El objetivo del presente estudio fue comparar la efectividad antibacteriana de la pasta de hidróxido de calcio con clorhexidina al 2% y la pasta de hidróxido de calcio con yodopovidona al 1%, frente al Enterococcus faecalis. El diseño de contrastación fue experimental. Se distribuyeron 10 placas Petri que contenían agar Müller Hinton a 40° C, sobre las cuales fue inoculada la bacteria Enterococcus faecalis. Además, estas fueron divididas de manera aleatoria en 3 segmentos cada una de acuerdo al tipo de pasta medicamentosa que se aplicó: grupo P1 (hidróxido de calcio + clorhexidina al 2%), grupo P2 (hidróxido de calcio + yodopovidona al 1%) y el grupo P3 o control (hidróxido de calcio + agua destilada). Finalmente, se procedió a la lectura de halos de inhibición a las 24 horas, 48 horas, 7 días, 14 días. Los datos fueron procesados a través del análisis de Tukey para determinar la diferencia de medias entre los grupos experimentales y el análisis de ANOVA con un nivel de significancia del 95%, utilizando el programa SPSS 20. Se concluyó que la pasta de hidróxido de calcio con clorhexidina al 2% fue más efectiva que la pasta de hidróxido de calcio con yodopovidona al 1% frente al crecimiento in vitro del Enterococcus faecalis.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Mestrado em Neurociências / Made available in DSpace on 2012-10-17T20:51:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T16:18:17Z : No. of bitstreams: 1 179364.pdf: 8460907 bytes, checksum: e97c27708b4f2dd5a6e173d4b2bba24c (MD5) / Uma das características da visão perfeita é a capacidade de fixar o olhar sobre o alvo desejado. Esta capacidade é influenciada pela região pré-tectal, que em aves fica na transição meso-diencefálica. Através de aferências direta da retina ou indireta (via núcleos associados aos gânglios basais), esta área integra-se ao substrato de vários reflexos oculares. Apesar de sua importância no controle visuo-motor fino, há grande desinformação sobre muitas das propriedades anatomofisiológicas deste sistema. Não existem dados, por exemplo, que indiquem como alguns destes núcleos conseguem manter uma elevada taxa de descarga neural. Sendo o glutamato um importante agente excitatório no sistema nervoso central, decidiu-se investigar a hipótese da participação desse neurotransmissor em núcleos do pré-tecto. Com esta finalidade foi estudada a presença e a distribuição das quatro subunidades que formam os receptores de glutamato do tipo AMPA (GluR1, GluR2, GluR3 e GluR4), uma classe de receptores excitatórios ativados por glutamato, em três núcleos pré-tectais do cérebro de aves: o núcleo pré-tectal (PT), o núcleo espiriforme lateral (SpL) e o núcleo espiriforme medial (SpM). Foi utilizado o padrão de expressão de três proteínas ligantes de cálcio: a parvalbumina (PV), a calbindina (CB) e a calretinina (CR), como um guia histológico a fim de melhor identificar cada núcleo pré-tectal. Foram feitos cortes de cérebro da área pré-tectal de pintos de 10 a 15 dias (Gallus domesticus), os quais foram processados pela técnica de imuno-histoquímica. O material foi analisado em microscopia óptica convencional. O PT tem a forma elíptica, é composto por um núcleo e uma porção que o envolve e apresentou marcações PV+ e CR+, com fibras e corpos celulares bem marcados, porém sem a presença de imunomarcação para CB. No SpL, muitas células e processos PV+ e CB+ foram vistos, no entanto, apenas fibras CR+ foram encontradas dentro deste núcleo. O SpM pareceu conter imunorreatividade positiva somente para CR, com células e processos bem marcados. Os resultados utilizando os anticorpos contra as subunidades de receptores de glutamato do tipo AMPA indicaram que o PT pode conter receptores formados pelas subunidades GluR1 e GluR2. O SpL apresentou imunorreatividade para as subunidades GluR2, GluR3 e GluR4, enquanto o SpM pareceu conter GluR1, GluR2 e GluR3. Considerando que o significado funcional destes dados ainda necessita de estudos adicionais, os dados obtidos sugerem, até o presente momento, que estes três núcleos estão sob forte aferência excitatória glutamatérgica mediada por receptores do tipo AMPA. A presença das proteínas ligantes de cálcio sugere que elas podem ser uma ferramenta histológica útil para a identificação dos diferentes grupos celulares pré-tectais no cérebro de aves

Tesis presentada para optar al Grado de Doctor en Farmacología / El Síndrome de Sjögren (SS) es una enfermedad autoinmune sistémica, que afecta a las glándulas exocrinas, principalmente a las glándulas salivales y lagrimales, generando en los pacientes síntomas de sequedad bucal y ocular. La etiopatogenesis del SS es desconocida, la visión clásica de la patología se centra en la relación de los factores de predisposición (factores genéticos, neurohormonales, células inflamatorias) y factores extrínsecos (por ejemplo virus) que inducen una respuesta inmune. Sin embargo, la pérdida de la homeostasis de las células epiteliales también podría generar la activación del sistema inmune. Resultados previos demuestran que las células acinares de glándulas salivales labiales (GSL) de pacientes SS presentan alteraciones en su polaridad. Esta pérdida de polaridad afecta la localización de componentes de la maquinaria exocítica como las proteínas SNAREs (STX3, STX4, VAMP8). La correcta interacción entre las proteínas SNAREs de la membrana de gránulos de secreción y de la membrana plasmática permite su reconocimiento y fusión contribuyendo así, a la especificidad de las vías de tráfico de membranas. Estos antecedentes sugieren que la pérdida de polaridad también podría estar alterando otros componentes de la maquinaria exocítica, como son Sinaptotagmina-I (Syt-I) y la correcta señalización de Ca2+. La exocitosis y la señalización por Ca2+ son procesos altamente polarizados en las células acinares de las GS. La señal de Ca2+ es sensada por Syt-I, que sirve de nexo entre el estímulo y la maquinaria exocítica (proteínas SNAREs). El mecanismo a través del cual Syt-I ejerce su función moduladora, depende de su interacción con PIP2 (fosfatidil-inositol-4,5-difosfato), siendo un proceso polarizado y dependiente de Ca2+. PIP2 favorece la interacción de Syt-I con la membrana plasmática, permitiendo la exocitosis. Los antecedentes sobre Syt-I, PIP2 y Ca2+ en las células acinares de pacientes SS son escasos, por no decir inexistentes. Las células acinares de GSL de pacientes SS muestran una sobre-expresión significativa del mRNA de Syt-I en comparación a controles, esta última evaluada mediante microarreglos de cDNA. En relación a la señalización de Ca2+, la literatura reporta alteraciones en la regulación del volumen celular y una menor sensibilidad a la estimulación con acetilcolina en células acinares de pacientes SS. Cabe destacar que la mayoría de los estudios están dirigidos al transporte de agua y no consideran su participación en la secreción de los componentes proteicos de la saliva, en donde su rol junto a otros segundos mensajeros puede ser relevante. En base a estos antecedentes, se postuló la hipótesis de esta tesis: “En GSL de pacientes SS hay un aumento de la expresión de Syt-I y una alteración de su localización, que se acompaña de cambios en la polaridad celular y en la dinámica de distribución del Ca2+. Estas alteraciones determinan cambios en la capacidad exocítica”. Esto podría explicar en parte la hipofunción glandular. Para la validación de esta hipótesis, nuestro objetivo general fue: Determinar en glándulas salivales labiales (GSL) de pacientes SS y en un modelo de cultivo acinar de células derivadas de glándula submandibular humana (HSG: human submandibular gland cell line) cultivadas en 3 dimensiones (3D), alteraciones en componentes que participan en la exocitosis como son: Syt-I, PIP2 y Ca2+. Los objetivos específicos fueron: 1) En GSL de pacientes SS y controles: Determinar los niveles de mRNA y de proteína, la presencia de Syt-I en complejos SNAREs pre-existentes y la localización subcelular de Syt-I, y además, la localización polarizada de PIP2 en los dominios apicales y basales de la membrana plasmática de células acinares, 2) En cultivos 3D de células HSG: Caracterizar la señalización de Ca2+ y determinar la polaridad de los eventos exocíticos bajo la estimulación con agonistas colinérgicos y -adrenérgicos, y 3) evaluar el efecto de la sobre-expresión de Syt-I en la secreción. Nuestros resultados mostraron que Syt-I se encuentra sobre-expresada y forma parte de los complejos SNAREs preexistentes en las GSL de pacientes SS. Syt-I está presente en la región basolateral de las células acinares, donde mostró una parcial colocalización con STX4. PIP2 mostró una relocalización desde el polo apical hacia el polo basolateral en GSL de pacientes SS. La relocalización de PIP2 observada, fenómeno sumado a la presencia de complejos SNAREs en el dominio basolateral de pacientes SS, donde Syt-I se encuentra presente, podría explicar en parte, el fenómeno de exocitosis ectópica de mucinas observado en las GSL de pacientes SS. Por otro lado, los acinos originados por las células HSG cultivadas en 3D expresaron Syt-I, la cual presentó una distribución similar a la observada en GS. Estas células, al ser estimuladas con agonistas colinérgicos y adrenérgicos, generaron una señalización polarizada de Ca2+ y eventos exocíticos. Cabe destacar, que la señalización de Ca2+ y la generación de eventos exocíticos fueron dependientes, tanto del Ca2+ extracelular, como de la organización polarizada de los acinos. La sobre-expresión de Syt-I por sí sola no generó cambios en la polaridad ni en la cantidad de los eventos exocíticos, pero generó un incremento en la magnitud de estos eventos en el polo apical. Al incubar los acinos en cultivo con citoquinas pro-inflamatorias se indujo alteración en la polaridad, que en conjunto con la sobre-expresión de Syt-I, generaron un incremento en la magnitud y número de eventos exocíticos en el polo basal, reproduciendo el efecto que podrían tener estos factores en la inducción de exocitosis ectópica en las GSL de pacientes SS. Los resultados obtenidos nos permitieron concluir que: 1. Los pacientes SS muestran una respuesta exacerbada de la maquinaria exocítica en condiciones basales, lo cual se correlaciona con el aumento de los niveles de expresión de Syt-I encontrados; 2. La presencia de Syt-I en los complejos SNAREs en el dominio basolateral de células acinares de pacientes SS y la relocalización de PIP2, sugieren que estos complejos son funcionales y generan focos de exocitosis ectópica; 3. La presencia de mucinas en la matriz extracelular (MEC) de las GSL de pacientes SS, descrita previamente, sería el resultado de un proceso exocítico aberrante provocado por pérdida de polaridad y alteraciones en la señalización de Ca2+ y en la expresión y localización de componentes de la maquinaria exocítica, como las proteínas SNAREs, Syt-I y PIP2, entre otras; 4. Los acinos 3D al presentar similitudes respecto a la señalización de Ca2+ y la generación de eventos exocíticos a las células acinares de GS, nos permitirán evaluar los efectos de las alteraciones observadas en GSL de pacientes SS / Sjögren´s syndrome (SS) is a systemic autoimmune disease that affects exocrine glands, mainly lacrimal and salivary glands, causing mouth and eye dryness. SS etiopathogenesis is unknown; the classical approach has focused in the interplay between predisposing factors (genetic and neuro-hormonal factors and extrinsic factors such as viruses) and autoimmune response. However, the loss of glandular epithelial cell homeostasis might trigger immune system activation. We have demonstrated that acinar-cells of labial salivary glands (LSG) of primary SS-patients (pSS) show changes in cell polarity, leading to mislocalized components of the exocytic machinery, such as SNARE proteins (STX 3, STX 4, VAMP8). Changes of cell polarity could affect additional components involved in the exocytic process including synaptotagmin I (Syt-I), and Ca2+. Exocytosis and Ca2+ signaling are polarized processes in acinar-cells. Ca2+ signals are sensed by Synaptotagmin-I (Syt-I), a protein that may also act as a linker between Ca2+ stimulus and the exocytic machinery (SNARE proteins). The mechanism by which Syt-I achieves its modulatory function depends on its binding to phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2), which is Ca2+ dependent. PIP2 promotes an interaction between Syt-I and plasma membrane, allowing exocytocis. Previous antecedents on Syt-I, PIP2 and Ca2 + in acinar cells of SS-patients are scarce. Acinar-cells of LSG from SS-patients show a less sensitive Ca2+-response to acetylcholine stimulation and a significant upregulation of Syt-I mRNA. Most of the studies about Ca2+ signaling in salivary glands are focused in water mobilization and do not consider the cooperation of the protein components of saliva with the secretion process. According to the evidence above presented, the following hypothesis was postulated: In LSG from SS-patients there is high expression level of Syt-I and a change of its localization, which is accompanied by changes in cell polarity and Ca2+ signaling. Therefore, our main goal was to determine alteration in components involved in the exocytic process including Syt-I, PIP2 and Ca2+ signaling, both in LSG from SS-patients and in 3D HSG acini (HSG: human submandibular gland cell line). Specific aims were: 1) Determine Syt-I expression and localization as well as PIP2 localization. Moreover, determine if Syt-I is present in preformed fusion complexes in LSG of SS-patients compared to controls. 2) To evaluate Ca2+ signaling and exocytosis and as they are affected by changes of cell polarity in 3D HSG acini; 3. Evaluate the effect of Syt-I overexpression on exocytosis. Our results demonstrated that Syt-I is overexpressed in SS patients and is present in preformed fusion complexes. In addition, Syt-I is present in the basolateral pole of acinar cells, showing partial colocalization with the SNARE protein STX4. PIP2, a plasma membrane lipid with an essential role in exocytosis, was found to be relocated from the apical pole to the basal pole in LSG of SS-patients. PIP2 relocalization together with presence of SNARE complexes in the basolateral domain of SS patients where Syt-I is present, provide a partial explanation of the ectopic exocytic phenomena observed in acinar cells of SS patients. On the other hand, we demonstrated that the 3D acini of HSG cells is a culture model which adequately resembles the intracellular Ca2+ signaling and exocytic process occurring in acinar cells of salivary glands upon cholinergic and adrenergic agonist stimuli. Ca2+ signaling and exocytic events were dependent on extracellular Ca2+ and cell polarity. Moreover, our results showed that overexpression of Syt-I by itself did not generate changes of polarity of exocytic events, but generates an increase in the magnitude of exocytic events in the apical pole of 3D HSG cells. However, the synergy between altered polarity induced by preincubation with cytokines and the overexpression of Syt-I would be responsible for an increase in the magnitude and number of exocytic events at the basal pole of 3D HSG cells. In summary, results obtained in this thesis allow us to conclude that in LSG of SS patients: 1) There is an enhanced response at baseline exocytic machinery, which correlates with increased SYT-I expression levels found; 2) The presence of Syt-I in preformed fusion complexes SNARE at the basolateral domain and the relocation of PIP2, suggest that such complexes are functional and induce aberrant basolateral exocytosis; 3) The presence of mucins in ECM, previously described, could be the result of an aberrant exocytic process caused by changes of cell polarity, Ca2 + signaling and altered expression and localization of components involved in the exocytic process such as SNAREs, Syt-I and PIP2, among others; 4) 3D acini showing comparable Ca2+ signaling and exocytic events respect to LSG acinar cells, will allow us to evaluate the effects of alterations observed in LSG of SS patient

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T11:39:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 276693.pdf: 1653605 bytes, checksum: 92e108206ef61f401325ee0b2476c79f (MD5) / Tendo em mente que a 1,25D3, produto final do metabolismo da vitamina D3 é essencial para a integridade do sistema reprodutor masculino, e que, a homeostase do Ca+2 desempenha papel chave em muitos processos envolvidos na espermatogênese, avaliamos o efeito em nível membranar da 1,25D3 sobre o metabolismo do Ca+2 em testículo inteiro e célula de Sertoli de ratos imaturos. Foi demonstrado que em após 60 minutos de pré-incubação com o hormônio, não hove variação da captação basal de 45Ca+2 nos tempos de incubação de 30, 60, 150, 300 e 600 segundos. No tempo de incubação de 60 segundos, foi verificado que a 1,25D3 tem a capacidade de aumentar a captação de 45Ca+2 do meio extracelular em diferentes doses em ambos modelos experimentais, sendo este evento independente da ação genômica. Em testículos, observou-se que doses entre 10-15M e 10-9M foram eficazes em aumentar a captação de 45Ca+2, sendo o maior efeito evidenciado da dose de 10-10M (106%). Utilizando esta dose, foi demonstrado que os canais de CCDV do tipo L e T são as principais vias de entrada do íon nas células testiculares, e que há necessidade da manutenção das correntes de K+ e Cl- para que ocorra este evento. Em células de Sertoli também não foi verificada a variação da captação basal de 45Ca+2. Neste sistema, foi verificado que no tempo de 60 segundos de incubação, o hormônio foi capaz de elevar a captação de 45Ca+2 entre as doses de 10-12M e 10-8 M, onde a dose de 10-12 M aumentou em torno de140% a capatação do íon. Já a dose de 10-10 M elevou em 89% o influxo do íon. Desta forma, utilizando a dose de 10-10 M, verificamos que as células de Sertoli comportam- se assim como os testículos: há necessitadade da ativação dos CCDV-L e T para a entrada do Ca+2 assim como das correntes de K+ e Cl-. Também foi verificado que em células de Sertoli há necessidade da ativação das proteínas PKC e p38MAPK para a capatação de Ca+2 estimulada pela 1,25D3. Alé, disso, as proteínas PI3K e ERK1/2 também estão em parte envolvidas neste processo. Por fim, avaliamos que a integridade dos microtúbulos e a atividade dos canais ClC3 faz-se necessária para que ocorra a entrada do íon nas células de Sertoli, sendo esta elevação do íon necessária para que ocorra o processo de secreção celular já demosntrada anteriormente pela 1,25D3.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:37:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 328355.pdf: 2113827 bytes, checksum: 1b1f5a0a553224afa5273b3b5476470f (MD5) Previous issue date: 2014 / Dotadas de um sistema complexo de comunicação, as células nervosas representam o modo com o qual o cérebro pode se comunicar com as mais diversas partes do corpo. O córtex cerebral apresenta sua citoarquitetura composta por neurônio, células gliais (incluindo os astrócitos) e fibras. O modo tradicional de comunicação nervosa é a sinapse, e, assim como os neurônios, a partir destas, as células gliais também podem se comunicar entre si. Tendo nos íons cálcio seu modo de transmitir a informação, o astrócito, ao término da cadeia de eventos bioquímicos, reage liberando gliotransmissores. Partindo-se destes conhecimentos, este trabalho desenvolveu um estudo experimental para melhor elucidar o processo de captação de íons cálcio por astrogliomas após o emprego de um estímulo glutamatérgico. O experimento foi realizado utilizando-se cultura de células de glioma C6; solução contendo cálcio; glutamato monossódico e o indicador de cálcio fluorescente FURA-2/AM. A aquisição dos dados foi realizada em equipamento de misturador de fluxo interrompido, stopped flow mixer, capaz de produzir dados de concentração de cálcio no interior das células, utilizando para tal fluorescência. O tratamento estatístico dos dados foi realizado através das ferramentas média e desvio padrão. Para a interpretação global dos mesmos, utilizou-se autores que pudessem estabelecer relações pertinentes sobre a temática, de modo a comprovar a influencia do neurotransmissor glutamato no processo de captação de íons cálcio por astrogliomas, além da análise da viabilidade da metodologia proposta para tal.<br> / Abstract : Nerve cells are endowed with a complex communication system. They represent the main way of communication between the brain and others parts of the body. The cerebral cytoarchitecture is composed by neuron, glial cells (including astrocytes) and fibers. The traditional mode of nervous communication is the synapse. Like neurons, glial cells also employ the synapse to communicate ones with each others. Using calcium ions like way of transmitting information, the astrocyte, in the end of the biochemical events chain, reacts by releasing gliotransmitters. Knowing that, this research developed an experimental study to elucidate the process of calcium uptake by astrogliomas after a glutamatergic stimulation. The experiment was executed by using a culture of C6 glioma cells; calcium solution; monosodium glutamate and fluorescent calcium indicator Fura-2/AM. Data acquisition was performed in a "stopped-flow mixer", a device able to obtain data from concentration of calcium inside cells by fluorescence measurement. The data statistical treatment was done by employing mean and standard deviation. The overall interpretation of the results made use of authors able to establish relevant links about the subject, in order to prove the influence of the neurotransmitter glutamate in the uptake of calcium ions by astrogliomas, besides assessing the feasibility of the proposed study methodology.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Alimentos, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T21:00:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 328640.pdf: 1862329 bytes, checksum: 22e0e8b949e43bd11e5e6aea80938c04 (MD5) Previous issue date: 2014 / O processo de impregnação a vácuo (IV) em alimentos porosos consiste na troca do gás e/ou líquido ocluso dentro dos poros por um líquido externo, promovida pela aplicação de vácuo seguido do restabelecimento da pressão atmosférica. Este processo possibilita a elaboração de novos produtos incorporados de compostos que possam causar beneficio para a saúde humana, como o cálcio. O objetivo deste trabalho foi desenvolver abacaxi desidratado enriquecido com cálcio por meio de diferentes processos de impregnação e analisar as influencia do sal nas características estruturais e nas propriedades mecânicas. Assim, as fatias de abacaxi foram submetidas a diferentes tratamentos de impregnação em solução a 1 % de cálcio: IV a 100 mmHg, IV seguido de pulso de vácuo de 50 mmHg com tempo de descida t1 e t2 e impregnação sem aplicação de vácuo; utilizando como fonte o cloreto de cálcio, seguindo para secagem em estufa com circulação e renovação de ar a 60 ºC. As amostras tratadas foram comparadas com as encontradas no comercio local desidratas por convecção e por liofilização. A influência dos diferentes tratamentos aplicados nas amostras foi determinada por medidas de umidade, pH, concentração de sólidos solúveis, atividade de água, variação de massa, porosidade, temperatura de transição vítrea e textura. Os ensaios mecânicos indicaram diferenças nos dados de força-deformação entre as amostras in natura e tratadas, mostrando que a aplicação do vácuo e a adição de cálcio alteram as propriedades mecânicas do produto final conferindo maior crocância. A aplicação de vácuo e secagem convectiva proporcionaram o aumento da porosidade das amostras, contudo, as amostras que apresentaram maior porosidade foram as desidratadas por liofilização. O processo de impregnação a vácuo aumentou 11 vezes a concentração de cálcio nas amostras quando comparada com a in natura e não houve diferença significativa entre os demais processos com aplicação de vácuo. Já quando comparado ao processo de impregnação sem aplicação de vácuo a IV teve um aumento de 91 % da concentração de cálcio incorporado nas amostras. Com os resultados obtidos de determinação da concentração de cálcio, observa-se que todos os processos produziram alimentos considerados enriquecidos. A temperatura de transição vítrea foi maior para as amostras submetidas ao processo de impregnação de cálcio a vácuo e impregnação sem aplicação de vácuo, em que a adição de cálcio propiciou uma diminuição na mobilidade das moléculas. Sendo assim, os resultados deste estudo representam uma alternativa para a produção de frutas fortificadas com cálcio, com aspecto crocante e um produto com elevado valor agregado.<br> / Abstract: The process of vacuum impregnation (IV) on porous food consist in the exchange of gas and/or occluded liquid within the pores by an external liquid, promoted by the application of vacuum followed by the atmospheric pressure restoration. This process allows the production of new products with incorporated compounds, which may cause benefits to human health, such as calcium. The objective of this study was develop a dehydrated pineapple enriched with calcium by different impregnation process and analyze the influence of salt in its structural characteristics and in its mechanical properties. So the pineapple slices were submitted to different impregnation treatments in solution at 1% Calcium: IV at 100 mmHg IV, using as source the calcium chloride, followed by a vacuum pulse of 50 mmHg with decay time t1 and t2, and impregnation without the application of vacuum, following to the drying oven with an air renewal and an air circulation at 60 ° C. The treated samples were compared with those found in the local shops dehydrated by convection or lyophilisation. The influence of different treatments applied to the samples were determined by measurements of humidity, pH, concentration of soluble solids, water activity, weight change, porosity, glass transition temperature and texture. The mechanical tests indicated differences in the force-deflection data between the treated samples and the fresh samples, showing that both the application of vacuum as the addition of calcium modify the mechanical properties of the final product, giving greater crunchiness. The application of vacuum and convective drying provided increasing porosity of the sample, however, the samples with greater porosity and crunchiness were dehydrated by lyophilisation. The process of vacuum impregnation increased by 11 times the calcium concentration in the samples when compared with fresh samples and there was no significant difference between the other processes with vacuum application. However, when compared to the impregnation method under atmospheric pressure, the vacuum impregnation had a 91% increase of the calcium concentration incorporated in the samples. With the obtained results from the determination of the calcium concentration, it is observed that all processes have produced foods that are considered enriched. The glass transition temperature was higher for samples submitted to the process of calcium impregnation at vacuum and impregnation under atmospheric pressure, in which the addition of calcium led to a decrease in the mobility of the molecules. Thereby, the results of this study represent an alternative for the production of fortified fruits with calcium, with crunchiness aspect and high added value.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-05-12T04:08:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 333307.pdf: 700130 bytes, checksum: d2a93fb3605532d59a87cffb25e56cf8 (MD5) Previous issue date: 2015 / Introdução: O Agregado de Trióxido Mineral (MTA) é um biomaterial utilizado no selamento de comunicações existentes entre o sistema de canais radiculares e o periodonto. Aditivos vêm sendo investigados com o intuito de melhorar suas características físico-químicas. O objetivo deste estudo foi avaliar a natureza física e química das nanopartículas de carbonato de cálcio (NPCC) e os efeitos de sua adição ao MTA nas seguintes propriedades: tempo de presa; alteração dimensional; resistência à compressão; solubilidade e pH. Métodos: A natureza física e química das NPCC foi verificada por microscopia eletrônica de transmissão e espectroscopia de energia dispersa. Os cimentos foram preparados de acordo com cada grupo: G1(MTA sem aditivo); G2 (MTA + 5% de NPCC) e G3 (MTA + 10% de NPCC). A verificação do tempo de tempo de presa seguiu a especificação ISO 6768 e ADA no 57 para materiais que requerem umidade para presa. Nos testes de alteração dimensional e de resistência à compressão (RC) foram utilizadas 06 amostras cilíndricas/grupo (em cada período), confeccionadas a partir de moldes de teflon com dimensões de 3,58 mm de altura por 3 mm de diâmetro. As amostras foram medidas após presa e depois de 24h e 30 dias de imersão em água destilada (AD). Realizada a medição, a RC foi determinada na máquina Instron com velocidade de cruzeta de 1 mm/min. Para o teste de solubilidade foram utilizados anéis de teflon (n=06), medindo 1,5 mm de espessura e 7,75 mm de diâmetro interno. Os anéis (n=06) foram preenchidos com os cimentos, pesados após a presa e após 30 dias em água (hidratados e desidratados após 24h em dessecador). O pH foi determinado por medição da AD utilizada no teste de alteração dimensional nos períodos de 24h e 30 dias. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (a=5%) pelos testes ANOVA e Tukey, exceto para o teste de alteração dimensional no qual foi usado o teste de Kruskal Wallis. Resultados: Houve redução significativa no tempo de presa (p<0,05) das amostras dos grupos G2 e G3, com relação ao G1. A alteração dimensional observada após 24h foi similar entre os grupos e após 30 dias o G2 apresentou menor percentual de alteração do que os espécimes do G1 e G3. Também houve diferença significativa na RC (p<0,001) após 24h e 30 dias (G1>G2>G3). Houve diferença significativa na solubilidade dos diferentes cimentos entre os grupos, quando hidratados: G2>G1>G3; e desidratados: G3>G2>G1. Dentro de cada grupo, apenas no G3 foi observada diferença significativa entre os meios. Não houve diferença entre os grupos no pH avaliado após 24h. No período de 30 dias, cada grupo teve aumento signficativo do pH em relação ao períodoanterior, sendo que os grupos adicionados de NPCC (G2 e G3) tiveram médias de pH similares entre si e superiores ao G1. Conclusão: As NPCC têm morfologia cúbica, medem a 60 nm e apresentam poucas impurezas. A adição do NPCC ao MTA promoveu alterações nas propriedades físico-químicas do cimento: acelerou o tempo de presa; diminuiu a RC; após 30 dias resultou em menor alteração dimensional (5% de NPCC), maior solubilidade e maior pH.<br> / Abstract : Introduction: Mineral trioxide aggregate (MTA) is a biomaterial used in the sealing of existing communications between the system of root canals and periodontal status. Additives has been investigated in order to improve its physical and chemical characteristics. The aim of this study was to evaluate the nature physico and chemical of nanoparticles of calcium carbonate (NPCC) and the effects of its adding to the MTA: setting time (PT), dimensional change (DC), compressive strength (CS), solubility (SOL) and pH. Methods: The physical and chemical nature of the NPCC was verified by transmission electron microscopy and energy dispersive spectroscopy. Cements were prepared according to each group: G1 (MTA - no additive); G2 (MTA + NPCC 5%) and G3 (MTA + 10% NPCC). The setting time followed the ISO 6768 specification and ADA in 57 for materials that require moisture to prey. The dimensional change and compressive strength (CS) and test using cylindrical samples 06 / group (in each period), made from Teflon mold with dimensions of 3.58 mm height by 3 mm in diameter. The samples were measured after setting and after 24h and 30 days of immersion in distilled water (DW). Conducted measurements, the CS was determined with the Instron crosshead speed of 1 mm / min. For the solubility and disintegration teflon rings were used (n = 06), measuring 1.5 mm thick and 7.75 mm internal diameter. Once filled, the rings were held for 30 days in DW. After this period, the cements were dried in a desiccator with silica for 24h. The weight of each cement hydrated and dehydrated signed up. The pH was determined by measuring the dimensional change in the test periods of 24hours and 30 days. Data were statistically analyzed by ANOVA and Tukey test, a = 5%); except for the dimensional change test (Kruskal Wallis, a = 5%). Results: There was significant reduction in the setting time (p <0.05) of the specimens in G2 and G3, with respect to G1. The dimensional changes observed after 24h was similar between groups, and after 30 days the G2 showed lower alteration of the specimens G1 and G3.There were also significant differences in the CS (p <0.001) after 24h and 30 days (G1> G2> G3). There was a significant difference in solubility between the groups, when hydrated: G2> G1> G3; and dried: G3> G2> G1. Within each group, only in G3 was no significant difference between the means. There was no difference between groups in the pH measured after 24hours. In the period of 30 days, each group had increased signficativo pH compared to the previous period, and the groups added NPCC (G2 and G3) had similar mean pH witheach other and higher than the G1. Conclusion: NPCC have cubic morphology and measured 15 to 60 nm and demonstrate their chemical nature with few impurities. The addition of NPCC to MTA modified the physical-chemical properties of cement: accelerated the setting time; CS decreased; after 30 days resulted in less dimensional change (5% NPCC), increased solubility and higher pH.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-04-19T04:13:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 336041.pdf: 3290695 bytes, checksum: c2bff10428a13ab49f61c13dd059c7ca (MD5) Previous issue date: 2015 / O câncer de mama é o segundo tipo de câncer mais frequente, atingindo 1.7 milhões de mulheres no mundo. É caracterizado pelo crescimento e proliferação celular desordenado, podendo ocorrer migração das células tumorais, invasão e metástase para outros tecidos e órgãos. Os tratamentos convencionais para o câncer não atingem somente as células tumorais, mas também os tecidos saudáveis apresentando uma série de efeitos adversos que podem levar a complicações severas. Com o avanço do entendimento da genética do câncer e a identificação de genes alvos, a aplicação do efeito de RNA de interferência (RNAi) apresenta-se como alternativa viável para a melhora do prognóstico. A estratégia anti-angiogênica com a introdução de siRNA contra proteína-chave da angiogênese surge como opção entre os genes alvo superexpressos no câncer de mama. Porém, o sucesso da aplicação de RNAi na terapêutica depende do desenvolvimento de nanocarreadores de siRNA efetivos no transporte e na proteção da molécula contra a rápida degradação na circulação. Desta forma, neste trabalho foram preparados dois tipos de suspensão de nanopartículas carreadoras em diferentes pHs (NP1 e NP2), constituídos de 3 componentes (SPIONs, CaP e copolímero PEG-PAsp) responsáveis por realizar funções distintas desde a formação das nanopartículas até a liberação controlada no citoplasma de células de carcinoma de mama. As nanopartículas foram caracterizadas por espalhamento dinâmico de luz, apresentando diâmetro hidrodinâmico médio entre 120 nm e 140 nm em distribuição por intensidade, e índice de polidispersão (PdI) entre 0,05 e 0,15. A avaliação do tamanho e da morfologia por microscopia eletrônica de transmissão corroborou os resultados de caracterização pela comparação com o histograma em número. As nanopartículas se apresentaram com alto potencial magnético, verificado pela capacidade de magnetização dos mesmos, sugerindo estruturas cristalinas de magnetita e maghemita. De acordo com os estudos de citoxicidade realizados por MTT, ambas NP1 e NP2 não foram citotóxicas em células de câncer de mama MDA-MB 231. A avaliação da eficácia em promover o escape endossomal e entregar o siRNA para o silenciamento foi estudada por microscopia confocal e RT-qPCR. A microscopia confocal confirmou a habilidade dos sistemas nanocarreadores em promover o escape endossomal, enquanto que a partir do ensaio de qPCR foi possível observar a redução da expressão do gene VEGF em cerca de 60% em relação aos controles. Diante deste cenário, as nanopartículas carreadoras NP1 e NP2 apresentam-se como alternativas viáveis para aplicação do efeito de RNA de interferência invivo, devido a sua capacidade de carreamento ativo de siRNA no campo magnético, ausência de citotoxicidade, e eficiência na entrega ao citoplasma celular para o silenciamento do gene VEGF objetivando a terapia anti-angiogênica contra o câncer de mama.<br> / Abstract : Breast cancer is the second most common cancer, affecting 1.7 million women. It is characterized by disordered cell growth and proliferation, tumor cells migration, invasion and metastasis. Conventional cancer treatments affect not only tumor cells but also healthy tissue presenting a series of adverse effects that may lead to severe poisoning. With the advancement of the understanding of the cancer genetics and the identification of target genes, application of interference RNA (RNAi) effect is presented as a viable alternative to a better prognosis. The anti-angiogenic strategy with the introduction of siRNA against key protein of angiogenesis appears as an option between the target genes overexpressed in breast cancer. However, the successful application of RNAi depends exclusively on the development of effective siRNA nanocarriers to transport and to protect the molecule against rapid degradation in the blood circulation. Thus, in this work were prepared two kinds of nanoparticles at different pHs (NP1 and NP2), consisting of 3 components (SPIONs, CaP and PEG-PAsp copolymer) responsible for performing different functions from the formation of nanoparticles to controlled release in the cytoplasm of breast carcinoma cells. The nanoparticles were characterized by dynamic light scattering, with hydrodynamic average diameter between 120 nm and 140 nm by intensity distribution and polydispersity index (PdI) of 0.05 to 0.15. The evaluation of the size and morphology by transmission electron microscopy confirmed the characterization results by comparison with the histogram in number. Nanoparticles presented high magnetic potential, verified by magnetizing capacity thereof, suggesting crystal structures of magnetite and maghemite. According to the cytotoxicity by MTT studies, both NP1 and NP2 are not cytotoxic in the MDA-MB 231 breast cancer cells. The efficacy in promoting endosomal escape and deliver siRNA for silencing was studied by confocal microscopy and RT-qPCR. Confocal microscopy confirmed the ability of nanocarriers to promote endosomal escape, while the qPCR assay was possible to observe a reduction in the expression of VEGF gene in about 60% compared to controls. In this scenario, the NP1 and NP2 nanoparticles are presented as a viable alternative carrier for application in RNA interference in vivo, due to its capacity of carrying siRNA by active targeting with application of a magnetic field, lack ofcytotoxicity, and efficiency in delivery to cell cytoplasm to silencing of VEGF gene with the objective of anti-angiogenic therapy against breast cancer.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2013-07-15T22:44:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 224515.pdf: 1874632 bytes, checksum: f75ffdde81e2821558f7fe8c19ed4e46 (MD5) / Os hormônios tireoidianos (HT) regulam a esteroidogênese e a espermatogênese. O mecanismo clássico de ação dos HT ocorre através da ligação com receptores nucleares específicos. Todavia, as iodotironinas podem atuar por vias não-genômicas ou extranucleares, caracterizadas pela rapidez da resposta (de segundos a minutos), e desta forma sinalizam distintas vias de regulação celular. O objetivo do presente estudo foi estudar o envolvimento dos canais de cloreto no efeito hiperpolarizante do T4 em células de Sertoli de túbulos seminíferos de ratos imaturos, e investigar a ação dos HT na captação de cálcio em testículos de ratos imaturos, assim como a caracterização das vias de entrada deste íon estimuladas por iodotironinas. Para isto foram utilizadas as técnicas eletrofisiológica e de captação de 45Ca2+. Nos estudos eletrofisiológicos, os túbulos seminíferos foram mantidos em uma câmara de perfusão com KRb a 32 ºC, pH 7,4 em atmosfera carbogênica (O2:CO2; 95:5 v/v). Quando usado o ácido carboxílico 9-antraceno (9-AC), este era adicionado e após 30 segundos o T4, e o potencial transmembrana monitorado. Para a captação de 45Ca2+, os testículos foram pré-incubados e incubados em KRb na presença de 0,2 µCi 45Ca2+ a 32 ºC, pH 7,4; mantidos em atmosfera carbogênica (O2:CO2, 95:5 v/v). O T3 ou T4 foram adicionados no meio de incubação. Quando usados inibidores, estes eram adicionados 15 minutos antes do hormônio. O efeito hiperpolarizante do T4 foi bloqueado totalmente na presença de 9-AC, indicando o envolvimento de canais de cloreto nesta ação do T4. Este hormônio também estimulou a captação de 45Ca2+, efeito não evidenciado para o T3 nos tempos e doses estudados. O uso de nifedipina e flunarizina, bloqueadores dos canais de Ca2+ dependentes de tensão (CCDT) tipo L e T, respectivamente, bloquearam a ação estimulatória do T4. Este estímulo também foi bloqueado pelo antagonista de canal de K+ dependente de Ca2+, apamina, e pelo 9-AC, antagonista de canal de Cl-, sugerindo um mecanismo de retroalimentação entre o Ca2+ e Cl- e/ou Ca2+ e K+. O inibidor de proteína cinase A (PKA), KT 5720, inibiu completamente o efeito do T4, indicando a ativação desta via no mecanismo de entrada do Ca2+ estimulada por T4. No entanto, este efeito não foi alterado pelo uso de cloreto de estearoilcarnitina, inibidor de proteína cinase C, sendo que este inibidor demonstrou um efeito per se estimulando a captação de 45Ca2+. Destes resultados pode-se concluir que os canais de Cl- são importantes mediadores da ação hiperpolarizante do hormônio T4 em células de Sertoli. O influxo de 45Ca2+ modulado por T4 é dirigido por correntes de canais de cálcio dependentes de tensão, Cl- e K+, bem como, pela atividade da PKA, sinalizando uma via imediata de ação do T4 na membrana plasmática.

Dissertação [mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química / Made available in DSpace on 2013-07-15T23:44:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 231751.pdf: 839533 bytes, checksum: 1a17b7ef8dc5e9a0d5e3cbb416c182ca (MD5) / Neste trabalho foram preparados microesferas de quitosana e compósitos de quitosana com fosfato de cálcio (QTS/ACP) para serem empregados como adsorventes alternativos a bauxita, no processo de remoção de compostos polares contidos no óleo mineral isolante envelhecido, o método utilizado foi o de percolação, o mesmo empregado pelas Centrais Elétricas de Santa Catarina (CELESC). Os materiais adsorventes foram caracterizados por IV, TGA, CHN e ICP-AES. A análise de IV caracterizou o ACP como o fosfato de cálcio amorfo carbonatado. O óleo envelhecido (15,4 dinas,cm) foi percolado numa coluna contendo o compósito e alíquotas foram recolhidas para medidas de tensão interfacial (TI). O valor mínimo de 40,0 dinas/cm foi adotado como término da regeneração do óleo. Análise do índice de neutralização confirmou a remoção dos compostos ácidos presentes no óleo envelhecido e o teste de compatibilidade revelou que o compósito não interfere nas características do óleo. A performance do compósito foi superior a bauxita e a microesfera de quitosana no processo. A utilização do novo adsorvente poderá ser uma alternativa interessante do ponto de vista ambiental, pois o material além de regenerar o óleo, pode ser reutilizado 4 vezes no processo de regeneração. O material poderá ser descartado no meio ambiente como macro-nutrientes de cálcio, nitrogênio e fósforo após a eliminação do óleo residual.