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Avaliação da eficácia do fitoterápico a base de Cymbopogon citratus Stapf em candidiase vaginal : estudo controlado, cego e randomizado / Evaluation of the efficacy of a Cymbopogon citratus Stapf. phytotherapeutic medicine in vaginal candidiasis : a controled, blind and randomized studyDias, Oswaldo José Queiroz January 2014 (has links)
DIAS, Oswaldo José Queiroz. Avaliação da eficácia do fitoterápico a base de Cymbopogon citratus Stapf em candidiase vaginal : estudo controlado, cego e randomizado. 2014. 69 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-05-22T13:44:24Z
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Previous issue date: 2014 / Candidiasis is one of the most common causes of infection of the female genital tract . Its
clinical diagnosis is suggested by the presence of
the
classic symptoms
:
vulvovaginal pain,
itching and burning , i
nflammation , thick, lumpy and malodoro
us
leucorrhea, vulvar and vaginal
hyperemia, swollen and cracked
v
aginal mucosa with white plates
.
Those
finding
s
should be
confirmed by laboratory diagnosis
.
M
ycological examination should confirm the presence of
bla
stoconi
dia
structures
, associated or not with pseudohyphae in
the vaginal exudate
.
Cymbopogon citratus
( DC. ) Stapf , known as lemon grass is a tall, thick grass with a strong
citrus scent . It is used in
folk
medicine to treat various
diseases
and studie
s have proven its
antidepressant, antioxidant, antiseptic, astringent, bactericidal , fungicidal , sedative and
calming
effects
. Its action against microorganisms of the genus
Candida
spp
has been proven
in vitro
. The objective of this study was to evaluat
e the therapeutic efficacy of
the
intravaginal
herbal medicine
made with the
essential oil of
Cymbopogon citratus
Stapf
(
OEC
c
) in the
t
reatment of vaginal candidiasis
.
At the
Maternity
Hospital in Assis Chateubriant
, 32 female
patients aged 18
-
49 years wit
h positive clinical and laboratory diagnosis for vaginal candidiasis
were randomly assigned
for two
treatment groups to receive study drug or control drug blind
treatment daily for 7 days as clinical protocol approved by the Research Ethics and conducted
a
ccording to the Guidelines for Good
Clinical Practice
.
25
patients
completed treatment and
participation in the study, 12 in the grou
p using the Miconazole (control
) and 13 in the group that
used the cream base OEC
c
( test) . The results of the clinical ex
amination before and after
treatment were analyzed by Fisher's exact test , which showed no statistically significant
difference between the groups OEC
c
and Miconazole in the proportion of patients who
progressed to the absence of characteristic findings o
f candidiasis ( P = 0 , 59) . This result was
also obtained when comparing mycological examination ( P = 0.32 ) . With regard to adverse
events , the data were analyzed by Fisher's exact test , which showed no statistically significant
difference between M
iconazole and OEC
c
groups regarding the proportion of patients reporting
any adverse event during the study ( P = 1.00 ) . The treatment outcome of patients who used
OEC
c
in the test group was not statistically different from the results obtained from the
use of miconazole in the
control group
,
either in its clinical efficacy
,
or
in
the presence of adverse
events
, showing that the use of the
vaginal
cream
with
OEC
c
can be an effective and safe
tr
eatment for vaginal candidiasis
. / A candidíase é uma das causas mais comuns de infecção do trato genital feminino. Seu diagnóstico clínico é sugerido pela presença dos sintomas clássicos, como dor vulvovaginal, prurido e ardor, inflamação, leucorréia espessa, grumosa e com mau odor, vulva e vagina hiperemiadas, edemaciadas e com fissuras, mucosa vaginal com placas brancas. Esta constatação deve ser confirmada pelo diagnóstico laboratorial, o exame micológico deve confirmar a presença de estruturas blastoconidiadas, associadas ou não a pseudohifas no exudato vaginal. O Cymbopogon citratus (DC.) Stapf, conhecido como capim-limão é uma grama alta e grossa com um forte aroma cítrico. É utilizado na medicina popular no tratamento de várias enfermidades e estudos já comprovaram seus efeitos antidepressivo, antioxidante, antiséptico, adstringente, bactericida, fungicida, calmante e sedativo. Sua ação contra microorganismos do gênero Candida spp já foi comprovada in vitro. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia terapêutica do medicamento fitoterápico de uso intravaginal a base do óleo essencial das folhas de Cymbopogon citratus Stapf (OECc) no tratamento da candidíase vaginal. Na Maternidade Escola Assis Chateubriant, 32 pacientes do sexo feminino com idade entre 18-49 anos com diagnóstico clínico e laboratorial positivo para candidíase vaginal foram randomicamente designadas para os grupos de tratamento, para receber o medicamento em estudo ou o medicamento controle, em tratamento cego, diariamente, durante 7 dias, conforme protocolo clínico aprovado pelo Comitê de Ética e Pesquisa e realizado de acordo com as Normas de Boas Práticas Clínicas. Destas, 25 concluíram o tratamento e a participação no estudo, sendo 12 no grupo que utilizou o Miconazol (controle) e 13 no grupo que utilizou o creme a base de OECc (teste). Os resultados do exame clínico pré e pós-tratamento foram analisados pelo teste exato de Fisher, que não evidenciou diferença estatisticamente significante entre os grupos OECc e Miconazol em relação à proporção de pacientes que evoluíram com ausência de achados característicos de candidíase (P = 0,59). Tal resultado também foi obtido na comparação dos exames micológicos ( P = 0,32). Com relação aos eventos adversos, os dados foram analisados pelo teste exato de Fisher, que não evidenciou diferença estatisticamente significante entre os grupos OECc e Miconazol em relação à proporção de pacientes que relataram algum evento adverso ao longo do estudo (P = 1,00). O resultado do tratamento das pacientes que utilizaram o OECc no grupo teste não foi estatisticamente diferente do resultado obtido com a utilização do miconazol no grupo controle, seja na questão da sua eficácia clínica, seja na presença de eventos adversos, mostrando que o uso do creme a base de OECc pode ser uma forma eficaz e segura de tratamento para a candidíase vaginal.
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Caracterização genotípica e fenotípica de Candida sp de fluido vaginal de mulheres adultasCunha, Keith Cássia da 16 April 2010 (has links)
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keithcassiadacunha_dissert.pdf: 1691081 bytes, checksum: fab0d44d3deb2f20e40bba856dd1b78f (MD5)
Previous issue date: 2010-04-16 / Candida albicans is widely recognized as the pathogen often occurring in vulvovaginal candidiasis. Objective: To compare the genotypes, among infection or
colonization and recurrent isolates, with virulence determinants (phospholipase, proteinase, amylase, gelatinase, haemolysin, thermotolerance and biofilm), and to in vitro antifungal susceptibilities. Methods: 317 samples of vaginal fluid of were collected from women with or without symptomatic indications to VVC, including vaginal itching, abnormal discharge,
soreness and dyspareunia to mycological investigation. The antimicrobial susceptibility was evaluated for 4 drugs (fluconazole, Itraconazole, ketoconazole and amphotericin B, by dilution method (M27A2- CLSI). Yeasts were subjected PCR (polimerase chain reaction),
RAPD (randomly amplified polymorphic DNA), and to RFLP (Restriction fragment lenght polymorphic), this last one, used for identification of Candida dubliniensis. Results: Considering the prevalent species, C. albicans showed high rates of significant sensitivity to azoles and the vast majority of produced virulence factors, regardless of their origin, infection or colonization. Statistical analysis enabled identification of 17 clusters with identical genetic identity, and other moderately related, or unrelated. Conclusions: There was no correlation between the genetic patterns with virulence and antimicrobial susceptibility for all isolates, suggesting that, the amplified genetic regions do not match with variables and might be related to other biological events. The inclusion of other primers could allow higher association among C. albicans strains. / Candida albicans é amplamente reconhecida como patógeno, ocorrendo freqüentemente em candidíase vulvovaginal. Objetivos. Comparar os genótipos entre os
isolados de infecção, colonização e isolados recorrentes com os determinantes de virulência (fosfolipase, proteinase, amilase, gelatinase, hemolisina, termotolerância e biofilme) e susceptibilidade antifúngica in vitro. Material e Método. 313 amostras de fluido vaginal foram coletadas de mulheres com ou sem indicações sintomáticas para candidíase vulvovaginal (CVV), como prurido vaginal, corrimento, ardência e dispareunia. A susceptibilidade antimicrobiana foi avaliada frente a quatro drogas (fluconazol, itraconazol,
cetoconazol e anfotericina B), determinada pelo método de diluição (M27A2-CLSI). As leveduras foram submetidas ao PCR (polimerase chain reaction), RAPD (randomly amplified polymorphic DNA), e ao RFLP (Restriction fragment lenght polymorphic), este
último, utilizada para a identificação de Candida dubliniensis. Resultados. Considerandose a espécie prevalente, C. albicans mostrou taxas elevadas de sensibilidade significativos aos azólicos e, a grande maioria, produziu vários fatores de virulência, independente de sua origem, infecção ou colonização. A análise estatística permitiu a identificação de 17
clusters com identidade genética idêntica, e outros moderadamente relacionados, ou independentes. Conclusão. Não houve correlação entre os padrões genéticos com a virulência e susceptibilidade antimicrobiana, sugerindo que as regiões genéticas
amplificadas estão relacionadas a outros eventos biológicos; a inclusão de outros primers poderá permitir uma associação maior entre os isolados de C. albicans.
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Investigação micológica do fluido vaginal de mulheres adultas da região de São José do Rio PretoCorrêa, Paula dos Reis [UNESP] 10 February 2009 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2009-02-10Bitstream added on 2014-06-13T18:56:01Z : No. of bitstreams: 1
correa_pr_me_sjrp.pdf: 763319 bytes, checksum: 1d1304fe60a8bc1f5f7c29d67c166679 (MD5) / A candidíase vulvovaginal (CVV) é uma inflamação da mucosa genital decorrente de infecção por leveduras. Os principais sintomas são disúria, hiperemia, ardência, corrimento, prurido, dispareunia, fissuras. Aproximadamente 75% das mulheres sofrem ao menos um episódio de candidíase vulvovaginal, 40% apresentam mais de um episódio e menos de 5% tornam-se recorrentes (CVVR). A CVV tem como principal etiologia, Candida albicans, no entanto, episódios devido às espécies “não albicans” estão aumentando. O manejo das vaginites vem sendo realizado de modo empírico, levando a problemas quanto à terapêutica. Assim, este projeto teve como objetivos caracterizar fenotipicamente leveduras isoladas do conteúdo vaginal de 223 mulheres adultas, sintomáticas (S) e assintomáticas (A), atendidas pelo Serviço de Ginecologia do Hospital de Base de São José do Rio Preto e determinar os indicadores clínicos. Para tal, foi realizada análise micológica dos 223 isolados clínicos, sendo que, 87 amostras apresentaram cultura positiva. C. albicans foi a espécie mais prevalente nos dois grupos (A/S), seguida de Candida glabrata. A maior parte das mulheres era casada com média de idade de 30 a 40 anos, referiu uso de anticoncepcionais e ciclo menstrual regular. Em relação a práticas sexuais houve, para parte das pacientes, concomitância entre os hábitos, anal, oral e vaginal. Quando avaliado o tratamento prévio, não houve evidência de associação com sintomas particulares. A suscetibilidade a antifúngicos, realizada pelos dois métodos de referência disco-difusão e microdiluição, mostrou concordância, estatisticamente comprovada, apenas para o itraconazol. Em relação à produção de fator de virulência, apenas C. albicans produziu fosfolipase. Diferentemente, proteinase foi detectada em C. albicans, C. glabrata e Candida parapsilosis. Esse último fator de virulência... / Vulvovaginal candidiasis (CVV) is an inflammation of genital mucosa caused by infection by yeasts. The main symptoms are dysuria, hyperemia, burning, corrimento, pruritus, dyspareunia, cracks. Approximately 75% of women suffer at least one episode of vulvovaginal candidiasis, 40% have more than one episode and less than 5% become recurrent (CVVR). The main cause is to candidiasis is Candida albicans, however, episodes due to the species non albicans are increasing. The management of vaginitis has been done so empirically, leading to problems with therapy. Thus, this project aimed to phenotypically characterize yeasts isolated from vaginal content of 223 adult women, symptomatic (S) and asymptomatic (A), attended by the Service of Gynecology, Hospital de Base de São José do Rio Preto and determine the clinical indicators. This has mycological analysis of 223 clinical isolates, of which 87 samples showed positive culture. C. albicans was the species most prevalent in both groups (A / S), followed by Candida glabrata. Most women were married with an average age of 30 to 40 years, said use of contraceptives and menstrual cycle regularly. In relation to sexual practices was for the part of patients, concomitance between habits, anal, oral and vaginal. When assessing the previous treatment, there was no evidence of association with particular symptoms. The susceptibility to antifungal held by the two methods of reference disc-diffusion and microdilution, showed agreement, statistically proven, only to itraconazole. For the production of virulence factor, only C. albicans produced phospholipase. Conversely, proteinase was detected in C. albicans, C. glabrata and Candida parapsilosis. The latter factor was associated with virulence, mainly in isolates from symptomatic patients. Data from this study helped reveal association between virulence factors with clinical signs... (Complete abstract click electronic access below)
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Avaliação do potencial in vitro e in vivo de tiossemicarbazida, tiossemicarbazida em nanopartícula de quitosana e tiossemicarbazida derivada do canfeno como antifúngico sobre Candida albicans / Thiosemicarbazide, thiosemicarbazide in nanoparticle chitosan and thiosemicarbazide derived from camphene as antifungal over Candida albicansAraújo, Deize Evangelista 06 May 2016 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2018-07-04T16:56:32Z
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Previous issue date: 2016-05-06 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Candidiasis is a serious health problem that affects a large number of people arround the world. The treatment of this disease is carried out with antifungals, which do not provide an effective cure, besides having resistance reports and high toxicity. In this context, it is necessary to study new antifungal compounds. In addition, the delivery form of the compounds in the living organism is also target of research, since the controlled release of compounds in biological systems can improve the mode of action of many drugs. Therefore, nanostructured systems, such as nanoparticles of chitosan, have been widely studied as controlled delivery of drugs. Then, this study aimed to evaluate the antifungal potential against Candida albicans of thiosemicarbazide (TSC), thiosemicarbazide-camphene (TSC-C) and chitosan nanoparticles incorporated with thiosemicarbazide (nanoTSC). In in vitro assays, the compounds were effective to inhibit nearly 100% of the fungus in concentrations of 1,37 mM to TSC, 0,02 mM to TSC-C and 0,27 mM to nanoTSC, and the most effective compound was TSC-C. NanoTSC and empty nanoparticles were also evaluated as to cell toxicity, and the concentration able to inhibit the fungus showed no cytotoxic activity. To confirm the values observed in in vitro assays, experiments were conducted using an animal model for vulvovaginal candidiasis. The results showed that TSC-C was more efficient in inhibiting C. albicans compared with TSC and nanoTSC, but was less effective than miconazole. However, histopathological analysis showed that the groups treated with the compounds under study, showed less intensity of damage to the vaginal epithelium and inflammatory infiltrates, compared with the positive control and the group treated with miconazole. Thus, the results suggest that TSC, nanoTSC and TSC-C are promising compounds in the treatment of vulvovaginal candidiasis. / A candidíase constitui um sério problema de saúde, pois é uma doença que atinge uma grande parcela da população mundial. O tratamento dessa doença é realizado com antifúngicos, que, muitas vezes, não garantem uma cura efetiva, além de apresentarem relatos de resistência e alta toxicidade. Nesse âmbito, faz-se necessário o estudo de novos compostos antifúngicos. Aliado a isso, a forma de liberação de fármacos no organismo vivo é também alvo de pesquisas, uma vez que a liberação controlada de fármacos em sistemas biológicos pode melhorar a forma de ação dos mesmos. Para tanto, os sistemas nanoestruturados, como as nanopartículas de quitosana, têm sido amplamente estudados como meios de liberação controlada de princípios ativos. Sendo assim, esse trabalho teve como objetivo a avaliação do potencial antifúngico de tiossemicarbazida (TSC), tiossemicarbazida-canfeno (TSC-C) e de nanopartículas de quitosana incorporadas com tiossemicarbazida (nanoTSC) contra Candida albicans. Nos ensaios in vitro, os compostos foram eficientes em inibir quase 100% do crescimento do fungo em concentrações de 1,37 mM para TSC, 0,02 mM para TSC-C e 0,27 mM para nanoTSC, sendo que o composto mais eficiente foi TSC-C. NanoTSC e nanopartículas vazias também foram avaliadas quanto a toxicidade celular, sendo que não foi observada atividade citotóxica na concentração capaz de inibir o crescimento do fungo. Para avaliar a atuação dos compostos in vivo, foram realizados experimentos utilizando um modelo animal para candidíase vulvovaginal. Os resultados mostraram que TSC-C apresentou maior eficiência no tratamento de candidíase vulvovaginal em comparação com TSC e nanoTSC, porém foi menos eficiente do que miconazol. No entanto, a análise histopatológica mostrou que os grupos tratados com os compostos em estudo, apresentaram menor intensidade de danos ao epitélio vaginal e infiltrados inflamatórios, se comparados com o controle positivo e com o grupo tratado com miconazol. Dessa maneira, os resultados apresentados sugerem que TSC, nanoTSC e TSC-C são compostos promissores para o tratamento da candidíase vulvovaginal.
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Desenvolvimento e caracterização de sistema nanoestruturado contendo miconazol e farnesol para o tratamento de candidíase vulvovaginal / Development and characterization of a nanostructured system containing myco-nazole and farnesol for the treatment of vulvovaginal candidiasisCosta, Adelaide Fernandes 15 April 2016 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2018-07-09T16:47:39Z
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Previous issue date: 2016-04-15 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Vulvovaginal candidiasis (VVC) is caused mainly by opportunistic fungus Candida albicans and its yeast to hyphae transition is considered the major virulence factor of this pathogen. The increased incidence of VVC has highlighted the importance of developing new therapeutic strategies. The objective of this study was to develop a mucoadhesive nanostructured system comprising miconazole, and farnesol within chitosan for the treatment of VVC. The drug showed the antifungal miconazole expected efficacy with minimal inhibitory concentration (MIC) of 1 μg/mL. The farnesol quorum-sensing molecule was capable of inhibiting hypha-transition yeast at levels greater or equal to 300 μM. When tested together, farnesol has no effect compared to the MIC obtained for miconazole. Nanoparticles of chitosan-containing miconazole and farnesol were prepared by ionic gelation and showed favorable characteristics for use on mucous membranes, such as diameter less than 300 nanometers (nm), polydispersion index (PDI) less than 0.3, positive zeta potential and acid pH. The encapsulation efficiency (EE) of the nanoparticles was on average 81.1% for miconazole, 31.9% farnesol and 32.7% and 70.0% for miconazole and farnesol when co-encapsulated, respectively. The nanoparticles showed instability as the diameter and PDI, but were stable compared to the EE. Regarding toxicity in cultured fibroblasts (Balb/ c 3T3) were considered non-toxic. The nanoparticles showed antifungal activity against C. albicans strain used, with MIC of 2.5 μg/mL and 2 μg/mL for nanoparticles with miconazole and miconazole/ farnesol, respectively. Nanoparticles containing farnesol inhibit yeast-hyphae transition at concentrations greater than or equal to 240 uM. The antifungal activity in vivo was assessed in the murine model for VVC. Although there is no statistically significant difference between treatments in relation to the counting of colony forming units (CFU), the results suggest that chitosan nanoparticles containing miconazole and farnesol were effective for inhibiting fungal proliferation and chitosan nanoparticles containing farnesol were capable of decreasing the pathogenicity of infection demonstrated by the absence of inflammation. / A candidíase vulvovaginal (CVV) é causada principalmente pelo fungo oportunista Candida albicans. A transição de leveduras para hifas é considerada como um dos principais fatores de virulência deste patógeno. O aumento da incidência de CVV tem destacado a importância do desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. O objetivo do presente estudo foi o desenvolvimento de um sistema nanoestruturado muco-adesivo composto por miconazol e farnesol em quitosana para o tratamento de CVV. O fármaco miconazol apresentou eficácia antifúngica com concentração inibitória mínima (CIM) de 1 μg/mL. A molécula quorum sensing farnesol foi capaz de inibir a transição levedura-hifa em concentrações maiores ou iguais a 300 μM. Quando avaliados em conjunto, o farnesol não apresentou nenhum efeito em relação à CIM obtida para o miconazol. Nanopartículas de quitosana contendo miconazol e farnesol foram preparadas por gelificação iônica e apresentaram características favoráveis para utilização em mucosas, como diâmetro menor que 300 nanômetros (nm), índice de polidispersão (PDI) menor que 0.3, potencial zeta positivo e pH ácido. A eficiência de encapsulação (EE) das nanopartículas foram em média 81,1% para miconazol, 31,9% para o farnesol e 32,7% e 70,0% para o miconazol e farnesol quando co-encapsulados, respectivamente. As nanopartículas demonstraram instabilidade quanto ao diâmetro e PDI, porém foram estáveis em relação à EE. Quanto à toxicidade em culturas de fibroblastos (Balb/c 3T3) foram consideradas não tóxicas. As nanopartículas demonstraram ação antifúngica contra a cepa de C. albicans utilizada, apresentando CIM de 2,5 μg/mL e 2 μg/mL para nanopartículas com miconazol e miconazol/farnesol, respectivamente. Nanopartículas contendo farnesol inibiram a transição levedura-hifa em concentrações maiores ou iguais a 240 μM. A ação antifúngica in vivo foi avaliada no modelo murino para CVV. Apesar de não existir diferença estatisticamente significativa entre os tratamentos em relação à contagem de unidades formadoras de colônias (UFC), os resultados sugerem que nanopartículas de quitosana contendo miconazol e farnesol são eficazes, pois inibem a proliferação fúngica e que nanopartículas de quitosana contendo farnesol são capazes de diminuir a patogenicidade da infecção, demonstrada pela ausência de inflamação.
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Caracterização e quantificação por citometria de fluxo dos leucócitos presentes nos lavados vaginais de mulheres com vulvovaginites e flora vaginal normal / Characterization and quantification by flow cytometry of leukocytes present in vaginal lavages from women with vulvovaginitis and normal microfloraFerreira, Joziani Beghini Junqueira de Carvalho, 1980- 18 August 2018 (has links)
Orientador: Paulo César Giraldo, Fernando Guimarães / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T17:52:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2011 / Resumo: Introdução: As vulvovaginites (VV) são consideradas como agravos importantes à saúde da mulher, pois afetam suas vidas no âmbito sexual, afetivo, social, e psíquico. Muitos aspectos da fisiopatogênese destas afecções ainda precisam ser esclarecidos, entre eles os mecanismos imunes relacionados à instalação e propagação da infecção. Objetivos: Identificar e quantificar por citometria de fluxo (CF) os leucócitos presentes no conteúdo vaginal de mulheres com flora normal e VV. Avaliar a expressão do CD16 nos neutrófilos do conteúdo vaginal destas mulheres. Materiais e Métodos: Estudo de corte transversal, no período de junho de 2009 a outubro de 2010. O estudo incluiu 152 mulheres no menacme diagnosticadas com: flora vaginal normal (n=51), vaginose bacteriana (VB) (n=34), candidíase vulvovaginal (CV) (n=43) e VB associada a CV (VB+CV) (n=14). As mulheres foram submetidas a exame especular para medida de pH vaginal, teste de Whiff, coleta de material para bacterioscopia e cultura para fungos. A VB foi detectada pelos critérios de Amsel e/ou escore de Nugent ?7. A CV, pela presença de hifas ou esporos no conteúdo vaginal. VB+CV foi diagnosticada quando estas duas VV estavam presentes na mesma mulher segundo critérios já descritos. Foram consideradas com flora vaginal normal, as mulheres que apresentaram flora do tipo 1 e ausência de patógenos nos exames laboratoriais. Ao final do exame ginecológico, foi realizado um lavado da cavidade vaginal, o qual foi enviado ao laboratório para processamento. Os leucócitos foram marcados com anticorpos monoclonais conjugados a fluoróforos (anti-CD3, anti-CD4, anti-CD8, anti-CD14, anti-CD15, anti-CD16, anti-CD19, anti-CD24 e anti-CD56) e analisados por CF. Resultados: Os granulócitos neutrófilos foram as células predominantes em todos os grupos estudados. A média da porcentagem de granulócitos neutrófilos foi significativamente maior (p<0,05) na CV comparado à flora normal e VB. A média da porcentagem de granulócitos neutrófilos foi significativamente menor (p<0,05) na VB comparado à flora normal e a CV. Macrófagos e linfócitos foram detectados em percentuais bem menores que os granulócitos neutrófilos. Houve significância estatística (p<0,05) para os linfócitos TCD4 que apresentaram média da porcentagem maior na CV e VB em comparação à flora normal. Considerando-se a intensidade da expressão do CD16 nos neutrófilos, houve maior expressão nas VV (VB, CV, VB+CV) quando comparado à flora normal (p<0,05). Entre as VV, esta ocorrência foi maior na VB comparado à CV (p<0,05). Conclusões: Os granulócitos neutrófilos foram as células predominantes nos lavados vaginais e suas quantidades foram decrescentes considerando-se CV, flora normal e VB. Estes dados sugerem que, como em outros tecidos, na vagina, os neutrófilos são as principais células efetoras da resposta imune apresentando-se em maiores ou menores concentrações conforme o estímulo imunológico causado pelo micro-organismo. A maior intensidade da expressão do CD16 nos neutrófilos das mulheres com VV indica um atraso na apoptose dos neutrófilos envolvidos nestas infecções, predominando na VB / Abstract: Introduction: Vulvovaginitis (VV) is a serious health problem in women. This disease affects their lives in all aspects, be it, sexual, affective, social, and psychological. Many aspects of the pathophysiology of these infections have yet to be elucidated, including the immune mechanisms related to proliferation of microorganisms and maintenance of the infectious process. Objectives: One aim of this study was to identify and to quantify the immune cells present in the vaginal lumen of women with normal flora and VV by flow cytometry (FC). Another aim was to evaluate the expression of CD16 on neutrophils from the vaginal lumen of these women. Materials and Methods: A Cross-sectional study was performed from June 2009 to October 2010. The study included 152 women of childbearing age diagnosed with: normal vaginal flora (n=51), bacterial vaginosis (BV) (n=34), vulvovaginal candidiasis (VC) (n=43) and BV associated with VC (BV+VC) (n=14). The women underwent speculum examination for performing vaginal pH, Whiff test, Gram stain and culture for fungi. BV was diagnosed by the Amsel criteria and/or Nugent score ?7. VC was diagnosed by the presence of yeast or hyphae in the vaginal discharge. A diagnosis of BV+VC was made when both criteria were present in the same woman. Normal vaginal microflora was defined by the presence of type 1 flora and absence of pathogens in laboratorial exams. During gynecological examination, a lavage of the vaginal cavity was performed and sent to the laboratory for processing. Immune cells were labeled with fluorochrome-conjugated monoclonal-antibodies (anti-CD3, anti-CD4, anti-CD8, anti-CD14, anti-CD15, anti-CD16, anti-CD19, anti-CD24 e anti-CD56) and analyzed by FC. Results: The neutrophil granulocytes were the predominant cells in all groups. The mean of the percentage of neutrophil granulocytes was significantly higher (p <0.05) in VC compared to the normal flora and BV. On the other hand, the mean of the percentage of neutrophil granulocytes was significantly lower (p <0.05) in BV compared to the normal flora and VC. Macrophages and lymphocytes were detected in percentages far lower than the neutrophil granulocytes. The mean percentage of CD4 lymphocytes was significantly higher (p <0.05) in BV and VC compared to the normal flora. The expression of CD16 on neutrophils was higher in VV (BV, VC, BV+VC) compared to the normal flora (p <0.05). Among the VV, it was higher in BV compared to VC (p <0.05). Conclusions: Neutrophil granulocytes were the predominant cells in the vaginal lavages. Higher amount of neutrophil granulocytes was observed in VC, normal flora and BV respectively. These data suggest that neutrophils are presented in higher or lower concentrations as the immune stimulation caused by the pathogen. The highest intensity of CD16 expression on neutrophils in women with VV indicates a delay in neutrophil apoptosis in these infections, predominantly in BV / Mestrado / Fisiopatologia Ginecológica / Mestre em Ciências da Saúde
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Cymbopogon nardus (L.) Rendle (citronela) : prospecção química-biológica do óleo essencial com destaque no estudo de biofilme e controle da candidíase vulvovaginal /Toledo, Luciani Gaspar de January 2020 (has links)
Orientador: Taís Maria Bauab / Resumo: A candidíase vulvovaginal (CVV) é uma infecção fúngica oportunista que ocasiona relevante problema à saúde da mulher, visto os desagradáveis sintomas desta afecção, somada às dificuldades terapêuticas dos fármacos da prática clínica e ao surgimento de cepas resistentes. Neste sentido, as plantas medicinais associadas a alternativas que melhorem o potencial antifúngico, como o emprego da nanotecnologia, despontam como uma importante fonte no controle e erradicação de infecções fúngicas. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antifúngica do óleo essencial (OE) de Cymbopogon nardus (L.) Rendle, em forma livre e incorporado em microemulsão lipídica (ME+OE) frente cepas ATCC e clínicas de C. albicans, C. glabrata e C. krusei. O OE foi obtido por hidrodestilação. A análise química do OE foi realizada por cromatografia gasosa acoplada a espectrofotômetro de massas (CG-EM). As microemulsões lípidicas (ME) foram desenvolvidas e um diagrama de fases foi construído. A ME e ME+OE foram caracterizados por dispersão de luz dinâmica, análise do potencial zeta, microscopia de luz polarizada, ensaios reológicos, força mucoadesiva e microscopia eletrônica de transmissão (MET). A potencialidade antifúngica do OE e ME+OE foi avaliada pela determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM) por microdiluição, ensaio de interação sorbitol e ergosterol. O ensaio de inibição da formação de hifas de C. albicans em presença de probiótico e p... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Vulvovaginal candidiasis (VVC) is an opportunistic fungal infection that causes relevant problem to woman’s health, due to unpleasant symptoms, difficulties of the therapy and the emergence of resistant strains. In this context, the medicinal plants associated to alternatives that improve the antifungal potential, such as the nanotechnology, is an important source in the eradication and control of fungal infections. Thus, the objective of this study was to evaluate the antifungal activity of the essential oil (EO) of Cymbopogon nardus (L.) Rendle, free form and loaded into a lipid microemulsion (ME+EO) against ATCC and clinical strains of C. albicans, C. glabrata and C. krusei. The EO was obtained by hydrodistillation. The chemical analysis of the EO was performed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The lipid microemulsions (ME) were developed and a phase diagram was constructed. The ME and ME+EO were characterized by scattering, zeta potential, polarized light microscopy, rheological assays, bioadhesiveness and transmission electronic microscopy (TEM). The antifungal activity of the EO and ME+EO were evaluated by determination of minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal fungicidal concentration (MFC) by microdilution, sorbitol and ergosterol assay. The inhibition of C. albicans hyphae formation in presence of probiotic and vaginal pathogen was carried out by transwells® system. Moreover, the coated and clean surfaces were characterized by contact angle... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Caracterização de espécies de Candida provenientes de infecção da mucosa vulvovaginal de mulheres atendidas no Hospital das Clínicas em Goiânia-GO / Characterization of Candida species from vulvovaginal mucosa infection of women attended at the Hospital das Clínicas in Goiânia-GOSantos, Andressa Santana 28 February 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-02-28 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Introduction:Vulvovaginal candidiasis (VVC) is characterized as the second most common
infection among infections affecting this region. Candida yeasts, such as C. albicans, C.
parapsilosis, C. topicalis, C. glabrata, C. krusei and C. guilliermondii, are the main causes of
this pathology and can be identified by phenotypic and molecular methods. Objectives:This
study determines the predictive value (PPV) of the clinical diagnosis of VVC in comparison to
the culture, characterizes Candida species isolated from the vaginal mucosa through
phenotypic and molecular methods, and verifies the production of hydrolytic enzymes and the
susceptibility profile in vitro to antifungal agents used in VVC therapy. Methods: the
phenotypic methods used were based on morphological and biochemical aspects, while
molecular tests were performed using the polymerase chain reaction with primes specific for
each species. In order to verify the activity of the enzymes protease, phospholipase and
hemolysin, yeast growth was carried out in media containing bovine albumin, egg yolk and
blood, and the reading was determined by the precipitation zone (PZ). Adherence of Candida
to epithelial cells was determined by light microscopy by counting the number of cells adhered
to 100 epithelial cells. In vitro susceptibility of Candida isolates to fluconazole, itraconazole,
voriconazole, nystatin, and amphotericin B was performed using the broth dilution assay to
determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of the antifungal. Results: the VPP of
clinical diagnosis against the gold standard of 61.8% (34/55). Among the 55 samples
collected, 36 isolates identified as C. albicans(27), C. glabrata (5) and C. topicalis (4) were
obtained. All isolates were enzyme producers with average adherence to 100 oral epithelial
cells for the C. albicans, C. glabrata and C. tropicalis species were respectively 402.5, 236.2
and 58. High resistance to fluconazole (38.8%), high susceptibility to amphotericin B (94.4%)
and low MIC values for nystatin (8 μg / mL at > 16 μg/mL) were observed for the isolates.
Conclusions: the culture is essential for the diagnosis of CVV and confirm that C. albicans
continues the predominant species as CVV agent. All species presented a high pathogenic
power. Hydrolytic enzymes were produced by all the isolates. This study allow suggest to the
clinician that the in vitro susceptibility tests prior to antifungal prescription would bring higher
therapeutic success. / Introdução: a candidíase vulvovaginal (CVV) é caracterizada como a segunda infecção mais
comum entre as infecções que acometem esta região. As leveduras do gênero Candida, como
C. albicans, C. parapsilosis, C. topicalis, C. glabrata, C. krusei e C. guilliermondii são as
principais causadoras desta patologia, podendo ser identificadas por métodos fenotípicos e
moleculares. Objetivos: determinar o valor preditivo (VPP), do diagnóstico clínico de CVV em
comparação à cultura, realiza a caracterização das espécies de Candida isoladas da mucosa
vaginal através de métodos fenotípicos e moleculares, verifica a produção de enzimas
hidrolíticas e o perfil de suscetibilidade in vitro aos antifúngicos usados na terapia da CVV.
Metódos: Os métodos fenotípicos usados foram baseados em aspectos morfológicos e
bioquímicos, enquanto os testes moleculares foram realizados usando–se a reação em cadeia
da polimerase com oligonucleotídeos específicos para cada espécie. Para a verificação da
atividade das enzimas proteinase, fosfolipase e hemolisina, foi realizado respectivamente, o
crescimento das leveduras em meios contendo albumina bovina, gema de ovo e sangue,
sendo a leitura determinada pela zona de precipitação (PZ). A aderência de Candida às células
epiteliais foi determinada por microscopia óptica pela contagem do número de células
aderidas a 100 células epiteliais. A suscetibilidade in vitro dos isolados de Candida para
fluconazol, itraconazol, voriconazol, nistatina e anfotericina B foi realizada usando-se o teste
de diluição em caldo visando á determinação da concentração inibitória mínima (CIM) do
antifúngico. Resultados: o VPP do diagnóstico clínico frente ao padrão-ouro de 61,8%
(34/55). Dentre as 55 amostras coletadas foram obtidos 36 isolados identificados como C.
albicans (27), C. glabrata (5) e C. tropicalis (4). Todos os isolados foram produtores de
enzimas, a média de aderência à 100 células epiteliais bucais para as espécies de C. albicans,
C. glabrata e C. tropicalis foi respectivamente de 402,5, 236,2 e 58. Alta resistência ao
fluconazol (38,8%), elevada suscetibilidade a anfotericina B (94,4%) e baixos valores de MIC
para nistatina (8 μg/mL a > 16 μg/mL) foram observados para os isolados.Conclusões: a
cultura é fundamental para o diagnóstico de CVV e confirmam que C. albicans continua a
espécie predominante como agente de CVV. Todas as espécies apresentam um alto poder
patogênico visto a liberação de enzimas por todos os isolados. Este estudo permite sugerir ao
clínico que a realização de testes de suscetibilidade in vitro anterior a prescrição do
antifúngico traria maior êxito terapêutico.
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DESENVOLVIMENTO DE FORMULAÇÕES NANOTECNOLÓGICAS PARA O TRATAMENTO DA CANDIDÍASE VULVOVAGINAL / DEVELOPMENT OF NANO-SCALE FORMULATIONS FOR THE TREATMENT OF VULVOVAGINAL CANDIDIASISSantos, Sara Saurin dos 21 August 2012 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This work aimed the preparation of clotrimazole-loaded nanocapsule suspensions for vulvovaginal fungal infections treatment. For the first time, virgin coconut oil and medium chain triglycerides were used as an oil core of polymeric nanocapsules containing clotrimazole. The analytical method for quantification of this drug into nanoparticles was developed and validated. The method proved to be selective, linear, precise, accurate and robust. Using the method of interfacial deposition of preformed polymer, the nanoparticles were successfully prepared at three different concentrations of clotrimazole (1, 2 and 3 mg/mL). The physicochemical parameters measured were pH, particle diameter, polydispersity index, drug content, encapsulation efficiency, zeta potential and stability in storage during 60 days. The encapsulation efficiency was near to 100%, zeta potential was positive due to the cationic polymer employed, the pH was around 5.6 and drug contents were close to the theoretical values. The size distribution was nanometer (140-200 nm) with polydispersity index lower than 0.2. The formulations had adequate physicochemical characteristics and were stable during storage. Photodegradation studies have shown that the nanoencapsulation improved the stability of clotrimazole against UVC radiation compared to free drug solution after 14 hours of experiment. The in vitro drug release using the dialysis bag technique was characterized by a prolonged release. No burst effect was observed. Profilesare based on an anomalous transport and first order kinetics, regardless of the oil used. The in vitro microbiological test of nanocapsules suspensions was performed against Candida albicans and Candida glabrata susceptible and resistant to fluconazole by microdilution method. In combination with clotrimazole into nanoparticles, medium chain triglycerides was reported to have similar MICs of methanolic solution containing the oil and the drug. In addition to the antifungal activity in solution, coconut oil did not lose its activity after incorporation into the nanostructures and, in combination with drug, showed greater inhibition of microbial growth than the nanocapsules of medium chain triglycerides with clotrimazole. Finally nanoparticle suspensions were incorporated into hydrogels containing polymers with mucoadhesive properties, Pemulen® and Pullulan, which presented appropriate drug content, pH and spreadability. The formulations developed in this study represent promising alternatives for treatment of vulvovaginal candidiasis. / Este trabalho objetivou a preparação de suspensões de nanocápsulas contendo clotrimazol para o tratamento de infecções fúngicas vulvovaginais. Pela primeira vez, o óleo de coco virgem e os triglicerídeos de cadeia média foram empregados como núcleo oleoso de nanocápsulas poliméricas contendo clotrimazol. A metodologia analítica para a quantificação do fármaco nas nanopartículas foi desenvolvida e validada. O método mostrou-se seletivo, linear, preciso, exato e robusto. A partir do método de deposição interfacial do polímero pré-formado, as nanopartículas foram preparadas com sucesso em três concentrações diferentes de clotrimazol (1, 2 e 3 mg/mL). Os parâmetros físico-químicos avaliados foram pH, diâmetro de partícula, índice de polidispersão, teor, eficiência de encapsulamento, potencial zeta e estabilidade frente ao armazenamento por 60 dias. A eficiência de encapsulamento foi próxima a 100%, o valor do potencial zeta foi positivo devido ao polímero catiônico empregado, valor de pH em torno de 5,6 e teores de fármaco próximos aos teóricos. A distribuição de tamanho foi nanométrica (140-200 nm), com índice de polidispersão menor que 0,2. As formulações apresentaram características físico-químicas adequadas e foram estáveis durante o armazenamento. Estudos de fotodegradação mostraram que o nanoencapsulamento melhorou a estabilidade do clotrimazol sob radiação UVC, em comparação com a solução do fármaco livre, após 14 horas de experimento. A liberação do fármaco in vitro, a partir da técnica de sacos de diálise, foi caracterizada como uma liberação prolongada sem efeito burst, que foi mediada por transporte anômalo e seguiu cinética de primeira ordem, independente do óleo utilizado. As suspensões foram capazes de diminuir a velocidade de liberação do clotrimazol nas 24 horas de experimento. A partir do método de microdiluição, procedeu-se a avaliação microbiológica in vitro das suspensões de nanocápsulas contra Candida albicans e Candida glabrata sensíveis e resistentes ao fluconazol. Em combinação com o clotrimazol nas nanopartículas, os triglicerídeos de cadeia média apresentaram valores de CIMs semelhantes à solução metanólica contendo o óleo e o fármaco. Além de apresentar atividade antifúngica em solução, o óleo de coco não perdeu sua atividade após a incorporação na nanoestrutura e, em associação com o fármaco, apresentou maior inibição do crescimento microbiano do que as nanocápsulas de triglicerídeos de cadeia média com clotrimazol. Por fim, as suspensões nanoparticuladas foram incorporadas em hidrogéis contendo polímeros com propriedades mucoadesivas, Pemulen® e Pullulan, que apresentaram teor, pH e espalhabilidade adequados. As formulações desenvolvidas neste estudo representam alternativas promissoras para o tratamento da candidíase vulvovaginal.
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Atividades Antifúngica e Toxicológica In Silico dos Enantiômeros (R)-(+)- e (S)-(-)-citronelal / Antifungal and Toxicological Activities In Silico of (R)-(+)- and (S)-(-)-citronellal EnantiomersMedeiros, Cássio Ilan Soares 25 October 2016 (has links)
Submitted by Cristhiane Guerra (cristhiane.guerra@gmail.com) on 2017-02-01T13:46:41Z
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Previous issue date: 2016-10-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The incidence of vulvovaginal fungal infections has increased dramatically over the last decades, therefore being the second most common cause of vulvovaginal candidiasis (VVC) placed after bacterial vaginosis diagnosed in 40% of the women with vaginal discharge. The increasing resistance of micro-oganismos pathogens to existing antimicrobial market has driven the search for new therapeutic alternatives, such as natural herbal products belonging to various families of the plant kingdom, such as Poaceae and Myrtaceae, which are presented as a viable solution due to the low cost and easy access of the population. Highlighted, the genus Cymbopogon and the Eucalyptus plants is one of the main sources of biologically active molecules, among them the monoterpenes holds a huge biological potential of human interest. However, the research of plant-derived compounds with pharmacological properties must always be attached to toxicity studies in order to show the absence of these substances harm to the human body. Given this context, it has studied the biological activity of enantiomers (R)-(+)- and (S)-(-)-citronellal against C. albicans and C. tropicalis strains derived from in vitro vulvovaginal secretions, as well as the parameters toxicological to predict the theoretical oral toxicity in silico. To achieve the antimicrobial in vitro studies; determination of minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) was used microdilution test. Also it was applied to disk diffusion technique on solid medium for comparative study of antifungal resistance/sensitivity profile used in the treatment of vulvovaginal candidiasis isolated and associated with monoterpenes studieds. The MIC's and MFC's of the (R)-(+)- and (S)-(-)-citronellal to 90% of fungal strains were respectively (R)MIC90% 16μg/mL and (R)MFC90% 32μg/mL; (S)MIC90% 64μg/mL and (S)MFC90% 128μg/mL (Strong antifungal activity against C. albicans and C. tropicalis). Were observed high resistance of C. albicans to fluconazole and itraconazole 12 (92.30%) strains. However, this resistance was reversed in 9 (75%) and 7 (58.33%) respectively, when combined with (R)-(+)-citronellal and 6 (50%) in combination with (S)-(-)-citronellal. Furthermore, it was also observed C. tropicalis high resistance to amphotericin B, itraconazole and miconazole. However, the resistance was reversed to amphotericin B and itraconazole, as a result of the synergistic effect in 2 (66.65%) of yeast. For miconazole resistance was reversed in 3 (100%) of the strains for both enantiomers. In the in silico analysis, both enantiomers have good oral bioavailability theoretically, however, a potential irritant was observed as possible toxic effect on these monoterpenes. In conclusion, these results suggest that the (R)-(+)- and (S)-(-)-citronellal have antimicrobial effect, and which also exert effect modifier activity when antifungal agents in combination. However, although presenting good oral bioavailability theoretically, the varied toxicological profile suggests the need to assess the risk-benefit of this compound in the production of a new antifungal drug, by conducting in vivo trials. / A incidência de infecções fúngicas vulvovaginais aumentou dramaticamente ao longo das últimas décadas, constituindo assim a segunda causa mais comum de candidíase vulvovaginal (CVV) após a vaginose bacteriana diagnosticada em 40% das mulheres com corrimento vaginal. O aumento da resistência dos micro-organismos patógenos aos antimicrobianos existentes no mercado tem impulsionado a busca de novas alternativas terapêuticas, como os produtos naturais a base de plantas pertencentes a várias famílias do reino vegetal, como por exemplo a Poaceae e a Myrtaceae, que se apresentam como uma solução viável devido ao baixo custo e fácil acesso da população. Em destaque, as plantas do gênero Cymbopogon e Eucalyptus constitui uma das principais fontes de moléculas biologicamente ativas, dentre elas os monoterpenos são detentores de um enorme potencial biológico de interesse humano. No entanto, as pesquisas de compostos derivados de plantas com propriedades farmacológicas devem sempre ser unida aos estudos toxicológicos, afim de se comprovar a ausência de malefícios destas substâncias ao organismo humano. Diante deste contexto, foi estudado a atividade biológica dos enantiômeros (R)-(+)- e (S)-(-)-citronelal contra cepas de C. albicans e C. tropicalis oriundas de secreções vulvovaginais in vitro, bem como os parâmetros toxicológicos para a previsão da toxicidade oral teórica in silico. Para a realização dos estudos antimicrobianos in vitro; determinação da concentração inibitória mínima (CIM) bem como da concentração fungicida mínima (CFM), utilizou-se o teste de microdiluição. Também foi aplicada a técnica de disco-difusão em meio sólido para estudo comparativo do perfil de resistência/sensibilidade a antifúngicos utilizados na terapêutica da candidíase vulvovaginal isolados e associados aos monoterpenos em estudo. As CIM’s e as CFM’s dos enantiômeros (R)-(+)- e (S)-(-)-citronelal para 90% das cepas fúngicas foram respectivamente (R)CIM90% 16μg/mL e (R)CFM90% 32 μg/mL; (S)CIM90% 64μg/mL e (S)CFM90% 128 μg/mL (forte atividade antifúngica contra C. albicans e C. tropicalis). Foram constatados alta resistência de C. albicans ao fluconazol e ao itraconazol 12 (92.30%) das cepas testadas. Mas, essa resistência foi revertida em 9 (75%) e 7 (58.33%) respectivamente, quando em associação com o (R)-(+)-citronelal e em 6 (50%) em combinação com o (S)-(-)-citronelal. Além disso, também foi observado alta resistência de C. tropicalis a anfotericina B, itraconazol e miconazol. Porém a resistência foi revertida para a anfotericina B e para o itraconazol, resultado do efeito sinérgico em 2 (66.65%) das leveduras. Para o miconazol a resistência foi revertida em 3 (100%) das cepas para ambos os enantiômeros. Na análise in silico, ambos os enantiômeros apresentaram boa biodisponibilidade oral teórica, no entanto, um potencial irritante foi observado como possível efeito tóxico para estes monoterpenos. Em conclusão, estes resultados sugerem que os enantiômeros (R)-(+)- e (S)-(-)-citronelal apresentam efeito antimicrobiano, e que também exercem efeito modificador de atividade aos agentes antifúngicos quando em combinação. No entanto, embora tenha apresentado boa biodisponibilidade oral teórica, o perfil toxicológico variado sugere a necessidade em avaliar o risco-benefício desse composto na produção de um novo medicamento antifúngico, por realização de ensaios in vivo.
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