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Detecção de rotavírus do grupo A em amostras fecaisadaptação do teste de aglutinação em látex para o emprego de anticorpos IgY anti-Rotavírus A

Lanzarini, Natália Maria January 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2015-10-23T12:42:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 natalia_lanzarini_ioc_mest_2014.pdf: 2473569 bytes, checksum: 3ef3e9aeef4d618351a689e2550d62e8 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-04-14 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A infecção pelo rotavírus A (RVA) é responsável por cerca de 453.000 mortes anualmente e aproximadamente 40% das hospitalizações por diarreia em crianças menores de cinco anos em todo o mundo, sendo o principal causador de gastroenterite aguda nesse grupo populacional. O desenvolvimento de um método de diagnóstico rápido, barato, sensível e específico para a detecção de RVA é importante do ponto de vista epidemiológico porque permite identificar surtos no local de ocorrência. O uso da imunoglobulina Y (IgY), anticorpo purificado a partir da gema de ovo, vem crescendo nos últimos anos, devido às características vantajosas quando comparada com a imunoglobulina G (IgG), como a obtenção de anticorpos de forma não invasiva e a produção de anticorpos em grandes concentrações. Este trabalho objetivou a adaptação de um teste de diagnóstico através da substituição do anticorpo de captura IgG pela IgY específica para o antígeno de RVA (LATEXY-ROTA). Para isto 09 frangas poedeiras foram imunizadas com o RVA, os ovos foram coletados e a IgY purificada a partir da gema do ovo por polietileno glicol 6.000, seguida da purificação adicional por cromatografia de troca iônica A IgY anti-RVA purificada foi ligada covalentemente à partículas de poliestireno e usada como insumo na adaptação de um teste de aglutinação em látex, sendo testada em um painel de amostras fecais sabidamente positivas e negativas previamente selecionadas pelo Centro Regional de Referência para Rotaviroses do Laboratório de Virologia Comparada e Ambiental (LVCA/IOC-FIOCRUZ). Foi obtida uma sensibilidade de 75% e uma especificidade de 87,5% quando o LATEXY-ROTA foi comparado com um teste imunoenzimático comercial disponível (padrão ouro). Quando comparado com dois testes comerciais de aglutinação em látex testados no painel de amostras utilizando a IgG, o LATEXY-ROTA obteve uma sensibilidade de 100% e especificidade de 88,24%. Baseado nos dados obtidos, sugerimos a viabilidade da substituição da IgG por IgY no ensaio de aglutinação pelo látex / The infection by rotavirus (RV ) is responsible for approximately 453,000 de aths annually and approximately 40 % of hospitalizations by diarrhea in children under five years worldwide , being the major cause of acute gastroent eritis in this population group . The development of a rapid method, inexpensive , sensitive and specific for rotavirus diagnosis is important from the disease because it allows the identification of outbreaks in the site of occurrence . The use of Immunoglobulin Y (IgY ) antibody purified from egg yolk, has been grow n in recent years , due to the advantageous features compared to immunoglobulin G (IgG) , as a noninvasive recovery of antibodies and production in high concentrations . The aim of t his method was to adapt a diagnostic test by replacing the IgG capture antibody by specific IgY for RVA antigen (LATEXY - ROTA). For that, 09 laying hens were immunized with RVA , the eggs were collected and IgY purified from egg yolk by polyethylene glycol 6 ,000, followed by purification by ion exchange chromatography. The purified anti - IgY RVA was covalently bound to polystyrene particles , being tested in a p anel of positive and negative fecal samples previously determined by the R otavirus Regional Reference Center of Compa rative and Environmental Virology Laboratory (LVCA / IOC - FIOCRUZ ) . A sensitivity of 75% and specificity of 85,7% was observed when the adapted test was compared to a commercial available enzyme immunoassay (golden standard). When compared to two commercial l atex agglutination tests using the IgG tested on the panel of samples , the LATEXY - ROTA had a sensitivity of 100% and specificity of 88.2 %. Based on the obtained data, we suggest the feasibility of replacing the IgG by IgY in the latex agglu tination assay.
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Ocorrência da raiva e de anticorpos antirrábicos em morcegos do noroeste de São Paulo

Casagrande, Daiene Karina Azevedo [UNESP] 27 July 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-10-06T13:02:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:19:23Z : No. of bitstreams: 1 000849248.pdf: 314345 bytes, checksum: d108c81049be36971a97a2a9f7b024fe (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Rabies is a major zoonosis which affects mammals from all over the world and has bats as reservoirs of, both urban and rural areas. Since 1998 cases of rabies in bats have been recorded in the northwest region of São Paulo State, predominantly in urban areas. The objective of this study was to investigate the circulation of rabies in bats in the northwestern region of São Paulo by searching of the virus in different species and the presence of rabies neutralizing antibodies in vampire bats. A total of 1,490 brain samples from bats were sent to the Laboratory of Rabies and 125 serum samples of vampire bats from four shelters in the region were examined from 2008 to 2012. The virus presence was determined by fluorescent antibodies test (FAT) and mouse inoculation test (MIT) while neutralizing antibodies were determined by the simplified microneutralization (SFIMT) in BHK21 cells. Rabies virus was detected in 26 (1.97%) out of 1,314 non-hematophagous bats and in none of the 176 vampire bats examined. Only 7% (9/125) of vampire bats had antibody titers above 0.5UI/ml, 65% (81/125) had low titers (0.10 to 0.5UI/ml) and 28% (35/125) were negative. The positivity rate observed was 1.74% which is above the average rate of 1.3% recorded previously in this region. The high percentage of vampire bats with neutralizing antibodies to rabies virus indicates a recent exposure to the virus which confirms that surveillance measures must be in place to avoid an increase in disease occurrence
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Desenvolvimento e aplicação do Elisa indireto com a nucleoproteína recombinante (NPR) do vírus da doença de Newcastle

Silva, Ketherson Rodrigues [UNESP] 15 June 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-10-06T13:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-15. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:18:23Z : No. of bitstreams: 1 000848339.pdf: 757255 bytes, checksum: 9dcc3acba66df8e1de6d584184ea3dc8 (MD5) / O vírus da doença de Newcastle (VDN) provoca uma das doenças infecciosas mais importantes para as aves domésticas, devido aos elevados impactos negativos para a saúde aviária e a interposição de barreiras comerciais para a indústria avícola. Isso requer a constante evolução de técnicas cada vez mais eficazes de diagnóstico para esse vírus. Neste contexto, a nucleoproteína (NP) de VDN é um dos componentes antigênicos ideais para uso no imunodiagnóstico, porque é mais conservada e tem uma elevada imunogenicidade, de modo que NP pode melhorar o desempenho de sorodiagnóstico do VDN. Assim, este estudo teve como objetivo determinar os perfis de produção de anticorpos (Acs) anti-VDN dos isótipos IgA, IgM e IgG, usando NP recombinante (NPr) do VDN como um antígeno alvo. Amostras de soro e de lágrima foram colhidas de plantéis comerciais de aves de postura e também de aves SPF infectadas experimentalmente com a estirpe vacinal LaSota do VDN. O método de ELISA indireto, usando a NPr do VDN como antígeno de revestimento, foi padronizado e utilizado de forma bem sucedida para a detecção de Acs de galinha anti-VDN dos isótipos IgG e IgM em amostras de soro, e de ambos os isotipos mais IgA para amostras de secreção lacrimal. Ainda, este método de ELISA com NPr foi capaz de diferenciar amostras positivas das negativas para o VDN de soro e de lágrima, e nas aves submetidas à infecção experimental com a estirpe vacinal LaSota, a soroconversão foi detectada mais precocemente para os anticorpos do isótipo IgA (lágrima) e IgM (lágrima e soro), que alcançaram uma concentração máxima no sétimo dia após a infecção (pi), enquanto que os níveis de anticorpos IgG anti-VDN começaram a ser detectados mais tardiamente e atingiram um pico aos 14 dias pi. Além disso, a aplicação do ELISA em amostras de soro e de lágrima colhidas a partir de plantéis comerciais de galinhas de postura, para detecção de dois... / Newcastle disease virus (NDV) causes one of the most important infectious diseases for chickens, due to the high negative impacts for health and the demands of trade barriers to poultry industry. This requires the constant development of increasingly more effective diagnostic techniques. In this context, the nucleoprotein (NP) of VDN is one of the ideal antigenic components for immunodiagnostics, because it is more conserved and has a high immunogenicity, so that NP may improve the performance of serodiagnosis of NDV. Thus, this study aimed to determine the production profiles of anti-NDV antibodies of IgA, IgM and IgG isotypes, using recombinant NP (rNP) of VDN as a target antigen. Serum and tear samples were collected from commercial poultry flocks, and from SPF birds experimentally infected with the LaSota vaccine strain of NDV. The indirect ELISA method using the NPr VDN as coating antigen was standardized and used for the detection of anti-NDV chicken antibody isotypes IgG, IgM in serum samples and antibodies of both isotypes added of IgA isotype for lacrimal secretion samples. This ELISA method with NPr was effectively able to differentiate NDV-positive and NDV-negative serum and tear samples, and in the birds subjected to a experimental infection with vaccine strain, the seroconversion was detected earlier for the antibodies of the IgA (tear) and IgM (tear and serum) isotypes, which have reached maximum concentration on the 7th day post-infection (pi), while the IgG anti-NDV antibody levels began to be detected later and peaked at 14 days pi. Moreover, the application of ELISA in serum and lachrymal samples collected from commercial layer chickens,with the detection of two (IgG and IgM for serum samples) or three isotypes (IgG, IgM and IgA for lachrymal samples) of anti-NDV antibodies, resulted in the highest detection frequencies than each antibody isotype was individually detected. By comparing the results of serum samples for ...
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Prevalência de anticorpos contra o vírus da diarreia viral bovina em suínos

Gatto, Igor Renan Honorato [UNESP] 26 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:20Z : No. of bitstreams: 1 000837037_20160328.pdf: 135986 bytes, checksum: b392bdf3a2b1bf28c5b65d4d51e4a4a9 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-28T13:37:42Z: 000837037_20160328.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-28T13:38:46Z : No. of bitstreams: 1 000837037.pdf: 3762653 bytes, checksum: bea2b617ceb4163e2c7bb4b39bcc4f39 (MD5) / Os suínos são susceptíveis a infecção por diversas espécies de Pestivirus, a infecção de suínos com pestivírus de ruminantes tem gerado preocupação em diversos países, dependendo do método utilizado, o diagnóstico entre BVDV e CSFV pode ser dificultado. O presente trabalho teve como objetivo verificar a prevalência de anticorpos contra o vírus da diarreia viral bovina (BVDV) em suínos terminados. Para tal, foram investigadas as prevalências do BVDV-1 e 2, obtiveram-se informações de prevalência de acordo com a origem das amostras, foram associados fatores de risco à ocorrência da infecção, verificado as diferenças entre os títulos das amostras positivas testadas com 100 TCID50 e 50 TCID50 e realizado diagnóstico diferencial para PSC. Os soros sanguíneo foram obtidos de suínos enviados para matadouros-frigorífico no estado de São Paulo. As propriedades de origem dos suínos eram localizadas nos estados do Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, Goiás, São Paulo, Paraná, Santa Catarina e Rio Grande do Sul. As amostras foram submetidas ao teste de VN conforme preconizado pelo Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals (OIE), para às sororreagentes, foi realizado o diagnóstico diferencial para PSC pelo método de ELISA. Foram analisadas 1705 amostras de soro sanguíneo de suínos, obtidas de 33 propriedades. O teste de VN indicou 5,34% (91/1705) de amostras sororreagentes ao BVDV, sendo 3,0% (51/1705) para o genótipo 1 e 2,35% (40/1705) para o genótipo 2. Considerando a origem das amostras, destacam-se os estados do Mato Grosso, com 10,00% e Rio Grande do Sul, com 9,18% de amostras sororreagentes ao BVDV-1, contra o BVDV-2, destacam-se os estados do Mato Grosso, com 6,0% e Mato Grosso do Sul, com 4,29% de sororreagentes. Nenhum fator de risco teve associação significativa com a ocorrência de infecção ao BVDV-1, contudo, para o BVDV-2, foram encontradas associações significativas... / Several species of Pestivirus have pigs as susceptible hosts. The infection of ruminant pestivirus in pigs have been concerning many countries and depending on the diagnosis test used it is hard to differ BVDV from CSFV infections due to serological cross-reaction in diagnostic tests. This study aimed on determining the prevalence of antibodies against bovine viral diarrhea virus (BVDV) in finisher pigs. Prevalence of BVDV -1 and BVDV-2 was investigated and information about the samples origin were analyzed in order to associate the the occurrence of the infection with possible risk factors. The samples were tested using 100 TCID50 and 50 TCID50 and the differences between the titers were analyzed. In addition, differential diagnosis for Classical Swine Fever (CSF) was done in all positive samples. The blood sera samples were obtained from pigs sent to slaughterhouses in the state of São Paulo. The origin of the animals was from farms located in the states of Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, Goias, Sao Paulo, Parana, Santa Catarina and Rio Grande do Sul. The samples were tested using the virus neutralization (VN) test according to the Manual of Diagnostic Tests Vaccines for Terrestrial Animals (OIE) and the positive samples were ELISA tested to differ from CSF. 1705 swine serum samples from 33 farms were tested. The VN test showed 5.34% (91 / 1705) of seropositive samples for BVDV, with 3.0% (51 / 1705) for genotype 1 and 2.35% (40 / 1705) for genotype 2. Considering the origin of the samples, the highlights are the states of Mato Grosso, with 10.00% and Rio Grande do Sul, with 9.18% of seropositive for BVDV-1. Regarding to BVDV-2, states that had the highest number of positive samples were Mato Grosso (6.0%) and Mato Grosso do Sul, (4.29%). No significant association was found between risk factors the occurrence of BVDV-1 infection, however, for BVDV-2 positive cases significant associations were found with the risk factors ...
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Avaliação das correlações existentes entre experiência de cárie, acúmulo de placa bacteriana e nível de Iga anti-streptococcus mutans na saliva de crianças com dentição mista

Mattos, Flávio de Freitas [UNESP] 20 November 2001 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2001-11-20Bitstream added on 2014-11-10T11:57:35Z : No. of bitstreams: 1 000146313.pdf: 1854979 bytes, checksum: 814de9269a8a7a7c941e1e67320db911 (MD5) / Neste estudo, objetivou-se avaliar as correlações existentes entre experiência decárie, acúmulo de placa bacteriana e nível de IgAanti - Streptococcus mutansna saliva de crianças de 8 a 12 anos de idade, com dentição mista. Foram examinadas 110 crianças, divididas em três grupos: sem experiência de cárie (SC), com lesões de cárie tratadas (CT) e com lesões de cárie não tratadas (CA), utilizando-se os índices lHOS, ceod, ceos. CPOD e CPOS. Foram também coletadas amostras desaliva não estimulada. A concentração de IgA específica foi quantificada, por ELISA para células inteiras de S. mutans. Não houve correlação significante entreo acúmulo de placa bacteriana e a concentração de IgA salivar específica. Houve correlação negativa entre o nível de IgA salivar específica e a experiência de cáriena dentição decídua das crianças com lesões de cárie não tratadas, indicando papel protetor. Houve porém, correlação positiva entre o nível de IgA e a experiência de cárie na dentição permanente das crianças com lesões de cárie tratadas. A IgAsalivar específica anti-mutans não impede o acúmulo de placa bacteriana, tendo papel protetor sobre a dentição decídua e não sobre a dentição permanente / This study aimed to evaluate the correlation between caries experience, plaque buildupandlevel ofIgAanti-Streptococcus mutansin salivaof children8-12years ofage,with mixed dentition. Withoutcaries(SC) lesions treated caries (CT) and untreated caries(CA), using the lHOSindex, ceod, ceos: 110 children, divided into three groups were examined.DMFT and DMFS.Samples were collected fromun stimulated saliva. The concentration of specific IgA was quantitated by ELISA to whole cell sof S. mutans. There was no significant correlation between the accumulation of plaque and salivary Ig Aspecific. There was a negative correlation between the level of specific salivary IgA and caries in the primary dentition of children with untreated caries lesions, indicating protective role. There was however,a positive correlation between the level of IgA and caries experiencein the permanent dentition of children with caries lesions treated. The salivary IgA specificanti-mutans does not prevent the buildup of plaque, with protective paperon the deciduous dentition and noton the permanent dentition
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Concentração de imunoglobulinas (IgA, IgG e IgM ) e de interleucinas (IL-1[beta], IL-10 e IF-y) em pacientes com endometriose

Facin, Andrea Cintra January 2006 (has links)
Com o objetivo de avaliar as imunidades humoral e celular de pacientes com endometriose, analisamos as concentrações das Imunoglobulinas ( A, G e M ) e das Interleucinas (1β, 10 e IFγ) no soro e no líquido peritonial. Também analisamos a sua associação com a presença de infertilidade, o nível de dor apresentado e a extensão da endometriose. Foram coletadas amostras de soro e líquido peritonial de 43 pacientes submetidas a laparoscopia, que foram divididas em 4 grupos : 20 pacientes inférteis com endometriose, 9 pacientes inférteis sem endometriose, 4 pacientes férteis com endometriose e 10 pacientes férteis sem endometriose. As concentrações de IL-1β, IL-10 e IFγ foram determinadas pela método de ELISA e as concentrações de IgA, IgG e IgM foram feitas pela técnica de imunodifusão radial. Nas pacientes com endometriose, as concentrações de IgA no soro e do líquido peritonial foram maiores nas pacientes inférteis do que nas férteis. A IgG estava mais elevada nas pacientes sem endometriose do que nas pacientes com endometriose, todas inférteis. Os níveis de interleucina 10 no líquido peritonial de pacientes com endometriose foram mais elevados nas pacientes inférteis do que nas férteis e Interferon γ apresentou concentrações mais baixas no soro e no líquido peritonial de pacientes inférteis sem endometriose. Não houve diferenças significativas entre os grupos para as concentrações de IgM e IL-1β, bem como nas correlações entre os níveis de citocinas e imunoglobulinas entre os diferentes grupos com os graus de endometriose e os níveis de dor nessas pacientes.
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Desenvolvimento de imunossensor para detecção de Staphylococcus aureus : estratégias de imobilização de anticorpos

Menti, Caroline 18 April 2016 (has links)
Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2017-02-24T13:45:52Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Caroline Menti.pdf: 287733 bytes, checksum: 1e558da754c143ffdcf1b15be9ec54fc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-24T13:45:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Caroline Menti.pdf: 287733 bytes, checksum: 1e558da754c143ffdcf1b15be9ec54fc (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul, FAPERGS.
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Aspectos cl?nicos e imunol?gicos da infec??o por Leishmania Infantum Chagasi em c?es do Rio Grande do Norte / Paula Vivianne Souza de Queiroz. Natal/RN

Queiroz, Paula Viviane de Sousa 16 November 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PaulaVSQ_TESE.pdf: 2112354 bytes, checksum: 4be2c2ba75cc5941ee80bd6de56cfd71 (MD5) Previous issue date: 2011-11-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / No Brasil, os c?es est?o envolvidos no ciclo de transmiss?o da Leishmania infantum chagasi, agente etiol?gico da leishmaniose visceral (LV), constituindose em fonte de infec??o para o vetor e promovendo a dispers?o da doen?a para ?reas n?o end?micas. N?o h? tratamento eficaz para LV canina, como tamb?m n?o h? vacinas eficientes.. Os mecanismos imunol?gicos que regulam a susceptibilidade ou resist?ncia ? infec??o por Leishmania em c?es n?o foram completamente caracterizados. A express?o das subclasses de IgG anti- Leishmania tem sido testada como marcador de susceptibilidade ou resist?ncia e consequente status cl?nico de animais infectados. O estudo teve como objetivo avaliar as caracter?sticas cl?nicas e imunol?gicas da infec??o por Leishmania em c?es que residem em ?reas end?micas para leishmaniose visceral, em ambientes periurbano e rural no Estado do Rio Grande do Norte. A popula??o examinada foi proveniente de ?reas de preval?ncia da infec??o canina e humana no RN, sendo 589 c?es de ?reas periurbanas do litoral leste do Estado, 97 c?es de ?reas rurais do munic?pio de S?o Miguel e 146 c?es soropositivos do CCZ de Natal. Os animais foram submetidos ao exame cl?nico e ao diagn?stico sorol?gico atrav?s do teste ELISA, utilizando os ant?genos rK39 e SLA. As subclasses de imunoglobulinas IgG1 e IgG2 foram determinadas atrav?s do ELISA. C?lulas obtidas de ba?o de c?es infectados foram cultivadas para isolamento, identifica??o e quantifica??o do parasita. Altos ?ndices de infec??o foram encontrados em ?rea periurbana (SLA:44,5%;rK39:8,2%) e rural (SLA:44,3%;rK39:11,3%). C?es adultos e machos predominaram entre os soropositivos nas tr?s popula??es estudadas. Unha grande, ?lceras, alopecia e perda de peso foram os sinais cl?nicos mais freq?entes, embora percentuais acima de 70% de assintom?ticos tenham sido registrados. C?es infectados por Leishmania apresentaram t?tulos mais elevados da imunoglobulina IgG2 em rela??o ? IgG1. C?es oriundos de ?reas periurbanas e rurais apresentaram, respectivamente, taxas de soroconvers?o de: 20,9% e 8,3% durante um per?odo de seis meses. A esp?cie L. i. chagasi foi identificada como agente etiol?gico da infec??o canina no CCZ Natal
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Prevalência de anticorpos antigliadina em crianças celíacas e não celíacas

Guimarães, Flávia Alice Timburibá de Medeiros 26 July 2006 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2006. / Submitted by Thaíza da Silva Santos (thaiza28@hotmail.com) on 2009-12-01T17:20:38Z No. of bitstreams: 1 Dissert_Flávia Alice Timburibá de Medeiros Guimarães.pdf: 270648 bytes, checksum: 9d8f121eaafd4034af61bfc5b90c5e01 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2009-12-04T03:11:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissert_Flávia Alice Timburibá de Medeiros Guimarães.pdf: 270648 bytes, checksum: 9d8f121eaafd4034af61bfc5b90c5e01 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-04T03:11:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissert_Flávia Alice Timburibá de Medeiros Guimarães.pdf: 270648 bytes, checksum: 9d8f121eaafd4034af61bfc5b90c5e01 (MD5) Previous issue date: 2006-07-26 / Introdução: A dosagem de anticorpos antigliadina é, no Brasil, teste ainda hoje bastante difundido para o rastreamento e diagnóstico de casos de doença celíaca. Estes anticorpos são, no entanto, freqüentemente encontrados em indivíduos não portadores desta afecção, o que pode resultar em diagnósticos errôneos. Objetivo: avaliar a prevalência dos anticorpos antigliadina em grupos de crianças brasileiras celíacas e não celíacas. Métodos: a prevalência dos anticorpos antigliadina IgA e IgG foi determinada em dois grupos de pacientes pediátricos pelo teste imunoenzimático ELISA. O primeiro grupo foi composto por 131 crianças com variadas patologias gastrointestinais e dosagem do anticorpo antitransglutaminase negativa (grupo 1). O segundo grupo foi composto por 48 crianças celíacas com diagnóstico confirmado pelo teste sorológico antitransglutaminase e biópsia jejunal típica (grupo 2). Resultados: no grupo 2, os valores de IgA e IgG foram maiores que no grupo 1, havendo diferença estatisticamente significante, com p=0,000 para IgA e p=0,002 para IgG. O grupo 1 apresentou IgG positiva em 36,6% dos casos e IgA positiva em 9,2% dos casos. O grupo 2 apresentou positividade do exame em 52,1% dos casos para IgG e em 47,9% dos casos para IgA. Conclusões: na população estudada a prevalência de positividade do anticorpo antigliadina em crianças presumivelmente não celíacas foi alta para IgG (36,6%). _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: The determination of antigliadin antibodies has been widely used in Brazil for the screening and diagnosis of celiac disease. These antibodies are, however, frequently found in non celiac patients. Objective: evaluate the prevalence of antigliadin antibodies in a two groups of Brazilian children composed by celiac and non celiac children. Methods: serum IgA and IgG antigliadin antibodies were analyzed by the ELISA method in two groups of children. One group of 131 patients, with varied gastrointestinal complaints and negative antitransglutaminase antibody test (group 1); and another group of 48 children with celiac disease diagnosis confirmed by positivity of the antitransglutaminase antibody test and jejunal biopsy (group 2). Results: the IgA and IgG antigliadin antibodies of group 2 showed higher values than group 1, with statistic significance (p=0,000 for IgA and p=0,002 for IgG). Group 1 had 36,6% of positive IgG and 9,2% of positive IgA. On the other side, group 2 was positive for IgG in 52,1% of the patients and in 47,9% of the patients for IgA. Conclusions: the prevalence of positive antigliadin antibodies in non celiac children was high for IgG (36,6%), on the studied population.
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Quitosana/Alginato epoxilado com corantes imobilizados como potencial fase estacionÃria para purificaÃÃo de IgG do soro humano. / Chitosan/alginate epoxilated with dyes immobilized as a potential stationary phase for IgG purification from human serum

Diego RomÃo Gondim 27 July 2012 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / As imunoglobulinas sÃo proteÃnas do soro humano que despertam maior interesse em sua utilizaÃÃo devido Ãs inÃmeras funÃÃes diagnÃsticas e terapÃuticas. Pesquisas nessa Ãrea contemplam assuntos de Ãmbito tÃcnico cientÃfico, beneficiando setores carentes no nosso paÃs no quesito da saÃde humana. Nesse contexto, o presente trabalho teve por finalidade avaliar o potencial da matriz quitosana/alginato epoxilado (QAE) com corantes reativos imobilizados, na purificaÃÃo de IgG humana utilizando a tÃcnica por cromatografia de afinidade. Os corantes Cibacron Blue F3GA, Reativo Verde 5 (Procion HE-4G) e o Reativo Azul 4 (Procion Blue MX-R) foram imobilizados nas partÃculas de quitosana/alginato epoxilada e nÃo foi observado desprendimentos desses corantes nos ensaios cromatogrÃficos. A matriz de QAE com e sem corantes imobilizados foram caracterizados por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) visando verificar os grupos especÃficos dos corantes na superfÃcie da matriz. Foi investigado a influÃncia do tipo de tampÃo e pH na adsorÃÃo de IgG de alta pureza. Os materiais apresentaram elevada capacidade de adsorÃÃo para diferentes sistemas tamponantes: MOPS (Ãcido morfolinopropanosulfÃnico), HEPES (Ãcido N-2-hidroxietilpiperazino-Nâ-2-etanosulfÃnico), MES (4 â Ãcido morfolinoetanosulfÃnico) e FS (Fosfato de SÃdio). As isotermas de adsorÃÃo foram obtidas em sistemas em batelada e os dados experimentais foram bem correlacionados pelos modelos de Langmuir e Langmuir-Freundlich. O adsorvente quitosana/alginato epoxilado com corante Reativo Azul 4 imobilizado apresentou quantidade mÃxima de adsorÃÃo de IgG superior a 180 mg/g, superando os outros materiais. Os trÃs adsorventes apresentaram constantes de dissociaÃÃo (KD e KDLF) entre 10-5 e 10-6 mol/L. Os ensaios cromatogrÃficos foram realizados com IgG de alta pureza e soro humano diluÃdo 10 vezes e realizaram-se balanÃos de massas, anÃlises de eletroforeses e quantificaÃÃo de proteÃnas totais pelo mÃtodo de Bradford. Nos ensaios em leito fixo com soro humano necessitou-se de 15,0 mL de soro diluÃdo para a saturaÃÃo do leito e as amostras coletadas das fraÃÃes cromatogrÃficas indicaram a purificaÃÃo de IgG do soro humano atravÃs da eletroforese. Entre os trÃs ligantes pseudobiespecÃficos (corantes) estudados no presente trabalho, o corante Cibacron Blue F3GA apresentou maior potencial para purificar IgG do soro humano em todos os trÃs tampÃes analisados, devido a maior seletividade deste por IgG comparado aos demais corantes imobilizados.

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