A erliquiose monocítica canina (EMC) é uma doença infecciosa de ocorrência mundial e transmitida pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus. As manifestações clínicas são inespecíficas e multissistêmicas. Pode apresentar as fases aguda, assintomática e crônica, as quais podem cursar com alterações hematológicas como trombocitopenia, discreta anemia e leucopenia durante a fase aguda, discreta trombocitopenia na fase assintomática, e pancitopenia nos casos crônicos graves. O estabelecimento de indicadores prognósticos para a doença pode ser de grande valia para o direcionamento do tratamento clínico. O estudo do título de anticorpos em cães infectados poderia auxiliar no diagnóstico da EMC bem como no monitoramento do tratamento. A fim de identificar as principais alterações clínicas, hematológicas e sorológicas de cães infectados por E. canis, foram selecionados 82 animais com diagnóstico etiológico de EMC (positivos a Reação em Cadeia da Polimerase PCR). Os cães foram subdivididos em grupos de animais assintomáticos (n=12), doentes e sobreviventes (n=51) e doentes e não sobreviventes (n=19). Foi realizado ainda acompanhamento clínico, hematológico e sorológico de 28 animais tratados com medicação preconizado, no período de até 180 dias após o tratamento. Na análise clínica, não houve predisposição sexual ou racial, porém cães maiores de 8 anos de idade apresentaram maior frequência. Os sintomas observados mais frequentemente em todos os cães, exceto nos assintomáticos, foram palidez de mucosas, apatia, hiporexia, letargia e gastrenterite. As alterações hematológicas encontradas no grupo dos cães doentes foram anemia e trombocitopenia, que variaram apenas na intensidade quando da comparação dos animais sobreviventes com os não sobreviventes, porém apenas a anemia e a leucopenia apresentaram-se como fatores prognósticos negativos para a doença. Altos títulos de anticorpos (≥ 2.560) foram observados em grande parte dos animais infectados, porém não puderam ser considerados indicadores de persistência da infecção. Em dois dos 28 animais com monitoramento pós tratamento houve reinfecção, face aos resultados novamente positivos na pesquisa de material genético para E.canis, associados à recidiva de alterações hematológicas em um dos dois animais, e abrupto novo aumento do título de anticorpos. Em outros animais, apesar da rápida ascensão do título concomitante à recidiva de alterações hematológicas, não houve amplificação de DNA erliquial, sugerindo diagnóstico molecular falso negativo. Concluiu-se que alterações clínicas e hematológicas sugestivas da doença foram encontradas nos animais doentes, apenas a anemia e leucopenia podem ser indicadores prognósticos da doença, e que a interpretação do título de anticorpos deve ser feita em consonância com alterações clínicas e hematológicas do cão suspeito. / The canine monocytic ehrlichiosis (CME) is an infectious disease occurring worldwide and is transmitted by the tick Rhipicephalus sanguineus. The clinical manifestations are nonspecific and multisystemic. It may present acute, asymptomatic and chronic phases, which may be presented with haematological changes such as thrombocytopenia, mild anemia and leukopenia during the acute phase, mild thrombocytopenia in asymptomatic phase, and pancytopenia in severe chronic cases. The establishment of prognostic indicators for the disease may be of great value to guide clinical treatment. The study of antibodies titer in infected dogs could help in the diagnosis of CME and in monitoring treatment. In order to identify the main clinical, hematological and serological changes in dogs infected with E. canis, 82 animals were selected with etiologic diagnosis of a CME (positive to Polymerase Chain Reaction - PCR). The dogs were subdivided into groups of asymptomatic animals (n = 12), sick and survivors (n = 51) and sick and non-survivors (n = 19). It was also conducted clinical, hematological and serological monitoring of 28 animals treated with recommended medication for the period until 180 days after treatment. In clinical analysis, there was no racial or sexual predisposition, however dogs older than 8 years of age had a higher frequency. The most frequently reported symptoms in all dogs except the asymptomatic patients were pale mucous membranes, apathy, appetite loss, lethargy and gastroenteritis. Hematological changes found in the group of sick dogs were anemia and thrombocytopenia, which varied only in intensity when comparing the survivors to the nonsurvivors, but only anemia and leukopenia were presented as negative prognostic factors for the disease. High titers of antibodies (2560 ≥) were observed in most infected animals, but they could not be considered indicators of persistent infection. In two out of the 28 monitored animals after treatment there was reinfection, compared to positive results back on the research of genetic material to E.canis, associated with relapse of hematological changes in one of the two animals, and sudden new increase in antibody titer. In other animals, despite the rapid rise of the concurrent title of relapse hematological changes, there was no erliquial DNA amplification, suggesting molecular diagnostic to be false negative. It was concluded that clinical and hematologic changes suggestive of the disease were found in sick animals, only anemia and leukopenia may be prognostic indicators of the disease, and that the interpretation of antibody titers should be done in line with clinical and hematologic changes of the suspect dog.

Submitted by Maurício Gianfrancesco Filippi null (mauriciofilippi@terra.com.br) on 2017-02-13T18:05:19Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Maurício G Filippi oficial.pdf: 3286618 bytes, checksum: 2e08ac3322153696d51497bfacf1f0f8 (MD5) / Rejected by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido está sem a ficha catalográfica. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2017-02-15T17:11:59Z (GMT) / Submitted by Maurício Gianfrancesco Filippi null (mauriciofilippi@terra.com.br) on 2017-02-16T22:41:18Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Maurício G Filippi.pdf: 3283472 bytes, checksum: fa27139485cf995a23ebdca2e069dd69 (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-02-20T18:00:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fillipi_mg_me_bot.pdf: 3283472 bytes, checksum: fa27139485cf995a23ebdca2e069dd69 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-20T18:00:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fillipi_mg_me_bot.pdf: 3283472 bytes, checksum: fa27139485cf995a23ebdca2e069dd69 (MD5) Previous issue date: 2016-12-12 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A monitorização eletrocardiográfica ambulatorial, ou método Holter, vem se mostrando como uma ferramenta eficaz na Medicina Veterinária para detectar lesões cardíacas precoces, não só por monitorar a atividade elétrica do coração, como também o controle do sistema nervoso autônomo desse órgão. Sabe-se também que as principais enfermidades infecciosas de cães, como a cinomose e a erliquiose monocítica canina (EMC) provocam lesões consideráveis no coração, comprovadas por exame histopatológico. Já está comprovada a ocorrência de miocardite na EMC, levando a frequente presença de alterações na geração e condução do impulso elétrico cardíaco. O presente estudo analisou a atividade elétrica do coração durante 24 horas, com enfoque na prevalência de arritmias, estudo da variabilidade da frequência cardíaca e na concentração de biomarcadores de cães com EMC crônica (grupo doente) em comparação à animais saudáveis (grupo controle). Quarenta e cinco por cento dos animais do grupo doente possuíram alta frequência de arritmias durante o estudo. A média da concentração de troponina cardíaca I e de creatinokinase MB (CK-MB) foi significativa (0,24 ng/mL ± 0,5; 229 ± 205 UI/mL) em comparação ao grupo controle (0,042 ± 0,07 ng/mL; 126 ± 46,12 UI/mL). O desvio padrão da média de todos os intervalos NN (SDNN) e a porcentagem de intervalos RR adjacentes com diferença de duração superior a 50 milissegundos (pnn50%) também foram extremamente singificativos (83 ± 65 e 14,56 ± 20) quando comparado aos animais saudáveis (268 ± 74,6 e 55,87 ± 12,8), respectivamente. Podemos concluir que a EMC crônica possui caráter arritmôgenico, onde há persistente lesão miocárdica e intensa estimulação do sistema nervoso autônomo simpático no coração. / Ambulatorial electrocardiographic monitoring, or Holter method, has been shown to be an effective tool in veterinary medicine to detect early heart lesions, not only to monitor the electrical activity of the heart, but also to control the autonomic nervous system of this organ. It is also known that the main infectious diseases of dogs, such as canine distemper and canine monocytic ehrlichiosis (CME) cause considerable lesions in the heart, proven by histopathological examination. It has already been proven the occurrence of myocarditis in the CME, leading to frequent presence of changes in the generation and conduction of the cardiac electrical impulse. The present study analyzed the electrical activity of the heart during 24 hours, focusing on the prevalence of arrhythmias, heart rate variability study and the biomarkers concentration of dogs with chronic CME (sick group) compared to healthy animals (control group). Forty-five percent of the animals in the diseased group had a high frequency of arrhythmias during the study. The mean concentration of cardiac troponin I and creatinokinase MB (CK-MB) was significant (0.24 ng / mL ± 0.5; 229 ± 205 IU / mL) compared to the control group (0.042 ± 0.07 ng / ML, 126 ± 46.12 IU / mL). The standard deviation of the mean of all NN (SDNN) intervals and the percentage of adjacent RR intervals with a duration difference greater than 50 milliseconds (pnn50%) were also extremely significant (83 ± 65 and 14.56 ± 20) when compared to Healthy animals (268 ± 74.6, 55.87 ± 12.8), respectively. It can be concluded that chronic CME has an arrhythmogenic character, where there is persistent myocardial injury and intense stimulation of the sympathetic autonomic nervous system of the heart. / FAPESP: 2014/11219-6

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008 - Vania Gomes dos Santos.pdf: 493126 bytes, checksum: 3cd32670acfcb8f78f94330257390af6 (MD5) Previous issue date: 2008-07-10 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Most infectious and parasitic diseases in dogs, have an initial phase with nonspecific symptoms such as apathy, anorexia and occasionally fever with respiratory, gastrointestinal and nervous abnormalities. Generally these changes are related to infection by canine distemper, Ehrlichia sp and the potential presence of exotic etiological agents such as Borrelia sp. This study aimed to detect the occurrence of the canine distemper virus, antibodies against Ehrlichia sp and homologous antibodies against Borrelia burgdorferi in dogs of the Zoonotic Diseases Control Center Paulo Dacorso Filho, of Rio de Janeiro, Brazil correlating with clinical symptoms and haematological disorders. To conduct the research, blood samples were collected from 38 animals collectively housed in five boxes from a population of 125 dogs without defined race, sex, different ages and with an unknown vaccination history. The presence of a positive animal for the canine distemper virus and the absence of clinical cases indicate that the dogs were naturally immunized or have subclinical infection. The number of positive but asymptomatic animals, for Anaplasma platys and Ehrlichia canis in the morphological analysis of blood smears was high, especially for A. platys indicating a high prevalence of sub-clinical infection. However, there was a high title of antibodies against Ehrlichia sp showing prior exposure to this agent. The high titles of homologous antibodies against Borrelia burgdorferi, indicates prior exposure or crossreaction with the spirochete Borrelia sp. and indicates the presence of the causative agent in the region. / A maioria das enfermidades infecciosas e parasit?rias em c?es apresenta uma fase inicial com sintomas inespec?ficos como apatia, anorexia e ocasionalmente febre evoluindo com altera??es respirat?rias, gastrointestinais e nervosas. Em geral essas altera??es s?o relacionadas com a infec??o por viroses como cinomose, bacterioses como Ehrlichia sp., al?m da potencial presen?a de agentes etiol?gicos ex?ticos como Borrelia sp. O presente estudo teve como objetivos detectar qualitativamente o ant?geno do v?rus da cinomose, avaliar a ocorr?ncia de anticorpos anti-Ehrlichia sp. e anticorpos hom?logos contra Borrelia burgdorferi em c?es acautelados no Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) Paulo Dacorso Filho, pertencente ao Munic?pio do Rio de Janeiro, Brasil e correlacionar com sintomas cl?nicos e altera??es hematol?gicas. Para realiza??o da pesquisa, foram coletadas amostras de sangue de 38 animais alojados coletivamente em cinco baias de uma popula??o de 125 c?es sem ra?a definida, machos e f?meas, de diferentes idades e com hist?rico de vacina??o desconhecido. A presen?a de um animal positivo para o v?rus da cinomose e aus?ncia de casos cl?nicos indica que os c?es estavam naturalmente imunizados ou com infec??o subcl?nica. O n?mero de animais positivos, por?m assintom?ticos, para Anaplasma platys e Ehrlichia canis ? an?lise morfol?gica em esfrega?os sang??neos foi elevado, especialmente para A. platys indicando uma alta preval?ncia de infec??o sub-cl?nica. Em contrapartida houve um alto t?tulo de anticorpos anti-Ehrlichia sp. evidenciando exposi??o pr?via a este agente. A elevada presen?a de anticorpos hom?logos anti-Borrelia burgdorferi indica exposi??o pr?via ou rea??o cruzada com espiroqueta do g?nero Borrelia e indica a circula??o do agente etiol?gico na regi?o estudada.

Ehrlichia canis e Anaplasma platys são parasitas de células sanguíneas transmitidos por carrapatos de larga distribuição mundial. O objetivo deste trabalho foi detectar a presença de E. canis e A. platys em cães naturalmente infectados no município de Porto Alegre, RS, Brasil, através de técnicas sorológicas e moleculares; realizar análise molecular dos agentes através do sequenciamento de um fragmento do gene 16S rRNA e compará-lo com sequências disponíveis no Genbank. Adicionalmente, avaliamos os parâmetros hematológicos e possíveis fatores de risco associados à infecção. Amostras de sangue foram coletadas de 146 cães residentes no Bairro Arquipélago, região suburbana de Porto Alegre e 53 cães mantidos no Centro de Controle de Zoonoses (CCZ). Dentre os animais analisados, 27 (13,56%) apresentaram resultado positivo na nPCR e 20 (10,2%) apresentaram sorologia positiva para A. platys. Através da ferramenta BLASTn, as sequências obtidas neste estudo foram comparadas e mostraram similaridade de 99,75% a 100% em relação a outras sequências de A. platys disponíveis no Genbank. Neste estudo não foi observada a presença de E. canis. DNA do agente não foi amplificado em nenhuma das amostras analisadas através de técnicas moleculares, e tampouco foram detectados cães sororreagentes, indicando a baixa prevalência do agente no município. Ao comparar a prevalência de infecção/exposição entre as populações estudadas, não observamos diferença significativa entre elas. Não foram observadas diferenças significativas nos parâmetros hematológicos e fatores de risco analisados nos animais infectados ou expostos, exceto a contagem de basófilos, que foi associada positivamente com infecção por A. platys. / Erlichia canis and Anaplasma platys are tick borne disease which has a worldwide geographic distribution. The aim of this study was to detect the presence of E. canis and A. platys in naturally infected dogs in Porto Alegre/RS – Brazil by serological and molecular techniques, performing molecular analysis of the agents by sequencing of a fragment of the 16S rRNA and comparing it with sequences available in Genbank. Additionally, we evaluated the hematological parameters and potential risk factors associated with infection. Blood samples were collected from 146 dogs living in the Arquipelago neighborhood, a suburban area of Porto Alegre and 53 dogs from Control Centrer of Zoonosis (CCZ). Among the examined animals, 27 (13.56%) were positive by nPCR and 20 (10.2%) were seropositive for A. platys. Through the BLASTn, the sequences obtained in this study were compared and showed similarity of 99.75% to 100% as compared to other sequences of A. platys available in Genbank. None of the dogs showed antibodies or E. canis DNA, indicating the low occurrence of the agent in Porto Alegre. There were no significant differences between positive groups and hematological parameters, or among the risk factors evaluated, except basophils count was associated with A. platys infection.

Ehrlichia canis e Anaplasma platys são parasitas de células sanguíneas transmitidos por carrapatos de larga distribuição mundial. O objetivo deste trabalho foi detectar a presença de E. canis e A. platys em cães naturalmente infectados no município de Porto Alegre, RS, Brasil, através de técnicas sorológicas e moleculares; realizar análise molecular dos agentes através do sequenciamento de um fragmento do gene 16S rRNA e compará-lo com sequências disponíveis no Genbank. Adicionalmente, avaliamos os parâmetros hematológicos e possíveis fatores de risco associados à infecção. Amostras de sangue foram coletadas de 146 cães residentes no Bairro Arquipélago, região suburbana de Porto Alegre e 53 cães mantidos no Centro de Controle de Zoonoses (CCZ). Dentre os animais analisados, 27 (13,56%) apresentaram resultado positivo na nPCR e 20 (10,2%) apresentaram sorologia positiva para A. platys. Através da ferramenta BLASTn, as sequências obtidas neste estudo foram comparadas e mostraram similaridade de 99,75% a 100% em relação a outras sequências de A. platys disponíveis no Genbank. Neste estudo não foi observada a presença de E. canis. DNA do agente não foi amplificado em nenhuma das amostras analisadas através de técnicas moleculares, e tampouco foram detectados cães sororreagentes, indicando a baixa prevalência do agente no município. Ao comparar a prevalência de infecção/exposição entre as populações estudadas, não observamos diferença significativa entre elas. Não foram observadas diferenças significativas nos parâmetros hematológicos e fatores de risco analisados nos animais infectados ou expostos, exceto a contagem de basófilos, que foi associada positivamente com infecção por A. platys. / Erlichia canis and Anaplasma platys are tick borne disease which has a worldwide geographic distribution. The aim of this study was to detect the presence of E. canis and A. platys in naturally infected dogs in Porto Alegre/RS – Brazil by serological and molecular techniques, performing molecular analysis of the agents by sequencing of a fragment of the 16S rRNA and comparing it with sequences available in Genbank. Additionally, we evaluated the hematological parameters and potential risk factors associated with infection. Blood samples were collected from 146 dogs living in the Arquipelago neighborhood, a suburban area of Porto Alegre and 53 dogs from Control Centrer of Zoonosis (CCZ). Among the examined animals, 27 (13.56%) were positive by nPCR and 20 (10.2%) were seropositive for A. platys. Through the BLASTn, the sequences obtained in this study were compared and showed similarity of 99.75% to 100% as compared to other sequences of A. platys available in Genbank. None of the dogs showed antibodies or E. canis DNA, indicating the low occurrence of the agent in Porto Alegre. There were no significant differences between positive groups and hematological parameters, or among the risk factors evaluated, except basophils count was associated with A. platys infection.

Orientador: Katia Denise Saraiva Bresciani / Banca: Caris Maroni Nunes / Banca; Marcos Rogério André / Resumo: A erliquiose canina apresenta elevada ocorrência na rotina da clínica médica de pequenos animais. Esta bactéria multiplica-se nas células epiteliais do intestino, nos hemócitos e nas células das glândulas salivares do carrapato Riphicephalus sanguineus, onde ocorre a transmissão transestadial e provavelmente não ocorre transmissão transovariana. O objetivo do presente estudo foi detectar molecularmente Ehrlichia canis em amostras de linfonodos e medulas ósseas de cães e nos intestinos, ovários e glândulas salivares de seus respectivos carrapatos R. sanguineus. Assim, 720 artrópodes fêmeas (dez de cada animal) foram removidos dos 72 cães examinados. Em seguida, foram efetuadas punções aspirativas de linfonodos e medulas ósseas. Após a dissecação dos carrapatos, seus órgãos (intestinos, ovários e glândulas salivares), bem como as amostras puncionadas de linfonodos e medulas ósseas dos cães foram testadas por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (nested-PCR) para amplificação de um fragmento do gene 16S do ácido ribonucleico ribossomal (rRNA) de E. canis e testados também por meio da PCR em Tempo Real Quantitativa (qPCR) para E. canis, baseada em um fragmento do gene dsb. A detecção por meio da nested-PCR foi de 80,5% nos linfonodos e 44,4% nas medulas ósseas, havendo diferença significativa (p<0,05). Já em relação às nested-PCRs dos órgãos dos carrapatos, observamos positividade de 22% nos intestinos, 11% nos ovários e 7% nas glândulas salivares. Na qPCR a detecção foi de 70,... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The canine erlichiosis presents a high level of occurrence in the routine of the medical clinic of small animals. This bacteria multiplies in the epithelial cells of the intestine, in the hemocytes and in the salivary glands of the tick Riphicephalus sanguineus, where there is a transestadial transmission and probably does not occur a transovarial transmission. The objective of our study was to molecularly detect Ehrlichia canis in samples of lymph nodes and bone marrow of dogs and in the intestines, ovaries and salivary glands of their respective ticks R. sanguineus. Therefore, 720 female arthropods (ten of each animal) were removed from the 72 evaluated dogs. Next, aspirative punches were made of lymph nodes e bone marrow. After the dissection of the ticks, their organs (intestines, ovaries and salivary glands), like the punches samples of lymph nodes and bone marrow of the dogs were tested by Polymerase Chain Reaction (nested-PCR) for amplification of the gene 16S rRNA of E. canis and also tested by the Quantitative Real Time PCR (qPCR) to E. canis, based on a fragment of the gene dsb. The detection of the refer pathogen by the nested-PCR was 80,5% in lymph nodes and 44,4% in bone marrows, showing a significant difference (p<0,05). ). In relation to the nested-PCRs of the tick's organs, we observed positivity of 22% on the intestines, 11% on the ovaries and 7% on the salivary glands. In the qPCR the detection was of 70,8% and 44,4% on the lymph nodes e bone marrows, resp... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientadora: Mirela Tinucci Costa / Banca: Gervásio Henrique Bechara / Banca: Paulo Cesar Ciarlini / Resumo: A babesiose e a erliquiose canina são doenças comuns em cães, transmitidas pelo vetor Rhipicephalus sanguineus. Os sinais e sintomas dessas doenças não são específicos. A detecção dos parasitos em esfregaços sanguíneos nem sempre é possível e a detecção sorológica pode indicar apenas que o animal teve contato com o agente, mas não necessariamente a doença ativa. Na Colômbia existem poucas pesquisas sobre a epidemiologia e diagnóstico de erliquiose e babesiose em cães, as poucas existentes se basearam na detecção dos hemoparasitas em esfregaços sanguíneos, ou de anticorpos específicos. Sendo assim propos-se este estudo com o objetivo de pesquisar a erliquiose e a babesiose em esfregaços sangüíneos associados a provas sorológicas e moleculares em cães da região centro-oriental de Colômbia. Amostras de sangue e soro de 91 cães, provenientes das cidades de Bogotá (n=21), Villavicencio (n=31) e Bucaramanga (n=39) foram submetidas a pesquisa parasitológica, detecção de anticorpos anti-B. canis e anti-E. canis e detecção molecular de Babesia canis e Ehrlichia canis. Os resultados mostraram que dentre as 91 amostras testadas, 4% e 5% delas apresentaram E. canis e B. canis, respectivamente nas pesquisas parasitológicas dos esfregaços sanguíneos. Nas mesmas amostras, 82% e 51% delas apresentaram anticorpos anti-E. canis e anti-B. canis, respectivamente e, em 40% e 5%, foram detectados os DNA de E. canis e de B. canis, respectivamente. Os amplicons foram confirmados por seqüenciamento e o DNA de E. canis e de B. canis obtidos mostraram similaridade genética de 98% a 99% com amostras de E. canis e de B. canis isoladas em outros países, as árvores filogenéticas dos agentes pesquisados foram / Abstract: Canine babesiosis and ehrlichiosis are common diseases in dogs, and are transmitted by the vector Rhipicephalus sanguineus. The clinical signs of these diseases are not specific. Detection of parasites in blood smears is not always possible and the serological detection could only indicate that the animal has had contact with the agent and not necessarily that the disease is being developed. In Colombia, there are few reports on canine babesiosis and ehrlichiosis's epidemiology and diagnosis, being them based only on the detection of haemoparasites in blood smears and detection of antibodies. The purpose of the present study was to investigate the presence of Ehrlichia sp. and Babesia sp. in blood smears, associated with serological and molecular detection of these parasites in dog blood samples from the middle east region of Colombia. Blood and sera samples from 91 dogs from Bogotá (n=21), Villavicencio (n=31) and Bucaramanga cities (n=39) were submitted to parasitological, serological and molecular detection of B. canis and E. canis. Among the 91 samples tested, 4% and 5% presented E. canis morulae and B. canis piroplasms in blood smears, respectively. Moreover, 82% and 51% of samples presented antibodies anti-E. canis and anti-B. canis, respectively. E. canis and B. canis DNA were detected in 40% and 5% of samples, respectively. The amplicons were confirmed by sequencing and the found DNA from E. canis and B. canis showed a genetic identity of 98% to 99% among samples from E. canis and B. canis isolated from other countries. Finally, phyllogenetic trees were constructed from both agents / Mestre

Ehrlichia canis e Anaplasma platys são parasitas de células sanguíneas transmitidos por carrapatos de larga distribuição mundial. O objetivo deste trabalho foi detectar a presença de E. canis e A. platys em cães naturalmente infectados no município de Porto Alegre, RS, Brasil, através de técnicas sorológicas e moleculares; realizar análise molecular dos agentes através do sequenciamento de um fragmento do gene 16S rRNA e compará-lo com sequências disponíveis no Genbank. Adicionalmente, avaliamos os parâmetros hematológicos e possíveis fatores de risco associados à infecção. Amostras de sangue foram coletadas de 146 cães residentes no Bairro Arquipélago, região suburbana de Porto Alegre e 53 cães mantidos no Centro de Controle de Zoonoses (CCZ). Dentre os animais analisados, 27 (13,56%) apresentaram resultado positivo na nPCR e 20 (10,2%) apresentaram sorologia positiva para A. platys. Através da ferramenta BLASTn, as sequências obtidas neste estudo foram comparadas e mostraram similaridade de 99,75% a 100% em relação a outras sequências de A. platys disponíveis no Genbank. Neste estudo não foi observada a presença de E. canis. DNA do agente não foi amplificado em nenhuma das amostras analisadas através de técnicas moleculares, e tampouco foram detectados cães sororreagentes, indicando a baixa prevalência do agente no município. Ao comparar a prevalência de infecção/exposição entre as populações estudadas, não observamos diferença significativa entre elas. Não foram observadas diferenças significativas nos parâmetros hematológicos e fatores de risco analisados nos animais infectados ou expostos, exceto a contagem de basófilos, que foi associada positivamente com infecção por A. platys. / Erlichia canis and Anaplasma platys are tick borne disease which has a worldwide geographic distribution. The aim of this study was to detect the presence of E. canis and A. platys in naturally infected dogs in Porto Alegre/RS – Brazil by serological and molecular techniques, performing molecular analysis of the agents by sequencing of a fragment of the 16S rRNA and comparing it with sequences available in Genbank. Additionally, we evaluated the hematological parameters and potential risk factors associated with infection. Blood samples were collected from 146 dogs living in the Arquipelago neighborhood, a suburban area of Porto Alegre and 53 dogs from Control Centrer of Zoonosis (CCZ). Among the examined animals, 27 (13.56%) were positive by nPCR and 20 (10.2%) were seropositive for A. platys. Through the BLASTn, the sequences obtained in this study were compared and showed similarity of 99.75% to 100% as compared to other sequences of A. platys available in Genbank. None of the dogs showed antibodies or E. canis DNA, indicating the low occurrence of the agent in Porto Alegre. There were no significant differences between positive groups and hematological parameters, or among the risk factors evaluated, except basophils count was associated with A. platys infection.

A erliquiose monocítica canina (EMC) é uma doença infecciosa de ocorrência mundial e transmitida pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus. As manifestações clínicas são inespecíficas e multissistêmicas. Pode apresentar as fases aguda, assintomática e crônica, as quais podem cursar com alterações hematológicas como trombocitopenia, discreta anemia e leucopenia durante a fase aguda, discreta trombocitopenia na fase assintomática, e pancitopenia nos casos crônicos graves. O estabelecimento de indicadores prognósticos para a doença pode ser de grande valia para o direcionamento do tratamento clínico. O estudo do título de anticorpos em cães infectados poderia auxiliar no diagnóstico da EMC bem como no monitoramento do tratamento. A fim de identificar as principais alterações clínicas, hematológicas e sorológicas de cães infectados por E. canis, foram selecionados 82 animais com diagnóstico etiológico de EMC (positivos a Reação em Cadeia da Polimerase PCR). Os cães foram subdivididos em grupos de animais assintomáticos (n=12), doentes e sobreviventes (n=51) e doentes e não sobreviventes (n=19). Foi realizado ainda acompanhamento clínico, hematológico e sorológico de 28 animais tratados com medicação preconizado, no período de até 180 dias após o tratamento. Na análise clínica, não houve predisposição sexual ou racial, porém cães maiores de 8 anos de idade apresentaram maior frequência. Os sintomas observados mais frequentemente em todos os cães, exceto nos assintomáticos, foram palidez de mucosas, apatia, hiporexia, letargia e gastrenterite. As alterações hematológicas encontradas no grupo dos cães doentes foram anemia e trombocitopenia, que variaram apenas na intensidade quando da comparação dos animais sobreviventes com os não sobreviventes, porém apenas a anemia e a leucopenia apresentaram-se como fatores prognósticos negativos para a doença. Altos títulos de anticorpos (&ge; 2.560) foram observados em grande parte dos animais infectados, porém não puderam ser considerados indicadores de persistência da infecção. Em dois dos 28 animais com monitoramento pós tratamento houve reinfecção, face aos resultados novamente positivos na pesquisa de material genético para E.canis, associados à recidiva de alterações hematológicas em um dos dois animais, e abrupto novo aumento do título de anticorpos. Em outros animais, apesar da rápida ascensão do título concomitante à recidiva de alterações hematológicas, não houve amplificação de DNA erliquial, sugerindo diagnóstico molecular falso negativo. Concluiu-se que alterações clínicas e hematológicas sugestivas da doença foram encontradas nos animais doentes, apenas a anemia e leucopenia podem ser indicadores prognósticos da doença, e que a interpretação do título de anticorpos deve ser feita em consonância com alterações clínicas e hematológicas do cão suspeito. / The canine monocytic ehrlichiosis (CME) is an infectious disease occurring worldwide and is transmitted by the tick Rhipicephalus sanguineus. The clinical manifestations are nonspecific and multisystemic. It may present acute, asymptomatic and chronic phases, which may be presented with haematological changes such as thrombocytopenia, mild anemia and leukopenia during the acute phase, mild thrombocytopenia in asymptomatic phase, and pancytopenia in severe chronic cases. The establishment of prognostic indicators for the disease may be of great value to guide clinical treatment. The study of antibodies titer in infected dogs could help in the diagnosis of CME and in monitoring treatment. In order to identify the main clinical, hematological and serological changes in dogs infected with E. canis, 82 animals were selected with etiologic diagnosis of a CME (positive to Polymerase Chain Reaction - PCR). The dogs were subdivided into groups of asymptomatic animals (n = 12), sick and survivors (n = 51) and sick and non-survivors (n = 19). It was also conducted clinical, hematological and serological monitoring of 28 animals treated with recommended medication for the period until 180 days after treatment. In clinical analysis, there was no racial or sexual predisposition, however dogs older than 8 years of age had a higher frequency. The most frequently reported symptoms in all dogs except the asymptomatic patients were pale mucous membranes, apathy, appetite loss, lethargy and gastroenteritis. Hematological changes found in the group of sick dogs were anemia and thrombocytopenia, which varied only in intensity when comparing the survivors to the nonsurvivors, but only anemia and leukopenia were presented as negative prognostic factors for the disease. High titers of antibodies (2560 &ge;) were observed in most infected animals, but they could not be considered indicators of persistent infection. In two out of the 28 monitored animals after treatment there was reinfection, compared to positive results back on the research of genetic material to E.canis, associated with relapse of hematological changes in one of the two animals, and sudden new increase in antibody titer. In other animals, despite the rapid rise of the concurrent title of relapse hematological changes, there was no erliquial DNA amplification, suggesting molecular diagnostic to be false negative. It was concluded that clinical and hematologic changes suggestive of the disease were found in sick animals, only anemia and leukopenia may be prognostic indicators of the disease, and that the interpretation of antibody titers should be done in line with clinical and hematologic changes of the suspect dog.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008 - Erica Mateus Toledo Accetta.pdf: 809163 bytes, checksum: 04d79d0b9854d1e99fd77cff6ae68a4f (MD5) Previous issue date: 2009-08-27 / Canine ehrlichiosis is an important infectious disease whose prevalence has been increasead in most areas of Brazil. Clinical signals and the laboratorial findings are variable. The present work had as objective to determine the frequency of the infection for E. canis and Anaplasma platys in dogs with trombocytopenia at Regi?o dos Lagos - State of Rio de Janeiro. It has been evaluated the CBC of 1127 dogs with trombocytopenia, a total of 3019 laboratorial tests carried through in the period of June 2006 and July 2007, at CEVET Lagos Lab, providing atendence to several clinics of Araruama, Iguaba Grande, S?o Pedro d Aldeia, Cabo Frio, Arraial do Cabo and B?zios. Erliquiosis was diagnosised through haemoparasit in smears of total blood s research stained with Panoptic kit. Eighty-four dogs (7.45%) were considered infected by the discovery of morulae of Ehrlichia spp. e Anaplasma platys. Normocytic normochromic anaemia and monocytosis were the most hematological alterations found. / A erliquiose canina ? uma importante doen?a infecciosa cuja preval?ncia tem aumentado significativamente em v?rias regi?es do Brasil. Os sinais cl?nicos e os achados laboratoriais s?o vari?veis. O presente trabalho teve como objetivo determinar a freq??ncia da infec??o por E. canis e A. platys em c?es com trombocitopenia na Regi?o dos Lagos do Estado do Rio de Janeiro. Foram avaliados os exames hematol?gicos de 1127 c?es com trombocitopenia de um total de 3019 exames realizados no per?odo de junho de 2006 a julho de 2007, no laborat?rio CEVET Lagos, que presta atendimento ?s diversas cl?nicas dos munic?pios de Araruama, Iguaba Grande, S?o Pedro d Aldeia, Cabo Frio, Arraial do Cabo e B?zios. A erliquiose foi diagnosticada atrav?s da pesquisa de hemoparasitos em esfrega?os de sangue total corados com kit pan?ptico. O diagn?stico baseou-se no achado de m?rulas de Ehrlichia spp. e Anaplasma platys, sendo considerados infectados 84 (7,45%) c?es. Anemia normoc?tica normocr?mica e monocitose foram as altera??es hematol?gicas mais freq?entes.