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Avaliação dos efeitos do fator estimulador de colônia de granulócitos na isquemia/reperfusão renalRodrigues, Vinicius Correa 25 April 2014 (has links)
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Versao Final Dissertacao Vinicius Correa.pdf: 1171952 bytes, checksum: 7ccdb0d8814d6e89eb154aa3a8776310 (MD5) / FAPES / A isquemia/reperfusão (IR) renal, pela oclusão temporária da artéria renal, provoca lesões similares aos casos de falência renal aguda encontrados na prática clínica. Diversas estratégicas terapêuticas têm sido estudadas para minimizar as consequências dos danos provocados pela IR. O objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos do fator estimulador de colônia de granulócitos (G-CSF) em modelo animal de isquemia e reperfusão renal após o evento isquêmico. No presente estudo foram utilizados ratos Wistar, machos, pesando entre 150-250 g. Realizou-se uma curva dose-resposta para estabelecer uma dose segura de G-CSF sem prejuízo da função renal nas concentrações de 10, 50, 100 e 250 μg/kg/dia por 5 dias. Para o estudo de IR os animais foram distribuídos nos grupos: SHAM (n=10) (controle, sem clampeamento, com nefrectomia unilateral) que receberam solução glicosada 5% (veículo), IR (n=9) (IR sem tratamento, nefrectomia unilateral) e IR-GCSF (n=9) (IR associado com G-CSF 100 μg/kg por 3 dias). A isquemia foi obtida pelo clampeamento da artéria renal por 40 minutos, seguida de reperfusão. Os animais foram alocados em gaiolas metabólica para análise dos parâmetros de função renal e posteriormente sacrificados com sobredose de anestésico para coleta de sangue e órgãos de interesse. Os resultados obtidos foram normalizados e foi utilizada ANOVA-1 seguido do post hoc de Tukey, os valores estão apresentados como média ± EPM e considerados significantes quando p<0,05. Ao final do tratamento o total de leucócitos dos animais foi de 10370 células/dL (SHAM), 11775 células/dL (IR) e 28800 células/dL (IR-GSCF) (p>0,05; Grupos SHAM e IR vs IR-GCSF). Os valores de creatinina plasmática foram de 0,34±0,02; 0,43±0,03 e 0,33±0,02 mg/dL para os animais dos grupos SHAM, IR e IR-GSCF, respectivamente (p<0,05; IR vs IR-GCSF). A área de deposição percentual de colágeno na região medular foi de 17%±3,41, 33%±1,17 e 20 ±1,20% para os grupos SHAM, IR e IR-GSCF respectivamente (p<0,01; IR vs IR-GCSF). Houve ainda menor quantidade de células em apoptose e menor concentração de produtos avançados de oxidação de proteínas nos animais tratados quando comparados aos do grupo IR. Esses resultados demonstram o efeito protetor do G-CSF contra a lesão renal em modelo experimental de IR. / Ischemia/reperfusion (IR) in kidney obtained by temporary occlusion of the renal artery causes injuries similar to cases of acute renal failure founded in clinical practice. Several therapeutic strategies have been studied to minimize the consequences of the damage caused by IR. The aim of this study was to evaluate the effects of granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) in an animal model of renal ischemia and reperfusion after the ischemic event. In the present study male Wistar rats weighing between 150-250 g were used. We performed a dose-response curve to establish a safe dose of G-CSF without loss of kidney function at concentrations of 10, 50, 100 and 250 mg/kg/day for 5 days. For the study of IR animals were distributed in three groups: SHAM (n=10) (control, without clamping, with unilateral nephrectomy) who received reperfusion 5% glucose solution (vehicle), IR (n= 9) (IR unilateral nephrectomy) and IR- GCSF (n = 9) (IR injury associated with G-CSF 100 mg/kg for 3 days). Ischemia was achieved by clamping the renal artery for 40 minutes followed by reperfusion. The animals were placed in metabolic cages for analysis of parameters of renal function and subsequently euthanized with an overdose of anesthetic for blood and organs of interest. The results were normalized and the ANOVA-1 followed via a post hoc Tukey was used, the values are presented as mean ± SEM and considered significant when p<0.05. At the end of the treatment the amount of leukocytes of the animals was 10370 cells/dL (sham), 11775 cells/dL (IR) and 28800 cells/dL (IR- GSCF) (p < 0.05, vs. sham IR and IR-GCSF). The plasma creatinine values were 0.34 ± 0.02 , 0.43 ± 0.03 and 0.33 ± 0.02 mg / dL for animals in groups SHAM , IR and IR- GSCF , respectively (p<0.05, vs IR IR-GCSF). The percentage area of collagen deposition in the medullary area was 16.22 ± 3.41 %, 32.99% ± 1.17 and 20.0 ± 1.20 % for the SHAM, IR and IR- GSCF groups respectively (p < 0.01, IR vs IR-GCSF). There was even smaller amount of cells undergoing apoptosis and lower concentration of advanced oxidation protein products in treated animals when compared with the IR group. These results demonstrate the protective effect of G-CSF against renal injury in an experimental model of IR.
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Mecanismos celulares e sistêmicos de regulação da eosinopoiese: efeitos estimulatórios dos cisteinil-leucotrienos e dos glicocorticóides e efeitos inibitórios da via inos/cd95l e do g-csfPinto, Tulio Queto de Souza January 2011 (has links)
Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2013-03-22T14:03:31Z
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Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / A provocação por via respiratória com ovalbumina (OVA) em camundongos
sensibilizados promove, na medula óssea (MO), eosinopoiese, resposta exacerbada
à Interleucina(IL)-5, e mudanças no padrão de resposta em cultura à eotaxina, à IL-
13 e aos antiinflamatórios não esteroidais (NSAIDs). Em cultura de MO, a
Prostaglandina (PG) E2 induz apoptose de eosinófilos, por via dependente de NO
sintase indutível (iNOS) e ligante de CD95 (CD95L), enquanto a dexametasona
(DEXA) promove eosinopoiese, gerando eosinófilos agregados e morfológicamente
imaturos e protege contra da apoptose induzida por PGE2, provavelmente por
mecanismos que regulem a expressão ou ativação de integrinas. No presente
trabalho avaliamos se: a) in vitro, os efeitos dos NSAIDs, da IL-13 e da eotaxina
dependem da produção de cisteinil-leucotrienos (CisLT) e da sinalização via receptor
1 de CisLT (CysLT1R); b) in vitro, a DEXA regula expressão de VLA-4, que
promoveria a agregação e imaturidade dos eosinófilos, e se PGE2 contrapõe a ação
da DEXA; c) in vivo, G-CSF e dietilcarbamazina (DEC) promoveriam eosinopenia
medular e sistemica e se inibiriam a inflamação pulmonar alérgica. Resultados: a)
NSAIDs, eotaxina e IL-13 potencializam a eosinopoiese via produção de CisLT e
sinalização via CysLT1R. Os NSAIDs ainda protegem os eosinófilos da apoptose
induzida por PGE2 exógena. b) A interação farmacológica entre PGE2 e DEXA
modificam a ação de ambas, de forma estreitamente relacionada sobre a expressão
de VLA-4 e, em condições específicas, esses agentes sinergizam gerando
quantidades aumentadas de eosinófilos maduros. c) A DEC, inibidor da síntese de
LTs, que na filariose experimental possivelmente atua via iNOS, inibe a eosinopoiese
e os efeitos da provocação sobre o pulmão e a MO, através da via iNOS-CD95L. O
Fator Estimulante de Colônias de Granulócitos (G-CSF), estimulante da
neutropoiese, igualmente inibiu a inflamação pulmonar alérgica através da inibição
da eosinopoiese. Este trabalho é parte do projeto intitulado "Eosinofilia na
Asma Experimental", licenciado pela Comissão de Ética no Uso de Animais
(CEUA) da Fiocruz, sob nos L010/04 e L002/09. / Our laboratory has previously shown that airway allergen challenge in
ovalbumin-sensitized mice rapidly induces an increase in bone-marrow (BM)
eosinophil production (eosinopoiesis), along with an increased response to
Interleukin(IL)-5 in BM culture, changes in the ex vivo responses to cytokines and
immunomodulators, including nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) and
cysteinyl-leukotrienes (CysLT), and colonization of the lungs by eosinophil
progenitors. Early in the course of IL-5-induced eosinophil differentiation in BM
culture, Prostaglandin E2 (PGE2) induces apoptosis, through a pathway dependent
on the inducible isoform of NO synthase (iNOS) and the ligand for CD95 (CD95L).
NSAIDs enhance eosinopoiesis and protect eosinophils in this critical period from
exogenous PGE2, through a novel mechanism of action at the celular level. In this
study, we show that indomethacin and aspirin act through endogenously synthesized
CysLT, by establishing the essential roles of 5-lipoxygenase, LTC4 synthase and
CysLT1R receptors, as well as the cytoprotective effect of CysLT against exogenous
PGE2. The similarity between the effects of NSAIDs and those of eotaxin and IL-13
prompted us to reevaluate the contribution of endogenous CysLT to the effects of
these cytokines. We confirmed that eotaxin and IL-13 act through this mechanism,
and expand therefore the list of agents that, through CysLT, enhance eosinopoiesis,
protecting immature eosinophils from apoptosis induced through the iNOS-CD95L
pathway. Dexamethasone promotes BM eosinopoiesis, generating aggregated,
cytologically immature eosinophils, which are nevertheless protected from PGE2-
induced apoptosis. We examined therefore the possibility that dexamethasone
upregulates integrin expression/activation, thereby maintaining an immature celular
phenotype in cultured eosinophils, while PGE2 would have opposite effects on both
integrin function and cytological maturation. We show that the proapoptotic effects of
PGE2 are profoundly modified by its pharmacological interaction with
dexamethasone, paralleling the effects of both drugs on integrins, and leading to a
synergic generation of increased numbers of mature eosinophils, in very specific experimental conditions. Diethylcarbamazine (DEC) is an antihelminthic drug that
blocks leukotriene synthesis, and possibly acts in experimental filarial infection
through iNOS. We have examined, for the first time, the effects of DEC in a model of
allergic pulmonary inflammation, showing that DEC is very effective in preventing the
impact of airway allergen challenge on BM and lungs, through the in vivo operation of
the iNOS-CD95L pathway. Granulocyte Colony-stimulating Factor (G-CSF), which
stimulates neutropoiesis, mobilizes CD34+ hemopoietic progenitors from BM, and
exerts complex immunoregulatory effects, was shown in our study to have a strong
impact in a murine model of allergic pulmonary inflammation. Like DEC, G-CSF
suppressed BM eosinopoiesis, although through a different mechanism, since DEC
suppressed neutrophilia in the lungs with no effect on BM neutrophilia/neutropoiesis,
while G-CSF promoted neutropoiesis and induced blood neutrophilia, even though it
suppressed eosinopoiesis.
This work was part of the Research Project “Eosinophilia in
Experimental Asthma”, licensed by the Committee on the Ethical Use of
Laboratory Animals (CEUA) at FIOCRUZ, under numbers L010/04 and L002/09.
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Análise imuno-histoquímica de hipóxia renal em modelo de isquemia/reperfusão tratado com fator estimulador de colônia de granulócitosAraujo, Isabela Bastos Binotti Abreu de 26 June 2014 (has links)
Submitted by Elizabete Silva (elizabete.silva@ufes.br) on 2014-12-18T19:01:56Z
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Dissertação.Isabela Bastos Binotti Abreu.pdf: 2016865 bytes, checksum: ca0ed256308cfb660d25a867930edd7e (MD5) / O rim demonstra uma capacidade singular em reparar-se após danos locais, no entanto, depois de acometido, as chances de desenvolvimento de lesões renais elevam-se. A patofisiologia da isquemia/reperfusão (IR) é complexa porque há ocorrência simultânea de danos celulares e inflamação. O decréscimo na quantidade de oxigênio requer um sistema capaz de evitar seus efeitos prejudiciais e uma maquinaria molecular HIF (Hypoxia Inducible Factor), um complexo, atua como fator de transcrição de diversos genes desde os da regulação da proliferação celular e apoptose até a sinalização para angiogênese. O Fator Estimulador de Colônia de Granulócitos (G-CSF) é uma glicoproteína conhecida pela sua capacidade de promover a sobrevivência, proliferação e diferenciação de células estimulando a recuperação aos efeitos advindos da IR. Com o intuito de observar as influências dessas proteínas foi realizada uma análise semi-quantitativa de amostras renais submetidas ou não à IR, usando-se descrições microscópicas morfológicas e imunohistoquímicas,
com os cálculos e gráficos estatísticos foram feitos no software
GraphPad Prism®. Das análises morfológicas, constatou-se que as lesões características de IR foram observadas em espécimes não tratados: bolhas em
epitélio tubular; vacuolização citoplasmática, distalização tubular e congestão luminal. De forma análoga, foi encontrada nos tratados, contudo em estágios menos avançados e em animais controle, não foi houve esta diferença tissular. As análises de microscopia eletrônica demonstraram alteração na barreira filtrante com concomitante perda de outras características glomerulares. Aos animais controle foi observada a arquitetura típica, ao passo que para os animais tratados notou-se conservação da barreira. A presença de HIF-1α nos rins contralaterais demonstrouse significante quando comparadas às amostras isquêmicas e tratadas (p<0,05). Já a ocorrência da mesma proteína em rins isquêmicos não apresentou qualquer diferença. Analisando-se a proteína VEGF foi comprovado que em rins contralaterais não há diferença estatística, contudo nos rins esquerdos há significância entre os três grupos (p<0,05). Já a correlação entre estas duas proteínas não se mostrou estatisticamente significante. Em relação às atividades de proliferação e morte celulares, todos os três grupos foram significantes entre si (p<0,05). Ao que concerne o tratamento, foi demonstrada a atividade protetora do medicamento e uma possível interação molecular com a HIF, enquanto que a ativação desta proteína corrobora sua rota metabólica já previamente descrita. / The kidney demonstrates a natural ability to repair itself after damage locations, however, after affected the chances of developing kidney damage increases. The pathophysiology of ischemia/reperfusion (IR) is complex because there are simultaneous occurrence of cell damage and inflammation. The decrease in amount of oxygen requires a system capable of avoiding its adverse effects and molecular machinery HIF (Hypoxia Inducible Factor), a complex, acts as a transcription factor
for a number of genes since the regulation of cell proliferation and apoptosis by signaling to angiogenesis. The Granulocyte Colony-Stimulating Factor (G-CSF) is a glycoprotein known for its ability to promote the survival, proliferation and differentiation of cells stimulating the recovery effects resulting from the IR. In order to observe the influence of these proteins a semi-quantitative analysis of kidneys samples submitted or not to IR was performed using morphological microscopic descriptions and immunohistochemical, with statistical calculations and graphics were done in GraphPad Prism® software. Morphological analysis demonstrated characteristic IR lesions in untreated specimens: bubbles in tubular epithelium; vacuolization, tubular distalization and distal luminal congestion. Similarly, it was found in treaties, but in less advanced stages and in control animals, there were no tissue differences. Analyses of electron microscopy showed changes in the filtering barrier with concomitant loss of glomerular other features. In control animals the typical architecture was observed, while for the treated animals was noted preservation of barrier. The presence of HIF-1α in the contralateral kidneys showed significant when compared with ischemic and treated samples (p<0.05). The incidence of the same protein in ischemic kidneys showed no difference. Analyzing the VEGF protein was proven that in contralateral kidneys no statistical difference, however, in the ischemic kidney there is significance within the three groups (p<0.05). The correlation between these two proteins was not statistically significant. In relation to cell proliferation, cell death activity, all three groups were statistically significant (p<0.05). As regard the treatment was demonstrated the protective activity of the drug and possible molecular interaction with HIF, while activation of this protein
confirms its metabolic pathway previously described.
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Estudo pré-clínico de implante de células tronco hematopoéticas em camundongos com cardiopatia isquêmica induzida e tratados com fator de crescimento celularFraporti, Liziara Silva 04 October 2011 (has links)
Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-23T20:13:16Z
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Previous issue date: 2011-10-04 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Several therapeutic alternatives have been employed in the therapy of patients with heart disease. In recent years, cellular therapy has emerged as a new strategy for ischemic heart disease and represents the most promising approach to treating these diseases. The literature suggests that the use of cell growth factor directs the HSC to the myocardium and facilitates the implantation and differentiation of the cells at the implant site, but few preclinical and clinical data were made for this cytokine. The objective proposed in this study was to characterize the role of G-CSF on cardiac remodeling in an experimental model of myocardial infarction induced in mice implanted with or without CTH. Was performed to obtain peripheral blood hematopoietic stem cells, prior to mobilization with G-CSF in inbred mice and the cells were implanted in different experimental groups. The cytokine TGF-β, IL-6 were measured by the technique of Enzime linked immunosorbent assay (ELISA) and IL-2, MCP-1, TNF-α, IL-10, IL-12, IFN-γ by Cytometric Bead Array (CBA). Histopathology of heart tissue was performed by hematoxylin-eosin (HE) and Masson's Malory. The measurement of cytokines was observed that the concentration of TGF-β decreased the serum of the experimental groups (IAM, IAM-PBS, IAM-CTH-GCSF and IAM-GCSF) compared to SHAM control group (p = 0.0470 ). The concentration of IL-6 showed an increase in the IAM-PBS group and IAM-CTH-G-CSF groups compared to SHAM and IAM-GCSF (p = 0.6053). Observed that IL-12 increased in the IAM-PBS group, the heart tissue in relation to the SHAM groups, IAM-CTH-GCSF and IAM-GCSF, and IFN-γ decreased in group IAM-CTH-GCSF and IAM-GCSF. Data from histopathological analysis showed no change in the SHAM group. On the other hand in the infarcted groups, without any treatment (IAM) and IAM-PBS, were identified, areas of vascular ectasia, disorganization in the direction of cardiac fibers, transmural scar, mild angiogenesis and necrosis with little inflammatory infiltrate. Groups IAM-CTH and IAM-CTH-GCSF had a moderate angiogenesis, healing areas, slight fibrosis, and inflammatory infiltrate with predominance of macrophages, plasma cells and histiocytes, with mild fibrosis, vascular ectasia and disorganization of the extracellular matrix. In the IAM-GCSF group, was observed a moderate angiogenesis, with a pronounced inflammatory infiltrate, characteristic of plasma cells, areas of calcification and extensive fibrosis. The G-CSF seems to have an important role in cardiac remodeling in an experimental model studied. / Diversas alternativas terapêuticas vêm sendo empregadas na terapia de paciente com doenças cardíacas. Nos últimos anos, a terapia celular emergiu como uma nova estratégia para doenças cardíacas isquêmicas representando a mais promissora abordagem para tratamento destas doenças. A literatura sugere que o uso de fator de crescimento celular direciona as CTH para o miocárdio e facilita o seu implante e diferenciação no local, porém poucos estudos pré-clínicos e clínicos foram feitos para esta citocina. O objetivo proposto neste estudo foi caracterizar o papel do G-CSF no remodelamento cardíaco em modelo experimental de infarto induzido, em camundongos implantados ou não com CTH. Foi realizada a obtenção de CTH do sangue periférico, com prévia mobilização com G-CSF em camundongos isogênicos e as células foram implantadas em diferentes grupos experimentais. As citocinas TGF-β, IL-6 foram dosadas pela técnica de Enzume Linked Immunosorbant Assay (ELISA) e as citocinas IL-2, MCP-1, TNF-α, IL-10, IL-12, IFN-γ por Cytometric Bead Array (CBA). A análise histopatológica do tecido cardíaco foi realizado através da coloração de Hematoxilina-Eosina (HE) e Tricrômio de Malori. Na dosagem das citocinas observou-se que a concentração do TGF-β diminuiu no soro dos grupos experimentais (IAM, IAM-PBS, IAM-CTH-GCSF e IAM-GCSF) quando comparado ao grupo controle SHAM, (p=0,0470). A concentração da IL-6 apresentou aumento nos grupos IAM-PBS e IAM-CTH-G-CSF em relação aos grupos SHAM e IAM-G-CSF (p=0,6053). Observou que a IL-12 aumentou no grupo IAM-PBS, no tecido cardíaco em relação aos grupos SHAM, IAM-CTH-GCSF e IAM-GCSF e o IFN-γ diminuiu nos grupos IAM-CTH-G-CSF e IAM-GCSF. Dados da análise histopatológica não demonstraram nenhuma alteração no grupo SHAM. Por outro lado nos grupos infartados, sem nenhum tratamento (IAM) e IAM-PBS, foram identificadas, áreas de ectasia vascular, desorganização no sentido das fibras cardíacas, cicatrização transmural, discretas angiogênese e necrose, com pouco infiltrado inflamatório. Os grupos IAM-CTH e IAM-CTH-G-CSF apresentaram uma angiogênese moderada, áreas de cicatrização, discreta fibrose, infiltrado inflamatório com predomínio de macrófagos, plasmócitos e histiócitos, com discreta fibrose, ectasia vascular e desorganização da matriz extra-celular. No grupo IAM-G-CSF foi observado uma moderada angiogênese, com acentuado infiltrado inflamatório, característico de plasmócitos, áreas de calcificação e extensas áreas de fibrose. O G-CSF parece ter um importante papel no remodelamento cardíaco no modelo experimental estudado
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Estudo do efeito do fator estimulador de colônia de granulócitos associado a metilprednisolona na lesão medular aguda experimental em ratos / Study of the effect of granulocyte colony-stimulating factor associated with methylprednisolone in experimental acute spinal cord injury in ratsTeixeira, William Gemio Jacobsen 29 August 2017 (has links)
Introdução: Várias são as propostas descritas para tratar farmacologicamente a lesão traumática da medula espinal. A metilprednisolona já foi padronizada para uso clínico. O fator estimulador de colônia de granulócitos (G-CSF) tem sido promissor em estudos experimentais e clínicos. Não há pesquisas quanto ao efeito da associação dos dois fármacos. Objetivo: Avaliar o efeito do tratamento com o fator estimulador de colônia de granulócitos associado a metilprednisolona na lesão medular aguda experimental em ratos. Material e métodos: Foram avaliados 40 ratos Wistar submetidos a lesão medular moderada com o NYU-Impactor. Os animais foram divididos em quatro grupos de 10 ratos. O Grupo Controle não recebeu tratamento; o Grupo G-CSF, foi tratado com G-CSF no momento da lesão e diariamente ao longo dos cinco dias subsequentes; o Grupo Metilprednisolona, com metilprednisolona durante 24 horas; e o Grupo G-CSF/Metilprednisolona, com metilprednisolona durante 24 horas e G-CSF no momento da lesão e ao longo de cinco dias. Os animais foram mantidos vivos durante 42 dias; a avaliação funcional foi realizada com a aplicação da escala funcional de Basso, Beattie e Bresnahan (BBB) nos dias 2, 7, 14, 21, 28, 35 e 42 subsequentes à lesão. A avaliação dos potenciais evocados motores foi realizada no dia 42 e a avaliação histológica da lesão da região da medula espinal lesada, realizada logo após a eutanásia ocorrida no dia 42. Resultados e conclusões: A associação de metilprednisolona e G-CSF no tratamento do traumatismo medular contuso experimental em ratos promoveu melhora neurológica avaliada pela escala BBB superior à melhora promovida pela metilprednisolona e G-CSF quando utilizadas isoladamente. A associação teve também efeito sinérgico que resultou em melhora nos parâmetros histológicos no local da lesão. Não houve diferença entre os grupos quanto à avaliação neurofisiológica / Introduction: There are several proposals to pharmacologically treat traumatic spinal cord injury. Methylprednisolone has already been standardized for clinical use. Granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) has been promising in experimental and clinical studies. There is no research on the effect of the association of the two drugs. Objective: to evaluate the effect of combined treatment of the granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) associated with methylprednisolone in experimental acute spinal cord injury in rats. Material and methods: Forty male Wistar rats were submitted to a moderate spinal cord injury with the NYU-Impactor. The animals were divided into four groups of ten rats each. The Control Group was not treated; the G-CSF Group was treated with G-CSF at the time of injury and daily over the next five days; the Methylprednisolone Group was treated with methylprednisolone for 24 hours; the G-CSF/methylprednisolone Group, was treated with methylprednisolone for 24 hours and G-CSF at the time of injury and daily over the next five days. The animals were kept alive for 42 days; Functional evaluation was performed using the Basso, Beattie and Bresnahan (BBB) score on days 2, 7, 14, 21, 28, 35 and 42 following the spinal cord injury. Evaluation of motor evoked potentials was held and histological examination of the lesion of the spinal cord was done immediately after euthanasia on day 42. Results and conclusions: The combination of methylprednisolone and G-CSF in the treatment of experimental spinal cord injury in rats promoted neurological improvement as assessed by BBB scale with greater improvement than with methylprednisolone or G-CSF when used alone. The combination of treatment had also a synergistic effect resulting in improvement in histological parameters at the injury site. There was no difference between groups regarding neurophysiological evaluation
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Ação educativa do enfermeiro no cuidado domiciliar de adolescentes e crianças: uso do fator estimulador de crescimento de colônia granulocítica (G-CSF) – uma perspectiva fenomenológicaSilva, Elizabeth Maria Oliveira da January 2016 (has links)
Submitted by Fabiana Gonçalves Pinto (benf@ndc.uff.br) on 2017-08-28T20:29:28Z
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Previous issue date: 2016 / Mestrado Profissional em Enfermagem Assistencial / Problema: Atualmente o câncer infantil representa a segunda causa de morte na faixa etária de 5 a 19 anos, ultrapassado apenas pelos óbitos provocados por causas externas. E, a partir do diagnóstico, traça-se uma das propostas de tratamento, a terapêutica com os agentes antineoplásicos, conhecidos como quimioterápicos, os quais são responsáveis pelo longo período de internação, tendo em vista que um dos efeitos adversos desta terapêutica com maior incidência é a neutropenia pós-quimioterapia. Tal condição representada pela contagem de neutrófilos inferior a 1500/m3 torna necessário o uso de moduladores de resposta muitas vezes em domicílio. Objetivo: Este estudo tem como objetivo construir uma ação educativa durante a utilização em domicílio do fator estimulador de colônias granulocíticas (G-CSF), pelo paciente e/ou familiar, buscando conhecer o significado desta ação educativa a ser construída em conjunto com os familiares, considerando e respeitando o conhecimento e saber emanado por eles, em todo o processo holístico de saúde onde o indivíduo apresenta necessidades interligadas ao meio que o cerca. Método: É um estudo de natureza qualitativa, tipo descritivo com apropriação do método fenomenológico na percepção de Maurice Merleau Ponty, e a teoria transpessoal de Jean Watson e teve como cenário o centro de quimioterapia infantil do Instituto Nacional de Câncer, que é uma Instituição Pública Federal de referência na área oncológica, e obteve aprovação no CEP em 22/12/2015n° do CAAE-51715515.500005243 e no CEP da instituição coparticipante em 07/01/2016 n0 do CAAE-51715515.5.3001.5274. O estudo foi desenvolvido em conformidade com os princípios éticos estabelecidos na Resolução do Conselho Nacional de Saúde (CNS) 466/12. Resultado: A coleta de dados ocorreu no serviço de quimioterapia infantil por meio de entrevista com participação de dezoito familiares. As entrevistas foram transcritas na integra com apropriação do método de Giorgi e após analise a luz da fenomenologia da Percepção de Maurice Merleau-Ponty originou-se a formação de quatro categorias: Categoria 1-O impacto do diagnóstico de câncer na perspectiva do familiar; Categoria 2-O significado do câncer e tratamento na percepção do familiar; Categoria 3-A importância da espiritualidade na percepção do familiar da criança com câncer; 4-O significado do cuidado domiciliar na perspectiva do familiar. Considerações finais: Durante o decorrer deste estudo percorreu-se um caminho direcionado ao cuidado, tanto ao cuidador quanto do ser a ser cuidado com o objetivo de compreender e auxiliar os familiares no processo do cuidar a partir da percepção da experiência vivenciada por estes em um contexto familiar. Tais propósitos incluíram o respeito e valorização do conhecimento e das experiências desses familiares, incluindo suas crenças, cultura, e hábitos sociais. E, neste contexto é de extrema importância que o enfermeiro vivencie a experiência a partir da percepção do sujeito deste estudo, considerando os conceitos humanísticos, visando almejar uma assistência cada vez mais qualificada e de excelência, o que propiciou a construção de uma tecnologia educacional (cartilha educativa), no que se refere ao uso em domicilio do fator estimulador de crescimento de colônias de granulócitos / Problem: Currently, childhood cancer represents the second cause of death in the age group of 5 to 19 years, surpassed only by deaths caused by external causes. From the diagnosis, one of the treatment proposals is the treatment with antineoplastic agents, known as chemotherapeutic agents, which are responsible for the long period of hospitalization, considering that neutropenia is one of the adverse effects of this therapy with a higher incidence after chemotherapy. That condition, represented by the neutrophil count below 1500 / m3 makes it necessary to use response modulators often at home. Objective: This study aimed to construct an educational action during the use of the granulocytic colony-stimulating factor (G-CSF), by the patient and / or family member at home. It seeks to know the meaning of this educational action built together with the family, considering and respecting the knowledge and knowledge emanated by them, throughout the holistic process of health where the individual present needs interconnected to the environment that surrounds him. Method: It is a descriptive qualitative study, based on the phenomenological method from the perspective of Maurice Merleau Ponty, and the transpersonal theory of Jean Watson. It had as setting the child chemotherapy center of the National Cancer Institute, which is a public federal hospital, specialized in oncology area, and obtained approval in the CEP on 12/22/2015 under protocol number CAAE-51715515.500005243 and in the CEP of the participating Institution on 07/01/2016 under protocol number CAAE-51715515.5.3001.5274. The study was developed in conformity with the ethical principles set out in National Health Council (CNS) Resolution No.466/12. Results: Data collection took place in the infant chemotherapy service through an interview with the participation of eighteen relatives. We transcribed the interviews in full, with appropriation of the Giorgi method, followed by analysis under the perspective of the phenomenology of Perception by Maurice Merleau Ponty. Then, four categories originated category 1. The impact of the cancer diagnosis from the family perspective; category; 2. The meaning of the cancer and treatment under the perception of the family member; category 3. The importance of the spirituality under the perception of the family member of the child with cancer; -the meaning of home care from the perspective of the family member. Final Considerations. During the development of this study, we went through a path directed to care that reached both the caregiver and the being to be cared for with the objective of understanding and helping the family in the care process from the perception of experiences lived by them in a family context. Such purposes included the respect and valorization of the knowledge and experiences of these relatives, including their beliefs, culture, and social habits. And in this context, it is extremely important that nurses live the experience from the perception of the subject of this study, considering the humanistic concepts, aiming for an increasingly qualified and excellent assistance, which has enabled the construction process of an educational technology (educational leaflet) as regards the use at home of granulocytes colony stimulating factor
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Estudo do efeito do fator estimulador de colônia de granulócitos associado a metilprednisolona na lesão medular aguda experimental em ratos / Study of the effect of granulocyte colony-stimulating factor associated with methylprednisolone in experimental acute spinal cord injury in ratsWilliam Gemio Jacobsen Teixeira 29 August 2017 (has links)
Introdução: Várias são as propostas descritas para tratar farmacologicamente a lesão traumática da medula espinal. A metilprednisolona já foi padronizada para uso clínico. O fator estimulador de colônia de granulócitos (G-CSF) tem sido promissor em estudos experimentais e clínicos. Não há pesquisas quanto ao efeito da associação dos dois fármacos. Objetivo: Avaliar o efeito do tratamento com o fator estimulador de colônia de granulócitos associado a metilprednisolona na lesão medular aguda experimental em ratos. Material e métodos: Foram avaliados 40 ratos Wistar submetidos a lesão medular moderada com o NYU-Impactor. Os animais foram divididos em quatro grupos de 10 ratos. O Grupo Controle não recebeu tratamento; o Grupo G-CSF, foi tratado com G-CSF no momento da lesão e diariamente ao longo dos cinco dias subsequentes; o Grupo Metilprednisolona, com metilprednisolona durante 24 horas; e o Grupo G-CSF/Metilprednisolona, com metilprednisolona durante 24 horas e G-CSF no momento da lesão e ao longo de cinco dias. Os animais foram mantidos vivos durante 42 dias; a avaliação funcional foi realizada com a aplicação da escala funcional de Basso, Beattie e Bresnahan (BBB) nos dias 2, 7, 14, 21, 28, 35 e 42 subsequentes à lesão. A avaliação dos potenciais evocados motores foi realizada no dia 42 e a avaliação histológica da lesão da região da medula espinal lesada, realizada logo após a eutanásia ocorrida no dia 42. Resultados e conclusões: A associação de metilprednisolona e G-CSF no tratamento do traumatismo medular contuso experimental em ratos promoveu melhora neurológica avaliada pela escala BBB superior à melhora promovida pela metilprednisolona e G-CSF quando utilizadas isoladamente. A associação teve também efeito sinérgico que resultou em melhora nos parâmetros histológicos no local da lesão. Não houve diferença entre os grupos quanto à avaliação neurofisiológica / Introduction: There are several proposals to pharmacologically treat traumatic spinal cord injury. Methylprednisolone has already been standardized for clinical use. Granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) has been promising in experimental and clinical studies. There is no research on the effect of the association of the two drugs. Objective: to evaluate the effect of combined treatment of the granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) associated with methylprednisolone in experimental acute spinal cord injury in rats. Material and methods: Forty male Wistar rats were submitted to a moderate spinal cord injury with the NYU-Impactor. The animals were divided into four groups of ten rats each. The Control Group was not treated; the G-CSF Group was treated with G-CSF at the time of injury and daily over the next five days; the Methylprednisolone Group was treated with methylprednisolone for 24 hours; the G-CSF/methylprednisolone Group, was treated with methylprednisolone for 24 hours and G-CSF at the time of injury and daily over the next five days. The animals were kept alive for 42 days; Functional evaluation was performed using the Basso, Beattie and Bresnahan (BBB) score on days 2, 7, 14, 21, 28, 35 and 42 following the spinal cord injury. Evaluation of motor evoked potentials was held and histological examination of the lesion of the spinal cord was done immediately after euthanasia on day 42. Results and conclusions: The combination of methylprednisolone and G-CSF in the treatment of experimental spinal cord injury in rats promoted neurological improvement as assessed by BBB scale with greater improvement than with methylprednisolone or G-CSF when used alone. The combination of treatment had also a synergistic effect resulting in improvement in histological parameters at the injury site. There was no difference between groups regarding neurophysiological evaluation
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Efeito da administração do G-CSF nos mecanismos efetores e imunorreguladores na neurite experimental autoimune induzida em ratos Lewis = Effect of the administration of the G-CSF onto the effector and immuneregulatory mechanisms of the experimental autoimmune neuritis induced in Lewis rats / Effect of the administration of the G-CSF onto the effector and immuneregulatory mechanisms of the experimental autoimmune neuritis induced in Lewis ratsPradella, Fernando, 1987- 03 November 2013 (has links)
Orientadores: Alessandro dos Santos Farias, Leonilda Maria Barbosa dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T01:58:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2013 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Imunologia / Mestre em Genética e Biologia Molecular
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Mobilização e coleta de CD34+ para transplante autólogo de células progenitoras periféricas hematopoiética em pediatria : análise de duas doses diferentes de G-CSF / Mobilization and collection of CD34+ cells for autologous transplantation of peripheral blood hematopoietic progenitor cells in children : analysis of two different G-CSF dosesEid, Katia Aparecida de Brito, 1964- 27 August 2018 (has links)
Orientador: Simone dos Santos Aguiar / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-27T08:24:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2015 / Resumo: Introdução: As células progenitoras periféricas hematopoiéticas (CPHP) é uma das alternativas de enxerto para a realização de transplante autólogo em crianças, adolescente e adulto jovem portadores de tumores sólidos e linfomas. Na mobilização, a dose clássica de G-CSF é 10µg/kg/peso do paciente SC em dose única. Acredita-se que doses maiores de G-CSF aplicadas duas vezes ao dia aumentariam o número de CD34+ coletadas com o menor número de leucaféreses. A tecnologia atual permite que seja realizado leucaférese em crianças com baixo peso (<10 kg). Objetivo: o mote do estudo foi avaliar se o G-CSF na dose de 15µg/kg peso do paciente ao dia e fracionado em duas doses, 10µg/kg e 5µg/kg, diminuiria o número de leucaférese realizada para atingir o mínimo de 3x106/kg/peso do paciente de CD34+ quando comparada com G-CSF na dose convencional, 10µg/kg/peso do paciente em dose única. Métodos: Os pacientes foram divididos em dois grupos. Grupo 10 formado por pacientes que receberam G-CSF 10µg/kg/peso SC ao dia em dose única às 6h e grupo 15 formado por pacientes que receberam G-CSF 15µg/kg/peso SC ao dia dividido em duas vezes, 10µg/kg SC às 6h e 5µg/kg SC às 18h. As leucaféreses foram realizadas em um separador celular automático de fluxo contínuo com anticoagulante ACD-A, foram processados 4 volemias em cada leucaférese. Pacientes com < 20 kg receberam priming de concentrado de hemácias filtradas e irradiadas (CHFI) durante as leucaféreses. A realização do transplante autólogo ocorreu com o número mínimo de 3x106/kg/peso de CD34+. Resultados: Sessenta e cincos pacientes portadores de tumores sólidos e linfomas foram avaliados, 39 pacientes receberam 10µg/kg/peso SC ao dia em dose única às 6h de G-CSF e 26 pacientes receberam 10µg/kg SC às 6h e 5µg/kg SC às 18h de G-CSF. Foram realizadas 146 leucaféreses, 110 (75,3%) no grupo 10 e 36 (24,7%) leucaféreses no grupo 15. No grupo 10 foi obtido uma mediana de 3 (1-7) leucaféreses e coletado uma média de 8,89x106/kg (± 9,59) de CD34+, o grupo 15 realizou uma mediana de 1 (1-3) leucaféreses e coletado uma média de 5,29x106/kg (± 4,95) de CD34+. Uma diferença estatística importante foi o número de leucaféreses (p<0,0001). Nenhum paciente apresentou intercorrências durante as leucaféreses. Os pacientes que receberam CHFI (<20 kg) não apresentaram hipovolemia nas leucaféreses realizadas. Conclusão: Para coletar o mínimo de 3x106/kg/peso de CD34+, a aplicação de G-CSF 15µg/kg/peso fracionada diminuiu significativamente o número de leucaférese realizada / Abstract: Introduction: The peripheral hematopoietic progenitor cells are a graft choice for performing autologous transplantation. In the mobilization, the classical dose of G-CSF is 10?g/kg of the patient in a single dose. There is a theory that higher doses of G-CSF applied twice daily could increase the number of collected CD34+ cells with a smallest number of leukapheresis. Objective: The aim of this study is to evaluate if a fractionated-dose of G-CSF at 15?g/kg of patient may reduce the number of leukapheresis for achieving the minimum target of 3 x 106/kg of CD34+ cells as compared to conventional dose of G-CSF. Methods: Patients were divided into two groups. Group 10: patients who received a single dose daily of G-CSF 10?g/kg and Group 15: patients who received twice dose daily of G-CSF 15?g/kg. The leukapheresis were processed in an automated cell separator. The autologous transplantation happened when the minimum number of 3x106/kg CD34+ was reached. Results: Group 10 enrolled 39 patients who received 10?g/kg of G-CSF and group 15 had 26 patients who received 15?g/kg fractionated of G-CSF. There were a total of 146 aphaeresis; 110 (75.3%) in group 10 and 36 (24.7%) group 15. Group 10 collected a median of 3 (1-7) leukapheresis and a mean of 8.89 x106/kg (± 9.59) CD34+, whereas group 15 had a median of 1 (1-3) leukapheresis and collected a mean of 5.29 x106/kg (± 4.95). The relevant difference statistic was the number of aphaeresis (p<0.0001). Conclusion: To collect a minimum target of 3x106/kg of CD34 +, the application of fractionated-dose of 15?g/kg G-CSF decreased significantly the number of leukapheresis performed / Doutorado / Saude da Criança e do Adolescente / Doutora em Ciências
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Fatores que influenciaram nos resultados das coletas de células progenitoras hematopoéticas em crianças portadoras de neuroblastoma avançado / Factors influencing results of peripheral hematologic progenitor cells harvesting in children with advanced NeuroblastomaBorba, Claudio Carneiro 10 May 2016 (has links)
Objetivos: Avaliar os resultados das coletas de células hematopoéticas CD34+, por aférese, em crianças portadoras de neuroblastoma tratadas no Serviço de Oncologia e Hematologia do Instituto da Criança do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo; estudar os fatores (idade, peso, estimulação com quimioterapia, dose do G-CSF, uso terapêutico de 131I-MIBG e tempo entre exposição à quimioterapia prévia) que influenciaram na mobilização e no rendimento da coleta de células CD34+ no sangue periférico e associar a quantidade de células CD34+ obtidas com a evolução clínica do paciente. Métodos: Trata-se de um estudo retrospectivo de pacientes com neuroblastoma submetidos à coleta de células-tronco hematopoéticas entre janeiro de1989 e junho 2012. Resultados: Avaliados 45 prontuários de crianças com idade mediana de 3,1 anos (0-12 anos), 26 (57%) apresentavam metástase em medula óssea ao diagnóstico. O tempo entre diagnóstico e o início da mobilização foi em média 19,7 ± 12 meses (mediana de 15,8 meses). Dos pacientes estudados, 11/45 (24,4%) receberam 131I-MIBG terapêutico antes da mobilização. Somente cinco pacientes (11,1%) receberam quimioterapia associada ao G-CSF para mobilização; as demais 40 crianças (88,9%) receberam exclusivamente G-CSF na dose média 26,5 ± 5,3 ug/kg/dia (mediana 28 ug/kg/dia). Não houve correlação entre o número máximo de células CD34+ no sangue periférico com a idade (p=0,9), com o peso (p=0,63), com a dose do G-CSF (p=0,46) ou com o intervalo entre o diagnóstico e o início da mobilização (p=0,09). A mediana da quantificação de células CD34+/uL no sangue periférico foi de 36,6 células, média de 45,2 ± 42,6 (mínimo 1,7 e máximo 236,3). Pacientes que haviam recebido 131I-MIBG previamente à mobilização apresentaram menor número de células CD34+/uL no sangue periférico (p=0,04). Em 26 pacientes (57,8%) foi possível coletar mais de 2,0x106 células CD34+/Kg na primeira coleta e em 19 pacientes (42,2%) foram necessárias mais de uma coleta, sendo que, oito pacientes (17,8%) apresentaram falha de mobilização. Os pacientes que apresentaram menor quantidade de células CD34+/uL no sangue periférico (<= 12) não conseguiram número maior ou igual a 2,0x106 células CD34+/Kg em 81,8% das coletas. O número mediano de células infundidas foi de 2,66 x106 células CD34+/Kg (média 3,38 ±1,6; mínimo 1,8; máximo 8,74 x106 CD34+/Kg). Os pacientes apresentaram contagem de leucócitos maior que 1000/mm3 e de plaquetas maior 50000/mm3 por dois dias consecutivos em média, no dia 13 ± 10 e no dia 46 ± 33, respectivamente, após infusão. Conclusões: A coleta de células-tronco hematopoéticas por aférese foi factível em todos os pacientes do estudo. Não houve influência significativa da idade, do peso, da dose do G-CSF e do tempo entre diagnóstico e inicio da mobilização, no número máximo de células. O uso prévio à coleta de 131I-MIBG terapêutico parece influenciar negativamente no pico de células CD34+ no sangue periférico (p=0,04). A contagem de células CD34+ no sangue periférico é importante fator preditivo do resultado das coletas de células progenitoras hematopoéticas CD34+ por aférese / Objectives: To evaluate the results of peripheral hematopoietic CD34+ stem cells harvesting in children with neuroblastoma treated at Serviço de Oncologia e Hematologia do Instituto da Criança do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo; regarding age, weight, stimulation with chemotherapy, G-CSF dose, time between diagnosis and the mobilization beginning and therapeutic 131I-MIBG use and the influence in mobilization and peripheral harvesting of autologous hematopoietic stem cells and to associate the amount of CD34+ cells obtained with the patient\'s clinical evolution. Methods: Between January 1989 and June 2012, children with neuroblastoma underwent to mobilization and peripheral hematopoietic stem cell harvesting and were retrospectively analyzed. Results: The charts of 45 children were reviewed. Median age was 3.1 years (0-12years), and 26 (57%) had metastases in bone marrow at diagnosis. Average time between diagnosis and mobilization was 19.7 ± 12 months (median, 15.8 months). 11/45 (24.4%) received therapeutic 131I-MIBG prior to mobilization. The average G-CSF dose was 26.5 ± 5.3mg/kg/day (mean 28mg/kg/day). There was no correlation between the absolute number of peripheral CD34+ cells and age (p=0.9), weight (p=0.63), G-CSF dose (p=0.46) or the range between diagnosis and early mobilization (p=0.09). The median quantification of CD34+ cells/uL in peripheral blood was 36.6, average 45.2 ±42.6 (minimum 1.7 and maximum 236.3 CD34+ cells/uL). Patients who had received therapeutic 131I-MIBG prior to mobilization, showed fewer absolute amount of CD34+/uL cells in peripheral blood (p=0.04). In 26 patients (57.8%) it was possible to harvest more than 2.0 x106 CD34+ cells/kg at first apheresis and in 19 patients (42.2%) more than one collection were necessary, and eight patients (17.8 %) failure to mobilize. Patients presenting less than 12 CD34+ cells/uL in peripheral blood on the harvesting day failed to reach more then 2.0x106 cells CD34+/kg in 81.8% of the apheresis procedures. It was infused a median number of 2.66 x106 CD34+ cells/kg (mean 1.6 ± 3.38; min 1.8; max 8.74 x106 CD34+ cells/kg). After the stem cells infusion, patients had white blood cells count greater than 1000/mm3 and platelet greater than 50,000/mm3 for two consecutive days on average after 13 ±10 and 46 ± 33 days, respectively. Conclusions: The hematopoietic stem cells harvesting was feasible in all patients included in this report. The G-CSF dose, age, weight and the period between harvesting and diagnosis showed no influence in mobilization and harvesting of autologous hematopoietic stem cells, however the absolute number of peripheral blood CD34+ cells/uL is an important predictive factor for the harvesting outcome. Additionally our findings support for the first time the notion that the use of therapeutic 131I-MIBG could have a negative impact in mobilization of peripheral blood stem cells in children with neuroblastoma
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