Tesis para Optar al Grado Académico de Magíster en Bioquímica, Área de Especialización: Toxicología y Diagnóstico Molecular / Memoria para Optar al Título de Bioquímica / El ser humano está constantemente expuesto a agentes externos (xenobióticos), entre los que se incluyen los fármacos. La mayoría de estos xenobióticos son lipofílicos siendo absorbidos por la mucosa gastrointestinal hacia la circulación sistémica. Para facilitar su excreción existen enzimas de biotransformación, tales como las monooxigenasas o citocromo P450 (CYP), las cuales se encuentran principalmente en el hígado y transforman sustancias lipofílicas en compuestos hidrofílicos modificando la velocidad de excreción, la vida media y otras propiedades fármaco/tóxicocinéticos. La variabilidad interindividual en el metabolismo y respuesta a fármacos es extensa debido a las características genéticas individuales y las interacciones con otros xenobióticos. Este tema es abordado por la farmacogenética, una disciplina que analiza la información genética del paciente para diseñar una terapia farmacológica más apropiada y por consiguiente, la información previa de esto puede ser beneficiosa, en especial en aquellos fármacos con un índice terapéutico estrecho o una concentración plasmática mínima. Ello debido a que es bien sabido que la mayoría de las enzimas de biotransformación son polimórficas, causando ya sea la supresión, disminución o aumento del metabolismo de fármacos. Por lo tanto, es necesario conocer su variación en un individuo para ajustar una terapia farmacológica individualizada. Una de las enzimas relevantes en la respuesta farmacológica, responsable del metabolismo de gran cantidad de fármacos y que corresponde casi al 30% de las enzimas P450 hepáticas es CYP3A4. Se han descrito numerosos polimorfismos en el gen que codifica para esta enzima, siendo CYP3A4*1B uno de los más estudiados. Al respecto, estudios in vitro han mostrado que esta variante exhibe una actividad enzimática dos veces menor que el genotipo común o wild type CYP3A4 wt/wt, sin embargo, in vivo no se ha logrado demostrar que esta variante esté asociada a una disminución de la actividad enzimática. El medicamento hipnosedativo Zolpidem utilizado para iniciar o mantener el sueño es biotransformado principalmente por CYP3A4, por lo que esta enzima puede tener un papel muy relevante en la respuesta farmacoterapéutica. A pesar de que se han realizado estudios in vitro que han demostrado su biotransformación por CYP3A4 (61%), CYP2C9 (22%) y CYP1A2 (14%), aún no se demuestra que la presencia del polimorfismo de CYP3A4 *1B altere los parámetros farmacocinéticos en humanos, ya sea sometidos a monodosis o a un tratamiento con Zolpidem. De acuerdo a estos antecedentes, el objetivo del presente trabajo de tesis persiguió determinar la frecuencia del polimorfismo CYP3A4 *1B en la población chilena sana, y asociar el polimorfismo a cambios en los parámetros farmacocinéticos de Zolpidem en un grupo de voluntarios sanos sometidos a una monodosis de Zolpidem. La detección de los diferentes genotipos se realizó a través de PCR-RFLP convencional y los parámetros farmacocinéticos se obtuvieron mediante análisis por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Los resultados obtenidos mostraron una frecuencia genotípica de un 0,889 para el genotipo silvestre (wt/wt), 0,111 para los heterocigotos (wt/*1B) y no se encontraron individuos homocigotos mutados (*1B/*1B) en 253 chilenos sanos. La frecuencia alélica fue de un 0,945 para el alelo silvestre (wt) y un 0,055 para el alelo mutado (*1B). El análisis estadístico para establecer la relación entre el genotipo y los parámetros farmacocinéticos de 32 personas estudiadas (28 para wt/wt y 4 para wt/*1B) no mostró una asociación estadísticamente significativa, por lo que sería necesario disponer de un mayor número de individuos tratados con el fármaco de modo de establecer la presencia de metabolizadores rápidos o lentos de Zolpidem o en su defecto realizar un estudio farmacocinético en un grupo de individuos previamente identificados como portadores del alelo mutado. Sin perjuicio de lo anterior, es necesario destacar que el objeto último de la farmacogenética es establecer respuestas individuales, por lo que el hallazgo de 4 individuos con genotipo mutado y el análisis de sus niveles plasmáticos de Zolpidem podrían permitir disponer de una herramienta útil para el ajuste de la dosis de este medicamento. / Human beings are constantly exposed to external agents (xenobiotics), including drugs. Most of xenobiotics are lipophilic and therefore they are absorbed by gastrointestinal mucous towards the systemic circulation. To facilitate their excretion biotransformation enzymes, such as monooxygenases or cytochrome P450 (CYP), found mainly in the liver, change lipophilic substances to hydrophilic compounds by modifying their excretion rate, half-life, and other pharmacokinetics or toxicokinetics properties. The interindividual variability in metabolism and drug responses is huge because of individual genetics characteristic and interactions with other xenobiotics. This topic is approached by pharmacogenetics, an area that analyzes the genetic makeup of patients a suitable pharmacological therapy design and therefore. The knowledge derived from this research can be beneficial, especially for those drugs with a tight therapeutic index or minimum plasmatic concentration. Since it is well-known that most biotransformation enzymes are polymorphic, causing suppression, decrease or increase of drug metabolism, it is necessary to know individual variation to fit an individualized pharmacology therapy. One of the relevant enzymes responsible for the metabolization of many drugs and part of hepatic P450 enzymes is CYP3A4. This enzyme presents several polymorphisms, being CYP3A4*1B one of the most studied. In vitro studies have shown that this variant shows only half of the enzymatic activity of the common genotype (CYP3A4 wild type). It has not been shown in vivo that this variant is associated to an enzymatic activity reduction. The hypnosedative drug Zolpidem used to induce or maintain sleep is mainly biotransformed by CYP3A4, therefore this enzyme may have a relevant role in the pharmacotherapeutic response. In spite of in vitro studies have demonstrated its biotransformation by CYP3A4 (61%), CYP2C9 (22%) and CYP1A2 (14%), it still has not been shown that the presence of the CYP3A4*1B polymorphism modifies zolpidem pharmacokinetic parameters in humans, whether they are administered as a monodose or a treatment sustained. The goal of this thesis was to determine CYP3A4*1B polymorphism frequency in a healthy Chilean population and in a group of healthy volunteers under a Zolpidem monodose treatment, and to relate the genotypes frequencies to changes in Zolpidem pharmacokinetic parameters. Detection of correlated genotypes were realized through conventional PCR-RFLP and the pharmacokinetic parameters were measured through high performance liquid chromatography (HPLC) analysis. The results showed a genotypic frequency of 0,889 for the wild type genotype (wt/wt) and 0,111 for heterozygous (wt/*1B). We did not find homozygote individuals for the (*1B/*1B) genotype in 253 healthy Chileans. The allelic frequency was 0,945 for the wild type allele (wt) and 0,055 for mutated allele (*1B). The statistic analysis to establish the relation among genotype and pharmacokinetic parameters of 32 individuals (28 wt/wt and 4 wt/*1B) did not show a significant statistically association. It will be necessary to analyze a higher number of subjects treated with the drug to establish rapid or poor Zolpidem metabolizers. Alternatively a pharmacokinetic study can be restored in a group previously identified as carriers of mutated allele. It is important to stand out that the final purpose of pharmacogenetics is the establishment of individual answers, therefore, the finding of wt/*1B genotype subjects together with their plasma levels of Zolpidem could permit us to have an useful tool to fit the drug posology.

MAGALHÃES, Nereide Stela Santos, também é conhecida em citações bibliográficas por: SANTOS MAGALHÃES, Nereide Stela / Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-04T18:26:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Laércio Brandão de Arruda.pdf: 1177291 bytes, checksum: fb483cdf7e380354cf9068578179be9d (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-17T23:19:30Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Laércio Brandão de Arruda.pdf: 1177291 bytes, checksum: fb483cdf7e380354cf9068578179be9d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-17T23:19:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Laércio Brandão de Arruda.pdf: 1177291 bytes, checksum: fb483cdf7e380354cf9068578179be9d (MD5) Previous issue date: 2013-08-30 / CAPES / Este estudo descreve como nanocápsulas convencionais e furtivas foram desenvolvidas e caracterizadas, para viabilizar o carreamento daβ-lapachona para sua utilização na terapêutica do câncer. Primeiramente, aβ-lapachona foi encapsulada em nanocápsulas de Poli-(ɛ)-caprolactona (PCL) e em nanocápsulas do copolímero Poli (ɛ-caprolactona)-polietileno glicol (PCL-PEG), seguindo o método de deposição interfacial do polímero pré-formado. Estas nanocápsulas foram caraterizadas pelo tamanho de partícula, índice de poli dispersão, eficiência de encapsulação e cinética de liberação in vitro. A avaliação da citotoxicidade foi realizada seguindo o método MTT, através de viabilidade celular de linhagem de células de leucemia promielocítica aguda (HL-60), câncer de mama(MCF-7), carcinoma de laringe humana (HEp-2) e carcinoma mucoepidermoide de pulmão humano (NCI-H292). E por fim, a atividade antitumoral in vivo da β-lapachona foi avaliada em camundongos machos Swiss inoculados com células de Sarcoma 180 (S-180),e estes animais receberam doses diárias de20 mg/kg/dia de β-lapachona encapsulado em nanocápsulas furtivas (NC-PCL-PEG/ β-lap) ou β-lapachona (β-lap) em suspensão por 7 dias. Os resultados demonstraram que o método de preparação foi eficiente na formação de nanocápsulas monodispersas (PDI<0,3), com tamanhos compreendidos entre150 e200 nm e com uma eficiência de encapsulação do fármaco de 98 ± 0,91% e 97 ± 1,3% para as nanocápsulas convencionais e furtivas, respectivamente. O perfil da cinética de liberação in vitro evidenciou uma liberação máxima da β-lapachona, através das nanocápsulas, em torno de 62,18 ± 3,93% e 66.29 ± 1,74% para PCL/β-lap ePCL-PEG/β-lap, respectivamente. No estudo de citotoxicidade, aβ-lapachona apresentou um efeito antiproliferativo relevante apenas na linhagem deMCF-7 (IC₅₀0,39μg/mL), onde ficou praticamente igual ao padrão DOX (IC₅₀ 0,32 μg/mL). De maneira geral aβ-lapachona, quando encapsulada, apresentou valores de IC₅₀ maiores que aβ-lapachona livre, com exceção na linhagem NCI-H292, o que provavelmente, deve-se ao fato de um mecanismo de captura celular diferenciado. Dessa forma o ensaio de MTT se mostrou bastante eficiente na avaliação de citotoxicidade da β-lapachona livre e encapsulada em relação ao padrão de análise (DOX). Nos estudos in vivo a atividade antitumoral da β-lapachona nanoencapsulada promoveu uma inibição da massa tumoral acima de 49,29%, quando comparado ao grupo controle, e de aproximadamente 15% quando comparado com o fármaco livre. / This study describes how conventional and stealth nanocapsules were developed and characterized to facilitate the conduction of β-lapachone for their use in cancer therapy. First, the β-lapachone has been encapsulated in nanocapsules Poly (ɛ)-caprolactone (PCL) and nanocapsules in the copolymer poly (caprolactone ɛ) - polyethylene glycol (PCL-PEG) by the method of pre-polymer interfacial deposition formed. These nanocapsules have been featured by the particle size, polydispersity index, encapsulation efficiency and in vitro release profile. The cytotoxicity assayment was performed following the method MTT cell viability through the line age of acute promyelocytic leukemia cells (HL-60), breast cancer (MCF-7), human laryngeal carcinoma(HEp-2) and human pulmonary mucoepidermoid carcinoma (NCI-H292). Finally, the in vivo antitumor activity of β-lapachone was evaluated in male Swiss mice inoculated with Sarcoma180 cells (S-180), and these animals received daily doses of 20mg/kg/day of β-lapachone encapsulated stealth nanocapsules (NC-PEG-PCL/β-lap)or β-lapachone(β-lap)in suspension for 7 days. The results showed that the preparation method was efficient in the formation of nanocapsules monodisperse(PDI<0.3),with sizes ranging between 150 and 200 nm and having a drug encapsulation efficiency of 98% and 97% for conventional and nanocapsules furtive, respectively. The profile of the in vitro release kinetics showed a maximum release of β-lapachone through the nanocapsules, around 62.18 ± 3.93%and 66.29 ± 1.74% for PCL/β-lap and PCL-PEG/β-lap, respectively. At cytotoxicity assayment β-lapachone presents a relevant antiproliferative effect only on MCF-7 cell line (IC₅₀ 0,39 μg/mL) where the result was barely equal when compared with standard analysis DOX (IC₅₀ 0,32 μg/mL). Thus, the MTT assay was very efficient in evaluating β-lapachone cytotoxicity of free and encapsulated compared to standard analysis (DOX). In studies in vivo antitumor activity of β-lapachone nanocoated promoted an inhibition of tumor mass up to 49.29% when compared to the control group, and approximately 15% when compared to the free drug.

Orientador: Ronilson Agnaldo Moreno / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-09-11T21:05:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Orives_AndreiaMariaLopesGuermani_M.pdf: 3018767 bytes, checksum: 284436344ffcfd9eb1783b1ac8b6ec4a (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a bioequivalência de duas formulações de amlodipina em comprimidos ( Amlodipina® 5 mg comprimidos, Laboratório Teuto Brasileiro Ltda., formulação teste e Norvasc ® 5 mg, Laboratórios Pfizer Ltda., como referência ) após administração oral a 24 voluntários adultos sadios de ambos os sexos. O estudo foi aberto, randomizado com duas fases, onde os voluntários receberam uma dose única de besilato de amlodipina 5 mg. As amostras de plasma foram obtidas em um período total de 144 h. As concentrações de amlodipina plasmáticas foram analisadas por um método baseado na cromatografia líquida acoplada ao espectrômetro de massa usando como fonte de ionização eletrospray íon positivo ( LC-MS-MS ) e desipramina como padrão interno. Foram obtidos os seguintes parâmetros das curvas de concentração plasmática x tempo: AUClast, AUCO-inf , AUC0-144h and Cmax. O intervalo estatístico proposto foi de 80 a 125% de acordo com o FDA / Abstract: The aim of this study was to assess the bioequivalence of two amlodipine tablet formulations ( Amlodipine ® 5 mg tablet formulation elaborated by Laboratório Teuto Brasileiro Ltda., Brazil as test formulation and Norvasc ® 5 mg tablet formulation from Laboratórios Pfizer Ltda., Brazil as reference formulation ) after their oral admistration to 24 healthy adult volunteers of both sexes. The study was conducted using an open, randomized two-period crossover design, in which twenty-four healthy volunteers received a single oral dose of amlodipine besylate tablet 5 mg. Plasma samples were obtained over a 144 h period. Plasma amlodipine concentrations were analysed by a method based on liquid chromatography with positive ion electrospray ionization ( LC-MS-MS ) using desipramine as internal standard. From the amlodipine plasma concentration vs time curves, the following pharmacokinetic parameters were obtained: AUClast, AUCO-inf, AUC0-144h and Cmax. The statistical interval proposed was 80 to 125% according to the US Food and Drug Administration Agency / Mestrado / Mestre em Farmacologia

El presente trabajo constituye un estudio descriptivo prospectivo de corte transversal (prescripción-indicación) cuyo objetivo es determinar las características de uso de ceftriaxona y ceftazidima y evaluar la prescripción con la Guía de tratamiento antimicrobiano Sanford en la Sala de Pacientes Críticos del Servicio de Emergencia del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen – EsSalud de Perú durante los meses de abril y mayo del 2005. Se evaluaron 293 historias clínicas, de los cuales 157 pacientes recibieron terapia antimicrobiana, de ellos 124 pacientes recibieron cefalosporinas de tercera generación como ceftriaxona y ceftazidima lo cual representa el 43.32%. De estos 124 casos, el 64.52% corresponde a ceftriaxona y el 35.48% corresponde a ceftazidima, lo cual demuestra un alto uso de de estos dos antimicrobianos coincidiendo con otros estudios de utilización de antimicrobianos. Según los resultados de este estudio se recomienda estandarizar el tratamiento de los pacientes con diagnóstico de infección mediante un protocolo farmacoterapéutico para las diferentes diagnósticos de infección y demás patologías con la finalidad de reducir la resistencia antimicrobiana y el coste de estos tratamientos. Las investigaciones en Emergencia son escasas por lo que es importante continuar y ampliar los estudios para así poder elaborar estrategias más específicas para nuestra realidad. / -- The present work is a prospective descriptive cross-sectional study (prescription- indication) with the aim of establishing characteristics of use of ceftriaxone and ceftazidime and assessing the prescription with the Sanford Guide to Antimicrobial Therapy in Room of Critical Patients in the Emergency Service of the Guillermo Almenara Irigoyen National Hospital – EsSalud in Lima (Perú) during the months of April and May 2005. It assessed 293 histories, of whom 157 patients received antimicrobial therapy, of whom 124 patients received ceftriaxone and ceftazidime which represents 43.32%. Of these 124 cases, the 64.52% corresponds to ceftriaxone and the 35.48% corresponds to ceftazidime, which shows a high use of these antimicrobial coinciding with other studies of the use of antimicrobials. According to the results of this study recommends standardize the treatment of patients with a diagnosis of infection through a pharmacotherapeutic protocol for the different diagnoses of infection and other pathologies with the aim of reducing antimicrobial resistance and the cost of these treatments. The investigations in Emergency are few and it is important to continue and expand the studies so it can develop more specific strategies for our reality.

La validación del proceso de fabricación de las tabletas de glibenclamida 5mg, fue realizado en un laboratorio farmacéutico, durante los meses de marzo a octubre del 2005. En este período se llevó a cabo la fabricación de tres lotes consecutivos, los cuales fueron utilizados para la validación. El estudio nos permitió demostrar que la validación del proceso de fabricación de las tabletas de glibenclamida 5mg cumplió con los parámetros establecidos. Demostrándose que los equipos, etapas y las áreas estaban adecuadamente instaladas, documentadas y operativas tal como se evidenció de manera consistente y repetitiva durante todo el proceso de validación. Adicionalmente los datos obtenidos del proceso de fabricación de las tabletas de glibenclamida 5 mg; fueron procesados con el paquete estadístico SPSS 11.10; demostrándose que existe diferencia significativa con un p < 0,05 entre el inicio, medio y final de los tres lotes. Por tanto se concluye que el proceso cumplió con las especificaciones establecidas, pero no asegura que estadísticamente este bajo control; porque las herramientas estadísticas nos permitieron evaluar con un alto grado de confiabilidad el comportamiento real del proceso. / -- The validation of the manufacturing process of the tablets glybenclamide 5mg, was carried out in a pharmaceutical laboratory, during the months of March to October of the 2005. In this period was carried out the production of three serial lots, which were used for the validation. The study allowed us to demonstrate that the validation of the manufacturing process of the tablets glybenclamide 5mg completed the established parameters. Being demonstrated that the equipment, stages and the areas were appropriately installed, documented and operative just as it was evidenced in a consistent and repetitive way during the whole validation process. Additionally the obtained data of the manufacturing process of the tablets of glybenclamide 5 mg; they were processed with the statistical package SPSS 11.10; being demonstrated that significant difference exists with a p < 0,05 among the beginning, means and end of the three lots. Therefore you concludes that the process completed the established specifications, but it doesn't assure that statistically this low control; because the statistical tools allowed us to evaluate with a high grade of dependability the real behavior of the process.

A Epilepsia é um conjunto de condições neurológicas que tem como característica comum a ocorrência de crises epiléticas recorrentes. A Epilepsia do Lobo Temporal (ELT) é a causa mais comum de crises resistentes a fármacos. Alguns dos modelos animais utilizados na literatura para estudo da condição epiléptica são linhagens de animais geneticamente susceptíveis à epilepsia, como os ratos WAR (Wistar Audiogenic Rats). A carbamazepina é um dos fármacos antiepilépticos mais prescritos, também utilizada em transtornos psiquiátricos. Devido ao baixo índice terapêutico, este fármaco está propenso a interações farmacológicas significativas, sendo que, pequenas mudanças na concentração plasmática podem resultar em perda da eficácia ou sinais de intoxicação. Além disso, pode ser indutor de várias enzimas hepáticas. A angiotensina II, peptídeo formado a partir da clivagem de AngI pela enzima conversora de angiotensina, tem sido considerada como sendo o principal peptídeo ativo do sistema renina-angiotensina (RAS), podendo ser considerado como um neurotransmissor/neuromodulador através de sua ação sobre os receptores AT1 e AT2 presentes em várias regiões cerebrais. O enalapril é um inibidor da enzima conversora de angiotensina e é um dos fármacos mais utilizados para tratamento da hipertensão em pacientes com epilepsia. Este estudo teve como objetivo avaliar a influência de crises epilépticas induzidas em modelo experimental de epilepsia, na farmacocinética do enalapril e da carbamazepina, um conhecido anticonvulsivante, quando usados em monoterapia ou em associação. Para isto, desenvolveu-se metodologia capaz de quantificar o enalapril e a carbamazepina simultaneamente em plasma de rato e realizar avaliação da disposição cinética destes fármacos em ratos Wistar e WAR (não submetidos ao kindling). O enalapril e a carbamazepina foram analisados em plasma por cromatografia líquida de ultraperformance acoplada a espectrômetro de massas. O preparo das amostras foi feito por extração líquido-líquido. O método foi desenvolvido e validado segundo a legislação vigente (ANVISA, RDC 27/2012), sendo adequado para a aplicação em estudos farmacocinéticos. Verificou-se que, nos estudos farmacocinéticos a carbamazepina somente teve seus parâmetros modificados quando administrada a ratos WAR em associação com o enalapril, apresentando diminuição da biodisponibilidade do medicamento (AUC0-∞: 9395 vs 35796 ng.h/mL, CWA e CCA, respectivamente). Com relação ao enalapril, o background genético para a epilepsia aumentou a biodisponibilidade do fármaco quando comparado ao seu controle (AUC0-∞: 105,25 vs 273,05ng.h/mL, ECA e EWA, respectivamente), além disso, a associação com a carbamazepina fez com que houvesse a diminuição das concentrações plasmáticas de enalapril tanto nos grupos controle, quanto nos grupos WAR. / Epilepsy is a set of neurological conditions that have in common that the occurrence of recurrent seizures. The Temporal Lobe Epilepsy (TLE) is the most common cause of seizures resistant to drugs. Some of the animal models used in the literature to study the epileptic condition are genetically susceptible strains of animals with epilepsy, such as WAR rats (Wistar audiogenic Rats). Carbamazepine is one of the most commonly prescribed antiepileptic drugs also used in psychiatric disorders. Due to the low therapeutic index, this drug is prone to significant drug interactions, and small changes in plasma concentrations may result in loss of efficacy or signs of intoxication. Furthermore, it may be an inducer of various liver enzymes. Angiotensin II peptide formed from AngI cleavage by angiotensin converting enzyme, has been considered as the main active peptide of the renin-angiotensin system (RAS) may be considered as a neurotransmitter/neuromodulator through its action on AT1 and AT2 receptors present in various brain regions. Enalapril is an angiotensin converting enzyme inhibitor, and is one of the most used drugs for treating hypertension in patients with epilepsy. This study aimed to evaluate the influence of epileptic seizures induced in experimental epilepsy, on the pharmacokinetics of enalapril and carbamazepine, a known anticonvulsant, when used alone or in combination. For this, we developed methodology to quantify the enalapril and carbamazepine simultaneously in rat plasma and perform evaluation of kinetic disposition of these drugs in rats Wistar and WAR (not subject to the kindling). Enalapril and carbamazepine were analyzed in the plasma by liquid chromatography Ultra-Performance coupled to a mass spectrometer. The sample preparation was done by liquid-liquid extraction. The method was developed and validated according to current legislation (ANVISA RDC 27/2012) and is suitable for use in pharmacokinetic studies. It was found that the pharmacokinetic studies carbamazepine only had their parameters modified WAR when administered to rats in combination with enalapril, with decreased bioavailability of the drug (AUC 0-∞: 9395 vs. 35796 ng · hr / mL, CWA and CCA respectively). With respect to enalapril, the genetic background for epilepsy increased bioavailability the drug compared to its control (AUC 0-∞: 105.25 vs. 273,05ng.h / ml, ECA and EWA, respectively), moreover, the association with carbamazepine reduced the plasma concentrations of enalapril in both control groups, as in WAR groups.

Introdução: pacientes com epilepsia em tratamento com politerapia podem manifestar sinais de efeitos adversos e/ou ineficácia terapêutica decorrentes das possíveis interações entre as diferentes drogas antiepilépticas (DAEs) que compõem o esquema terapêutico. Para contornar esta situação, as DAEs desenvolvidas atualmente apresentam perfil farmacocinético com menor potencial para interações farmacológicas. O levetiracetam é uma nova DAE aprovada para utilização como terapia adjuntiva no tratamento de crises focais em adultos. Seu metabolismo, por não depender de forma significativa do sistema oxidativo microssomal hepático, proporciona associações positivas com outras DAEs. Entretanto, observações clínicas de que a associação entre levetiracetam e DAEs indutoras enzimáticas (carbamazepina, fenitoína, fenobarbital e primidona) implicaria em menor disposição plasmática do levetiracetam têm sido confirmadas por alguns estudos e consideradas irrelevantes por outros. Objetivo: caracterizar e comparar o perfil farmacocinético do levetiracetam entre pacientes adultos com epilepsia em tratamento regular com DAEs indutoras enzimáticas e pacientes que estejam ou em tratamento com DAEs que não alteram a atividade das enzimas de metabolismo ou sem tratamento farmacológico. Casuística e Métodos: trinta pacientes foram selecionados, tendo sido alocados quinze em cada grupo, de acordo com o perfil das DAEs em uso regular (grupo indutor enzimático e grupo controle). A todos foi administrada dose única oral de levetiracetam 1000 mg. Ao longo de 24 horas foram coletadas sete amostras de sangue para determinação da concentração plasmática do levetiracetam e três amostras de urina para quantificação do levetiracetam eliminado inalterado e de seu principal metabólito inativo, o ucb L057. As amostras foram encaminhadas à Universidade de Pavia, Itália, e analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). Resultados: foram calculados os seguintes parâmetros farmacocinéticos: concentração plasmática máxima de levetiracetam e o tempo decorrido até seu alcance; meia-vida de eliminação; constante de velocidade de eliminação; área sob a curva de concentração plasmática versus tempo; clearance oral aparente e clearance renal do levetiracetam; volume aparente de distribuição e quantidades excretadas na urina como fármaco inalterado e como ucb L057. Comparações entre os grupos foram feitas a partir dos testes t de Student ou Mann-Whitney, conforme apropriado. O grupo em tratamento com DAEs indutoras enzimáticas apresentou clearance oral aparente do levetiracetam significativamente maior e meia-vida de eliminação significativamente menor do que o grupo controle (p < 0,05). As quantidades tanto de levetiracetam quanto de ucb L057 eliminadas na urina não divergiram significativamente entre os dois grupos (p > 0,05). Discussão e Conclusões: estudos têm evidenciado o potencial das DAEs indutoras enzimáticas tanto para estimular a atividade de enzimas hidrolíticas, como as responsáveis pela conversão do levetiracetam a ucb L057, quanto para inibir e/ou competir pelos sítios de ligação dos transportadores presentes nos túbulos renais responsáveis pela secreção ativa do ucb L057. Embora o presente estudo não tenha objetivado identificar e caracterizar as vias de metabolismo e eliminação do levetiracetam, os dados encontrados evidenciam a diferença na disposição plasmática deste fármaco quando associado às DAEs indutoras enzimáticas. Considerando que o levetiracetam é majoritariamente prescrito em associações, as quais geralmente envolvem ao menos uma DAE indutora enzimática, o sucesso da terapêutica dos pacientes em que o levetiracetam for adicionado ao esquema medicamentoso prévio ou em que as DAEs indutoras enzimáticas tenham suas posologias modificadas pode ser prejudicado caso não haja o reconhecimento da possibilidade de ocorrência da alteração de perfil farmacocinético evidenciada. / Introduction: patients with epilepsy treated with two or more antiepileptic drugs (AEDs) associated (politherapy) can show signs of adverse effects and/or therapeutic inefficacy due to possible interactions among the different combined AEDs. As an attempt to handle this problem, the AEDs developed nowadays are showing pharmacokinetic characteristics that decrease their potential to get involved in pharmacological interactions. Levetiracetam is a new AED approved as add-on therapy for the treatment of focal seizures in adults. Its metabolism does not rely significantly on the hepatic microssomal oxidative system, what has been considered a positive aspect in favor of its use in association with other AEDs. However, clinical observations of decreased levetiracetam plasma disposition when it is associated with enzyme inducing AEDs (carbamazepine, phenytoin, phenobarbital and/or primidone) has been confirmed by some studies and considered irrelevant by others. Purpose: to describe and compare the pharmacokinetic profile of levetiracetam among adult patients with epilepsy in treatment with enzyme-inducers AEDs and patients in treatment with AEDs without any impact on enzymes activity or with no pharmacological treatment. Patients and Methods: a single oral dose of levetiracetam 1000 mg was administered for the thirty selected patients (fifteen per group). Over 24 hours, seven blood samples were collected to have their levetiracetam concentrations quantified, and three urine samples were collected to have their levetiracetam and ucb L057 (the main levetiracetam inactive metabolite) amounts quantified. The samples were sent to University of Pavia, Italy, to be analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC). Results: the following pharmacokinetics parameters were calculated: the maximum plasma levetiracetam concentration and the time it occurred, elimination half-life, elimination rate constant, area under the curve, levetiracetam apparent oral clearance and renal clearance, volume of distribution and amount excreted in urine as unchanged drug and as ucb L057. Comparisons between the two groups were performed by Student t-test or Mann-Whitney test, as appropriate. The group of patients treated with enzyme-inducers AEDs showed the levetiracetam apparent oral clearance significantly higher and elimination half-life significantly lower than those from control group (p < 0,05). The amount excreted in urine as unchanged drug and as ucb L057 were not significantly different between the two groups (p > 0,05). Discussion: some studies highlight the capacity of enzyme inducing AEDs both to increase the activity of hydrolysis enzymes, such as those responsible for converting levetiracetam to ucb L057, and to inhibit and/or to compete for the binding sites on the transporters responsible for active tubular secretion of ucb L057. Although the present study did not aim to identify and describe the metabolic and elimination pathways of levetiracetam, the data found clearly show the difference in levetiracetam disposition when it is associated with enzyme inducing AEDs. Considering that levetiracetam is mainly prescribed in association with other drugs, and in most of these associations at least one drug is an enzyme inducer, neglecting this evident change in levetiracetam pharmacokinetic in cases such as those which levetiracetam is added to a previous regimen, or those which enzyme-inducers have their prescription changed, can negatively affect the success of the treatment and consequently the patients quality of life.

Background – A associação da infecção pela bactéria Helicobacter pylori com algumas doenças gástricas, como por exemplo, a úlcera gástrica e o câncer gástrico, é bem definida. No entanto, a associação da bactéria com outras doenças, especialmente extragástricas não está estabelecida. Métodos – Foi realizada avaliação da ansiedade e depressão e pesquisa do Helicobacter pylori com endoscopia em participantes de um estudo que avaliou os efeitos da erradicação do Helicobacter pylori sobre a dispepsia funcional. Pacientes com infecção por Helicobacter pylori dispepsia funcional foram randomizados para receber omeprazol, amoxicilina e claritromicina (grupo antibiótico) ou omeprazol mais placebo (grupo controle) por 10 dias. Os pacientes foram avaliados na baseline e 12 meses após. O principal desfecho do estudo foi avaliar a mudança no status de ansiedade e depressão após 12 meses nos dois grupos. Resultados – Foram incluídos 234 pacientes, 115 no grupo antibiótico e 119 no grupo controle. As informações do Hospital Anxiety and Depression Scale e pesquisa da bactéria foram obtidas de 213 pacientes (91,03%) na visita de 12 meses. Com respeito à avaliação da ansiedade após 12 meses os resultados foram: no grupo antibiótico 66,3%(69/104) não modificaram o status da ansiedade, 13,5% (14/104) que não apresentavam passaram a apresentar ansiedade, 20,2%(21/104) que apresentavam ansiedade passaram a não apresentar; no grupo controle 70,6% (77/109), 7,3% (8/109) e 22,0% (24/109) respectivamente. Resultando em um valor de P de 0,340. Quanto a depressão após 12 meses os resultados foram: no grupo antibiótico 71,2%(74/104) não modificaram o status da depressão, 18,3% (19/104) que não apresentavam passaram a apresentar depressão, 10,6%(11/104) que apresentavam depressão passaram a não apresentar; no grupo controle 69,7% (76/109), 10,1% (11/109) e 20,2% (22/109) respectivamente. Resultando em um valor de P de 0,057. Conclusão – Não foi observada relação estatística significativa entre o tratamento do Helicobacter pylori e a mudança de status de ansiedade e depressão nos sujeitos. / Background – The association of infection due to Helicobacter pylori bacteria with some gastric diseases, such as gastric ulcer and gastric cancer, is well defined. However, the association of the bacterium with other diseases, especially extra gastric ones, is not. Methods – We evaluated anxiety and depression and the presence of Helicobacter pylori through endoscopy, in subjects who participated in a study assessing the effects of Helicobacter pylori eradication, in functional dyspepsia. Subjects with Helicobacter pylori infection, suffering functional dyspepsia, were randomized to receive omeprazol, amoxicillin and claritromicin (antibiotic group) or omeprazol plus placebos (control group) during 10 days. Subjects were evaluated at baseline and after 12 months. The main outcome of the study was to assess the anxiety and depression change of status, after 12 months, in both groups. Results – We included 234 subjects: 115 in the antibiotic group and 119 in the control group. We obtained HADS information and bacteria research from 213 subjects (91.03%) at the 12 months visit. Regarding the 12-month anxiety assessment the results were: 66.3% (69/104) did not modify the anxiety status, 13.5% (14/104) who did not present previous signs of anxiety began showing signs of anxiety and 20.2% (21/104) who presented anxiety, ceased to present the condition in the antibiotic group; in the control group the results was 70.6% (77/109), 7.3% (8/109) and 22.0% (24/109) respectively, resulting in a P value of 0,340. As for depression, after 12 months, the results were: 71.2% (74/104) did not modify the depression status, 18.3% (19/104) who did not present previous signs of anxiety began showing signs of depression and 10.6% (11/104) who presented depression, ceased to present the condition in the antibiotic group; in the control group the results was 69.7% (76/109), 10.1% (11/109) and 20.2% (22/109) respectively, resulting in a P value of 0,057. Conclusion – No significant statistical value was observed between the treatment for Helicobacter pylori and the changing status of anxiety and depression in the subjects.

Objetivos: O objetivo deste estudo foi avaliar a influência do Diabetes Mellitus do tipo 2 na farmacocinética da glimepirida em ratos Wistar e descrever o perfil através de modelo farmacocinética populacional (popPK). Metodologia: Os experimentos com animais foram aprovados pelo CEUA/UFRGS (protocolo #27892). O diabetes foi induzido com administração intraperitoneal de 100 mg/kg de nicotinamida, 15 minutos antes da administração intravenosa de 65 mg/kg de STZ. Os animais com nível de glicemia > 250 mg/dL foram considerados diabéticos. A glimepirida foi administrada na dose de 5 mg/kg via i.v. nos animais sadios (n = 11) e diabéticos (n = 9) e quantificada por CLAE-UV. A ligação às proteínas plasmáticas foi determinada por método de ultracentrifugação (Centrifree®). A análise farmacocinética não compartimental (software Phoenix®) foi realizada, assim como a modelagem farmacocinética populacional (software Monolix ®). Resultados e Discussão: A metodologia analítica para quantificação da glimepirida em plasma foi desenvolvida e validada, seguindo os critérios do FDA, apresentou sensibilidade, exatidão e precisão. O modelo de indução da diabetes produziu glicemia > 250 mg/dL. A ligação às proteínas plasmáticas não foi afetada pela doença (LPPSaudáveis = 99,3 ± 0,09%, LPPDiabéticos = 99,13 ± 0,075%, p > 0,05). O modelo farmacocinético populacional estrutural de 2 compartimentos com eliminação de primeira-ordem com covariável categórica (diabetes), foi usado para descrever os perfis plasmáticos de concentração-tempo da glimepirida após administração intravenosa na dose de 5 mg/kg a ratos saudáveis e diabéticos. O CL e a ASC0-inf dos animais diabéticos foram estatisticamente diferentes dos animais saudáveis, CLpop Saudáveis= 0,066 L/h para CLpop diabéticos = 0,024 L/h e ASCpop saudáveis = 19,24 μg/mL.h para ASCpop diabéticos = 59,64 μg.h/mL, indicando que a eliminação foi alterada nos animais diabéticos induzidos STZ. Conclusões: A modela gempossibilitou identificação do parâmetro que atribuiu variabilidade entre os grupos. Desta forma, a variabilidade interindividual foi quantificada e incluída no modelo. O modelo popPK final, nos permitiu elucidar os fatores que afetam a farmacocinética da glimepirida e prever mudanças na exposição em uma população específica. / Objective: The aim of this study was to evaluate the influence of diabetes mellitus type 2 on the pharmacokinetics of glimepiride in rats and describe the profile in population pharmacokinetic model (popPK). Methods: The experiments with animals were approved by CEUA/UFRGS (protocol number). The diabetes was induced by intraperitoneal administration of NA (100 mg/kg) dissolved in saline 15 min before an intravenous administration of 65 mg/kg STZ in citrate buffer (pH 4.5) to overnight fasted rats. Animals with blood glucose level> 250 mg/dL were considered diabetic. After administered of glimepiride at a dose of 5 mg/kg i.v. bolus in healthy (n = 11) and diabetic animals (n = 9). Method HPLC-UV developed and validated quantified plasma concentrations. The plasma protein binding was determined by method ultracentrifugation (Centrifree®). Noncompartmental analysis of pharmacokinetic in Phoenix® software was performed, as well as the model pharmacokinetic population using Monolix®. Performed by Student's t-test for SigmaStat® software. Results and Discussion: The HPLC-UV method for quantification of glimepiride in plasma was developed and validated following requirements by FDA showing sensitivity, accuracy and precision. Induced diabetes model produced glucose> 250 mg / dL. The plasma protein binding was not affect by the disease (LPPSaudáveis = 99.3 ± 0.09%, LPPDiabéticos = 99.13 ± 0.075%, p> 0.05). The model pharmacokinetic population 2 compartments with eliminating first-order with categorical covariates diabetic was used to describe the plasma profile concentration-time glimepiride. The CL and AUC 0-inf of diabetic animals were significantly different. In healthy animals was Clpop Healthy = 0.066 L/h for diabetics Clpop = 0.024 L/h and healthy ASCpop = 19.24 g/mL.h ASCpop for diabetics = 59.64 g/mL.h, indicating that elimination was decreased in induced diabetic rats STZ. Conclusions: popPk enabled identification of the parameter assigned variability between the groups. Thus, the inter subject variability was measured and included in the model. The PBPK final model, allowed us to elucidate the factors that affect the pharmacokinetics of glimepiride and predict changes in exposure in a specific population.

Orientador: Luiza Aparecida Trinca / Banca: José Silvio Govone / Banca: Silvio Sandoval Zocchi / Resumo: Os ensaios na area de farmacologia cl nica envolvem coletas sangu neas e medidas da informação (concentração de um fármaco) em horários pré estabelecidos. A prática atual, na maioria das vezes, estabelece os tempos de coleta arbitrariamente, o que pode resultar em dados pouco informativos para ajustar um modelo. Uma metodologia para resolver este tipo de problema e a construcão de delineamentos otimos. Em geral, os modelos envolvem equações não lineares. Sendo que um modelo popular e o modelo monocompartimental (de primeira ordem de absorção e eliminação) que possui três parâmetros. O problema principal de delineamento para modelos não lineares e que a matriz de variâncias e covariâncias dos estimadores dos parâmetros depende dos valores destes, dificultando o planejamento. Outra dificuldade é que várias coletas são realizadas num mesmo sujeito e portanto as respostas são correlacionadas. Assim, a matriz de variâncias e covariâncias depende também das correlações que podem ser incorporadas considerando-se um modelo não linear com efeitos aleatórios. Esse trabalho visa o estudo da teoria de delineamentos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Trials in clinical pharmacology involves colleting blood samples and measuring the concentration of a drug at pre-especi ed moments. Current practice, usually xes the point times arbitrarily, which can result in uninformative data to t the aimed model. A methodology for solving such problems is the construction of optimum designs. In general, the models involve nonlinear equations. A popular model is the one-compartment model ( rst-order absorption and elimination). This model has three parameters. The main problem of design for nonlinear models is that the matrix of variances and covariances of the estimators of the parameters depends on the values of these, making the planning more di cult. Another di culty is that several samples are performed in the same subject and therefore the responses are correlated. The matrix of variances and covariances also depends on the correlations. The correlations can be incorporated by considering a nonlinear model with random e ects. This work aims to study the theory of optimal designs and the construction of algorithm to optimize designs under the nonlinear model with xed e ects and random e ects. The methodology can produce local optimum designs at some prior value of the parameters or try to reach global optimum through the incorporation of probability distributions of the parameters which are taken into account when calculating the value of the criterion used such designs are called Bayesians. Based on the results of an experiment from the literature D and Aw local and Bayesian optimum designs were obtained. To compare designs their e ciencies were calculated / Mestre