Orientador: Edson Rosa Pimentel / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T20:21:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_MarcosdosSantosde_D.pdf: 2549790 bytes, checksum: f7c5cf41c1fe21e8441475d830717187 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Vários estudos indicam que a acupuntura (AC) tem efeito anti-inflamatório (AI) sistêmico e mecanotransdutor local. Estes efeitos podem potencialmente acelerar o processo de cicatrização. Portanto, o objetivo deste estudo foi analisar o efeito de diferentes protocolos de AC nas características bioquímicas, organizacionais e ultraestruturais de tendões de ratos durante o processo de cicatrização. Ratos Wistar machos com 60 dias de idade foram divididos nos seguintes grupos: grupo não tenotomizado ou normal (N), grupo tenotomizado (T), tenotomizado e submetido à AC no ponto E-36 (E36), tenotomizado e submetido à AC no B-57 (B57), tenotomizado e submetido à AC manual no ponto E-36 e B-57 (EB) e tenotomizado e submetido à eletroacupuntura (EA) nos dois pontos citados. Os animais foram submetidos à eutanásia nos dias 7, 14 e 21 após a lesão. Em seguida, os tendões calcâneos foram coletados, processados e analisados para quantificação de proteínas não colagênicas através do método de Bradford. Para a análise organizacional, foi utilizada a quantificação da birrefringência das fibras de colágeno através da microscopia de polarização. Na analise ultraestrutural foram mensurados os diâmetros das fibrilas de colágeno e em seguida foram construídos histogramas de distribuição destes diâmetros assim como foi calculado o diâmetro da massa-média - MAD - das fibrilas de colágeno. Os resultados mostraram que o uso associado dos pontos E-36 e B-57 aumenta tanto a birrefringência das fibras de colágeno nos dias 14 e 21 após a lesão quanto o MAD nos três períodos analisados. A reorganização das fibrilas de colágeno também aumentou no dia 21 após a lesão com a aplicação dos dois pontos citados. No entanto, a aplicação da EA não promoveu aumento da birrefringência ou da reorganização das fibrilas assim como diminuiu o MAD no dia 21 após a lesão. Desta forma, concluímos que o uso da AC manual nos pontos E-36 e B-57 tem efeito no restabelecimento das propriedades estruturais e ultraestruturais do colágeno de tendões durante o processo de cicatrização. Estes resultados sugerem o fortalecimento da estrutura tendínea com consequente aumento da resistência a re-ruptura e o potencial uso da AC em protocolos de reabilitação / Abstract: Several studies indicate that acupuncture (AC) has both local mechanotransductor and systemic anti-inflammatory (AI) effects. These effects could potentially accelerate the healing process. Therefore, the aim of this study was to analyze the effect of different protocols of AC on the biochemical, organizational and ultrastructural aspects of rat tendons during the healing process. Male Wistar rats at 60 days of age were divided into the following groups: not tenotomized or normal group (N), tenotomized group (T), tenotomized and submitted to AC at ST-36 point (ST36), tenotomized and submitted to AC at BL-57 point (BL57), tenotomized and submitted to manual AC at ST-36 and BL-57 points (SB) and tenotomized and submitted to electroacupuncture (EA) on the two points mentioned. The animals were euthanized on 7th, 14th and 21th days after injury. Thereafter, the Achilles tendons were collected, processed and analyzed to quantify non-collagenic proteins using the method of Bradford. For organizational analysis, it was quantified the collagen fibers birefringence by polarizing microscopy. In the ultrastructural analysis were measured the diameters of collagen fibrils and then histograms of distribution of these diameters were built as well as mass-average diameter - MAD - of collagen fibrils was calculated. The results showed that the associated use of ST-36 and BL-57 points increases both the birefringence of collagen fibers at 14th and 21th days and the MAD at the three periods analyzed. The reorganization of collagen fibrils also increased at 21th day with the application of the two points mentioned. However, the application of EA did not increase the birefringence or the reorganization of fibrils as well as decreased the MAD of fibrils at 21th after injury. Thus, we conclude that the use of manual AC at ST-36 and BL-57 points is effective in restoring the structural and ultrastructural properties of the collagen of tendons during the healing process. These results suggest strengthening the tendon structure with consequent increased resistance to re-rupture and the potential use of AC in rehabilitation protocols / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2016-05-25T14:13:04Z No. of bitstreams: 1 Franciane Barbieri Fiorio.pdf: 1211751 bytes, checksum: 1c9c3d2ae4759d7517b8eb73fab2b12a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-25T14:13:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franciane Barbieri Fiorio.pdf: 1211751 bytes, checksum: 1c9c3d2ae4759d7517b8eb73fab2b12a (MD5) Previous issue date: 2014-12-18 / The optimization of time for the healing of a wound is very important, in view of the consequences it may cause, and this optimization becomes even more relevant in individuals with advanced age, where the repair is slower. The objective of this study was to evaluate the effect of low power laser on healing in an experimental model of skin wounds in aged rats. The skin wound was produced on the back using a "punch" 8mm diameter. 45 rats were males, of which 15 young people (± 30 days) and 30 elderly (± 500 days), divided into three groups, control young, control age and treated which underwent skin wound, and the group old treated received low-level laser treatment (30 mW, power density of 1.07 W / cm2), the area 0,028cm2 beam and wavelength λ660nm, active means of InGaAlP. Analyses were conducted to check the effects of laser on the expression of collagen type I and III, MMP-3, MMP-9, TIMP-2 and VEGF by immunohistochemical staining, IL-6 expression by RT-PCR and CINC-1 expression by ELISA. The results show that the laser decreased IL-6 and IL-8, MMP-3 and MMP-9, increased levels of TIMP-2 and VEGF, and favored collagen I and III deposition at the three time points (3, 7 and 14 days). We can conclude that laser therapy with the parameters used was effective in the treatment of skin wounds in aged animals at different stages of the process of tissue repair by modulating the expression of mediators of tissue repair and collagen deposition. / A otimização do tempo para a cicatrização de uma ferida é de suma importância, tendo em vista as sequelas que ela pode ocasionar e, esta otimização se torna ainda mais relevante no indivíduo com idade avançada, onde o reparo é mais lento. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do laser de baixa potência na cicatrização em um modelo experimental de feridas cutâneas em ratos idosos. A ferida cutânea foi produzida no dorso do animal utilizando um "punch" de 8mm de diâmetro. Foram utilizados 45 ratos, machos, dos quais 15 jovens (± 30 dias) e 30 idosos (±500 dias), distribuídos em três grupos experimentais, controle jovem, controle idoso e tratado idoso, que foram submetidos à ferida cutânea, e o grupo idoso tratado recebeu tratamento com laser de baixa potência (30 mW, densidade de potência de 1,07 W/cm2), área do feixe de 0,028cm2 e comprimento de onda de λ660nm, meio ativo de InGaAlP. Foram realizadas análises para verificar os efeitos do laser sobre a expressão de colágeno tipo I e III, MMP-3, MMP-9, TIMP-2 e VEGF através de imunoistoquímica, expressão de IL-6 através de RT-PCR e expressão de CINC-1 através de ELISA. Os resultados mostram que o laser diminuiu os níveis de IL-6 e IL-8, de MMP-3 e MMP-9, aumentou os níveis de TIMP-2 e VEGF e favoreceu a deposição de colágeno I e III nos três tempos experimentais (3, 7 e 14 dias). Podemos concluir que a laserterapia com os parâmetros utilizados foi eficaz no tratamento de feridas cutâneas em animais idosos, em diferentes fases do processo de reparação tecidual, modulando a expressão de mediadores do processo de reparo tecidual e deposição de colágeno.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:04:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leticia Cunha Franco.pdf: 698845 bytes, checksum: a75fb6bf6b52a01cbfd87faf3ef4a052 (MD5) Previous issue date: 2010-05-28 / The larval therapy (LT) is a biotherapy applied for hundreds of years and understands the use of live larvae of flies in the treatment of wounds of various etiologies. The aims of this study were to assess the "acceptance" or "refusal" of larval therapy in wound healing between doctors and nurses from CAIS (Centre for Integral Care of Health) in Goiânia, GO and evaluate the factors affecting "acceptance "or" refusal "of the TL in wound healing, in the body and the bodies of others. This study takes a quantitative, descriptive and analytical study carried out in the period between June and December 2009, on the 14 CAIS, Goiânia, GO. The study population consisted of 209 professionals and of these, 92 nurses and 41 doctors completed the data collection instrument. The questionnaire took over identifying data, socioeconomic, demographic, religious, vocational training and qualification, "acceptance" and "refusal" of the TL and evaluation of factors that could influence the responses "acceptance" and "refusal" of biotherapy. All tests were performed using the software "Statistical Package for Social Sciences (SPSS). The data were explored by frequency, mean, standard deviation, median and interquartile range. The Wilcoxon test was used to compare the characteristics of variables in two different situations, in the body and the body of another person (acceptance or refusal of health professionals). P values <0.05 were considered statistically significant. Among the 133 professionals, 76.7% were female, 58.6% were aged between 23 and 32 years, 63.2% and 76.0% were Catholics from the State of Goiás. Among the professionals, 48.1% (n=64) said they would use maggots to treat wounds in his body and 51.8% (n=69) would use in the wounds of others. The factors that most interfered with the response "acceptance" among professionals, both for use in the same body as the body of others were: wound that does not respond to other treatments, reducing the healing time, rapid and selective debridement and effectiveness against microorganisms (Md=8 to 9; Q1=7 to 8;Q3=10;MIN=0 to 2;MAX=10). As for the answer "refusal", the factors that most interfered with this choice, the two situations were: insufficient knowledge and disgust manipulation (Md=9;Q1=3 to 6;Q3=10;MIN=0;MAX=10). Despite therapy with fly larvae is still poorly understood by physicians and nurses from CAIS, Goiânia, GO, almost half of these professionals agree to use this therapy, a factor that indicates the need for approximation of scientific research to practical reality. / A terapia larval (TL) é uma bioterapia aplicada há centenas de anos e compreende na utilização de larvas vivas de moscas no tratamento de feridas de variadas etiologias. Os objetivos gerais deste estudo foram: avaliar a aceitação ou recusa da terapia larval na cicatrização de feridas entre médicos e enfermeiros dos CAIS (Centro de Atendimento Integral à Saúde) de Goiânia, GO e avaliar os fatores que interferiram na aceitação ou recusa da TL na cicatrização de feridas, no próprio corpo e no corpo de outras pessoas. Trata-se de estudo de natureza quantitativa, descritivo e analítico, realizado no período compreendido entre junho e dezembro de 2009, nos 14 CAIS de Goiânia, GO. A população foi constituída por 209 profissionais e destes, 92 enfermeiros e 41 médicos preencheram o instrumento de coleta de dados. O questionário encampou dados de identificação, socioeconômicos, demográficos, de religiosidade, formação e qualificação profissional, aceitação e recusa da TL e avaliação dos fatores que poderiam influenciar nas respostas aceitação e recusa da bioterapia. Todas as análises foram realizadas utilizando o software Statistical Package for the Social Sciences (SPSS). Os dados foram explorados pela frequência, média, desvio padrão, mediana e intervalo interquartil. O teste de Wilcoxon foi utilizado para comparação das características das variáveis em duas situações distintas, no próprio corpo e no corpo de outra pessoa (aceitação ou recusa dos profissionais de saúde). Valores de p<0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Entre os 133 profissionais, 76,7% eram do sexo feminino; 58,6% tinham idade entre 23 e 32 anos; 63,2% eram católicos e 76,0% procedentes do Estado de Goiás. Entre os profissionais, 48,1% (n=64) disseram que aceitariam utilizar as larvas para tratamento de feridas em seu próprio corpo e 51,8% (n=69) a utilizariam nas feridas de outras pessoas. Os fatores que mais interferiram na resposta aceitação entre os profissionais, tanto para utilização no próprio corpo como no corpo de outras pessoas foram: ferida que não responde a outros tratamentos, redução no tempo de cicatrização, desbridamento rápido e seletivo e eficácia contra microrganismos (Md=8 a 9;Q1=7 a 8;Q3=10;MIN=0 a 2;MAX=10). Quanto à resposta recusa , os fatores que mais interferiram nesta escolha, nas duas situações foram: conhecimento insuficiente e asco à manipulação (Md=9;Q1=3 a 6;Q3=10;MIN=0;MAX=10). Apesar da terapia com larvas de moscas ainda ser pouco conhecida por médicos e enfermeiros dos CAIS de Goiânia, GO, quase metade desses profissionais aceitaria utilizar esta terapêutica, fator que aponta a necessidade de aproximação das pesquisas científicas à realidade prática.

As lesões na pele, quando extensas, representam um grande problema de saúde pública e elevados custos associados aos tratamentos. A laserterapia tem sido aplicada por décadas a fim de acelerar o processo de cicatrização cutânea. Já a matriz de pericárdio porcino apresenta potencial para ser utilizado como curativo biológico, porém o patch tem rápida biodegradação, por isso adicionou-se quitosana. Muitos autores observaram esses tratamentos individualmente, no entanto não há dados concisos sobre a associação dessas terapias. O objetivo desse estudo foi avaliar a resposta clínica, histológica e histomorfométrica da ação fotobiomoduladora do laser no processo de reparação de úlceras cutâneas com o auxílio do curativo de pericárdio porcino revestido com quitosana. A úlcera cutânea foi induzida cirurgicamente em 48 ratos distribuídos em 6 grupos distintos com 8 animais cada, sendo eles: Matriz (curativo de pericárdio porcino); ML (curativo de pericárdio porcino com a aplicação da laserterapia); MQ (curativo de pericárdio porcino revestido com quitosana); MQL (curativo de pericárdio porcino revestido com quitosana com a aplicação da laserterapia); Ctrl (o grupo controle que não recebeu curativo algum) e Laser (o grupo controle que recebeu somente a laserterapia). Nos grupos que receberam imediatamente após o procedimento cirúrgico a radiação laser, com as seguintes características: comprimentos de onda da luz = 660nm, irradiância = 30mW/\'CM POT.2\', e densidade de energia de 30j/\'CM POT.2\'. O registro fotográfico das úlceras foi realizado no 10º dia pós-operatório e para fornecer a área ulcerada foi utilizado o software Image J. Foi realizada uma análise histológica e histomorfométrica (contagem de fibroblastos, células inflamatórias, vasos sanguíneos e colágenos) a partir de biópsias coletadas no 10º dia pós-operatório. Os resultados obtidos foram dados através das médias dos grupos com relação a cada análise, sendo eles: área da lesão (Laser = 0,48 \'CM POT.2\', Matriz = 0,46 \'CM POT.2\', Ctrl = 0,28 \'CM POT.2\', ML = 0,23 \'CM POT.2\', MQ = 0,22 \'CM POT.2\' e MQL = 0,19 \'CM POT.2\'); formação colagênica (Laser = 54,51%, Matriz = 51,75%, Ctrl = 58,84%, ML = 68,77%, MQ = 69,50% e MQL = 71,72%); células inflamatórias (Laser = 126,31, Matriz = 132,40, Ctrl = 101,85, ML = 97,67, MQ = 95,27 e MQL = 94,15); vasos sanguíneos (Laser = 6,83, Matriz = 4,48, Ctrl = 5,37, ML = 7,46, MQ = 5,42 e MQL = 3,98) e fibroblastos (Laser = 55,83, Matriz = 71,31, Ctrl = 78,63, ML = 85,40, MQ = 105,06 e MQL = 108,58). Os dados foram analisados pela análise de variância, com post hoc de Tukey, a fim de comparar os grupos com um nível de significância de 95% (p<0,05). Com base nesses achados, observou-se que houve melhora estatisticamente significante no grupo com curativos de pericárdio porcino revestido com quitosana associado à aplicação da laserterapia (MQL) quando comparado ao controle, mostrando-se mais eficaz no processo cicatricial de úlceras. / Large skin injuries represent a major public health issue, with high costs associated with the treatments. Laser therapy has been used for decades to accelerate the process of skin healing. The porcine pericardium matrix has the potential to be used as a biological dressing, but the patch has rapid biodegradation, so chitosan was added to delay this effect. Many authors have used these treatments individually; however there is no accurate data on the combination of these therapies. The aim of this study was to assess the clinical, histological and histomorphometric photobiomodulation laser action in the repair of skin ulcers associated with porcine pericardium dressing coated with chitosan. The skin ulcer was surgically induced in 48 rats, which were distributed into 6 groups with 8 animals each: Matrix (porcine pericardium dressing), ML (porcine pericardium dressing with laser therapy), MQ (porcine pericardium dressing coated with chitosan), MQL (porcine pericardium with a bandage coated with chitosan and laser therapy), Ctrl (the control group did not receive treatment) and Laser (the control group that received only laser therapy). The laser radiation groups received the treatment immediately after the surgery, with the following characteristics: light wavelength = 660nm, irradiance = 30mW/\'CM POT.2\' and of energy density 30j/\'CM POT.2\'. The photographic record of the ulcers was performed on the 10th postoperative day and to provide the ulcerated area was used the software ImageJ. We performed a histological and histomorphometric (count of fibroblasts, inflammatory cells, blood vessels and collagen) from biopsies also on the 10th postoperatively day. The results were given as means of groups from each analysis, as follows: lesion area (Laser = 0,48 \'CM POT.2\', Matriz = 0,46 \'CM POT.2\', Ctrl = 0,28 \'CM POT.2\', ML = 0,23 \'CM POT.2\', MQ = 0,22 \'CM POT.2\' e MQL = 0,19 \'CM POT.2\'), collagen formation (Laser = 54,51%, Matriz = 51,75%, Ctrl = 58,84%, ML = 68,77%, MQ = 69,50% e MQL = 71,72%), inflammatory cells (Laser = 126,31, Matriz = 132,40, Ctrl = 101,85, ML = 97,67, MQ = 95,27 e MQL = 94,15); blood vessels (Laser = 6,83, Matriz = 4,48, Ctrl = 5,37, ML = 7,46, MQ = 5,42 e MQL = 3,98) and fibroblasts (Laser = 55,83, Matriz = 71,31, Ctrl = 78,63, ML = 85,40, MQ = 105,06 e MQL = 108,58). Data were analyzed by analysis of variance with Tukey\'s post hoc to compare the groups with a significance level of 95% (p<0.05). Based on these findings, we observed that there was a statistically significant improvement in the group with porcine pericardium dressings coated with chitosan associated with the application of laser therapy (MQL) compared to control, displaying more effective in healing ulcers.

Os objetivos deste estudo foram avaliar o efeito da aplicação subcutânea do cloridrato de papaverina no processo de reparação de feridas cirúrgicas abertas no dorso de ratos e avaliar pelos métodos histomorfológico, histomorfométrico e imunoistoquímico eventos biológicos do processo de reparação. Foram realizadas feridas dérmicas padronizadas com punch, 5mm de diâmetro e 2mm de profundidade, no dorso de ratos. Os animais foram divididos em dois grupos conforme o tratamento realizado: no grupo controle, 25 ratos foram tratados através da injeção de cloreto de sódio 0,9% e no grupo teste, 25 ratos foram tratados através da injeção da solução de cloridrato de papaverina a 50mg/mL de cloreto de sódio a 0,9%. Em ambos os grupos foi aplicado subcutâneo (por quadrante da ferida), 0,25mL da solução correspondente aos frascos do grupo teste ou grupo controle totalizando 1 mL da solução. Os 50 espécimes foram processados para as análises macro e microscópica. Para análise do cálculo do edema, foram utilizados 10 ratos (5 animais do grupo teste e 5 animais do grupo controle). Fragmentos de pele padronizados (3cm2) foram removidos da área da ferida e pesados no período de 6 horas. Para análise morfométrica do fechamento da ferida/formação de cicatriz, 10 ratos foram utilizados (5 animais do grupo teste e 5 do grupo controle). As feridas cirúrgicas padronizadas foram fotografadas nos períodos de 0h, 3,7,14 e 21 dias pós-cirúrgico e as imagens foram analisadas por software de morfometria (ImageLab2000®) quanto a área, perímetro e fator de forma. Pela técnica de coloração da hematoxilina e eosina, a análise histomorfológica (análise qualitativa descritiva) e histomorfométrica (análise quantitativa em relação à reepitelização, formação do tecido de granulação, edema, celularidade e matriz colagênica) foram realizadas nos períodos de 6h, 3,7,14 e 21 dias e analisadas sob microscopia de luz. Reações de imunoistoquímica com o anticorpo anti-actina de músculo liso foi realizada para identificação e contagem do número de miofibroblastos nos períodos de 3, 7, 14 e 21 dias. A partir do modelo experimental avaliado, comprovou-se a ação vasodilatadora da papaverina. Os fragmentos padronizados do grupo teste apresentaram maior peso em relação ao grupo controle (p= 0,047). As feridas do grupo teste mostraram um fechamento maior e menor formação de cicatriz quando comparado ao grupo controle no período de 21 dias. No grupo teste, uma maior quantidade de edema (p = 0,028) e uma menor quantidade de matriz colagênica (colágeno) (p = 0,028) foram encontradas no período de 6 horas. Houve maior reepitelização no grupo teste no período de 7 dias e menor formação de tecido de granulação nos períodos de 14 e 21 dias para o mesmo grupo. No grupo controle, um maior número de miofibroblastos foi encontrado quando comparado ao grupo teste nos períodos de 14 e 21 dias (p=0, 016). Dentro dos limites deste estudo, a aplicação subcutânea do cloridrato de papaverina parece acelerar o processo de reparação de feridas cirúrgicas abertas no dorso de ratos. Sua aplicação promove vasodilatação e um maior exsudato inflamatório no início do processo de reparação. Tal efeito parece estar relacionado com a maior velocidade de reparação observada macro e microscopicamente. / The objectives of this study were to evaluate the effect of subcutaneous administration of papaverine hydrochloride in the process of open surgical repair of wounds in the back of rats and evaluate the methods histomorphological, immunohistochemical and histomorphometric biological events of the repair process. Standardized wounds were inflicted by dermal punch, 5mm in diameter and 2mm deep, in the backs of rats. Animals were divided into two groups according to treatment: control group, 25 rats were treated by injection of sodium chloride 0.9%) and test group (25 rats treated by the injection of papaverine hydrochloride 50 mg / mL sodium chloride 0.9%). In both groups was administered subcutaneously (by quadrant of the wound), 0.25 mL of the solution corresponding to bottles of the test group or control group, totaling 1 mL of the solution. The 50 specimens were processed for macro and microscopic analysis. For analysis of the calculation of edema, we used 10 rats (5 animals in the test group and 5 control animals). Standardized skin fragments (3cm2) were removed from the wound area and heavy during the 6 hours. For morphometric analysis of the closure of the wound / scar formation, 10 rats were used (five animals in the test group and 5 in the control group). Surgical wounds were photographed in standardized periods of 0h, 3,7,14 and 21 days after surgery and the images were analyzed by morphometry software (ImageLab2000 ®) as area, perimeter and form factor. By staining with hematoxylin and eosin, the histomorphologic analysis (descriptive qualitative analysis) and histomorphometric (quantitative analysis in relation to reepithelialization, formation of granulation tissue, edema, cellularity and collagen matrix) were recorded at 6h, 3.7 , 14 and 21 days and analyzed under light microscopy. Immunohistochemical reactions with anti-smooth muscle actin was performed to identify and count the number of myofibroblasts at 3, 7, 14 and 21 days. From the experimental model evaluated, proved the vasodilator papaverine. The fragments of the standardized test group had a higher weight in the control group (p = 0.047). The wounds of the test group showed a greater closing and less scarring compared to control group within 21 days. In the test group, a greater amount of edema (p = 0.028) and a smaller amount of collagen matrix (collagen) (p = 0.028) were found within 6 h. A greater reepithelialization in the test group after 7 days and less formation of granulation tissue during periods of 14 and 21 days for the same group. In the control group, a greater number of myofibroblasts was found when compared to the test group during the periods of 14 and 21 days (p = 0, 016). Within the limits of this study, subcutaneous administration of papaverine hydrochloride appears to accelerate the repair of surgical wounds opened in the back of rats. Its application promotes vasodilation and a greater inflammatory exudate in the early repair process. This effect appears to be related to a faster repair observed macroscopically and microscopically.

O estudo avaliou o óleo-resina (OR) proveniente da Copaifera langsdorffii quanto: à citotoxicidade; ao potencial cicatrizante em modelos animais; aos efeitos no modelo ex vivo de cicatrização da pele humana; à atividade antimicrobiana in vitro e in vivo. A citotoxicidade do OR (1, 10, 50, 100, 500 e 1000 µg/mL) foi avaliada em culturas de fibroblastos 3T3 pela determinação da viabilidade e proliferação celular. A atividade cicatrizante foi avaliada em úlceras cutâneas em orelha de coelho, com aplicações tópicas diárias, por 21 dias, do OR in natura e em creme (10 e 25%) e controles [creme base (Cr) e solução fisiológica]; no dorso de ratos, o tratamento consistiu de creme a 10% e os mesmos controles, por 14 dias. As úlceras foram avaliadas por análise de imagem, índices de cicatrização e histologia nos dias 2, 7, 14 e 21. Parâmetros bioquímicos (hidroxiprolina e metaloproteinases) foram incluídos na investigação da cicatrização em ratos. No modelo ex vivo, os fragmentos de pele receberam diariamente: OR in natura, cremes a 10 e 25% e controles (Cr e meio de cultura (DMEM), por 21 dias, e foram avaliados nos dias 0, 1, 3, 7, 14 e 21, por análises clínico-fotográfica e histológica. A atividade antimicrobiana in vitro foi avaliada pela determinação das concentrações inibitória e bactericida mínimas para bactérias Gram-positivas: S. aureus (ATCC 6538), S. pyogenes (ATCC 19615) e Enterococcus faecalis (ATCC 10541) e Gram-negativas: P. aeruginosa (ATCC 2327) e E. coli (ATCC 10538). A atividade antimicrobiana in vivo foi avaliada nas úlceras infectadas com S. aureus ou S. pyogenes em ratos, pela contagem bacteriana no exsudato e biópsias nos dias 2, 7 e 14 após úlceras e inoculação bacteriana além da atividade cicatrizante. O OR não apresentou toxicidade aos fibroblastos até 100 µg/mL, com viabilidade e proliferação de 90 a 100%. Promoveu melhor cicatrização a 10%, nos modelos orelha de coelho e dorso de ratos, enquanto, in natura ocasionou agressão tecidual. O modelo ex vivo manteve-se viável por 21 dias; a 10% o OR inibiu a reepitelização das úlceras, diferente do controle (DMEM), evidenciando que sua atividade cicatrizante é dependente do processo inflamatório, ausente neste modelo. Apresentou atividade antimicrobiana in vitro (S. aureus, S. pyogenes e E. faecalis), a qual se manteve in vivo observada pelo estímulo cicatrizante do OR a 10% em creme nas úlceras infectadas com S. aureus ou S. pyogenes em ratos. Os resultados evidenciaram que o OR da C. langsdorffii não foi citotóxico, apresentou atividade antimicrobiana in vitro e in vivo, além de importante atividade cicatrizante dependente, essencialmente da fase inflamatória, demonstrada nos modelos animais e ausente no modelo ex vivo, contribuindo para o conhecimento quanto ao seu mecanismo de ação, eficácia e segurança para o uso clínico na cicatrização de úlceras cutâneas. / The study evaluated oleoresin (OR) obtained from Copaifera langsdorffii regarding its: cytotoxicity; wound healing potential in animal models; effects on the ex vivo model of human skin healing; and antimicrobial activity in vitro and in vivo. The cytotoxic effect of OR (1, 10, 50, 100, 500 and 1000 µg/ mL) was assessed on 3T3 fibroblasts by viability and proliferation assays. The wound healing activity was performed in a rabbit ear model, with daily topical treatment, over 21 days: in natura OR, and at 10 and 25% cream, and controls [base cream (Cr) and saline]; in dorsal wounds in rats, the treatment consisted of daily topical application of 10% OR cream and the same controls, over 14 days. The wounds were assessed by image analysis, wound healing rates and histology on days 2, 7 and 14. Biochemical tests (hydroxyproline and metalloproteinases) were included for the healing investigation in rats. In the ex vivo model, skin fragments received daily: in natura OR, 10 and 25% creams, and controls (Cr and culture medium (DMEM), for 21 days, and on days 0, 1, 3, 7, 14 and 21, fragments were analyzed by photographical and histological analyses. The in vitro antimicrobial activity was assessed by the minimal inhibitory and bactericidal concentrations assays, on Gram-positive: S. aureus (ATCC 6538), S. pyogenes (ATCC 19615) and Enterococcus faecalis (ATCC 10541) and Gram-negative: P. aeruginosa (ATCC 2327) and E. coli (ATCC 10538). The in vivo antimicrobial activity was assessed in wounds infected either with S. aureus or S. pyogenes, by bacterial count in the exudates and biopsies on days 2, 7 and 14 after wounding and bacterial inoculation, along with the healing activity. OR was not cytotoxic to fibroblasts up to 100 µg/mL, showing 90 to 100% cell viability and proliferation. OR 10% cream enhanced healing in rabbits and in rats, however, in natura it caused aggression to the tissue. The ex vivo model was viable for 21 days; at 10% OR inhibited wound reepithelialization, different from the control (DMEM), showing evidence that healing properties of OR depend on the inflammatory phase, absent in this model. OR showed in vitro antimicrobial activity (S. aureus, S. pyogenes and E. faecalis), which was maintained in vivo, observed by a healing stimulus of 10% OR cream in wounds infected with S. aureus or S. pyogenes, in rats. The results showed that OR from C. langsdorffii showed no cytotoxicity, and presented in vitro and in vivo antimicrobial activity. It also enhanced healing, depending, essentially, on the inflammatory phase, demonstrated by the animal models of injury and repair and absent in the ex vivo model. These findings contribute to an understanding of the OR mechanism of action, efficacy and safety for clinical use in wound healing.

Os objetivos deste estudo foram avaliar o efeito da aplicação subcutânea do cloridrato de papaverina no processo de reparação de feridas cirúrgicas abertas no dorso de ratos e avaliar pelos métodos histomorfológico, histomorfométrico e imunoistoquímico eventos biológicos do processo de reparação. Foram realizadas feridas dérmicas padronizadas com punch, 5mm de diâmetro e 2mm de profundidade, no dorso de ratos. Os animais foram divididos em dois grupos conforme o tratamento realizado: no grupo controle, 25 ratos foram tratados através da injeção de cloreto de sódio 0,9% e no grupo teste, 25 ratos foram tratados através da injeção da solução de cloridrato de papaverina a 50mg/mL de cloreto de sódio a 0,9%. Em ambos os grupos foi aplicado subcutâneo (por quadrante da ferida), 0,25mL da solução correspondente aos frascos do grupo teste ou grupo controle totalizando 1 mL da solução. Os 50 espécimes foram processados para as análises macro e microscópica. Para análise do cálculo do edema, foram utilizados 10 ratos (5 animais do grupo teste e 5 animais do grupo controle). Fragmentos de pele padronizados (3cm2) foram removidos da área da ferida e pesados no período de 6 horas. Para análise morfométrica do fechamento da ferida/formação de cicatriz, 10 ratos foram utilizados (5 animais do grupo teste e 5 do grupo controle). As feridas cirúrgicas padronizadas foram fotografadas nos períodos de 0h, 3,7,14 e 21 dias pós-cirúrgico e as imagens foram analisadas por software de morfometria (ImageLab2000®) quanto a área, perímetro e fator de forma. Pela técnica de coloração da hematoxilina e eosina, a análise histomorfológica (análise qualitativa descritiva) e histomorfométrica (análise quantitativa em relação à reepitelização, formação do tecido de granulação, edema, celularidade e matriz colagênica) foram realizadas nos períodos de 6h, 3,7,14 e 21 dias e analisadas sob microscopia de luz. Reações de imunoistoquímica com o anticorpo anti-actina de músculo liso foi realizada para identificação e contagem do número de miofibroblastos nos períodos de 3, 7, 14 e 21 dias. A partir do modelo experimental avaliado, comprovou-se a ação vasodilatadora da papaverina. Os fragmentos padronizados do grupo teste apresentaram maior peso em relação ao grupo controle (p= 0,047). As feridas do grupo teste mostraram um fechamento maior e menor formação de cicatriz quando comparado ao grupo controle no período de 21 dias. No grupo teste, uma maior quantidade de edema (p = 0,028) e uma menor quantidade de matriz colagênica (colágeno) (p = 0,028) foram encontradas no período de 6 horas. Houve maior reepitelização no grupo teste no período de 7 dias e menor formação de tecido de granulação nos períodos de 14 e 21 dias para o mesmo grupo. No grupo controle, um maior número de miofibroblastos foi encontrado quando comparado ao grupo teste nos períodos de 14 e 21 dias (p=0, 016). Dentro dos limites deste estudo, a aplicação subcutânea do cloridrato de papaverina parece acelerar o processo de reparação de feridas cirúrgicas abertas no dorso de ratos. Sua aplicação promove vasodilatação e um maior exsudato inflamatório no início do processo de reparação. Tal efeito parece estar relacionado com a maior velocidade de reparação observada macro e microscopicamente. / The objectives of this study were to evaluate the effect of subcutaneous administration of papaverine hydrochloride in the process of open surgical repair of wounds in the back of rats and evaluate the methods histomorphological, immunohistochemical and histomorphometric biological events of the repair process. Standardized wounds were inflicted by dermal punch, 5mm in diameter and 2mm deep, in the backs of rats. Animals were divided into two groups according to treatment: control group, 25 rats were treated by injection of sodium chloride 0.9%) and test group (25 rats treated by the injection of papaverine hydrochloride 50 mg / mL sodium chloride 0.9%). In both groups was administered subcutaneously (by quadrant of the wound), 0.25 mL of the solution corresponding to bottles of the test group or control group, totaling 1 mL of the solution. The 50 specimens were processed for macro and microscopic analysis. For analysis of the calculation of edema, we used 10 rats (5 animals in the test group and 5 control animals). Standardized skin fragments (3cm2) were removed from the wound area and heavy during the 6 hours. For morphometric analysis of the closure of the wound / scar formation, 10 rats were used (five animals in the test group and 5 in the control group). Surgical wounds were photographed in standardized periods of 0h, 3,7,14 and 21 days after surgery and the images were analyzed by morphometry software (ImageLab2000 ®) as area, perimeter and form factor. By staining with hematoxylin and eosin, the histomorphologic analysis (descriptive qualitative analysis) and histomorphometric (quantitative analysis in relation to reepithelialization, formation of granulation tissue, edema, cellularity and collagen matrix) were recorded at 6h, 3.7 , 14 and 21 days and analyzed under light microscopy. Immunohistochemical reactions with anti-smooth muscle actin was performed to identify and count the number of myofibroblasts at 3, 7, 14 and 21 days. From the experimental model evaluated, proved the vasodilator papaverine. The fragments of the standardized test group had a higher weight in the control group (p = 0.047). The wounds of the test group showed a greater closing and less scarring compared to control group within 21 days. In the test group, a greater amount of edema (p = 0.028) and a smaller amount of collagen matrix (collagen) (p = 0.028) were found within 6 h. A greater reepithelialization in the test group after 7 days and less formation of granulation tissue during periods of 14 and 21 days for the same group. In the control group, a greater number of myofibroblasts was found when compared to the test group during the periods of 14 and 21 days (p = 0, 016). Within the limits of this study, subcutaneous administration of papaverine hydrochloride appears to accelerate the repair of surgical wounds opened in the back of rats. Its application promotes vasodilation and a greater inflammatory exudate in the early repair process. This effect appears to be related to a faster repair observed macroscopically and microscopically.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Numerosos modelos in vitro e in vivo foram desenvolvidos para estudar o reparo de lesões e identificar os mecanismos chave deste processo. Visando avaliar o processo de cicatrização utilizamos um modelo de lesão excisional total e um modelo de queimadura promovida por escaldamento. No estudo utilizando o modelo de lesão excisional total, abordamos o uso da aspirina (um inibidor não seletivo da COX) e seu efeito diferenciado sobre os sexos na cicatrização cutânea de camundongos. Observamos que os grupos fêmea controle e tratado apresentaram contração atrasada comparado aos grupos macho controle e tratado, respectivamente. Entre os grupos fêmea e macho controles, as fêmeas apresentaram menor atividade da mieloperoxidase e menor quantidade de células MIF-positivas do que os machos controle. Já entre os grupos fêmea e macho tratados, foi observado que nas fêmeas tratadas, a atividade da mieloperoxidase e a quantidade de macrófagos F4/80-positivos estavam maiores do que no grupo macho tratado. Ainda entre os grupos tratados, as fêmeas apresentaram menores níveis de hidroxiprolina e maior expressão proteica de vWF e VEGF comparado aos machos. No estudo das lesões causadas por queimadura, avaliamos as propriedades anti- inflamatórias e antioxidantes do ácido cafeico fenetil ester (CAPE) no reparo destas lesões e observamos que em 7, 14, 21 e 70 dias após a queimadura, o grupo queimado+CAPE apresentou menor área lesada, além de menor atividade da mieloperoxidase e dos níveis de nitrito do que o grupo queimado. Também foi observado que no grupo queimado+CAPE a expressão proteica de CD68 e de PECAM-1 estava reduzida comparada ao grupo queimado. Analisando os parâmetros de dano oxidativo foi observado que os níveis de MDA e de proteínas carboniladas estavam menores no grupo queimado+CAPE do que no grupo queimado, tanto no plasma quanto na lesão. Em suma, nosso estudo avaliou o processo de cicatrização de dois modelos de lesão, em roedores de diferentes espécies e em abordagens distintas. No modelo de lesão excisional total em camundongos observamos que a administração da aspirina prejudicou o processo de cicatrização em camundongos Balb/c fêmeas, mas não afetou esse processo nos machos da mesma linhagem, o que pode ser explicado pela redução dos níveis de estrógenos nas fêmeas. A utilização do CAPE na cicatrização de queimaduras em ratas comprovou sua eficácia anti-inflamatória e antioxidante devido ao grupo queimado+CAPE ter apresentado maior taxa de cicatrização, redução da resposta inflamatória, além da redução do dano oxidativo em lipídeos e proteínas comparado ao grupo queimado. / Several in vitro and in vivo models have been developed to study wound healing and to identify key mechanisms of this process. The most of these studies use animals models to reproduce the human physiology and possible therapeutic treatments. In order to evaluate the wound healing process in different wound models, we use a full-thickness excisional wound model and a burn model promoted by scalding. In the full-thickness excisional wound study, we approach the aspirin use (COX non-selective inhibitor) and its distinct effect on the gender in cutaneous wound healing on mice. It was observed that both female control and treated groups presented smaller wound area than male control and treated groups, respectively. Between female and male control groups, the females presented smaller myeloperoxidase activity and MIF-positive cells than control males. Comparing female and male treated groups it was observed that in female treated group, the myeloperoxidase activity and the F4/80-positive macrophages amount were greater than male treated group. Also between the treated groups, the females presented smaller hydroxyproline levels and greater vWF and VEGF protein expression compared to the males. In study of the burns performed by scalding, it was evaluated the caffeic acid phenethyl ester (CAPE) anti-inflammatory and antioxidant properties on repair of these lesions. It was observed that at 7, 14, 21 and 70 days after burning, the burn+CAPE group presented smaller wound area, beyond smaller myeloperoxidase activity and nitrite levels than burn group. It was also observed that the burn+CAPE group presented smaller CD68 and PECAM-1 protein expression compared to burn group. Analyzing the oxidative damage parameters, it was observed that the MDA and carbonilated proteins levels were greater in the burn group compared to burn+CAPE group. In conclusion, our study evaluated the wound healing process in 2 wound models on distinct rodent species with distinct approaches. In mice full-thickness wound model, under gender and aspirin action influence, it was seen that the aspirin administration impaired the wound healing process on Balb/c female mice, but did not alter the wound repair on males of the same lineage, what can be explained by reduction of the estrogen levels in these females. The CAPE use on rat burning healing demonstrated its anti-inflammatory and antioxidant efficiency because the burn+CAPE group presented greater burning healing, smaller inflammatory response, beyond smaller oxidative damage at lipid and protein level compared to burn group

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T20:21:53Z : No. of bitstreams: 1 silva_jl_dr_araca.pdf: 803850 bytes, checksum: a13420fee8c9eac95ae85dcbb9659489 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A película radiográfica é uma tecnologia que os cirurgiões-dentistas estão mais familiarizados estando confortáveis em termos da técnica e da interpretação. A radiografia digital é um avanço que está sendo adotado lentamente pelo cirugião-dentista, oferecendo algumas vantagens distintas sobre a película. O propósito deste estudo é comparar o sistema radiográfico digital Digora com a digitalização da radiografia convencional, avaliando a densidade radiográfica do processo de reparo alveolar na região de molares inferiores inclusos após exodontia em humanos. Os princípios e técnica para a exodontia foram padronizados assim como para a obtenção das imagens radiográficas. Imagem sugestiva de tecido ósseo mineralizado foi observada nos períodos de 60 e 90 dias, comparando os sistemas digital e convencional digitalizado. A estatística sugere perda nos valores da densidade, nos períodos estudados, para o sistema das radiografias convencionais digitalizadas em relação ao sistema Digora. Os resultados obtidos permitem concluir que a qualidade da imagem convencional digitalizada é menos precisa quando comparada a digital, para o acompanhamento do reparo ósseo pós-operatório. / Conventional radiographic film It is a technology that the surgeon-dentists more are made familiar being comfortable to in terms of the technique and the interpretation. The digital x-ray is an advance that is being adopted slowly for the dentistry. The digital image incorporates computer science in the captation, the exposition, the distinction, and the storage of the direct radiographic images. The digital image offers some distinct advantages on the film, but as all the emergent technology presents new different challenges and so that the users surpass them. The intention of this study was to evaluate through the radiograpic examination for the Digora system the radiographic density of the behavior of the fabric bone during the process of repair in the region of molar enclosed inferiors after exodontia in human beings. Standardized procedures had been used for the surgery of the patients as well as for the attainment of the radiographic images. Bone suggestive fabric image mineralized was observed in the periods of 60 and 90 days comparing the conventional and digital method. The gotten results allow to conclude that the quality of the digital conventional image is lower efficient than the digital one gotten directly for the accompaniment of the postoperative bone repair.

As lesões na pele, quando extensas, representam um grande problema de saúde pública e elevados custos associados aos tratamentos. A laserterapia tem sido aplicada por décadas a fim de acelerar o processo de cicatrização cutânea. Já a matriz de pericárdio porcino apresenta potencial para ser utilizado como curativo biológico, porém o patch tem rápida biodegradação, por isso adicionou-se quitosana. Muitos autores observaram esses tratamentos individualmente, no entanto não há dados concisos sobre a associação dessas terapias. O objetivo desse estudo foi avaliar a resposta clínica, histológica e histomorfométrica da ação fotobiomoduladora do laser no processo de reparação de úlceras cutâneas com o auxílio do curativo de pericárdio porcino revestido com quitosana. A úlcera cutânea foi induzida cirurgicamente em 48 ratos distribuídos em 6 grupos distintos com 8 animais cada, sendo eles: Matriz (curativo de pericárdio porcino); ML (curativo de pericárdio porcino com a aplicação da laserterapia); MQ (curativo de pericárdio porcino revestido com quitosana); MQL (curativo de pericárdio porcino revestido com quitosana com a aplicação da laserterapia); Ctrl (o grupo controle que não recebeu curativo algum) e Laser (o grupo controle que recebeu somente a laserterapia). Nos grupos que receberam imediatamente após o procedimento cirúrgico a radiação laser, com as seguintes características: comprimentos de onda da luz = 660nm, irradiância = 30mW/\'CM POT.2\', e densidade de energia de 30j/\'CM POT.2\'. O registro fotográfico das úlceras foi realizado no 10º dia pós-operatório e para fornecer a área ulcerada foi utilizado o software Image J. Foi realizada uma análise histológica e histomorfométrica (contagem de fibroblastos, células inflamatórias, vasos sanguíneos e colágenos) a partir de biópsias coletadas no 10º dia pós-operatório. Os resultados obtidos foram dados através das médias dos grupos com relação a cada análise, sendo eles: área da lesão (Laser = 0,48 \'CM POT.2\', Matriz = 0,46 \'CM POT.2\', Ctrl = 0,28 \'CM POT.2\', ML = 0,23 \'CM POT.2\', MQ = 0,22 \'CM POT.2\' e MQL = 0,19 \'CM POT.2\'); formação colagênica (Laser = 54,51%, Matriz = 51,75%, Ctrl = 58,84%, ML = 68,77%, MQ = 69,50% e MQL = 71,72%); células inflamatórias (Laser = 126,31, Matriz = 132,40, Ctrl = 101,85, ML = 97,67, MQ = 95,27 e MQL = 94,15); vasos sanguíneos (Laser = 6,83, Matriz = 4,48, Ctrl = 5,37, ML = 7,46, MQ = 5,42 e MQL = 3,98) e fibroblastos (Laser = 55,83, Matriz = 71,31, Ctrl = 78,63, ML = 85,40, MQ = 105,06 e MQL = 108,58). Os dados foram analisados pela análise de variância, com post hoc de Tukey, a fim de comparar os grupos com um nível de significância de 95% (p<0,05). Com base nesses achados, observou-se que houve melhora estatisticamente significante no grupo com curativos de pericárdio porcino revestido com quitosana associado à aplicação da laserterapia (MQL) quando comparado ao controle, mostrando-se mais eficaz no processo cicatricial de úlceras. / Large skin injuries represent a major public health issue, with high costs associated with the treatments. Laser therapy has been used for decades to accelerate the process of skin healing. The porcine pericardium matrix has the potential to be used as a biological dressing, but the patch has rapid biodegradation, so chitosan was added to delay this effect. Many authors have used these treatments individually; however there is no accurate data on the combination of these therapies. The aim of this study was to assess the clinical, histological and histomorphometric photobiomodulation laser action in the repair of skin ulcers associated with porcine pericardium dressing coated with chitosan. The skin ulcer was surgically induced in 48 rats, which were distributed into 6 groups with 8 animals each: Matrix (porcine pericardium dressing), ML (porcine pericardium dressing with laser therapy), MQ (porcine pericardium dressing coated with chitosan), MQL (porcine pericardium with a bandage coated with chitosan and laser therapy), Ctrl (the control group did not receive treatment) and Laser (the control group that received only laser therapy). The laser radiation groups received the treatment immediately after the surgery, with the following characteristics: light wavelength = 660nm, irradiance = 30mW/\'CM POT.2\' and of energy density 30j/\'CM POT.2\'. The photographic record of the ulcers was performed on the 10th postoperative day and to provide the ulcerated area was used the software ImageJ. We performed a histological and histomorphometric (count of fibroblasts, inflammatory cells, blood vessels and collagen) from biopsies also on the 10th postoperatively day. The results were given as means of groups from each analysis, as follows: lesion area (Laser = 0,48 \'CM POT.2\', Matriz = 0,46 \'CM POT.2\', Ctrl = 0,28 \'CM POT.2\', ML = 0,23 \'CM POT.2\', MQ = 0,22 \'CM POT.2\' e MQL = 0,19 \'CM POT.2\'), collagen formation (Laser = 54,51%, Matriz = 51,75%, Ctrl = 58,84%, ML = 68,77%, MQ = 69,50% e MQL = 71,72%), inflammatory cells (Laser = 126,31, Matriz = 132,40, Ctrl = 101,85, ML = 97,67, MQ = 95,27 e MQL = 94,15); blood vessels (Laser = 6,83, Matriz = 4,48, Ctrl = 5,37, ML = 7,46, MQ = 5,42 e MQL = 3,98) and fibroblasts (Laser = 55,83, Matriz = 71,31, Ctrl = 78,63, ML = 85,40, MQ = 105,06 e MQL = 108,58). Data were analyzed by analysis of variance with Tukey\'s post hoc to compare the groups with a significance level of 95% (p<0.05). Based on these findings, we observed that there was a statistically significant improvement in the group with porcine pericardium dressings coated with chitosan associated with the application of laser therapy (MQL) compared to control, displaying more effective in healing ulcers.