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Efeitos da fotobiomodulação associada a terapia de células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo e implantadas em joelhos com osteoartrite experimental / Effects of photobiomodulation associated with mesenchymal stem cells therapy derived from adipose tissue and implanted in knees with experimental osteoarthritis

Stancker, Tatiane Garcia 30 October 2017 (has links)
Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-17T22:01:31Z No. of bitstreams: 1 Tatiane Garcia Stancker.pdf: 1297386 bytes, checksum: b71324f95aa95befc8016ee8adc416fd (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-17T22:01:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tatiane Garcia Stancker.pdf: 1297386 bytes, checksum: b71324f95aa95befc8016ee8adc416fd (MD5) Previous issue date: 2017-10-30 / Osteoarthritis (OA) is a chronic degenerative process characterized by progressive deterioration of the cartilagereaching subchondral bone. Current interventions have little or no effect on the repair of articular cartilage. Therefore, the therapy throughmesenchymal stem cells (MSC’s) has been a target of interest due to its multilineage potential, becoming an important tool in the attempt of tissue repair. The photobiomodulation (PBMT) has been shown to be favorable in the proliferation of various cell types, including MSC’s. The aim of this study is to determine whether PBMT can increase the retention of adipocyte-derived stem cells (ADSC's) injected into the knee of the rat submitted to the experimental model of osteoarthritis and to analyze the chondroprotective effects of these therapies. ADSC's were collected from 3 male Fischer-344 rats and validated by flow cytometry. The sample was composed of 50 Fischer-344 rats and distributed into five groups: Control group (healthy animals), OA group (animals with OA), OA PBMT group (OA animals treated with PBMT therapy), OA ADSCs group (OA treated with ADSC's injection), and OA ADSC's PBMT group (animals with OA treated with ADSC's injection and PBMT). OA was induced by intra-articular injection of 4% papain solution. OA ADSC's and OA ADSC's PBMT animals received intra-articular injection of ADSC's (1x10⁶) diluted in 100μ of culture medium. For the groups that received PBMT (parameters used: wavelength of 808nm, power of 50mW, energy of 2J, density of energy 71.2J/cm² and spot size 0,028cm²) the applications were performed in 4 points of the articular line of the knee on consecutive days. The euthanasia was performed on the 3rd and 7th days after the treatments,which the articular cartilage was extracted for the quantification of the gene expression by RT/ PCR of SRY, IL-1β, IL-6, TNF-α, IL- MMP-1, MMP's 1 and 2, TIMP's 1 and 2 and collagen type II.For the statistical analysis, One way ANOVA with Tukey's post-hoc test was used andall data are expressed as mean±standard deviation with P<0,05. The results showed that the PBMT and ADSC’s therapies decreased the expression of pro-inflammatory cytokines (IL-1β, IL-6 and TNF-α) and MMP’s 1 and 2 when compared to the OA group. In addition, they increased the gene expression of TIMP's 1 and 2, IL-10 and Collagen type II. And the effects are more effective when therapies are associated. PBMT stimulated the retention of these cells in the intra-articular space. We conclude that the intra-articular ADSC’s injection associated with PBMT has chondroprotective action, modulating the inflammatory process and decreasing the cytokines and MMP's. / A osteoartrite (OA) é um processo degenerativo crônico caracterizado pela degradação progressiva da cartilagem chegando a atingir o osso subcondral. As intervenções atuais para a OAexercem pouco ou quase nenhum efeito sobre a reparação da cartilagem articular.Sendo assim, a terapia através de células-tronco mesenquimais (CTM’s) têm sido alvo de interesse devido a seu potencial de multilinhagem, tornando-se uma importante ferramenta na tentativa de reparação tecidual. A fotobiomodulação (PBMT) tem demonstrado favorecer a proliferação de vários tipos celulares, inclusive as CTM’s.O objetivo deste estudo é determinar se a PBMT pode aumentar a retenção de células-tronco derivadas de adipócitos (ADSC’s) injetadas em joelho de ratos submetidos à modelo experimental de osteoartrite e analisar os efeitos condroprotetores destas terapias. As ADSC’s foram coletadas de 3 ratos Fischer-344 machos e validadas através da citometria de fluxo. A amostra foi composta de 50 ratas Fischer-344 e distribuídas em cinco grupos: grupo Controle (animais saudáveis), grupo OA (animais comOA), grupo OA PBMT (animais com OA tratados com terapia porPBMT), grupo OA ADSC’s (animais com OA tratados com injeção de ADSC’s), e grupo OA ADSC’s PBMT (animais com OA tratados com injeção de ADSC’s e PBMT). A OA foi induzida através da injeção intra-articular de solução de papaína a 4%. Os animais dos grupos OA ADSC’s e OA ADSC’s PBMT receberam injeção intra-articular de ADSC’s (1x10⁶)diluídas em 100μde meio de cultura. Para os grupos que receberam PBMT (parâmetros utilizados:comprimento de onda de 808nm; potência de 50mW; energia de 2J; densidade de energia 71,2J/cm² e área do feixe 0,028cm²) as aplicações foram realizadas em 4 pontos da linha articular do joelho em dias consecutivos. A eutanásia foi realizada no 3° e 7° dias após os tratamentos onde foram extraídas as cartilagens articulares para a quantificação da expressão gênica através de RT/PCR deSRY, IL-1β, IL-6, TNF-α, IL-10, MMP’s 1 e 2, TIMP’s 1 e 2 e colágeno tipo II. Para a análise estatística foi utilizado ANOVA One way com post hoc test o teste de Tukey e os dados foram expressos através da média±desvio padrão com valor de P<0,05. Os resultados mostraram que as terapias através de PBMT e ADSC’s diminuíram a expressão de citocinas pró inflamatórias (IL-1β, IL-6 e TNF-α) e das MMP’s 1 e 2 quando comparados ao grupo OA. Além disso, aumentaram a expressão gênica das TIMP’s 1 e 2, IL-10 e do Colágeno tipo II. E quando as terapias são associadas os efeitos são mais eficazes. A PBMT também mostrou estimular a retenção destas células no espaço intra-articular. Concluímos que a injeção intra-articular de ADSC’s associada a PBMT tem ação condroprotetora, modulando o processo inflamatório, diminuindo as citocinas e MMP’s.
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Investigation of the influence of red and infrared illumination on mechanical properties of cells: Photobiomodulation / Investigação da influência da iluminação (com luz vermelha e infravermelha) em propriedades mecânicas de células: fotobiomodulação

Ana Carolina de Magalhães 22 November 2016 (has links)
The photobiomodulation therapy (PBMT) has many demonstrated applications in the health area including anti-inflammatory and wound healing effects. The main objective of this work is to verify if the PBMT causes measurable changes in the mechanical properties of cells, specifically in red blood cells, epithelial cells and fibroblasts. In addition, to contribute to the knowledge of the action mechanisms of the PBMT, this study intends to support applications of the PBMT during invasive procedures, such as the direct photo-treatment of the blood in surgical procedures with cardiopulmonary bypass, regarding security of the cellular integrity. For this analysis, three experimental techniques were used: optical magnetic twisting cytometry (OMTC), defocusing microscopy and confocal laser-scanning microscopy. Human bronchial epithelial cells were evaluated with OMTC. The epithelial cell culture was either photo-treated or not, with red laser (lambda=660 nm), and fixed power and time (power density of 153 mW/cm2, time 300 s). It was not possible to observe significant differences between photo-treated and control epithelial cells, for the hysteresivity (ratio between the cell loss and elastic shear moduli). The defocusing microscopy, similar to a phase contrast microscopy, was used to study human red blood cells from fresh blood. The red blood cells were either photo-treated or not, with red laser (lambda=660 nm), and different powers and times (power densities from 0 to 510 mW/cm2, times from 0 to 180 s). Some morphological and mechanical characteristics of individual red blood cells were evaluated, such as volume, radial profile of cell thickness, lateral and vertical membrane fluctuations, for the photo-treated and control red blood cells. It was not possible to detect differences between the two groups, for any of the parameters analyzed. For both techniques, the absence of detectable differences might be due to several factors, such as the non-action of the PBMT, with the parameters used, in the epithelial cells and red blood cells or to the small sensitivity of each technique. Confocal laser-scanning microscopy was used to evaluate the actin filaments of mouse fibroblasts. The fibroblast cell culture was either photo-treated or not, with red (lambda=625 nm) or infrared (lambda=808 nm) light and fixed power and time (power density from 113 to 158 mW/cm2, time 300 s). The nucleus and cell areas increased slightly when comparing photo-treated and control cells. On the other hand, the total actin, total actin density and the number of filaments decreased. These changes were detected for a short time after treatment, however, after 24 h they are not anymore detectable. The total branch length does not seem to suffer any modifications. In summary, with the data acquired with the three techniques, it was found that the PBMT, in the red range, with the parameters used, could not cause noticeable changes in red blood cells and epithelial cells, in vitro. On the other hand, the PBMT in the red and near-infrared range, with the power and times used, cause changes in actin filaments of fibroblasts, in vitro, in particular the decrease of the total actin density. / A terapia por fotobiomodulação tem muitas aplicações na área de Saúde devido a sua ação anti-inflamatória e de reparação tecidual. O objetivo geral desse trabalho é verificar se a terapia por fotobiomodulação provoca mudanças nas propriedades mecânicas de células, em particular em hemácias, células epiteliais e fibroblastos. Além de contribuir com o conhecimento dos mecanismos de ação da terapia por fotobiomodulação, este estudo pretende subsidiar aplicações da terapia por fotobiomodulação durante procedimentos mais invasivos, como a iluminação direta do sangue em procedimentos cirúrgicos com circulação extracorpórea, sob o ponto de vista da segurança quanto à integridade celular. Para essa análise foram utilizadas três técnicas experimentais: citometria óptica magnética de oscilação (OMTC), microscopia de desfocalização e microscopia confocal. Com a técnica de OMTC foram avaliadas células epiteliais brônquicas humanas em cultura, foto-tratadas com laser vermelho (lambda=660 nm), com potência e tempo fixos (densidade de potência de 153 mW/cm2, tempo 300 s). Não foi possível constatar diferenças significativas entre as células epiteliais foto-tratadas e as células controle, para a histerisividade (razão entre os módulos viscoso e elástico das células). Com a técnica de microscopia de desfocalização, semelhante a uma microscopia de contraste de fase, foram estudadas hemácias humanas de sangue recém coletado. As hemácias foram tratadas com laser vermelho (lambda=660 nm), com potências e tempos variados (densidade de potência de 0 a 510 mW/cm2, tempo de 0 a 180 s). Foram avaliadas algumas características morfológicas e mecânicas das hemácias individualmente, como o volume, perfil radial de espessura, flutuações lateral e vertical da membrana, tanto para hemácias foto-tratadas quanto para hemácias controle. Não foi possível detectar diferenças entre as hemácias foto-tratadas e controle para nenhum dos parâmetros avaliados. Para ambas as técnicas, a falta de mudanças observáveis poderia ser devida a diversos fatores, como a não ação da terapia por fotobiomodulação nas células epiteliais e nas hemácias, com os parâmetros aqui empregados, ou à falta de sensibilidade de cada uma das técnicas usadas. A microscopia confocal foi utilizada para avaliar os filamentos de actina de fibroblastos de camundongo em cultura, os quais foram foto-tratados com luz vermelha (lambda=625 nm) ou infravermelha (lambda=808 nm) e potência e tempo fixos (densidade de potência de 113 a 158 mW/cm2, tempo 300 s). Foi possível constatar ligeiro aumento nas áreas nuclear e celular das células foto-tratadas em relação aos fibroblastos controle. Também foi possível verificar a diminuição da quantidade total de actina, densidade de actina e do número de filamentos de actina nos fibroblastos foto-tratados. Essas mudanças são detectadas para tempos curtos após o tratamento, sendo que depois de 24 h elas desaparecem. O tamanho total dos filamentos parece não sofrer alterações. A partir dos dados coletados com as três técnicas, foi possível constatar que a terapia por fotobiomodulação, com os parâmetros utilizados, não consegue provocar mudanças perceptíveis em hemácias e em células epiteliais, in vitro. Porém, causa mudanças nos filamentos de actina de fibroblastos, in vitro, em particular a diminuição da densidade de actina total.
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Influência da terapia laser de baixa intencidade em células precursoras miogênicas (in vitro) e durante a regeneração muscular (in vivo).

Amaral, André Capaldo 11 March 2004 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseACA.pdf: 1948849 bytes, checksum: 00677b36766e019e8a7e13bd7b288172 (MD5) Previous issue date: 2004-03-11 / The Low Intensity Laser Therapy (LILT) constitutes one of the resources most used by physical therapists, with the goal of stimulating the process of repairing the skeleton muscle tissue. On the other hand, the intense utilization, its respective action mechanisms and therapeutic effectiveness are not scientifically proved. Based on this, we elaborated the present study aiming to investigate the influence of the LILT, at wavelengths (&#955;) usually used at clinical practices (670, 685 and 830 nm), on the function of the Myogenic Precursor Cells (MPCs), directly responsible for the tissue regeneration process. The beginning phase was carried out throughout in vitro experiments, determining the alterations started by radiations over the proliferation ability and the cellular differentiation. The MPCs used were in the second passage, after had been extracted from four days old Wistar rats. To analyze the proliferation, it was elaborated, for each &#955;, a dose-response data curve including the control group constituted of non-radiated cells, and the irradiated groups with doses of 0.3; 0.6; 0.9; 1.2; and 1.5 J/cm2. This procedure was carried out with the cells under the influence of 5 or 10% of fetal bovine serum (FBS). The dose demonstrating the highest effectiveness on the cellular proliferation in each radiation, was used to establish the influence on the process of cellular differentiation, and investigated throughout the analysis of the expression of the genes related to the isoforms IIa and IIx of the myosin heavy chain (MHC). The final phase of the study was pointed towards the radiation action evaluation, at the same dose parameters used before, on the muscle regeneration process in vivo, after induced cryoscopy lesion at the Tibialis anterior muscles of adults Wistar rats. There were evaluations of the histological, histochemical aspects for the Succinic Dehydrogenase enzyme (SDH) and the activity of the Lactate Dehydrogenase enzymes (LDH) and Citrate Sintase (CS). The outcomes demonstrated that the radiation at &#955; of 670, 685 and 830 nm promoted an increase of 56.8, 70.6 and 84.8 % on the proliferate ability of the PMCs. These values were achieved with the 1.2, 0.6 and 0.3 J/cm2 doses respectively, and with the cells under the influence of 5% of FBS. The highest concentration of serum (10% of FBS) determined a less pronounced bio-stimulating effect, rising only 13.6, 17.5 and 10.9 %, respectively. In relation to the MHC isoforms expression rate, it showed that there was a significant fall of the IIa isoform, due to the action of the 685 nm, and an increase of the IIx isoform, due to the action of the 685 and 830 nm radiations, in relation to the non-radiated cells rate. By means of in vivo analysis, it was possible to demonstrate the ability of radiation at &#955; of 685 and 830 nm on increasing DHL enzymes and CS during the muscle regeneration process. Therefore, according to the outcomes it is allowed to attribute to the LILT an ability &#955; and dose-dependent of influencing the proliferation function and the metabolism of the MPCs. It was not possible to infer its effect on the cellular differentiation process, because of the inverted effect on the MHC isoforms expression, though. / A terapia LASER de baixa intensidade (TLBI) constitui um dos recursos mais utilizados pelos fisioterapeutas com o intuito de estimular o processo de reparo do tecido muscular esquelético. Em contrapartida à intensa utilização, seus respectivos mecanismos de ação e sua efetividade terapêutica não se encontram cientificamente comprovados. Com base nesse contexto, elaboramos a presente pesquisa com o objetivo de investigar a influência exercida pela TLBI, nos comprimentos de onda (&#955;) freqüentemente utilizados na prática clínica (670, 685 e 830 nm), sob a função das células precursoras miogênicas (CPMs), responsáveis diretas pelo processo de regeneração tecidual. A fase inicial foi realizada por meio de experimentos in vitro, determinando as alterações desencadeadas pelas radiações sobre a capacidade de proliferação e diferenciação celular. As CPMs utilizadas encontravam-se na 2a passagem, após terem sido extraídas dos músculos de ratos Wistar com 4 dias após o nascimento. Para analisar a proliferação foi elaborada, para cada &#955;, uma curva doseresposta compreendendo o grupo controle, constituído por células não irradiadas, e os grupos irradiados com as doses de 0.3, 0.6, 0.9, 1.2 e 1.5 J/cm2. Esse procedimento foi realizado com as células sob influência de 5 ou 10 % de soro fetal bovino (SFB). A dose demonstrando a maior efetividade sobre a proliferação celular em cada radiação foi utilizada para estabelecer a influência sobre o processo de diferenciação celular, investigada por meio da análise da expressão dos genes relacionados as isoformas IIa e IIx da cadeia pesada de miosina (MHC). A fase final da pesquisa foi direcionada a avaliar a ação das radiações, nos mesmos parâmetros dosimétricos previamente utilizados, sobre o processo de regeneração muscular in vivo após criolesão induzida no músculo tibial anterior de ratos Wistar adultos. Foram avaliados os aspectos histológicos, histoquímicos para a enzima Succinato Desidrogenase (SDH) e a atividade das enzimas Lactato Desidrogenase (LDH) e Citrato Sintase (CS). Os resultados demonstraram que as radiações nos &#955; de 670, 685 e 830 nm proporcionaram um aumento de 56.8, 70.6 e 84.8 % na taxa de proliferação das CPMs. Esses valores foram alcançados com as respectivas doses 1.2, 0,6 e 0,3 J/cm2 e com as células sobre a influência de 5% de SFB. A maior concentração de soro determinou um efeito bioestimulante menos pronunciado, com elevação de 13.6, 17.5 e 10.9 % respectivamente. Em relação à taxa de expressão das isoformas de MHC foi demonstrado que houve uma significativa diminuição da isoforma IIa, pela ação da radiação de 685 nm, e uma elevação da isoforma IIx, pela ação das radiações de 685 e 830 nm, em relação às células não irradiadas. A análise in vivo demonstrou a capacidade das radiações nos &#955; de 685 e 830 nm em elevar a atividade das enzimas LDH e CS durante o processo de regeneração muscular. Conjuntamente os resultados permitem atribuir à TLBI uma capacidade &#955; e dose-dependente de influenciar a função proliferativa e o metabolismo das CPMs. Porém, não foi possível inferir seu efeito sobre o processo de diferenciação celular em virtude do efeito inverso sobre a expressão das isoformas de MHC.
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Desenvolvimento de dispositivo para imobilização pélvica e efeitos da fotobiomodulação (830 nm) no tecido muscular em diferentes condições experimentais : estudo em ratos / Development of devices for pelvic immobilization and photobiomodulation effects (830 nm) in muscle tissue under different experimental conditions : study in rats

Arruda, Eder João de 20 February 2017 (has links)
Submitted by Aelson Maciera (aelsoncm@terra.com.br) on 2017-06-05T19:10:49Z No. of bitstreams: 1 TeseEJA.pdf: 2933059 bytes, checksum: 5355b23e3d854a8e6867a11ec2458cde (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2017-06-05T20:04:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseEJA.pdf: 2933059 bytes, checksum: 5355b23e3d854a8e6867a11ec2458cde (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2017-06-05T20:05:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseEJA.pdf: 2933059 bytes, checksum: 5355b23e3d854a8e6867a11ec2458cde (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-05T20:10:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseEJA.pdf: 2933059 bytes, checksum: 5355b23e3d854a8e6867a11ec2458cde (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / The effects of photobiomodulation by low level laser therapy (LLLT) on muscle tissue are well known. However, it is not found in the literature studies about the application of LLLT in the pelvic musculature under experimental disuse. The present thesis focused its analysis on three aspects: point out the anesthetic option which interferes the least in the metabolism of glucose, considering that muscle tissue is one of the main sites involved in glycemic regulation (study I), thus the results from this study could support the development of an non invasive pelvic immobilization model in rats (study II) and evaluate its effectiveness, through the chemo-metabolic response of the involved musculature before the muscular atrophy. Then we sought to evaluate if there is reversal of this muscle conditions (study III) by applying LLLT during and after the pelvic immobilization period. The three studies were performed with 80 male rats divided into different experimental groups. For the statistical evaluation, in study I the data were submitted to the Shapiro-Wilk normality test, followed by the ANOVA and Tukey test. In studies II and III the data were submitted to the Kolmogorov-Smirnov normality test followed by ANOVA and Tukey's test (a critical level of p <0.05 was stablished). In study we used 32 Wistar rats (n = 4), aged between 3 and 4 months, weighing 250±50g, distributed in eight groups, of which 4 groups were submitted to the glucose tolerance test (GTT) and another 4 submitted to the insulin tolerance test (ITT). We compared four anesthetics: Thiopental sodium (T, 40 mg/kg), Zolazepan (Z, 50 mg/kg), Ketamine-Xylazine (K, 35 mg/kg and 4 mg/kg) and Tribromoethanol (TRI, 250mg/kg). We concluded that Thiopental and Tribromoethanol anesthetics are the safest because they do not interfere in the glycemic control dynamics. In the study II, we distributed 18 rats were in three groups (n = 6): control (C), pelvic immobilization for 7 days (PI) and remobilized for 7 days after 7 days of device use (RP7). We found a difference (p <0.05) between groups: pelvic muscle glycogen reserves were reduced by 68% in the PI group and 50% in the RP7 group. The group PI had a delay of 10% in the glucose decay constant (KITT). Considering the total protein/DNA ratio groups PI and RP7 presented a reduction of 28% and 24% in the gluteus maximus and 32% and 16% in the iliopsoas, respectively. In the evaluation of the serum concentration of interleukin 6, the group PI had an increase of 27.3% and RP7 19.2% compared to the C. Interleukin 10 increased 30.4% and 14.9% in the IP and RP7 groups, respectively. Tumor necrosis factor (TNF-α) presented a discrete but significant increase of 5% only in the PI group compared to group C. Therefore, the experimental model proved to be effective in mimicking the deleterious effects of disuse, and this effects were not recovered after removing the immobilization device. Based on this findings, study III used 30 rats distributed in five groups (n=6), being; Control (C), Pelvic Immobilization (PI), Immobilized 7 days and remobilized for 7 days (IR), Laser during pelvic immobilization (LDPI) and Laser after pelvic immobilization (LAPI). Thus, the LLLT (Ga-Al-As, continuous λ = 830 nm, P = 30 mW, beam area = 0.116cm², T = 14s, fluency of 3,62J/cm², E = 0.42J; power density = 0.26mW/cm²) was applied on 8 points for 7 consecutive days. This study showed that, considering pelvic immobilization in the experimental condition, LLLT can minimize the catabolism by promoting an increase of glycogen reserves in the involved muscles, improving the total protein/DNA ratio, reducing pro-inflamatory activity (IL-6 and TNF- α) and increasing the anti-inflammatory activity (IL-10), especially when the LLLT was applied during the period of immobilization, providing that skeletal muscles maintain better metabolic and structural conditions even under disuse conditions. Finally, this work was successful in elucidating thiopental and tribromoethanol anesthetics as the ones that least interfere with glucose metabolism, so that this favored the development of an experimental model of disuse with marked muscular catabolism, which can be attenuated by means of photobiomodulation (830 nm). / Os efeitos da fotobiomodulação por terapia laser de baixa intensidade (LLLT) no tecido muscular são bem conhecidos. No entanto, não se encontra na literatura estudos que tenham verificado a aplicação de LLLT na musculatura pélvica sob desuso em caráter experimental. A presente tese concentrou suas análises em três vertentes: Apontar a opção anestésica que menos interfere no metabolismo da glicose, tendo em vista que o tecido muscular é um dos principais sítios envolvidos na regulação glicêmica (estudo I), de modo que os resultados provenientes desse estudo pudessem favorecer o desenvolvimento de um modelo experimental aplicado na imobilização da cintura pélvica de ratos (estudo II) e avaliar sua efetividade, por meio da resposta quimiometabólica, da musculatura envolvida e diante do quadro de atrofia muscular, buscou-se então avaliar se há reversão (estudo III) por meio da aplicação da LLLT durante e após o período de imobilização pélvica. Os três estudos foram realizados com 80 ratos machos da linhagem Wistar (Rathus novergicus var, albinus, Rodentia, Mamalia), com idade de 3 a 4 meses e massa corporal 250±50 g, distribuídos em diferentes grupos experimentais. Para a avaliação estatística, no estudo I os dados foram submetidos ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk, seguido da aplicação da análise de variância ANOVA e teste de Tukey. Nos estudos II e III os dados foram submetidos ao teste de normalidade Kolmogorov-Smirnov seguido de ANOVA e teste de Tukey. Em todos os cálculos foi fixado um nível crítico de p<0,05. O estudo I foi realizado com 32 ratos Wistar, idade entre 3 a 4 meses, massa corporal 250±50g, que foram distribuídos em oito grupos (n=4), dos quais 4 grupos foram submetidos ao teste de tolerância a glicose (GTT) e outros 4 submetidos ao teste de tolerância a insulina (ITT). Os anestésicos utilizados foram: Tiopental sódico (T, 40 mg/kg peso,ip), Zolazepan (Z, 50 mg/kg peso, ip), Ketamina-Xilasina (KX, 35 mg/kg peso e 4 mg/kg peso, ip) e Tribromoetanol (TRI, 250mg/kg peso, ip). Concluiu-se que os anestésicos tiopental e tribromoetanol são os mais seguros por não interferirem nas dinâmicas de controle glicêmico. No estudo II foram utilizados 18 ratos distribuídos em três grupos (n=6): controle (C), imobilização pélvica por 7 dias (IP) e remobilizado por 7 dias após 7 dias de uso do dispositivo (RP7). Constatou-se que houve diferença (p<0,05) entre os grupos, onde as reservas glicogênicas da musculatura pélvica foram reduzidas em média 68% no grupo IP e 50% no grupo (RP7). A constante de decaimento (KITT) revelou retardo de 10% no grupo IP. A razão proteína total/DNA mostrou que houve redução de 28% e 24% no glúteo máximo e 32% e 16% no iliopsoas dos grupos IP e RP7, respectivamente. Na avaliação da concentração sérica de interleucina 6 houve elevação de 27,3% no grupo IP e 19,2% no grupo RP7 comparados ao C. A interleucina 10 expressou elevação de 30,4% e 14,9% nos grupos IP e RP7, respectivamente. O fator de necrose tumoral (TNF-α) apresentou discreta, porém significativa elevação de 5% somente no grupo IP comparado ao grupo C. Portanto, o modelo desenvolvido mostrou-se eficaz em mimetizar os efeitos deletérios do desuso, efeitos esses que não foram reestabelecidos após a remoção do modelo. Com base nos achados supracitados, o estudo III utilizou 30 ratos distribuídos em cinco grupos (n=6), sendo; Controle (C), Imobilização pélvica (IP), Imobilizado 7 dias e remobilizado por 7 dias (IR), Laser durante imobilização pélvica (LDIP) e Laser após imobilização pélvica (LAIP). Assim, a LLLT (Ga-Al-As, contínuo; λ = 830 nm; P= 30 mW; área do feixe = 0,116cm2, T= 14 s; fluência de 3,62J/cm; E= 0,42J; Densidade de potência de 0,25 mW/cm2) foi aplicada em 8 pontos por 7 dias consecutivos. Esse estudo revelou que frente a imobilização pélvica na condição experimental, a LLLT pode minimizar o catabolismo ao favorecer a elevação nas reservas glicogênicas da musculatura pélvica, melhorar a relação proteína total/DNA, reduzir a (IL-6 e TNF-α) atividade pró-inflamatória e aumentar (IL-10) a atividade anti-inflamatória, principalmente quando a LLLT foi aplicada durante o período de imobilização, propiciando que o músculo esquelético mantenha melhores condições metabólicas e estruturais mesmo sendo submetido ao desuso. Por fim, esse trabalho teve êxito em elucidar os anestésicos tiopental e tribromoetanol como os que menos interferem no metabolismo da glicose, de modo que isso favoreceu o desenvolvimento de um modelo experimental de desuso com acentuado catabolismo muscular, que pode ser atenuado por meio da fotobiomodulação (830 nm).
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Análise da influência da irradiação por led em cultura celular / Analysis of the influence of led irradiation in cellular culture

Santos, Jessyca Luana Melo Costa 03 May 2018 (has links)
Submitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2018-06-15T14:59:20Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Jessyca Luana Melo Costa Santos - 2018.pdf: 988766 bytes, checksum: e26f66c4c01ec695f377458e0e9daf89 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-06-15T15:00:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Jessyca Luana Melo Costa Santos - 2018.pdf: 988766 bytes, checksum: e26f66c4c01ec695f377458e0e9daf89 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-15T15:00:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Jessyca Luana Melo Costa Santos - 2018.pdf: 988766 bytes, checksum: e26f66c4c01ec695f377458e0e9daf89 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-05-03 / The light is used for treatment from the earliest days of civilization, considered as one of the oldest therapeutic modalities. Today, there are modern devices such as LEDs and lasers, which generate low-intensity light capable of interacting with biological tissues, triggering cellular responses and increased cellular metabolism necessary for the tissue repair process. The objective of this study was to evaluate the viability and activity of fibroblasts after irradiation with red LED 630nm in different potencies and fixed time. For the experiment, mouse fibroblast, L929 strain in RPMI medium supplemented with 10% fetal bovine serum, L-glutamine, Hepes, 2Mercaptoethanol, streptomycin and penicillin were cultured. After adequate confluence of the cells, the irradiation with fixed time of ten seconds was initiated, the power being varied according to each group: G50, power of 50mW; G75, 75 mW and G100, 100 mW and Control group (GC), without irradiation. The procedure was performed in triplicate. The cells were submitted to the MTT cytotoxicity test, evaluation of nitric oxide production (NO) and evaluation of collagen synthesis. Values were checked for normal distribution and, after failing to meet the assumptions (Kolmogorov-Smirnov, P <0.05), were analyzed by non-parametric Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests at a significance level of 5%. In the evaluation of cytotoxicity there was no significant difference between the control group, G50, G75 and G100. The results of nitrite production by fibroblasts show that there was a significant difference (P <0.05) between the control group and the experimental groups (G50, G75 and G100). Regarding the production of collagen, there was a significant difference (p ˂ 0.05) between the control group and the irradiated groups, but not between (G50, 752 and G100). In this study it was concluded that the irradiation of the L929 fibroblast culture by red led 630nm, at 50mW, 75mW and 100mW potentials for ten seconds, does not cause cell death, stimulates the production of nitric oxide and collagen. / Resumo: A luz vem é usada para tratamento desde os primórdios da civilização, considerada como uma das mais antigas modalidades terapêuticas. Hoje, existem modernos aparelhos como os LEDs e os lasers, que geram luz de baixa intensidade capazes de interagir com os tecidos biológicos desencadeando respostas celulares e aumento do metabolismo celular, necessárias para processo de reparação tecidual. O objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade e atividade de fibroblastos após a irradiação com LED vermelho 630nm em diferentes potências e tempo fixo. Para o experimento foi feito o cultivo de fibroblastos de camundongo, linhagem L929 no meio RPMI suplementado com 10% de soro fetal bovino, L-glutamina, Hepes, 2Mercaptoetanol, estreptomicina e penicilina. Após a confluência adequada das células, iniciou-se a irradiação com tempo fixo de dez segundos, variando-se a potência de acordo com cada grupo: G50, potência de 50mW; G75, 75 mW e G100, 100mW e Grupo controle (GC), sem irradiação. O procedimento foi realizado em triplicata. A células foram submetidas ao teste de viabilidade celular MTT, à avaliação da produção de Óxido Nítrico (NO) e à avaliação da síntese de colágeno. Os valores foram verificados e analisados utilizando ANOVA ao nível de significância de 5%. Na avaliação da citotoxicidade não houve diferença significativa entre o grupo controle, G50, 75 e G100. Os resultados da produção de nitrito pelos fibroblastos demonstram que houve diferença significativa (P < 0,05) entre o grupo controle, e os grupos experimentais (G50, 752 e G100). Em relação à produção de colágeno, houve diferença significativa (p ˂ 0,05) entre o grupo controle e os grupos irradiados, mas não entre o (G50, G75 e G100). Neste trabalho concluiu-se que a irradiação da cultura de fibroblastos L929 por led vermelho 630nm, nas potências de 50mW, 75mW e 100mW durante dez segundos, não ocasiona morte celular, estimula a produção de óxido nítrico e colágeno.
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Fototerapia antimicrobiana: otimização de protocolo experimental in vitro e estudo de resistência bacteriana / Antimicrobial phototherapy: optimization of in vitro experimental protocol and study of bacterial resistance

Galo, Ítalo Dany Cavalcante 16 July 2018 (has links)
Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2018-08-16T13:19:25Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ítalo Dany Cavalcante Galo - 2018.pdf: 2927565 bytes, checksum: 078e47430d5f7162d86e682c8a01e08b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-08-17T11:19:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ítalo Dany Cavalcante Galo - 2018.pdf: 2927565 bytes, checksum: 078e47430d5f7162d86e682c8a01e08b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T11:19:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ítalo Dany Cavalcante Galo - 2018.pdf: 2927565 bytes, checksum: 078e47430d5f7162d86e682c8a01e08b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-07-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Bacterial infections increase significantly the rate of morbidity and mortality in the hospital setting, which is substantially aggravated by the presence of bacterial resistance. For this reason, research that brings therapeutic alternatives that are efficient, cheap and safe in the fight against different infectious agents are necessary. One potential therapy is antimicrobial phototherapy, especially represented by blue light, which shows promise but still requires study and adjustments as to the best way of application. Thus, the present study aimed to verify the antibacterial action of blue light using different experimental protocols in order to clarify contradictions reported in the literature on the subject and to determine a reproducible protocol for the study of bacterial resistance. In vitro cultures of S. aureus, E. coli, P. aeruginosa, K. pneumoniae, S. epidermidis, E. faecalis and C. albicans were performed specifically for each test of light irradiation by blue ( 470 nm) or red (660 nm) light LED emitters. Different variations of light application were performed under two conditions: after inoculation and before inoculation in agar. In addition, preliminary testing was performed to verify the possible development of bacterial resistance to blue light. All of the in vitro assays evidenced important bacterial growth inhibition, showing that the possible inherent biases found in the literature can be eliminated with the adoption of specific protocol measures and that, in fact, the blue light inhibits the growth of these infectious agents. It has been demonstrated that, in all cases, the use high application times (and hence doses) of blue light is required to have better inhibition. The resistance test performed suggests higher sensitivity of S. aureus in relation to P. aeruginosa and E. coli, showing evidence that E. coli tends to become more resistant to successive applications of this photoemission. The present study evidences that the blue light has antibacterial action in all the in vitro protocols tested, being indicated the use of light application with the infectious agent in liquid medium rich in nutrients as a way of optimizing subsequent tests of greater complexity. The test of resistance to the blue light adopted evidences more tendency to resistance by the bacterium Escherichia coli in relation to other species tested. / Infecções bacterianas aumentam significativamente a morbidade e mortalidade no âmbito hospitalar, quadro que se agrava substancialmente na presença da resistência bacteriana. Por esta razão, pesquisas que tragam alternativas terapêuticas que sejam eficientes, baratas e seguras no combate a diferentes agentes infecciosos são necessárias. Uma terapia em potencial é a fototerapia antimicrobiana, representada especialmente pela luz azul, a qual se mostra promissora, mas, ainda demanda de estudo e ajustes quanto a melhor maneira de aplicação. Assim, o presente estudo teve como objetivo verificar a ação antibacteriana da luz azul utilizando diferentes protocolos experimentais a fim de esclarecer contradições reportadas na literatura sobre o tema e determinar um protocolo reprodutível para estudo de resistência bacteriana. Foram realizadas culturas in vitro de S. aureus, E. coli, P. aeruginosa, K. pneumoniae, S. epidermidis, E. faecalis e C. albicans de forma específica para cada teste de irradiação luminosa obtida por meio de emissores LED de luz azul (470 nm) ou vermelha (660 nm). Foram realizadas diferentes variações de aplicação da luz em duas condições: após semeadura e anterior à semeadura em ágar. Além disso, foi feito teste preliminar para verificação de possível desenvolvimento de resistência bacteriana à luz azul. Todas as análises in vitro adotadas evidenciam importante inibição bacteriana, mostrando que os possíveis viesses inerentes a trabalhos encontrados na literatura podem ser eliminados com a adoção de medidas protocolares específicas e que, de fato, a luz azul inibe o crescimento destes agentes infecciosos. Foi demonstrado que, em todos os casos, é necessário o uso de elevados tempos de aplicação (e, consequentemente, doses) de luz azul para se ter melhor inibição. O teste de resistência realizado sugere maior sensibilidade da S. aureus em relação a P. aeruginosa e E. coli, e mostra evidências de que a E. coli tende a se tornar mais resistente à aplicações sucessivas desta fotoemissão. O presente estudo evidencia que a luz azul possui ação antibacteriana em todos os protocolos in vitro testados, sendo indicado o uso de aplicação da luz com o agente infeccioso em meio líquido rico em nutrientes como forma de otimizar testes de maior complexidade subsequentes. O teste de resistência à luz azul evidencia maior tendência à resistência por parte da bactéria Escherichia coli em relação a outras espécies testadas.
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Terapia de fotobiomodulação associada ao exercício físico no estresse oxidativo em modelo experimental de artrite reumatoide induzida por colágeno / Photobiomodulation therapy associated with physical exercise in oxidative stress in an experimental model of collagen-induced rheumatoid arthritis

Santos, Solange Almeida dos 19 December 2016 (has links)
Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-17T21:50:50Z No. of bitstreams: 1 Solange Almeida dos Santos.pdf: 759875 bytes, checksum: f16dbd72a00c1e89bdc4543f27aacd3f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-17T21:50:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Solange Almeida dos Santos.pdf: 759875 bytes, checksum: f16dbd72a00c1e89bdc4543f27aacd3f (MD5) Previous issue date: 2016-12-19 / Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic inflammatory disease characterized by chronic and systemic inflammation, which leads to destruction of the cartilage and bone, and affects tissues in multiple joints. Oxidative stress has been implicated in involvement in various disease conditions, such as rheumatoid arthritis (RA). In vivo experimental studies using photobiomodulation therapy (FBM) have shown positive effects in reducing lipid peroxidation and increasing antioxidant activity. The regular practice of physical exercise has also been reported as a beneficial treatment capable of reducing oxidative damage. The aim of this research was to analyze the effect of photobiomodulation therapy at 2 joules and 4 joules doses associated with physical exercise on oxidative stress in an experimental model of rheumatoid arthritis in protein expression: superoxide dismutase (SOD); Glutathione Peroxidase (GPX) and Catalase (CAT) on thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). Twenty-four male Wistar rats divided into 4 groups were submitted to an AR model (CIA). First immunization were performed at the base of the tail on the days 0 and 07, and after 28 days the third dose was administered intra-articular in both knees of the animals. After the last induction, FBM therapy was started immediately, transcutaneously at two points: medial and lateral, with a total of 15 applications. Treadmill exercise started the day after the last induction and lasted 5 weeks. As results we obtained the decrease of the lipid peroxidation and the increase of antioxidant activities of SOD, GPX and CAT with physical exercise associated to FBM in doses of 2 joules and 4 joules. Conclusion: Physical exercise associated with FBM therapy decreases lipid peroxidation and increases antioxidant activity. / A artrite reumatóide (AR) é uma doença inflamatória crônica redicivante caracterizada por uma inflamação crônica e sistêmica. O estresse oxidativo tem sido referido no envolvimento em várias condições de doenças, como artrite reumatóide (AR). Estudos experimentais in vivo, utilizando a terapia de fotobiomodulação têm demonstrado efeitos positivos na diminuição da peroxidação lipídica, e no aumento das atividades antioxidantes. A prática regular de exercício físico também vem sendo relatada como um tratamento benéfico capaz de diminuir os danos oxidativos. Sendo assim, esta pesquisa tem por objetivo analisar os efeitos da terapia de fotobiomodualçao nas doses 2 joules e 4 joules associado ao exercício físico sobre marcadores de estresse oxidativo em modelo experimental de artrite reumatóide. Foram analisadas expressão proteica: superóxido dismutase (SOD); e Glutationa Peroxidase (GPX) e Catalase (CAT), sobre as substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). 24 ratos machos wistar divididos em 4 grupos foram submetidos a um modelo de AR (CIA), 1ª imunização realizada na base da cauda nos dias 0, 07, e após 28 dias foi administrada 3ª dose intra-articular em ambos joelhos dos animais. Após última indução a terapia de fotobiomodulação foi iniciada imediatamente, por via transcutânea em dois pontos: medial e lateral, as aplicações seguintes aconteceram em dias alternados, totalizando 15 aplicações. O exercício na esteira começou no dia subsequente a última indução e teve duração de 5 semanas. Como resultados obtivemos a diminuição da peroxidação lipídica e aumento das atividades antioxidantes da SOD, GPX e CAT com exercício físico associado a terapia de fptpbiomodulação nas doses de 2 joules e 4 joules. Conclusão: O exercício físico associado a terapia de fotobiomodulação diminui peroxidação lipídica e aumenta atividades antioxidantes.
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Avaliação da independência funcional e da qualidade de vida dos indivíduos com lesão medular após serem submetidos à fotobiomodulação / Evaluation of the functional independence and quality of life of individuals with medular injury submitted to photobiomodulation

Palácio, Paulo Roberto da Costa 18 December 2017 (has links)
Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-19T18:05:15Z No. of bitstreams: 1 Paulo Roberto da Costa Palácio.pdf: 1422325 bytes, checksum: 51b63e3f97165219831c853176256d9e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-19T18:05:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paulo Roberto da Costa Palácio.pdf: 1422325 bytes, checksum: 51b63e3f97165219831c853176256d9e (MD5) Previous issue date: 2017-12-18 / Introduction: Spinal cord injury (LM) is a tragic event that can profoundly affect a patient's life, with physical, psychological, social and environmental implications. Causing the loss of functional independence and reduced expectation and quality of life. The objective of this study was to evaluate if the photobiomodulation is able to influence the treatment of LM, promoting greater functionality and directly reflecting the quality of life of these individuals. Methods: The sample consisted of 25 patients. They were divided into two groups (Control and Photobiomodulation). The control group received physiotherapeutic treatment plus placebo photobiomodulation and the Photobiomodulation group received physiotherapeutic treatment and 12 sessions of low power laser therapy three times a week. All subjects completed the Life Quality Questionnaire (WHOQOL-bref) and the Functional Independence Measure (MIF) scale before, immediately after and 30 days after photobiomodulation. The data were analyzed statistically accepting a p <0.05 and the Shapiro-Wilk test was used for data normality. For the non-parametric variables, the following tests were used: Friedman and Mann-Whitney and for anova parametric variables for repeated measurements and Pearson correlation. Results: There were no statistically significant differences between the groups Photobiomodulation and control, in any of the domains and periods evaluated in the MIF. In the comparison between the groups, statistically significant results were observed in the psychological (0.001), Social (0.001) and General Quality of Life (0.001) domains. Statistically significant results were observed in the correlation between Physical domain and Perception of Quality of life (0.018 and 0.001, respectively) in the periods before and after 30 days of photobiomodulation. Conclusion: It was concluded that FBM was able to promote a significant influence in the social and psychological domains of individuals with LM, representing a good perception in the general quality of life of this population, but did not promote an influence on the functional independence of individuals with LM. / Introdução: A lesão medular (LM) é um evento trágico que pode afetar profundamente a vida de um paciente, com implicações físicas, psicológicas, sociais e ambientais. Causando a perda da independência funcional e redução da expectativa e qualidade de vida. O objetivo deste estudo foi avaliar se a fotobiomodulação é capaz de influenciar no tratamento de LM, promovendo maior funcionalidade e refletindo diretamente na qualidade de vida desses indivíduos. Métodos: A amostra foi composta de 25 pacientes. Foram divididos em dois grupos (Controle e Fotobiomodulação). O grupo controle recebeu o tratamento fisioterápico mais a fotobiomodulação placebo e o grupo Fotobiomodulação recebeu o tratamento fisioterápico e 12 sessões de laserterapia de baixa potência, três vezes por semana. Todos os indivíduos preencheram o Questionário de qualidade Vida (WHOQOL-bref) e a escala da Medida de Independência Funcional (MIF) antes, imediatamente após e 30 dias após a fotobiomodulação. Os dados foram analisados estatisticamente aceitando um p<0,05 e empregou-se o teste de Shapiro-Wilk para normalidade dos dados. Para as variáveis não paramétricas foi utilizado os testes: Friedman e Mann-Whitney e para as variáveis paramétricas anova para medidas repetidas e correlação de Pearson. Resultados: Não foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos Fotobiomodulação e controle, em nenhum dos domínios e períodos avaliados na MIF. Na comparação entre os grupos foram observados resultados estatisticamente significantes nos domínios psicológico (0,001), Social (0,001) e Qualidade de Vida Geral (0,001). Observou-se resultados estatisticamente significantes na correlação entre domínio Físico e a Percepção da Qualidade de vida (0,018 e 0,001, respectivamente) nos períodos pré e pós 30 dias da fotobiomodulação. Conclusão: Concluiu-se que a FBM foi capaz de promover uma influência significante nos domínios social e psicológico dos indivíduos com LM, representando uma boa percepção na qualidade de vida geral desta população, porém não promoveu uma influência na independência funcional dos indivíduos com LM.
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Terapia de fotobiomodulação após extração de terceiros molares inclusos. Estudo clinico randomizado duplo cego / Photobiomodulation Therapy after the extraction of included third molars. Random double blind study

Carlosama, Franklin Eduardo Quel 30 November 2018 (has links)
O objetivo deste estudo clinico duplo-cego, randomizado, controlado foi avaliar a resposta pós-operatória de pacientes após cirurgia de extração de terceiros molares inclusos que receberam a irradiação com diferentes protocolos do terapia de fotobiomodulação. Sessenta pacientes foram recrutados de acordo com os critérios de inclusão e exclusão previamente estabelecidos e distribuídos nos 2 grupos experimentais (irradiados) e no grupo placebo (não-irradiado); n=20. Para o grupo 1: ? 660nm, 100mW, 36J/cm2, 1J por ponto, 10 segundos/por ponto (3 pontos intra-oral 6 extra oralmente). Para o grupo 2: ? 808nm, 100mW, 107 J/cm2, 3J por ponto, 30 segundos/por ponto (3 pontos intra-oral 6 extra oralmente). Para todos os grupos os pacientes foram irradiados imediatamente após o procedimento cirúrgico e às 48h. No grupo placebo foi utilizado um laser com o recobrimento da ponta, não permitindo a saída da luz no tecido alvo. Depois da cirurgia todos os participantes foram orientados quanto as recomendações pós-operatórias de rotina. Os pacientes foram instruídos a preencher um diário para avaliação da intensidade da dor pós-operatória em uma escala numérica de dor do máximo ao mínimo após o término do efeito do anestésico, nos períodos de 4, 6, 8, 24 e 48 horas. Para avaliar o processo inflamatório foram usados dois parâmetros: trismo (avaliado mediante a máxima abertura inter-incisiva) e edema (avaliada mediante três medições extra-orais, por meio de uma fita métrica flexível). Para avaliar a deiscência foi realizada uma escala analógica visual e com um medidor de ponta seca com 4 escores (não existe deiscência, leve 5 mm, moderada 10 mm e grave 20 mm ou mais). As variáveis de inflamação e deiscência foram avaliadas em tres momentos diferentes por um observador calibrado no: pré-operatório, às 48 horas e aos 7 dias. Os valores obtidos foram submetidos à análise estatística para determinação da homogeneidade e normalidade da amostra. A partir desta análise foi escolhido o teste estatístico mais adequado para a comparação entre os grupos experimentais realizados. Os resultados revelaram uma correlação positiva entre a irradiação com terapia de fotobiomodulação e as variáveis estudadas. O laser infravermelho apresentou melhores resultados em termos de dor, trismo, edema e deiscência em relação ao laser vermelho, embora os resultados não forneçam dados estatisticamente significativos quando comparados ao grupo placebo. No entanto, os efeitos do laser após a cirurgia de terceiros molares requer mais estudos devido à grande aplicabilidade na área. / The objective of this random controlled double-blind clinical study, is to assess the post-operatory response of patients after a surgery of extraction of included third molars; that received radiation with different protocols of Low Level Laser. Sixty patients were recruited according to the inclusion and exclusion criteria previously established and distributed into two experimental groups (radiated) and into a placebo group (not radiated); n=20. For group 1: ? 660nm, 100mW, 36J/cm2, 1J per point, 10 seconds/per point (3 points intra-oral 6 extra orally). For group 2: ? 808nm, 100mW, 107 J/cm2, 3J per point, 30 seconds/per point (3 points intra-oral 6 extra orally). For all the groups the patients were irradiated immediately after the surgical process and 48 hours after. In the control group a covered tip laser was used; not allowing the exit of the light towards the alveoli tissue. After the surgery all the participants were learnt about the current post operatory recommendations. Patients were instructed to complete a diary to evaluate postoperative pain intensity on a numerical scale of pain from the maximum to the lowest after the end of the anesthetic effect, in the periods of 4, 6, 8, 24 and 48 hours. To assess the inflamatory process, two parameters were used: Trismus (a measure of the maximum inter-incisor separation) and edema (assessed by three extra-oral measurements done with a flexible measuring tape). To assess the dehiscence, an analogue scale with 4 data fields was used (nonexistent dehiscence, slight 5 mm, moderate 10 mm and severe 20 mm or more). The variables of inflamation and dehiscence were assessed in three different moments by a qualified observer in: pre-operatory, after 48 hours and after 7 days. The values obtained were subjected to a statistic analysis for determination of homogeneity and normality of the sample. From this analysis, the most suitable statistic test was chosen for comparison between experimental groups. The outcome showed a positive correlation between photobiomodulation therapy and the studied variables. The infrared laser showed better results in terms of pain, trismus, edema and dehiscence in comparison to the red laser, although the results did not provide meaningful statistic data when comparing to the control group. Nevertheless, the effects of laser after a surgery of third molars require further studies due to the wide application in the area.
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Análise da citotoxicidade e genocitoxicidade da Aloe vera associada a medicamento endodôntico e fotobiomodulação a laser

Carvalho, Nayane Chagas 02 December 2016 (has links)
This study aims to evaluate the effect of a drug in order to avoid the appearance of side effects of human pulp fibroblasts. The groups were divided into: CTR with culture medium with fibroblasts; CL, FTL only; AA, Aloe vera with distilled water; AL, Aloe vera with distilled water and FTL; HA, calcium hydroxide P.A. With distilled water; HL, calcium hydroxide P.A. With distilled water and FTL; HAA, calcium hydroxide P.A. With Aloe vera and distilled water; HAL, calcium hydroxide P.A. With Aloe vera, distilled water and FTL. Cytotoxicity evaluation was performed with the MTT reagent at 24, 48 and 72 h, for the evaluation of genotoxicity the micronucleus test was used in 24 h. At 24 h, the CL group presented a greater media of cellular viability, and the HA showed lower mean but stimulated greater number of cell division. At 48 h, the CL group presented a higher medium of cellular viability of high genotoxicity, and the HAL showed lower mean. The AL group showed a higher percentage of surviving cells in 72 h with statistic different from the HA and HL groups (p <0.05). (P <0.001) and to the AA group (p <0.01). The AL group exhibited high genotoxicity with significant results when the CTR group (p <0.001) and the AA group (p <0.01). It is concluded that Aloe vera allowed a greater cell viability in human pulp fibroblasts in the presence of calcium hydroxide, with the increase of the genotoxicity increase in this association. Calcium hydroxide and an FTL showed higher cytotoxicity. / Este estudo objetiva avaliar in vitro o efeito da Aloe vera associada a medicamento de uso endodôntico combinados ou não a FTL em fibroblastos pulpares humanos FP6. Os grupos foram divididos em: CTR com meio de cultura com fibroblastos; CL, apenas FTL; AA, Aloe vera com água destilada; AL, Aloe vera com água destilada e FTL; HA, hidróxido de cálcio P.A. com água destilada; HL, hidróxido de cálcio P.A. com água destilada e FTL; HAA, hidróxido de cálcio P.A. com Aloe vera e água destilada; HAL, hidróxido de cálcio P.A. com Aloe vera, água destilada e FTL. A avaliação da citotoxicidade sucedeu-se com o reagente MTT em 24, 48 e 72 h e, para avaliação da genotoxicidade utilizou-se o teste de micronúcleo em 24 h. Em 24 h, o grupo CL apresentou a maior média de viabilidade celular, e o HA mostrou menor média mas estimulou maior número de divisão celular. Em 48 h, o grupo CL apresentou a maior média de viabilidade celular apesar da elevada genotoxicidade, e o HAL mostrou menor média. O grupo AL demonstrou maior percentual de células sobreviventes em 72 h com diferença estatística dos grupos HA e HL (p<0,05). O grupo AL exibiu alta genotoxicidade tendo resultados significantes quando em comparação com o grupo CTR (p<0,001) e ao grupo AA (p<0,01). Conclui-se que a Aloe vera permitiu uma maior viabilidade celular em fibroblastos pulpares humanos na presença do hidróxido de cálcio, contudo houve aumento da genotoxicidade nessa associação. Já o hidróxido de cálcio e a FTL apresentaram maior citotoxicidade.

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