Orientador: Marcos José Salvador / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T12:16:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Feltran_GabrielPrimini_M.pdf: 2195659 bytes, checksum: ca442329b76d3b823e9a0079209f4252 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Os monoterpenos são uma importante classe de produtos naturais com odor e sabor intenso e que contém muitas moléculas que apresentam atividade biológica, incluindo a atividade antimicrobiana, e aplicações na indústria farmacêutica, cosmética e alimentícia. Entretanto, são substâncias lipofílicas, voláteis e apresentam certa instabilidade química. Ciclodextrinas (CDs) são carreadores macrocíclicos, capazes de complexar, aumentar a solubilidade em água e estabilizar um largo espectro de substâncias e que, atualmente, têm sido objeto de pesquisas e de desenvolvimento de novos produtos pela indústria farmacêutica. Neste trabalho procedeu-se um estudo comparativo da complexação de quatro monoterpenos (citral, ?-mirceno, limoneno e 1,8-cineol) em ?CD e HP-?CD, bem como a avaliação biológica desses compostos, complexados ou não. Após essas avaliações realizou-se o desenvolvimento de um enxaguante bucal contendo o monoterpeno mais promissor no combate ao biofilme dentário. Para a caracterização físico-química do complexo de inclusão monoterpeno-CD foram utilizadas técnicas espectroscópicas (UV-Vis), cromatográficas (CG-EM) e calorimétricas (DSC), avaliando a solubilidade dos complexos em água e porcentagem de inclusão dos monoterpenos em CD. Foi realizado um screening da atividade antimicrobiana dos quatro monoterpenos em estudo frente à quatro cepas de bactérias (Staphylococcus aureus ATCC 6538; Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853; Escherichia coli ATCC 10538 e Streptococcus mutans ATCC 25175) e quatro cepas de fungos (Candida albicans ATCC 10231; Candida dubliniensis ATCC 22019; Candida tropicalis ATCC 157 e Candida parapsilosis ATCC 22019). Essa avaliação foi realizada através da determinação da Concentração Inibitória Mínima (concentração que inibiu 50% do desenvolvimento microbiano, CIM) e Concentração Biocida Mínima (concentração que inibiu em 100% o desenvolvimento microbiano, CBM). O monoterpeno citral mostrou-se mais efetivo (CBM citral = 2,5µL/mL) frente à cepa de S. mutans (ATCC 25175). A partir desses resultados o citral foi o monoterpeno escolhido para dar continuidade aos estudos propostos no projeto. Avaliou-se o efeito do citral isoladamente, complexado e incorporado em formulações de enxaguante bucal, frente ao crescimento e aderência de S. mutans (ATCC 25175) em superfície sólida. Avaliou-se, também, a citotoxicidade do citral e de algumas formulações de enxaguante bucal verificando-se baixa citotoxicidade frente a cultura de queratinócitos humanos (HaCat). Tanto o citral em sua forma livre como complexado em CDs apresentou atividade frente a cepa indicadora de S. mutans (ATCC 25175), impedindo a formação do biofilme in vitro em concentração sub-inibitória (CBM/2 = 1,25µL/mL). Ao avaliar o citral e seus complexos de inclusão incorporados nas formulações de enxaguante bucal, observou-se manutenção do efeito antibacteriano in vitro frente a cepa de S. mutans (ATCC 25175) e uma melhor solubilidade do complexo de inclusão citral-HP?CD se comparado ao monoterpeno não complexado em CD / Abstract: Monoterpenes are an important class of natural products with intense flavor and odor and can exhibit biological activity including antimicrobial activity, and applications in the pharmaceutical, cosmetic and food industry. However, monoterpenes are lipophilic and volatile substances which demonstrate some chemical instability. Cyclodextrins (CDs) are macrocyclic carriers capable of complexing a wide range of substances and increase their water solubility currently been the subject of research and development of new products for the pharmaceutical industry. In this project a comparative study was carried complexing four monoterpenes (citral, ?-myrcene, limonene and 1,8-cineole) in ?-cyclodextrin and hydroxypropyl-?-cyclodextrin, and biological evaluation of such monoterpenes, complexed or not. After these assessments was performed to develop a mouthwash containing the most promising monoterpene to combat dental biofilm. For physico-chemical characterization of the inclusion complex monoterpene-CD spectroscopic (UV-Vis), chromatographic (GC-MS) and calorimetric (DSC) were used to evaluate the solubility of the complex in water and percentage of inclusion of these monoterpenes in cyclodextrin. Antimicrobial activity screening for the monoterpenes was conducted across four strains of bacteria (Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Escherichia coli ATCC 10538 and Streptococcus mutans ATCC 25175) and four strains of fungi (Candida albicans ATCC 10231, Candida dubliniensis ATCC 22019, Candida tropicalis ATCC 157 and Candida parapsilosis ATCC 22019). This evaluation was performed by determining the minimum inhibitory concentration (concentration that inhibited 50% of microbial growth, MIC) and Minimum Biocide Concentration (concentration that inhibited 100% microbial development, MBC). The monoterpene citral was more effective (MBC citral = 2.5?L/mL) against the strain of S. mutans (ATCC 25175). From these results the monoterpene citral was chosen to continue the studies in the proposed project. Were evaluated the effect of citral alone, complexed and incorporated into mouthwash formulations, to the growth and adherence of S. mutans (ATCC25175) on a solid surface. It was also assessed the cytotoxicity of citral and some mouthwash formulations afford low cytotoxicity against human keratinocytes (HaCat) cell culture. Both citral and citral complexed with CDs presented activity against the indicator strain of S. mutans (ATCC25175), preventing the formation of biofilms in vitro in the sub-inhibitory concentration (MBC/2 = 1.25?L/mL). When evaluating citral and their inclusion complexes embedded in mouthwash formulations, the in vitro antibacterial effect against S. mutans (ATCC 25175) was maintained and an increased solubility of the inclusion complex citral-HP?CD compared to monoterpene uncomplexed with CD / Mestrado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Mestre em Ciências

Orientador: Inez Valeria Pagotto Yoshida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-14T14:08:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Abbehausen_Camilla_M.pdf: 940208 bytes, checksum: 2b2315fde8a813d9a3f372ac94b57962 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: No presente trabalho obteve-se híbridos de siloxano e b-ciclodextrina (b-CD). Baseando-se na comprovada reatividade das ciclodextrinas frente a grupos isocianatos, sintetizou-se um híbrido de b-ciclodextrina e siloxano, pela reação da b-ciclodextrina com g-isocianatopropiltrietoxissilano (IPTS), formando uma ligação uretana entre o silano e a b-ciclodextrina. O alcoxissilano, posteriormente hidrolisado, deu origem a um material resinoso do tipo polissilsesquioxano (PSS) modificado por b-ciclodextrina. O mesmo alcoxissilano foi também submetido à condensação com poli(dimetilsiloxano) contendo ¿Si(CH3)2-OH em finais de cadeia, dando origem a uma rede polimérica, também de aspecto resinoso, contendo nos nós de reticulação a b-cyclodextrin. Os materiais obtidos foram caracterizados estruturalmente por espectro infravermelho (IV), ressonância magnética nuclear de C (RMN C) e de Si (RMN Si) e análise por difração de raios X (DRX). O comportamento térmico dos materiais foi analisado por termogravimetria (TGA). A capacidade formadora de complexos de inclusão das ciclodextrinas inseridas no polímero PSS-b-CD foi avaliada pela inclusão de fenolftaleína, monitorada por espectrofotometria na região UV-vis e a difusão de água pelo material foi avaliada por ensaios de intumescimento. A morfologia dos filmes dos materiais preparados foi analisada por microscopia eletrônica de varredura (SEM). / Abstract: In this study, hybrid polymers derived from siloxane and b-cyclodextrin (b-CD) were obtained, by reaction of b-CD with g-isocianatepropyltriethoxysilane (IPTS), forming a urethane bond between these components. The resulting alkoxysilane was hydrolyzed generating b-CD-modified polysilsesquioxane resin (b-CD-PSS). The alkoxysilane was also submitted to condensation with poly(dimethylsiloxane) with ¿ Si(CH3)2-OH end groups, giving rise to a resinous polymeric network. These materials were characterized by infrared spectrum, C and Si nuclear magnetic resonance and X ray diffraction. The thermal behavior was analyzed by thermogravimetry. The capability of b-CD grafted in the siloxane polymers to form inclusion complexes was evaluated by the formation of b-CD-phenolphthalein, by UV-vis sectra. The ability of water diffusion into b-CD-PSS film was evaluated by swelling measurement. b-CD modified siloxanes were able to form films and their morphologies were evaluated by scanning electron microscopy. / Mestrado / Quimica Inorganica / Mestre em Química

Throughout the history of the development of treatments proposed for pain, medicinal plants and their secondary metabolites have played a key role. However, even more effective therapeutic options for the treatment of painful conditions are necessary. In this sense, the present study aimed to evaluate the effect of the inclusion complex of β-cyclodextrin (β-CD) containing carvacrol, a phenolic monoterpene present in the essential oil of medicinal plants of the genus Origanum, Thymus (Lamiaceae), on the oncology nociception (induced by tumor cell sarcoma 180, S180) in experimental animals. This thesis is formed by three chapters, consisting of a review of patents and two regular papers. Initially, the review Terpenes and derivatives as a new perspective for pain treatment: a patent review was elaborated, which describes patents on the analgesic properties of terpenes and prospects created from these records. After conducting the experimental protocols, the article Evidence for the Involvement of descending pain- inhibitory mechanisms in the attenuation of cancer pain induced by carvacrol , a monoterpene of Origanum oil was constructed, in which it has been shown that carvacrol (CARV) reduces nociception induced by tumor cells (S180), decreases the number of Fos positive neurons in lamina I of the Lumbar spinal cord and activates the brain nuclei involved in the descending inhibitory pain pathway, such as the periaqueductal gray, nucleus raphe magnus and locus coeruleus. Subsequently, the inclusion complex consisting of carvacrol and β-cyclodextrin (CARV/β-CD) was developed and characterized physicochemically through the method of co-evaporation. CARV complexation was able to increase the time of the antinociceptive effects of this compound in animals with S180 in 15 hours and improved the pharmacological response at lower doses, in addition to promoting a clear increase in solubility and stability. These data formed the patent submitted and approved by the Center for Innovation and Technology Transfer (CINTEC UFS) and forms the scientific basis of the article Encapsulation of β-cyclodextrin in carvacrol improves the pharmacological response on cancer pain . From these findings, we conclude that the analgesic effect of carvacrol on cancer pain can be enhanced by employing inclusion complexes containing β-cyclodextrin and may represent an interesting object of further translational research and clinical trials in order clinical evidence to be obtained, which is necessary for the development of new drugs for cancer-associated pain management. / Ao longo da história do desenvolvimento de propostas terapêuticas para o tratamento da dor, as plantas medicinais e seus metabólitos secundários tem exercido um papel fundamental. No entanto, ainda são necessárias opções terapêuticas mais eficazes para o tratamento de condições dolorosas. Neste sentido, o presente trabalho buscou avaliar o efeito do complexo de inclusão de β-ciclodextrina (β-CD) contendo carvacrol, um monoterpeno fenólico presente no óleo essencial de plantas medicinais do gênero Origanum e Thymus (Lamiaceae), sobre a nocicepção oncológica (induzida por células tumorais sarcoma 180, S180) em animais de experimentação. A tese é composta por três capítulos, constituídos de uma revisão de patentes e dois artigos científicos. Inicialmente foi elaborada a revisão Terpenes and derivatives as a new perspective for pain treatment: a patent review , a qual descreve as patentes sobre as propriedades analgésicas dos terpenos e as perspectivas criadas a partir destes registros. Após a realização dos protocolos experimentais foi elaborado o artigo Evidence for the involvement of descending pain-inhibitory mechanisms in the attenuation of cancer pain induced by carvacrol, a monoterpene of Origanum oil , no qual foi demonstrado que o carvacrol (CARV) reduz a nocicepção induzida por células tumorais (S180), diminui o número de neurônios Fos positivos na lâmina I da medula lombar e ativa núcleos cerebrais envolvidos na via descendente inibitória da dor, como a substância cinzenta periaquedutal, núcleo magno da rafe e locus ceruleus. Posteriormente, foi desenvolvido e caracterizado físico-quimicamente o complexo de inclusão constituído de β-ciclodextrina e carvacrol (CARV/β-CD) através do método de co-evaporação. A complexação do CARV foi capaz de aumentar o tempo do efeito antinociceptivo deste composto nos animais com o S180 em 15 horas e melhorar a resposta farmacológica em doses menores, além de promover nítido aumento de solubilidade e estabilidade. Estes dados compuseram a patente submetida e aprovada pelo Centro de Inovação e Transferência de Tecnologia (CINTEC UFS) e constitui a base científica do artigo Encapsulation of carvacrol in β-cyclodextrin improve the pharmacological response on cancer pain . A partir destes achados é possível concluir que o efeito analgésico do carvacrol sobre a dor oncológica pode ser aprimorado pelo emprego de complexos de inclusão contendo β-ciclodextrina e pode representar um interessante objeto de novas pesquisas translacionais e ensaios clínicos a fim de que sejam obtidas as evidências clínicas necessárias para o desenvolvimento de novos medicamentos destinados ao manejo da dor associada ao câncer.

Orientador: Anselmo Gomes de Oliveira / Banca: Rosemeire Cristina Linhari Rodrigues Pietro / Banca: Thalita Pedroni Formariz Pilon / Banca: Clovis Augusto Ribeiro / Banca: Francisco Benedito Teixeira Pessine / Resumo: 2-(2-nitrovinil)furano (G-0) apresenta atividade antiprotozoária, antibacteriana e antifúngica frente a elevado número de patógenos porém, a capacidade de sublimação, baixa velocidade de dissolução em meio aquoso, problemas de compatibilidade com excipientes e fotodegradação, tem limitado sua incorporação em formas farmacêuticas para uso humano e/ou veterinário. O propósito do presente trabalho foi avaliar duas alternativas para a estabilização do candidato a fármaco, através da formação de complexos de inclusão liofilizados (FD) com hidroxipropil-β-ciclodextrina e sulfobutiléter-β-ciclodextrina sódica e utilizando a microencapsulação com etilcelulose pelo método de emulsificação/evaporação do solvente. Uma vez formados e previamente caracterizados, os complexos foram submetidos ao ensaio de estabilidade acelerada a 40°C/75 %HR e ensaios de fotoestabilidade acelerada. A câmara de fotoestabilidade também foi utilizada para confirmar o perfil de degradação dos complexos. Os fotoprodutos foram isolados em coluna analítica e o maioritário foi caracterizado por espectroscopia de RMN. Foi avaliada também a volatilidade do G-0 na forma de complexos comparado com misturas físicas equivalentes através de TGA e CG-HS-FID, complementando assim um estudo desenvolvido anteriormente no modo isotérmico. As propriedades biofarmacêuticas da substância livre e na forma complexada foram estudadas em relação ao comportamento de dissolução em Fluido Vaginal Simulado e a permeação/retenção em muco... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: 2-(2-nitrovinyl)furan (G-0) has antiprotozoal, antibacterial and antifungal activity against a large number of pathogens, although the sublimation, low dissolution rate in aqueous medium, low compatibility with excipients and photodegradation, have hindered the incorporation in pharmaceutical dosage forms, to use in human and/or veterinary medicine. The aim of this work was to evaluate two alternatives for the stabilization of the drug candidate through freeze-drying inclusion complex formation (FD) with hydroxypropyl-β-cyclodextrin and sulfobutylether-β-cyclodextrin sodium salt and through microencapsulation with ethylcellulose by mean of emulsion/solvent evaporation method. Once the complexes were prepared and fully characterized previously, they were subjected to an accelerated stability study at 40°C/75 %RH, and a photostability assay under forced irradiation conditions. A photostability chamber was also used in order to confirm the degradation profile for the complexes. Photoproducts were isolated in analytical column and the main degradation product was characterized aided by NMR. Drug volatility was also evaluated when G-0 was complexed, and compared with equivalent physical mixtures through TGA and GC-HS-FID. Biopharmaceutical properties of free drug and in the complexes were studied in terms of dissolution rate in Simulated Vaginal Fluid and permeation/retention in bovine vaginal mucosa. Finally, the influence of both complexes on the "in vitro" antifungal activity a... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-08Bitstream added on 2014-06-13T19:40:50Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_ds_dr_sjrp.pdf: 1933738 bytes, checksum: baca389347279bb3f5a0eea7681d038d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O desenvolvimento da tecnologia de pães é um fenômeno de grande impacto na indústria de alimentos. Ao longo dos anos vários aditivos foram incorporados à tecnologia de panificação, elevando a qualidade destes produtos e fazendo crescer a sua aceitação pela população em geral. O objetivo deste trabalho foi estudar os efeitos sobre a qualidade do pão e sobre o processo de envelhecimento, da adição de enzimas na massa. As enzimas usadas foram xilanase produzida pelo fungo Thermoascus aurantiacus CBMAI 756 nas concentrações de 20, 35 e 50U/100 g de farinha de trigo e/ou da ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase) produzida pela bactéria Bacillus clausii E16 nas concentrações de 15 e 30U/100 g de farinha de trigo, parcialmente purificadas. O mecanismo de ação dessas enzimas sobre os seus respectivos substratos arabinoxilana e amido, respectivamente, também foram avaliadas. Os pães adicionados de xilanase, CGTase e xilanase/CGTase foram produzidos em três etapas distintas. Para o estudo do envelhecimento os pães foram mantidos a temperatura de 4ºC durante 10 dias, e foram avaliados quanto à perda de água, a textura e a retrogradação da amilopectina. Os produtos obtidos pela ação da xilanase e CGTase sobre as arabinoxilanas e o amido, respectivamente, isolados da farinha de trigo, foram analisados por HPAEC-PAD e HPLC. O fungo T. aurantiacus exibiu uma variação no perfil enzimático de acordo com cada substrato usado no seu cultivo. O substrato que resultou no melhor perfil enzimático para o uso em panificação foi o sabugo de milho, porque esse extrato enzimático exibiu alta atividade xilanolítica e baixa atividade amilolítica e proteolítica. A adição de xilanase, CGTase e xilanase/CGTase aumentou o volume da massa e o volume específico dos pães. Quanto ao... / The development of bread technology is a phenomenon of great impact on food industry. For years, many additives were used on bread technology, increasing the bread quality and improving the acceptance of general population. The aim of this work was to study the effects on the bread quality and on the staling process, by adding enzymes to the dough. The enzymes used were xylanase from the fungus Thermoascus aurantiacus CBMAI 756 in the concentrations 20, 35 and 50U/100 g wheat flour and/or cyclodextryn glycosiltransferase (CGTase) from the bacteria Bacillus clausii E16 in the concentration 15 and 30U/100 g wheat flour, partially purified. The action mechanisms of these enzymes under the substrates arabinoxylan and starch, respectively, were also evaluated. The breads added of xylanase, CGTase and xylanase/CGTase were produced in three distinct stages. For bread staling study, the breads were stored at 4ºC for 10 days, and they were analyzed regarding to the moisture content, texture and amylopectin retrogadation. The products obtained by the action of xylanase and CGTase on arabinoxylans and starch, respectively, isolated from wheat flour, were analyzed by using HPAEC-PAD and HPLC. The fungus T. aurantiacus exhibited a variation on the enzymatic profile according to each substrate used on its cultivation. The substrate which resulted in a better enzymatic profile for using on breadmaking was corncob, since this enzymatic extract exhibited high xylanolytic activity and low amylolytic and proteolytic activities. The addition of xylanase, CGTase and xylanase/CGTase increased the dough volume and the specific volume of the breads. Regarding to the staling study, the enzymes added separated or together reduced amylopectin retrogradation and firmness of the crumb during storage, when compared... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Anselmo Gomes de Oliveira / Banca: Marco Vinícius Chaud / Banca: Renata Fonseca Vianna Lopez / Resumo: O objetivo esse trabalho foi o desenvolvimento de sistemas microemulsionados ou subemulsionados estabilizados por fosfatidilcolina de soja (FS) associada à tensoativos hidrofílicos para veiculação de AmB. Foi avaliada a utilização de pluronic (PLU) como co-tensoativo e observou-se o predomínio de sistemas mais viscosos. O estudo do comportamento reológico das MEs, mostrou que todas as amostras apresentaram comportamento Newtoniano, mantendo a viscosidade constante independente da velocidade de deformação. Os estados de agregação da AmB foram avaliados através de seus espectros de absorção relativos às diferentes concentrações, inclusão em ciclodextrinas e incorporação no sistema microemulsionado selecionado. Foi verificada uma modificação relativa na proporção de monômeros do fármaco. A técnica de nefelometria foi realizada e indicou aumento no tamanho das gotículas da ME com o aumento da concentração da AmB. Verificou-se que a incorporação de AmB nos sistemas desenvolvidos é dependente da proporção relativa da fase interna oleosa. A liberação de AmB, in vitro, é mais prolongada à medida que aumenta a proporção de fase interna oleosa. Os sistemas microemulsionados e subemulsionados mostraram-se eficazes na veiculação de AmB apresentando-se como sistema reservatório facilitando a liberação prolongada. / Abstract: The objective of this work was the development of subemulsified and microemulsified systems stabilized by soya phosphatidylcholine (FS) and/or FS associated to hydrophylic surfactants to AmB veiculation. It was evaluated the use of pluronic (PLU) as co-surfactant and it was observed the predominancy of the more viscose systems. The study of the rheological behavior of MEs verified that all the samples have presented Newtonian behavior, maintaining the viscosity constant independent of the deformation speed. The states of aggregation of the AmB have been evaluated through its relative absorption specters to the different concentrations, inclusion in cyclodextrins and incorporation in the selected microemulsion system. A relative modification in the proportion of monomers of the drug was verified. The Nefelometry technique was performed and showed increase in the droplets size of the ME with increase to the AmB concentration. It was verified that the AmB incorporation in the developed systems is dependent on the oil phase. The in vitro release of AmB is more prolonged as long as the internal oil phase increases. The microemulsified and subemulsified systems appear as more effective in the AmB veiculation presenting themselves as reservatory system, facilitating the prolonged release. / Mestre

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2014-08-06T11:34:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Estudo_da_Encapsulacao_da_isotretinoina_nas_formas_livres_e_associada_a_ciclodextrinas_em_niossomas.pdf: 2030155 bytes, checksum: 19eecf0e1e4b0f42b01d0975d4634686 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-06T11:34:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Estudo_da_Encapsulacao_da_isotretinoina_nas_formas_livres_e_associada_a_ciclodextrinas_em_niossomas.pdf: 2030155 bytes, checksum: 19eecf0e1e4b0f42b01d0975d4634686 (MD5) Previous issue date: 2009-12-15 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Fundação de Apoio à Pesquisa - FUNAPE / Non-ionic surfactant vesicles (niosomes) and cyclodextrins (CDs) are able to modify physical-chemical properties of incorporated drugs. One of the major challenges for the topical administration of retinoids, such as isotretinoin (31cisRA), is the stability of these compounds in formulations capable of reducing their toxicity during the treatment. The purpose of this research was to develop vesicular carries capable to transport and deliver isotretinoin for topical application during acne treatment. The niosomes were obtained from Bryj®30:Cholesterol:DCP (50:25:10) by the film hydration method. The HP CDs:isotretinoin complex was obtained by agitation for 8 days in phosphate buffer pH 7.4. The vesicles were characterized and it was possible to encounter a large amount of morphological varieties, flexible structures and fluid membrane, after inclusion of free isotretinoin. The fluidness of the membrane that contains isotretinoin allowed leaking of the drug when in concentration above 5 mM. The HP CDs:Isotretinoin (20:1) increased the vesicle size considerably, also allowing drug leaking. The systems developed presented themselves as potential carries of isotretinoin for topical application and played the roll of drug delivery system, / Os niossomas, vesículas formadas por tensoativos não-iônicos, e as ciclodextrinas (HP CDs) são sistemas capazes de alterar as características físico-químicas originais de diversos fármacos. O maior desafio da administração tópica de retinóides, como isotretinoína (ácido 13-cis-retinóico), é a manutenção de sua estabilidade em formulações capazes de reduzir a sua toxicidade durante o tratamento. A proposta deste trabalho foi desenvolver sistema para o transporte e liberação da isotretinoína com potencial para aplicação na terapêutica tópica da acne. Os niossomas foram formados a partir de Brij®30:Colesterol:DCP (50:25:10) pelo método de hidratação do filme lipídico. O complexo HP Ciclodextrinasisotretinoína foi obtido por agitação durante 8 dias em tampão fosfato pH 7,4. Os niossomas foram caracterizados sendo possível verificar grande variedade morfológica, estruturas flexíveis e membrana fluída após a inclusão da isotretinoína livre. A fluidez da membrana que contém isotretinoína permitiu o vazamento de fármaco quando em concentrações maiores que 5 mM. O complexo HP CDs:isotretinoína (20:1) aumentou consideravelmente o tamanho das vesículas, também permitindo vazamentos. Os sistemas desenvolvidos possuem potencial para uso como carreadores da isotretinoína na aplicação tópica demonstrando comportamento de “sistema de liberação modificado”.

A fotoestabilidade é uma propriedade das moléculas que, quando utilizada como parâmetro farmacêutico, descreve como um fármaco responde à exposição à luz (solar ou artificial). No presente trabalho, foi avaliada a fotoestabilidade dos fármacos loratadina (LORA) e acetazolamida (ACZ) e de complexos LORA-ciclodextrinas. O estudo de fotoestabilidade de LORA (Capítulo 2) indicou que o fármaco é estável quando no estado sólido, porém, ocorre surgimento de coloração intensa. Por outro lado, quando em solução, observou-se degradação do fármaco, com surgimento de vários fotoprodutos denominados F1 a F15, dentre os quais foi possível identificar cinco compostos: F4 (C13H10N), F10 (C14H10CIN), F8 (C20H18CIN2O), F9 (C19H18CIN2) e F14 (C17H14CIN). A validação do método analítico CLAE, utilizado para quantificação de LORA em especialidades farmacêuticas (comprimidos e xaropes) é descrita no Capítulo 3. Na avaliação da fotodegradação forçada de formulações líquidas contendo LORA, foram degradados até 50% do fármaco. As formulações sólidas apresentaram-se fotoestáveis, observando-se perda de menos de 5% do fármaco. Não foram encontrados produtos de fotodegradação nas formulações, quando analisadas tal qual, obtidas do mercado. Dessa forma, as embalagens primárias garantiram sua estabilidade. A complexação de LORA com ciclodextrinas (Capítulo 4) mostrou-se um recurso bastante interessante para melhorar a fotoestabilidade do fármaco, uma vez que, após 12 horas de irradiação luminosa, é possível recuperar até 99% deste, quando na forma de complexo com γ-CD na proporção 1:1. Finalmente, o Capítulo 5 traz o método CLAE desenvolvido e validado para avaliação da acetazolamida (ACZ), o qual mostrou-se adequado para a quantificação do fármaco, obtendo-se ótima linearidade, precisão, exatidão e seletividade. Segundo as condições do guia Q1B, a ACZ se manteve estável quando submetida à radiação luminosa utilizando meios aquosos e no estado sólido. No entanto, a fotoestabilidade da ACZ foi afetada na presença de metanol, sendo possível quantificar três impurezas. / Photostability is a property of molecules that, when used as a pharmaceutical parameter, can describe how a drug responds to exposure to light (either solar or artificial). In this study, the photostability of the drugs loratadine (LORA) and acetazolamide (ACZ), as well as LORA-cyclodextrin complexes, was evaluated. A study of the photostability of LORA (Chapter 2) indicated that the drug is stable in its solid form, however intense coloring does occur. On the other hand, when in solution form, degradation of the drug was observed, with the appearance of several photoproducts that we labled F1 to F15, among which it was possible to identify five compounds: F4 (C13H10N), F10 (C14H10CIN), F8 (C20H18CIN2O), F9 (C19H18CIN2) and F14 (C17H14CIN). The validation of the analytical method by HPLC, used for the quantification of LORA in pharmaceutical products (tablets and syrups) is detailed in Chapter 3. In the evaluation of forced photodegradation of liquid formulations containing LORA, up to 50% of the drug was degraded. The solid formulations proved to be photostable, with a loss of less than 5% of the drug. No photodegradation products were found in the formulations when they were analyzed \"as is\" (the way they were obtained from the commercial market). Accordingly, their primary packaging protected their stability. The complexation of LORA with cyclodextrins (Chapter 4) proved to be an effective resource for improving the photostability of the drug, since, after 12 hours of luminous radiation, it was possible to recover up to 99% of the drug, when in the complex form with γ-CD, in the proportion 1:1. Finally, Chapter 5 describes the HPLC method developed and validated for the evaluation of acetazolamide (ACZ), which proved to be adequate for the quantification of the drug, with the attainment of optimal linearity, precision, exactness and selectivity. According to the conditions of the Q1B guideline, ACZ was stable when subjected to luminous radiation using aqueous means and in its solid state. However, the photostability of ACZ was affected by the presence of methanol, and we were able to quantify three impurities.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-12Bitstream added on 2014-06-13T21:05:13Z : No. of bitstreams: 1 blanco_kc_dr_rcla_parcial.pdf: 165788 bytes, checksum: 441eba3e7f81a4045fd71fd169810c38 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-03T11:42:26Z: blanco_kc_dr_rcla_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-03T11:43:59Z : No. of bitstreams: 1 000722980_20150710.pdf: 153337 bytes, checksum: ef6f673ca2880afc3824d702fd97308c (MD5) Bitstreams deleted on 2015-08-03T12:21:09Z: 000722980_20150710.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-03T12:22:22Z : No. of bitstreams: 1 000722980.pdf: 702124 bytes, checksum: 076acfb344282eec1bfa2c15d2efa0a1 (MD5) / As ciclodextrinas (CDs) resultam da degradação do amido por ciclodextrina glicosiltransferase (CGTases) produzidas principalmente pelo gênero Bacillus. As CDs são oligossacarídeos cíclicos capazes de formar complexos de inclusão com uma grande variedade de moléculas modificando suas características indesejadas sendo assim muito utilizadas em vários setores industriais. A linhagem bacteriana Gram-positiva e formadora de esporos nomeada como CGII foi isolada de águas residuárias de uma fábrica de farinha de mandioca em Ribeirão Bonito, São Paulo, Brasil e submetidos a estudos filogenéticos e testes bioquímicos. O planejamento composto central foi então utilizado para optimizar a composição do meio e as condições de cultivo para a produção da enzima ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase) em frascos agitados e em biorreatores. As características físico-químicas e bioquímicas da CGTase como pH e temperatura óptima; estabilidade em temperatura e pH; a influência de substâncias; cinética enzimática e produção de ciclodextrina foram avaliadas após purificação em cromatografia de afinidade usando a β-CD como ligante. Neste trabalho também foram investigadas novas aplicações da ciclodextrina produzida pela CGTase de B. lehensis: A síntese de fases sólidas de nanopartículas de óxido de ferro magnético (Fe4O3), óxido de cobre (CuO) e prata metálica (Ago) a partir de CDs por síntese hidrotérmica, usando CDs. As nanopartículas foram caracterizadas por difração de raios-x, espectroscopia de infravermelho e microscopia eletrônica de varredura. A enzima CGTase também foi imobilizada por ligação covalente no suporte magnetita síntetizada anteriormente, a qual foi silinalizado com 3-aminopropiltrimetilsilano e ativada com glutaraldeido. A sequência do gene 16S rRNA apresentou maior grau de similaridade com... / Cyclodextrins (CDs) are obtained from starch degradation by enzyme cyclodextrin glycosyltransferase (CGTases) produced mainly by Bacillus genus. The CDs are cyclic oligosaccharides capable of forming inclusion complexes with a wide variety of molecules, modifying their unwanted characteristics and, therefore are widely used in various industrial sectors. The bacterial strain Gram-positive and spore-forming named CGII was isolated from wastewater from a cassava mill in São Paulo, Brazil and subjected to phylogenetic studies and biochemical tests. A central composite design was then used to optimize the medium composition and culture conditions for the production of the enzyme cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) in bioreactors. The physicochemical and biochemical proprieties of CGTase as pH and temperature optimum, stability to pH and temperature, the influence of substances, enzyme kinetics and production of cyclodextrin were evaluated after purification by affinity chromatography using β-CD as a ligand. In this work new applications of cyclodextrin produced by CGTase from B. lehensis were also investigated. The solid phase synthesis of nanoparticles magnetic iron oxide (Fe4O3), copper oxide (CuO) and metallic silver (Ag) by hydrothermal synthesis using CDs were characterized by x-ray, infrared, and scanning electron microscopy. The enzyme CGTase was also immobilized on the support by covalent bond to the synthesized magnetite, which has been silylazed with 3- aminopropil-trimetilsilano and activated with glutaraldehyde. The 16S rRNA gene sequence indicated the highest degree of similarity to strains of Bacillus genomic MLB2 lehensis (100%). The response surface methodology showed that the model for the optimization of CGTase of B. lehensis reached a good level of agreement with experimental... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Roberto da Silva / Banca: Heloiza Ferreira Alves do Prado / Banca: Gustavo Orlando Bonilla Rodriguez / Resumo: A ciclomaltodextrina glucanotransferase (EC 2.4.1.19) é uma enzima capaz de formar ciclodextrinas a partir do amido. As ciclodextrinas são oligossacarídeos cíclicos, os quais os principais tipos são α-, β- e γ-CD, que apresentam 6, 7 e 8 unidades de glicose interligadas por ligações α-1,4. Duas bactérias alcalofílicas Bacillus sp subgrupo alcalophilus E16 e Paenibacillus campinasensis H69-3 foram estudadas por apresentarem boa produção de CGTase, ambas foram isoladas de amostras de solo. A atividade enzimática foi estudada utilizando os métodos já pré-determinados em estudos anteriores, como dextrinizante, CD-fenolftaleína e determinação de proteína. Para alcançar a purificação foram utilizados os processos de ultrafiltração e purificação por gel filtração em resina Sephadex G-75. A partir desses processos obteve-se resultados significativos, para o extrato purificado produzido por Bacillus sp subgrupo alcalophilus E16, obteve-se um fator de purificação de 35,4 vezes, um rendimento de 34.1 % e atividade específica de 13.10 U/mg, enquanto o extrato purificado de Paenibacillus campinasensis H69-3 resultou em um fator de purificação de 94.5 vezes, um rendimento de 33.2 % e a atividade específica de 23.64 U/mg. Foram feitos ensaios quanto a produção de ciclodextrinas utilizando o extrato bruto concentrado da CGTase por ultrafiltração produzida por Paenibacillus campinasensis H69-3, no perfil de hidrólise de diferentes amidos a 1.0%, a enzima atuou convertendo o amido em β-CD de melhor forma nos amidos de arroz e de mandioca, enquanto que na concentração de 2.5 % a melhor conversão se deu nos amidos de milho e mandioca. Quanto à dextrinização dos amidos, as concentrações de 1.0 % e 2.5 % apresentaram o mesmo perfil de hidrólise, sendo os amidos de mandioca, solúvel e batata apresentaram melhor conversão, quando comparadas aos amidos de arroz e milho. A dextrinização do amido foi mais efetiva na ... / Abstract: The cyclomaltodextrin glucanotransferase ( EC 2.4.1.19 ) is an enzyme able to form cyclodextrin from starch . Cyclodextrins are cyclic oligosaccharides , which are the main types α - , β - and γ - CD which have 6, 7 and 8 glucose units connected by α - 1, 4 bonds. Two bacterial alkalophilic Bacillus sp subgroup alcalophilus E16 and Paenibacillus campinasensis H69 -3 was studied due to their good CGTase production, both of which were isolated from soil samples. The enzymatic activity was studied using the methods already pre-determined in previous studies, as dextrinizante, CD-phenolphthalein and protein determination. To achieve the purification and ultrafiltration processes were used for purification gel filtration resin Sephadex G-75. From these processes significant results were obtained for the purified extract produced by Bacillus sp subgroup alcalophilus E16 gave a purification factor of 35.4 times, a yield of 34.1% and a specific activity of 13.10 U / mg , while the purified extract of Paenibacillus campinasensis H69-3 resulted in a purification factor of 94.5 times , a yield of 33.2 % and specific activity of 23.64 U / mg . Tests were made for the production of cyclodextrins using concentrated crude extract by ultrafiltration CGTase produced by Paenibacillus campinasensis H69 3, hydrolysis of starches from different profile than 1.0 % , the enzyme acted converting starch into β- CD best in rice starch and tapioca , whereas a concentration of 2.5 % and better conversion is given cassava and corn starch . As for dextrinizing the starch, the concentrations of 1.0% and 2.5% showed the same profile hydrolysis , and cassava starches , potato and soluble showed better conversion, when compared to starches of rice and corn. Dextrinisation of starch was more effective at 1.0% concentration , because practically all starch was hydrolyzed at a concentration of 2.5% was slower hydrolysis , for 24 hours, the starches in the study were ... / Mestre