Ilex paraguariensis é uma importante planta nativa da América do Sul, popularmente conhecida como mate, cujas folhas são tradicionalmente consumidas na forma de infusão. Muitos benefícios à saúde são mencionados para a utilização de seus constituintes, entre eles as saponinas. Várias propriedades farmacológicas são atribuídas as saponinas. No mate, o maior teor delas ocorre nos frutos imaturos. Os fungos promovem sérias micoses invasivas em indivíduos com a saúde comprometida. Sendo assim, este trabalho objetiva avaliar o potencial antimicótico do extrato aquoso e de uma fração purificada de saponinas, ambos obtidos de frutos verdes do mate, frente aos principais fungos causadores de micoses. Visa também o estudo da associação entre a fração de saponinas e o fluconazol. Inicialmente foram avaliadas quanto à susceptibilidade 16 espécies, entre fungos leveduriformes e filamentosos. Nove Candida spp. foram selecionadas para os estudos de CIM, de associação por Checkerboard e pela metodologia de superfície de resposta, e por fim para pesquisa do mecanismo de ação. As espécies de Candida foram mais sensíveis a associação da fração de saponinas com fluconazol, que aos mesmos isoladamente. A associação foi capaz de reverter à resistência ao fluconazol em alguns isolados. Os testes de mecanismo de ação revelaram variações entre os isolados, não sendo possível afirmar apenas um mecanismo geral de ação da combinação. Ensaios microscópicos revelaram um predomínio do brotamento e a presença de um material viscoso em torno das leveduras, enquanto que o ergosterol exógeno revelou a possibilidade de interação com as saponinas, interferindo na atividade antifúngica. / Ilex paraguariensis is an important native plant from South America, generally known as Yerba Mate, which is traditionally consumed as an infusion made from the leaves. Many health benefits have been mentioned for the use of its constituents, including the saponins. Several pharmacological properties are atributed to the saponins, where it´s highest content can be found in mate green fruits. The fungi promote serious invasive mycoses in individuals with compromised health. Thus, this study aims to evaluate the antifungal potential of the crude extract and the purified saponins fraction, both obtained from unripe mate fruits, in the treatment of mycoses causing fungi. It also aims evaluate the antifungal association of saponins fraction and fluconazole. At first were evaluated the susceptibilities of 16 species, including yeasts and filamentous fungi. Nine Candida spp. were selected for the studies of minimal inhibitory concentration, association assay, checkerboard, response surface methodology, and finally to investigate the antifungal action mechanism. Candida species were more susceptible to the fraction of saponins more fluconazole, than the neat substances. Their association was able to reverse fluconazole resistance in some isolates. The mechanism of action assays revealed variations between the isolates, then, it was not possible to explain a general mechanism of action for this antifungal activity. Microscopic studies demonstrated a predominance of buds and a viscous liquid around the cells. Furthermore, exogenous ergosterol showed the possibility of interaction with saponins, interfering antifungal activity.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-05Bitstream added on 2014-06-13T19:53:30Z : No. of bitstreams: 1 000742104.pdf: 1014576 bytes, checksum: 756eb37581269053728e8fa1771a4c98 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / O envelhecimento em fêmeas é caracterizado por declínio progressivo nas funções bioquímicas e fisiológicas de vários tecidos e órgãos, que resulta em menor produção de estrógeno, diminuição da defesa antioxidante e aumento do estresse oxidativo. Ervas com poder antioxidante que possam minimizar os efeitos do estresse oxidativo na senilidade vem sendo estudadas e o Ilex paraguariensis (chá mate), consumido em alguns países da América do Sul na forma de chá, apresenta elevada capacidade antioxidante in vivo, além de aumentar a expressão de enzimas antioxidantes. Este trabalho analisou o efeito da administração de chá mate por 8 semanas, na defesa antioxidante e dano oxidativo de ratas jovens e senis. Fêmeas Wistar de 4 e 17 meses de idade foram distribuídas nos grupos: Senis (S), Senis tratadas com chá mate (SCM), Jovens (J) e Jovens tratadas com chá mate (JCM). Os grupos SCM e JCM receberam diariamente chá mate na dose de 20 mg/kg de massa corpórea, por oito semanas. Foram avaliadas a capacidade antioxidante no plasma, as substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e a atividade das enzimas antioxidantes, superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase no hemolisado e homogenato do fígado. O chá mate aumentou a capacidade antioxidante no plasma, diminuiu TBARS e elevou a atividade das enzimas antioxidantes no hemolisado e homogenato do fígado, porém as respostas ao tratamento foram influenciadas pela idade. / Aging process in females is characterized by a progressive decline in biochemical and physiological functions of various tissues and organs, resulting in decreased production of estrogen, decreased antioxidant defense and increased oxidative stress. Herbs with antioxidant properties that can minimize the effects of oxidative stress in aging have been studied and Ilex paraguariensis (mate tea), consumed in some countries of South America in the form of tea has high antioxidant capacity in vivo, in addition to increasing the expression of antioxidant enzymes. This study examined the effect of administration of mate tea for 8 weeks in antioxidant defense and oxidative damage in young and senile rats. Female rats (4 and 17 months of age) were allocated into groups: Senile (S), Senile treated with mate tea (SCM), Young (J) and Young treated with mate tea (JCM). SCM and JCM received daily mate tea (20 mg / kg body mass) for eight weeks. We evaluated the antioxidant capacity of plasma (FRAP), the thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and antioxidant enzymes, superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase in liver homogenate and hemolysate. Mate tea increased the plasma FRAP, decreased TBARS and increased the antioxidant enzyme activity, both in hemolysate and liver homogenate, but responses to treatment were influenced by age.

A erva-mate (Ilex paraguariensis A.St.-Hil.) é uma espécie nativa da América do Sul, muito utilizada no preparo de bebidas estimulantes. As folhas e ramos utilizados no preparo destas bebidas não são consumidos na sua forma in natura ou bruta, ao contrário, eles passam por uma série de processamentos industriais como o sapeco, secagem, moagem e envelhecimento. As condições de processamento podem modificar as características sensoriais assim como podem influenciar diretamente a quantidade final de substâncias bioativas presentes na ervamate. As principais classes de compostos bioativos encontrados na erva-mate são as metilxantinas, os polifenóis e as saponinas. Essas substâncias são responsáveis por uma série de efeitos benéficos, como a atividade antioxidante, hipocolesterolemiante, anti-obesidade, anti-inflamatória e cardioprotetora. Porém, não foram encontrados na literatura, estudos que correlacionem a atividade da erva-mate sobre o metabolismo de proteínas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o metabolismo de aminoácidos e de lipídios em ratos tratados com extrato aquoso de erva-mate comercial e bruta. Foram utilizados 30 ratos Wistar machos divididos em três grupos: grupo controle (CTR): animais tratados com ração padrão e água ad libitum, grupo da erva-mate comercial (COM) e grupo da erva-mate bruta (BRU): animais tratados com ração padrão e extrato de erva-mate comercial ou bruta ad libitum, respectivamente. Além da captação do ácido aminoisobutírico (AIB-14C), da oxidação de Lalanina- 14C e da síntese de proteínas a partir de Leucina-14C, também foram avaliados o peso corporal, os níveis séricos de insulina, glicose, colesterol total, triglicerídeos, ureia, proteínas totais e os índices das gorduras retroperitoneal e epididimal e a respectiva atividade lipolítica desses tecidos. O tratamento com o extrato de erva-mate comercial aumentou significativamente a captação de AIB-14C no fígado. Ambos os tratamentos com extrato aquoso de erva-mate comercial e bruta reduziram drasticamente a síntese de proteínas no fígado e o peso das gorduras retroperitoneais e aumentaram os níveis de lipólise do tecido adiposo epididimal. Apenas o grupo COM reduziu significativamente o ganho de peso dos animais enquanto que apenas o grupo BRU reduziu os níveis séricos de triglicerídeos. Ambos os extratos COM ou BRU não modificaram o metabolismo de proteínas no músculo sóleo. Este trabalho demonstrou pela primeira vez que a erva-mate é capaz de interferir no metabolismo hepático de aminoácidos e no metabolismo de lipídeos, sem interferir no metabolismo de proteínas do músculo esquelético. Além disso, foi observado que alguns efeitos estão diretamente relacionados a proporção entre os compostos bioativos presentes nos extratos, visto que os extratos de erva-mate comercial e bruta diferiram em vários resultados. / Yerba mate (Ilex paraguariensis A.St.-Hil.) is a native specie from South America, widely used in the preparation of stimulant drinks. The leaves and branches used in these drinks are not consumed in the natural or gross form, rather, they undergo a series of industrial processes such as singeing, drying, milling and aging. The processing conditions can modify the sensory characteristics and can directly influence the final amount of bioactive substances present in yerba mate. The major classes of bioactive compounds found in yerba mate are methylxanthines, polyphenols and saponins. These substances are responsible for a number of beneficial effects such as antioxidant activity, cholesterol lowering activity, anti-obesity, antiinflammatory and cardioprotective effects. However, weren’t found in the literature, studies that correlate the activity of yerba mate on proteins metabolism. The aim of this study was to evaluate the amino acids and lipids metabolism on rats treated with aqueous extract of commercial or gross yerba mate. We used 30 male Wistar rats divided into three groups: control water group (CW): animals treated with standard chow and water ad libitum, commercial mate group (CM) and gross mate group (GM): animals treated with standard chow and aqueous extract of commercial or gross yerba mate ad libitum, respectively. Beyond the uptake of aminoisobutiric acid (AIB-14C), the oxidation of L-alanine-14C and protein synthesis from Leucine-14C, were also evaluated body weight, seric levels of insulin, glucose, total cholesterol, triglycerides, urea, total protein and fat contents of retroperitoneal and epididymal and the lipolytic activity of these tissues. The treatment with the commercial yerba mate extract significantly increased uptake of AIB-14C in the liver. Both treatments with aqueous extract of commercial and gross yerba mate drastically reduced protein synthesis in the liver and retroperitoneal fat weight and increased levels of epididymal adipose tissue lipolysis. Only the CM group significantly reduced the weight gain of the animals while only the GM group reduced levels of seric triglycerides. Both extracts CM or GM did not change the protein metabolism in the soleus muscle. This study first demonstrated that yerba mate is able to interfere with the hepatic metabolism of amino acid and lipid metabolism, without interfering with protein metabolism in skeletal muscle. Moreover, it was observed that some effects are directly related to the ratio of bioactive compounds present in the extracts, whereas extracts of commercial yerba mate and gross yerba mate differed in several outcomes.

A erva-mate (Ilex paraguariensis Saint Hillarie) é uma espécie nativa da região meridional do Brasil, cujas folhas, após o processamento, são utilizadas como bebida pelas populações do Brasil, Argentina, Paraguai, Uruguai e outros países da América do Sul. O objetivo deste trabalho foi verificar a presença de bactérias mesófilas, termófilas, bolores, leveduras e a diversidade de bactérias e leveduras nas amostras in natura e após processamento. Também de verificar a qualidade sanitária na erva-mate já processada. As coletas das amostras foram realizadas de janeiro a junho de 2013, no município de Vargeão, Santa Catarina. Foram utilizados os métodos oficiais de análises de alimentos da Association of Analytical Communities e do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. O termófilo mais encontrado tanto na erva-mate processada quanto nas folhas foi o Bacillus licheniformis. Os mesófilos que predominaram nas folhas foram: Pantoea ananatis, Staphylococcus sciuri e Staphylococcus epidermidis. Já na erva-mate processada os mesófilos mais frequentes foram: Bacillus megaterium, Bacillus amyloliquefaciens e Klebsiella pneumoniae. As principais leveduras identificadas nas folhas foram: Aureobasidium pullulans e Sympodiomycopsis sp. Dois isolados do gênero Sympodiomycopsis foram sequenciados e trata-se de uma nova espécie. Na erva-mate processada as leveduras identificadas foram: Rhodosporidium kratochvilovae, Rhodotorula mucilaginosa, Sporobolomyces nylandii. E verificou-se que todos os parâmetros microbiológicos para a erva-mate processada atenderam tanto à legislação brasileira vigente, como também aos parâmetros estabelecidos pela Organização Mundial da Saúde. / Yerba mate (Ilex paraguariensis Saint Hillarie) is a native species of the southern region of Brazil, whose leaves, after processing, are mainly used as a beverage by Brazilian, Argentine, Paraguayan and Uruguayan people. The purpose of this work was to verify the presence of thermophilic and mesophilic bacteria, molds and yeasts, and microbial diversity in leaves and in the products ready for the consumption and to determine the sanitary quality in processed yerba mate. The collection of the samples was carried out from January to June 2013, in the city of Vargeão, Santa Catarina, Brazil. Official methods of analysis of foods of the Association of Analytical Communities and of the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply were used. The mainly thermophilic bacteria found in yerba mate and leaves were Bacillus licheniformis. The mesophilic bacteria that predominated in leaves were: Pantoea ananatis, Staphylococcus sciuri and Staphylococcus epidermidis. In yerba mate the most common mesophilic bacteria were: Bacillus megaterium, Bacillus amyloliquefaciens and Klebsiella pneumoniae. The main yeast identified in the leaves were Aureobasidium pullulans and Sympodiomycopsis sp. Two isolates of the genus Sympodiomycopsis were a new species. The yeasts identified in the yerba mate were: Rhodosporidium kratochvilovae, Rhodotorula mucilaginosa and Sporobolomyces nylandii. And it was found that all microbiological parameters for processed yerba mate attended both the current Brazilian legislation, as well as parameters established by the World Health Organization.

Ilex paraguariensis é uma importante planta nativa da América do Sul, popularmente conhecida como mate, cujas folhas são tradicionalmente consumidas na forma de infusão. Muitos benefícios à saúde são mencionados para a utilização de seus constituintes, entre eles as saponinas. Várias propriedades farmacológicas são atribuídas as saponinas. No mate, o maior teor delas ocorre nos frutos imaturos. Os fungos promovem sérias micoses invasivas em indivíduos com a saúde comprometida. Sendo assim, este trabalho objetiva avaliar o potencial antimicótico do extrato aquoso e de uma fração purificada de saponinas, ambos obtidos de frutos verdes do mate, frente aos principais fungos causadores de micoses. Visa também o estudo da associação entre a fração de saponinas e o fluconazol. Inicialmente foram avaliadas quanto à susceptibilidade 16 espécies, entre fungos leveduriformes e filamentosos. Nove Candida spp. foram selecionadas para os estudos de CIM, de associação por Checkerboard e pela metodologia de superfície de resposta, e por fim para pesquisa do mecanismo de ação. As espécies de Candida foram mais sensíveis a associação da fração de saponinas com fluconazol, que aos mesmos isoladamente. A associação foi capaz de reverter à resistência ao fluconazol em alguns isolados. Os testes de mecanismo de ação revelaram variações entre os isolados, não sendo possível afirmar apenas um mecanismo geral de ação da combinação. Ensaios microscópicos revelaram um predomínio do brotamento e a presença de um material viscoso em torno das leveduras, enquanto que o ergosterol exógeno revelou a possibilidade de interação com as saponinas, interferindo na atividade antifúngica. / Ilex paraguariensis is an important native plant from South America, generally known as Yerba Mate, which is traditionally consumed as an infusion made from the leaves. Many health benefits have been mentioned for the use of its constituents, including the saponins. Several pharmacological properties are atributed to the saponins, where it´s highest content can be found in mate green fruits. The fungi promote serious invasive mycoses in individuals with compromised health. Thus, this study aims to evaluate the antifungal potential of the crude extract and the purified saponins fraction, both obtained from unripe mate fruits, in the treatment of mycoses causing fungi. It also aims evaluate the antifungal association of saponins fraction and fluconazole. At first were evaluated the susceptibilities of 16 species, including yeasts and filamentous fungi. Nine Candida spp. were selected for the studies of minimal inhibitory concentration, association assay, checkerboard, response surface methodology, and finally to investigate the antifungal action mechanism. Candida species were more susceptible to the fraction of saponins more fluconazole, than the neat substances. Their association was able to reverse fluconazole resistance in some isolates. The mechanism of action assays revealed variations between the isolates, then, it was not possible to explain a general mechanism of action for this antifungal activity. Microscopic studies demonstrated a predominance of buds and a viscous liquid around the cells. Furthermore, exogenous ergosterol showed the possibility of interaction with saponins, interfering antifungal activity.

Tesis por compendio / [ES] Phytophthora es uno de los géneros fitopatógenos más relevantes y agresivos en la agricultura y silvicultura. Muestreos realizados en la última década han revelado una gran cantidad de interacciones entre especies de Phytophthora y plantas, desconocidas con anterioridad. La introducción de nuevos patógenos de suelo, como Phytophthora en los bosques de Fagaceae, modifica la comunidad microbiana presente en la rizosfera, con importantes consecuencias ambientales y económicas. El género Quercus es uno de los géneros de Fagaceae más extendidos en Europa, y Quercus ilex es la especie dominante en España. El vínculo entre la dispersión de Phytophthora en los ecosistemas naturales y las actividades del ser humano, ha sido previamente estudiado. Numerosos muestreos en viveros y espacios públicos, mostraron la presencia de gran diversidad de especies de Phytophthora que podían suponer una amenaza para la producción y los ecosistemas naturales. En este contexto, se realizó un muestreo de viveros ornamentales y forestales en cuatro comunidades autónomas españolas, centrándose en los posibles síntomas asociados a Phytophthora en diferentes hospedantes e incluyendo muestras de agua de los viveros. Los resultados mostraron 17 filotipos de Phytophthora que afectan a 22 especies vegetales incluidas en 19 géneros. Algunas de estas interacciones se citaron por primera vez en España. Entre los patógenos de suelo aislados en los viveros, se identificó una gran cantidad de formas asexuales tipo Cylindrocarpon en las raíces de hospedantes leñosos. Se caracterizó una colección de aislados mediante estudios morfológicos y moleculares. Se identificaron 12 especies pertenecientes a los géneros Cylindrodendrum, Dactylonectria e Ilyonectria en hospedantes pertenecientes a 15 géneros y otras cuatro nuevas especies se describieron. El estudio demostró la prevalencia de este grupo fúngico asociado con plántulas de diversos hospedantes que muestran síntomas de decaimiento en viveros forestales. Se evaluó la susceptibilidad de Q. ilex a la inoculación con ocho especies de Phytophthora obtenidas de muestreos en viveros. Las especies más agresivas fueron Phytophthora cinnamomi, Phytophthora cryptogea, Phytophthora gonapodyides, Phytophthora plurivora y Phytophthora psychrophila, seguidas de Phytophthora megasperma, mientras que Phytophthora quercina y Phytophthora nicotianae fueron las especies menos agresivas. Los resultados obtenidos en el ensayo de patogenicidad confirmaron que todas las especies de Phytophthora evaluadas podrían representar una amenaza para los encinares. En este contexto, se realizó un estudio para verificar la presencia y / o detección de especies de Phytophthora en dos áreas de España (dehesas del sudoeste y bosque del noreste) utilizando diferentes métodos de aislamiento y detección. El aislamiento directo y el método de trampeo vegetal en muestras obtenidas a partir de encinas con y sin decaimiento, identificaron Phytophthora cambivora, P. cinnamomi, P. gonapodyides, P. megasperma y Phytophthora pseudocryptogea en las dehesas, mientras que, en el bosque del noreste, no se aisló Phytophthora spp. Los análisis estadísticos indicaron que no había una relación significativa entre la frecuencia de aislamiento de las especies de Phytophthora y la expresión de los síntomas de la enfermedad en las encinas de las dehesas. Además, P. quercina se detectó con mayor frecuencia que P. cinnamomi en las dos áreas estudiadas utilizando sondas TaqMan de PCR a tiempo real. Se evaluaron seis masas de Q. ilex ubicadas en tres comunidades autónomas de España mediante “Next Generation Sequencing” (NGS) para tener un mayor conocimiento sobre la diversidad de Phytophthora spp. en los bosques de encinas. Se detectaron 37 filotipos de Phytophthora pertenecientes a los clados 1 al 12, excepto los clados 4, 5 y 11, lo que demuestra una gran diversidad de Phytophthora en los encinares estudiados. Los filotipos más abundantes fueron P. quercina, P. psychrophila, P. cinnamomi y P. plurivora. / [EN] Phytophthora is one of the most relevant and aggressive plant pathogenic genus in agriculture and forestry. Due to the increasing environmental threat of invasive plant pathogens, monitoring new areas in the last decade has revealed a large number of new Phytophthora species-plant host interactions. The introduction of soilborne pathogens, such as Phytophthora in Fagaceae forests modifies the microbial community present in the rhizosphere with relevant environmental and economic consequences. The genus Quercus is one of the most extended Fagaceae genera in Europe, and Q. ilex is the dominant tree in Spain. The link between Phytophthora dispersion in natural ecosystems and human derived activities has been previously studied. Numerous sampling in nurseries and public spaces revealed a great diversity of Phytophthora species that compromised production and threated natural ecosystems. In this context, sampling ornamental and forest nurseries in four Spanish regions was carried out focusing on possible symptoms associated to Phytophthora on different hosts and including water samples from the nurseries. The results showed 17 Phytophthora phylotypes affecting 22 plant species included in 19 plant genera and some of them reported for the first time in Spain. Among the soilborne pathogens isolated in the nurseries, a large number of Cylindrocarpon-like asexual morphs were identified from the roots of woody hosts. A collection of Cylindrocarpon-like isolates recovered from Spanish nurseries was characterised by morphological and molecular studies. Twelve species belonging to the genera Cylindrodendrum, Dactylonectria and Ilyonectria were identified from damaged roots of 15 different host genera and other four species were newly described. The study demonstrated the prevalence of this fungal group associated with seedlings of diverse hosts showing decline symptoms in forest nurseries in Spain. The susceptibility of Quercus ilex to the inoculation with eight Phytophthora species obtained from nurseries was evaluated. The most aggressive species were Phytophthora cinnamomi, Phytophthora cryptogea, Phytophthora gonapodyides, Phytophthora plurivora and Phytophthora psychrophila followed by Phytophthora megasperma, while Phytophthora quercina and Phytophthora nicotianae were the least aggressive species. Results obtained in the pathogenicity test confirmed that all Phytophthora species tested could represent a threat to holm oak ecosystems. In this context, a study to verify the presence and/or detection of Phytophthora species was conducted in two holm oak areas of Spain (southwestern dehesas and northeastern woodland) using different isolation and detection methods. Direct isolation and baiting methods in declining and non-declining holm oak trees revealed Phytophthora cambivora, P. cinnamomi, P. gonapodyides, P. megasperma, and Phytophthora pseudocryptogea in the dehesas, while in the northeastern woodland, no Phytophthora spp. were recovered. Statistical analyses indicated that there was not a significant relationship between the Phytophthora spp. isolation frequency and the disease expression of the holm oak stands in the dehesas. Phytophthora quercina and P. cinnamomi TaqMan real-time PCR probes showed that P. quercina was detected in a higher frequency than P. cinnamomi in both studied areas. A better understanding of the Phytophthora spp. diversity in holm oak forests was assessed using Next Generation Sequencing (NGS) in six Q. ilex stands located in three regions in Spain. Thirty-seven Phytophthora phylotypes belonging to clades 1 to 12, except for clades 4, 5 and 11, were detected in this study, demonstrating a high diversity of Phytophthora species in holm oak Spanish forests. The most abundant phylotypes were P. quercina, P. psychrophila, P. cinnamomi and P. plurivora. In summary, this Thesis demonstrated a high diversity of Phytophthora and Cylindrocarpon-like species in Spanish nurseries, reporting new pathogen-plant host in / [CA] Phytophthora és un dels gèneres fitopatògens més rellevants i agressius en l'agricultura i la silvicultura. Mostrejos realitzats en l'última dècada han revelat una gran quantitat d'interaccions desconegudes fins ara entre espècies de Phytophthora i plantes. La introducció de nous patògens del sòl, com Phytophthora en els boscos de Fagaceae, modifica la comunitat microbiana present en la rizosfera, amb importants conseqüències ambientals i econòmiques. El gènere Quercus és un dels gèneres de Fagaceae més estesos a Europa, i Quercus ilex és l'espècie dominant a Espanya. El vincle entre la dispersió de Phytophthora en els ecosistemes naturals i les activitats de l'ésser humà, ja ha sigut estudiat prèviament. Nombrosos mostrejos en vivers i espais públics, van mostrar la presència d'una gran diversitat d'espècies de Phytophthora que podien suposar una amenaça per a la producció i els ecosistemes naturals. En aquest context, es va realitzar un mostreig de vivers ornamentals i forestals en quatre comunitats autònomes espanyoles, centrant-se en els possibles símptomes associats a Phytophthora en diferents hostes i incloent mostres d'aigua dels vivers. Els resultats van mostrar 17 filotipus de Phytophthora que afecten 22 espècies vegetals incloses en 19 gèneres. Algunes d'aquestes 'interaccions es van citar per primera vegada a Espanya. Entre els patògens del sòl aïllats en els vivers, es va identificar una gran quantitat de formes asexuals tipus Cylindrocarpon en les arrels de plantes llenyoses. Es va caracteritzar una col·lecció d'aïllats mitjançant estudis morfològics i moleculars. Es van identificar 12 espècies pertanyents als gèneres Cylindrodendrum, Dactylonectria i Ilyonectria en hostes pertanyents a 15 gèneres i altres quatre noves espècies es van descriure. L'estudi va demostrar la prevalença d'aquest grup fúngic associat amb plàntules de diversos hostes que mostren símptomes de decaïment en vivers forestals espanyols. Es va avaluar la susceptibilitat de Q. ilex a la inoculació amb huit espècies de Phytophthora obtingudes de mostrejos en vivers. Les espècies més agressives van ser Phytophthora cinnamomi, Phytophthora cryptogea, Phytophthora gonapodyides, Phytophthora plurivora i Phytophthora psychrophila, seguides de Phytophthora megasperma, mentre que Phytophthora quercina i Phytophthora nicotianae van ser les espècies menys agressives. Els resultats obtinguts en l'assaig de patogenicitat van confirmar que totes les espècies de Phytophthora avaluades podrien representar una amenaça per als ecosistemes d'alzines. En aquest context, es va realitzar un estudi per a verificar la presència i / o detecció d'espècies de Phytophthora en dues àrees d'Espanya (deveses del sud-oest i bosc del nord-est) utilitzant diferents mètodes d'aïllament i detecció. L'aïllament directe i el mètode de parany vegetal en mostres obtingudes a partir d'alzines, amb i sense decaïment, van identificar Phytophthora cambivora, P. cinnamomi, P. gonapodyides, P. megasperma i Phytophthora pseudocryptogea en les deveses, mentre que, en el bosc del nord-est, no es va aïllar Phytophthora spp. Les anàlisis estadístiques van indicar que no hi havia una relació significativa entre la freqüència d'aïllament de les espècies de Phytophthora i l'expressió dels símptomes de la malaltia en les alzines en les deveses. A més, P. quercina es va detectar amb major freqüència que P. cinnamomi en les dues àrees estudiades utilitzant sondes TaqMan de PCR a temps real. Es van avaluar sis masses de Q. ilex situades en tres comunitats autònomes d'Espanya mitjançant "Next Generation Sequencing" (NGS) per a tindre un major coneixement sobre la diversitat de Phytophthora spp. en els boscos d'alzines. Es van detectar 37 filotipus de Phytophthora pertanyents als clades 1 al 12, excepte els clades 4, 5 i 11, la qual cosa demostra una gran diversitat d'espècies de Phytophthora en els alzinars estudiats. Els filotipus més abundants van ser P. quercina, P. psychrophila, P. cinnamomi i P. plurivora. / Mora Sala, B. (2020). Detection and identification of Phytophthora spp. in woody plant nurseries and holm oak forests [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/153808 / TESIS / Compendio

Medium solution N and electrical conductivity (EC), and foliar N levels were measured to determine criteria which signal the need for reapplication of a controlled-release fertilizer (CRF) in order to maximize growth of container-grown Ilex crenata Thunb. ‘Helleri’. Rooted cuttings of ‘Helleri’ holly were initially fertilized (7 Mar. 1991) with 8-9 month (18N-2.6P-9.9K) or 12-14 month (17N-3.1P-9.9K) Osmocote. A subset of 12 plants received a CRF reapplication (half rate) of the respective Osmocote formulation on 19 July, 2 Aug., or 16 Aug. In addition to reapplication treatments, 12 plants received a liquid fertilizer (LF) solution with each irrigation starting on 19 July. Canopy widths of plants receiving LF or CRF reapplication on 19 July and 2 Aug. were greater than those plants without supplemental fertilizer (control). At the time of the second reapplication date (2 Aug.), medium solution N and EC, and foliar N levels of control plants were = 40 mg liter⁻¹, 0.4 d m⁻¹ and 2.3%, respectively. Since growth of control plants was less than those of LF, CRF 19 July and 2 Aug. reapplications, medium solution N and EC, and foliar N values at the time of the second reapplication (2 Aug.) signaled the need for CRF reapplication or LF supplementation. There was a strong relationship between medium solution EC and N (NO₃ + NH₄) (r² = 0.91, P = 0.05), indicating that growers could use EC measurements to predict medium solution N concentration, as well as to assess the adequacy of the fertilizer regime. / Master of Science

INTRODUÇÃO: A erva-mate (Ilex paraguarienis), uma planta nativa e consumida em grande parte da América do Sul, apresenta diversos compostos bioativos que já demonstraram importante atividade antioxidante in vitro e in vivo. O chá mate é um produto desta planta cujas propriedades antioxidantes ainda não foram avaliadas em ensaios com humanos. OBJETIVO: Este projeto visa avaliar o potencial antioxidante do chá mate in vivo e ex vivo sobre o plasma e LDL de humanos após a ingestão de chá-mate. MÉTODOS: Indivíduos em jejum (n=20) tiveram seu sangue coletado em três momentos: antes, após uma hora e depois de 1 semana (7 dias) da ingestão diária de chá-mate. O plasma e a LDL obtidos nos três momentos foram submetidos à oxidação por três mecanismos diferentes [Cobre (Cu+2), lipoxigenase e peroxinitrito (SIN-1)] e em seguida foram medidos os produtos de peroxidação lipídica formados: a concentração de TBARs (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico) e a formação de dienos conjugados empregando-se métodos espectrofotométricos. Também foram determinados o perfil antioxidante total do plasma (TAS), avaliação da lipoperoxidação plasmática basal (TBARs), avaliação da fragmentação da Apolipoproteína B após oxidação da LDL, por eletroforese em gel com SDS-PAGE e os níveis de expressão, por meio de análise de PCR real time, de alguns genes relacionados à produção de enzimas antioxidantes. Teste t de Student pareado foi utilizado para verificar se houve diferença estatisticamente significante entre os resultados das diversas análises antes e após o consumo do chá. RESULTADOS: Os resultados obtidos pela maioria dos ensaios realizados demonstraram que o consumo de chá mate aumentou a resistência à oxidação, a capacidade antioxidante plasmática e a expressão de genes relacionados à produção de enzimas antioxidantes. CONCLUSÃO: Esses resultados sugerem que o consumo de chá mate por período curto pode atuar como antioxidante por múltiplos mecanismos e portanto pode contribuir para diminuição do risco de desenvolvimento de doenças crônicas relacionadas a processos oxidativo. / Yerba Mate (Ilex paraguariensis) is a native and widely consumed South American plant. It contains high concentrations of bioactive compounds that respond for its high antioxidant activity in vitro and in vivo. This activity has not been demonstrated yet in humans for the mate tea, a product derived from Yerba Mate. OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the antioxidant activity of maté tea in vivo and ex vivo on plasma and LDL human after ingestion of mate tea infusion. METHODS: Fasting peripheral venous blood samples of twenty healthy women (n=20) were taken in three different times: before drinking the tea, one hour later and after one week of daily consumption (7 days) of mate tea. The plasma and isolated LDL were oxidated with 3 different systems [copper (CuSO4), lipoxygenase and peroxynitrite (SIN-1)]. Next, the peroxidation products evaluated were: concentration of malonaldeyde (TBA) and conjugated dienes (lag time), using spectrophotometric methods. We also measured the plasma total antioxidant status (TAS), serum levels of malondialdehyde (MDA) as thiobarbituric substances (TBARS), fragmentation of apo B using SDS-PAGE and the level of antioxidant enzyme gene expression by PCR real time. Paired t student test was used to analyze the results before and after ingestion of mate tea. RESULTS: The results obtained by most of the tests showed that mate tea ingestion increased the plasma and LDL resistance by ex vivo oxidation, the plasma antioxidant capacity and the level of antioxidant enzyme gene expression. CONCLUSION: This study suggests that regular consumption of mate tea can act as an antioxidant by multiple mechanisms and thus may contribute decrease the risk of developing chronic diseases related to oxidative processes.

Introdução - Estudos mostram maior ocorrência de complicações cardiovasculares na população HIV/aids. Alguns estudos envolvendo animais e indivíduos saudáveis ou com outras doenças observaram benefícios no consumo de chocolate e erva mate na função endotelial e vasodilatação. Objetivo Avaliar o efeito da ingestão de chocolate e erva mate na elasticidade arterial de indivíduos com HIV/aids em terapia antirretroviral. Métodos Ensaio clínico cruzado, aleatorizado e duplo-cego, envolvendo 89 indivíduos com HIV/aids entre 19 e 59 anos, em tratamento regular com antirretrovirais por no mínimo 6 meses, e carga plasmática do HIV <500 cópias/ml. Os indivíduos receberam suplementação diária com aproximadamente 65g de chocolate amargo, 3g de erva mate ou respectivos placebos por 15 dias, com washout de igual tempo entre as intervenções. A aferição da elasticidade arterial foi realizada por análise do formato da onda de pulso com o equipamento HDI/PulseWaveTM CR-2000®. Também foram avaliados: composição corporal, glicemia, perfil lipídico, proteína C-reativa e concentração plasmática de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). As respostas entre tratamentos foram avaliadas por ANOVA e por teste t de Student pelo Stata® 11.0, considerando-se p< 0,005. Resultados A população foi composta principalmente por homens (62,9 por cento) caucasianos (46,1 por cento) com idade média de 44,6 ± 7,1 anos. O tempo médio de diagnóstico de HIV/aids foi de 13,2 ± 4,8 anos com 10,6 ± 5,1 anos de terapia antirretroviral. Não foram encontradas diferenças significantes na elasticidade arterial dos pequenos e grandes vasos após as suplementações. Conclusão Este é o primeiro estudo a avaliar o efeito da ingestão de erva mate e chocolate na elasticidade arterial de indivíduos com HIV/aids. Apesar das evidências positivas desses alimentos na saúde cardiovascular de animais e indivíduos com outras doenças, os mesmos efeitos não foram observados neste estudo. Provavelmente o tempo de suplementação, a biodisponibilidade das substâncias bioativas e o metabolismo alterado desses indivíduos interferiram nos resultados obtidos, sugerindo a necessidade de melhor investigação desses fatores / Introduction There has been an increase on cardiovascular diseases occurrence in the HIV/aids population. Some studies involving animals and healthy individuals or individuals with other pathologies have shown benefits on endothelial function and vasodilation under use of chocolate and yerba maté. Objective To evaluate the effect of chocolate and yerba maté intake on HIV/aids patient´s arterial elasticity. Methods Double-blind crossover trial including 89 HIV/aids patients, 19 to 59 years of age, on antiretroviral therapy for at least six months, and with viral load <500copies/ml. The individuals consumed daily approximately 65g of dark chocolate, 3g of yerba maté or placebo during 15 days, followed by a 15-day washout period after each intervention. Arterial elasticity was measured using the HDI/PulseWaveTM CR-2000 CardioVascular Profiling System®, which provides a pulse wave contour analysis. Body composition, glicemic index, lipid profile, C-reactive protein and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) were also assessed. The crossover analysis was performed using analysis of variance (ANOVA) on Stata®. The paired Students t-test was also applied. A p value <0.05 was considered significant. Results Most of the individuals were men (62.9 per cent), caucasian (46.1 per cent) aging 44.6 ± 7.1 years. The mean time of HIV/aids diagnosis was 13.2 ± 4.8 years, with 10.6 ± 5.1 years of antiretroviral therapy. There were no significant alterations on elasticity of either large or small arteries after chocolate and yerba maté intake. Conclusion This is the first research to evaluate the effect of chocolate and yerba maté intake on HIV/aids patient´s arterial elasticity. Despite of the positive evidence of these foods on cardiovascular health of animals and populations with other pathologies, the same effects were not observed in this study. Most probably the time of intervention, the bioavailability of the bioactive substances and the altered metabolism of this individuals interfered on the results, which indicates the need for further investigation

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2017-09-27T13:47:07Z No. of bitstreams: 1 ANA ZILDA CEOLIN COLPO 2017.pdf: 6048240 bytes, checksum: 62bfa1f3557cbe81c077e11ac86b15a3 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2017-09-27T13:47:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ANA ZILDA CEOLIN COLPO 2017.pdf: 6048240 bytes, checksum: 62bfa1f3557cbe81c077e11ac86b15a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-27T13:47:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANA ZILDA CEOLIN COLPO 2017.pdf: 6048240 bytes, checksum: 62bfa1f3557cbe81c077e11ac86b15a3 (MD5) Previous issue date: 2017-08-09 / O consumo de bebidas a base de erva-mate é parte dos hábitos e costumes de populações do sul do Brasil, Argentina e Uruguai. Seu consumo é um símbolo cultural vinculado à sociabilidade e demonstrações de cordialidade. Aprimorar o conhecimento sobre a associação de seu consumo com a saúde humana pode levar a formulação de paradoxos de grande relevância econômica e social. Assim, esta pesquisa teve como objetivos: i) avaliar a capacidade dos extratos de erva-mate modularem o equilíbrio redox a nível sistêmico em Drosophila melanogaster e em nível de sistema nervoso central (SNC) em ratos; ii) observar como os extratos podem afetar eventos genotóxicos relacionados a perda da heterozigose em asas de Drosophila melanogaster. Dietas acrescidas de colesterol foram usadas como indutoras de danos no estudo com moscas da fruta e imobilização no estudo com animais. Para avaliar a relação do extrato com mutagênese e antimutagênese empregou-se o Teste de Mutação e Recombinação Somáticas (SMART). Além disso, no delineamento experimental deste trabalho projetou-se o uso de extratos (mates) obtidos mimetizando a forma tradicional de consumo, assim nas abordagens com moscas da fruta empregaram-se extratos obtidos por extrações sequenciais. Com animais, por limitações impostas pelo experimento, empregou-se o extrato bruto obtido de forma convencional. Nesta vertente também se incluiu a avaliação dos efeitos do composto majoritário em extratos de erva-mate, o ácido clorogênico (CGA). Os resultados demostram que extratos de erva-mate, em Drosophila melanogaster expostas à dieta hipercolesterolêmica, são capazes de aumentar significativamente a capacidade de resistir a estresse induzido melhorando a homeostase redox. O que foi constatado pela redução dos níveis de produtos da peroxidação lipídica, recuperação da atividade enzimática da glutationa S-transferase (GST) e aumento do tempo de vida dos insetos. Nas regiões cerebrais córtex (CTX), hipocampo (HIP) e corpo estriado (STR) a indução de estresse por imobilização produz danos a lipídeos e proteínas. Mate e CGA foram capazes de atenuar esses prejuízos, demostrando seu potencial de melhorar a resistência a estresse induzido, efeito possivelmente mediado por sua capacidade antioxidante. Para completar, os resultados obtidos para a atividade genotóxica mostraram que mate não induz danos em asas de Drosophila, quer seja por processos mutacionais ou recombinatórios. Dados relativos à avaliação da antigenotoxicidade indicaram que os extratos reduziram a frequência de manchas mutantes em co-tratamento. No entanto, podem apresentar efeitos genotóxicos quando administrados após danos, isto pode ser resultado de sua ação na modulação de funções detoxificantes no organismo, relacionadas principalmente ao citocromo P450 (CYP). Com base em dados da literatura estas informações levam a suposição que compostos fenólicos podem provocar inibição do CYP reduzindo a metabolização e a eliminação de drogas, o que produz acumulação e aumento da toxicidade. Conclui-se, por meio do uso dos diferentes modelos experimentais e das propostas deste estudo, que a erva-mate possui significativa atividade antioxidante e não produz efeito genotóxico per se, mas sua relação com antigenotoxidade e metabolização de xenobióticos precisa ser confirmada por estudos aprofundados nesta abordagem. / The consumption of yerba-mate based beverages is part of the habits of the population from South Brazil, Argentina and Uruguay. Its consumption is a cultural symbol linked to sociability and demonstrations of cordiality. Improving the knowledge about the association of yerba-mate consumption with human health can lead to the creation of great economic and social relevant paradoxes. Thus, this research had as objectives: i) to evaluate the capacity of yerba-mate extracts on modulating the redox balance at systemic level in Drosophila melanogaster and at the central nervous system (CNS) in rats; ii) to observe how the extracts can affect genotoxic events related to heterozygosity loss on Drosophila melanogaster wings. Diets with high cholesterol added were used as damage inducers on the study with fruit flies and immobilization with animals. The Somatic Mutation and Recombination Test (SMART) was used to evaluate the relation of the extract with mutagenesis and antimutagenesis. In addition, in the experimental design of this work, were used extracts (mates) obtained mimicking the traditional form of consumption. Thus, in the approaches with fruit flies, extracts obtained by sequential extractions were used. Because of the limitations imposed by the experiment, the crude extract obtained by the conventional manner was used in the animals. In this strand, the evaluation of the effects of the major compound in yerba-mate extracts, the chlorogenic acid (CGA), was also included. The results showed that yerba-mate extracts, in Drosophila melanogaster exposed to hypercholesterolemic diet, are able to increase significantly the capacity to resist the induced stress, improving the redox homeostasis. This was evidenced by the reduction of the levels of lipid peroxidation products, glutathione S-transferase (GST) activity recovery and increase of the insects’ lifespan. In the brain regions: cortex (CTX), hippocampus (HIP) and striatum (STR), the induction of immobilization stress produces damage to lipids and proteins. Mate and CGA were able to mitigate these damages, demonstrating their potential to improve induced stress resistance. This effect was possibly mediated by its antioxidant capacity. To complete, the results obtained for the genotoxic activity showed that mate does not induce damage in Drosophila wings, either by mutational or recombinant processes. Data for the evaluation of the antigenotoxicity indicated that the extracts reduced the frequency of mutant stains in co-treatment. However, they can present genotoxic effects when given after damage. This may be due to its action on modulating detoxifying functions in the organism, related mainly to the P450 cytochrome (CYP). Based on the literature data, this information lead to the assumption that phenolic compounds may cause CYP inhibition, reducing metabolization and drug elimination, which produces accumulation and increased toxicity. Were possible to conclude, by using different experimental models and the study proposals, that yerba-mate has significant antioxidant activity and does not produce genotoxic effect per se, but its relation with antigenotoxicity and xenobiotic metabolization needs to be confirmed by deepened studies focused on this approach.