Objetivos: - Analizar las variaciones en la composición lipídica y el contenido de carbohidratos del músculo y de la glándula digestiva de O. vulgaris durante un periodo corto de ayuno, como aproximación a sus requerimientos nutricionales. - Conocer la aceptabilidad y crecimiento de O. vulgaris alimentado con dietas formuladas con diferentes ingredientes de origen vegetal y animal. - Elaborar piensos formulados en base a los resultados previos de aceptabilidad y comprobar su rendimiento en O. vulgaris mediante ensayos de engorde y digestibilidad. - Estimar los requerimientos lipídicos de O. vulgaris después de suministrar dietas con distinto contenido en aceite de pescado, comprobando los cambios que se producen en el crecimiento, aprovechamiento nutritivo y digestibilidad de la dieta. - Determinar la composición nutricional de O. vulgaris después de suministrar dietas formuladas con distinto contenido en aceite de pescado. - Estudiar los cambios que se producen en el crecimiento, composición nutricional, aprovechamiento nutritivo y digestibilidad de la dieta de O. vulgaris después de suministrar dietas formuladas que incluyen carbohidratos simples o complejos. Metodología: -Ensayos de ayuno: Se configuraron 5 grupos experimentales (n = 4). Cuatro grupos se sacrificaron a los días 1, 2, 4 y 8 después de suministrar la última comida y un grupo control fue alimentado durante los 8 días de duración del experimento. El día del sacrificio los animales se diseccionaron separando el tejido muscular y la glándula digestiva. Se determino el contenido de carbohidratos, los lípidos totales, y las clases lipídicas mediante HPTLC. -Aceptabilidad de ingredientes: Se prepararon diferentes dietas formuladas con un ingrediente a testar (30%), gelatina como aglomerante (20%), y agua (50%). Los ingredientes de la dieta se mezclaron al Baño María a 45ºC y se dejaron enfriar a 4ºC. Se utilizaron grupos experimentales de entre 6 y 8 individuos (887,0 ± 274,2 g) y se le suministró la dieta entre 3 y 15 días. Se calcularon las tasas de alimentación y crecimiento y el índice de eficacia alimentaria de cada dieta. -Ensayos de engorde: Se probaron 8 piensos diferentes elaborados con ingredientes secos o liofilizados. La duración de los ensayos fue de 42 a 56 días con ejemplares subadultos (700-800 g) mantenidos a 18ºC en recirculación con control de la temperatura. Se realizaron análisis de composición corporal (humedad, proteína, grasa, cenizas y MELN) de los animales, las heces y en las dietas suministradas. Con los datos obtenidos se calcularon las tasas de alimentación, crecimiento y digestibilidad. Resultados y Conclusiones En los animales sometidos a un periodo de ayuno se detectó un aumento en los monoglicéridos y el colesterol en el músculo y se movilizó un promedio de 0,23 g de lípidos por día de ayuno, principalmente ácidos grasos libres, ésteres de esterol y triglicéridos procedentes de la glándula digestiva. Los lípidos contribuyeron con un 26% y los carbohidratos con un 9,9% al gasto energético diario durante el ayuno en el pulpo de roca. Los piensos elaborados con liofilizados de pescado y la yema de huevo en polvo ofrecieron los mejores resultados, con tasas de alimentación y crecimiento similares a las obtenidas para dietas naturales a base de pescado. Las dietas artificiales semihúmedas basadas en una mezcla de ingredientes secos o liofilizados, que emplearon pota (T. sagittatus) como ingrediente principal, mostraron buenas tasas de alimentación, crecimiento, aprovechamiento nutritivo y digestibilidad, igualando o superando las dietas naturales a base de pescado. Se sugieren tasas óptimas de ingesta de lípidos para el pulpo en torno a 1 g al día, con porcentajes apropiados de grasa para dietas formuladas entre el 13-14% en sustancia seca, aunque estos porcentajes pueden variar en futuros estudios según las proporciones de lípidos polares y neutros de la dieta. La dieta mejor aceptada incluía almidón al 5%, aunque los mejores índices de aprovechamiento nutritivo se observaron en la dieta con glucosa al 5%, destacando un PPV del 72% e índices de conversión inferiores a 1 / Aims: - To analyse the variations in lipid composition and carbohydrates content of muscle and digestive gland of O. vulgaris during short-term starvation as approximation to its nutritional requirements. - To determine the acceptability and growth of O. vulgaris fed formulated diets with different ingredients of vegetal and animal origin. - To prepare formulated diets based on the previous results of acceptability and check its efficiencies on O. vulgaris by means of ongrowing and digestibility experiments. - To estimate the lipid requirements of O. vulgaris after supplying diets with different content in fish oil, comparing the changes that take place in the growth, feed efficiency and digestibility of diet. - To determine the proximate and lipid classes composition of O. vulgaris after supplying formulated diets with different content in fish oil. - To study the changes that produce in the growth, nutritional composition, feed efficiency and digestibility of diet in O. vulgaris after supplying formulated diets including simple or complexes carbohydrates. Methodology: -Experiment of starvation: We configured 5 experimental groups (N = 4). Four groups were sacrificed 1, 2, 4 and 8 days after the last meal and a group control was fed throughout the 8 day experimental period. The day of the sacrifice the animals were dissected separating the muscular and the digestive gland. We determined the content of carbohydrates, total lipids, and lipid classes by means of HPTLC. -Acceptability of ingredients: We prepared different formulated diets with an ingredient to test (30%), gelatine as binder (20%) and water (50%). The ingredients of the diet were mixed at 45ºC and cool to 4 ºC. Each diet was tested in experimental groups of between 6 and 8 individuals (887.0 ± 274. g) during a period between 3 and 15 days. The feeding and growth rates and feed efficiency indices of each diet were calculated. -Ongrowing experiments: Eight different formulated diets including dry or freeze-dried ingredients were tested. The length of the experiments was of 42 to 56 days with subadults (700-800 g) kept to 18ºC in a recirculation seawater system with control of the temperature. The proximate composition (moisture, protein, lipid, ash and MELN) of the animals, the faeces and the diets supplied were analysed. The feeding and growth rates and digestibility were calculated with the data obtained. Results and Conclusions In the animals subjected to a starvation period detected an increase in the monoacylglycerols and the cholesterol in the muscle and 0.23 g of lipids by day of starvation, mainly free fatty acids, steryl esters and triacylglycerols were mobilized from the digestive gland. The lipids contributed with 26% and the carbohydrates with a 9.9 % of the energy costs of the animals during starvation in octopus. The elaborated diet based on freeze-dried fish and egg yolk powder offered the best results, with feeding and growth rates similar to the obtained for natural diets based on fish. The semi-moist formulated diets based on a mixture of dried or freeze-dried ingredients, composed of squid (T. sagittatus) as the main ingredient, showed good feeding and growth rates, feed efficiency and digestibility, similar or surpassing the natural diets based on fish. We propose optimal lipid feeding rates of around 1 g day-1, with appropriate percentages of lipid for formulated diets between the 13-14% dry matter, although these percentages can vary in future studies according to the proportions of polar and neutral lipids of the diet. The best acceptability was detected in the diet formulated with 5% of starch, although the best feed efficiency was observed in the diet with 5% of glucose, highlighting a productive protein value of 72% and a food conversion ratio lower than

Se determinaron: I.) Las concentraciones de sodio, potasio, cloro y proteínas, en el sudor provocado por el ejercicio y la emoción, en equinos SPC, separados en (A) machos enteros; (B) machos castrados; y (C) hembras. II.) El receptor involucrado en la respuesta sudoral de la especie equina. Comprobándose que: 1.- La pérdida de sodio, potasio, cloro y proteínas fue en aumento de diciembre (1980) a marzo (1981). 2.- Las hembras (C) excretaron mayor cantidad de cloro y proteínas que los machos, tanto en ejercicio como en la emoción. 3.- En (B) el sodio tuvo irregular excreción, los valores de los demás parámetros siempre fueron menores que en (A). 4.- Los 3 grupos tuvieron siempre mayores pérdidas por el sudor-emoción que por el sudor-ejercicio. 5.- Receptores beta dos adrenérgicos son los responsables del proceso motor sudoral. / The following items were determined: I.) Sodium, potassium, chloride and protein concentrations in sweat produced by exercise and emotion in thoroughbred, separaated in (A) whole males; (B) castrated males; (C) females. II.) The receptor involved in equine's response to sweat. Prooving that: 1.- The loos of sodium, potassium, chloride and proteins increased from December (1980) to Maarch (1981). 2.- Female (C) excretes more chloride and proteins than males, in excercise and in emotion. 3.- In (B) sodium had irregular excretion. The values for other parametreas were always lower than in (A). 4.- The three groups suffered greater losses in emotinal sweat than in sweat than in sweat induced by exercise. 5.- Beta-2 adrenergic receptors are responsible for the motor sudoral process.

La farmacocinética de la amoxicilina fue determinada en equinos sanos y en equinos en los cuales se indujo artritis aséptica mediante toxina de Escherichia coli. El antibiótico fue administrado por vía IV, IM y VO y se realizó un seguimiento de los parámetros farmacocinéticos, en suero y en líquido sinovial, así como se desarrolló un modelo de inducción de artritis aséptica caracterizando los sintomas clínicos, midiendo variables fisiológicas como frecuencia cardíaca, frecuencia respiratoria, temperatura rectal, y cambios hematológicos y del líquido sinovial. La disposición cinética de la droga administrada por vía IV fue mejor descrita por un modelo bicompartimental. Una fase de distribución lenta fue seguida por una fase de eliminación rapida, con una semivida de eliminación de 1.19 + - 0.113 horas. Las concentraciones de la droga y la vida media de eliminación sugieren su efectividad por esta vía, para su utilización en patologias infecciosas causadas por bacterias Gram positivas, y Gram negativas utilizando dosajes frecuentes. Tras la administración vía IM de la droga en suspensiones acuosas al 10 y 17 por ciento se observó una fase de distribución más rápida para la primera y una semivida superior para ésta también. La absorción fue completa para la suspensión al 10 por ciento a las 24 horas e incompleta para la suspención al 17 por ciento al mismo tiempo. Fue concluido que es preferible la administración de amoxicilina a equinos por la vía intramuscular en suspención al 10 por ciento sobre la suspención al 17 por ciento. El fundamento es el incremento en biodisponibilidad que se logra con la mayor dilución. Las concentraciones observadas tras el uso de la droga por esta vía fueron superiores a las CIM para bacterias Gram positivas y algunas Gram negativas, involucradas en sepsis comunes en equinos para las dos suspenciones. En líquido sinovial las concentraciones de antibiótico tras la administración IM, superaron las CIM para bacterias Gram positivas y fueron inferiores en comparación con las concentraciones séricas, con una persistencia inferior para las dos suspensiones utilizadas. Luego de la administración por vía oral se determino en líquido sinovial una vida media corta con rápida absorción y eliminación, desapareciendo las concentraciones de la droga totalmente a las 12 horas post-administración, La experiencia sugiere utilizar esta vía solamente para bacterias Gram positivas altamente susceptibles a la amoxicilina y utilizando un dosaje frecuente. En animales con artritis experimentas la cinética sérica de amoxicilina no fue diferente de la descripta en animales sano. En sinovia, sin embargo, las concentraciones fueron mucho más elevadas en animales con artritis aséptica respecto de los sanos. El uso de amoxicilina por vía IV podría ser efectiva para el tratamiento de patologías sépticas articulares, al igual que la vía IM en suspención al 10 por ciento. Como recomendación, se sugiere iniciar el tratamiento con la administración IV de la droga, continuando con administraciones IM. / The pharmacokinetic profile of amoxicillin (AMX) was determined in healthy horses and in horses in which aseptic arthritis was produced. Aseptic arthritis was induced using Escherichia coli toxin. AMX was administered by IV, IM and PO routes and pharmacokinetic and bioavalability parameters were estimated. Some physiological variables were measured after the induction arthritis. The kinetic disposition of the drug was best described by a 2 comportment open model. A slow distribution phase was followed by a rapid elimimation phase and the mean half life was of 1.19 + - 0.113 hours. Drug concentrations and mean half life suggests the effectiveness of amoxicillin when used against infectious pathologies caused by Gram positive bacteria, and Gram negative especially if frequent dosing schemes are used. After IM administration as 10 and 17 . aqueous suspensions a faster distribution phase was observed in the case of the former and the mean half life was also longer. There was a complete absorption for the 10. suspension in 24 hours. The absortion process was not completed by the 17. one by the same time. Drug concentrations after IM administration were higher than the MIC for Gram positive and some Gram negative microorganisms involved in common horses infectious processes for both suspenssions. It was concluded that, amoxicillin should be administered to horses as 10. rather than a 17. suspension. In sinovial fluid, the antibiotic concentration after IM administration were higher than the MIC for Gram positive bacteria and showed lower concentrations than serum whith a shorter persistence period as well. After PO administration rapid absorption and elimination of AMX from synovial fluid took place. No drug presence was noticed after 12 hours. The use of PO administration is recommended only for highly susceptible Gram positive bacteria, if a high frequency dosage regime is implemented. In animals with experimental aseptic arthritis, the serum kinetics of amoxycillin was not different from that described in healthy animals. In synovial fluid, however, the concentrations resulted much higher in arthritic animals in comparison with healthy animals. IV administration of AMX would probably act with high efficacy to treat septic articular pathologies in horses. IM (10. ) administration in high dosages could be very useful too. PO administration should be used only in the treatment of highly susceptible Gram positive bacteria, using high dosages. As a recommendation, the suggestion of starting the treatment with IV administration continuing with IM administration is made.

Con el presente trabajo se ha pretendido investigar la influencia de diversos factores relacionados con el cocultivo de los gametos porcinos, sobre los resultados de la fecundación" in vitro" (AV), fundamentalmente con la intención de mejorar la eficacia actual del sistema de AV en cuanto a la consecución de embriones viables (fecundaciones monospérmicas). Para ello, se han utilizado 129 hembras porcinas prepúberes a las que se indujo la ovulación mediante un tratamiento con 1250 U.I. de PMSG y 750 U.I. de HCG. El tratameinto empleado resultó eficaz para los fines perseguidos en un 80'62% de las hembras y el número medio de ovocitos recogidos fue de 19'07 + 1'52 por animal, utilizándose un total de 1984 ovocitos.En relación a las condiciones del sistema de fecundación, el primer factor investigado ha sido el tiempo de cocultivo, entendido como tiempo de contacto entre los gametos. En las dos experiencias realizadas, utilizando tiempos de 4, 6 u 8 horas (experiencia la), o de 1, 2, 3 ó 4 horas (experiencia lb), los mejores resultados se obtuvieron tras 4 horas de cocultivo, ya que los porcentajes de penetración de mantuvieron altos con respecto al máximo alcanzado a las 8 horas (82,68 vs. 93,96%), mientras que los de monospermia no disminuyeron excesivamente con respecto a los obtenidos con tiempos de cocultivo menores, teniendo en cuenta que la concentración de espermatozoides empleada fue intencionadamente elevada (12 x 105 esp/ml). El segundo factor analizado fue la concentración espermática. Se utilizaron concentraciones de 3, 6 y 12 x 105 esp vivos/ml, deduciéndose de los resultados que la mayor efectividad en nuestro sistema correspondía a la concentración de 6 x lO 5 esp/ml, ya que los porcentajes de penetración fueron significativamente diferentes a los obtenidos con la concentración espermática más alta (71'62% vs. 76'83%), y los porcentajes de monospermia tampoco se diferenciaron de los obtenidos con la concentración espermática más baja (62'26 vs. 68'08%). El tercer factor estudiado ha sido la influencia de la presencia o ausencia en el medio de cocultivo del "cumulus" expandido que acompaña al ovocito en la ovulación. Por los resultados obtenidos, se puede pensar que la presencia estas células junto con la correspondiente matriz intrecelular de ácido hialúrico es altamente beneficiosa para la mejora del rendimiento de la FIV debido a que los porcentajes de penetración en los ovocitos denudados (53'69 fueron menores (p<0'0l) que los obtenidos en los ovocitos con "cumulus" (69'10%), mientras que los porcentajes de monospermia fueron superios (p < 0'01) en el segundo caso (39'45% vs. 60'97%). Por último, se ha investigado el efecto de la reducción del volumen medio de cocultivo más comúnmente utilizado (2 mI) a otro menor (0'4 n obteniéndose resultados equivalentes en ambos casos para los porcentajes penetración, pero mayores porcentajes de monospermia (p<0'05) con volumen de 0'4 mI (57'53% vs. 78'12%). Del conjunto de los resultados se deduce que los porcentajes de penetración y polispermia en la AV porcina son consecuencia de la influencia de diferentes factores, entre los que se encuentran el tiempo de cocultivo, concentración espermática, la presencia del "cumulus oophorus" y el volumen de medio de cocultivo utilizados. / In the present work, we have investigated the influence of differen factors, related to porcine gametes coculture, on the results of "in vitro" fertilization (IVF). We have try to improve the efficiency of the current system to get viable embryos (monospermic fertilizations). 129 prepuberal gilts have been used after the induction of ovulation by administration of 1250 I.U. of PMSG followed, 55 hours later, by 750 I.U. of HCG. The results showed that the best moment for the recovery of oocytes was 44 h after HCC administration. In the same way, the treatment followed was effective for the required objectives in 80.62% of the studied females and the medium number of recovered oocytes was 19.07 + 1.52 per animal, giving a total number 01 1984 oocytes used. In relation with the conditions of the fertilization system, the first investigated factor was the coculture time, understanding it as contact time between gametes. To study the effect of this factor, two experiences were realized; fot the first one, 4, 6 or 8 hours of coculture time were used (experience lb) The best results were obtained at 4 hours of coculture, because the percentage of penetration was maintained high (82.68%) and, at the same time, the percentage of monospermy increased (p<O.Ol), although the sperm concentration employed was deliberately high (12 x lOS spx/ml). The second investigated factor was the sperm concentration. The results showed that, among the used concentrations (3, 6 and 12 x lO 5 alive spz/ml), the maximum effectiveness in our system was obtained for the concntration of 6 x lOS spz/ml, since the percentage of penetration was not signficatively different of that obtained with the highest sperm concentration The third studied factor was the influence of the presence or absence of the expanded ."cumulus", which is shed with the oocytes at the ovulation, in the coculture medium. The presence of these cells joined with the intercellular matrix of hialuronic acid was highly beneficious for the improvement of the IVF, because of the percentage of penetration with the denuded oocytes (53.69%) was lower (p<0.01) than that obtained with the .cumulus" enclosed oocytes (69.16%), and the percentage of monospermy was higher (p<0.01) at the second case (39.45% vs. 60.97%). Finally, the percentage of penetration and monspermy was investigated using two different coculture medium volume, one the commonly used by other authors (2 ml) and another minor volume (0.4 mI). The results showed that the percentage of monospermy was higher (p<0.01) with the 0.4 mI volume (57.53 vs.78312%). We may deduce from the total results that the percentages of and monospermy in porcine IVF are due to the influence of different factors, some of them being the coculture time, the sperm concentrarían, the presence of "cumulus". and the coculture medium volume.

El objetivo de este trabajo consistió en describir el papel del sistema plasminógeno/plasmina (PLG/PLA) en la fecundación bovina y porcina. Mediante fecundación in vitro, demostramos que la presencia de PLG ó PLA en el medio de coincubación de los gametos disminuía la penetración de los espermatozoides en los ovocitos y su unión a la zona pelúcida (ZP). Esta disminución no se debía a alteraciones de la funcionalidad espermática ni a cambios en la resistencia de la ZP a la proteolisis, sino a que la PLA provocaba la liberación de los espermatozoides adheridos a la ZP. Mediante inmunofluorescencia indirecta detectamos la presencia de PLG y sus activadores en la ZP y en el oolema de los ovocitos antes de la fecundación. Tras la fecundación, dicha presencia disminuyó o desapareció por completo, por lo que proponemos que el sistema PLG/PLA se activa durante la interacción espermatozoide-ovocito y contribuye a regular la polispermia. / The aim of this study was to describe the role of the plasminogen/plasmin system (PLG/PLA) in bovine and porcine fertilization. Through in vitro fertilization, we demonstrated that the presence of PLG or PLA in the incubation medium of gametes decreased penetration of oocytes and sperm binding to the zona pellucida (ZP). This decrease was not due to alterations in sperm function or changes in the ZP resistance to proteolysis, but the PLA caused the release of sperm previously bound to the ZP. By indirect immunofluorescence we detected the presence of PLG and its activators in the ZP and oolema of the oocytes before fertilization. After fertilization, this presence diminished or disappeared completely, so we propose that the PLG/PLA system is activated during sperm-oocyte interaction and contributes to the regulation of polyspermy.

tesis por compendios / El objetivo de esta tesis doctoral es investigar los ritmos diarios de comportamiento alimentario e indicadores de bienestar en la dorada. Este objetivo general se aborda en 3 áreas temáticas interrelacionadas: selección dietaria, sincronización al horario de alimentación e indicadores de bienestar. El nexo común gira en torno al estudio de los ritmos de alimentación en la dorada, mediante el empleo de comederos a demanda en los cuales el pez es capaz de elegir libremente la cantidad y el momento en el cual desea alimentarse, y si dispone de más de un comedero a demanda, realizar selección dietaria y decidir el tipo de alimento; o bien mediante comederos automáticos que permiten estudiar el efecto sincronizador del horario de alimentación. La alimentación además juega un papel clave en el bienestar de los peces, cuya evaluación requiere considerar los ritmos de indicadores fisiológicos de estrés y el comportamiento alimentario de los peces.

Tesis por compendio de publicaciones / La luz y los patrones de alimentación influyeron sobre el comportamiento, fisiología y reloj molecular de dos peces teleósteos. Se clonaron dos criptocromos de lubina (cry1 y cry2), expresándose en todos los tejidos estudiados y mostrando ritmos diarios de expresión en cerebro, hígado y corazón (excepto cry2). La fase (día/noche) de alimentación a demanda en lubina afecta a los patrones diarios de actividad amilasa intestinal y expresión de period1 en tejidos periféricos (i.e. hígado), pero no en cerebro. Durante las inversiones estacionales de alimentación de la lubina, mostraron mayores valores de glucosa sanguínea durante la fase de alimentación, revelando también los mayores valores medios en lubinas nocturnas invierno. El pez cebra utilizó un nuevo comedero a demanda, mostrando independencia de fase entre ritmos circadianos de alimentación (nocturno) y locomoción (diurno), con diferentes periodicidades. Además la actividad y posición del pez cebra resultó espectro-dependiente, provocando mayores efectos las longitudes de onda cortas. / Thesis summary in English Light and feeding patterns influence on the behaviour, physiology and molecular clock of two teleost fish. Two cryptochromes (cry1 and cry2) were cloned, being expressed in all studied tissues and showing daily rhythm of expression in brain, liver and heart (except cry2). The self-seabass feeding phase (day/night) affected on daily patterns of intestinal amylase activity and on the period1 expression in peripheral tissues (i.e. liver), but not in brain. During the seasonal feeding inversions in seabass, the highest blood glucose levels were shown during their feeding phase, revealing also the highest values in nocturnal seabass in winter. Zebrafish used a new self-feeding system, displaying phase-independence between feeding (nocturnal) and locomotor (diurnal) circadian rhythms, with different periodicities. Moreover, the zebrafish activity and vertical position were spectrum-dependent, being the main effects provoked by short-wavelengths.

La presente Tesis Doctoral tiene como objetivo profundizar en los conocimientos sobre ritmos biológicos y comportamiento alimentario de tres especies de peces teleósteos de interés en acuicultura: tenca (Tinca tinca), trucha alpina (Salvelinus alpinus) y lubina (Dicentrarchus labrax).Con este fin se ha investigado la influencia de factores bióticos y abióticos en la sincronización de los ritmos de actividad locomotora y alimentaria, así como el carácter endógeno y/o exógeno de estos ritmos. A su vez, se ha profundizado en el comportamiento individual de truchas alpinas mantenidas en grupo, mediante una nueva metodología que permite estudiar los ritmos de demanda voluntaria de alimento y la autoselección dietaria de los individuos. Asimismo, se ha analizado la influencia de los niveles endógenos de melatonina, modificados mediante la administración de melatonina exógena y de su aminoácido precursor (triptófano) en la dieta, sobre la concentración de cortisol y el ritmo de actividad locomotora en lubina. / This Doctoral Thesis deeps into the knowledge about biological rhythms and feeding behaviour in three teleostean fish species of interest in aquaculture: tench (Tinca tinca), Arctic charr (Salvelinus alpinus) and European sea bass (Dicentrarchus labrax). With this aim, the influence of biotic and abiotic factors has been researched in the field of synchronization of locomotor and feeding rhythms, as far as the endogenous or exogenous character of these rhythms. Moreover, individual feeding behaviour of Arctic charr kept in groups has been studied trying a new methodology which allows the monitoring of feeding demands and dietary self-selection of individuals. Furthermore, influence of endogenous melatonin modified through exogenous melatonin and its precursor amino acid (tryptophan) administration in the diet, in the cortisol levels and locomotor activity rhythms in sea bass were analysed.