Sabe-se que a desnutrição modifica a resposta imune específica e inespecífica do organismo frente a agentes infecciosos comprometendo a produção e a função de células linfo-hemopoéticas, estando associada a modificações da resposta imune, resultando em maior suscetibilidade à infecções, porém os mecanismos exatos que comprometem o sistema imune em estados de desnutrição ainda estão para serem esclarecidos. A literatura relata que aproximadamente 60% das infecções que evoluem para sepse são adquiridas no ambiente hospitalar, envolvendo geralmente bactérias Gram negativas e incidindo especialmente em indivíduos com nutrição inadequada. Considerando tais aspectos e em função da complexidade da interação do estado nutricional e resposta do organismo frente a agentes patogênicos, envolvendo controles celulares e moleculares múltiplos ainda pouco conhecidos, propusemo-nos a estudar alguns aspectos da resposta inflamatória em desnutrição. Camundongos Swiss machos adultos, submetidos a desnutrição protéica-energética, após perda de aproximadamente 25% do peso corpóreo, foram inoculados com lipopolissacarideo de Escherichia coli: Hemograma, mielograma, esplenograma e dosagens sistêmicas de citocinas, foram realizadas. Células coletadas da cavidade peritonial de animais que não foram estimulados com LPS foram utilizadas para as determinações de citocinas e NO in vitro, bem como para quantificação dos receptores CD14 e TLR-4/MD-2 e do fator de transcrição NFκB. Células da cavidade peritonial foram usadas, também, para realização dos testes de espraiamento, fagocitose e atividade cida com Candida albicans. Animais desnutridos apresentaram anemia, leucopenia; severa redução na celularidade da medula óssea, do baço e da cavidade peritonial. A capacidade de espraiamento, fagocitose, atividade cida e síntese de citocinas e NO foram significativamente menores nos animais dos grupo desnutrido. O número de receptores de CD14 e TLR-4/MD-2 e do fator de transrição NFκB, também foram significativamente menores nos animais desnutridos. Estes achados sugerem que. animais desnutridos apresentam resposta deficiente frente ao LPS. A menor expressão de receptores CD14 e TLR-4/MD-2 pode ser responsável, em parte pela imunodepressão observada. Os dados nos levam a inferir que o estado nutricional interfere no estado de ativação de macrófagos e na capacidade de resposta dos animais. / Malnutrition modifies the specific and non-specific immune response of the organism to infectious agents, hampering the production and function of Iympho-hemopoietic cells leading to a higher susceptibility of the orgonism to infections. However, the exact mechanisms by which the immune system is undermined has not yet been fully elucidated. Approximately 60% of infections that evolve to bacteremia are nosocomial, and usually involve Gram negative bacteria in individuais that have inadequate nutrition. Taking this into consideration, and in view of the complexity of the interaction between nutritional state and the organism\' s response to infection, which involves poorly known multiple cellular and molecular controls, we proposed to study a few aspects of the inflammatory response in protein malnutrition. Male, outbred Swiss mice were sumbitted to protein malnutrition and after the loss of about 25% of total body weight they were inoculad whith lipopolissacharide of Escherichia coli: Hemogram, mielogram, splenogram and the determination of systemic production of cytokines were used to evaluate. Cells from the peritoneal cavity of animais who were not inoculated were collected for determination of cytokines and NO production in vitro and to evaluate the expression of NFκB and CD14 and TLR-4/MD-2 receptors. Cells from the peritoneal cavity were used too for the spreading, phagocytosis and killing tests with Candida albicans. Malnourished animais presented anemia, leucopenia a severe reduction on bone marrow, spleen and peritoneal cavity cellularity. The spreading, phagocytosis, killing and the production of cytokines and NO was significantly lower in malnourished animais. The number of CD14 and TLR-4/MD-2 receptors and NFκB was found to be significantly lower in malnourished animais. These findings suggest that malnourished mice present a deficient response to LPS. The smaller expression of CD14 and TLR-4/MD-2 receptors may be partly responsible for the immunodeficiency observed. These data lead us to infer that the nutritional state interferes in the activation of macrophages and in the immune response capacity.

A hemopoese é um processo dinâmico regulado pelo microambiente no qual se situa. O principal tecido hemopoético após o nascimento, a medula óssea, é constituído basicamente por substâncias solúveis, como fatores de crescimento, por uma matriz extracelular (MEC) e por células estromais, além das células hemopoéticas. Esse microambiente indutor íntegro é capaz de regular os processos de sobrevivência, proliferação e diferenciação celular, induzindo a célula a sair de um estado quiescente e entrar em ciclo celular. Contudo, na desnutrição protéica (DP) observa-se redução significativa da celularidade das células hemopoéticas, tanto no compartimento periférico quanto no central, a medula óssea. O comprometimento estrutural do microambinte medular decorrente da desnutrição pode prejudicar a sinalização de indução do ciclo celular, fato este que justificaria o quadro de pancitopenia. Portanto, no presente estudo nos propusemos avaliar o ciclo celular de células tronco/progenitoras hemopoéticas (CTPH) da medula óssea de camundongos desnutridos. Para tanto, utilizamos um modelo murino, sendo a desnutrição induzida a partir de uma ração hipoprotéica. As CTPH foram obtidas por método de depleção imunomagnética e utilizadas para a avaliação do ciclo celular a partir da incorporação de Iodeto de Propídeo (PI) e Laranja de Acridina (AO). Também, foram quantificadas proteínas regulatórias do ciclo celular por western blot e avaliada a expressão de receptores para fibronectina, VLA4 e VLA5. Paralelamente, em modelo ex vivo, avaliou-se a influência de fatores de crescimento e de uma matriz de fibronectina sobre a proliferação das CTPH. Considerando a importância das células estromais na sinalização celular, realizamos o ensaio de CFU-F para a quantificação de células estromais e dos fatores de crescimento secretados. Por fim, avaliamos a eficácia da recuperação nutricional frente às alterações no ciclo celular observadas no modelo de desnutrição. Resumidamente, observou-se um comprometimento no ciclo celular das CTPH de camundongos desnutridos, com um aumento desta população celular nas fases GO/G1. As proteínas indutórias do ciclo celular apresentaram uma expressão reduzida enquanto as proteínas inibitórias apresentaram um aumento de expressão nas CTPH dos animais desnutridos. Ex vivo, porém, as CTPH dos animais desnutridos responderam adequadamente aos estímulos externos fornecidos, uma vez que a proliferação celular foi igual para ambos os grupos. A avaliação da cultura de CFU-F indicou comprometimento quantitativo das células estromais nos animais desnutridos e uma redução da produção de citocinas importantes no controle da hemopoese. Após a renutrição, observamos uma reversão das alterações do ciclo celular, com recuperação da celularidade medular, aumento da população de CTPH nas fases proliferativas (S/G2/M) e a normalização da expressão das proteínas regulatórias do ciclo celular. Podemos concluir que a desnutrição protéica compromete o ciclo celular de CTPH, provavelmente devido às alterações no microambiente medular, comprovadas pela redução de células estromais e de fatores de crescimento. Uma vez que o fornecimento de quantidades ótimas de fatores de crescimento e de uma matriz de fibronectina, mimetizando ex vivo o microambiente íntegro, estimula as células de animais desnutrido a proliferarem, podemos sugerir que todo o mecanismo intracelular de controle do ciclo, aparentemente, não foi comprometido. Em relação à recuperação nutricional, podemos afirmar que esta é eficaz na reversão do quadro de pancitopenia, sendo demonstrado um aumento da proliferação das CTPH. / Hematopoiesis is a dynamic process governed by the microenvironment in witch it is located. Basically, the main hematopoietic tissue, the bone marrow, is composed by soluble factors such growth factors, extracellular matrix (ECM) and stromal cells, besides the hematopoietic cells. This intact inducible microenvironment is capable to control cell survival, proliferation and differentiation, inducing cell to exit a quiescent state and enter the cell cycle. However, in protein malnutrition (PM) is observed a significant reduction of hematopoietic cells, both in peripheral and central compartments. The bone marrow structural impairment due to malnutrition could harm the cell cycle signaling, a fact that could justify the establishment of pancitopenia. Therefore, in this study we set out to assess the cell cycle of hematopoietic stem/progenitors cells (HSPC) from bone marrow of malnourished mice. We used a murine model, and malnutrition induced from a low protein diet. The HPSC were obtained by immunomagnetic depletion method and used for the evaluation of cell cycle from the incorporation of propidium iodide (PI) and Acridine Orange (AO). Also, we quantified the cell cycle regulatory proteins by western blot and evaluated the expression of receptors for fibronectin, VLA4 and VLA5. Meanwhile, in ex vivo model, we evaluated the influence of growth factors and a matrix of fibronectin on the proliferation of HSPC. Considering the importance of stromal cells in cell signaling, we performed the CFU-F assay for the quantification of stromal cells and growth factors secreted. Finally, we evaluated the efficacy of nutritional recovery in the face of cell cycle alterations observed in the model of malnutrition. Briefly, we observed an impairment in the cell cycle of HSPC of undernourished mice, with an increase in this cell population in G0/G1 phase. The proteins that induce cell cycle showed a reduced expression whereas the inhibitory proteins showed increased expression in HPSC of malnourished animals. Ex vivo, however, HSPC of malnourished animals responded appropriately to external stimuli provided, since cell proliferation was similar for both groups. Assessing the culture of CFU-F showed a quantitative impairment of stromal cells in malnourished animals and reducing production of cytokines important in controlling hematopoiesis. After refeeding, we observed a normalization of the cell cycle, with recovery of cellularity, an increased population of proliferative phases HSPC (S/G2/M) and normalization of the expression of cell cycle regulatory proteins. We can conclude that malnutrition compromises the HPSC cell cycle, probably due to changes in the bone marrow microenvironment, as proven by the reduction of stromal cells and growth factors. Since the supply of great quantities of growth factors and a matrix of fibronectin, mimicking an intact microenvironment, stimulates the cells of malnourished animals to proliferate, we suggest that the whole mechanism of intracellular cycle control is apparently not been compromised. Regarding the nutritional recovery, we can say that this is effective in reversal of the pancytopenia, and demonstrated an increased proliferation of HSPC.

A fome e a má nutrição permanecem entre os problemas mais devastadores que enfrentam a maioria dos pobres e carentes do mundo. A desnutrição está relacionada com o desequilíbrio do estado nutricional e ocorre sob diversas formas, podendo afetar o fígado. A desnutrição no início da vida pode afetar profundamente o corpo e o cérebro de ratos adultos. Alguns desses efeitos são permanentes enquanto outros desaparecem quando os animais são submetidos ao processo de renutrição. Sendo assim, outra maneira de interferir na regeneração hepática fundamenta-se no fato de que os processos proliferativos do fígado podem ser modulados por fatores alimentares. Experimentos de desnutrição protéico-energética mostraram que o fígado de ratos desnutridos regenera-se mais lentamente após a hepatectomia. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da desnutrição e renutrição protéica na microestrutura dos fígados de camundongos. Foram utilizados 12 camundongos Swiss machos, subdividos nos seguintes grupos: Controle do desnutrido (CD) (n=3), Desnutrido (D) (n=3), Renutrido (R) (n=3) e Controle do renutrido (CR) (n=3). Os animais dos dois grupos controle e do grupo renutrido receberam ração normoprotéica (12%) ao passo que o grupo desnutrido recebeu ração hipoprotéica contendo (2%). Os seguintes parâmetros estereológicos do fígado foram estimados: volume, número total e o volume menor (p= 0,001) em relação ao CR (R= 8020 µm³ e CR= 10018 µm³). O número total de hepatócitos nos animais desnutridos não apresentou diferença significativa (p= 0,055) em comparação ao seu CR (D = 1.1 x 107 e CD=1.6 x 107) e o R não apresentou diferença significativa (p= 0,055) em comparação ao seu CR (R= 2.8 x 107 e CR= 2.2 x 107). Portanto, a renutrição atenuou a atrofia do volume do hepatócito ocasionada pelo processo de desnutrição (carência de proteína). / The hunger and the malnutrition remain the most devastating problems faced by the majority of poor and needy people in the world. The malnutrition is related to an unbalanced nutritional condition and it occurs in different ways may affecting the liver. In the beginning of life, the malnutrition can affect profoundly the body and the brain in adult rats. Most of these effects are permanent while others disappear when the animal are submitted to a renutrition process. In this way, other manner to interfere in the hepatic regeneration is based on the fact that the liver proliferative processes might be modulating by food factors. The energetic protein malnutrition experiments have showed that the undernourished rat livers regenerate slower after hepatectomy. The aim of this study was to evaluate the effects of the caloric protein malnutrition and renutrition in the liver microstructure. In this study were used 12 Swiss male mice divided in: control of the undernourished mice (UC) (n=3), undernourished (U) (n=3), renourished (RN) (n=3) and control of the renourished (RNC) (n=3). The animals from both control groups and the undernourished group received normal protein food (12% protein) and the undernourished group received hypoprotein food (2% protein). The following stereological parameters were estimated: volume, total number and mean volume of the hepatocytes. The mean volume of U was significantly lower (p=0.001) than the UC (U= 23.57 mm³ e UC= 46.5 2mm³) and RN was lower (p=0.001) than the RNC (RN= 38.89 mm³ e RNC= 52.03 mm³).The mean volume of hepatocytes in undernourished animals was lower (p=0.001) in comparison with the respective control (U= 4505 µm³ e CD= 8170.13 µm³) and the RN was lower (p= 0.001) in relation to the RNC (RN= 8020 µm³ e RNC= 10018 µm³). The total number of hepatocytes in undernourished animals did not presented significant difference (p= 0.055) in comparison with the respective control (U = 1.1 x 107 e UC= 1.6 x 107). So, the renutrition attenuated the hepatocyte volume atrophy caused by the malnutrition process (protein deficiency).

Orientador : Vanda Maria Gimenes Gonçalves / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T18:23:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Muniz_IracemaAugustaCarvalhoCortez_M.pdf: 2288961 bytes, checksum: b7aa0c94a3696bccc069d6b6fb127c46 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A desnutrição intra-uterina é responsável direta por parcela significativa da morbimortalidade no período neonatal e por repercussões em longo prazo no desenvolvimento neuropsicomotor. O presente estudo teve por objetivo avaliar o desenvolvimento neuropsicomotor no sexto mês de vida em lactentes a termo, pequenos para a idade gestacional e sua correlação com o fluxo sangüíneo cerebral por ultra-sonografia doppler ao nascimento. O trabalho foi realizado em 60 recém-nascidos a termo, selecionados no Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas, e divididos em dois grupos conforme a adequação peso/idade gestacional. O grupo 1 foi constituído por 36 recém-nascidos adequados para a idade gestacional e o grupo 2 por 24 recém-nascidos pequenos para a idade gestacional. Foram realizadas avaliações Dopplerfluxométricas entre 24 e 48 horas de vida em todos os recém-nascidos e acompanhamento posterior em 28 recém-nascidos no sexto mês de vida, sendo 16 adequados para a idade gestacional e 12 pequenos para a idade gestacional, com avaliações do neurodesenvolvimento através do instrumental das Escalas Bayley de Desenvolvimento Infantil II (BSID-II) (1993), no Laboratório de Estudos do Desenvolvimento Infantil I, do Centro de Estudos e Pesquisas em Reabilitação "Prof. Dr. Gabriel Porto", da Faculdade de Ciências Médicas da Universidade Estadual de Campinas. Os valores medianos de velocidade de fluxo cerebral: Velocidade de Fluxo no Pico Sistólico (VFPS), Velocidade de Fluxo no Final da Diástole (VFFD), Velocidade Média de Fluxo (VMF), mensurados em Artéria Cerebral Anterior (ACA) foram menores no grupo 2. Houve significância estatística com relação às velocidades sistólica e média. Resultados semelhantes foram observados em Artéria Cerebral Média (ACM), sem diferenças significativas. Constatou-se que a adequação peso/idade, a presença de policitemia neonatal e os valores de pressão arterial média estiveram associados aos valores de VMF em ACA. Enquanto a presença de sofrimento fetal, os valores de pressão arterial média e o hábito de fumar durante a gestação estiveram associados ao fluxo médio em ACM. A avaliação do neurodesenvolvimento demonstrou valores menores de ¿Index Score¿ em RN PIG, sem significado estatístico, havendo associação significativa entre o fluxo em ACA nas medidas de VFPS com a Escala Mental e Motora e da VMF com a Escala Motora. Não houve correlação de fluxo em relação à ACM. Concluiu-se que os RN PIG apresentaram valores de fluxo sistólico e médio significativamente menores em ACA, sendo observado um modelo de alta complexidade, não dependendo apenas da condição de nutrição ao nascimento. A performance do neurodesenvolvimento esteve associada significativamente aos valores de VFPS em ACA nas Escalas Mental e Motora e com a VMF em ACA na Escala Motora / Abstract: The intrauterine malnutrition is responsible not only for a great number of morbidity and mortality in neonatal period but also for causing neurological and intellectual sequelae. This paper aimed to evaluate the neurological development of full term infants, small-for-gestational age, and the correlation with cerebral blood flow using cranial ultrasound Doppler at birth. This study was performed at CAISM, a center for pregnant women, at the School Hospital of State University of Campinas (UNICAMP). Sixty term infants were selected and divided in two groups: Appropriate-for-gestational age (AGA) (36) and Small-for-gestational age (SGA) (24). Cranial ultrasound Doppler evaluation was performed on both groups, between 24 and 48 hours after birth. Twenty-eight subjects were followed at six months at LEDI I / CEPRE, a center for treating children with physical disability, using the Bayley Scales of Infant Development II (BSID II). Cerebral Blood Flow Velocity (CBFV), comprising Peak Systolic Flow Velocity (PSFV), End Diastolic Flow Velocity (EDFV), Mean Flow Velocity (MFV), was inferior in the small-for-gestational group, in the Anterior Cerebral Artery (ACA). Doppler measurements were statistically significant in the second group only for values related to Peak Systolic Flow Velocity and Mean Flow Velocity in the ACA. Similar results were seen in the Middle Cerebral Artery (MCA). However, there was no difference for any evaluated parameters of flow velocity in such artery. As to cerebral blood flow influencing factors, it was observed that weight/gestational age (AGA or SGA), presence of neonatal polycythemia and mean arterial blood pressure were statistically related to Mean Flow Velocity in the ACA. In presence of fetal suffering, mean arterial blood pressure and smoking in the pregnancy were statistically related to Mean Flow Velocity in the MCA. Index Score values were inferior in the small-for-gestational age newborns at six months. There was a significant association of Peak Systolic Flow Velocity with Mental and Motor Scales in the ACA and there was also a significant association of Mean Flow Velocity in the ACA with Motor Scales. There was no association for any evaluated parameters of flow velocity in the MCA. We concluded that small-for-gestational age newborns present Peak Systolic Flow Velocity and Mean Flow Velocity significantly reduced only in the Anterior Cerebral Artery. Results show that cerebral blood flow in newborns can be a highly complex model, which does not depend only on the intrauterine growth. The neurological development of small-for-gestational age was significantly associated to PSFV values in ACA in Mental and Motor Scales, and to MFV in ACA in Motor Scale / Mestrado / Pediatria / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1137_1.pdf: 1321687 bytes, checksum: 253b31bf70dd4ec1654c3742e9f3bb37 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A resposta imune inata em processos infecciosos é conhecida por sofrer alterações em decorrência de estados de desnutrição. Assim, o objetivo deste estudo foi de comparar a cinética da produção de óxido nítrico (ON) e a viabilidade de macrófagos alveolares (MA), após infecção celular in vitro, com Staphylococcus aureus meticilina-sensível (MSSA), e meticilina-resistente (MRSA) entre grupos de ratos nutridos (N) ou submetidos à desnutrição neonatal (D). Ratos machos Wistar (n=45) foram divididos em dois grupos distintos, de acordo com a dieta utilizada: N (ratos amamentados por mães submetidas à dieta com 17% de caseína) e D (ratos amamentados por mães submetidas à dieta nutricionalmente deficiente com 8% de caseína). Após o período de amamentação, os animais foram submetidos a um longo período de reposição nutricional, com Labina. Os MA foram coletados através da técnica do lavado broncoalveolar, após traqueostomia. O isolamento dos MA foi realizado por adesão em placas, sendo distribuídos na proporção de 106 células/mL de RPMI. Após o isolamento dos MA, foram estabelecidos quatro sistemas: controle negativo (CN), contendo apenas MA; controle positivo (CP), MA mais 10&#956;L de LPS (lipopolissacarídeo); MSSA, MA mais 100&#956;L de suspensão bacteriana (ATCC 29213) (densidade óptica de 0.15, equivalente a 10-6 CFUmL-1) e MRSA, MA mais 100&#956;L de suspensão bacteriana (ATCC 33591). As placas foram incubadas à 37ºC, com atmosfera úmida e 5% de CO2. A cada duas horas, num total de 24 horas de incubação, foram retirados 100&#956;L do sobrenadante das culturas. A quantificação do ON baseou-se na reação de Griess, através da determinação da concentração de nitritos. A leitura foi realizada em leitor de ELISA, filtro-550nm. A viabilidade dos MA foi analisada após 24 horas de incubação dos sistemas, e avaliada pela redução mitocondrial do 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5- brometo de difenil tetrazólico (MTT) à formazam. A quantificação do formazam solubilizado foi realizada em leitor de ELISA com filtro de 570nm. Utilizou-se teste t- Student e Mann-Whitney, admitindo-se p<0,05. A desnutrição acarretou diminuição do crescimento ponderal dos animais, da liberação de ON nos sobrenadantes das culturas e da viabilidade dos macrófagos. Houve menor produção de ON no MRSA quando comparado com MSSA, entretanto, a partir das 12h, não foi detectada diferença entre os sistemas, permanecendo até 24h. Ao avaliar a viabilidade dos macrófagos entre os sistemas, ocorreu maior redução no MRSA do grupo desnutrido. Pode-se concluir que o modelo de desnutrição neonatal adotado promoveu alteração na função das células fagocitárias, comprometendo o estresse nitrosativo e a viabilidade dos macrófagos alveolares. Além disto, há evidências de diferenças no mecanismo de evasão do sistema imune entre as cepas MSSA e MRSA

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1144_1.pdf: 2316718 bytes, checksum: d0402e5dbfe6888a88b8b9c579b0637e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Staphylococcus aureus resistentes a meticilina constituem um grave problema para a saúde mundial. Alguns fatores relacionados às condições do hospedeiro predispõem às infecções por esses micro-organismos, dentre eles destaca-se a desnutrição. Assim, torna-se importante avaliar repercussões da desnutrição neonatal na resposta imune frente à patógenos com perfis distintos de resistência, como o S. aureus. Para isso foram utilizados ratos machos Wistar amamentados por mães cuja dieta continha 17% de proteína (grupo nutrido) e 8% de proteína (grupo desnutrido). Após desmame, ambos os grupos foram alimentados com dieta normoprotéica até a idade adulta. Os Macrófagos alveolares foram obtidos após traqueostomia, através da coleta do lavado broncoalveolar. Para a obtenção dos linfócitos foi realizado o procedimento cirúrgico de punção cardíaca. Após o isolamento dos diferentes tipos celulares em placas tipo Falcon, procedeu-se com a realização dos estímulos. Sendo especificados quatro sistemas de análise: controle negativo, composto apenas por macrófagos/linfócitos em cultura; controle positivo, semelhante ao anterior, adicionado de lipopolissacarídeo (sorotipo de Escherichia coli; 055:B5, Sigma); e dois sistemas teste, composto por macrófagos/linfócitos estimulados com as cepas de Staphylococcus aureus sensível e resistente a meticilina. A dosagem das citocinas foi realizada pelo método de ELISA, a partir de amostras coletadas do sobrenadante das culturas após de 24 horas de incubação. Os resultados demonstram que modelo de desnutrição neonatal produziu sequela no peso corporal e reduziu a produção de citocinas pró-inflamatórias (IL-12 e IFN-&#947;), indicando que esse modelo de desnutrição pode comprometer a resolução de um processo infeccioso. A cepa de Staphylococcus aureus resistente a meticilina, estimulou uma maior produção de IFN-&#947; e IL-10 de macrófagos alveolares sugerindo estimulação imunológica mais intensa por parte dessa cepa

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:30:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3547_1.pdf: 2312976 bytes, checksum: c87799a66031646002629814fe3026bf (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Staphylococcus aureus resistentes à meticilina têm aumentado de forma significativa nos últimos anos, sendo importante problema de saúde pública, como também, a desnutrição, ainda presente em nosso país. Assim, torna-se importante avaliar repercussões da desnutrição neonatal na resposta imune frente a patógenos em potencial, como o S. aureus. Ratos machos Wistar foram amamentados por mães que receberam durante a lactação, dieta padrão do biotério (grupo nutrido labina) ou dieta experimental, contendo 17% de proteína (grupo nutrido caseína) e 8% de proteína (grupo desnutrido). Após o desmame, todos os animais foram recuperados com dieta normoprotéica, Labina, até o experimento, mantidos em ciclo claro/escuro de 12/12 h, e pesados diariamente até o 21°dia, em dias alternados e até a data de execução de cada experimento (90-120 dias). Vinte quatro horas antes do experimento, as cepas MSSA ATCC 29213 ou MRSA ATCC 33591foram plaqueadas em Ágar Sangue, minutos antes, aliquotadas em tubos contendo PBS estéril cuja turbidez foi ajustada para a concentração de 106 UFC/mL. Macrófagos alveolares (MA) foram obtidos após traqueostomia, através da coleta de lavado broncoalveolar sendo formados in vitro: um sistema controle, composto por MA; dois sistemas testes, de acordo com a cepa bacteriana. A análise estatística foi efetuada utilizando-se o teste t de Student, p<0,05. Os resultados indicam que a desnutrição neonatal acarretou uma diminuição do crescimento ponderal, da taxa de fagocitose e da produção dos radicais superóxido e óxido nítrico, dos MA frente a S. aureus, não influenciando a aderência destas células. Pode-se sugerir que as cepas utilizadas tenham igual susceptibilidade aos mecanismos microbicidas dos MA tanto em animais eutróficos como em desnutridos no período neonatal, apresentando a mesma capacidade de manter os parâmetros imunológicos testados próximos aos valores referentes às condições normais das células

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:32:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9614_1.pdf: 5703525 bytes, checksum: 5d59b2767e188dd946ff0cddcbaf1149 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Nesta tese avaliamos os efeitos tardios da desnutrição neonatal sobre a expressão/produção de moléculas de fusão e fatores transcricionais em macrófagos alveolares e células musculares esqueléticas. Foram utilizados 36 ratos, machos, Wistar, amamentados por mães que receberam dieta durante a lactação contendo 17% de caseína, grupo nutrido (N) ou 8% de caseína, grupo desnutrido (D). Após o desmame, os animais foram recuperados com dieta Labina ou Teklad Global, até 42 dias (n=12), 60 dias (n=12) e 90 dias de vida (n=12). Metade destes animais (n=18) foi submetida a um procedimento cirúrgico de traqueostomia objetivando a retirada de lavado broncoalveolar e posterior cultura dos macrófagos alveolares por 4 dias. Da outra metade (n=18), foram retirados todos os músculos de ambas as patas dos animais e realizada a cultura das células musculares esqueléticas durante 10 dias. Deste modo, os resultados geraram dois artigos originais. O primeiro intitulado Long-term effects of a neonatal low-protein diet in rats on the number of macrophages in culture and the expression/production of fusion proteins permitiu observar que a desnutrição durante a lactação alterou o número de macrófagos em cultura e a produção de proteínas de fusão em ratos jovens e adultos, mas não modificou a expressão das moléculas de adesão caderinas. O segundo intitulado Effect of a neonatal low-protein diet on the morphology of myotubes in culture and the expression of key proteins that regulate myogenesis in young and adult rats demonstrou que a desnutrição neonatal não modificou a expressão de proteínas-chaves do processo miogênico, mas alterou a morfologia e reduziu o número dos miotubos em cultura de animais com 60 dias de vida. Em conclusão, a desnutrição neonatal causou sequelas no organismo jovem e adulto, mesmo após a reposição nutricional. Estas alterações foram evidenciadas no desenvolvimento de macrófagos alveolares em cultura e na miogênese

Made available in DSpace on 2014-06-12T22:56:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2972_1.pdf: 1280234 bytes, checksum: 8c3bb88a2475f18d3fb212903634e177 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Neste trabalho, estudou-se a interação dos efeitos cerebrais da cafeína e da desnutrição. Ratas Wistar foram desnutridas no aleitamento pela dieta básica regional (DBR, com 8% de proteínas de origem predominantemente vegetal). Seus filhotes receberam, aos 70-75 dias de idade, 30 mg/kg de cafeína ou solução salina, por via intraperitoneal. Parte desses animais foi testada no modelo comportamental conhecido como inibição latente (IL). A outra parte foi submetida ao estudo do fenômeno da depressão alastrante da atividade elétrica cerebral (DAC). A cafeína bloqueou a IL, tanto no grupo DBR8 quanto em um grupo controle, bem-nutrido. Num terceiro grupo, desnutrido pela DBR22, suplementada na quantidade (22%), mas não na qualidade das proteínas (suplementação à custa dos alimentos da DBR), o efeito da cafeína sobre a IL desapareceu. Como, na IL, os animais precisam ser injetados com cloreto de lítio (LiCl), estudou-se também os efeitos do LiCl sobre a DAC. A cafeína não alterou, enquanto o LiCl reduziu a propagação da DAC no grupo DBR8, mas não nos grupos nutrido e DBR22. Nossos resultados demonstram efeitos antagônicos da cafeína sobre a IL e do LiCl sobre a DAC, os quais dependem do estado nutricional durante o desenvolvimento cerebral, sugerindo interação droga-nutrição. Sugere-se também o envolvimento da cafeína na modulação de receptores subcorticais, envolvidos com a atenção seletiva no núcleo acumbens, mas sem ação expressiva no neocortex, onde a DAC foi avaliada

Made available in DSpace on 2014-06-12T22:57:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3045_1.pdf: 893604 bytes, checksum: dcb29f02762a14a1b36ddf5bdf7632cb (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A desnutrição grave diminui a imunocompetência e com isso, aumenta a mortalidade infantil. Com o intuito de minimizar a morbimortalidade hospitalar, a OMS publicou diretrizes específicas para o tratamento de crianças com desnutrição grave. Portanto, supõe-se que na alta hospitalar os pacientes apresentem melhora da resposta imunológica. Esta dissertação originou o artigo intitulado Resposta imune de crianças desnutridas graves tratadas segundo o protocolo da OMS na fase hospitalar, atualmente submetido para publicação, e que está apresentado às páginas 25-42. O objetivo foi comparar reposta imune inata de crianças desnutridas graves internadas, tratadas segundo o protocolo da OMS, no momento da admissão e alta hospitalar. Para tal, foi realizado estudo experimental realizado com crianças menores de dois anos de idade, sendo 10 com desnutrição grave, e 10 crianças do grupo controle. O grupo desnutrido foi composto por pacientes internados no Instituto Materno Infantil Professor Fernando Figueira (IMIP) e submetidas ao protocolo da OMS. Foram excluídas as crianças portadoras do vírus HIV e aquelas reinternadas no período do estudo. Foi coletada uma amostra sanguínea na admissão e outra na alta hospitalar, sendo realizada análise do perfil leucocitário, índice de aderência, capacidade fagocitária e a produção de radicais livres (superóxido e óxido nítrico). Os pacientes com desnutrição grave apresentaram na admissão redução significativa da atividade fagocítica e produção de radicais oxidantes. Na alta hospitalar, foi observado melhora da função fagocitária e da liberação de óxido nítrico e superóxido, em relação à admissão hospitalar (p<0,005), entretanto, quando comparados ao grupo controle, os pacientes apresentaram valores reduzidos de linfócitos, assim como diminuição na produção de radicais livres. A partir destes resultados, foi observado que o tempo de hospitalização mostrou-se eficaz em restabelecer a atividade fagocitária, porém insuficiente em restaurar a atividade microbicida e o número de linfócitos