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Avaliação dos efeitos neurotóxicos induzidos por benzo(a)pireno sobre parâmetros comportamentais e bioquímicos

Maciel, Érica Santos January 2012 (has links)
Benzo[a]pireno (BaP) é um contaminante ambiental formado durante a combustão incompleta ou pirólise de material orgânico. O papel do BaP como um potente agente mutagênico e carcinogênico está bem definido, no entanto, poucos estudos foram publicados relacionados aos efeitos neurotóxicos provocados por este composto. Devido a presença de BaP como contaminante de alimentos e água, o objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos da administração subcrônica oral de BaP, nas concentrações de 1 mg/kg e 2 mg/kg, em ratos machos e fêmeas sobre parâmetros comportamentais (atividade locomotora e memória de reconhecimento de objetos), dano ao DNA através do ensaio cometa, medida do conteúdo e secreção da proteína S100B, medida de GFAP e alterações na via das MAPKs (ERK1/2, JNK1/2 and p38MAPK). As duas doses utilizadas neste estudo são equivalentes aos níveis de contaminação em fumantes, consumidores de grandes quantidades de produtos como carne defumada, grelhados e peixes, ou mesmo em indivíduos com alta exposição ocupacional. Como resultados, encontramos, que a atividade locomotora aumentou nos animais tratados com BaP, tanto os machos como as fêmeas. No teste de reconhecimento de objetos, os machos apresentaram um déficit na memória de curta duração, memória esta não testada no grupo das fêmeas. O dano ao DNA foi significativamente maior nos animais tratados com BaP, onde foi observado danos de classe três e quatro, os mais graves. No imunoconteúdo de GFAP os animais tratados com BaP apresentaram uma tendência de aumento de astrogliose hipocampal, que provavelmente poderá ser confirmada se aumentarmos o tempo de administração. A secreção de S100B apresentou-se alterada tanto no líquor quanto no soro, a qual pode atuar tanto na sinalização neurônio-astrócito, em condições fisiológicas ou patológicas, quanto em diversas doenças neurodegenerativas. Foi observado também alteração na via das MAPKs, onde o tratamento com BaP diminuiu a fosforilação da ERK2 hipocampal, não alterando as demais testadas. O BaP foi capaz de induzir danos ao DNA, alterar a atividade locomotora, prejudicar a memória e alterar parâmetros neuroquímicos dos animais, mesmo em uma concentração encontrada como contaminante de alimentos e água, apontando para a necessidade de uma legislação mais eficiente para este composto, visto que pode acarretar sérios problemas à saúde. / Benzo[a]pyrene (BaP) is an environmental contaminant formed during incomplete combustion or pyrolysis of organic material. The role of the BaP as a potent mutagenic and carcinogenic agent is well defined; however, few studies have been published related to the neurotoxic effects of BaP. Due to the presence of BaP as a contaminant of food and water, the objective of this study was to investigate the effects of subchronic oral administration of BaP, concentrations of 1mg/kg and 2mg/kg, in male and female rats on behavioral parameters (locomotor activity and object recognition memory), DNA damage through comet assay, as the content and secretion of S100B, measure of GFAP and changes in the pathway of MAPKs (ERK1/2, JNK1/2 and p38MAPK). The two doses used in this study are equivalent to the contamination levels in smokers, consumers of large quantities of products such as smoked meat, grilled meats and fish, or even in individuals with high occupational exposure. As a result, there was an increased locomotor activity in both males and females treated with BaP. In the object recognition test, males showed a deficit in short-term memory. This parameter was not tested in the group of females. The DNA damage index, evaluated by the nucleus fragment migration (DNA grade 1-4) was significantly increased in animals treated with BaP, due to the nigher presence of grade 3-4 of DNA tail lengh. In immunocontent GFAP, animals treated with BaP showed a trend of increased astrogliosis hippocampal, which can probably be confirmed if we increase the time of administration. The secretion of S100B showed changed both in serum and cerebrospinal fluid, which can act in neuron-astrocyte signaling in physiological or pathological conditions, and in various neurodegenerative diseases. It was also observed changes in the MAPK pathway, whereas treatment with BaP decreased the phosphorylation of ERK2 hippocampal, without altering the others tested. BaP was able to induce DNA damage, alteration of locomotor activity, impair memory, and changes neurochemical parameters of the animals, even at a concentration found as a contaminant of food and water, pointing to the need for legislation more efficient for this compound, since it can cause serious health problems.
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Desenvolvimento de ferramenta computacional para obtenção automática de deslocamento e anotação de outros parâmetros em testes comportamentais do tipo campo aberto / Development of software to automatically obtain displacement and annotation of other parameters in open field behavioral tests

Isabela Maria de Oliveira 10 August 2018 (has links)
Testes comportamentais do tipo Campo Aberto figuram dentre os mais básicos e consolidados para estudos de comportamento animal, sendo, portanto, amplamente utilizados em pesquisas de Neurociência e Farmacologia. Através dele se pode avaliar os efeitos da imposição de diferentes condições no comportamento de animais, bem como comparar ou caracterizar perfis típicos de comportamento entre linhagens de uma mesma espécie. Consistindo de soltar animal em uma caixa e observar, dentre outros parâmetros, seu deslocamento e preferência em permanecer nas áreas próximas às paredes ou nas centrais, a extração desses dados pela forma tradicional acabar por ser limitante à obtenção plena de resultados. Isso posto, este trabalho visa oferecer aos pesquisadores um meio para obter os dados de maneira automatizada, sem o desgaste de ficar assistindo o vídeo do teste para anotar o deslocamento. Escrita em Python, utilizando técnicas consolidadas de Visão Computacional e operações de compreensão acessível, esta ferramenta além de ser Open Source pode ser ajustada à extração de outros parâmetros e à aplicação em outras modalidades do teste, além de oferecer a medida do deslocamento de forma mais precisa. / Open Field Test is a basic and consolidated test used in Animal Behavior studies, especially Neuroscience and Pharmacology. Through it, its possible to evaluate the effects in behavior of imposing different conditions, as well to compare or characterize typical behavior profiles between lineages of the same species. Consisting of releasing an animal in a box and observing, among other parameters, its displacement and preference in remaining in the areas near the walls or in the central ones, the extraction of these data in the traditional way ends up being limiting to obtaining full results. That said, this essay aims to offer researchers a way to get the data in an automated way, without need watching the video of the test to note the displacement. Written in Python, using consolidated techniques of Computational Vision and operations of accessible comprehension, this tool besides being Open Source can be adjusted to the extraction of other parameters and application in other modalities of the test, besides offer a more accurate measure of displacement.
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Presença de galos em um sistema alternativo de produção de ovos visando o bem-estar animal / Presence of roosters in an alternative system of egg production aimed at animal welfare

Dayana Cristina de Oliveira Pereira 19 February 2016 (has links)
Dentre as cinco liberdades citadas pela Farm Animal Welfare Council a liberdade comportamental consiste na possibilidade de exercer os comportamentos naturais das espécies. Neste contexto a presença de galos no sistema de produção de ovos pode contribuir para o bem-estar das aves ao propiciar a manifestação dos comportamentos reprodutivos que são inerentes à espécie. Assim, esta pesquisa teve como objetivo avaliar o efeito da inserção de galos em um sistema alternativo de produção de ovos, visando avaliar os seus efeitos tanto no bem-estar animal quanto na produção de ovos de poedeiras criadas nesse tipo de sistema de produção. O experimento foi conduzido em galpões da empresa Korin Agropecuária, a qual se baseia nos princípios e conceitos da Agricultura Natural, conforme preconizado por Mokiti Okada (Japão, 1882 - 1955). Foram utilizadas poedeiras e galos da linhagem Isa Brown no período compreendido entre o início e o pico de produção 15° e 31° semanas de idade, respectivamente. Foram estabelecidos dois tratamentos: Tratamento 1: criação de poedeiras sem galos (4500 aves) e Tratamento 2: criação de poedeiras com galos (4500 poedeiras e mais 250 galos). Esta proporção foi estabelecida considerando as variáveis custo de produção e área disponível. As variáveis avaliadas foram: microclima das instalações, produção de ovos, mortalidade e comportamento das aves. Este último foi analisado uma vez por semana em três períodos distintos: manhã (8hs às 9hs), meio do dia (12hs às 13hs) e à tarde (16hs às 17hs), as demais variáveis foram avaliadas diariamente. Utilizouse o delineamento casualizado em blocos. As médias foram analisadas pelo teste de Tukey, a 5% de significância. A análise do microclima das instalações evidenciou, exceto no período da manhã, que as aves foram submetidas a períodos constantes de estresse, caracterizados pelo Índice de Temperatura de Globo Negro e Umidade ITGU (acima de 74) e pela entalpia (acima de 70). Mesmo neste contexto a produção de ovos e mortalidade das aves foram compatíveis aos índices preconizados pelo manual da linhagem no tratamento sem galos. No tratamento com galos os índices foram ainda melhores, caracterizado pela maior produção de ovos e menor índice de mortalidade. A análise comportamental permitiu identificar a presença de todos os comportamentos indicativos de bem-estar e baixa ocorrência de comportamentos anômalos e agonísticos em ambos os tratamentos. Pôde-se notar que a introdução de galos, além dos benefícios produtivos, ampliou o repertório de atividades das aves, ao introduzir os comportamentos reprodutivos. Somado a isso, houve redução significativa no comportamento reflexo de tolerância, o qual segundo as discussões desta pesquisa correlacionam-se à impossibilidade de expressar os comportamentos reprodutivo. Tais resultados ratificam os galos como sendo uma importante ferramenta na busca pelo bem-estar das aves. Essa pesquisa, portanto, inaugura novas possibilidades de se avaliar, sob outras condições, a presença dos galos nos sistemas de produção de ovos. Novas proporções de poedeiras e galos devem ser investigadas a fim de se estabelecer um valor que mantenha os benefícios citados e torne a introdução de galos mais eficiente em termos econômicos. / Among the five freedoms cited by the Farm Animal Welfare Council, behavioral freedom is the ability to perform natural behaviors of the species. In this context the presence of roosters on egg production system can contribute to the welfare of the birds by providing the manifestation of reproductive behaviors that are inherent to the species. Thus, this research aimed to evaluate the effect of inclusion of roosters in an alternative system of egg production in order to evaluate its effects on both animal welfare and on the production of laying eggs created on this type of production system. The experiment was conducted on the facilities of Korin Agricultural Company, which is based on the principles and concepts of Natural Agriculture, as recommended by Mokiti Okada (Japan, 1882-1955). Hens and roosters of Isa Brown breeds were used on the period between the beginning and the peak of the production at 15th and 31st weeks of age, respectively. Two treatments were established: Treatment 1 - creation of laying hens without roosters (4,500 birds) and Treatment 2 - rearing of laying hens (4,500 hens plus 250 roosters). This ratio was settled considering variables as the production cost and available area. The parameters evaluated were: microclimate of the facilities, egg production, mortality and birds\' behavior. The latter was analyzed once a week in three different periods: morning (8 am to 9 am), midday (12 pm to 13 pm) and afternoon (16 pm to 17 pm), the other parameters were assessed daily. The experimental design was in randomized blocks. The means were analyzed by Tukey\'s test. The microclimate analysis of the facility showed, except in the morning, the birds were subjected to constant stress periods, characterized by high levels of Black Globe Temperature and Humidity Index - BGHI, (over 74) and enthalpy (over 70). Even in this context, egg production and mortality of birds were comparable to the parameters given in the Breed Manual for a hen only production system. Higher egg production and lower mortality were observed in the hens that were housed with roosters. Behavioral analysis identified the presence of all behaviors indicative of high welfare and low occurrence of anomalous and agonistic behavior in both treatments. It might be noted that the introduction of roosters, in addition to the production benefits, expanded the repertoire of activities and behaviors of the birds. These results confirm the roosters as an important tool in the search for bird welfare. This research therefore opens new possibilities to evaluate, under other conditions, the presence of roosters in egg production systems. New proportions of layers and roosters should be investigated in order to establish the correct proportion of hens to roosters that maintains the benefits mentioned and make the introduction of roosters more efficient in economic terms.
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Análise do microbioma de bactérias de luz intestinal de hamsteres e sua correlação com LPS circulante, decorrente da translocação microbiana na leishmaniose visceral experimental / Microbial analysis of intestinal light bacteria of hamsters and their correlation with circulating LPS, due to microbial translocation in experimental visceral leishmaniasis

Daiane Barros Dias Mendonça 29 November 2017 (has links)
A leishmaniose visceral, na sua forma clinica ativa, caracteriza-se por febre de longa duração, hepatoesplenomegalia e caquexia. No Brasil, a letalidade é, em média, de 7% e as principais causas de morte são: hemorragia, comorbidade com doenças imunossupressoras e infecção bacteriana. O mecanismo de aumento de infecção bacteriana na LV não está claro e uma das hipóteses, é que pode haver translocação bacteriana da mucosa intestinal para o lúmen dos vasos sanguíneos e ocasionar uma maior severidade da resposta imuno-inflamatória e com consequente piora clínica. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ocorrência de translocação microbiana em hamsteres infectados experimentalmente com Leishmania (L.) infantum e correlacionar com as alterações histopatológicas encontradas no intestino dos animais infectados. Hamsteres (Mesocricetus auratus) foram infectados intraperitonealmente com 2x107 amastigotas de L. (L.) infantum e eutanasiados após 48, 72 horas e 15, 45 e 90 dias de infecção. Como grupo controle foram utilizados hamsteres inoculados intraperitonealmente com meio de cultura RPMI. Foram coletados: sangue, fezes, baço, intestinos grosso e delgado. Para detecção de amastigotas na mucosa intestinal, foi utilizada a técnica de PCR em tempo real (qPCR), imunohistoquímica e análise histopatológica, sendo que nesta técnica também foram avaliadas alterações histológicas no tecido intestinal. O baço foi utilizado para determinar a carga parasitária através da técnica de Stauber. Para detecção da translocação microbiana ou produtos desde, foi realizada a quantificação de lipopolissacarídeo (LPS) em plasma. Para avaliar a possível mudança da flora bacteriana intestinal, foi realizado sequenciamento bacteriano de amostra de fezes de hamsteres controles e infectados nos vários tempos de infecção. Observamos aumento da carga parasitária em baço e em intestino com o decorrer da infecção, sendo a diferença significativa aos 90 dias de infecção. Paralelamente, observamos aumento de LPS circulante nos animais infectados em diferentes tempos, 48 horas, 72 horas, 45 dias e 90 dias, com diminuição no período intermediário de 15 dias, porém com diferença significante somente aos 90 dias após a infecção em relação ao grupo controle. Alterações histopatológicas foram observadas no intestino grosso e delgado, variando de infiltrado inflamatório leve a grave, enterite, histiocitose e ainda presença de amastigotas. As alterações observadas ocorreram a partir de 48 horas de infecção, diferenciando a população do infiltrado inflamatório entre neutrófilos, linfócitos, e ainda eosinófilos em intestino grosso de animais com 90 dias de infecção. O sequenciamento de DNA bacteriano das fezes mostra que houve alteração no microbioma dos animais, porém não há identidade significante, ou seja, acima de 95% na maioria das bactérias. Concluímos que as alterações de histologia da mucosa, a invasão de amastigotas neste tecido e o aumento do LPS, sugerem que a translocação microbiana é um evento ocorrente durante a infecção por L. (L.) infantum neste modelo experimental. / Visceral leishmaniasis, in its active clinical form, is characterized by long-lasting fever, hepatosplenomegaly and cachexia. In Brazil, the lethality is, on average, 7% and the main causes of death are hemorrhage, comorbidity with immunosuppressive diseases and bacterial infection. The mechanism of increased bacterial infection in LV is unclear and one of the hypotheses is that there may be bacterial translocation of the intestinal mucosa to the lumen of the blood vessels and cause a greater severity of the immune-inflammatory response and consequent clinical worsening. The objective of this work was evaluate the occurrence of microbial translocation in Leishmania (L.) infantum infected-hamsters and correlate with the histopathological changes found in the gut of infected animals. Hamsters (Mesocricetus auratus) were infected intraperitoneally with 2x107 amastigotes of L. (L.) infantum and euthanized after 48, 72 hours and 15, 45 and 90 days of infection. As a control group, hamsters were inoculated intraperitoneally with RPMI culture medium. Were collected: blood, feces, spleen, large and small intestines. To detection amastigotes in intestinal mucosa, real-time PCR (qPCR), immunohistochemistry and histopathological analysis were used, and histological alterations in intestinal tissue were also evaluated. Spleen was used to determine the parasitic load through the Stauber technique. To detection of microbial translocation or products related, was performed quantification of lipopolysaccharide (LPS) in plasma. In order to evaluate the possible change in intestinal bacterial flora, bacterial sequencing of sample faeces from control and infected hamsters was carried. We observed increased parasite load on spleen and intestine as the infection progressed, the difference being significant at 90 days of infection. At the same time, we observed increased circulating LPS in infected animals at different times, 48 hours, 72 hours, 45 days and 90 days, with decrease in the intermediate period of 15 days, howeversignificant difference was observed only at 90 days post-infection in relation to control group. Histopathological changes were observed in the large and small intestine, ranging from mild to severe inflammatory infiltrate, enteritis, histiocytosis, and amastigotes. The changes occurred from 48 hours of infection, differentiating the population of the inflammatory infiltrate between neutrophils, lymphocytes, and even eosinophils in the large intestine of animals with 90 days of infection. |Bacterial sequencing shows that there was a change in the microbiome of the animals, but there is no significant identity, ie, above 95% in most bacteria. We conclude that changes in mucosal histology, invasion of amastigotes in this tissue and increase in LPS, suggest that microbial translocation is an event occurring during L. (L.) infantum infection in this experimental model.
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Efeitos da exposição ao etanol em camundongos adolescentes e adultos: comportamentos relacionados à recompensa, sensibilização comportamental e o papel dos sistemas dopaminérgico e glutamatérgico. / Effects of ethanol exposure in adolescent and adult mice: behaviors related to reward, behavioral sensitization and the role of the dopaminergic and glutamatergic systems.

Priscila Fernandes Carrara do Nascimento 16 September 2011 (has links)
O uso de drogas de abuso inicia-se principalmente na adolescência, um período em que o sistema nervoso central está passando por mudanças maturacionais neuroquímicas e neuroanatômicas. Assim, o objetivo desse projeto foi avaliar efeitos comportamentais e neuroquímicos da exposição ao etanol em camundongos adolescentes e adultos. O presente projeto investigou: o desenvolvimento da sensibilização comportamental ao etanol em camundongos adolescentes e adultos; possíveis alterações na sinalização dopaminérgica e glutamatérgica no núcleo accumbens e estriado de camundongos sensibilizados ao etanol durante a adolescência; participação da via AMPc/PKA na sensibilização comportamental ao etanol em camundongos adolescentes e adultos; efeitos reforçadores do etanol em camundongos adolescentes e adultos por meio do modelo de auto-administração; efeitos reforçadores do etanol utilizando-se o aparelho de preferência condicionada de lugar, que possibilita a quantificação do tempo de permanência do animal no ambiente associado aos efeitos da droga; efeito de intoxicações crônicas seguidas de abstinência no padrão de consumo. / The use of drugs of abuse begins mainly in adolescence, a period in which the central nervous system is undergoing neurochemical and neuroanatomical maturation changes. Thus, the aim of this project was to evaluate the behavioral and neurochemical effects of ethanol exposure in adolescent and adult mice. The present project investigated: the development of behavioral sensitization to ethanol in adolescent and adult mice; possible alterations in the dopaminergic and glutamatergic sinaling in the nucleus accumbens and striatum of mice sensitized to ethanol during adolescence; participation of the AMPc/PKA pathway in the behavioral sensitization to ethanol in adolescent and adult mice; reinforcing effects of ethanol in adolescent and adult mice in a model of self-administration; reinforcing effects of ethanol in a model of conditioned place preference, that allows the quantification of the animal time spent in the environment associated with the drug effects; effect of chronic intoxication followed by withdrawal in the consumption pattern.
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Efeitos adaptativos induzidos pelo estresse crônico imprevisível nos receptores do fator liberador de corticotrofina tipo 2 e de glicocorticóides no sistema nervoso central de ratos. / Effects of chronic unpredictable stress on corticotrophin releasing factor type 2 and glucococorticoid receptors in the rat brain.

Marília Brinati Malta 30 August 2012 (has links)
O estresse é um fenômeno conservado e observado evolutivamente, que tem como objetivo assegurar a sobrevivência do indivíduo. Porém quando o organismo perde a capacidade de se autorregular, torna-se uma ameaça. Algumas psicopatologias, como ansiedade e depressão, sugerem o envolvimento dos sistemas CRF e noradrenérgico e de níveis elevados de GCs. Avaliamos nesse trabalho algumas alterações morfofisiológicas e comportamentais decorrentes da exposição do estresse crônico imprevisível (EI) em ratos machos. Avaliados 24 h após o último estímulo estressor, os animais submetidos ao EI apresentaram níveis elevados de corticosterona plasmática, de RNAm de CRF2 e expressão de GR em regiões encefálicas (LSi e VmH e LSi, CeA, BST e PVH, respectivamente). Essas alterações morfofisiológicas foram, em parte, decorrentes da ação de GCs e de NE. Não foram observadas alterações comportamentais quanto à anedonia e ansiedade. Dessa maneira, podemos dizer que o EI utilizado nesse estudo, foi capaz de induzir algumas alterações morfofisiológicas, porém não comportamentais. / While acute stress initiates neuronal responses that prepare an organism to adapt to challenges, chronic stress may lead to maladaptative responses that could result in diseases. Evidence suggests the involvement of CRF system and high corticosterone levels in stress-related psychiatric disorders such as anxiety and major depressive disorders. The aim of this work was to investigate whether chronic unpredictable stress (CUS) could modulate de CRF system, GR expression in the CNS and behavior in male rats. Results showed an increase in corticosterone plasmatic levels, CRF2 mRNA and GR expression in specific regions of the CNS (LSi e VmH e LSi, CeA, BST e PVH, respectively), associated with the limbic system at 24 h after the last stress session. The chronic treatment with an inhibitor of GCs synthesis (metyrapone) and adrenergic receptor antagonists (atenolol and phentolamine) prevented the CUS effects in CRF2 mRNA levels and GR expression. No anxiety or depression-like behavior was observed in rats submitted to CUS. We conclude that CUS cause biochemical alterations since the increase CRF2 mRNA levels and GR expression in limbic region, but these changes were not able to cause behavioral changes.
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Efeito do transplante de células mononucleares da medula óssea na frequência de crises e no desempenho cognitivo de ratos com epilepsia induzida por lítio-pilocarpina

Venturin, Gianina Teribele January 2008 (has links)
A epilepsia atinge cerca de 1% da população mundial, sendo que aproximadamente 30% desses pacientes não respondem ao tratamento medicamentoso. Por sua vez, as células-tronco representam uma esperança de tratamento da epilepsia, visto que têm grande capacidade de proliferação, diferenciação e regeneração de tecidos, podendo restaurar circuitos neurais e restabelecer a excitabilidade neuronal fisiológica. O objetivo deste estudo é verificar se as células mononucleares da medula óssea (CMMO) apresentam potencial terapêutico no controle das crises epilépticas e do dano neuronal progressivo induzido pela epilepsia experimental. Os animais foram injetados com lítio-pilocarpina (127 mg/kg e 60 Mg/kg i.p., respectivamente) para indução de status epilepticus (SE). As crises comportamentais foram classificadas de acordo com a escala de Racine e a duração do SE foi controlada com diazepam (10 mg/kg, i.p., 90 minutos). Os animais controle receberam solução salina. Após 22 dias, o total dos animais foi dividido em quatro grupos: Pilocarpina; Pilocarpina + CMMO, Salina e Salina + CMMO. Os grupos CMMO receberam transplante de células da camada mononuclear da medula óssea, obtidas de camundongos EGFP C57BL/6, via veia caudal (107 células, 200L), e os demais salina. Os animais tratados com pilocarpina foram monitorados por vídeo durante sete dias pré-transplante e outros catorze dias após o procedimento, para observação e computação de crises espontâneas recorrentes (CERs). Ainda, 45 dias depois da injeção das células os animais foram avaliados na tarefa do labirinto aquático de Morris (LAM) e a seguir na tarefa de reconhecimento de objetos, e logo após utilizou-se o teste do eletrochoque máximo para avaliação do limiar convulsivo. Decorridos sete meses do transplante os animais foram sacrificados e foram coletados os hipocampos direito e esquerdo, e amostras de cerebelo, bulbo olfatório, coração, pulmão e fígado para análise da presença de EGFP por PCR. Nossos resultados demonstram que os animais tratados com pilocarpina que receberam injeção de CMMO têm melhor desempenho no LAM quando comparados com o grupo pilocarpina. Esta melhora foi significativa durante o primeiro e último dias de treino, e também durante o teste em todos os parâmetros avaliados: latência, número de cruzamentos e permanência no quadrante alvo. Ainda, as CMMO reduziram o número de crises. Entretanto, na tarefa de reconhecimento de objetos e no teste do eletrochoque máximo não há diferença entre os animais epilépticos tratados ou não com CMMO. Finalmente, não foram detectadas bandas correspondentes à EGFP em nenhuma das amostras estudadas. Nos últimos anos, estudos que buscam tratamentos baseados em células-tronco para as mais diversas doenças neurodegenerativas foram vistos com muito interesse. Este tipo de tratamento pode ser útil também no tratamento da epilepsia crônica, dado o potencial que estas células têm de, independentemente do mecanismo, restaurar o micro ambiente neuronal e re-estabelecer a excitabilidade neuronal fisiológica. Palavras-chave: Epilepsia, células-tronco, testes comportamentais. / Epilepsy affects 1% of the world population and 30% of these patients are refractory to medication now available. Stem cells host hope in the treatment of epilepsy. Given their ability to proliferate, differentiate and regenerate tissues they could fix neural circuits and reestablish the physiological excitability of neurons. This study aimed to verify the therapeutic potential of bone marrow mononuclear cells (BMMC) on seizure control and on progressive neuronal loss induced by experimental epilepsy. Experimental status epilepticus (SE) was induced by lithium-pilocarpine injection (127 mg/kg; ip and 60 mg/kg; ip respectively). Seizures were scored by Racine’s scale. The duration of SE was controlled with diazepan (10mg/kg; ip; 90 minutes after SE onset). Control animals received saline other than pilocarpine. Twenty-two days after SE, rats were randomly assigned into four groups: Pilocarpina; Pilocarpine+BMMC; Control and Control+BMMC. BMMC groups received cell transplantation (obtained from EGFP C57BL/6 mice) via tail vein (107 cells, 200L). The other groups received saline in the same volume. Pilocarpine-treated animals were monitored for the presence of spontaneous seizures for 21 days (7 prior to cell transplant and 14 afterwards).Forty-five days after transplant rats underwent cognitive evaluation in the object recognition task and the Morris water maze (MWM), followed by the maximal electroshock test to evaluate seizure threshold. Rats were sacrificed seven months after transplantation. The hippocampi, cerebellum, olfactory bulb, and samples of the heart, lung and liver were collected in order to verify the presence of EGFP using PCR. Our results demonstrate that pilocarpine-treated rats injected with BMMC perform better in the MWM when compared to pilocarpine only. This difference was significant in the first and last training days and during the probe trial, when we evaluated the escape latency, time in target quadrant and number of crossings. In addition, seizure frequency was reduced by BMMC. Despite that, in the object recognition task and in the maximal electroshock test no difference was found between epileptic rats treated with BMMC or saline. Finally, we didn’t detect the presence of EGFP in any of the analyzed samples. During the last years much has been done to study the application of stem cells in several neurodegenerative diseases. This kind of approach can also be valid in the treatment of chronic epilepsy, given these cells have the potential of, whichever the mechanism might be, restore the neuronal micro environment and reestablish neuronal physiological excitability.
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Comportamento e desempenho de leitões leves submetidos à uniformização com leitões de pesos distintos. / Behaviour and growth performance of low-birth weight piglets cross-fostered with piglets of different birth weights

Souza, Lisiane Pires de January 2010 (has links)
O objetivo do trabalho foi avaliar o comportamento, a sobrevivência e o desempenho de leitões leves quando uniformizados com leitões de maior peso. Os leitões foram transferidos para 60 fêmeas receptoras, sendo divididos em três grupos (G) (n= 20): G1- 12 leitões leves (0,80-1,25 kg); G2- seis leitões leves e seis leitões médios (1,40-1,60 kg) e G3- seis leitões leves e seis leitões pesados (>1,70 kg). Para a análise, os grupos 2 e 3 foram subdivididos em LG2 (leves do G2), MG2 (médios do G2), LG3 (leves do G3) e PG3 (pesados do G3). Observações comportamentais foram efetuadas nos dias 1, 2, 4 e 6 (avaliação visual direta) e nos dias 3 e 5 (câmeras de vídeo) após o nascimento. Após a abertura do escamoteador, foi observado que os leitões LG3 e HG3 se dirigiram mais para o úbere do que os leitões LG1, LG2 e IG2, no dia 6. O percentual de mamadas perdidas foi maior nos leitões LG3 do que nos outros grupos, no dia 1, e maior do que os leitões LG1, IG2 e HG3, no dia 2. No dia 4, mais leitões leves (LG1, LG2 e LG3) perderam mamadas do que os leitões IG2 e HG3. No dia 1, os leitões IG2 brigaram mais durante a mamada do que os leitões LG1 e LG3. Também no dia 1, o número de brigas e o percentual de leitões envolvidos em brigas, durante 15 minutos após a mamada, foi maior nos leitões LG1, LG3 e HG3 do que nos leitões LG2. No dia 2, mais leitões LG2 se envolveram em brigas do que leitões LG1, LG3 e HG3. Maior número de brincadeiras foi observado no dia 2 em leitões IG2 e HG3 em comparação aos leitões LG1, LG2 e LG3. Não houve diferença entre os grupos no percentual de leitões vocalizando, antes e após a mamada, em todos os dias de observação. Os leitões leves (LG1, LG2 e LG3) apresentaram peso semelhante, nos dias 4, 8, 12 e 16 após o nascimento, independentemente de serem ou não misturados com leitões de maior peso; no entanto, a taxa de sobrevivência até o dia 16 foi menor nos leitões LG3 do que nos outros grupos. Apesar do peso ao desmame dos leitões leves não ter sido influenciado pelo peso de seus companheiros de leitegada, os resultados de sobrevivência mostram que eles não devem ser misturados com leitões pesados. / The aim of the study was to evaluate the behaviour, pre-weaning survival and growth performance of low-birth weight piglets cross-fostered with piglets of higher weights. Piglets were transferred to 60 foster sows, and divided in three groups (G; n=20): G1- 12 low-birth weight piglets (0.80-1.25 kg); G2- six low-birth weight piglets and six intermediate-birth weight piglets (1.40-1.60 kg), and G3- six low-birth weight piglets and six high-birth weight piglets (>1.70 kg). For analysis purposes, groups G2 and G3 were subdivided in LG2 (six G2 light piglets); IG2 (six G2 intermediate-weight piglets), LG3 (six G3 light piglets), and HG3 (six G3 heavy piglets). Behavioural observations were performed on days 1, 2, 4 and 6 (visual direct observation) and on days 3 and 5 (video recording) after birth. After opening the creep box, more LG3 and HG3 piglets moved towards the udder than LG1, LG2 and IG2 piglets, on day 6. The percentage of missed nursings was higher in LG3 piglets than in the other groups, on day 1, and more than LG1, IG2 and HG3 piglets, on day 2. On day 4, light piglets (LG1, LG2 and LG3) missed more nursings than IG2 and HG3 piglets. On day 3, video recording showed a higher percentage of missed nursings in LG1, LG2, and LG3 piglets as compared to HG3 piglets. On day 1, the number of fights during nursing was higher in IG2 than in LG1 and LG3 piglets. Also on day 1, number of fights and percentage of piglets engaged in fights, during 15 min after nursing, were higher in LG1, LG3 and HG3 than in LG2 piglets. On day 2, more LG2 piglets were engaged in fights than LG1, LG3 and HG3 piglets. More playful behaviours were observed on day 2 in IG2 and HG3 piglets compared to LG1, LG2 and LG3 piglets. There were no differences among groups in percentage of piglets vocalizing, before and after nursing, on any day of observation. Light piglets (LG1, LG2, and LG3) presented similar body weight on days 4, 8, 12 and 16 after birth, regardless of being or not mixed with piglets of higher weights; however, the survival rate until day 16 was most compromised in LG3 piglets compared to the other groups. In spite of weaning weight of low-birth weight piglets not be influenced by the weight of their littermates, the results of survival until weaning show that they should not be mixed with high-birth weight piglets.
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Padrões espaciais de ocorrência de tiranídeos (Aves: Tyrannidae) nas florestas com araucária : aspectos filogenéticos e funcionais

Brum, Fernanda Thiesen January 2011 (has links)
Os gradientes de riqueza e diversidade foram extensivamente explorados por ecólogos, estudando as interações dos organismos com o meio em escalas locais, e biogeógrafos, que buscam entender como os organismos se distribuem atualmente e no passado na superfície da terra em relação a dinâmicas de extinção, especiação e dispersão. Mas tão fundamental quanto saber o que determina o número de espécies em um determinado local, é saber o que determina quem são as espécies que ocorrem ali, ou seja, a composição de espécies. Nas últimas décadas, os ecólogos têm reconhecido que a organização das comunidades não é determinada apenas pelo ambiente atual e por interações biológicas, mas também pela história evolutiva dos clados que compõem as comunidades e pelo histórico biogeográfico da região. Os caminhos evolutivos de cada linhagem que compõe o pool de espécies se tornam as peças chave na explicação dos padrões de riqueza e diversidade atuais. Eu avaliei fatores ambientais e espaciais que influenciaram a organização dos clados de tiranídeos em sítios distribuídos ao longo da área de ocorrência da floresta com Araucaria, e como os gradientes de estrutura filogenética, juntamente com variáveis espaciais, ambientais e de disponibilidade de recurso, afetam a distribuição dos tiranídeos frugívoros naquele bioma. Os resultados mostraram que fatores históricos são os principais determinantes da organização dos clados e da variação espacial da frugivoria por Tyrannidae ao longo do gradiente de distribuição da floresta com Araucaria. Os resultados indicam que os processos ecológicos de organização das diferentes comunidades localizadas nesse tipo florestal são, de maneira geral, determinados pela dinâmica histórica de retração e expansão da floresta com Araucaria como um todo. A utilização de gradientes filogenéticos ajudou a elucidar alguns mecanismos históricos, como dinâmicas passadas de dispersão e especiação dos grupos, por trás de padrões de variação na frugivoria, que indicam uma possível conservação filogenética de nicho. / Gradients of richness and diversity were extensively addressed by ecologists studying the interactions between organisms and the environment in local scales, and by biogeographers seeking to understand the current and past distribution of organisms in relation to extinction, speciation and dispersal dynamics. Besides untangling the drivers of species richness in a certain site, it is also important to understand what species occur in that site, i.e. species composition. Recently, ecologists have recognized that community assembly is not only influenced by current environment and biological interactions, but also by the evolutionary history of clades in the community and by the biogeographical history of the region. The evolutionary path of each lineage within the species pool is now considered important to explain the current richness and diversity patterns. I evaluated how environmental and spatial factors drive Tyrannidae phylogenetic assembly in sites distributed along Araucaria forest range and how phylogenetic gradients, together with resource availability, spatial and environmental variables, affect the frugivorous Tyrannidae in that biome. The results showed that historical factors are the main determinants of phylogenetic assembly and of spatial variation in frugivory by Tyrannidae in the distribution range of the Araucaria forests. The results indicated that ecological processes that structure community assemblies in the Araucaria forests are, in a general way, determined by the historical dynamic of expansion and contraction of Araucaria forest as a hole. The use of phylogenetic information helped us to elucidate some historical mechanisms behind the variation pattern of frugivory, which indicated possible phylogenetic niche conservatism.
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Efeito do enriquecimento ambiental nas alterações motoras de ratos submetidos à hipóxia-isquemia neonatal

Goldani, Rafael January 2010 (has links)
A encefalopatia hipóxico-isquêmica neonatal é a causa mais importante de dano cerebral que ocorre no período de desenvolvimento e maturação causando à criança sequelas neurológicas de grande impacto ao longo da vida. O ambiente é um importante aliado no processo de reabilitação neuropediátrica, sendo muito utilizado pelos profissionais da saúde. Estímulos ambientais podem servir como estratégia de tratamento e inúmeros estudos têm demonstrado o seu potencial neuroprotetor. Este trabalho teve por objetivo avaliar o comportamento motor em dois momentos do desenvolvimento e os possíveis benefícios do enriquecimento ambiental em ratos submetidos à hipóxia-isquemia cerebral neonatal. Ratos Wistar machos e fêmeas foram submetidos a um modelo de lesão hipóxico-isquêmica encefálica neonatal no 7º dia pós-natal. Em um primeiro momento, foram avaliados com 22 dias e 42 dias de vida, e num segundo momento, foram submetidos a um protocolo de enriquecimento ambiental que iniciava no 8º dia de vida. Para avaliação do comportamento motor foi utilizado o teste de suspensão na barra, teste rota Rod e teste da caminhada na escada horizontal. Os animais não apresentaram alterações sensoriomotoras com 22 dias de vida, porém com 42 dias as alterações foram significativas. O enriquecimento ambiental promoveu uma recuperação parcial dos déficits motores em ratos machos quanto à latência de queda no teste da barra e no Rota Rod. As fêmeas demonstraram um melhor aproveitamento do ambiente enriquecido que lhes proporcionou uma melhor performance no teste da caminhada e uma curva de aprendizado no teste Rota Rod. Quanto à morfologia, o enriquecimento ambiental não foi capaz de promover modificações significativas no dano hipocampal e estriatal. Com base nos nossos resultados, podemos concluir que tanto animais com 22 DPN como com 42 DPN apresentaram alterações sensoriomotoras promovidas pela HIE neonatal e são influenciadas pelo gênero. O enriquecimento ambiental teve efeito neuroprotetor, melhorando o desempenho motor sem alterações morfológicas significativas. / The neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy is the most important cause of brain damage that occurs during development and maturation, causing neurological damage to the child with a big impact throughout the life. The environment is important in the process of neuropediatric rehabilitation and is widely used by health professionals. Enriched environmental serve as a treatment strategy and several studies have demonstrated its effects neuroprotective. This study aimed to evaluate motor behavior in two stages of development and the possible benefits of environmental enrichment in rats with neonatal cerebral hypoxia-ischemia. Male and female Wistar rats were subjected to a model of hypoxic-ischemic neonatal brain at the 7th postnatal day. At first, were evaluated 22 days and 42 days of life, and subsequently, underwent a protocol of environmental enrichment that began on the 8th day of life. For evaluation of motor behavior test was used to Grip Test, Rota Rod test and ladder walking test. The animals no showed sensorimotor disturbance with 22 days of life but with 42 days the changes were significant. Environmental enrichment promoted a partial recovery of motor deficits in male rats on the latency to fall in the Grip test and the Rota Rod test. The females showed a better application of the enriched environment that gave them a better performance in the ladder walking test and a learning curve in Rota Rod test. As to morphology, environmental enrichment did not cause significant changes in striatal and hippocampal damage. Based on our results, we conclude that changes in sensorimotor function sponsored by HIE is progressive and influenced by gender. Environmental enrichment had a neuroprotective effect, improving motor performance, without significant morphological changes.

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