Submitted by Suzana Dias (suzana.dias@famerp.br) on 2018-11-09T16:20:01Z No. of bitstreams: 1 SabrinaQueirozArdito_tese.pdf: 553115 bytes, checksum: 3a2e5134532370664d754e2648b56cf0 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-09T16:20:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SabrinaQueirozArdito_tese.pdf: 553115 bytes, checksum: 3a2e5134532370664d754e2648b56cf0 (MD5) Previous issue date: 2018-04-06 / Chagas disease is caused by the parasite Trypanosoma cruzi. It is a chronic, systemic disease, which affects about 6 million people in Latin America and 30-40% has cardiomyopathy secondary to this disease. In the vast majority of cases, the main cause of death is related to the final stages of chronic heart failure. Chagas disease has become a growing health problem in non-endemic areas due to migration. Objective: To evaluate the impact of atrial fibrillation on the prognosis of chronic systolic heart failure secondary to Chagas cardiomyopathy. Material and Methods: About 234 patients routinely followed at the Cardiomyopathy Outpatient Service of Hospital de Base of São José do Rio Preto Medical School in the SUS, from January 2000, to December 2010, with the diagnosis of chronic heart failure secondary to Chagas cardiomyopathy were included in the study. A Cox proportional hazard model was used to detect independent predictors of all-cause mortality in the studied population. A survival curve was built for patients with and without atrial fibrillation. In all the circumstances, p value <0.05 was considered statistically significant. Results: Atrial fibrillation was observed in 63 patients (26.9%). In a cox proportional hazard model analysis, beta-blocker therapy ( Hazard Ratio=0.381; 95% Confidence Interval 0.257 to 0.563, p value <0.001), use of metoprolol succinate (Hazard Ratio=0.382; 95% Confidence Interval 0.170 to 0.855, p value=0.019), use of Losartan (Hazard Ratio=0.611; 95% Confidence Interval 0.380 to 0.981, p value =0.041), and left systolic ventricular diameter (Hazard Ratio=1.042; 95% Confidence Interval 1.021 to 1.063, p value <0.001) were determined independent predictors of all-cause mortality. Survival probability at 12, 24, 36, 48 and 60 months was 80%, 65%, 56%, 44% and 37%, respectively, in patients without atrial fibrillation, and 76%, 58%, 48%, 41% and 32% in patients with atrial fibrillation, (p=0.393). Conclusion: Atrial fibrillation has no prognostic significance in patients with chronic systolic heart failure secondary to Chagas Cardiomyopathy. / A doença de Chagas é causada pelo parasita Trypanosoma cruzi. É uma doença crônica, sistêmica, que afeta cerca de seis milhões de pessoas na América Latina, e 30-40% têm cardiomiopatia secundária a essa patologia. Para a grande maioria, a principal causa de morte está relacionada a estágios finais de insuficiência cardíaca crônica. A Doença de Chagas tem se tornado um problema de saúde crescente em áreas não endêmicas devido ao deslocamento e crescimento populacional. Objetivo: Avaliar o impacto da fibrilação atrial no prognóstico da insuficiência cardíaca crônica sistólica secundária à cardiomiopatia da Doença de Chagas. Casuística e Método: Foram incluídos no estudo 234 pacientes seguidos no Ambulatório de Cardiomiopatia do Hospital de Base da Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, no Sistema Único de Saúde, no período de janeiro de 2000 a dezembro de 2010, que apresentavam o diagnóstico de insuficiência cardíaca crônica sistólica secundária à cardiomiopatia da Doença de Chagas. O modelo de risco proporcional de Cox foi utilizado para detectar variável de predição independente de mortalidade geral na população como um todo, bem como para revelar variáveis de predição independentes de mortalidade geral em pacientes com fibrilação atrial. Foi construída curva de sobrevida dos pacientes pelo método de Kaplan-Meier de acordo com as variáveis de predição identificadas. Da mesma forma, construiu-se curva de sobrevida para pacientes com e sem fibrilação atrial. Em todas as circunstâncias, considerou-se valor de p <0,05 como estatisticamente significante. Resultados: A fibrilação atrial foi observada em 63 pacientes (26,9%). Terapia com betabloqueador (Razão de Risco=0,381; Intervalo de Confiança 95% de 0,257 a 0,563, p<0,001), uso de succinato de metoprolol ( Razão de Risco=0,382; Intervalo de Confiança 95% de 0,170 a 0,855, p=0,019), uso de Losartan (Razão de Risco=0,611; Intervalo de Confiança 95% de 0,380 a 0,981, p=0,041), e o diâmetro sistólico do ventrículo esquerdo (Razão de Risco=1,042; Intervalo de Confiança 95% de 1,021 a 1,063, p<0,001) as variáveis de predição independentes de mortalidade geral. A probabilidade de sobrevida em 12, 24, 36, 48 e 60 meses foi de 80%, 65%, 56%, 44% e 37%, respectivamente em pacientes sem fibrilação atrial, e 76%, 58%, 48%, 41% e 32% em pacientes com fibrilação atrial, (p=0,393). Conclusão: A fibrilação atrial não tem significado prognóstico em pacientes com insuficiência cardíaca crônica sistólica secundária à cardiomiopatia da Doença de Chagas.

Submitted by Suzana Dias (suzana.dias@famerp.br) on 2018-11-09T18:03:41Z No. of bitstreams: 1 ChristianeAyo_tese.pdf: 8833199 bytes, checksum: e3a470634a8f41b17966d4b370464f0c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-09T18:03:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ChristianeAyo_tese.pdf: 8833199 bytes, checksum: e3a470634a8f41b17966d4b370464f0c (MD5) Previous issue date: 2017-06-30 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - FAPESP / Ocular toxoplasmosis, characterized by an intraocular inflammation, is the most common clinical manifestation of toxoplasmosis, the infectious disease caused by the protozoan Toxoplasma gondii. The lesions can affect the macula and other layers of the retina and the choroid, resulting in retinochoroiditis with different degrees of ocular involvement. Chagas disease is resulting from infection by the protozoan Trypanosoma cruzi. After 20 years of infection, about 30% develop chronic Chagas heart disease, which is clinically manifested by malignant ventricular arrhythmia, thromboembolism, sudden cardiac death, and chronic heart failure. Ten per cent of Chagas patients present the digestive form of the disease, characterized mainly by dilatations of the esophagus and/or colon, due to the denervation process. The progression of the infection, as well as the development of the different clinical forms and different degrees of severity may be related to genetic characteristics of the pathogen and the host. Among the factors related to the host, the immunological response is of special interest with genetic markers playing an important modulating role in this context as they may contribute to the pathogenesis or resistance in the clinical course of these infections. Objective: The present study aimed to verify the hypothesis that KIR genes, their HLA ligands and MICA gene polymorphisms are associated with ocular toxoplasmosis (OT) and the different clinical forms of Chagas disease. Patients and Methods: This study included 297 patients with toxoplasmosis, 148 clinically diagnosed with OT and 149 without OT. Moreover, 267 patients with Chagas disease were enrolled: 78 clinically diagnosed with the digestive form of the disease, 107 with the cardiac form and 82 with the mixed form. The ELISA technique was used to confirm infection by T. gondii and T. cruzi. Polymorphisms of the KIR and MICA genes were identified by PCR-SSOP and nested PCR. Continuous variables were compared using the unpaired t test and the Chi-square test with Yates correction or the Fisher's exact test were used compare the other results. Results: In relation to the toxoplasmosis, MICA genotypes and alleles did not differ between patients with and without OT, or between patients with the primary or recurrent manifestations of the disease. KIR3DS1 gene was positively associated with the development of OT. KIR activating genes along with their HLA ligands (KIR3DS1+/Bw4-80Ile+, KIR2DS1+/C2+ and KIR3DS1+/Bw4-80Ile+) were associated with susceptibility to OT and both its primary and recurrent clinical manifestations. The inhibitory pairs - KIR2DL3/2DL3-C1/C1 and KIR2DL3/2DL3-C1 - were associated with resistance to OT and its clinical manifestations, whereas the combination KIR3DS1-/KIR3DL1+/Bw4-80Ile+ was a protection factor for the development of OT and, in particular, against recurrent manifestations. As for Chagas disease, The MICA-129met allele was associated with the development of left ventricular systolic dysfunction (LVSD) in patients with chronic chagasic cardiomyopathy, while the MICA-129val allele was associated with a protection of developing LVSD. In particular, the MICA-129 met/met homozygous haplotype was associated with the development of severe LVSD and the MICA-129 val/val homozygous genotype protected against this condition. It was also possible to demonstrate that the haplotype MICA*008~HLA-C*06 and the combination between KIR genes and their HLA ligands - KIR2DS2-/KIR2DL2-/KIR2DL3+/C1+ - were associated with susceptibility for the digestive clinical form of Chagas disease. Conclusions: Our results demonstrate that KIR genes may influence both OT and the clinical digestive form of Chagas disease, whereas the MICA gene may influence the clinical forms of Chagas disease, but not the development of OT. / A toxoplasmose ocular, caracterizada por uma inflamação intraocular, é a manifestação clínica mais comum da toxoplasmose, doença infecciosa causada pelo protozoário Toxoplasma gondii. As lesões podem afetar a mácula, as diversas camadas da retina e a coróide resultando em retinocoroidite com diferentes graus de comprometimento ocular. A doença de Chagas é resultante da infecção pelo protozoário Trypanosoma cruzi. Após 20 anos de infecção, cerca de 30% dos pacientes desenvolvem a cardiopatia chagásica crônica, que se manifesta clinicamente por arritimia ventricular malígna, tromboembolismo, morte súbita cardíaca e insuficiência cardíaca crônica. Dez por cento dos pacientes apresentam a forma digestiva, caracterizada principalmente por dilatações do esôfago e/ou cólon devido ao processo de denervação. A progressão de uma infecção, assim como o desenvolvimento de diferentes formas clínicas e diferentes graus de gravidade, podem estar relacionadas com as características genéticas do patógeno e do hospedeiro. Dentre os fatores relacionados ao hospedeiro, a resposta imunológica desperta um interesse especial e os marcadores genéticos exercem importante papel modulador neste contexto, pois podem contribuir para patogênese ou resistência do curso clínico dessas infecções. Objetivo: O presente estudo teve como objetivo verificar a hipótese de que os genes KIR, seus ligantes HLA e o polimorfismo do gene MICA estão associados à toxoplasmose ocular (TO) e às diferentes formas clínicas da doença de Chagas. Casuística e métodos: Foram incluídos no estudo 297 pacientes com toxoplasmose, 148 clinicamente classificados com TO e 149 sem TO. Também participaram deste estudo 267 pacientes com doença de Chagas, 78 clinicamente classificados com a forma digestiva da doença, 107 com a forma cardíaca, 82 com a forma mista. O teste de ELISA foi realizado para confirmar as infecções por T. gondii e T. cruzi. Os polimorfismos destes genes foram identificados por PCR-SSOP e PCR nested. As variáveis contínuas foram comparadas utilizando o teste t não pareado. Para comparação dos demais resultados foram realizados o Teste Qui-quadrado com correção de Yates ou o Teste Exato de Fisher. Resultados: Em relação à toxoplasmose, alelos e genótipos MICA não diferiram entre os pacientes com e sem TO, nem entre os pacientes com a manifestação primária ou recorrente da doença. O gene KIR3DS1 foi associado positivamente com o desenvolvimento da TO. Genes KIR ativadores juntamente com os seus ligantes HLA (KIR3DS1+/Bw4-80Ile+ e KIR2DS1+/C2+ + KIR3DS1+/Bw4-80Ile+) foram associados com suscetibilidade à TO e às suas manifestações clínicas primária e recorrente. Os pares inibidores - KIR2DL3/2DL3-C1/C1 e KIR2DL3/2DL3-C1 – foram associados com a resistência à TO e suas manifestações clínicas, enquanto que a combinação KIR3DS1-/KIR3DL1+/Bw4-80Ile+ foi associada como fator de proteção para o desenvolvimento da TO e, em particular, para a manifestação recorrente. Quanto à doença de Chagas, o alelo MICA-129met foi associado como fator de risco para o desenvolvimento da disfunção sistólica ventricular esquerda (DSVE) em pacientes com cardiopatia chagásica crônica, enquanto que o alelo MICA-129val foi associado com a proteção ao desenvolvimento da DSVE. Em especial o haplótipo homozigoto MICA-129 met/met foi associado com o desenvolvimento da DSVE grave e o genótipo homozigoto MICA-129 val/val foi associado com a proteção desta condição. Também foi possível demonstrar que o haplótipo MICA*008~HLA-C*06 e a combinação entre KIR e seus ligantes HLA - KIR2DS2-/KIR2DL2-/KIR2DL3+/C1+ - foram associados como fatores de suscetibilidade à forma clínica digestiva da doença de Chagas. Conclusões: Nossos resultados demonstram que os genes KIR podem exercer influência tanto na toxoplasmose ocular quanto na forma clínica digestiva da doença de Chagas, enquanto que MICA pode exercer influência nas formas clínicas da doença de Chagas, mas não no desenvolvimento da toxoplasmose ocular.

A enzima glicossomal gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH) de Tripanosoma cruzi e os mutantes D210L e D210L-G213D foram expressos em E. coli, purificados e submetidos a ensaios de cinética enzimática e de cristalização. A enzima GAPDH tipo selvagem e o mutante D210L-G213D cristalizaram-se no grupo espacial P21 e os cristais apresentaram padrões de difração de raios-X de boa qualidade. A estrutura cristalográfica da enzima tipo selvagem foi determinada a 2.5 e 2.15 A de resolução, a partir de coletas de dados realizadas a 277 e 100 K respectivamente. Os fatores R cristalográficos finais dos refinamentos foram de 16.0% para a estrutura a 277 K e 18.8% para a estrutura a 100 K. A estrutura do mutante GAPDH D210L-G213D foi determinada a 2.15 A de resolução e refinada até um fator R cristalográfico de 18.9%. A comparação entre as estruturas da enzima tipo selvagem determinadas nas duas temperaturas levou a resultados interessantes no que diz respeito ao empacotamento cristalino. O resfriamento dos cristais provocou uma redução no volume da cela unitária de 10.5%, tendo a maior variação ocorrido no parâmetro de rede a (14.5%). A sobreposição das celas unitárias mostrou uma rotação do conteúdo da unidade assimétrica de cerca de 5 graus em torno de um eixo aproximadamente paralelo a b. Por outro lado, a análise das estruturas da enzima tipo selvagem e mutante, juntamente com os parâmetros cinéticos, permitiram a discussão a respeito de alguns detalhes do mecanismo catalítico da enzima, principalmente no que se refere ao papel do resíduo Arg249. Tal resíduo, que apresenta grande mobilidade conformacional de sua cadeia lateral, parece estar envolvido na etapa de reorientação de um dos intermediários durante o processo catalítico. / The glycosomal glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) from Typanosoma cruzi and its mutants D210L and D210L-G213D were expressed in E. coli and purified, followed by kinetic and crystallization assays. Both wild type enzyme and D210L-G213D mutant were crystallized in P21 space group and the crystals presented good X-ray diffraction patterns. The three-dimensional structure of the wild type enzyme was determined at 2.5 and 2.15 A resolution from data collected at 277 and 100 K respectively. The structures were refined to a crystallographic R-factor of 16.0% for data collected at 277 K and 18.8% for those collected at 100 K. Also, the structure of the D210L-G213D mutant was solved at 2.15 A resolution and refined to a crystallographic R-factor of 18.9% with good geometry indicators. Comparison between the wild type enzyme structures solved at both temperatures led to interesting results concerning the crystal packing. Flash-cooled crystals presented a 10.5% shrink in the unit cell volume being the major reduction observed in the parameter a (14.5%). Superposition of the unit cells showed a global rotation of the asyrnmetric unit content of about 5 degrees around an axis approximately parallel to b. On the other hand, the analysis of the wild type and mutant enzyme structures, together with the kinetic parameters, allowed a discussion about some catalytic mecanism details, mainly the role of the Arg249 residue. The results showed that this residue might be involved in the reorientation of one of the intermediates during the catalytic process.

O parasita Trypanosoma cruzi (T. cruzi) é o causador da doença de Chagas e continua sendo um grave problema de saúde pública, principalmente nas regiões mais pobres da América Latina. Na busca por novas drogas terapêuticas contra T. cruzi, nós avaliamos a atividade do composto 5-hidroxi-3-metil-5-fenil-pirazolina-1-(S-benzilditiocarbazato) (H2bdtc) tanto in vitro quanto in vivo. Esta espécie foi caracterizada por análise elementar, espectroscopia UV-visível, infravermelho, RMN e espectrometria de massas. Nos experimentos biológicos, o composto H2bdtc em suspensão e/ou encapsulado em nanopartícula lipídica sólida (NLS) foi comparado com um dos medicamentos empregados atualmente, o benzonidazol (BZN). Utilizando-se o composto H2bdtc encapsulado em NLS observou-se: (a) redução de forma eficaz da parasitemia em camundongos, em concentração 100 vezes mais baixa do que aquela normalmente empregada para Benzonidazol (clinicamente aplicada a uma concentração de 400 ?mol kg-1 dia-1); (b) diminuição da inflamação e das lesões de fígado e do coração e (c) resultou em 100,0% de sobrevivência dos camundongos infectados com T. cruzi após 60 dias. Para fins de elucidação do possível mecanismo de ação do composto H2bdtc, estudo de interação com o DNA e com a albumina do soro Humano (HSA) foram realizados. Baseado nos dados relacionados à atividade tripanocida in vitro e in vivo do composto H2bdtc, este pode ser tomado como potente agente tripanocida e o estudo desenvolvido neste projeto pode concorrer ao uso de H2bdtc como possível nova droga a ser utilizada contra Doença de Chagas. / The parasite Trypanosoma cruzi causes Chagas disease, which remains a serious public health concern and continues to victimize thousands of people, primarily in the poorest regions of Latin America. In the search for new therapeutic drugs against T. cruzi, here we have evaluated both the in vitro and the in vivo activity of 5-hydroxy-3-methyl-5-phenyl-pyrazoline-1-(S-benzyldithiocarbazate) (H2bdtc). This compound was characterized by elemental analysis, UV-visible spectroscopy, infrared, NMR and mass spectrometry. Biological experiments were conducted with H2bdtc as a free compound or encapsulated into solid lipid nanoparticles; we compared the results with those achieved by using the currently employed drug, benznidazole. H2bdtc encapsulated into solid lipid nanoparticles (a) effectively reduced parasitemia in mice at concentrations 100 times lower than that normally employed for benznidazole (clinically applied at a concentration of 400 ?mol kg-1 day-1); (b) diminished inflammation and lesions of the liver and heart; and (c) resulted in 100,0% survival of mice infected with T. cruzi. Biological mechanism elucidation of H2bdtc compound was analyzed based on the interaction with DNA and Human Serum Albumin (HSA). Based on the data related to the in vitro and in vivo trypanocidal activity of H2bdtc it was taken as potent trypanocidal agent. Studies developed on this project allow concluding that H2bdtc is a possible new drug to be used against Chagas Disease.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / A doenÃa de Chagas à causada pelo parasito intracelular Trypanosoma cruzi e afeta em torno de 17 milhÃes de pessoas na AmÃrica Latina. A fase crÃnica da doenÃa caracteriza-se por baixo nÃvel de parasitemia e alto nÃvel de anticorpos Anti-T.cruzi e o diagnÃstico à feito preferencialmente utilizando-se mÃtodos sorolÃgicos, incluindo imunofluorescÃncia indireta (IFI), hemaglutinaÃÃo indireta (HAI) e imunoensaio enzimÃtico (ELISA). SÃo testes que apresentam alta sensibilidade, mas sofrem de baixa especificidade, e um variÃvel nÃmero de indivÃduos apresenta testes sorolÃgicos inconclusivos. Nos Ãltimos anos, muitos estudos tÃm usado a tecnologia da ReaÃÃo em Cadeia da Polimerase (PCR) para detectar sequÃncias de DNA de T. cruzi em sangue de pacientes chagÃsicos crÃnicos. A alta especificidade da PCR tem apontado para sua aplicaÃÃo como mÃtodo confirmatÃrio no diagnÃstico de pacientes com provas sorolÃgicas inconclusivas. O objetivo desse trabalho foi realizar uma anÃlise comparativa entre a PCR e os mÃtodos convencionais mais utilizados para o diagnÃstico - sorologia e xenodiagnÃstico, na detecÃÃo da infecÃÃo por T. cruzi, em indivÃduos com doenÃa de Chagas crÃnica. Sangue de 67 pacientes chagÃsicos crÃnicos, ambos os sexos, provenientes do ambulatÃrio de doenÃa de Chagas do Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio, da Universidade Federal do CearÃ, foram avaliados para T. cruzi, utilizando testes sorolÃgicos (IFI, HAI e ELISA), PCR-Multiplex e xenodiagnÃstico. AlÃm disso, foi avaliado tambÃm a PCR-Multiplex em dejetos de triatomÃneos provenientes do xenodiagnÃstico destes pacientes. De acordo com o resultado dos testes sorolÃgicos, os pacientes foram classificados em 3 grupos: 1Â. Sorologia positiva (quando 2 ou 3 resultados dentre os 3 testes sorolÃgicos foram positivos), 2Â. Sorologia inconclusiva ou indeterminado (apenas 2 resultados foram negativos) e 3Â. Sorologia negativa (quando os 3 resultados foram negativos). Dentre as 59 amostras com sorologia positiva foram obtidos 18 (30,5%) resultados positivos de PCR-Multiplex em sangue perifÃrico e 41 (69,5%) resultados negativos. Nos PCR-Multiplex em dejetos de triatomÃneos foram obtidos 20 (33,9%) resultados positivos e 39 (66,1%) resultados negativos. As 2 amostras com sorologia inconclusiva foram negativas na PCR-Multiplex, tanto em sangue perifÃrico como em dejetos de triatomÃneos. As amostras com sorologia negativa (n=6) apresentaram 2 resultados positivos (33,3%) na PCR-Multiplex em sangue e 4 resultados negativos (66,7%). Nos dejetos de triatomÃneos, as 6 amostras com sorologia negativa foram negativas na PCR-Multiplex. Estes resultados mostraram que o ensaio da PCR-Multiplex em amostras de sangue perifÃrico e em dejetos de triatomÃneos, empregando iniciadores para regiÃes diferentes, no caso, DNA nuclear e DNA do cinetoplasto, podem ser aplicados para o diagnÃstico da doenÃa de Chagas crÃnica (mesmo com diferentes metodologias de extraÃÃo de DNA total). Os dados mostraram tambÃm que a PCR-Multiplex em dejetos de triatomÃneos à mais sensÃvel que o ensaio do xenodiagnÃstico.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2014-09-04T12:27:38Z No. of bitstreams: 2 DissertacaoDiogo H Saliba de Souza.pdf: 1557895 bytes, checksum: 142312323e42e02c8880548032f2795d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-04T12:27:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DissertacaoDiogo H Saliba de Souza.pdf: 1557895 bytes, checksum: 142312323e42e02c8880548032f2795d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-03-26 / Introduction: Chagasic megaesophagus (CM) is the most common digestive manifestation of Chagas’ Disease (CD) in Brazil and the State of Goiás is one of the most affected regions. The Hospital das Clínicas (HC)/ Universidade Federal de Goiás (UFG) is a reference center for study and treatment of CM in the last decades. The objective of this study was to characterize the current epidemiological profile of patients with CM seen at the HC of the UFG, from 1998 to 2010. Methodology: Nine hundred thirty-nine patients' records were analyzed and age, gender, place of birth, serology, symptoms and radiological classification according to Rezende et al. were analyzed. Results: The median age of patients was 55 years old. Male patients were the most prevalent, 54%. The prevalence of younger patients, less than 31 years old, was 4.2% but 82.1% of them were from Bahia State. Patients with more than 40 years old, were majority (85.5%). The radiological groups were distributed as follows: group I (35.9%), group II (32.9%), group III (17%) and group IV (14.2%). Dysphagia for solid was common in all radiological groups, however dysphagia for liquids, regurgitation and other gastrointestinal symptoms were significant in groups II, III and IV. Conclusion: Compared to previous studies by the same group in 1975, 1994 and 1995, the number of younger patients decreased and the frequency curve is shifting to older ages. / Introdução: O megaesôfago chagásico (MEC) é a manifestação digestiva mais comum da doença de Chagas (DC) no Brasil e o Estado de Goiás se encontra entre os mais prevalentes. O Hospital das Clínicas (HC) / Universidade Federal de Goiás (UFG) é um centro de referência no estudo e no tratamento do MEC nas últimas décadas. O objetivo desse estudo foi caracterizar o perfil clínico-epidemiológico atual desses pacientes acompanhados no HC da UFG de 1998 a 2010. Metodologia: Foram analisados 939 prontuários de pacientes nas variáveis idade, sexo, naturalidade, testes sorológicos, sintomatologia e classificação radiológica segundo Rezende et al. Resultados: A mediana da idade dos pacientes foi de 55 anos. O sexo masculino foi o mais prevalente, 54%. A prevalência de pacientes abaixo de 31 anos foi 4,2% porém 82,1% deles eram naturais da Bahia. A maioria dos pacientes (85,5%) tinha mais de 40 anos de idade. Os grupos radiológicos foram assim distribuídos: grupo I (35,9%), grupo II (32,9%), grupo III (17%) e grupo IV (14,2%). Disfagia para sólidos é comum em todos os grupos radiológicos, porém disfagia para líquidos, regurgitação e outros sintomas digestivos foram significativos nos grupos II, III e IV. Conclusão: Em relação aos estudos anteriores realizados pelo mesmo grupo em 1975, 1994 e 1995, a população de jovens, abaixo de 31 anos, está diminuindo e a maioria se encontra em faixas etárias mais avançadas.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Problemas Relacionados a Medicamentos (PRM) sÃo responsÃveis por causar morbidade e mortalidade em todo o mundo, e tambÃm, afetar resultados clÃnicos esperados e a qualidade de vida (QV) de pacientes. O tratamento etiolÃgico da DoenÃa de Chagas (causada pelo Trypanosoma cruzi) conta apenas com o benzonidazol (BNZ). Este medicamento pode produzir toxicidade (hipersensibilidade, aplasia medular, etc.) e tem eficÃcia parcial. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos provocados na saÃde dos pacientes emu so de BNZ, medidos a partir de Ãndices QV e PRM. Dezenove pacientes foram inluÃdos em um estudo observacional, descritivo e de seguimento que ocorreu de novembro de 2006 a outubro de 2007. Estes pacientes, apÃs prescriÃÃo de BNZ e consentimento, foram acompanhados por 6 meses por um farmacÃutico e estagiÃrios treinados. O MÃtodo DÃder foi utilizado, excetuando-se a etapa de intervenÃÃo. Os PRM foram classificados por juÃzes utilizando-se o Segundo Consenso de Granada (2002). As reaÃÃes adversas foram classificadas pelo Centro de FarmacovigilÃncia do Cearà (CEFACE). Utilizou-se o questionÃrio Short-Form Health Survey (SF-36) para avaliar a QV dos pacientes antes e apÃs o seguimento. Realizou-se anÃlise descritiva para os dados. AlÃm disso, os testes de Mcnemar e Wilcoxon foram feitas para anÃlise inerencial, considerando o nÃvel de significÃncia de p<0,05. A maioria dos pacientes era homem (58%), possuÃa escolaridade atà o ensino fundamental (57,9%) e encontrava-se na forma indeterminada da doenÃa de Chagas (74%). Cerca de 42% dos pacientes fizeram uso de dois ou trÃs medicamentos durante o tratamento com BNZ, havendo mÃdia de consumo de 1,3 medicamento por paciente, sendo os anti-hipertensivos e diurÃticos os mais usados durante o tratamento com BNZ (22%). Em relaÃÃo à adesÃo ao BNZ, 47,4% nÃo foram aderentes ao BNZ. Suspenderam o tratamento, 36,8%, a maioria devido à presenÃa de RAM (Coeficiente de CorrelaÃÃo = 0,415, p-valor bicaudal = 0,047). Somou-se um total de 148 PRM nas trÃs etapas de avaliaÃÃo. Destes 41,9% estavam relacionados à necessidade, 33,1% à efetividade e 25% à seguranÃa. Verificou-se que a quantidade de PRM estava associada ao nÃmero de medicamentos usados (Coeficientes de CorrelaÃÃo Kendall = 0,438, p-valor bicaudal = 0,018). Comprovou-se que a quantidade de PRM apÃs o tÃrmino do tratamento (60 dias) foi maior em relaÃÃo ao inÃcio (Teste de Wilcoxon: Z=-3,725, p<0,05). Cerca de 17 pacientes (10 homens e 7 mulheres) afirmaram apresentar alguma RAM, que variou desde prurido a parestesia. A maioria destas foi classificada como provÃvel e leve. Demonstrou-se que os pacientes com RAM leves tÃm um conhecimento maior em relaÃÃo Ãqueles com reaÃÃes moderadas (Coeficiente de CorrelaÃÃo = 0,523; p-valor bicaudal = 0,028). NÃo foi detectada alteraÃÃo da QVRS apÃs o seguimento. Entretanto, mostrou-se que os PRM afetaram a QVRS (Teste de Wilcoxon: Z=-3,724, p<0,05). NÃo houve diferenÃa entre QVRS antes e depois, no entanto houve piora da QVRS em relaÃÃo aos PRM. / Drug Related Problems (DRP) are responsible to cause morbidity and mortality in all world, and can affect expected clinical results and quality of life (QoL) of patient. Etiologic treatment for Chagasâ disease (caused by Trypanosoma cruzi) have only a drug, the benznidazole (BNZ). This medicine may produce toxicity (hipersensibility, bone medular aplasy, etc.) and have partial efficacy. The aim was to estimate the effects in the health of patients in use of BNZ, mensured by QoL and DRP. Nineteen patients included in a observational, descriptive and follow-up study in the period from November of 2006 to October of 2007. These patients, after prescription of BNZ and consent, were followed by 6 months by pharmacist and pharmacist students. Dader Method was utilized except intervention procediment. DRP were classified by judges utilizing the Second Granada Consensus (2002). The adverse reaction were classified by Centro de FarmacovigilÃncia do Cearà (CEFACE). The QoL was mensuread by Short-Form Health Survey (SF-36) questionnaire before and after the follow-up. Were realized by descriptive analysis to study the result. Also, Mcnemar and Wilcoxon tests were made for inferential analysis, considering the significance level p<0,05. The majority of patients were men (58%), had until primary school level (57,9%) and they were in a indeterminate form of Chagas disease (74&#61477;). About 42&#61477; from patients used 2 or 3 medicines with BNZ treatment, with an average from 1,3 medicine per patient. Antihypertension and diuretics were the most utilized in BNZ treatment (22%). In relation to adherence, 47,4% from patients were not adhere to BNZ. The use of BNZ was suspended in 36,8% of patients, the major reason was adverse reaction (Correlation Coefficient = 0,415, p-value = 0,047). In three steps of analysis was founded a total of 148 DRP (41,9% related to necessity, 33,1% to effectiveness and 25% to security). DRP were associated to number of medicines (Kendall Coefficient = 0,438, p-value = 0,018). The number of DRP were high after than the start of treatment with BNZ (Wilcoxon test: Z=-3,725, p<0,05). Seventeen patients (10 men and 7 women) showed adverse reaction, to pruritus until parestesia. These majority reactions were classified as probable and soft. Patients with soft adverse reaction have more knowledge level in relation to patients with moderate adverse reaction (Correlation Coefficient = 0,523; p-value = 0,028). It wasnât detected alterations in QoL after follow-up, but it was showed that DRP affected QoL levels (Wilcoxon test: Z=-3,724, p<0,05). There wasnât difference between QoL before and after, however DRP affected QoL.

Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-10-20T15:45:49Z No. of bitstreams: 2 Tese - Liliane da Rocha Siriano - 2013.pdf: 1382106 bytes, checksum: d95d1cd146dc5c4ce2277e1d362553fe (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-10-20T15:46:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Liliane da Rocha Siriano - 2013.pdf: 1382106 bytes, checksum: d95d1cd146dc5c4ce2277e1d362553fe (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-20T15:46:08Z (GMT). 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In this study, monitoring women during pregnancy allowed the accompaniment of the newborn to nine months of age, at which stage it is expected that maternal antibodies have disappeared completely. To know the population of pregnant women infected by Trypanosoma cruzi, in the service of a Maternity Hospital, 1979 records were analyzed at an interval of three years (2010 to 2012). Socioeconomic and demographic profiles, as well as reproductive and serological features were studied. Had positive serology for American trypanosomiasis 3.1% of women (61/1.979) and a few of them reported abortions. Studies have shown that abortion in infected mothers who failed to transmit their infection to the fetus had no greater frequency of miscarriage, prematurity and perinatal mortality, but there was a greater tendency to stillbirth in mothers who transmitted the infection to their children. Thirty-eight infected by T. cruzi pregnant women (two with twin pregnancies) and their fetuses (forty) participated in a survey to verify integration of kDNA minicircle of this protozoan in their children. For serological diagnosis the three conventional techniques of ELISA, IFA and HAI were performed on all samples. All mothers confirmed the positivity of Chagas disease by serology. Two children had positive serological, parasitological and molecular diagnosis of Trypanosoma cruzi, featuring congenital transmission, in addition to horizontal gene transfer. The polymerase chain reactions (PCR) were performed to identify the presence of nuclear DNA (nDNA) and mitochondrial (kDNA) in the samples studied. The amplifications were performed in triplicate with each primer pair for diagnostic confirmation. Amplification of nuclear material of T. cruzi occurred in 92.1% of mothers and 10% of children (4/40). In 70% of children and 92.1% of the mothers was no amplification of kinetoplast DNA of the parasite. Most integration events of minicircle kDNA occurred through mobile elements, with most of them the LINE-1 retrotransposon. The largest number of integrations was observed on chromosome X. / Após mais de um século da descoberta da doença de Chagas, cujo agente etiológico é o parasito denominado Trypanosoma cruzi, muito ainda há para ser desvendado sobre essa doença. O polimorfismo, a forma de reprodução, a correlação entre cepa e forma clínica, métodos sorológicos e moleculares, transferência gênica e suas consequências clínicas, tratamento e cura são tópicos que envolvem grandes questionamentos ainda não totalmente elucidados pelos pesquisadores desta enigmática doença. O controle de doadores em bancos de sangue e a diminuição nos índices de transmissão vetorial fizeram com que a transmissão congênita ganhasse uma maior importância. No presente estudo, o monitoramento das mulheres durante a gestação possibilitou o acompanhamento do recém-nascido até os nove meses de idade, fase na qual se espera que os anticorpos maternos tenham desaparecido por completo. Para se conhecer a população de gestantes infectadas por Trypanosoma cruzi, no serviço da Maternidade de um Hospital Universitário, 1.979 prontuários foram analisados num intervalo de três anos (2010 a 2012). Perfis socioeconômicos e demográficos, assim como as características reprodutivas e sorológicas foram estudados. Tiveram sorologia positiva para Tripanossomíase Americana 3,1% das mulheres (61/1.979) e poucas relataram aborto. Estudos sobre o aborto demonstraram que em mães infectadas que não transmitiram sua infecção ao feto não houve maior frequência de aborto, prematuridade e mortalidade perinatal, porém, houve uma maior tendência à natimortalidade nas mães que transmitiram a infecção aos seus filhos. Trinta e oito gestantes infectadas por T. cruzi (duas com gestações gemelares) e seus conceptos (quarenta) participaram de uma pesquisa para verificar a integração de minicírculos de kDNA deste protozoário em seus filhos. Para o diagnóstico sorológico as três técnicas convencionais de ELISA, IFI e HAI foram realizadas em todas as amostras. Todas as mães confirmaram a positividade da doença de Chagas pela sorologia. Duas crianças tiveram diagnóstico sorológico, parasitológico e molecular positivos para Trypanosoma cruzi, caracterizando a transmissão congênita, além da transferência gênica horizontal. As reações de polimerização em cadeia (PCR) foram realizadas visando identificar a presença de DNA nuclear (nDNA) e mitocondrial (kDNA) nas amostras estudadas. As amplificações foram realizadas em triplicata com cada par de primers, para confirmação diagnóstica. A amplificação do material nuclear de T. cruzi ocorreu em 92,1% das mães e em 10% das crianças (4/40). Em 70% das crianças e em 92,1% das mães houve amplificação do DNA do cinetoplasto do parasito. A maior parte dos eventos de integração de minicírculos de kDNA ocorreu por meio de elementos móveis, sendo a maioria deles o retrotransposon LINE-1. O maior número de integrações foi observado no cromossomo X.

A Doença de Chagas (DC) foi descrita por Carlos Chagas em 1909. É causada por um parasita T. cruzi, transmitido por triatomíneos, por transfusão de sangue, vertical e por via oral. A DC tem duas fases: aguda e crônica. A evolução para a forma cardíaca ocorre em cerca de 30% dos casos crônicos e é a maior responsável pela mortalidade na doença de Chagas crônica. O objetivo deste trabalho foi estudar a cardiopatia chagásica em pacientes do Tocantins, comparando com outras cardiopatias e pacientes assintomáticos do ponto de vista de exames complementares não invasivos usando energias radiantes, como ecocardiografia e RX e o ECG. Houve uma prevalência de 9,5% de pacientes chagásicos atendidos no ambulatório de cardiologia em Araguaína Tocantins, sendo que 7.3% na forma crônica e 2,21% na forma indeterminada .Dos pacientes crônicos, incluídos no estudo 50% tinham megaesôfago e 4 megacolon (20%). A maioria dos pacientes não apresentou história familiar positiva para DC, nem era tabagista ou etilista. As principais alterações eletrocardiográficas encontradas referem-se à condução. A avaliação do ICT, do chagásico crônico mostrou se aumentada em 40% dos pacientes, 40% apresentam alterações esofágicas e 20% dos pacientes s apresentavam megacolon . O ecocardiograma mostrou-se alterado em 42%). 27% dos pacientes apresentaram FE abaixo de 55% alterada. Alterações da contratilidade segmentar e Assincronia septal foram encontradas em 80% dos chagásicos crônicos. Em 80% dos pacientes foi verificada disfunção diastólica. As alterações valvares ocorreram em 75%. As alterações eletrocardiográficas,ocorreram em 80% dos pacientes com CCC, , enquanto nas outras cardiopatias tinham alterações no ECG. Observou-se que no grupo dos chagásico a diminuição da fração de ejeção esta correlacionada a maior incidência de arritmias alem da disfunção diastólica e relacionada com aumento do atrio esquerdo, ICT tem correlação com a FE e tamanho de VE e AE. Os ECG alterados também guardam relação com as disfunções. / Chagas disease (AD) was described by Carlos Chagas in 1909. It is caused by a parasite T. cruzi, transmitted by bugs, by blood transfusion, vertical and orally. The DC has two phases: acute and chronic. The evolution to the cardiac form occurs in about 30% of chronic cases and is the largest cause of mortality in chronic Chagas disease. The aim of this study was to Chagas\' disease in patients of Tocantins, compared with other heart patients and asymptomatic from the standpoint of non-invasive exams using radiant energies such as echocardiography and ECG and RX .. The descriptive study included 80 patients, 20 chronic form of Chagas disease, 20 indeterminate, 20 with other heart diseases, and 20 controls. There was a prevalence of 9.5% of chagasic patients treated in outpatient cardiology at Araguaina Tocantins, and 7.3% in chronic and 2.21% in the indeterminate. Of the chronic patients in the study 50% had megaesophagus and megacolon 4 (20%). Most patients had no family history of AD, nor was a smoker or drinker. Major electrocardiographic abnormalities found refer to driving. The evaluation of ICT, the chronic chagasic showed that increased by 40% of patients, 40% had esophageal changes and 20% of patients had megacolon s. The echocardiogram was abnormal in 42%). 27% of patients had EF below 55% changed. Changes in segmental contractility and Asynchrony septum were found in 80% of chronic Chagas disease. In 80% of the patients was observed diastolic dysfunction. The valvular changes occurred in 75%. Electrocardiographic abnormalities occurred in 80% of patients with CCC, while the other heart had ECG changes. Arterial hypertension had an incidence of 45% in patients with CCC and 40% in FCI. The systolic and diastolic ventricular dysfunction was more prevalent in groups that had an abnormal ECG and arrtimia.Observou that the group of chagasic decreased ejection fraction is correlated to a higher incidence of arrhythmias besides diastolic dysfunction and related increased atrio-left, ICT correlates with LV size and EF and LA. The abnormal ECG also are related to the dysfunction

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2016-10-13T18:50:52Z No. of bitstreams: 1 2015 - Vitor Sueth Santiago.pdf: 10611307 bytes, checksum: 28bcb538332e756e608d3f04694b22b6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-13T18:50:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015 - Vitor Sueth Santiago.pdf: 10611307 bytes, checksum: 28bcb538332e756e608d3f04694b22b6 (MD5) Previous issue date: 2015-10-16 / CAPES / FAPERJ / CAPES-PROCAD / This work aimed to characterize the trypanocidal activity of curcumin, as well as synthesise a set of structurally-related compounds to investigate the relationships between chemical structure and biological activity (SAR). The isolation of natural curcumin was carried along with two other natural curcuminoides, which together with a third (cyclocurcumin) formed the very first set of derivatives subjected to a screening against epimastigotes forms of T. cruzi (Dm28c strain). This screening pointed out the 1,3-diketone moiety as well as the methoxyl- group in the position 3 of the aromatic ring as potencial pharmacophores. Then, a set of synthetic analogues were prepared based on rational changes on the three structural subunits present in curcumin. These synthetic derivatives were subjected to the same screening, and three of them showed superior trypanocidal activity compared to the natural product. Then, taking the informations obtained from this first screening, the synthesis of constrained analogues were performed which showed an interesting result based on the ring-size of the derivatives. In parallel, a series of 1,3-pyrimidine derivatives were prepared, based on potential bioisosteric relationships between the 1,3-diketone moiety and the 1,3-pyrimidine heterocycle. All the derivatives obtained were tested against T. cruzi, and those shown trypanocidal activity were submited to a cell viability assay, where three of the synthetic derivatives demonstrated selective toxicity against the parasite: (E) ? 2 - (4 ? hydroxy - 3-methoxybenzylidene) ? 6 - ((E) ? 3 - (4 ? hydroxy ? 3 - methoxyphenyl) acryloyl) cyclohexanone; (2E,6E) - 2,6 ? bis (4 ? hydroxy ? 3 -methoxybenzylidene) cyclohexanone and 4,4 '- ((1E,1'E) - (2 ? chloropyrimidine - 4,6 - diyl) bis (ethene - 2,1 - diyl)) bis (2 -methoxyphenol). These derivatives were tested in an assay of infected macrophages, and they prove to be toxic for both parasite forms (trypomastigote and amastigote). The investigation of the probable mechanism of action started with a scanning/transmission electronic microscopy of the curcumin-treated parasites in a sublethal dose. The analysis of ultraestructural changes in parasite treated cells suggested the enzyme CYP51 as well as tubulin as possible targets for curcumin. The HPLC analysis of the membrane lipids of treated parasites showed no difference when compared to non treated control. The flow cytometry analysis showed a characteristic profile similar to those compounds who binds to tubulin and disrupts microtubules. To improve this hypothesis, the T. cruzi tubulin was modelled by homology and the curcuminoids were docked at the literature known curcumin site. The results obtained showed a good correlation between the best-scored poses obtained from the docking study and the experimental IC50 values obtained from the assays of the natural derivatives against parasite cells. / Este trabalho teve como principal objetivo a caracteriza??o da atividade tripanocida da curcumina, bem como a s?ntese diversos derivados estruturalmente an?logos a fim de investigar rela??es entre a estrutura qu?mica e a atividade biol?gica. O isolamento da curcumina da matriz natural foi realizado juntamente com outros dois curcuminoides, que em conjunto com um terceiro (ciclocurcumina) formou o primeiro conjunto de compostos submetido a uma triagem biol?gica sobre formas epimastigotas de T. cruzi (cepa Dm28c). Nesta triagem foi detectado como farmac?foro a subunidade 1,3-dicetona e o grupamento metoxila na posi??o 3 do anel arom?tico. Em seguida, foi sintetizada uma cole??o de derivados com modifica??es em tr?s subunidades estruturais da curcumina, os quais foram submetidos a uma triagem frente ao parasito. Tr?s dos an?logos sint?ticos apresentaram atividade t?xica frente ao parasito de maneira superior ao produto natural. Em seguida, usando informa??es da primeira triagem, procedeu-se para a s?ntese de an?logos estruturalmente restritos, os quais apresentaram um importante resultado acerca dos aspectos conformacionais associados ao tamanho do anel utilizado para a restri??o. Em paralelo foi sintetizada uma s?rie de derivados estruturalmente originais explorando a potencial rela??o bioisost?rica entre a subunidade 1,3-dicetona e o anel pirimid?nico. Ap?s triagem de todos os derivados frente a formas epimastigotas de T. cruzi, foi realizado um ensaio de viabilidade celular onde tr?s derivados sint?ticos demonstraram toxicidade seletiva frente ao parasito nas concentra??es testadas: (E) -2- (4-hidr?xi-3-metoxibenzilideno) ? 6 - ((E) ? 3 - (4 - hidr?xi- 3- -metoxifenil) acriloil) cicloexanona, (2E,6E) -2,6-bis (4 ? hidr?xi ? 3 - metoxibenzilideno) cicloexanona e 2-cloro-4,4'- ((1E,1'E) ? pirimidina - 4,6 - diilbis (eteno - 2,1-diil)) bis (2-metoxifenol). Estes derivados foram utilizados em um modelo de macr?fagos infectados, onde provaram ser t?xicos tanto para formas tripomastigotas quanto para formas amastigotas do parasito. Na investiga??o do prov?vel mecanimo de a??o desta classe de compostos, os parasitos tratados com curcumina foram submetidos ? microscopia eletr?nica, onde foram observadas altera??es ultraestruturais no parasito que sugerem como alvos a CYP51 e a tubulina. O ensaio de quantifica??o dos lip?dios n?o-saponific?veis da membrana celular de T. cruzi sugere que n?o houve inibi??o de CYP51, ao passo que a citometria de fluxo das culturas tratadas mostrou um perfil caracter?stico de subst?ncias que atuam sobre os microt?bulos das c?lulas, se ligando ? tubulina. Foi ent?o constru?da por modelagem molecular um modelo de tubulina de T. cruzi onde os curcuminoides naturais ativos foram ancorados, e as pontua??es do ancoramento foram coerentes com os valores de CI50 encontrados.