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Estudo dos efeitos biológicos de uma desintegrina recombinante do veneno da serpente Bothrops alternatus, DisBa-01, sobre a musculatura da parede abdominal após indução de hérnia incisional em ratos

Oliveira, Claudio Ricardo de 29 April 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2443.pdf: 1570096 bytes, checksum: 27db268f8c997a54559bd609fc4ac9ce (MD5) Previous issue date: 2009-04-29 / INTRODUCTION: The incisional hernia (IH) is one of the most frequent complications after laparotomy, causing high rates of re-operations. Advances in suture material, in the guidelines for incisions, in the techniques of closure and use of dentures (screens), have failed in the elimination of this surgical complication. In this context, advances in the understanding of biological and structural changes of collagen may offer a new strategy in the treatment of IH, since the matrix disorders that induces the formation of primary hernia probably also affect the wound healing in laparotomies. OBJECTIVE: To investigate the effect of a recombinant desintegrin (DisBa-01) on the abdominal muscle healing process with incisional hernia (IH) regarding the fibroblasts and vessels proliferation and matrix metalopeptidase activity as well. The role of &#945;2 and anti- &#945;v&#946;3 integrins were investigated by antibody competition. METHODS: IH was induced by sectioning of the midline in 20 Wistar rats, divided into two groups: control that received the topical application of phosphate buffered saline (PBS) and DisBa-01 protein (0.5mg/Kg) dissolved in PBS. Another 10 rats were divided in two groups: one received anti-&#945;V&#946;3 antibodies and the second anti-&#945;2 subunit antibodies. At the end of 14 days, the animals were sacrificed and muscle fragments were stored in liquid nitrogen for determination of MMPs by zymography. The remaining fragments of the control and DisBa-01 groups were fixed in 10% formol in PBS (v/v). Blood vessels density, mononuclear cells, fibroblasts and collagen fibers were studied by optical microscopy in blue reticuline and Masson-trichrome. Data was analyzed by parametric tests were applied with critical level of 5%. RESULTS: All animals after surgical induction developed IH. However, after 14 days the persistence of the opened hernial ring in the controls but not in the DisBa-01 group. This protein induced the formation of a membrane that occluded the entire hernial ring. A significant increase in the number of mononuclear cells, fibroblasts, new vessels and MMP-2 activity was observed in DisBa-01 group (p<0.05). DisBa-01 group significant increased the collagen content. Anti-&#945;V&#946;3 integrin antibodies produced similar results but not anti-&#945;2 integrin blocking antibodies. CONCLUSION: These results indicate that DisBa-01 promoted vascular and fibroblastic cell proliferation and monocytic, and matrix remodeling. In addition, these results strongly indicate that &#945;V&#946;3 integrin has an important role in the control of would healing and the blocking of this integrin may be an interesting therapeutical strategy in tissue repair conditions, including IH. / INTRODUÇÃO: a hérnia incisional (HI) é uma das complicações mais freqüentes após laparotomia, causando altos índices de re-operações. Avanços nos materiais de suturas, nas orientações de incisões, nas técnicas de fechamento e do uso de próteses (telas), têm falhado para a eliminação desta complicação cirúrgica. Neste contexto, avanços no entendimento das alterações biológicas e estruturais do colágeno podem oferecer uma nova estratégia no tratamento da HI, uma vez que as desordens da matriz que induz a formação da hérnia primária provavelmente também prejudicam a cicatrização da ferida operatória nas laparotomias. OBJETIVO: Investigar os efeitos da desintegrina recombinante DisBa-01, sobre o processo de cicatrização da musculatura da parede abdominal com hérnia incisional (HI) com relação a proliferação de fibroblastos, vasos e a atividade das metalopeptidases de matriz. A função das integrinas anti-subunidade &#945;2 e anti- &#945;V&#946;3 foram investigadas pelo bloqueio de anticorpos. MÉTODOS: Foi induzida a HI por secção da linha alba em 20 ratos Wistar, distribuídos em dois grupos: controle que recebeu a aplicação tópica de solução salina tamponada com fosfato (PBS), e DisBa-01 (0,5mg/Kg) dissolvida em PBS. Outros 10 ratos foram divididos em dois grupos: um recebeu anti-&#945;V&#946;3 e outro anti-subunidade &#945;2. Ao final, de 14 dias, os animais foram sacrificados e fragmentos do músculo dos 04 grupos foram armazenados em nitrogênio liquido para determinação de MMPs por zimografia. O restante dos fragmentos dos grupos controle e DisBa-01, foram fixados em formol a 10% em PBS (v/v). A densidade de vasos sangüíneos, células mononucleares, fibroblastos e de fibras colágenas foram estudadas por microscopia óptica em reticulina e Tricromo de Masson. Para analise dos dados foram aplicados testes paramétricos com nível critico de 5%. RESULTADOS: Todos os animais após indução cirúrgica desenvolveram HI. Entretanto, após 14 dias nos animais do grupo Controle houve persistência do anel herniário aberto e nos animais do grupo DisBa-01 foi observado a formação de membrana que ocluía todo o anel herniário. Foi observado aumento significativo das células mononucleares, fibroblastos, neovascularização e da atividade da MMP-2 no grupo DisBa-01 (p<0,05). Houve aumento significativo da colagenização no grupo DisBa-01 em comparação ao controle. O grupo anti-&#945;V&#946;3 produziu resultados similares a proteína DisBa-01 mas não no grupo bloqueado anti-subunidade &#945;2. CONCLUSÃO: Estes resultados indicam que a DisBa-01 promoveu proliferação vascular, celular fibroblástica e monocítica, e remodelamento da MEC. Adicionalmente, estes resultados fortemente indicam que a integrina &#945;V&#946;3 tem importante função no controle da ferida cirúrgica e o bloqueio desta integrina pode ser uma interessante estratégia terapêutica nas condições de reparo tecidual, incluindo a HI.
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Influência de três hemostáticos tópicos no processo de reparo em feridas de extração dental: análise histológica e histométrica em ratos

Almeida Júnior, Paulo [UNESP] 17 December 2004 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-12-17Bitstream added on 2014-06-13T20:50:50Z : No. of bitstreams: 1 almeidajunior_p_me_araca.pdf: 2659878 bytes, checksum: 7b05cfcaf4408ab253ef351ae3eb5826 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A hemorragia após extração dental constitui-se em uma das complicações mais freqüentes na prática da cirurgia oral. Devido à dificuldade para se exercer manobras como pinçamentos e ligaduras de vasos neste tipo de hemorragias, existe a possibilidade do preenchimento do alvéolo com materiais hemostáticos de ação tópica. O propósito deste estudo foi analisar a influência de três hemostáticos tópicos (Hemostop®, Pro Tape® e ViscoStat®) na cronologia do processo de reparo em feridas de extração dental por meio de uma análise histológica e histométrica. Para tanto foram utilizados 60 ratos (Wistar) machos divididos em quatro grupos de 15 animais cada. Todos os animais foram submetidos à extração do incisivo central superior direito, seguido ou não da colocação de agente hemostático entre o terço médio e apical do alvéolo dental, e posterior sutura com fio reabsorvível. Em grupos de cinco, os animais foram sacrificados aos 7, 14 e 28 dias pós-operatórios por inalação excessiva de éter sulfúrico. Suas maxilas foram separadas, fixadas em formalina, descalcificadas em EDTA e incluídas em parafina. Foram realizados cortes de 6 æm de espessura e corados com Hematoxilina e Eosina, e Tricrômio de Masson. Após a análise histológica, em microscópio óptico; e histometria óssea, com o software ImageLab, os resultados foram submetidos ao teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis. Pela metodologia aplicada foi possível concluir que: 1) houve atraso na cronologia do processo de reparo alveolar em todos os grupos tratados; 2) os materiais analisados provocaram intensa reação inflamatória no tecido adjacente; 3) em todos os períodos estudados (7, 14 e 28 dias), a análise histométrica revelou maior neoformação óssea nos animais do grupo 1 (controle). No entanto, a análise estatística constatou diferença significante (p<0,05) somente no 70 dia,... / The hemorrhage after dental extraction is one of the most frequent complications in practice of the oral surgery. Due to the difficulty to exercise maneuvers as arrestty and ligature of blood vessel in this type of hemorrhages, exists the possibility of the filling of the alveolus with hemostatics materials of topical action. The purpose of this study was to analyze the influence of three topical hemostatics (Hemostop®, Pro Tape® and ViscoStat®) in the chronology of the repair process in wounds of dental extraction through a histologic and histometric analysis. For such, 60 male's rats (Wistar) were used divided in four groups of 15 animals each. All the animals were submitted to the extraction of the right superior central incisor, followed or not of the placement of hemostatics agent among the medium and apical third of the dental alveolus, and subsequent suture with reabsorble filament. In groups of five, the animals were sacrificed to the 7, 14 and 28 postoperative days by excessive inhalation of sulfuric ether. Your maxillaries were separate, fixed in formalin solution, decalcified in EDTA and included in paraffin. Cuts of 6 æm of thickness were accomplished and stained with hematoxylin and eosin, and Masson's trichromic. After the histologic analysis, in optical microscope; and histometric bony, with the software ImageLab, the results were submitted to the no-parametric test of Kruskal-Wallis. For the applied methodology it was possible conclude that: 1) there was delay in the chronology of the alveolar repair process in all the treated groups; 2) the analyzed materials instigated a intense inflammatory reaction in the adjacent tissue; 3) in all the studied periods (7, 14 and 28 days), the histometric analysis revealed larger bony neoformation in the animals of the group 1 (control group)...(Complete abstract click electronic access below)
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Avaliação da aspirina e do ácido cafeico fenetil estersobre o reparo tecidual cutâneo / Evaluation of aspirin and caffeic acid phenethyl ester on cutaneous wond healing

Jeanine Salles dos Santos 23 July 2012 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Numerosos modelos in vitro e in vivo foram desenvolvidos para estudar o reparo de lesões e identificar os mecanismos chave deste processo. Visando avaliar o processo de cicatrização utilizamos um modelo de lesão excisional total e um modelo de queimadura promovida por escaldamento. No estudo utilizando o modelo de lesão excisional total, abordamos o uso da aspirina (um inibidor não seletivo da COX) e seu efeito diferenciado sobre os sexos na cicatrização cutânea de camundongos. Observamos que os grupos fêmea controle e tratado apresentaram contração atrasada comparado aos grupos macho controle e tratado, respectivamente. Entre os grupos fêmea e macho controles, as fêmeas apresentaram menor atividade da mieloperoxidase e menor quantidade de células MIF-positivas do que os machos controle. Já entre os grupos fêmea e macho tratados, foi observado que nas fêmeas tratadas, a atividade da mieloperoxidase e a quantidade de macrófagos F4/80-positivos estavam maiores do que no grupo macho tratado. Ainda entre os grupos tratados, as fêmeas apresentaram menores níveis de hidroxiprolina e maior expressão proteica de vWF e VEGF comparado aos machos. No estudo das lesões causadas por queimadura, avaliamos as propriedades anti- inflamatórias e antioxidantes do ácido cafeico fenetil ester (CAPE) no reparo destas lesões e observamos que em 7, 14, 21 e 70 dias após a queimadura, o grupo queimado+CAPE apresentou menor área lesada, além de menor atividade da mieloperoxidase e dos níveis de nitrito do que o grupo queimado. Também foi observado que no grupo queimado+CAPE a expressão proteica de CD68 e de PECAM-1 estava reduzida comparada ao grupo queimado. Analisando os parâmetros de dano oxidativo foi observado que os níveis de MDA e de proteínas carboniladas estavam menores no grupo queimado+CAPE do que no grupo queimado, tanto no plasma quanto na lesão. Em suma, nosso estudo avaliou o processo de cicatrização de dois modelos de lesão, em roedores de diferentes espécies e em abordagens distintas. No modelo de lesão excisional total em camundongos observamos que a administração da aspirina prejudicou o processo de cicatrização em camundongos Balb/c fêmeas, mas não afetou esse processo nos machos da mesma linhagem, o que pode ser explicado pela redução dos níveis de estrógenos nas fêmeas. A utilização do CAPE na cicatrização de queimaduras em ratas comprovou sua eficácia anti-inflamatória e antioxidante devido ao grupo queimado+CAPE ter apresentado maior taxa de cicatrização, redução da resposta inflamatória, além da redução do dano oxidativo em lipídeos e proteínas comparado ao grupo queimado. / Several in vitro and in vivo models have been developed to study wound healing and to identify key mechanisms of this process. The most of these studies use animals models to reproduce the human physiology and possible therapeutic treatments. In order to evaluate the wound healing process in different wound models, we use a full-thickness excisional wound model and a burn model promoted by scalding. In the full-thickness excisional wound study, we approach the aspirin use (COX non-selective inhibitor) and its distinct effect on the gender in cutaneous wound healing on mice. It was observed that both female control and treated groups presented smaller wound area than male control and treated groups, respectively. Between female and male control groups, the females presented smaller myeloperoxidase activity and MIF-positive cells than control males. Comparing female and male treated groups it was observed that in female treated group, the myeloperoxidase activity and the F4/80-positive macrophages amount were greater than male treated group. Also between the treated groups, the females presented smaller hydroxyproline levels and greater vWF and VEGF protein expression compared to the males. In study of the burns performed by scalding, it was evaluated the caffeic acid phenethyl ester (CAPE) anti-inflammatory and antioxidant properties on repair of these lesions. It was observed that at 7, 14, 21 and 70 days after burning, the burn+CAPE group presented smaller wound area, beyond smaller myeloperoxidase activity and nitrite levels than burn group. It was also observed that the burn+CAPE group presented smaller CD68 and PECAM-1 protein expression compared to burn group. Analyzing the oxidative damage parameters, it was observed that the MDA and carbonilated proteins levels were greater in the burn group compared to burn+CAPE group. In conclusion, our study evaluated the wound healing process in 2 wound models on distinct rodent species with distinct approaches. In mice full-thickness wound model, under gender and aspirin action influence, it was seen that the aspirin administration impaired the wound healing process on Balb/c female mice, but did not alter the wound repair on males of the same lineage, what can be explained by reduction of the estrogen levels in these females. The CAPE use on rat burning healing demonstrated its anti-inflammatory and antioxidant efficiency because the burn+CAPE group presented greater burning healing, smaller inflammatory response, beyond smaller oxidative damage at lipid and protein level compared to burn group
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Processo de acompanhamento de paciente portadores de feridas na atenção básica / Process monitoring of patients with wounds in primary care

Victor da Silva Lucas 28 November 2013 (has links)
Esta pesquisa tem como objeto de estudo a análise do processo de acompanhamento dos clientes portadores de feridas na atenção primária do município de Angra dos Reis. Os objetivos são: verificar a existência de processo de acompanhamento de clientes portadores de feridas nas unidades de atenção primária do município de Angra dos Reis; analisar as dificuldades inerentes ao processo de acompanhamento de clientes portadores de feridas nas unidades de atenção primária do município de Angra dos Reis. O método foi descritivo, o tipo é de levantamento e de natureza quantitativa. O instrumento de coleta de dados foi o formulário, tendo como sujeitos do estudo a população de enfermeiros atuantes na atenção primária do município de Angra dos Reis e que assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido, conforme disposto na Resolução 196/96 do Conselho Nacional de saúde. O cenário utilizado foi o município de Angra dos Reis. A pesquisa foi aprovada pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Instituto de Medicina Social da UERJ, através da Plataforma Brasil em 28/06/2013. A análise demonstrou que mais de 93% dos enfermeiros realizam curativos durante sua atuação profissional na atenção primária, destes, 80% realizam algum tipo de acompanhamento de clientes portadores de feridas. Este acompanhamento nem sempre é contínuo, por contada dificuldade técnica do próprio profissional, da interrupção do fornecimento de materiais por parte do almoxarifado, da baixa adesão do cliente e da inexistência de uma rotina institucionalizada. A insuficiência de produtos disponíveis no município para a realização de curativos também foi um fator descrito pelos sujeitos como prejudicador no processo de acompanhamento destes pacientes. Foi verificado que a utilização de produtos de segunda geração para realização de curativos, quando indicados de forma correta e respeitando o prazo de troca, proporciona uma economia nos fastos do município no que se refere ao tratamento tópico de feridas, economia esta que pode chegar à metade dos gastos. Este estudo foi relevante para a otimização do processo de acompanhamento de clientes portadores de feridas no município, bem como reorganização defluxos, rotinas e do cuidado prestado. / This research aims to study the analysis of the monitoring of clients with wounds in primary care in the municipality of Angra dos Reis. The objectives are: to verify the existence of monitoring clients with wounds in primary care units of the municipality of Angra dos Reis process, to analyze the inherent difficulties in the monitoring clients with wounds process in the p primary care units of the municipality of Angra dos Reis. The method was descriptive, is the type of survey and quantitative nature. The instrument for data collection was the form, with the population of nurses working in primary care in the municipality of Angra dos Reis as subjects of study that signed the consent for, as defined in Resolution 196/96 of the National Council Health. The scenario used was the municipality of Angra dos Reis. The study was approved by Ethics Committee in Research of the UERJs Institute of Social Medicine by Brazil on 28/06/2013 Plataform. The analysis showed that more than 93% of nurses do dressing during their professional careers in primary care, of which 80% use some type of monitoring clients with wounds. This monitoring is not always continuous, due to the technical difficulty of the professional himself, the interruption of the supply of material from warehouse, the low adherence of the client and the lack of an institutionalized routine. The failure of products available in the county for holding dressings was also described by subjects as a factor that harms in clinical patient management process. It was found that the use of second-generation products to perform curative when given correctly and respecting the exchange term, provides a saving in expenditure of the municipality with regard to topical treatment of wounds, this economy that can reach the half of the expenses. This study was relevant for optimizing the treatment of clients with wounds in the city process and reorganization of flows and routines of the care provided.
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Protocolo para estabelecimento de ferida cutânea crônica experimental em ratos Wistar (Rattus norvergicus)

Loss, Fernanda Regina January 2013 (has links)
Estudos sobre cronificação têm se mostrado cada vez mais importantes, visto que, tanto na medicina humana, quanto na medicina veterinária, tem sido comum a ocorrência de lesões crônicas, que muitas vezes apresentam dificuldade de cicatrização com terapia convencional. Por este motivo, o presente trabalho tem por objetivo estabelecer modelo de ferida crônica em ratos Wistar, com o uso de agentes químicos, comumente utilizados na rotina clínica como antissépticos, em doses consideradas tóxicas ao leito da ferida. Para isso, foram utilizados 48 ratos Wistar, machos, divididos em quatro grupos de 12 animais cada. (Controle, Polivinilpirrolidona - PVPI 1%, Clorexidina 1% e H2O2 35%). Os animais foram submetidos a anestesia inalatória e sofreram lesão circular de 1cm de diâmetro, confeccionada com o uso de trépano corneal. Foram realizadas duas feridas simétricas paralelas e em seguida à confecção iniciou-se a aplicação tópica dos agentes químicos, com auxílio de pipeta de 50μl, sendo instilados duas vezes ao dia, durante 15 ou 30 dias. As avaliações macroscópicas das feridas induzidas cirurgicamente eram realizadas a cada dois dias, através de medição com paquímetro, além de observação quanto a presenças de sangramentos e outras secreções. Foram avaliadas também através de histologia e imuno-histoquímica. Como resultados o grupo PVPI teve maior taxa de contração, cicatrizando em menor tempo que o grupo controle, embora essa diferença de tempo não tenha sido significativa estatisticamente; apesar das feridas se apresentarem cicatrizadas macroscopicamente, à avaliação histológica foi possível perceber que haviam alterações, dignas de processo cicatricial em curso; o grupo H2O2 proporcionou resultados positivos perante aquilo que foi proposto. Sugere-se que novos estudos sejam realizados, com o H2O2, nos quais os períodos de uso do agente sejam prolongados, superiores aos usados no presente estudo, utilizando ainda material de silicone, fixado nas bordas da ferida, com o intuito de evitar cicatrização por contração. Sugere-se também o uso de doses elevadas de analgésicos durante todo o tempo de experimento. / Research on chronic lesions have been of increased interest in both human and veterinary medicine, as different conditions can delay and lead to difficulties on wound healing, even after conventional therapy has been instituted. Although there are several reports on experimental models for the study of acute wound healing, the establishment of chronic lesions using chemical agents, for scientific purposes, is scarce. This study pursued the development of a chronic skin wound model with chemical substances routinely used as antiseptics, in concentrations considered detrimental to injured tissue. For that, forty-eight Wistar rats were divided in four groups of 12 animals each, for of one of the topical treatments: povidone-iodine solution, 1% chlorhexidine, 35% hydrogen peroxide (H2O2), and control with 0.9% saline solution (NaCl). Under general anesthesia, two circular full skin defects, with 1cm diameter, were produced (with a corneal trephine) in the dorsal cervical region of all the animals. Immediately after the incisions, 50μl of one of the treatments were administrated twice daily, for either 15 or 30 days. Macroscopic evaluations were performed every other day, recording wound size (with a pachymeter) and occurrence of bleeding or exudates. Microscopically, at day 15 or 30, histologic and immunohistochemical studies were carried out with the complete removal of the wound or cicatricial region. Macroscopically, the povidone-iodine group showed faster wound contraction and healing rate than the control, yet, this difference was not statistically significant. Although, under clinical observation, the incised regions presented scar tissue, the histopathological evaluation of the respective specimens showed uncompleted healing process features. The hydrogen peroxide demonstrated promising results to the proposed intent. However, a bigger sample is needed to ascertain the found evidences. Furthermore, studies with longer or more frequent periods of substance exposure, along with devices to circumvent wound contraction and higher doses of analgesics, are recommended.
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Células-tronco mesenquimais e eletroacupuntura na cicatrização de lesões cutâneas experimentais em coelhos / Mesenchymal stem cells and electroacupuncture at experimental wound healing in rabbits

Gianotti, Wanessa Krüger Beheregaray January 2011 (has links)
Durante as duas últimas décadas, têm ocorrido progressos substanciais a respeito do entendimento da fisiopatologia da cicatrização de feridas, e novas terapias tem sido desenvolvidas. Contudo, acelerar o processo de reparo continua sendo um desafio no campo da cirurgia plástica reconstrutiva. Tratamentos inovadores para melhorar a cicatrização e a regeneração cutânea são necessários e é nesse âmbito que as pesquisas com as células-troncos mesenquimais (MSCs) vêm ganhando espaço na última década. As MSCs foram estudadas em diversas áreas no que diz respeito ao seu efeito sobre a cicatrização de lesões e suas aplicações clínicas. Relatos apontam que tanto as MSCs originárias da medula óssea influenciam beneficamente a cicatrização de feridas, quanto originárias do tecido adiposo (ADSCs). A vantagem das ADSCs está na facilidade de serem coletadas, baixas taxas de morbidade e pelo alto rendimento de MSCs por coleta. Estudos demonstram que a eletroacupuntura (passagem de eletricidade através de agulhas de acupuntura inseridas na pele) pode exercer efeito cicatrizante em feridas cutâneas experimentalmente induzidas por meio do aumento da proliferação e da migração de células epiteliais e do tecido conjuntivo envolvidos no reparo de feridas. Dessa forma, este trabalho tem como objetivo avaliar o efeito da terapia com ADSCs no processo da cicatrização de feridas cutâneas em coelhos induzidas experimentalmente. Além disso, avaliar se a eletroacupuntura (EA) é capaz de causar efeito sobre a terapia com ADSCs no reparo de lesões cutâneas experimentais. Para tanto, foram utilizados 32 coelhos divididos em quatro grupos: GCTAD (ADSCs), GCTADE (ADSCs associado a EA), GE (EA) e GC (controle) o período de avaliação das lesões foi de 15 dias. As feridas induzidas cirurgicamente foram avaliadas por observações clinicas e análises histológicas. Os animais do GCTAD apresentaram uma velocidade cicatricial superior aos demais grupos até a quinta avaliação. Já na sétima avaliação o GE passa a ter a melhor taxa de contração cicatricial superando o GCTAD (p=0,039) e o GC (p=0,05). O GCTAD apresentou as maiores médias nas variáveis histológicas: proliferação vascular (p=0,059), proliferação fibroblástica (p=0,05) e Ki67. Nas variáveis reepitelização e colagenização as médias foram maiores que a dos outros grupos, mas semelhantes ao GE e a presença de queratina, da mesma forma, semelhante ao GCTADE. O GCTADE se destaca pela presença de folículos pilosos (p=0,026) e pelas maiores médias encontradas para as células mononucleares e polimorfonucleares, mas esses valores não configuram diferença estatística significativa. Por meio desse experimento, demostrou-se que o GCTAD melhora a cicatrização de feridas, acelerando a fase proliferativa do processo cicatricial. A associação dos tratamentos EA e ADSCs só foi considerada superior aos outros tratamentos na avaliação da presença de folículos pilosos. Talvez, o beneficio dessa associação seja mais evidente se o estudo for feito por um período superior aos 15 dias, ou seja, durante a fase de remodelamento da cicatrização, onde pode ser que se verifique um aspecto cosmético mais favorável da cicatriz. / The pathophysiology understanding of wound healing has been substantial progress during the last two decades, and new therapies have been developed. However, to accelerate the repair process remains a challenge in the field of reconstructive plastic surgery. Innovative treatments to enhance wound healing and cutaneous regeneration are necessary and in this context the research with mesenchymal stem cells (MSCs) are getting space in the last decade. MSCs have been studied in several areas with regard to its effect on the healing of lesions and their clinical applications. Reports indicate that both MSCs from bone marrow beneficially influence wound healing, as originating from adipose tissue (ADSCs). The advantage of ADSCs is because they can be easily collected, with low rates of morbidity and the high yield of MSCs per collection. Studies show that electro acupuncture (passing electricity through the acupuncture needles inserted into the skin) can have a healing effect on experimentally induced skin wounds by increasing the proliferation and migration of epithelial cells and connective tissue involved in wound repair. Thus, this study aims to evaluate the effect of therapy with ADSCs in the process of skin wound healing in rabbits that were experimentally induced. Moreover, to evaluate whether electro acupuncture (EA) is capable to causing effect on ADSCs therapy in the repair of experimental skin lesions. Therefore, it was used 32 rabbits divided into four groups: GCTAD (ADSCs), GCTADE (ADSCs associated with EA), GE (EA) and CG (control) the evaluation period of the lesions was 15 days. The surgically induced wounds were evaluated by clinical observations and histological analysis. The GCTAD animals showed an accelerated wound healing than the other groups until the fifth assessment. In the seventh evaluation GE replaced by the best healing rate than GCTAD (p = 0.039) and CG (p = 0.05). The GCTAD had the highest averages in the histological variables: vascular proliferation (p = 0.059), fibroblast proliferation (p = 0.05) and Ki67. Reepithelialization and collagen variables the averages were higher than other groups, but similar to GE and the presence of keratin, the same way, similar to GCTADE. The GCTADE stands by the presence of hair follicles (p = 0.026) and by the major averages found for the mononuclear and polymorph nuclear cells, but these values are not statistically significant. Through this experiment, we show that the GCTAD improves wound healing by accelerating the proliferation phase of healing. The combination of EA and ADSCs treatments were not considered superior to other treatments in assessing the presence of hair follicles. Perhaps the benefit of this association is more evident if the study is done for a period exceeding 15 days, during the remodeling phase of healing, it could be ascertained a more favorable cosmetic appearance of the scar.
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Protocolo para estabelecimento de ferida cutânea crônica experimental em ratos Wistar (Rattus norvergicus)

Loss, Fernanda Regina January 2013 (has links)
Estudos sobre cronificação têm se mostrado cada vez mais importantes, visto que, tanto na medicina humana, quanto na medicina veterinária, tem sido comum a ocorrência de lesões crônicas, que muitas vezes apresentam dificuldade de cicatrização com terapia convencional. Por este motivo, o presente trabalho tem por objetivo estabelecer modelo de ferida crônica em ratos Wistar, com o uso de agentes químicos, comumente utilizados na rotina clínica como antissépticos, em doses consideradas tóxicas ao leito da ferida. Para isso, foram utilizados 48 ratos Wistar, machos, divididos em quatro grupos de 12 animais cada. (Controle, Polivinilpirrolidona - PVPI 1%, Clorexidina 1% e H2O2 35%). Os animais foram submetidos a anestesia inalatória e sofreram lesão circular de 1cm de diâmetro, confeccionada com o uso de trépano corneal. Foram realizadas duas feridas simétricas paralelas e em seguida à confecção iniciou-se a aplicação tópica dos agentes químicos, com auxílio de pipeta de 50μl, sendo instilados duas vezes ao dia, durante 15 ou 30 dias. As avaliações macroscópicas das feridas induzidas cirurgicamente eram realizadas a cada dois dias, através de medição com paquímetro, além de observação quanto a presenças de sangramentos e outras secreções. Foram avaliadas também através de histologia e imuno-histoquímica. Como resultados o grupo PVPI teve maior taxa de contração, cicatrizando em menor tempo que o grupo controle, embora essa diferença de tempo não tenha sido significativa estatisticamente; apesar das feridas se apresentarem cicatrizadas macroscopicamente, à avaliação histológica foi possível perceber que haviam alterações, dignas de processo cicatricial em curso; o grupo H2O2 proporcionou resultados positivos perante aquilo que foi proposto. Sugere-se que novos estudos sejam realizados, com o H2O2, nos quais os períodos de uso do agente sejam prolongados, superiores aos usados no presente estudo, utilizando ainda material de silicone, fixado nas bordas da ferida, com o intuito de evitar cicatrização por contração. Sugere-se também o uso de doses elevadas de analgésicos durante todo o tempo de experimento. / Research on chronic lesions have been of increased interest in both human and veterinary medicine, as different conditions can delay and lead to difficulties on wound healing, even after conventional therapy has been instituted. Although there are several reports on experimental models for the study of acute wound healing, the establishment of chronic lesions using chemical agents, for scientific purposes, is scarce. This study pursued the development of a chronic skin wound model with chemical substances routinely used as antiseptics, in concentrations considered detrimental to injured tissue. For that, forty-eight Wistar rats were divided in four groups of 12 animals each, for of one of the topical treatments: povidone-iodine solution, 1% chlorhexidine, 35% hydrogen peroxide (H2O2), and control with 0.9% saline solution (NaCl). Under general anesthesia, two circular full skin defects, with 1cm diameter, were produced (with a corneal trephine) in the dorsal cervical region of all the animals. Immediately after the incisions, 50μl of one of the treatments were administrated twice daily, for either 15 or 30 days. Macroscopic evaluations were performed every other day, recording wound size (with a pachymeter) and occurrence of bleeding or exudates. Microscopically, at day 15 or 30, histologic and immunohistochemical studies were carried out with the complete removal of the wound or cicatricial region. Macroscopically, the povidone-iodine group showed faster wound contraction and healing rate than the control, yet, this difference was not statistically significant. Although, under clinical observation, the incised regions presented scar tissue, the histopathological evaluation of the respective specimens showed uncompleted healing process features. The hydrogen peroxide demonstrated promising results to the proposed intent. However, a bigger sample is needed to ascertain the found evidences. Furthermore, studies with longer or more frequent periods of substance exposure, along with devices to circumvent wound contraction and higher doses of analgesics, are recommended.
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Desenvolvimento de creme de rhizophora mangle l.: Avaliação do potencial cicatrizante em feridas cutâneas

ARAÚJO, Jéssica Guido De 05 August 2015 (has links)
Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2017-03-13T17:45:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertacao Mestrado Jessica Guido.pdf: 2910682 bytes, checksum: 6e5a54efeb07a20e49a541a5149ab676 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-13T17:45:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertacao Mestrado Jessica Guido.pdf: 2910682 bytes, checksum: 6e5a54efeb07a20e49a541a5149ab676 (MD5) Previous issue date: 2015-08-05 / Rhizophora mangle L. é a espécie arbórea mais frequente no mangue brasileiro e tem intenso uso popular no tratamento de doenças mucocutâneas. A fim de fornecer base científica para sua utilização, este estudo teve por objetivos avaliar a atividade cicatrizante de creme de extrato aquoso de folha de Rhizophora mangle L. em ratos Wistar, e investigar a ação citotóxica e o perfil fitoquímico dos extratos aquosos das folhas, caule e raiz de R. mangle. O screening fitoquímico dos extratos aquosos de folhas, caule e raiz da planta foi realizado a partir da identificação dos compostos majoritários. Realizou-se a investigação da citotoxicidade dos extratos das três partes da planta, com concentrações de 100; 10; 1; 0,1; 0,01; 0,001; 0,0001 e 0,00001 μg/mL frente as células Hela (104 células/mL), e como controle utilizou-se o Dimetilsufóxido (0,1%). Para avaliação da atividade cicatrizante do creme de extrato aquoso foram utilizados 45 ratos Wistar, fêmeas, submetidos à indução de ferida cirúrgica e divididos em 3 grupos (controle negativo, padrão e tratado). Cada grupo recebeu, respectivamente, aplicação de soro fisiológico a 0,9%, dexpantenol a 5% em creme e extrato aquoso da folha da R. mangle. a 5% em creme, e foram acompanhado até o 5o, 10o e 15o dia de pós-operatório para avaliação dos aspectos macroscópicos das feridas e avaliações morfométrica e histomorfométrica. O grupo tratado apresentou feridas uniformes e sem infecção, quando comparado aos outros dois grupos, porém a análise morfométrica não mostrou no 15o dia diferença estatística entre os grupos devido ao formato retangular da ferida inicial. O estudo histomorfométrico demonstrou que todos os animais tratados com o creme de R. mangle apresentaram reepitelização completa no 15o dia de pós-operatório (0,00 ± 0,00) em relação ao padrão (1.26 ± 0.77) e controle negativo (2.45 ± 0.62). Houve proliferação de células Hela sob ação das diferentes concentrações de 0,001 a 100 μg/mL nos extratos das folhas e caule, e na raiz em 100 μg/mL com p>0,05. O perfil fitoquímico revelou presença de taninos nos três extratos, além de flavonóides na folha; flavonóides, triterpenos e saponinas no caule, e na raiz revelou também a presença de triterpenos. Através de ensaios fitoquímicos ficou comprovado a presença de taninos, flavonóides, triterpenos e saponinas nos extratos aquosos de R. mangle e foi também observado efeito mitogênico em células HeLa. Este estudo revelou que o uso tópico do EAF. R. mangle a 5% em creme apresenta efeito significativo na reepitelização de feridas cirúrgicas em ratos e reforçou a importância da realização da histomorfometria na correlação com os achados morfométricos. / Rhizophora mangle L. is the most common species in Brazilian mangrove and has intense popular use in treatment of mucocutaneous disease. In order to provide scientific basis for its use, this study aimed to evaluate the healing activity of aqueous extract cream of Rhizophora mangle L. leaves in rats, and to investigate the cytotoxic activity and phytochemical screening of aqueous extracts of leaves, stem and root of R. mangle. Phytochemical screening of aqueous extracts of leaves, stem and root of the plant was done by identification of major compounds. The cytotoxicity of the extracts of the three parts of the plant, with concentrations of 100; 10; 1; 0.1; 0.01; 0.001; 0.0001 and 0.00001 ug / mL was evaluated on Hela cells (104 cells / ml) and dimethylsulfoxide (0.1%) was used as control. To evaluate the healing activity of aqueous extract cream were used 45 Wistar rats, females undergoing induction wound and divided into 3 groups (negative control, standard and treated). Each group received respectively 0.9% saline, 5% dexpanthenol in cream and 5% aqueous extracts of leaves of R. mangle in cream, for a period of 5th, 10th and 15th day postoperatively to evaluate the macroscopic aspects of the wounds and morphometric and histomorphometric evaluations. The treated group showed uniform wounds without infection when compared to the other two groups, but the morphometric analysis did not show on the 15th day statistical difference between the groups due to the rectangular shape of the original wound. The histomorphometric study showed complete epithelialization of the animals treated with R. mangle cream on the 15th day after surgery (0,00 ± 0,00) compared to the standard (1.26 ± 0.77) and negative control (2.45 ± 0.62). There was proliferation of Hela cells different concentrations from 0.001 to 100 mg/mL of the extract of leaves and stem, and 100 mg / ml of root with p> 0.05. The phytochemical profile revealed the presence of tannins in the three extracts, and flavonoid in leaves; flavonoids, saponins, triterpenes in stem, and in root was also revealed the presence of triterpenes. Through phytochemical assays it was proven the presence of tannins, flavonoids, triterpenes and saponins in aqueous extracts of R. mangle and mitogenic effect was also observed in HeLa cells. This study showed that th topical use of aqueous extract of leaves of R. mangle in cream at 5% has significant effect on epithelialization of surgical wounds in rats and reinforced the importance of holding the histomorphometry in correlation with the morphometric findings.
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Atividade antioxidante, cicatrizante e antiulcerogênica dos extratos e das frações das folhas de Oncidium flexuosum SIMS (Orchiaceae) / Antioxidant, cicatrizant and antiulcerogenic of extracts and fractions of Oncidium flexuosum Sims (Orchiaceae) leaves

Gaspi, Fernanda Oliveira de Gaspari 02 November 2011 (has links)
Orientadores: João Ernesto de Carvalho, Mary Ann Foglio / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-17T20:05:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gaspi_FernandaOliveiradeGaspari_D.pdf: 71779654 bytes, checksum: cfa74eb88bc93a25160ab6df284bff34 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O conhecimento sobre as plantas, a descoberta de suas propriedades curativas têm sempre acompanhado a evolução do homem através dos tempos. A família Orchidaceae é a maior entre as angiospermas, são mais de 25 mil espécies já descritas. Entre elas está a Oncidium flexuosum Sims., uma importante espécie brasileira conhecida popularmente como bailarina e que possui grande valor ornamental. Porém, esta é a primeira pesquisa sobre as suas propriedades medicinais. Os objetivos deste trabalho foram avaliar as atividades antioxidante in vitro e in vivo, cicatrizante e antiulcerogênica dos extratos e das frações obtidas a partir das folhas de O. flexuosum e realizar as análises fitoquímicas e histoquímica preliminares. Para isto, foram utilizadas as análises da capacidade sequestradora do radical livre difenilhidrazil (DPPH), da atividade antiulcerogênica induzida por etanol, do reparo tecidual associado ou não a microcorrente, além das reações de caracterização e cromatografia de camada delgada. Também foram realizados testes histopatológicos para avaliar possíveis danos oxidativos. O extrato hidroalcoólico de O. flexuosum (EH) possui as atividades antioxidante in vitro diante do radical livre DPPH e in vivo, cicatrizante associado à microcorrente, estimulante da proliferação de fibroblastos in vitro e colágeno in vivo, e atividade antiulcerogênica. A fração terpeno (FrT) inibi o processo oxidativo causado pelo substâncias reativas do ácido tiobarbitúrico (TBARS). O extrato bruto enzimático (EBZ) e a FrT estimulam a proliferação de fibroblastos, porém com menor potência do que o EH. As análises fitoquímicas e histoquímica revelaram que as folhas de O. flexuosum possuem, entre os seus constituintes, as substâncias fenólicas, tais como flavonoides e taninos, e também cumarinas, triterpenos e esteróides. O EH não induziu danos renais nos animais, mas tem potencial hepatotóxico dose-tempo-dependente, causando inflamação e degeneração tecidual. Conclui-se que o EH possui atividade antioxidante, cicatrizante e antiulcerogênica, provavelmente devido à presença das substâncias fenólicas / Abstract: The knowledge about plants, the discovery of their healing properties has always followed the evolution of man through the ages. The Orchidaceae family is the largest among the angiosperms, they are more than 25,000 described species, among them is the Oncidium flexuosum Sims., an important Brazilian species popularly known as dancer and which has great ornamental value. However, this is the first survey of its medicinal properties. The objectives of this work were to investigate the antioxidant activity in vitro and in vivo, wound healing and antiulcerogenic activities of the extracts and fractions obtained from the leaves of Oncidium flexuosum and perform the preliminary phytochemical and histochemistry analysis. For this, analysis of free radical scavenging capacity with difenilhidrazil (DPPH) test, antiulcer activity induced by ethanol, tissue repair associated or not with microcurrent were made, other than the characterization reactions and thin layer chromatography. Histopathological tests were also performed to evaluate possible oxidative damage. The extract of Oncidium flexuosum (EH) has in vitro antioxidant activity against free radical DPPH and in vivo, cicatrizant associated with microcurrent, stimulating fibroblasts proliferation in vitro and collagen in vivo. The terpene fraction (FrT) inhibit the oxidative process caused by the thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). The enzimatic crude extract (EBZ) and FrT stimulate proliferation of fibroblasts, but with less efficiency than the EH. The phytochemical and histochemistry analysis revealed that the leaves of Oncidium flexuosum plant species have among its constituents, the phenolic substances such as flavonoids and tannins, and also the coumarins, triterpenes and steroids. The EH was not induce kidney damage in animals, but has hepatotoxic potential dose-time-dependent, causing inflammation and tissue degeneration. It was concluded that the EH has antioxidant, cicatrizant and antiulcerogenic activities probably due to the presence of phenolic substances / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica
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Atividade cicatrizante do extrato bruto de Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) verlot / Evaluation of wound healing properties of Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) verlot extract

Jorge, Michelle Pedroza, 1981- 14 February 2008 (has links)
Orientadores: João Ernesto de Carvalho, Mary Ann Foglio, Lucia Tasca Gois Ruiz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T14:23:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jorge_MichellePedroza_M.pdf: 2723510 bytes, checksum: d0521f341cbca8308beb772206b9dd69 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: As folhas de Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) Verlot (Bignoniaceae), popularmente conhecida como Crajiru, são utilizadas na medicina popular como cicatrizante, antiinflamatória e no tratamento de cólicas intestinais. O presente trabalho descreve os efeitos cicatrizante, antiinflamatório, antiulcerogênico e antioxidante do extrato bruto metanólico das folhas de Arrabidaea chica. O extrato estimulou o crescimento de fibroblastos, in vitro, de forma proporcional à concentração utilizada com atividade similar à alantoina. Também estimulou a produção in vitro de colágeno de maneira semelhante ao ácido ascórbico. Nos ensaios de DPPH e Folin-Ciocalteau, o extrato bruto apresentou moderada ação antioxidante. A aplicação tópica do extrato bruto em modelos experimentais do processo cicatrizante in vivo reduziu em 96% a área cutânea ulcerada após dez dias de tratamento, enquanto o grupo salina apresentou redução de somente 36%. Em modelos de úlcera gástrica em ratos induzida por etanol, o extrato bruto de A. chica reduziu o índice de lesões em 90%. Apesar do uso popular em processos inflamatórios, esse extrato não reduziu o edema de pata induzido por carragenina nem o edema de orelha induzido por óleo de cróton em ratos. Esses resultados permitem concluir que o extrato bruto metanólico das folhas secas de Arrabidaea chica possui princípios ativos que ativam o processo cicatricial, através da proliferação de fibroblastos e síntese de colágeno, confirmando o uso popular cicatrizante desta espécie / Abstract: Arrabidaea chica (Humb. & Bonpl.) Verlot (Bignoniaceae) leaves, popularly known as Crajiru, are employed in folk medicine for wound healing, anti-inflammatory, and intestinal colic. Herein we report the in vitro and in vivo healing, antulcerogenic, antiinflamatory and antioxidant activities of Arrabidaea chica crude methanolic extracts. A. chica crude methanolic extract stimulated cell growth in a concentration dependent way and demonstrated similar effect as allantoin and vitamin C increasing in vitro collagen production. Also, A. chica crude extract demonstrated moderate scavenger effect (DPPH assay) and moderate reducing effect (Folin-Ciocalteau reagent). Wound healing experimental models in rats reduced in 96% the wounds size after ten days treatment, whereas saline group showed only 36% wound healing. Antiulcerogenic experimental models in rats showed gastroprotective activity, redution of 90%, by measuring ulceration lesion index (ULI). The Arrabidaea chica crude extract showed no antiinflamatory activity. The crude extract¿s efficiency seems to involve fibroblast growing stimulus and collagen synthesis both in vitro and in vivo, beyond the moderate scavenging activity and antiulcerogenic activity, corroborating with the folk use of this plant species / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

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