Made available in DSpace on 2014-06-12T22:56:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4294_1.pdf: 2681042 bytes, checksum: 02a4ec56a4d0d261afcc5dd9f2991588 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Este trabalho teve como objetivo utilizar a histoquímica com lectinas para investigar o perfil sacarídico de tecidos prostáticos humanos diagnosticados como hiperplasia prostática benigna (HPB, n = 30) e adenocarcinoma prostático (AP, n = 30). As biópsias foram obtidas nos arquivos do Setor de Patologia do Laboratório de Imunopatologia Keizo Asami (LIKA) da UFPE. Os cortes histológicos (4μm) foram tratados com tripsina e metanol-H2O2 e incubados com as lectinas conjugadas a peroxidase, Con A, LTG e LTA (15, 30 e 30μg/mL, respectivamente). A marcação foi revelada com DAB-H2O2 seguida pela contra-coloração com hematoxilina. Com a lectina Con A, verificou-se uma diminuição no padrão de marcação das células transformadas sendo inversamente proporcional ao nível de malignidade, isto é, no AP as células foram menos marcadas do que no HPB. Este resultado indica uma diminuição ou inacessibilidade de resíduos de glicose/manose resultante da mudança no perfil deste carboidrato nestes dois diagnósticos. A LTG não apresentou especificidade para as células transformadas bem como para o estroma da próstata, em ambos diagnósticos, contudo marcou as células do endotélio vascular. A LTA falhou em reconhecer resíduos de L-fucose nos tecidos estudados. Desta forma os resultados indicam que Con A apresentou-se como um marcador histoquímico para HPB e AP, enquanto que a LTG não. Sendo esta última um marcador de células dos vasos sanguíneos exclusivamente no AP. A diferença de marcação entre os tecidos com AP e HPB, pela lectina Con A, corrobora achados que sugerem existir modificação no padrão glicídico de células malignas, quando comparadas com células transformadas benignamente

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:00:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6565_1.pdf: 3397227 bytes, checksum: 460e0a823d65ddc3c9b179ed89a4acb0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho descreve o estudo espectroscópico de tecidos de mama humana sadios e com neoplasias maligna (Carcinoma Ductal Infiltrante - CDI) e benigna (Fibro- adenoma - FIB) submetidos à histoquímica com lectina, utilizando-se para tal finalidade conjugados obtidos a partir da interação entre a Concanavalina A (Con A) e criptatos de Lantanídeos(III) (criptatos de Ln(III)). Inicialmente foram sintetizados e caracterizados criptatos de fórmula geral Ln(III) µ [(bipy)2py(CONHCH2CH2NH2)2], onde Ln(III)= Tb(III) ou Eu(III), de acordo com metodologia descrita na literatura. A Con A foi conjugada aos criptatos de Ln(III) e a conjugação foi verificada via teste de atividade hemaglutinante. Amostras de tecidos mamários humanos normais e diagnosticados com CDI e FIB foram marcados com os conjugados Con A-criptato de Ln(III) e uma amostra de tecido com CDI foi marcada simultaneamente com o conjugado Con A-criptato de Eu e hemato- xilina/eosina (H.E.). As amostras foram, então, submetidas a medidas de espectroscopia de emissão. Os dados obtidos foram comparados em termos das intensidades de emissão das bandas de emissão característica para cada íon lantanídeo e tratados via Análise de Componentes Principais (PCA), que mostraram razoável separação dos casos por diagnós- tico. A análise da amostra marcada concomitantemente com o conjugado Con A-criptato de Eu(III) e H.E. mostrou ser possível submeter uma mesma amostra a duas metodolgias diferentes de marcação, sem perdas de informação

Orientador: Joaquim Murray Bustorff-Silva / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T08:36:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SbragiaNeto_Lourenco_D.pdf: 2576111 bytes, checksum: bacdcfdd6c5fc7a9fe512cbb767cbdce (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Os tumores do córtex da supra-renal (TCSR) na infância são muito raros e de comportamento imprevisível. Os dados de 33 crianças com TCSR, diagnosticadas entre 1980 e 1996 no Hospital das Clínicas da Universidade Estadual de Campinas e no Centro Infantil "Dr. Domingos Boldrini" em Campinas, foram analisados com o objetivo de se verificar a relação de fatores clínicos, cirúrgicos, anatomopatológicos e imunohistoquímicos com o prognóstico e a sobrevida. A coleta de dados clínicos, laboratoriais, cirúrgicos e evolutivos foi feita por análise retrospectiva dos prontuários médicos. A avaliação histológica foi refeita pelo autor, e cada caso foi classificado de acordo com os critérios de HOUGH et aI. (1979), WEISS et aI. (1984), VAN SLOOTEN et aI. (1985), CAGLE et aI. (1986), WEISS et aI. (1989) modificado e RIBEIRO et aI. (1990), e estadiado pelos critérios de SULLlVAN et aI. (1978). Os estudos imunohistoquímicos com p53, Ki67, c-erb-B2 e bcl-2 foram realizados de acordo com a técnica de HSU et aI. (1981) modificada. Os testes estatísticos empregados foram o exato de Fisher, o Cochran, o Log Rank, o Wilcoxon, além das curvas de sobrevida de Kaplan-Meier aplicados no total dos pacientes e nos pacientes com sobrevida livre de doença (EFS). Os resultados mostraram que 64% dos pacientes eram do sexo feminino, 85% caucasóides, com idade ao diagnóstico entre dois e 96 meses (média de 31 e mediana de 27 meses), 85% da zona urbana, 27% com antecedente pessoal ou familial de contato com agrotóxico e 30% das famílias com história de outros casos de neoplasias. A apresentação clínica predominante foi a virilização isolada (70%), seguida da associação de virilização e síndrome de Cushing (21%), sendo apenas dois pacientes assintomáticos e um com síndrome de Cushing isolada. Os exames laboratoriais endocrinológicos (17-0H e 17-KS urinários e o SDHEA sérico) mostraram-se alterados nos 31 pacientes que foram submetidos à coleta. Dois pacientes não colheram o SDHEA. A avaliação imagenológica apresentou 97% de positividade para o ultra-som de abdome e 100% para a tomografia axial computadorizada. Os lados foram igualmente acometidos. Foram encontrados 22 pacientes no estádio I, cinco no II, três no III e três no IV. As complicações peri¬-operatórias ocorreram em 18% e as várias classificações histopatológicas não puderam predizer o prognóstico. A contagem do número total de mitoses dos tumores foi relevante, quando nos primeiros dez campos havia pelo menos uma mitose. O volume tumoral maior que 200 mL foi estatisticamente significante para malignidade (p<0,0017). Os resultados do p53 e c-erb-B2 (negativo em 100%), Ki67 (positivo em um paciente), e bcl-2 (positivo em nove pacientes), não mostraram correlação prognóstica. O bcl-2 mostrou mais positividade que os demais imuno-marcadores (p<0,0001). A sobrevida global foi de 88%. Os fatores estatisticamente significantes para o prognóstico bom foram o sexo feminino (p=O,025), a ausência de massa abdominal palpável (p=O;012), os estádios I e II de SULLlVAN et aI. (1978) (p=0,014), a ressecabilidade total do tumor na cirurgia (p=0,043), o peso tumoral menor que 100g (p=0,0017) e a classificação de RIBEIRO et aI. (1990) (p=0,004). Em conclusão, os critérios clínicos e cirúrgicos do TCSR na infância são ainda os aspectos mais importantes do prognóstico destas neoplasias e os imuno-marcadores estudados (p53, Ki-67, c-erb-B2 e bcl¬ 2) não foram úteis para predizer o prognóstico tumoral / Abstract: This study was performed to investigate the prognostic significance of clinical, pathological and immunohistochemical findings in a series of children with adrenocortical tumors. A retrospective chart review was conducted on the charts of 33 children with adrenocortical tumors, seen at the Hospital de Clínicas of the Universidade Estadual de Campinas and at the Centro Infantil "Dr. Domingos Boldrini" in Campinas, SP. The histological sections were reviewed and each tumor classified according to the following criteria: HOUGH et al. (1979), WEISS et aI. (1984), VAN SLOOTEN et al. (1985), CAGLE et al. (1986), WEISS et al. (1989), and RIBEIRO et ai. (1990). Staging was.ctone according to SULLlVAN, et ai. (1978). The histochemical analysis of p53, Ki67, c-erb-B2 and bcl-2 was done according to the technique described by HSU et al. (1981). The statistical analysis included Fisher exact tests to compare proportions, Kaplan--Meier (KAPLAN & MEIER, 1958) actuarial survival curves with Log Rank test for group comparisons, and the Wilcoxon and the Cochran tests for comparing histological findings. Sixty-four percent of the patients were female and 85% were Caucasian, with ages ranging from 2 to 96 months. Eighty-five percent were from urban areas, 27% reported contact with agricultural chemicals, and 30% ofthe patients had at least one relative with cancer. Virilization was the most common presentation affecting 70% of patients, followed by the association of virilization and Cushing's syndrome in 21 %. In two patients there were no signs of adrenocortical hyperfunctioning and one presented with signs of Cushing's syndrome alone. Endocrinological tests (urinary 17 -OH e 17 -KS and serum SDHEA) were abnormal in all patients tested. The tumor was detected by ultrasound in 97% of the cases and by CA T scan in 100% of the patients. Both sides were equally affected. Twenty-two patients were classified as stage I, five as stage II, three as stage III and another three as stage IV. None of the different histopathological criteria evaluated were able to correctly predict the outcome. Tumors weighing more than 200g had a significantly greater chance of being malignant (p=0.0017). The imunohistochemical tests for expression of p53, c-erb-B2, Ki67 and bcl-2 were inconclusive as to their prognostic significance, due to the small number of tumors expressing these genes. The following parameters were statistically associated with a good outcome: female gender, absence of palpable .tumor, stages I or II of SULLlVAN et al. (1978), tumor weight below 100g (P=0.0017) and meeting the benign criteria of RIBEIROet al. (1990). It is concluded, that clinical ands surgical parameters are still the most important prognostic factors for pediatric ACT an that, the imunohistochemical markers evaluated in this study had no role in predicting the outcome / Doutorado / Doutor em Cirurgia

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:13:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2950_1.pdf: 1304284 bytes, checksum: e378bb9e29624b94c930b4edfbdd07d5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / O câncer de tecido mamário é o segundo tipo de câncer mais freqüente no mundo e o mais comum entre as mulheres. Dentre os tumores malignos de mama, o carcinoma ductal invasivo (CDI) representam o maior grupo, constituindo cerca de 65 a 80% dos carcinomas mamários. O perfil morfológico e molecular desse carcinoma é bastante heterogêneo, apresentando características bastante variáveis. Uma célula cancerosa não expressa erroneamente apenas proteínas e DNA, mas carboidratos também, o que impulsiona a glicobiologia voltada para dignóstico, prognóstico e terapêuica, sendo as lectinas, uma ferramenta auxiliar. Outra molécula de valor diagnóstico e prognóstico é c-erbB-2 que tem papel chave na proliferação, adesão, diferenciação e motilidade celular. O trabalho objetivou avaliar o perfil de N-aceti-galactosamina em glicoconjugados celulares empregando a histoquímica com lectinas e o perfil imunohistoquímico para c-erbB-2 no CDI. Foram utilizadas 61 biópsias do Setor de Anatomia Patologia do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco. Na histoquímica com lectinas os tecidos foram tratados com tripsina e incubados com as lectinas Dolichos biflorus agglutinin (DBA) e Vicia villosa agglutinin (VVA), específicas para N-acetilgalactosamina (GalNAc), conjugadas a biotina (de 80&#956;g/mL). Para a investigação da proteína c-erbB-2 foi utilizado o método da estreptavidina-biotina-peroxidase. Para a revelação, foi utilizada uma solução de diaminobenzidina (DAB) e H2O2. O perfil de c-erbB-2 apresentou correlação entre a sua superexpressão e o grau histológico e a observação de invasão linfonodal. O CDI apresentou um perfil de reconhecimento para GalNAc diferente para as lectinas estudadas. Não se verificou nenhuma relação entre os achados histoquímicos para VVA e DBA e imunohistoquímicos para c-erbB-2. Resultados demonstram a histoquímica com Lectina como uma técnica auxiliar para avaliação do perfil de glicoconjugados no câncer de mama

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-11-09T08:35:29Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1961523 bytes, checksum: 799f7b3e7935d265d6d9366f8865fce3 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-09T08:35:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1961523 bytes, checksum: 799f7b3e7935d265d6d9366f8865fce3 (MD5) Previous issue date: 2012-12-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As sementes do urucum (Bixa orellana L.), que apresentam dormência, e as estruturas secretoras de bixina do tegumento seminal, ainda são pouco compreendidas do ponto de vista anatômico, histoquímico e químico. Este trabalho teve como objetivo caracterizar o desenvolvimento das sementes de urucum e a ontogenia das estruturas secretoras de bixina por meio de análises anatômicas, micromorfológicas, histoquímicas e químicas. Sementes de urucum foram coletadas da antese aos 180 dias após a antese (d.a.a.), com intervalos de 5 a 15 dias. O material foi processado de acordo com técnicas usuais em microscopia de luz e eletrônica de varredura e também submetido à análise química para detecção de compostos de reserva e bixinoides. O óvulo é anátropo, bitegumentado e crassinucelado. O endosperma é nuclear e a semente é bitegumentada. A testa é parenquimatosa e na mesotesta predominam estruturas secretoras de bixina. A principal camada mecânica é o exotégmen, com células de paredes espessadas dispostas em paliçada. Além de açúcares solúveis acumulados na semente, o endosperma acumula lipídio, amido e proteína, e o embrião acumula apenas lipídio e proteína. Não é constada dormência morfológica, uma vez que o embrião já está desenvolvido na semente madura. Há dormência imposta pelo tegumento, como esclerificação e acúmulo de fenólicos no tégmen e tampão calazal. As estruturas secretoras de bixina se formam no mesofilo da testa de sementes em desenvolvimento, a partir de uma célula inicial com núcleo e nucléolo conspícuos, vários vacúolos pequenos e citoplasma denso. Ocorre coalescimento gradativo de células adjacentes e dissolução de paredes que fazem contato entre estas células, estabelecendo-se uma condição cenocítica. Os vacúolos coalescem e formam um espaço central, delimitado por uma faixa citoplasmática periférica, os núcleos degeneram e a secreção acumula-se no centro. O teor de bixinoides atinge o valor máximo de 0,22% aos 90 d.a.a, e se estabiliza. / The seeds of annatto (Bixa orellana L.), that have dormancy, and the bixin glands of the seed coat, are still poorly understood in terms of anatomy, histochemistry and chemistry. This study aimed to characterize the development of annatto seeds and ontogeny of bixin glands through anatomical, micromorphological, histochemical and chemical analysis. Annatto seeds were collected from anthesis to 180 days after anthesis (d.a.a.), with intervals of 5 to 15 days. The material was processed according to standard techniques for light microscopy and scanning electron microscopy and also subjected to chemical analysis for detection of storage compounds and bixinoids. The ovule is anatropous, bitegmic and crassinucellate. The endosperm is nuclear and the seed is bitegmic. The testa is parenchymatous and bixin glands predominate in the mesotesta. The main mechanical layer is exotegmen, composed of thick-walled cells arranged in palisade. In addition to soluble sugars that are accumulated in the seeds, the endosperm accumulates lipid, starch and protein, and the embryo accumulates only lipid and protein. Morphological dormancy is not observed, since the embryo is fully developed in the mature seed. There is dormancy imposed by the seed coat, as sclerified cells and accumulation of phenolic compounds in the tegmen and chalazal plug. Bixin glands are formed in the mesophyll of the testa in developing seeds, from a single initial cell with nucleus and nucleolus conspicuous, several small vacuoles and dense cytoplasm. Gradual coalescence of adjacent cells and dissolution of cell walls of these cells occur, setting up a cenocitic condition. The vacuoles coalesce and form a central space delimited by a band of peripheral cytoplasm, the nuclei degenerate and secretion accumulates in the center. Bixinoids content reaches the maximum value of 0.22% at 90 d.a.a., and stabilizes.

Orientador: Oslei Paes de Almeida / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-26T10:32:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martinez_MarisolMartinez_D.pdf: 11593706 bytes, checksum: 9204e3ab03e2563ba5f0fa74b21ca2e2 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Os tumores odontogênicos (TO) são um grupo heterogêneo de lesões derivadas de tecidos dentários, que ocorrem nos ossos gnáticos e tecidos adjacentes. Os TO são raros, na grande maioria benignos, representando menos de 4% de todos os espécimes recebidos em laboratórios de patologia bucal. Os TO malignos frequentemente apresentam dificuldades para diagnóstico e correta classificação, com vários pontos ainda não bem esclarecidos. O objetivo desse trabalho foi comparar as características clínicas, histológicas e imunohistoquímicas do carcinoma ameloblástico (CA) e fibrosarcoma ameloblástico (FSA) e dos seus respectivos correspondentes benignos ou seja ameloblastoma (AM) e fibroma ameloblástico (FA). O carcinoma escamocelular intra-ósseo primário (CEIP) também foi comparado com carcinoma escamocelular de mucosa bucal (CEMB). Foi avaliada a expressão imunohistoquímica de citoqueratinas 5, 7, 8, 14, 19, marcadores de proliferação celular Ki-67, p53, p63 e moléculas de adesão celular CD138 (Syndecan), E-cadherin e ?-catenin. Os resultados mostraram que o CA expressaram mais altos níveis Ki-67, p53 e p63 do que AM por tanto, poderiam ser usados como marcadores para diferenciar essas duas lesões. A expressão de CKs 5 e 19 foram alteradas com relação ao padrão observado em AM, pelo que alterações genéticas de essas proteínas poderiam estar presentes nas células malignas. CK19 pode ser um bom marcador para tumores odontogênicos benignos como AM mas não em malignos pois a expressão nestes é variável. Nas moléculas de adesão celular particularmente CD138 não foi observada diminuição da expressão em AC comparada com AM. As características histológicas assim como o perfil imunohistoquímico do CEMB e CEIP foram similares, por tanto, sugere-se que as características clínicas e radiográficas sejam os principais parâmetros para ser considerados no diagnóstico. Nos casos de fibroma ameloblástico (FA) e fibrosarcoma ameloblástico (AFS) a expressão de CKs foi similar em intensidade e localização e Ki-67 em FSA foi mais alto comparado com FA enquanto que p53 foi negative e ambas lesões. A expressão das moléculas de adesão foi similar em ambas lesões sendo mais intensa com CD138. Finalmente, foram ilustradas as características clínicas e histopatológicas de um caso de fibroodontoma ameloblástico pigmentado e um caso de CEIP originado a partir da transformação maligna de um queratocisto / Abstract: Odontogenic tumors correspond to a heterogenous group of lesions derived from dental tissues, involving the jaws and adjacent tissues. OT are rare, the majority benign, representing less than 4% of all specimens of an oral pathology laboratory. OTs frequently present difficulties for the correct diagnosis and classification, with various points yet to be clarified. The objective of this study was to analyze the clinical, histological and the expression of immunohistochemical markers in malignant odontogenic tumors and the benign counterparts. We assessed CK5, 7, 8, 14, 19, Ki-67, p53, p63, CD138 (Syndecan), E-cadherin and ?-catenin expression by immunohistochemistry in 15 and 9 cases of ameloblastoma (AM) and ameloblastic carcinoma (AC) respectively. Dez cases of primary intraosseous squamous cell carcinoma (PIOSCC), 9 cases of squamous cell carcinoma of mouth (OSCC), 8 cases of ameloblastic fibroma and ameloblastic fibrosarcoma (AFS). Also, these were compared expression patterns between these groups. In summary, Ki-67, p53 and p63 expression were higher in AC than in AM and could be used as markers of malignant transformation of AM. CKs 5 and 19 expression in AC are altered in relation to the pattern found in AM, also CK19 is a good marker for benign odontogenic tumors as AM. Our results do not permit to confirm that expression of CD138, is decreased in AC in relation to AM. The histological features as well as the immunohistochemical profile of OSCC and PIOSCC were similar, therefore, suggests that the clinical and radiographic features are the main parameters to be considered for diagnosis. In both AF and AFS the CKs expression in odontogenic islands was similar in intensity and localization, except CK7 that in most cases of AF was focally positive, while in AFS most cases were negative. Ki-67 proliferative index was higher in AFS that in AF, and p53 was negativo in both lesions. Expression of adhesion molecules was similar in AF and AFS, being most intense for CD138 / Doutorado / Patologia / Doutora em Estomatopatologia

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T11:55:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_JeannieNascimentodos_M.pdf: 32745022 bytes, checksum: e65636e6bbbcef6ffef2461bf4bbb383 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: A regionalização do epidídimo de búfalos das raças Mediterrânea (Me), Murrah (Mu) e mestiços Me x Mu foi estudada entre as idades de quatro a trinta e seis meses. Os animais foram agrupados em duas faixas etárias: pré e pós-púberes e os epidídimos foram divididos em 7 sub-regiões denominadas de A a G. Cada sub-região foi analisada sob microscopia de luz e eletrônica de transmissão. A microscopia de luz inclui técnica de rotina para coloração com Hematoxilina e Eosina, histoquímica com P AS e análise morfométrica para diâmetros de túbulo e lúmen e alturas de epitélio e estereocílios. À microscopia eletrônica foram analisados os aspectos ultraestruturais dos tipos celulares do epitélio epididimário e duetos eferentes. Ao longo do epidídimo, à microscopia de luz, observou-se em ambas as faixas etárias, células Principais (P), Basais (B), Apicais (A) e leucócitos intraepiteliais (LI). Figuras mitóticas no terço apical do epitélio também estavam presentes, sendo mais numerosas nas sub-regiões B e C, principalmente em búfalos prépúberes. A análise histoquímica revelou a existência de atividade secretória a partir dos 5 meses de idade, principalmente na sub-região A, a qual contém os duetos eferentes e nestes a atividade se torna cada vez maior com o amadurecimento do animal. Através da análise morfométrica, observou-se que os búfalos em pré-puberdade já possuem bem definidas as variações dos diâmetros tubular e lurninal e das alturas de epitélio e estereoecílios, que se mostraram semelhantes ao observado nos animais pós-púberes. Os diâmetros tubular e lurninal são crescentes entre as sub-regiões A e G, enquanto as alturas de epitélio e estreocílios apresentam um comportamento contrário; mais, em ambos os aspectos morfométricos existe uma diferença significativa (p<O,O5), considerando-se as sub-regiões entre as faixas etárias. Os aspectos ultraestruturais do epitélio em pré e pós-púberes, não mostraram diferença entre A e P; as células B se assemelharam a células de reserva enquanto LI se assemelharam a linfócitos e macrófagos. As células P apresentaram características secretórias e absortivas que variaram de intensidade entre as sub-regiões, especialmente nos búfalos pó-spúberes. O animal de quatro meses de idade já apresentou grande atividade epitelial nas sub-regiões da cauda (F e G) e na sub-região G, possui volumosas estruturas paracristalinas intracitoplasmáticas e intranucleares, também observadas nas sub-regiões E, F e G dos animais pós-púberes. Estas estruturas estão associadas possivelmente ao armazenamento de proteínas / Abstract: The zonation of the buffalo epididymis of Mediterranea (Me), Murrah (mu) breeds and croosbreed Me x Mu was studied in 4 to 36 month old animals. These buffalos were c1assified in two groups, the animals which have not reached puberty (sexually immature) and animals (mature animals) and their epididymis was divided in 7 subregions called A to G. each subregion was analysed with and transmission electron microscopy. Light microscopy inc1uded routine staining with Hematoxilin & Eosin (HE), histochemistry with P AS and morphometric analysis for tubular and luminal diameters and height of epithelium and stereocilia. Throughout the epididymary tubule it was observed with light microscopy that tubules of alI ages have Principal cell (P), basal cell (B), Apical ceeII (A) and intraepithelialleukocytes (LI). Mitotic figures in the apical region of the epithelium are also found and are more numerous in the B and C subregions, specially in buffalos between 5 and 9 months of age. Histochemical analysis revealed the existence of secretory activity from the 5th month of age, principally in the A subregion, where the activity increases with sexual maturation. Morphometric analysis supports the idea that the buffalos which have not reached puberty already havee weell determined diameters and height variations of the tubule, lumen, epithelium and stereocilia. These variations were similar to that observed in buffalos after puberty. Tubular and luminal diameters increase from the A to G subregions while the height of epithelium and stereocilia diminish. However, in both morphometric features a significant difference (p<O.O5) was verified between the subregions of the animals sexually immature and animals after puberty. Ultraestructural features of the epididymary epithelium in both age ranges reveal no differences among the A and P cells; B cells appear to be reserve cells, while LI are similar to lymphocytes and macrophages. In P cells Llltrastructural features suggestive of secretory and absorptive activities were found in varying intensities in alI subregion, specially in buffalos after puberty. The 4 month old mimal already had an accentuated epithelial activity in its caudal subregions (P and G). The G subregion had large cytoplasmic and intranuc1ear paracristalline structures, similar to that Jbserved in E, P and G subregions of buffalos after puberty. These structures are probably !lssociated protein storage / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:01:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4250_1.pdf: 1667928 bytes, checksum: 460ab7d5aafb5bfa6e4047756c71507a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Durante a menstruação pode ocorrer a passagem, através das tubas uterinas, de material endometrial viável, com capacidade de implantação o que, conseqüentemente, originaria um quadro clínico denominado de endometriose. Estudos têm demonstrado que dentre os glicocorticóides, a dexametasona é capaz de inibir o crescimento de uma forma geral e seus efeitos podem ser observados nas funções reprodutivas, por bloquear várias respostas induzidas pelos estrogênios no útero de ratas. Portanto, a presente pesquisa teve por objetivo analisar histomorfometricamente os sítios de implantes endometriais sobre a região externa da musculatura da parede abdominal anterior de ratas tratadas com dexametasona (0,8 mg/Kg/dia). Para tanto, foram utilizadas 40 ratas albinas (Rattus norvegicus albinus), da linhagem Wistar com 90 dias de idade, pesando aproximadamente 150g, as quais foram submetidas à indução da endometriose (implante cirúrgico), através da técnica preconizada por Vernon e Wilson (1985) e divididas nos seguintes grupos: Grupo I - ratas induzidas a endometriose e avaliadas após 34 dias (controle I); Grupo II - ratas induzidas a endometriose e avaliadas após 47 dias (controle II); Grupo III - ratas induzidas a endometriose e após 21 dias do pós-operatório, os animais foram tratados com dexametasona por 13 dias e eutanasiados no dia seguinte ao término do tratamento; Grupo IV - ratas induzidas a endometriose e após 21 dias do pós-operatório, os animais foram tratados com dexametasona por 13 dias e eutanasiados após um período de 13 dias contados a partir do término do tratamento com dexametasona. Nossos resultados mostraram que a dexametasona administrada aos grupos III e IV foi capaz de promover redução do processo inflamatório em ratas com endometriose induzida e também do teor de colágeno estromal; além do que, propiciou considerável diminuição nas áreas ocupadas pelas glândulas

Biomateriais, cerâmicos ou metálicos, para emprego em tecido ósseo, são importantes ferramentas na medicina regenerativa com intuito de reparar, restaurar, restituir, sustentar, tratar e substituir tecido lesionado. A análise da resposta biológica aos biomateriais é um grande desafio, considerando os aspectos inerentes do tecido ósseo mineralizado e as características físicas dos biomateriais. A compreensão do comportamento celular envolvido nesse conjunto tem o intuito de desenvolver biomateriais mais aptos e adequados ao tecido ósseo o qual ele é destinado. O objetivo deste estudo foi avaliar a osteointegração de implantes cerâmicos e metálicos após ensaio in vivo, por meio de técnicas histoquímicas com colorações de Giemsa-Eosina (GE), Hematoxilina-Eosina (HE), Tricrômico de Masson-Goldner (MG), Tricrômico de Masson (TM), Tricrômico de Gomori (GO) e Picrossírus (PS), Azul de Toluidina (AT) além de técnicas imunohistoquímica (IHQ), lectina-histoquímica (LHQ) e marcadores fluorescentes. Implantes cerâmicos à base de fosfatos de cálcio: hidroxiapatita (HAp), &beta;-fosfato tricálcico (&beta;-TCP) e mistura dos dois (BCP) 1:1 em peso, foram produzidos por gelcasting de espuma e pela inovadora técnica da bola de neve. Os implantes à base de titânio comercialmente puro (Ticp) e da Liga Ti-13Nb-13Zr (Liga) foram produzidos por metalurgia do pó; sendo macroporosos, com a adição de diferentes polímeros naturais, ou microporosos, com elevadas densidades, submetidos a diferentes tratamentos de superfície. A avaliação da osteointegração foi realizada em tíbia de coelhos após períodos de reparação, em conjuntos osso-implante: não-descalcificados e descalcificados. Na análise histológica por microscopia óptica com colorações histoquímicas, os conjuntos apresentaram crescimento ósseo com osteointegração em todos os implantes. A análise por fluorescência mostrou as fases e áreas marcadas de acordo com o período de aplicação do marcador, indicando intenso remodelamento ósseo em todo o osso, o crescimento ósseo no interior dos poros e ao redor dos implantes para os marcadores tetraciclina e calceína. Com a análise de IHQ foram avaliados os marcadores para osteopontina (OP), osteonectina (ON) e osteocalcina (OC), e com LHQ foram avaliadas 5 lectinas. O melhor marcador por IHQ foi para OP, havendo correlação entre a marcação com WGA pela LHQ e OP pela IHQ. A técnica de LHQ foi bem sucedida em criar perfis de comparação entre os biomateriais. A maior marcação por RCA-1 para todos os implantes cerâmicos e metálicos, indicam que esta é um promissor marcador para diferenciação em estudos de osteointegração, bem como a marcação por sWGA e PNA nos implantes de Liga. / The use of biomaterials in bone, whether ceramic or metallic, are important tools for regenerative medicine aiming to repair, restore, restitute, support, treat and substitute damaged tissue. The evaluation of biological response towards biomaterials is a big challenge considering the inherent aspects of mineralized bone tissue and physical characteristics of biomaterials. The understanding of the cellular behavior involved will propitiate the development of more fit and adequate biomaterials to the targeted bone. The objective of this study was to evaluate the osseointegration of ceramic and metallic implants after in vivo testing on bone, with histochemical staining techniques as Giemsa-Eosin (GE), Hematoxylin-Eosin (HE), Masson-Goldners Trichrome (MG), Massons Trichrome (MT), Gomoris Trichrome (GT), Picrosirius Red (PS), Toluidine Blue (TB), besides Immunohistochemistry (IHC), Lectinhistochemistry (LHC) and Fluorescent labeling. The ceramic implants were produced using calcium phosphates: hydroxyapatite (HAp), &beta;-tricalcium phosphate (&beta;-TCP) and their biphasic mixture (BCP) 1:1 by weight, as ceramic foam by gelcasting or as ceramic spheres obtained by the innovative Snowballing technique. The metallic implants were produced using commercially pure titanium (cpTi) and alloy Ti-13Nb-13Zr (Alloy) by powder metallurgy, using natural polymers as additives to achieve macroporosity and microporous without additives and different surface treatments. The osseointegration evaluation was performed on implanted tibia bone of New Zealand White rabbits after repair period in bone-implant samples either decalcified or undecalcified. Histological analysis of stained slides with optical microscopy showed samples with bone ingrowth and osteointegration on all implants. The Fluorescent analysis evidenced the bone growth phases and areas according to each marker injection period. Intense remodeling process throughout the bone, bone ingrowth inside the pores and surrounding the implants was observed with the markers tetracycline and calcein. The IHC analysis was performed using markers for osteopontin (OP), osteocalcin (OC) and osteonectin (ON), and LHC analysis using five lectins. The best marker by IHC was OP; with correlation between the result of lectin WGA and the antibody for OP. The LHC technique was successful creating profiles for comparison between biomaterials. The results of RCA-1 for all ceramic and metallic implants indicates that this is a promising marker for differentiation at osseointegration studies, as well as the results of sWGA and PNA for Alloy implants.

Submitted by Caroline Falcao (caroline.rfalcao@ufpe.br) on 2017-04-05T16:39:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 2011-Tese-MoacyrRêgol.pdf: 2001004 bytes, checksum: 1fa7b5e19c232f34bd9c8735fac6c753 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-05T16:39:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 2011-Tese-MoacyrRêgol.pdf: 2001004 bytes, checksum: 1fa7b5e19c232f34bd9c8735fac6c753 (MD5) Previous issue date: 2011-08-26 / Este trabalho objetivou analisar a expressão de Galectina=1(Gal=1), Galectina=3 (Gal=3) e ligantes de lectinas em ambientes hipóxicos e/ou privados de nutrientes em célula de câncer de mama e em biópsias tumorais. Para modelar o evento in vitro a linhagem celular de câncer de mama T47D foi submetida à hipóxia em câmara de hipóxia durante 24, 48 e 72h com ou sem privação de nutrientes. Os grupos controles (normóxia com ou sem nutrientes) foram mantidos em estufa de CO2. As biópsias tumorais de carcinoma ductal invasivo (CDI) foram divididas em dois grupos: um positivo e outro negativo para o marcador de hipóxia (CA IX) assim como as biópsias de carcinoma ductal in situ (CDIS) foram divididas em comedônicas/hipóxas e não=comedônicas/controle, para posterior comparação quanto aos parâmetros clínicos, histopatológicos e glicobiológicos. Os experimentos com T47D mostraram que a expressão de Gal=3 aumenta progressivamente quando submetida à hipóxia e privação de nutrientes durante 24, 48, 72h. As biopsias de CDI positivas para CA IX apresentaram uma marcação nuclear mais intensa que o grupo negativo e características tumorais mais agressivas como invasão linfonodal e ausência de Receptor de estrógeno. Gal=1 não foi expressa pelas células neoplásicas no modelo in vitro bem como nas biópsias, onde foi possível detectar positividade nas células do estroma associadas ao tumor. Quanto ao papel da Gal=3 na proteção a morte celular, utilizando=se citômetria de fluxo, observou=se que não houve correlação entre a inibição do domínio de reconhecimento a carboidratos da proteína e o aumento de morte celular. Entretanto, foi observada indução a morte para o anticorpo monoclonal M338, específico para o N=terminal de Gal=3, sendo esta marcação aumentada em até três vezes durante o aumento de morte celular em 48h e 72h de hipóxia e privação de nutrientes. A histoquímica com lectinas foi utilizada em amostras de CDIS com Con A, WGA e UEA=I e de CDI com L=PHA e SNA. Nos casos de CDIS as lectinas utilizadas reconheceram mais casos do grupo comedônico (hipóxico) que o não=comedônico. Ao passo que nas biópsias de CDI foi observado um aumento na sialilação assim como nas células T47D (in vitro) onde se pode avaliar que esta glicosilação não é de responsabilidade exclusiva de ST6GALNac. Nossos resultados indicam que ocorre uma glicosilação aberrante no ambiente hipóxico in vitro e in vivo associada a um fenótipo tumoral mais agressivo bem como sugere que Gal=3 participa da proteção contra morte celular e informativa para diagnóstico e prognóstico. / This study aimed to analyze the expression of Galectin=1, Galectin=3 and lectin ligands in hypoxic environments starved or not of nutrients in breast cancer cells and in tumour biopsies. In vitro experiments in T47D breast cancer cells were subjected to hypoxia in hypoxia chamber for 24, 48 and 72h with or without nutrients; control groups (in normoxia and nutrients supplied) were kept in CO2 incubator. Invasive ductal carcinoma (IDC) biopsies were divided into two groups: one positive and one negative for hypoxia marker Carbonic Anhydrase (CA IX); and Ductal Carcinoma in situ (DCIS) samples were divided in comedonecrosis/hypoxic or non=comedonecrosis/control groups, and then they were compared to clinical, histopathological and glycobiology aspects. Confocal microscopy, real=time PCR and western blotting showed that Galectin=3 expression was predominantly nuclear and increased progressively when subjected to hypoxia for 24, 48, 72h and nutrient starvation. CDI samples positive for hypoxia marker CA IX presented an intense nuclear staining in comparison to control group besides more aggressive tumour features as node positivines and absence of ER staining. Gal=1 was not expressed by neoplastic cells in cell model and biopsies, where it was possible to detect positivity in tumour=associated stroma. The evaluation of Gal=3 role in cell death protection using flow cytometry showed that there was no correlation between inhibition of Gal=3 carbohydrate recognition domain and the increase in cell death rate. However, it was observed that monoclonal antibody M338, specific to Gal=3 N=terminal, positivity increased with the increasing of dead cells after 48h and 72h under hypoxia and starvation. Lectin histochemistry for Gal=3 ligands or Gal=3=ligant complex preventing carbohydrates were investigated using Con A, WGA, PNA and UEA=I for DCIS and L=PHA, SNA and VVA for CDI. Results indicated that in CDIS the lectins used recognized more intensely the comedogenic/hypoxic group while in CDI samples were observed an increase in sialylation as well as in T47D cells indicating that ST6GALNac is not the only responsible for this event. Our results indicate that aberrant glycosylation occurs in hypoxic environments associated with a high aggressive tumour phenotype providing information of diagnostic and prognostic value. Results also suggest that Gal=3 participates in the protection of cell death by N=terminal and that sialylation in hypoxic environment is not mainly caused by N=glycosylation.