O emprego de técnicas imunoistoquímicas, utilizando marcadores biológicos como o Ki67, que permite a avaliação do índice de proliferação celular em neoplasias malignas, vem sendo preconizado como um importante caminho de investigação do comportamento biológico das neoplasias malignas, tendo como consequências contribuições para o estabelecimento do prognóstico e desenvolvimento de novos protocolos terapêuticos. Neste trabalho, utiliza-se o método imunoistoquímico da avidina-biotina-peroxidase avaliada a expressão de Ki67 no parênquima de amostras de carcinomas de células escamosas da mucosa bucal com diferentes graus de diferenciação histológica. Além disso, a quantificação da área de infiltrado inflamatório foi avaliada. Os resultados demonstraram que a resposta imunológica celular é o principal mecanismo de defesa no carcinoma de células escamosas da mucosa bucal, expressada pelo grande número de linfócitos T e macrófagos e a expressão de Ki67 está relacionado ao índice mitótico e, consequentemente, à proliferação celular e, também, à diferenciação da neoplasia. / The utilization of immunohistochemical techniques as biological markers, such as Ki67, that allows the evaluation of the cell proliferation in malignancies, has been advocated as an important way of investigating the biological behavior of cancer, resulting in contributions to the establishment of prognosis and development of new treatment protocols. In this study, using immunohistochemical methods with avidin-biotin-peroxidase, we have assessed the expression of Ki67 in samples of oral squamous cell carcinoma with different patterns of histologic differentiation. The results showed that the cellular immune response is the major deffence mechanisnc in squamous cell carcinoma of the oral mucosa, expressed by the large number of T lymphocytes and macrophages, and expression of Ki67 is related to mitotic index associated with cell proliferation and neoplastic differentiation of tumor.

Submitted by LUCIANA ROCHA STRIEDER null (lucianastrieder@hotmail.com) on 2016-01-19T21:12:07Z No. of bitstreams: 2 dissertação 19.01.16 .pdf: 19074519 bytes, checksum: 646181ed6e1659fe081a91e6503d357f (MD5) dissertação 19.01.16 .pdf: 19074519 bytes, checksum: 646181ed6e1659fe081a91e6503d357f (MD5) / Approved for entry into archive by Sandra Manzano de Almeida (smanzano@marilia.unesp.br) on 2016-01-20T12:44:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 strieder_lr_me_sjc.pdf: 19074519 bytes, checksum: 646181ed6e1659fe081a91e6503d357f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-20T12:44:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 strieder_lr_me_sjc.pdf: 19074519 bytes, checksum: 646181ed6e1659fe081a91e6503d357f (MD5) Previous issue date: 2015-12-11 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas (FAPEAM) / O carcinoma espinocelular de lábio (CEC) é uma das neoplasias malignas mais comuns, acometendo principalmente lábio inferior devido à exposição solar. Este trabalho teve como objetivo avaliar 3 métodos de gradação histológica (OMS, BD e MRH), analisar a expressão da proteína EGFR no CEC de lábio, comparar com queilite actínica (QA) e correlaciona-las com o prognóstico. Dados de 53 pacientes com CEC de lábio foram coletados para a avaliação clinicopatológica e histológica. 22 casos de CEC e 19 de QA foram submetidos à reação imuno-histoquímica com a proteína EGFR e analisados por um analisador automatizado para avaliação da expressão proteica. A média de idade foi de 65 anos, 69,8% foram homens, o lábio inferior foi o local de predileção com 94,4% e 66,03% dos pacientes estavam em estadios precoces (T1+T2). 28 (52,83%) e 34 (64,15%) casos respectivamente foram graduados em baixo risco prognóstico ou grau 1 pelas escalas BD e OMS, o modelo MRH graduou a 29 (54,72%) casos como médio risco prognóstico ou grau 2. O modelo de gradação mais simples e fácil de ser aplicado em CEC de lábio foi a Escala BD e o mais eficaz, pois quando em alto grau histológico foi associado à menor sobrevida global (P=0,045). A sobrevida global foi de 87,8% em 5 anos. Estadiamento clínico avançado (T3+T4) e envolvimento linfonodal (N1) foram associados à menor sobrevida global e sobrevida livre de recorrência (P=0,002; 0,005; 0,007 e 0,01). O tratamento cirúrgico combinado ao radioterápico foi associado à menor sobrevida livre de recorrência (P=0,03). Na expressão da proteína EGFR não houve diferença estatisticamente significante entre QA e CEC de lábio. O CEC de lábio quando em estadios e graus histológicos avançados, é associado a um pior prognóstico, o diagnóstico precoce é essencial para a escolha do melhor tratamento e sobrevida dos pacientes, evitando mutilações e consequentemente, perda na qualidade de vida. / Lip squamous cell carcinoma (SCC) is one of the most common malignancies affecting especially lower lip due to sun exposure. This study aimed to evaluate three methods of histological grading (WHO, BD and MRH), analyze the expression of EGFR protein on the lip of SCC, compared with actinic cheilitis (AC) and correlates them with the prognosis. Data from 53 patients with lip SCC were collected for the clinicopathological and histological evaluation. 22 cases of SCC and 19 AC underwent immunohistochemical reaction with EGFR protein and analyzed by an automated analyzer for evaluation of protein expression. The average age was 65 years, 69,8% were men, lower lip was the site of predilection with 94,4% and 66,03% of patients were in early stages (T1 + T2). 52.83% and 64.15% cases respectively were graduates in low risk prognosis or grade 1 by BD and WHO scales, the MRH model graduated 54.72% cases as medium risk prognosis or grade 2. The simplest grading model and easy to apply in lip SCC was the BD scale and more efficient because when in high histological grade was associated with lower overall survival (P = 0.045). Overall survival was 87,8% at 5 years. Advanced clinical stage (T3 + T4) and lymph node involvement (N1) were associated with lower overall survival and recurrence-free survival (P = 0.002; 0.005; 0.007 and 0.01). Surgical treatment combined with radiotherapy was associated with lower recurrence-free survival (P = 0.03). The expression of EGFR protein had no statistically significant difference between AC and lip SCC. The lip SCC when in advanced stages and high histological grades, is associated with a worse prognosis, early diagnosis is essential for choosing the best treatment and survival of patients, avoiding mutilation and consequently, loss in quality of life. / FAPEAM: 1271/2012

Made available in DSpace on 2016-02-05T18:29:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-29. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:33:41Z : No. of bitstreams: 1 000854236.pdf: 3500858 bytes, checksum: 0816f15b9343c3e3ecc9d4ad9291ee5e (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O carcinoma de células escamosas de laringe (CCEL) é um dos mais comuns que acometem a região da cabeça e pescoço, representando aproximadamente 25% dos tumores malignos desta localização anatômica. Os fatores de risco associados ao desenvolvimento deste tumor são o consumo de tabaco e álcool, história familiar e a infecção pelo vírus do papiloma humano (HPV) em uma parcela dos casos. A ocorrência de segundos tumores primários e metástases é frequentemente relatada nos CCEL. Entretanto, até o momento, não há marcadores moleculares úteis na prática clínica que sejam capazes de predizer a progressão e a evolução clínica da doença. Neste contexto, as plataformas de microarranjos de oligonucleotídeos (microarrays), têm possibilitado uma análise mais ampla na busca por marcadores de detecção precoce, progressão, resposta e risco de recorrência e metástase. Foram incluídos neste estudo 88amostras de CCEL de pacientes não tratados. O grupo teste foi composto por 35 CCEL avaliados previamente para expressão gênica global (8x60K, Agilent Technologies) e 33 para a expressão de miRNAs (plataforma Array 8x60K, Agilent Technologies). O grupo de validação foi formado por 33amostras fixadas em formalina e em blocos de parafina (FFPE) e 19 amostras de tumor a fresco. O grupo teste foi avaliado para genotipagem para o HPV (LINEAR ARRAY HPV Genotyping Test, Roche), resultando em dois casos positivos para HPV16. A análise de expressão de transcritos revelou 1.680 genes diferencialmente expressos comparados aos tecidos normais de laringe (necrópsias). A análise de expressão global de miRNAs revelou 89 miRNAs diferencialmente expressos na comparação entre tecido normal e tumoral. A integração entre os dados de transcritos codificadores e de miRNAs (correlação negativa r<0) revelou alterações recorrentes em um subgrupo de genes associados com a degradação de componentes da matriz extracelular... / Laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC) is one of the most common head and neck malignancies representing approximately 25% of the tumors located in this region. Risk factors associated to development of LSCCs include alcohol and tobacco consumption, family history of cancer and human papilloma virus (HPV) infection. Second primary tumors and metastasis are frequently observed in patients with LSCC. To date, no useful molecular markers have been described that can successfully predict disease progression and clinical outcome. In this context, large scale molecular studies enable a global analysis of tumor molecular alterations aiming to reveal biomarkers for early diagnosis, prognosis and response to therapy. LSCC samples were obtained from 88 untreated patients. Global gene (Array plataform 8x60K, Agilent Technologies) and miRNA expression (Array platform 8x60K, Agilent Technologies) profiles were evaluated in 35 and 33 samples, respectively (Test group, N=36). An independent group of samples (N=33, validation group) was included, being 33 formalin fixed and paraffin embedded tissue samples and 19 fresh frozen tissues. HPV genotyping using LINEAR ARRAY HPV Genotyping Test (Roche) was performed in tumor samples from test group. Only two cases were HPV16-positive. The expression analysis revealed 1,680 differentially expressed genes in tumors compared to normal tissue (pool of normal laryngeal samples from necropsies). The miRNA analysis revealed 89 miRNAs differentially expressed. Integrative transcriptome and miRNAs analysis data (negative correlation r<0) revealed a subset of altered genes associated with the degradation of extracellular matrix components (MMP3, MMP9, MMP10, MMP13, COL10A1 and COL3A1) and neoplastic processes (CAV1, ERBB4, HLF,HMGA2, HOXB6, KLF2, PDCD4, PPP1R3 and TOP2), as well as their putative miRNA regulators (hsa-miR-199b-5p, hsa-miR-218-5p, hsa-miR-29c-3p, hsa-miR-21-5p, hsa-miR-204-5p, hsa-miR-125b-5p, hsa-miR- ...

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-25Bitstream added on 2015-05-14T16:59:20Z : No. of bitstreams: 1 000826506_20160824.pdf: 153918 bytes, checksum: d5ded8370e2d61cb9c08c67b2aa9b8b7 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-08-29T14:25:02Z: 000826506_20160824.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-29T14:25:39Z : No. of bitstreams: 1 000826506.pdf: 566712 bytes, checksum: 85576a500370f23bba238b3ce890a33e (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O papilomavírus humano (HPV) vem sendo associado ao carcinoma espinocelular (CEC) de orofaringe, como um possível fator etiológico. As oncoproteínas virais E6 e E7 são capazes de inibir a produção de citocinas do padrão Th1 e iniciar a produção de citocinas do padrão Th2, prejudicando a resposta celular frente à infecção. O propósito deste trabalho é avaliar o efeito das oncoproteínas virais E6 e E7 do HPV-16 sobre a resposta de células T (CD4 e CD8) de pacientes com e sem CEC de cabeça e pescoço. Foram recrutados para o estudo 20 indivíduos, sendo 10 pacientes com diagnóstico de CEC de cabeça e pescoço e 10 indivíduos sem câncer. Para avaliar a proliferação celular e liberação de citocinas (TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 e IL-10) das células T CD4 e CD8 frente ao estímulo com os peptídeos sintéticos dos genes E6 e E7 do HPV-16, a técnica ELISA foi utilizada. O mapeamento do DNA do HPV-16 foi realizado em amostras de plasma e saliva pela técnica de PCR em tempo real. Os resultados mostraram que o peptídeo E7 do HPV-16 inibiu a produção das citocinas pelas células T CD4 e CD8 derivadas dos indivíduos sem câncer (6/10) e pacientes com CEC de cabeça e pescoço (5/10) (p<0,05). A proteína Concanavaliana A induziu a proliferação das células T CD4 e CD8 dos indivíduos sem câncer e pacientes com CEC de cabeça e pescoço (p<0,05). As respostas celulares quanto à atividade proliferativa e a produção de citocinas dos pacientes com CEC de cabeça e pescoço foram semelhantes às respostas dos indivíduos sem câncer / The human papillomavirus (HPV) has been associated with squamous cell carcinoma (SCC) of the oropharynx, as a possible etiologic factor. The viral oncoproteins, E6 and E7 are able to inhibit the production of Th1 cytokines and initiate the production of Th2 cytokines, damaging the cellular response to infection. The purpose of this study is to evaluate the effect of viral oncoproteins E6 and E7 of HPV-16 on the response of T cells (CD4+ and CD8+) in patients with or without SCC of the head and neck. It was recruited for the study, 20 individuals, 10 patients with SCC of the head and neck and 10 individuals without cancer. To assess cell proliferation and cytokine release (TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-10) of CD4 and CD8 stimulation against synthetic peptides of the HPV-16 E6 and E7 genes, ELISA technique was used. The mapping of the HPV-16 DNA was performed in plasma and saliva samples by real time PCR. The results showed that the HPV-16 E7 peptide inhibited the production of cytokines by CD4 and CD8 T cells derived from subjects without cancer (6/10) and patients with SCC of the head and neck (5/10) (p <0, 05). The concavaline A protein induced proliferation of CD4 and CD8 T cells from individuals without cancer and patients with SCC of the head and neck (p <0.05). Cellular responses as to proliferative activity and cytokine production in patients with SCC of the head and neck were similar to the responses of individuals without cancer / FAPESP: 12/05381-0

As mutações no gene de supressão tumoral p53 estão entre as anormalidades genéticas mais comuns encontradas numa ampla variedade de tumores. Embora a função do gene p53 ainda não esteja completamente esclarecida, ele parece ser um fator de transcrição nuclear que controla a proliferação celular, a apoptose e a manutenção da estabilidade genética. A angiogênese é essencial para o crescimento e a metastatização de tumores sólidos. O Fator de Crescimento do Endotélio Vascular (VEGF, Vascular Endothelial Growth Factor), um fator de crescimento identificado recentemente com propriedades angiogênicas significativas, pode ser um importante regulador da angiogênese tumoral. A associação entre as expressões da proteína p53 e do VEGF e o prognóstico tem sido pouco estudada. Foram estudadas peças cirúrgicas de 47 pacientes com carcinoma epidermóide de esôfago (CEE) submetidos à esofagectomia em estágios II e III, utilizando-se coloração imuno-histoquímica. As expressões da proteína p53 e do VEGF foram observadas em 53% e 40% dos tumores, respectivamente. As expressões da proteína p53 e do VEGF coincidiram em somente 21% dos casos, e não foi encontrada correlação entre elas. Nenhum dos fatores clinicopatológicos se correlacionaram significativamente com as expressões da proteína p53 ou do VEGF. Em relação ao prognóstico, não havia associação significativa entre as expressões da proteína p53 e do VEGF e pior prognóstico. Os autores concluem que tanto a expressão da proteína p53 como a expressão do VEGF não se correlacionaram com o prognóstico em pacientes com CEE em estágios II e III. / p53 tumor suppressor gene mutations are the most common genetic alterations found in a wide variety of cancers. Although the function of the p53 gene has not been definitely established, p53 appears to be a nuclear transcription factor that plays a role in the control of cell proliferation, apoptosis, and the maintenance of genetic stability. Angiogenesis is a critical process in solid tumor growth and metastasis. Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF), a recently identified growth factor with significant angiogenic properties, may be a major tumor angiogenesis regulator. Few studies have investigated the association between p53 and VEGF expressions and prognosis in esophageal carcinoma. Forty-seven specimens resected from patients with stage II and III squamous cell carcinoma (SCC) of the esophagus were studied by means of immunohistochemical staining. p53 and VEGF expressions were observed in 53% and 40% of the tumors, respectively. p53 and VEGF staining statuses were coincident in only 21% of the tumors, and no significant correlation was found between p53 and VEGF statuses. No clinicopathologic factors were significantly correlated with p53 or VEGF expression. No significant association between p53 and VEGF expressions and poor prognosis was found. In conclusion, p53 and VEGF were not correlated with prognosis in patients with stage II and III SCC of the esophagus.

O Carcinoma Epidermóide do Esôfago (CEE) é uma das neoplasias malignas mais agressivas e letais do trato digestivo. Seu diagnóstico frequentemente ocorre em indivíduos com doença avançada, sendo baixas as possibilidades de cura. O Rio Grande do Sul é o estado brasileiro com maior número de diagnósticos, com estimativa de contribuir com 10% dos casos do país em 2008, atingindo uma incidência de 19,73 casos novos/100.000 habitantes do sexo masculino e 7,58 novos casos/100.000 habitantes do sexo feminino. O CEE permanece o tipo mais comum com mais de 80% dos casos. Tentativas de diagnóstico precoce do CEE em indivíduos sob risco têm sido feitas utilizando-se citologia coletada com balões abrasivos. Porém, tal técnica tem demonstrado que, apesar de obter boas amostras de células da mucosa esofágica, apresenta sensibilidade abaixo do esperado para sua aplicação na rotina. No presente estudo os autores se propõem estudar a prevalência da expressão da proteína p53 em material citológico coletado pelo Balão RS em indivíduos sob risco para CEE, além de verificar sua acurácia diagnóstica para rastreamento de CEE. Foram incluídos indivíduos assintomáticos que apresentassem ao menos um dos fatores de risco: a) consumo de mais de 40 gramas de etanol/dia por mais de 10 anos; b) consumo de mais de 10 cigarros/dia por mais de 10 anos; c) uso diário de chimarrão por mais de 10 anos; d) diagnóstico prévio de carcinoma epidermóide do trato aéro-digestivo superior (TADS). Foram excluídos indivíduos com: a) recusa em participar do estudo; b) agitação psicomotora que impossibilitasse a passagem do balão; c) varizes esofágicas; d) disfagia progressiva; e) hepatopatia crônica descompensada; f) hemorragia digestiva alta nos últimos 30 dias; g) sinais de encefalopatia metabólica; h) diagnóstico de divertículo de Zenker. Entre março de 2006 e dezembro de 2007, 171 indivíduos foram avaliados com citologia esfoliativa pelo Balão RS e as biópsias esofágicas guiadas pela cromoendoscopia com solução de Lugol. O material citológico foi analisado após coloração de Papanicolaou e imunocitoquímica p53. O material de biópsia foi corado pela Hematoxilina/Eosina e imunoistoquímica p53. Oito sujeitos foram excluídos (4,7%) por apresentarem material citológico inadequado coletado pelo Balão RS. A amostra de 163 pacientes consistiu de 150 homens (92%), com idade entre 28 e 84 anos (média= 52,6 ± 12 anos). Tabagismo ativo foi observado em 141 pacientes (86,5%), com mediana de carga tabágica de 39,5 maços/ano. Alcoolismo ativo foi observado em 114 indivíduos, com consumo de destilados em 78,1% dos casos e quantidade mediana de 320 gramas de álcool/dia. Alcoolismo e tabagismo ativos concomitantes foram observados em 63,8% da amostra estudada (104 sujeitos). Consumo de chimarrão diário foi observado em 69,9% no grupo estudado. Tabagismo, consumo de álcool e consumo de chimarrão em bases regulares foram identificados de maneira concomitante em 77 indivíduos (47,2%). Carcinoma do TADS foi o fator de inclusão em 42 pacientes (25,8%). A utilização do Balão RS foi fácil e rápida, sendo bem tolerado sem complicações. Os resultados dos exames citológicos foram os seguintes: 147 normais (90,2%), 10 alterações celulares reativas (6,1%), 3 alterações escamosas de significado indeterminado (ASCUS) (1,8%), 1 lesão intra-epitelial de baixo grau (LISL) (0,6%), 1 lesão intra-epitelial de alto grau (HSIL) (0,6%) e 1 carcinoma escamoso (0,6%). A cromoendoscopia com Lugol apresentava áreas descoradas em 65 indivíduos (40,1%). As áreas coradas apresentaram diagnóstico histopatológico normal em 110 (67,5%) e esofagite em 53 indivíduos (32,5%). Dos 65 pacientes com áreas descoradas foi atribuído diagnóstico anatomopatológico normal em 23 (35,4%), esofagite em 39 (60%), displasia de alto grau em 1 (1,5%), carcinoma in situ em 1 (1,5%) e carcinoma invasivo em 1 (1,5%). A citologia positiva (ASCUS, LSIL, HSIL, Carcinoma) coletada pelo Balão RS obteve sensibilidade de 66,7% (IC95% 22,0 – 93,6), especificidade de 97,5% (IC95% 96,7 – 98,0), acurácia de 96,9% (IC95% 95,3 – 97,9), valor preditivo positivo de 33,3% (IC95% 11,0 – 46,8) e negativo de 99,4% (IC95% 98,5 – 99,9) para identificação de lesões neoplásicas histológicas. A imunoistoquímica com p53 foi executada em 161 indivíduos, sendo que a expressão desta proteína foi positiva em 38 indivíduos (23,6%), com acometimento da camada basal em 29 (76,3%), camada média em 8 (21,1%) e camada superficial em 1 (2,6%). Não houve expressão imunocitoquímica da proteína p53 no material citológico obtido com Balão RS nesta amostra de indivíduos sob risco de CEE. Podemos concluir que, apesar do Balão RS ter apresentado um bom desempenho na coleta de amostras citológicas do esôfago, a negatividade da expressão da imunocitoquímica da proteína p53 em todas as amostras sugere que seu uso não contribui para a melhora da efetividade diagnóstica da citologia. / Squamous Cell Carcinoma of the Esophagus (SCCE) is one of the most aggressive and lethal digestive cancers. Unfavorable prognosis is common due to late diagnosis, resulting in low chances of curative treatment. Rio Grande do Sul is the leading Brazilian state in new cases, with an estimated 2008 prevalence of 19.73 new cases/100,000 male inhabitants and 7.58 new cases/100,000 female inhabitants. SCCE remains the most frequent histological type, contributing with 80% of the cases. Exfoliative cytology obtained with abrasive balloons has been used to attempt early diagnosis of SCCE. Although this technique collects good cytological samples from the esophageal mucosa, the low sensitivity of cytology precludes its use in clinical practice. In the current work the author studied the prevalence of p53 expression in cytologic smear collected by the RS Balloon in high risk individuals, and tested its yield in the cytological screening of SCCE and its precursor lesions. Asymptomatic individuals with at least one of the following risk factors for SCCE were included: a) current alcohol drinking (more than 40 g of alcohol/day); b) tobacco smoking (>10 cigarettes/day); c) maté drinking for more than 10 years; d) previous head and neck cancer. Exclusion criteria were: a) refusal to participate in the study; b) agitation that precludes the collection of cytologic material with the RS Ballon; c) esophageal varices; d) progressive dysphagia; e) unstable cirrhosis; f) upper digestive tract hemorrhage in the previous 30 days; g) metabolic encephalopathy; h) previous diagnosis of Zenker’s diverticulum. Between march/2006 and december/2007, 171 individuals were recruited and submitted to exfoliative cytology with RS Balloon, and esophageal biopsies guided by Lugol chromoendoscopy. Cytology samples were analyzed after Papanicolaou staining and p53 immunostaining. Biopsy samples were analyzed after Hematoxilin/Eosin staining and p53 immunostaining. RS Balloon cytological samples were inadequate in eight (4.7%) individuals who were excluded from the analysis. The final sample consisted of 163 individuals where 150 were male (92%), with ages ranging between 28 and 84 years old (mean 52.6 ± 12.0). Current tobacco smoke was observed in 141 patients (86.5%), with a median of 39.5 pack/year. Current alcoholism was found in 114 individuals, who consumed mainly distilled beverages, (median = 320 g of alcohol/day). Concomitant alcoholism and tobacco smoking were observed in 104 (63.8%) subjects. Daily Maté consumption was observed in 69.9%. Current smoking, daily Maté and alcohol drinking were observed in 77 individuals (47.2%). Previous head and neck cancer was the inclusion criterion in 42 patients (25.8%). Using the RS Balloon was quick, easy and well tolerated by patients (no complications observed). The cytological results were: 147 normal (90.2%), 10 benign reactive cellular changes (6.1%), 3 atypical squamous cells of undetermined significance (ASCUS) (1.8%), 1 low grade squamous intraepithelial lesion (LISL) (0.6%), 1 high grade squamous intraepithelial lesion (HSIL) (0.6%) and 1 squamous carcinoma (0.6%). Lugol chromoendoscopy showed unstained areas in 65 patients (40.1%). Biopsies from normally stained areas were diagnosed as normal in 110 (67.5%) and esophagitis in 53 (32.5%) individuals. Biopsies from unstained areas were diagnosed as normal in 23 (35.4%), esophagitis in 39 (60%), high grade dysplasia in 1 (1.5%), carcinoma in situ in 1 (1.5%), and invasive carcinoma in 1 (1.5%). Positive cytology (ASCUS, LSIL, HSIL, Carcinoma) collected by the RS balloon had a sensitivity of 66.7% (IC95% 22.0 – 93.6), a specificity of 97.5% (IC95% 96.7 – 98.0), a positive predictive value of 33.3% (IC95% 11 – 46.8), a negative predictive value of 99.4% (IC95% 98.5 – 99.9) and accuracy of 96.9% (IC95% 95.3 – 97.9) for the diagnosis of histopathological neoplastic lesions. Immunohistochemical expression of p53 protein was analyzed in 161 individuals, out of which 38 (23.6%) were positive, with basal layer expression in 29 (76.3%), middle layer expression in 8 (21.1%) and superficial layer in 1 (2.6%). Immunocytochemical expression of p53 protein in cytologic smear was negative in all cytology samples. In summary, even though the RS Balloon collected adequate samples, the negative results of immunocytochemical expression of p53 protein suggest that its use does not contribute to improving the performance of conventional cytology of the esophagus in the screening for SCCE and its precursor lesions. XIV

O carcinoma epidermóide do esôfago é neoplasia com alta taxa de mortalidade e distribuição geográfica peculiar. O estudo da célula tumoral ou suas diferenciações pré-tumorais, demonstraram ter por análise imunohistoquímica e genética, inúmeros determinantes que podem ajudar no tratamento. Neste trabalho foi avaliada a expressão imunohistoquímica de p53 e ki-67 na carcinogênese esofágica induzida quimicamente através do uso de dietilnitrosamina, em um grupo de 100 camundongos fêmeas. O estudo experimental foi realizado com 4 grupos de animais, onde os grupos I e II foram considerados controles, sendo diferenciados por gavagem esofágica, uma vez semana, com água fria (temperatura ambiente) ou quente (60º-70ºC). E os grupos III e IV foram considerados estudos, os quais receberam dietilnitrosamina por 3 dias consecutivos semanalmente, também sendo diferenciados por gavagem, uma vez por semana, com água fria ou quente. O estudo apresentou data progressiva de sacrifícios com colheita de peças esofágicas, que iniciava aos 30 dias de experimento e terminava aos 150 dias. Demonstrou-se que não houve diferença na incidência tumoral quando foi acrescida a variável temperatura da água; provavelmente devido ao episódio único semanal que era adicionado ao animal em experimentação. A análise imunohistoquímica do p53 não evidenciou diferença estatística durante a evolução da carcinogênese até 150 dias, porém quando analisado a relação com alterações patológicas demonstra-se que apresenta significância em relação à patologia baixo grau de displasia, alto grau e carcinoma. A análise imunohistoquímica do ki-67 demonstrou diferença estatística durante a evolução da carcinogênese a partir do dia 120 de experimento e quando analisada a relação com alterações patológicas demonstrou-se que apresenta significância também em relação à lesão intraepitelial de alto grau e carcinoma.

Orientador: Cláudia Maria Navarro / Resumo: Carcinomas espinocelulares (CEC) de cabeça e pescoço são um problema de saúde pública e, embora avanços nos métodos terapêuticos tenham ocorrido nas últimas décadas, pacientes tardiamente diagnosticados apresentam prognóstico sombrio e taxa de sobrevida reduzida. A inspeção visual da boca é considerada padrão-ouro na detecção precoce de CEC e desordens potencialmente malignas orais (DPMOs), alterações que podem preceder o CEC. Entretanto, características clínicas podem não retratar com fidelidade a extensão da doença. A detecção de biomarcadores em soro humano é um método auxiliar que pode determinar com maior exatidão parâmetros clínicopatológicos. Avaliou-se prontuários de pacientes atendidos, no período de 1993 a 2014, durante as Campanhas de Prevenção do Câncer de Boca (CPCB) e no Serviço de Medicina Bucal (SMB) da Faculdade de Odontologia de Araraquara (FOAr - Unesp), diagnosticados com DPMOs e CEC e a associação entre o comparecimento às CPCB com tamanho do tumor e presença de linfonodos palpáveis. Foram incluídos neste estudo 176 pacientes atendidos nas CPCB e 478 no SMB. Foram diagnosticados 199 casos de CEC, 128 casos de leucoplasia, 75 de queilite actínica e 264 de líquen plano, esta última DPMO apresentou 8 casos de CEC desenvolvidos na mesma região anatômica. Não houve associação entre o comparecimento nas CPCB com tamanho do tumor (p = 0,3834) e presença de linfonodos palpáveis (p = 0,4434), no entanto, tamanhos T1 ou T2 de tumor e ausência de linfonodos foram co... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a worldwide public health concern. Although many improvements were done in therapeutic field, advanced diagnosed HNSCC present poor prognosis and low survival rates. Oral visual exams are the most applied method to detect oral SCC (OSCC) and oral potentially malignant disorders (OPMDs), disorders that can precede OSCCC. However, clinical features may not accurately represent real SCC evolution. Thus, tumor markers detection in human serum have been used to precisely determine clinicopathoogical parameters. Patients' charts diagnosed with OSCC and/or OPMDs who attended oral cancer preventive campaigns (OCPC) and the Oral Medicine Service (OMS) from Araraquara School of Dentistry (São Paulo State University (Unesp)) between 1993 and 2014 were revised. We evaluated the association between OCPC attendance with tumor size and lymph node metastasis. 176 patients from OCPC and 478 patients from OMS were included in this study. A total of 199 OSCC, 128 leukoplakia, 75 actinic cheilitis, and 264 lichen planus cases were diagnosed. From the latter, 8 cases of OSCC arisen of oral sites previously diagnosed as this OPMD. There was no statistically significant difference between OCPC attendance and tumor size (p = 0,4434) and lymph node mestastasis (p = 0,3834), however, T1 or T2 sizes and absence of palpable lymph nodes were major noted in both groups. Since 2000, OCPC are responsible for providing a continuing education program to public healthcare dentists that comprises prevention and diagnosis of OPMDs and OSCC. An increase of diagnosed OSCC by these dentists was observed, this is the main result of the OCPC. We also evaluated the prognostic value of high squamous cell carcinoma antigen (SCC-Ag) levels in clinicopathological features of head and neck squamous cell carcinoma...(Com'plete abstract electronic access below) / Mestre

Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-06-15T21:32:04Z No. of bitstreams: 1 VivianeAlvesDeOliveira_TESE.pdf: 3374047 bytes, checksum: 44d9876dbb2ee4424f40958d76b2c3ba (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-06-19T22:23:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 VivianeAlvesDeOliveira_TESE.pdf: 3374047 bytes, checksum: 44d9876dbb2ee4424f40958d76b2c3ba (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-19T22:23:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VivianeAlvesDeOliveira_TESE.pdf: 3374047 bytes, checksum: 44d9876dbb2ee4424f40958d76b2c3ba (MD5) Previous issue date: 2018-01-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / O carcinoma de células escamosas oral (CCEO) resulta de processos de descontroles de eventos celulares provocados por mutações decorrentes de agentes genotóxicos, o que pode levar, dentre outros fatores, à perda de controle do processo de proliferação celular, sendo este considerado um dos precursores do câncer oral. A busca por biomarcadores para o CCEO constitui alvo de várias pesquisas, dentre as quais destacam-se proteínas de reparo do DNA como a XRCC1 e APE1 e proteínas do ciclo celular como p53 e Ki67. Assim, o objetivo desta pesquisa foi analisar a expressão imunoistoquímica das proteínas de reparo APE1, XRCC1 e das proteínas envolvidas no ciclo celular p53 e ki67, associando-as entre si e com parâmetros prognósticos clínicos e histopatológicos, em carcinoma de células escamosas de língua oral (CCELO), visando contribuir para o melhor entendimento da participação dessas proteínas no desenvolvimento desta neoplasia. A expressão imunoistoquímica de APE1 e XRCC1 foi avaliada de forma semiquantitativa e a de p53 e ki67 de forma quantitativa, em 58 casos de Carcinoma de células escamosas de língua oral (CCELO). Os dados clínicos foram coletados nos prontuários médico de cada paciente e a gradação histopatológica de Brandwein-Gensler efetuada para cada caso. Para a análise estatística foram realizados os testes de Qui-quadrado e Exato de Fisher e adotou-se significância de p<0,05. A maioria dos casos apresentou alta imunoexpressão para APE1 (n = 36; 62,1%), assim como para XRCC1 (n = 38; 65,5%). Já para as proteínas Ki67 e p53, houve uma distribuição igual quando os casos foram categorizados em baixa e alta expressão (n = 29, 50%). A imunoexpressão de XRCC1 foi significativamente maior nos casos de lesão em estágio inicial I e II (n = 23; 62,2%) em relação aos estágios avançados III e IV (n=16, 80%, p = 0,05). A imunoexpressão de p53 foi significativamente maior nos casos de lesão em estágio avançado (n = 19; 65,5%) e baixa em estágios iniciais (n=17, 60,7%; p = 0,047). Nenhuma das proteínas estudadas mostrou associação entre si, nem com os demais parâmetros clínicos e a gradação histopatológica. Apesar da associação significativa da maior imunoexpressão de XRCC1 com melhor estadiamento clínico e da p53 com o pior estadiamento clínico, estas não foram embasadas quando analisado o desfecho dos pacientes. Os resultados desta pesquisa indicam que XRCC1 e APE1 participam do processo de carcinogênese do CCELO, porém, a expressão imunoistoquímica destas e de p53 e Ki67 não mostraram associação com parâmetros prognósticos. / Oral squamous cells carcinoma (OSCC) results from processes of decontrol of cellular events caused by mutations due genotoxic agents, which may lead, among other factors, to loss of control of the cellular proliferation process, being considered as one of the precursors of oral cancer. Searching biomarkers for OSCC is the target of several studies, among the markers it is highlighted the DNA repair proteins, such as XRCC1 and APE1, and cell cycle proteins, such as p53 and Ki67. Thus, the aim of this study was to analyze the immunohistochemical expression of APE1, XRCC1 and the proteins involved in the cell cycle, p53 and ki67, associating them with clinical and histopathological prognostic parameters in oral tongue squamous cell carcinoma (OTSCC), in order to contribute to the better understanding of the participation of these proteins in the development of this neoplasia. The immunohistochemical expression of APE1 and XRCC1 was evaluated semiquantitatively and the expression of p53 and ki67 quantitatively, in 58 cases of OTSCC. Clinical data were collected from the medical records of each patient and the histopathological grading of Brandwein-Gensler was carried out for each case. For the statistical analysis, Chi-square and Fisher's exact test were performed, and significance was set at p <0.05. The majority of cases showed high immunoexpression of APE1 (n = 36; 62.1%), as well as of XRCC1 (n = 38; 65.5%). In relation to the Ki67 and p53 proteins, there was an equal distribution when the cases were categorized into low and high expression (n = 29, 50%). XRCC1 immunoexpression was significantly higher in cases of early stage lesions I and II (n = 23; 62.2%) compared to advanced stages III and IV (n = 16, 80%, p = 0.05). The Immunoexpression of p53 was significantly higher in cases of advanced lesion (n = 19; 65.5%) and low in early stages (n = 17, 60.7%, p = 0.047). None of the studied proteins showed association with each other, nor with the other clinical parameters and histopathological grading. Despite the significant association of the highest XRCC1 immunoexpression with better clinical staging and of p53 with the worst clinical staging, these results were not supported when the patients' outcome were analyzed. The results of this study indicate that XRCC1 and APE1 participate in the process of carcinogenesis of OTSCC, but the immunohistochemical expression of these proteins and also p53 and Ki67 did not show any association with prognostic parameters.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-07-16Bitstream added on 2014-06-13T19:28:56Z : No. of bitstreams: 1 monteiro_ad_me_sjc.pdf: 2444040 bytes, checksum: 4a5dc86f25f7f5e34acf7860928523f6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Neste trabalho foram estudados, comparativamente, os aspectos clínicos, histológicos e das regiões organizadoras nucleolares pela impregnação por prata (AgNOR) na carcinogênese quimicamente induzida pelo 9,10-dimetil-1,2-benzantraceno (DMBA) a 0,5% diluído em acetona em bordo lingual de hamsteres sírios dourados (Mesocricetus auratus). Oitenta e oito hamsteres foram divididos em dois grupos: 55 no grupo estudo, pincelados três vezes por semana com a solução de DMBA e 33 no grupo controle, pincelados três vezes por semana apenas com acetona. Os resultados permitiram as seguintes conclusões: os aspectos clínicos da evolução do carcinoma epidermóide (CE) quimicamente induzido pelo DMBA em bordo lingual de hamsteres, guardam semelhança com aqueles contidos na literatura sobre o desenvolvimento do CE em humanos; existe sintonia dos aspectos clínicos com os aspectos histológicos quando comparados à carcinogênese em humanos; a AgNOR mostrou sincronismo com as alterações histológicas de malignidade, mostrando-se um marcador de proliferação celular e, finalmente, o posicionamento do molar inferior do hamster pode ser considerado como coadjuvante da carcinogênese quimicamente induzida em bordo lingual. / In this work were studied, comparatively, the clinical, histological and nuclear argyrophilic nuclear organizer region impregnated by silver (AgNOR) aspects in the carcinogenesis on the tongue of golden syrian hamster (Mesocricetus Auratus), induced chemically by 0,5% 9,10-dimetil-1,2-benzantraceno (DMBA) in acetone. Eighty eight hamsters were divided into two groups: 55 in the study group, were painted three times a week on left side of the tongue with DMBA solution and 33 in the control group were painted only with acetone, with the same frequency. The results consent the followed conclusions: the clinical aspects of the evolution of epidermoid carcinoma (EC) in carcinogenesis induced chemically by DMBA on the tongue hamster were similar with that in the literature about the development of the EC in humans; there is connection between the clinical and histological aspects when compared with the humans carcinogenesis; the AgNOR show compatibility with malignant histological changes, validating in being proliferation marker and, finally, the position of hamster molar tooth can be considerate an adjuvant in the carcinogenesis induced chemically on the hamster tongue.