Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências. / Made available in DSpace on 2012-10-21T00:27:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 192167.pdf: 1199940 bytes, checksum: c3b3423796b9706fea00625846b864f7 (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências. / Made available in DSpace on 2012-10-21T03:10:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 190909.pdf: 332052 bytes, checksum: 891f570ad6e72998d32b1ab815510fd3 (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar o tipo de morte celular (apoptose ou necrose) induzida por glutamato em fatias de hipocampo de ratos e o possível papel neuroprotetor do GMP. Para tanto, avaliou-se a viabilidade celular (redução do MTT), a liberação de LDH, a fragmentação de DNA, a liberação do citocromo c e o envolvimento da via das MAPK (ERK 1/2 e p38MAPK). Glutamato 1 e 10 mM promoveram redução da viabilidade celular sem liberação de LDH, induziram liberação do citocromo c, fragmentação de DNA e inibição da via da ERK 2 e p38MAPK, sugerindo morte celular por apoptose. Glutamato 10 mM induziu somente fragmentação de DNA. A redução de viabilidade celular induzida por glutamato 1 e 10 mM foi bloqueada por antagonistas ionotrópicos (MK-801 e GAMS), e antagonistas ionotrópicos e metabotrópicos (MK-801, GAMS e M-CPG), respectivamente. GMP 1 mM não alterou a redução de viabilidade celular e a inibição da ERK 2 e p38MAPK induzidas por glutamato. Contudo, GMP protegeu contra a redução de viabilidade celular induzida por NMDA. GMP per se induziu e também aumentou o grau de fragmentação de DNA promovido por glutamato. O aumento da concentração de GMP de 1 para 5 mM reduziu a viabilidade celular. Estes resultados demonstram que glutamato (1 e 10 mM) induz morte celular por apoptose e apontam o GMP como um potencial agente indutor de apoptose em fatias de hipocampo de ratos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências / Made available in DSpace on 2012-10-20T03:30:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-26T02:02:31Z : No. of bitstreams: 1 182964.pdf: 2383515 bytes, checksum: 7988b17d08e5ec99cb77101349cd09bd (MD5) / Avaliação da modulação de vias de transdução de sinal intracelular no hipocampo de ratos expostos ao chumbo e cádmio, in vitro e in vivo, ressaltando os efeitos sobre a fosforilação de MAPKs e a expressão de proteínas de choque térmico. Estuda a modulação da fosforilação de ERK1/2 e p38MAPK e alterações nos imunoconteúdos de Hsp27 e Hsp70. Demonstra de forma inédita alterações de fosforilação destas MAPKs no tecido hipocampal íntegro.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:13:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissMAM.pdf: 496176 bytes, checksum: 7a17b24b7ce0e3ca12b9792d1efdd52e (MD5) Previous issue date: 2006-05-04 / A idéia de causação mental remete a Descartes e a constituição do problema mente-cérebro como um problema filosófico. Iniciando o percurso nesta origem do problema, a questão da causação mental é situada como uma questão contemporânea, intimamente ligada à escolha de um tratamento para as chamadas desordens mentais. A contribuição cartesiana para a insolubilidade do problema da causação encontra-se no próprio conceito de causalidade. A visão mecânica do mundo, movido por leis de causalidade linear, não permite vislumbrar a possibilidade de outros tipos de interação, como emergência e causalidade circular, entre outras. Revisitando o conceito de causação, as contribuições de Stuart Mill permitem abandonar o paradigma do modelo mecânico da causação linear, optando pelo modelo químico, que possibilita pensar em outras formas de causação, assim como compreender as interações mental-físico, e a constituição do mental como propriedade emergente. Situando as teorias da mente que abordam a causação mental, o materialismo emergentista de Bunge permite a compreensão da causalidade, mas torna irrelevante a distinção entre mental e físico. Sem redução dos estados mentais a estados cerebrais, os sistemas neurais plásticos interagem entre si e com outros sistemas, promovendo relações de causação e a emergência de propriedades que garantem ou facilitam a sobrevivência do organismo. A plasticidade é uma característica de alguns organismos vivos e seu desenvolvimento dá-se a partir da aprendizagem de novas conexões neurais, que por sua vez, levam à emergência de novas propriedades. O movimento e a plasticidade permitidos pelo emergentismo favorecem a compreensão das maneiras pelas quais uma psicoterapia poderia apresentar resultados para o organismo, provocando movimento e alterações no todo do sistema neural plástico. Desta maneira, torna-se possível explicar situações de controle do físico sobre o mental, como a ação de drogas ou o resultado de lesões. Por outro lado, é possível também explicar como os processos mentais intervêm sobre os estados físicos, como a possibilidade do efeito placebo ou o estresse psicológico alterando o sistema imunológico. Conciliando a teoria de Bunge com algumas propostas e pesquisas acerca de temas como psicossomática, biofeedback, efeito placebo, estresse e sistema imunológico, conclui-se que alguns argumentos de Bunge contribuem para fundamentar essas práticas observadas clinicamente. A psicoterapia apresenta-se como uma forma eficaz no tratamento das desordens mentais, mas considerando que estas podem possuir origens diferentes: celular ou sistêmica, em parte dos casos de desordens com origens sistêmicas, a psicoterapia é não somente necessária, como suficiente. Contudo, para casos de origem celular, ou provocados por lesões, psicoterapias podem ser necessárias, porém não suficientes, fazendo-se preciso o uso paralelo de outros tratamentos. Considerando as dificuldades em identificar apenas com um diagnóstico clínico a origem das desordens, e considerando tanto os aspectos físicos como os mentais , o mais indicado é um trabalho paralelo, que permita um olhar para os aspectos internos, subjetivos, apresentados em linguagem de primeira pessoa; assim como para os aspectos externos, objetivos, apresentados em linguagem de terceira pessoa e observáveis com o auxílio dos instrumentos existentes. Contar com diferentes perspectivasamplia as possibilidades de tratamentos.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Educação Física, Programa de Pós-Graduação em Educação Física, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-11-06T15:34:40Z No. of bitstreams: 1 2017_PauloMarceloMaiaLopes.pdf: 975287 bytes, checksum: 4c0189dfaec8c84a8cd294040d071307 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-01-04T17:24:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_PauloMarceloMaiaLopes.pdf: 975287 bytes, checksum: 4c0189dfaec8c84a8cd294040d071307 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-04T17:24:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_PauloMarceloMaiaLopes.pdf: 975287 bytes, checksum: 4c0189dfaec8c84a8cd294040d071307 (MD5) Previous issue date: 2018-01-04 / Introdução: O controle da auto-regulação cerebral durante o exercício é altamente complexo e permanece incompletamente compreendido. Durante o exercício isométrico, a ativação dos aferentes musculares metabolicamente sensíveis (metaborreflexo) aumenta exponencialmente a pressão arterial média (PAM) e esta é sustentada quando ocorre oclusão circulatória pós-exercício (OCPE). A estimulação do metaborreflexo muscular tem sido associada ás respostas do fluxo sanguíneo cerebral ao exercício, porém tais respostas ainda não estão claras. Objetivo: Determinar a influência da ativação metaborreflexa muscular no índice de reatividade cerebrovascular (PRx) e na pressão intracraniana (PIC) em homens jovens saudáveis. Métodos: Quinze homens jovens saudáveis (24 ± 5 anos, média ± desvio padrão) realizaram aleatoriamente dois protocolos. No protocolo experimental, o metaborreflexo muscular foi ativado durante três minutos através da OCPE, enquanto que durante o protocolo controle o metaborreflexo muscular não foi ativado após o exercício. As medidas foram feitas em repouso e nos três minutos seguintes ao exercício isométrico de preensão manual (EIPM) com OCPE (experimental) ou sem OCPE (controle). Os participantes realizaram uma única série de EIPM a 40% da contração voluntária máxima (CVM) por 90 segundos. A freqüência cardíaca (FC), pressão arterial sistólica (PAS), pressão arterial diastólica (PAD) e PAM, foram monitoradas batimento á batimento usando a técnica de fotopletismografia digital (NIBP humano, instrumentos AD). Além disso, a pressão intracraniana (PIC) foi monitorada de forma não invasiva, através do BrainCare Research 1.5 (BrainCare Health Technology, São Carlos, Brasil). Resumidamente, pequenas deformações na superfície do crânio causadas por oscilações na PIC, batimento a batimento, foram capturadas pelo sensor do tipo de straingauge (SR-4), que foi colocado em contato com a superfície da cabeça e conectado ao equipamento de aquisição de sinais. O índice de reatividade cerebrovascular (PRx) é determinado pelo cálculo do coeficiente de correlação entre PIC e PAM. Resultados: As variáveis fisiológicas basais foram semelhantes entre os protocolos (P> 0,05). Durante a OCPE, no entanto, a PAM aumentou significativamente em relação ao repouso (Δ28 ± 3 mmHg, P 0,05), FC (Δ69 ± 3 bpm, P> 0,05) e PRx (Δ0,19 ± 0,08, P> 0,05) permaneceram inalterados. Durante o protocolo controle, a PAM (Δ88,6 ± 2,18 mmHg, P> 0,05) retornou aos valores basais após o EIPM, e PIC (Δ2,03 ± 0,30 a.u. P> 0,05), FC (Δ67,66 ± 2,89 bpm, P> 0,05) e PRx (Δ0,23 ± 0,10 a.u., P> 0,05) permaneceram inalterados durante o exercício em relação ao repouso. Já na OCPE em relação á recuperação no procedimento controle, a PAM encontrava-se significativamente elevada (Experimental: OCPE Δ117,24 ± 3,79 mmHg – Controle: recuperação Δ91 ± 2,17 mmHg, P< 0,05), enquanto que todas as outras variáveis não sofreram alterações significativas. Conclusão: Apesar da elevação robusta e sustentada na pressão arterial sistêmica durante a ativação das fibras musculares aferentes metabolicamente sensíveis, o PRx é preservado. / Background: The control of cerebral perfusion during exercise appears to be highly complex and remains incompletely understood. During isometric exercise, activation of metabolically sensitive skeletal muscle afferents (muscle metaboreflex) markedly increases mean arterial pressure (MAP), and MAP is sustained when the ischemia is maintained following the cessation of exercise (postexercise muscle ischemia, PEI). Stimulation of muscle metaboreflex has been implicated in the brain blood flow responses to exercise, but this remains unclear. Aim: To determine the influence of muscle metaboreflex activation on pressure reactivity index (PRx) and intracranial pressure (ICP) in healthy young men. Methods: Fifteen healthy young men (24 ± 5 years, mean ± SD)randomly performed two protocols. In the experimental protocol the muscle metaboreflex was activated during 3-min period via PEI, whereas during control protocol the muscle metaboreflex was not activated. Measurements were made at baseline and following isometric handgrip exercise (IHG) with or without PEI for experimental and control protocols, respectively. Participants completed a single bout of IHG at 40% of maximum voluntary contraction for 90 seconds. Heart rate (HR) and arterial BP was monitored on beat-to-beat basis using finger photoplethysmography (Human NIBP, AD instruments). In addition, ICP was monitored noninvasively via BrainCare Research 1.5 (BrainCare Health Technology, São Carlos, Brazil). Briefly, small deformations in the surface of the cranium caused by beat-to-beat ICP oscillations was captured by strain gauge type sensor (SR-4) who was placed in contact to the surface of head and connected to personal monitor. PRx is determined by calculating the correlation coefficient between 40 consecutive, time averaged data points of ICP and MAP. Results: Baseline physiological variables were similar between the protocols (P> 0.05). During PEI, however, MAP significantly increased from rest (Δ28 ± 3 mmHg, P 0.05), HR (Δ69 ± 3 bpm, P> 0.05) and PRx (Δ0.19 ± 0.08, P> 0.05) were unchanged. During the control protocol, MAP (Δ88.6 ± 2.18 mmHg, P> 0.05) returned to baseline values following IHG exercise and mean ICP (Δ2.03 ± 0.30 to P> 0.05), HR (Δ67.66 ± 2.89 bpm, P> 0.05) and PRx (Δ0.23 ± 0.10 au, P> 0.05) were unchanged from the rest. In the OCPE regarding recovery in the control procedure, MAP was significantly elevated (Experimental: OCPE Δ117.24 ± 3.79 mmHg - Control: recovery Δ91 ± 2.17 mmHg, P <0.05), whereas all other variables did not change significantly. Conclusion: Despite the robust and sustained elevation in systemic blood pressure during selective activation of metabolically sensitive skeletal muscle afferent fibers, the PRx is preserved.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-11-17T20:10:46Z No. of bitstreams: 1 2017_EduardoSiqueiraWaihrich.pdf: 8404407 bytes, checksum: 73ae93c3605a23aca1e8613a4cf067cb (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-11-24T20:21:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_EduardoSiqueiraWaihrich.pdf: 8404407 bytes, checksum: 73ae93c3605a23aca1e8613a4cf067cb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-24T20:21:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_EduardoSiqueiraWaihrich.pdf: 8404407 bytes, checksum: 73ae93c3605a23aca1e8613a4cf067cb (MD5) Previous issue date: 2017-11-24 / Introdução: Os Aneurismas Cerebrais ainda são considerados como patologias devastadoras de etiologia complexa e não completamente compreendidas. A anatomia do sifão carotídeo pode estar relacionada à formação e desenvolvimento dessas lesões. Os Stents Redirecionadores de Fluxo (SRF) são dispositivos que podem alterar a anatomia do sifão carotídeo. Objetivos: O objetivo desse estudo é avaliar a correlação entre a anatomia do sifão carotídeo com a formação e evolução de aneurismas cerebrais e as repercussões nessa anatomia após a liberação de SRF. Método: Entre janeiro de 2007 e dezembro de 2016, angiografias digitais com subtração em incidência de perfil estrito de 692 pacientes tratados consecutivamente com o diagnóstico de aneurisma cerebral (AC) no Departamento de Neurorradiologia intervencionista do Hospital Universitário de Limoges – França foram analisados. Desses, 183 pacientes com AC localizados no Sifão Carotídeo tratados foram tratados com SRF tipo Pipeline® e acompanhados por 6 meses. Os ângulos anteriores e posteriores do sifão carotídeo foram medidos e correlacionados com dados como relação a localização, apresentação, tamanho das lesões e resultado conforme a classificação de O’Kelly-Marotta utilizando análises multivariadas. Resultados: De 692 aneurismas, 225 (32,51%) eram rotos e 467 (67,49%) não rotos, 218 (31,50%) se localizavam no sifão carotídeo e 474 (68,50%) eram distais ao sifão. O tamanho médio dos aneurismas foi de 7,99±6,95mm. A análise multivariada evidenciou relação entre o ângulo anterior do sifão > 15,40° com: Ruptura (P=0,005), localização do aneurisma após o sifão carotídeo (P = 0,034) ,aneurismas de maiores tamanhos (P=0,015), e aumento anual de 1,002mm do tamanho aneurismático (P = 0,015). A implantação de SRF esteve associada à mudanças imediatas da morfologia do sifão carotídeo e na angiografia de controle após 6 meses. O ângulo anterior aumentou de 3,97º±25,06º para 22,05º±25,18º (P < 0,001) e o ângulo posterior de 71,98º±31,27º para 79,43º±31,80º (P < 0,001). A análise multivariada evidenciou aumento progressivo e estatisticamente significante da frequência de oclusão total (grau D) do aneurisma no controle de 6 meses a medida que aumenta o ângulo anterior (RP = 1,42, para aumentos entre 5,3o a 12o (P = 0,017); RP = 1,56, para aumentos entre 12,1o a 27,6o (P = 0,002); RP = 1,83; para aumentos acima de 27,6o (P < 0,001), em relação a aumentos menores que 5,3o ). Conclusão: Houve relação direta, significante e independente do aumento do ângulo anterior com aneurisma cerebrais localizados após o sifão carotídeo, maiores lesões e maior risco de ruptura. A implantação de SRFs geram mudanças morfológicas no sifão carotídeo, particularmente o aumento do ângulo anterior que se mostrou relacionado direta e estatisticamente com maior chance de oclusão da lesão no controle angiográfico após 6 meses. Esses achados sugerem que a morfologia do sifão carotídeo acarreta a mudanças hemodinâmicas que podem estar associados na formação e evolução dos aneurismas cerebrais. / Introduction: Brain aneurysms are still devastating disease of complex etiology and not fully understood. The anatomy of the carotid siphon may be related to the formation and development of these lesions. Flow Diverters Stents (FDS) are devices that can change the anatomy of the siphon. Objectives: The objective of this study is to evaluate the implication of carotid siphon anatomy in formation and evolution of brain aneurysms and the repercussions in this anatomy after FDS deployments. Methodology: Between January 2007 and December 2016, digital angiography with subtraction in strict lateral view of 692 patients consecutively treated with the diagnosis of brain aneurysm (BA) in the Department of Neuroradiology of the University Hospital of Limoges - France were analyzed. Of these, 183 patients with BA located in the Carotid Siphon treated with Pipeline® FDS deployment were followed for 6 months. The anterior and posterior angles of the carotid siphon were measured and correlated with data such as location, presentation, lesion size and outcome according to the O'Kelly-Marotta classification using multivariate analyzes. Results: Of 692 aneurysms, 225 (32.51%) were ruptured and 467 (67.49%) were not ruptured, 218 (31.50%) located in the carotid siphon and 474 (68.50%) were distal to the siphon, The mean size of the aneurysms was 7.99 ± 6.95mm. The multivariate analysis revealed a significative relationship between angles > 15,40 ° and rupture (P = 0.005), location after carotid siphon (P = 0.034) and larger aneurysms (P = 0.015). Multivariate analysis also showed an increase of 1.002 mm in aneurysmal size per patient year (P = 0.015). The FDS deployment was associated with immediate changes and at the 6-month control angiography of the carotid siphon morphology. The anterior angle increased from 3.97 ° ± 25.06 ° to 22.05 ° ± 25.18 ° (P < 0.001) and the posterior angle from 71.98 ° ± 31.27 ° to 79.43 ° ± 31.80 ° (P < 0.001) . The multivariate analysis showed a progressive and statistically significant increase in total occlusion frequency (grade D) of aneurysm at 6-month control as the anterior angle increases (PR = 1.42, for increases between 5.3 and 12o = 0.017), RP = 1.56, for increases between 12.1o to 27.6o (P = 0.002), RP = 1.83, for increases above 27.6o (P <0.001), in relation to smaller increases Than 5.3). Conclusion: There was a right, significant and independent relation to the anterior angle increase with aneurysm located after the carotid siphon, greater lesions and greater risk of rupture. FDS deployment generated morphological changes in the carotid siphon, particularly the anterior angle increase that was shown to be directly and statistically related to a greater chance of lesion occlusion in the 6-month angiographic control. These findings show that the morphology of the carotid siphon causes hemodynamic changes that may be associated in brain aneurysms formation and evolution.

As acidúrias metilmalônica e propiônica são doenças que afetam o catabolismo de aminoácidos de cadeia ramificada e ácidos graxos de cadeia ímpar causadas pela deficiência das enzimas metilmalonil-CoA mutase (EC 5.4.99.2) e propionil-CoA carboxilase (EC 6.4.1.3), respectivamente. Esses distúrbios são bioquimicamente caracterizados pelo acúmulo tecidual e elevada excreção urinária predominante dos ácidos metilmalônico (MMA) e propiônico (PA). Tendo em vista que os mecanismos responsáveis pelo dano neurológico encontrado nesses distúrbios ainda não estão bem estabelecidos, especialmente no que se refere ao tipo de células neurais vulneráveis à ação tóxica, o presente trabalho investigou os efeitos in vitro do MMA e do PA sobre importantes parâmetros de dano oxidativo lipídico e protéico e sobre a produção de espécies reativas em preparações sinaptossomais de cérebro de ratos jovens que são utilizadas para o estudo de efeitos neurotóxicos de compostos em neurônios. Também foi avaliado os efeitos da administração intraestriatal in vivo de MMA ou PA sobre os mesmos parâmetros, bem como sobre as atividades de enzimas antioxidantes em estriado de ratos jovens. Nossos resultados demonstraram que o MMA aumentou in vitro e in vivo a formação de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS) em preparações sinaptossomais e no estriado, respectivamente, indicando que o metabólito induz peroxidação lipídica. Verificamos ainda que a adição de MK-801 (antagonista glutamatérgico do tipo NMDA) e dos antioxidantes melatonina e trolox preveniu o aumento nos níveis de TBA-RS causado pelo MMA em sinaptossomas, indicando o envolvimento de receptores de glutamato e de espécies reativas neste efeito. Além disso, o MMA aumentou significativamente a oxidação da 2’,7’-diclorofluoresceína diacetato em sinaptossomas, refletindo um aumento na produção de espécies reativas induzido por esse ácido orgânico. Observamos também que o MMA aumentou a formação de carbonilas in vitro em sinaptossomas e a oxidação de grupamentos sulfidrilas in vivo em estriado, evidenciando dano oxidativo protéico. A administração intraestriatal de MMA inibiu significativamente a atividade da glutationa peroxidase, ao passo que as atividades das enzimas superóxido dismutase e catalase não foram alteradas. Por sua vez, o PA não alterou in vitro e in vivo qualquer dos parâmetros avaliados. O presente estudo indica que o MMA induz estresse oxidativo em sinaptossomas e em estriado, através do aumento da produção de espécies reativas e redução das defesas antioxidantes. Presumimos que o dano oxidativo provavelmente neuronal causado por esse metabólito possa representar um importante mecanismo fisiopatogênico envolvido na disfunção neurológica encontrada nos pacientes afetados pela acidúria metilmalônica. / Propionic acidemia and methylmalonic acidemia are disorders that affect the catabolism of branched-chain amino acids and odd-chain fatty acids caused by deficiency of methylmalonyl-CoA mutase (EC 5.4.99.2) and propionyl-CoA carboxylase (EC 6.4.1.3) activities, respectively. These disorders are biochemically characterized by tissue accumulation and high urinary excretion of methylmalonic (MMA) and propionic (PA) acids. Considering that the pathomechanisms of brain damage found in propionic and methylmalonic acidemias are not well established, specially regarding the type of neural cells vulnerable to the toxicity, the present study investigated the in vitro effects of MMA and PA on important parameters of lipid and protein oxidative damage and on the production of reactive species in synaptosomal preparations from brain of young rats used to study the neurotoxic effects of compounds on neurons. The in vivo effects of intrastriatal administration of MMA or PA on the same parameters, as well as on enzymatic antioxidant defenses, were also evaluated in striatum of young rats. It was observed in vitro and in vivo that MMA increased thiobarbituric acid-reactive substances (TBA-RS) levels in synaptosomal preparations and in striatum, respectively, indicating that this organic acid induces lipid peroxidation. Furthermore, the lipid oxidative damage was attenuated by the free radical scavengers α-tocopherol and melatonin and by the NMDA glutamate receptor antagonist MK-801, implying the involvement of reactive species and glutamate receptor activation in these effects. In addition, 2’,7’-dichlorofluorescein diacetate oxidation was significantly increased in synaptosomes by MMA in vitro, reinforcing the observation that reactive species generation is elicited by MMA. We also found that MMA increased carbonyl formation in vitro and sulfhydryl oxidation in vivo, suggesting that this metabolite induces protein oxidative damage. Moreover, intrastriatal administration of MMA significantly inhibited glutathione peroxidase activity, whereas it did not alter the activities of superoxide dismutase and catalase. PA did not modify these parameters in vivo and in vitro. Our data showed that MMA induces lipid and protein oxidative damage in synaptosomes and in striatum mediated by increased production of reactive species and the reduction of antioxidant defenses. Therefore, it is presumed that the cellular oxidative damage caused by MMA may represent an important pathophysiological mechanism involved in the neurological dysfunction found in patients affected by methylmalonic acidemia.

O ácido glutárico (AG) é o principal metabólito acumulado nos tecidos e fluidos corporais de pacientes afetados por acidemia glutárica tipo I (AG I), um erro inato do metabolismo da via catabólica dos aminoácidos lisina, hidroxilisina e triptofano causado pela deficiência severa da atividade da enzima glutaril-CoA desidrogenase. Clinicamente, os pacientes apresentam macrocefalia ao nascimento e uma hipomielinização ou desmielinização progressiva do córtex cerebral. Crises de descompensação metabólica com encefalopatia aguda ocorrem nestes pacientes principalmente entre 3 e 36 meses de vida, levando a uma marcada degeneração estriatal, que é a principal manifestação neurológica da doença. Depois de sofrer essas crises, os pacientes apresentam distonia e discinesia que progridem rapidamente e os incapacita para as atividades normais. Apesar dos sintomas neurológicos severos e achados neuropatológicos com atrofia cerebral, os mecanismos que levam ao dano cerebral na AG I são pouco conhecidos. O objetivo inicial do presente trabalho foi desenvolver um modelo animal por indução química de AG I através da injeção subcutânea do AG em ratos Wistar de forma que os níveis cerebrais deste composto atinjam concentrações similares aos encontrados em pacientes (~0,5 mM) para estudos neuroquímicos e comportamentais. Observamos que o AG atingiu concentrações no cérebro aproximadamente 10 vezes menores do que no plasma e 5 vezes menores do que nos músculos cardíaco e esquelético. O próximo passo foi investigar o efeito desse modelo sobre parâmetros do metabolismo energético no cérebro médio, bem como nos tecidos periféricos (músculo cardíaco e músculo esquelético) de ratos de 21 dias de vida Verificamos que a produção de CO2 a partir de glicose não foi alterada no cérebro médio dos ratos, bem como a atividade da creatina quinase no cérebro médio, músculo cardíaco e músculo esquelético. A atividade do complexo I-III da cadeia respiratória estava inibida em cérebro médio de ratos (25%), enquanto no músculo esquelético estavam inibidas as atividades dos complexos I-III (25%) e II-III (15%) e no músculo cardíaco não foi encontrada nenhuma inibição dos complexos da cadeia respiratória. Em seguida, testamos o efeito in vitro do AG sobre os mesmos parâmetros do metabolismo energético e observamos uma inibição das atividades do complexo I-III (20%) e da sucinato desidrogenase (30%) no cérebro médio na concentração de 5 mM do ácido. A produção de CO2, a partir de glicose e acetato, e a atividade da creatina quinase não foram alteradas pelo AG no cérebro médio dos animais. Assim, concluímos que o AG interfere no metabolismo energético celular, o que poderia explicar, ao menos em parte, a fisiopatogenia da AG I.

Os fatores neurotróficos regulam o desenvolvimento neuronal e a plasticidade sináptica e possivelmente têm um importante papel na patofisiologia da esquizofrenia. Os níveis do fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF) têm se mostrado alterados no cérebro e no soro de pacientes com esquizofrenia. Tem-se observado que a clozapina, um antipsicótico atípico, pode elevar a expressão do BDNF em nivel cerebral. No atual estudo, medimos os niveis de BDNF sérico em 44 pacientes esquizofrênicos, sendo 20 pacientes em uso de clozapina e 24 em uso de antipsicóticos típicos, além de 25 controles normais. Os grupos estavam pareados para sexo e idade. Os níveis do BDNF sérico dos pacientes e dos controles normais foram analisados por enzima imunoensaio. Os controles normais apresentaram níveis significativamente mais altos do BDNF quando comparado com o grupo de esquizofrênicos (p<0.001), assim como quando comparado com os subgrupos de pacientes em uso de clozapina e de típicos (p<0.001). Os níveis de BDNF dos pacientes em uso de clozapina se mostraram marginalmente superiores aos valores encontrados no grupo de típicos (p=0.056). O BDNF sérico foi fortemente correlacionado com a dose de clozapina (r=0.643; p=0.002), mas não com outras caracteristicas demográficas. Os nossos achados reforçam a idéia de achados em outros estudos em que os niveis séricos de BDNF estão reduzidos em pacientes esquizofrênicos e também sugere um efeito diferencial da clozapina comparada com antipsicóticos típicos em tais níveis.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2011. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-06-13T18:20:27Z No. of bitstreams: 1 2011_FernandoFranciscoBorgesResende.pdf: 2375537 bytes, checksum: b22c99aafd57bdf0961c5245927ef0dc (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-07-03T21:39:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_FernandoFranciscoBorgesResende.pdf: 2375537 bytes, checksum: b22c99aafd57bdf0961c5245927ef0dc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-03T21:39:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_FernandoFranciscoBorgesResende.pdf: 2375537 bytes, checksum: b22c99aafd57bdf0961c5245927ef0dc (MD5) / O objetivo do atual estudo foi avaliar os efeitos do small-interfering RNA (siRNA) e28_hnNOS sobre a expressão gênica da enzima NO sintase neuronal (nNOS) e sobre a viabilidade celular de gliomas. O glioma apresenta alta ocorrência entre os tumores cerebrais e tem o pior prognóstico. Entre os vários mediadores da tumorigênese, situa-se o óxido nítrico (NO), formado pelas enzimas NO sintases. A isoforma nNOS é expressa em tumores cerebrais, e está associada ao seu grau de malignidade. No presente estudo foi desenvolvido o siRNA e28_hnNOS para interferência de RNA sobre sequência-alvo do RNAm de nNOS, codificada pelo exon 28. Células de glioma U-251MG, cultivadas em triplicatas, foram transfectadas com este siRNA de 21 nucleotídeos (37,5nM) estruturado em lipossomas catiônicos, para análise nos tempos de 4, 24 e 48 horas pós-transfecção, havendo o controle negativo scramble. O conteúdo de RNAm de nNOS foi quantificado por RT-qPCR e os resultados expressos pelo método de 2-ΔΔCT. O siRNA e28_hnNOS alterou o conteúdo de nNOS, com expressão de 0,61 vezes em relação ao controle negativo scramble no tempo 24hs e, surpreendentemente, aumento de 1,4 vezes no tempo 48hs. O efeito do siRNA e28_hnNOS sobre a viabilidade celular foi determinado pelo ensaio de MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5-difenil brometo de tetrazolina). Células foram lesadas com neomicina (300 μg/ml) por 24 horas e transfectadas com o siRNA (37,5nM) por 4 horas, havendo grupo controle não lesado. O uso do siRNA e28_hnNOS combinado com a neomicina reduziu a viabilidade celular para 96,36%. Os resultados do presente estudo mostram que a interferência de RNA via siRNAs pode controlar a expressão gênica de nNOS em gliomas e revelam o potencial uso deste método, em associação com a neomicina, para obtenção de efeitos antiproliferativos. _________________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of the present study was to test effects of the siRNA e28_hnNOS on neuronal nitric oxide synthase enzyme (nNOS) content and cell viability of glioma cells in culture. Glioma is an aggressive cerebral tumor that holds a very poor prognosis. Nitric oxide synthase enzymes and their respective product - nitric oxide (NO) have a role in cancer development and metastasis. In our study, we tested the siRNA e28_hnNOS, which targets to nNOS mRNA sequence coded by exon 28. For that, glioma cells U-251MG in culture were transfected with e28_hnNOS (37,5 nM) mixed with cationic liposomes. They were tested at the time-points 4, 24, and 48 hours. The negative control was the commercial scramble All-Stars™ (Qiagen™). The nNOS mRNA content was quantified by RT-qPCR and the results were expressed by the method 2-ΔΔCT. The nNOS content was reduced to 0.61 fold to the scramble negative control value at 24 h. Surprisingly, we found a 1.4 fold increase at 48 h post-transfection. The siRNA effects on cell viability were determined by MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5-difenil brometo de tetrazolina) assay. Cells were previously lesioned with neomycin (300 μg/ml) for 24 h and then treated with e28_hnNOS for 4 hour. Non-lesioned and scrambled control groups were included. The use of siRNA e28_hnNOS in combination with neomycin reduced the cell viability to 96.36%. In conclusion, our results show the ability of siRNAs to change the nNOS mRNA content in glioma cells in culture and reveal the potential use of RNA interference in combination with neomycin for antiproliferative effects.