Orientador : Ivan Mota / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T04:59:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rossi_ClaudioLucio_M.pdf: 2721633 bytes, checksum: c973f899a17547d6bc28e44ee16e51e6 (MD5) Previous issue date: 1982 / Resumo: A imunização de camundongos usando-se a IgG de coelho como imunógeno e o hidróxido de alumínio como adjuvante não resultou em produção de anticorpos da classe IgE em nível detectável e a produção de anticorpos IgG IND.1' foi muito baixa. 2. A imunização, em idênticas condições, com os fragmentos Fab e Fc, induziu a produção de níveis detectáveis tanto de IgE quanto de 'IgG IND.1' capazes de reagirem não somente com o imunógeno original, Fab ou Fc, mas também com a molecula íntegra da IgG. 3. Embora a IgG, quando administrada em hidróxido de aluminio, nao se mostrasse um bom imunogeno, no tocante a produção de anticorpos homocitotrópicos, foi capaz, nas mesmas condições de imunização, de induzir a síntese de anticorpos aglútinantes da classe IgG.. 4. O uso de adjuvante completo de Freund potenciou a imunogenicidade da IgG, induzindo uma resposta anticorpos homocitotrópicos significantemente maior do de que aquela obtida com o hidróxido de alumínio, particularmente de anticorpos 'IgG IND.1'5. A não imunogenicidade da IgG, quando administrada em hidróxido de alumínio, em termos de anticorpos homocitotrópicos, não foi restrita a linhagem A/Sn, visto que as linhagens C57Bl/10J e Balb/c, nas mesmas condições de imunização, comportaram-se do mesmo modo. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Imunologia / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Margareth Castro Ozelo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T11:38:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Montalvao_Silmara_M.pdf: 5511908 bytes, checksum: e7e6cf52da6e5f3fb92bce534c8e27ec (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Os principais problemas relacionados ao tratamento de pacientes portadores de hemofilia A estão relacionados ao uso terapêutico de fator VIII (FVIII), sendo estes o desenvolvimento de anticorpos neutralizantes anti-FVIII (inibidores), e o desenvolvimento de reações anafiláticas, que são eventos raros, no entanto potencialmente graves. As informações quanto aos isotipos de imunoglobulinas associados a estas duas situações clínicas ainda é limitado. O objetivo deste projeto foi avaliar as características da resposta imune humoral em pacientes com hemofilia A que apresentam inibidor e/ou em condição de reação alérgica ao FVIII. Para estas análises três metodologias foram aplicadas, (1) determinação de anticorpos inibitórios por método de Bethesda-Nijmegen, (2) determinação do isotipo de imunoglobulinas envolvidas subclasses da IgG, IgM e IgE anti-FVIII, por método de ELISA e (3) determinação de citocinas por método multiplex BDTM CBA® (cytometric bead array). Esse projeto foi dividido em três estudos. No primeiro estudo, foram analisadas amostras de 25 pacientes brasileiros com hemofilia A, sendo 44% destes afrodescendentes. Todos os pacientes receberam exclusivamente terapia de reposição com concentrado de FVIII derivado de plasma (pdFVIII) e produtos bypass após o desenvolvimento de inibidor. Cinco pacientes deste grupo foram acompanhados por uma análise longitudinal no período de até três anos. No segundo estudo, 4 pacientes com hemofilia A com inibidor foram avaliados no período em que foram tratados através do protocolo de indução de imunotolerância (ITI) para erradicação do inibidor, também em análise longitudinal. O terceiro consistiu da avaliação de incidência de reação alérgica em pacientes com hemofilia A. Três de 322 pacientes (0,9%) apresentaram reação alérgica após a exposição exclusivamente para pdFVIII durante os últimos quinze anos em nosso centro. Os resultados evidenciaram que a subclasse IgG4 é a principal na modulação em presença de anticorpos inibitórios, enquanto a IgG1 na maior parte das análises estava presente junto a baixos títulos de inibidor.Durante o tratamento de ITI os níveis das interleucinas anti-inflamatórias IL-4 e IL-6 acompanharam o decaimento dos títulos de inibidor e IgG4 nos pacientes que obtiveram sucesso ao tratamento. Além disso, no decorrer do protocolo observou-se uma resposta polarizada para o tipo Th1 como padrão de resposta na conquista da tolerância completa ao FVIII. No contexto da reação alérgica, apenas um dos três pacientes apresentou reatividade da IgE que foi exclusiva ao pdFVIII, sendo negativa no ensaio do IgE anti-rFVIII (anti-fator VIII recombinante), demonstrando que a reatividade não foi específica ao FVIII. O entendimento resposta imune humoral em pacientes com hemofilia A, incluindo a participação da IgG4 e IgG1 no mecanismos envolvendo a presença e erradicação dos inibidores e da IgE na reação alérgica, possibilita ampliar conceitos estabelecidos dos mecanismos envolvidos nessas duas situações. Isso poderá auxiliar no desenvolvimento de novos produtos menos imunogênicos e de novas estratégias para a indução de tolerância ao FVIII, que tenham maior eficiência e melhor custo benefício / Abstract: The main problems related to the treatment of hemophilia A patients are linked to the use of therapeutic factor VIII (FVIII). First, the development of neutralizing antibodies against FVIII (inhibitors), and second development of anaphylactic reactions, which are rare, however potencialy severe. The knowledge about the immunoglobulin isotypes associated with these two clinical situations is still limited.The aim of this project was to evaluate the characteristics of the humoral immune response in patients with hemophilia A who have inhibitors and/or allergic reaction to FVIII. For these analyzes three methods were used (1) inhibitory anti-FVIII antibodies assay by Bethesda-Nijmegen (2) immunoglobulins isotype ELISA assay for anti-FVIII IgG subclasses, IgM and IgE and (3) cytokines assay by BDTM Cytometric bead array (BD CBA®) multiplex method. This project was divided in three studies. In the first study, we analyzed samples from 25 Brazilian hemophilia A patients with 44% African-descents. All patients received exclusively replacement therapy with plasma-derived (pdFVIII) concentrates, and bypassing agents after the development of inhibitors. Five patients from this group were followed for a longitudinal analysis in a period up to three years. In the second study, 4 hemophilia A patients with inhibitor were evaluated also in longitudinal analyses, during the induction of immunotolerance (ITI) treatment for the eradication of the inhibitor. The third study included the evaluation of the incidence of allergic reaction among hemophilia A patients. Three out of 322 patients (0.9%) had allergic reaction after exclusively exposure to pdFVIII during the last fifteen years in our center. The results of these studies demonstrated that IgG4 subclass is the main immunoglobulin involved in the modulation of the inhibitory antibodies, while IgG1 is associated with low-titer inhibitors. During the ITI protocol, the anti- inflammatory interleukins, IL-4 and IL-6 decreased following the IgG4 reduction among the patients that achieved success in the ITI treatment. In addition, during the ITI protocol it was observed a polarized Th1 immune response after the complete success achievement. In the context of allergic reaction, only one out of three patients presented IgE reactivity that was exclusively to pdFVIII, and the assay IgE anti-rFVIII (anti-recombinant FVIII) was negative, confirming that the reativity was not specific to FVIII. The understanding of the humoral immune response in hemophilia A patients, including the role of IgG4 and IgG1 in the mechanisms involving the presence and eradication of inhibitors, and the participation of IgE in allergic reaction, allows to better understand the established concepts of the mechanisms involved in these two situations. This may help the development of less immunogenic new products and new strategies for induction of tolerance to FVIII, with higher efficiency and best value / Mestrado / Clinica Medica / Mestra em Clínica Médica

Nesse trabalho foram estudadas 2 estratégias visando a purificação de IgM a partir de plasma humano. A primeira estratégia baseou-se em um processo desenhado para a fábrica de produção de hemoderivados do Instituto Butantan para a produção dos fatores de coagulação VIII e IX, albumina e IgG. Após 2 colunas cromatográficas, a IgM foi separada das 2 proteínas mais abundantes do plasma, a albumina e a IgG e o enriquecimento da IgM em relação a IgA e IgG foi bastante satisfatória. A segunda estratégia está inserida no processo de fracionamento de plasma desenvolvida em nosso laboratório. Através de um estudo sistemático em coluna de troca aniônica, obtivemos uma fração contendo IgG, uma contendo albumina, ambos praticamente puros e uma terceira contendo IgM e outras proteínas contaminantes. Os resultados obtidos indicam que a IgM pode ser purificada com sucesso empregando ambas as estratégias. Entretanto, para se obter um produto mais homogêneo, será necessário ainda adicionar uma ou mais etapas de purificação. / In this work we studied two strategies for the purification human plasma IgM. The first strategy was based on a process designed for the hemoderivatives production factory of the Butantan Institute for the production of coagulation factors VIII and IX, albumin and IgG. After 2 chromatographies, IgM was separated from the 2 most abundant plasma proteins, that is, albumin and IgG and the achieved enrichment of IgM in relation to IgG and IGA was very satisfactory. The second strategy is part of a plasma fractionation process under development in our laboratory. Through a systematic study using an anionic exchange column we separated a fraction containing IgG, a second containing albumin, being both nearly pure and a third fraction containing IgM and other contaminating proteins. The obtained results indicate that IgM can be purified successfully by both strategies. However, to obtain a more homogeneous product, additional purification steps are necessary.

Orientador: Flávia Hebeler Barbosa Trovão / Resumo: Bibliotecas conformacionais de anticorpos vem constituindo importantes ferramentas na investigação científica de imunoglobulinas expressas em diferentes situações biológicas incluindo patologias. O conhecimento e elucidação estrutural de anticorpos diferenciais produzidos em patologias distintas pode representar ferramenta molecular fundamental para a intervenção na fisiopatologia da doença; incluindo diagnóstico diferencial, identificação de biomarcadores, terapêutica baseada em imunoglobulinas para bloqueio de patógenos bem como, contribuir para a constituição de painéis de anticorpos capazes de identificar epítopos agregando, também, informações para avanços no desenvolvimento de vacinas. A maior dificuldade atualmente reportada na literatura científica é a obtenção in vitro dos fragmentos Fab (Fragment Antigen Binding) devido à ausência de informações metodológicas das fases experimentais necessárias à construção do Fab, substrato essencial a construção de bibliotecas de anticorpos. Uma abordagem ainda inédita neste contexto é o desenvolvimento de uma metodologia experimental eficiente para a obtenção de bibliotecas de Fab na infecção pelo vírus ZIKA (ZIKV). A infecção pelo vírus ZIKA (ZIKV) vem sendo associada à casos de microcefalia em neonatos de gestantes infectadas e síndrome de Guillain-Barré, a neutralização viral baseada em anticorpos dirigidos contra epítopos específicos é pouco conhecida, a maioria dos estudos se referem a outros Flavivirus. A resposta imunológi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Conformational libraries of antibodies have become important tools for the scientific investigation of immunoglobulins expressed under different biological situations, including pathological conditions. The knowledge and structural elucidation of differential antibodies produced during distinct pathological conditions may be fundamental for intervention in the pathophysiology of diseases, including differential diagnosis, biomarker identification, immunoglobulin-based therapy for pathogen blocking, and constitution of antibody panels for identifying epitopes for vaccine advancement. Currently, the greatest difficulty reported in the scientific literature is the lack of methodological information for the experimental phases necessary for in vitro construction of Fab (Antigen Binding Fragment), an essential substrate for antibody library construction. In this context, an efficient experimental methodology for obtaining Fab libraries in ZIKA (ZIKV) virus infection is as yet unreported. ZIKV infection has been associated with cases of microcephaly in neonates of infected pregnant women and those with Guillain-Barré syndrome. However, viral neutralization based on antibodies directed against specific epitopes is not well understood, therefore, most studies have been carried out on other Flaviviruses. The humoral immune response is essential for protection against Flaviviruses; hence, it is important to understand the mechanisms of the host immune system against this virus. Thus, t... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Patrícia Pintor dos Reis / Resumo: Os anticorpos são proteínas altamente específicas, com síntese estimulada pela presença de um antígeno, que podem ser usados como ferramentas em pesquisa, diagnóstico clínico, acompanhamento de patologias, inferência in silico e terapêutica. Diferentes metodologias baseadas no uso de anticorpos vêm sendo descritas e, a grande maioria delas utilizando como ferramenta a construção por técnicas moleculares da fração de ligação ao antígeno (Fab) ou as frações variáveis da imunoglobulina. O estudo e aplicação dos anticorpos desenvolvidos in vitro na prática médica humana cresceu muito nos últimos anos, no entanto o mesmo não ocorreu no campo da medicina veterinária, área que carece de estudos nesse sentido. Assim, este estudo buscou realizar a criação de uma biblioteca de frações variáveis de anticorpos em hiperplasia e neoplasia mamária em cães e criar um banco de dados gerado por sequenciamento em larga escala de sequências destes anticorpos para disponibilização pública, contribuindo, assim, para futuras aplicações e avanços científicos no campo da medicina veterinária. / Abstract: Antibodies are highly specific proteins, with stimulated synthesis by the presence of an antigen, which can be used as tools in research, clinical diagnosis, pathology monitoring, in silico inference and therapeutics. Different methodologies based on the use of antibodies have been described and the majority of them uses molecular techniques to construct the antigen binding fraction (Fab) or the variable fractions of the immunoglobulin. Description and application of antibodies developed in vitro in the human medical practice has grown a lot in the last years, however the same has not occurred in veterinary medicine field. Thus, this study aimed to create a library of variable fractions of antibodies in mammary hyperplasia and neoplasia in dogs and to create a database generated by large-scale sequencing of these antibodies for public availability, thus contributing to future applications and scientific advances in veterinary medicine. / Doutor

Orientador: Mário De Beni Arrigoni / Banca: Telma Terezinha Berchielli / Banca: Mário Sartori Bueno / Banca: Rafael da Costa Cervieri / Banca: José Roberto Sartori / Resumo: O objetivo deste estudo foi estudar os efeitos da suplementação do preparado de anticorpos policlonais (PAP) ou monensina sódica (MON) sobre o desempenho, características de carcaça, perfil metabólico sanguíneo, flutuação da ingestão de matéria seca (IMS) e incidências de rumenites e abscessos de fígado. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em arranjo fatorial 2 × 2, com seis repetições por tratamento, nos quais 48 bovinos machos inteiros de cada grupo genético (GG) avaliado [Brangus (BR) ou Nelore (NE)] foram alimentados com dietas contendo MON ou PAP fornecidos diariamente nas doses de 30 e 300 mg/kg de MS, respectivamente. Os animais passaram por três fases durante o estudo: adaptação (ADAP), crescimento, e terminação. As dietas fornecidas nestes períodos continham 55, 70 e 85% de concentrado, respectivamente. Não foi observado (P > 0,05) efeito principal dos aditivos alimentares (AA) sobre a maioria das características de desempenho, com exceção à IMS em quilos e em porcentagem do peso vivo, onde bovinos recebendo MON apresentaram (P < 0,05) menores IMS. Foi observado (P < 0,01) efeito principal dos AA e dos GG sobre as concentrações de bicarbonato, total de CO2 e excesso de base no fluído extra-celular, onde bovinos recebendo PAP, e aqueles da raça BR, apresentaram maiores concentrações desses metabólitos no sangue. Animais que receberam PAP e aqueles da raça BR, apresentaram maiores (P < 0,01) valores de pH na fase de ADAP que animais suplementados com MON (7,427 vs. 7,400) e animais NE, respectivamente. Bovinos BR apresentaram (P < 0,01) maior ganho de peso diário que bovinos NE em ambas as fases, contudo conversão alimentar similar (P > 0,05). Por outro lado, bovinos NE mostraram maior (P < 0,05) incidência de lesões ruminais. Assim sendo, a suplementação de PAP pode ser uma eventual alternativa... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study, conducted at the São Paulo State University feedlot, Botucatu Campus, Brazil, was designed to test monensin (MON) and a polyclonal antibody preparation (PAP) against rumen bacteria on feedlot performance of Brangus (BR) and Nellore (NE) cattle. The experiment was designed as a 2 × 2 factorial arrangement using repeated measures over time, replicated 6 times (4 bullocks/pen), in which 48 8-mo-old bullocks of each of two breeds (BD) evaluated were fed diets containing either MON at 30 mg•kg-1 or PAP at 300mg•kg-1 of dry matter (DM). Measures over time were taken according to the phase and level of concentrate fed during the study: 55, 70 and 85%. Phases were named adaptation (AD), growing (GR), and final (FN), respectively. No significant (P > 0.05) feed additives (FA) main effect was observed for any of the feedlot performance variables, with the exception (P < 0.05) of DM intake expressed in kg (PAP= 7.60; MON=7.24) and in % of body weight (PAP= 2.11; MON=2.03). Feeding MON led to greater (P < 0.05) subcutaneous fat deposition throughout the study, and decreased (P < 0.05) the final rib eye area (RBA). As a result a reduced (P < 0.05) RBA deposition, mainly in GR phase, it was observed when feeding MON was compared to feeding PAP. A significant (P < 0.01) FA and BD main effects were found for bicarbonate, total CO2, and base excess in extracellular fluid, where bullocks receiving PAP, and those BR cattle, presented greater concentrations of these metabolites in the blood. Likewise, BR cattle and bullocks receiving PAP had (P < 0.01) higher blood pH in the AD phase than NE cattle and bullocks fed MON (7.427 vs. 7.400), respectively. BR had greater (P < 0.01) average daily gain in GR and FN phases, but similar (P > 0.05) feed conversion was observed. On the other hand, NE bullocks presented greater (P < 0.05) incidence of rumenites. Thus, feeding PAP may... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Resumo: O experimento foi conduzido na UNESP - Campus de Botucatu, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso num arranjo fatorial com três cultivares de Brachiaria brizantha (Marandu, Xaraés e BRS Piatã) e duas alturas de resíduo (15 e 25 cm), no total de seis tratamentos com quatro repetições (parcelas de 20 m2). O período de avaliação foi de um ano (01/12/2007 a 10/12/2008), com a realização de oito cortes, sendo três na primavera, três no verão, um no outono e um no inverno. A produção de massa seca (MS) da Xaraés foi maior no verão e na primavera em relação à Marandu. No somatório do ano a produtividade de MS da Xaraés foi 27,07% superior à Marandu, alcançando valor elevado (20.023 kg/ha), o que demonstra o potencial de utilização deste genótipo, principalmente em sistemas de produção de bovinos de corte mais intensivos. A produção de MS da Piatã nas estações do ano foi semelhante à Marandu, totalizando 17.572 e 15.757 kg/ha, respectivamente. Os dados de produção indicam que a Piatã apresentou a melhor distribuição da forragem produzida ao longo do ano. A produção de forragem das cultivares foi maior na altura do resíduo de 15 cm no verão e inverno, e não diferiu nas alturas de manejo no outono e primavera, demonstrando exigências diferentes de manejo do capim ao longo do ano. Os resultados obtidos confirmam a recomendação e a importância da cultivar Piatã como alternativa de utilização e diversificação das pastagens nos sistemas produtivos. / Abstract: The experiment was conducted in the School of Veterinary Medicine and Animal Science of UNESP - Botucatu Campus. The experimental design was a complete randomized blocks in a factorial arrangement with three cultivars of Brachiaria brizantha (Marandu, Xaraés and BRS Piatã) and two stubble heights (15 and 25 cm), in the total six treatments with four replications (20 m² plots). The evaluation period was of one year (12/01/2007 to 12/10/2008) with eight cuts: three in the spring, three in the summer, one in the fall and one in the winter. The production of dry matter (DM) of Xaraés in summer and spring were higher than Marandu with a total of 27.07% higher DM than Marandu. The total DM production was 20,023 kg/ha, demonstrating the potential of use of the Xaraés cultivar, especially in more intensive systems of beef cattle production. DM production of Piatã in the seasons was similar to Marandu, totalizing 17,572 and 15,757 kg/ha, respectively. The production data indicate that Piatã cultivar had the best distribution of forage produced during the year. The forage production of cultivars was higher in the stubble height of 15 cm in summer and winter, and did not differ for two heights of management in the fall and spring, showing different requirements of grass management during the year. The results confirm the recommendation and the importance of Piatã cultivar as an alternative of use and diversification of pastures in the production systems. / Orientador: Ciniro Costa / Coorientador: Paulo Roberto de Lima Meirelles / Banca: Heraldo César Gonçalves / Banca: Roberto Antonio Rodella / Banca: Cacilda Borges do Valle / Banca: Valdo Rodrigues Hering / Doutor

Um dos motivos do baixo desempenho dos animais está em falhas durante o processo de colostragem, pois ele pode apresentar baixa qualidade nutricional e microbiológica. Após esta fase inicial de vida, o desempenho das bezerras sofre influência direta do manipulador. Na intenção de identificar pontos falhos no processo de criação de bezerras, objetivou-se caracterizar o manejo destes animais, através do levantamento das principais práticas zootécnicas adotadas, avaliar a composição nutricional e microbiológica do colostro fornecido aos recém nascidos e as características do tratador de bezerras. Para caracterizar os sistema de criação de bezerras realizou-se uma entrevista com 179 produtores e/ou técnicos, abordando questões relacionadas a criação de bezerras, desde o manejo da vaca seca até o desaleitamento. Para caracterizar o colostro, foram colhidas 66 amostras, diretamente da ordenha de vacas recém-paridas ou do banco de colostro, com as quais realizaram-se análises bromatológicas e microbiológicas. A avaliação da atitude dos tratadores de bezerras foi realizada através de uma entrevista com 100 tratadores, a qual permitiu colher dados de auto-relatos do responsável pela criação de bezerras. A entrevista foi conduzida com base em questionário semi-estruturado, aplicado por um único entrevistador e direcionado ao tratador de bezerras. Os itens de atitude foram medidos e classificados de acordo com a resposta do entrevistado em uma escala de cinco pontos (Escala de Likert). Através do levantamento foi possível identificar pontos de melhoria na criação de bezerras, principalmente com as vacas pré-parto e acompanhamento dos partos, além de um melhor cuidado com o processo de colostragem desde a identificação da qualidade do colostro até o momento correto de oferecer o alimento ao recém-nascido. Práticas de manejo direcionadas a obtenção de colostro de boa qualidade devem ser priorizadas, além de cuidados com a higienização da colheita e armazenamento do mesmo, pois apenas 22,6% das amostras de colostro atendem a recomendação de qualidade nutricional e microbiológica. Assim, grande parte dos bezerros nesta população estudada está propensa a apresentar falhas na transferência de imunidade passiva e exposta a patógenos quando alimentados com colostro materno. Para algumas variáveis o tratador tem uma atitude positiva, porém na prática o comportamento realizado nem sempre é o mesmo. É possível que os tratadores de bezerras tenham componentes afetivos e cognitivos positivos, ou seja, já tiveram experiência anterior de sucesso com as práticas ou ainda, conhecem a importância técnica das principais ações na criação. Porém, o componente comportamental sobressai sobre algumas ações, levando-os a uma divergência entre a atitude e o comportamento. Programas voltados para educação, treinamento e fortalecimento do comprometimento dos colaboradores é um caminho interessante na tentativa de reduzir as falhas na criação de bezerras. / One cause of the low dairy calves performance is related to failures during colostrum feeding process, because it may have low nutritional and microbiological quality. After this initial period of life, the dairy calves performance is under direct influence of the handler. In an attempt to identify weak points in the dairy calves raising systems the study aimed to characterize the dairy calves management, through a survey of the main husbandry adopted practices, assess the nutritional and microbiological composition of colostrum and the calves handler attitude. To characterize the dairy calves raising system an interview with 179 producers and / or field technicians, addressing issues related to creation of calves from the dry cow management until weaning, was held. To characterize colostrum quality, 66 samples were collected directly from recently calved cows or colostrum bank, for chemical and microbiological analyzes. The evaluation of the attitude of calves handlers was conducted by interviewing 100 handlers, which allowed the collection of self-reported data. The interview was conducted based on a semi-structured questionnaire applied by a single interviewer and directed to calves handler. The items of attitude were measured and ranked according to the handler\'s response on a five point scale (Likert scale). Through the survey it was possible to identify areas for improvement in the dairy calves system of production, especially with pre-partum cows and monitoring of deliveries, and better care with the colostrum feeding process as to identifying the quality of colostrum to the correct feeding time for the newborn. Management practices aimed to obtain good quality colostrum must be priorities besides, care with sanitation during the harvest and storage of the same, since only 22.6% of colostrum samples meet the recommendation of nutritional and microbiological quality. Thus, most of the calves in the studied population are likely to present failures in the transfer of passive immunity and exposed to pathogens when fed colostrum. For some variables the handler has a positive attitude, but in practice the behavior performed is not always the same. It is possible that the calves handlers have positive affective and cognitive components, in other words, have had previous experience of successful practices or even know the technical importance of the main practices in dairy calves raising. However, the behavioral component stands on some actions, leading them to a divergence between the attitude and behavior. Programs for education, training and commitment of employees are an interesting way to reduce the low performance of dairy calves.

O presente estudo avaliou o efeito da suplementação mineral injetável de cobre (Cu) e zinco (Zn) sobre a resposta imunológica e o desempenho de bovinos de corte a pasto, foram avaliadas vacas no período pré-parto (experimento I) e seus bezerros até pós desmama (experimento II). O experimento foi realizado na Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos da USP, Campus de Pirassununga-SP. No experimento I, foram avaliadas sessenta vacas prenhas por inseminação, distribuídas aleatoriamente em delineamento inteiramente casualizado com dois tratamentos (T e S). No tratamento testemunha (T), as vacas receberam soro fisiológico como placebo, e no tratamento suplementado (S) receberam mineral injetável via subcutânea (75 mg de cobre e 250 mg de zinco), com aproximadamente 75 dias antes do parto. Foram avaliados os teores de Cu e Zn séricos, IgG e IgM, ceruloplasmina e a atividade fagocitária. Os dados experimentais foram analisados utilizando-se o PROC MIXED do SAS (SAS, 2009), com o nível de significância de 5% para interpretação estatística de todos os testes. Os teores de cobre, zinco, IgM, IgG, ceruloplasmina e a atividade fagocitária das vacas não apresentaram diferença (p&gt;0,05) entre os tratamentos. Da mesma forma, não houve influencia (p&gt;0,05) das vacas nos teores de Cu e Zn séricos, na resposta imunológica e no desempenho dos bezerros aos 70 dias de idade (primeira coleta de sangue). O fornecimento de Cu e Zn injetável aos 75 dias antes do parto não alterou os teores de zinco, cobre e ceruloplasmina sérica, bem como a resposta imunológica até 30 dias após o parto. Como não houve diferença significativa entre as mães, foi considerado que os bezerros eram provenientes de vacas homogêneas. Assim, no experimento II, cinquenta e quatro bezerros filhos destas vacas, foram distribuídos aleatoriamente em delineamento inteiramente casualizado em 2 tratamentos: (T) - bezerros não suplementados, que receberam soro fisiológico como placebo; (S) - bezerros suplementados com cobre (15 mg aos 70 dias, 45 mg aos 140 dias e 60 mg aos 210 dias) e zinco (50 mg aos 70 dias, 150 mg aos 140 dias e 200 mg aos 210 dias). Foram realizadas colheitas de sangue com aproximadamente 70, 140, 170, 210 e 240 dias de idade, para avaliação dos teores de Cu e Zn sérico, ceruloplasmina, IgG e IgM e a atividade fagocitária. A suplementação parenteral de Cu e Zn aos 70, 140 e 210 dias não alteraram (p&gt;0,05) os teores de Cu e Zn séricos, a resposta imunológica, o desempenho, a atividade da enzima superóxido dismutase e a atividade fagocitária de bezerros Nelore. A falta de resposta ao suplemento mineral injetável deveu-se possivelmente ao fato dos bezerros já estarem recebendo as quantidades adequadas de cobre e de zinco nas suas dietas. / This study evaluated the effect of injectable Cu and Zn on the immune response and performance of beef cattle on pasture, cows were evaluated in the antepartum period (experiment I) and their calves to post weaning (experiment II). The experiment was perfomed at the Faculty of Animal Science and Food Engineering, University of São Paulo, Campus Pirassununga. In experiment I, sixty pregnant Nelore cows by insemination were divided in a completely randomized design in two treatments. In the control treatment (T), the 30 cows received saline as placebo, the supplemented (S) received mineral injection subcutaneously (75 mg of copper and 250 mg of zinc), 75 days prior to parturition, when also received clostridiosis vaccine. It were evaluated the serum levels of Cu and Zn, IgG, and IgM, ceruloplasmin, SOD and phagocytic activity. Experimental data were analyzed using PROC MIXED of SAS (SAS, 2009), with 5% significance level for statistical interpretation of all tests. The levels of copper, zinc, IgM, IgG, ceruloplasmin and the phagocytic activity of the cows had no statistical difference (p&gt;0.05) between treatments. Similarly, there wasn\'t influence (p&gt;0.05) of cows for Cu and Zn serum, immune response and performance of calves at 70 days of age (first blood sample). The supply of Cu and Zn injection at 75 days before delivery did not change the levels of zinc, copper and serum ceruloplasmin and the immune response 30 days after delivery. Since there was no significant difference between the mothers, it was considered that the calves were from homogeneous cows. In experiment II, fifty four calves born from these cows were distributed completely randomized design with 2 treatments: (T) - calves not supplemented that receive solution saline as placebo and (S) - calves supplemented with injectable mineral applied subcutaneously containing copper (15 mg at 70 days, 45 mg at 140 days and 60 mg at 210 days) and zinc (50 mg at 70 days, 150 mg at 140 days and 200 mg at 210 days. Blood samples were realized with approximately 70, 140, 170, 210 and 240 days of age. Were assessed levels of serum Cu and Zn, ceruloplasmin, IgG and IgM and the phagocytic activity. Parenteral supplementation of Cu and Zn at 70, 140 and 210 days didn\'t alter (p&gt;0.05) the contents of Cu and Zn serum, the immune response, performance, activity of superoxide dismutase and the phagocytic activity of Nelore calves. The lack of response to injectable mineral supplement possibly was due to the fact that the calves were already taking adequate amounts of copper and zinc in their diets.

Sepse é a primeira causa de morte em Unidades de Terapia Intensiva. A gravidade dessa doença é considerada conseqüência de um desequilíbrio da resposta inflamatória e, apesar dos avanços em diagnóstico e tratamento, os índices de mortalidade se mantêm inalterados. O papel dos receptores Fc de immunoglobulinas nesta situação é pouco esclarecido. Tais receptores deflagram respostas imunes opostas, que dependem do receptor envolvido e podem ser tanto ativatórias, quanto inibitórias. As respostas ativatórias são atribuídas a um motivo chamado ITAM, enquanto as inibitórias são relacionadas ao motivo ITIM. Camundongos apresentam dois receptores de IgG ativatórios (Fc&#947;RI e Fc&#947;RIII), que portam motivos ITAM, associados a uma sub-unidade conhecida como cadeia gamma, assim como um receptor de IgG que apresenta um motivo ITIM na sua porção intra-citoplasmática (Fc&#947;RII). Este trabalho teve como objetivo o estudo do papel destes receptores em bacteremias e sepse. Para isso, utilizamos um modelo de peritonite induzida por ligadura e punção cecal. Este projeto descreve pela primeira vez, um papel importante do FcR&#947;II na indução de apoptose em linfócitos B, durante infecção bacteriana severa. Nossos resultados colocaram em evidência, ainda, o fato de que animais deficientes em cadeia gamma apresentam mortalidade diminuída, quando submetidos a esse modelo de peritonite, e que essa diminuição é associada a menores valores de TNF&#945; no soro e nos fluidos peritoneais, menor recrutamento peritoneal de células inflamatórias, assim como a um surpreendente aumento na fagocitose de E. coli. Hemocultura e cultura do lavado peritoneal desses animais revelaram uma flora multimicrobiana, enquanto camundongos selvagens apresentaram uma forte predominância de E. coli e um número total bastante superior de bactérias. Esse papel inibitório da cadeia gamma pode estar relacionado a mecanismos de auto-tolerância. Lisado total de células peritoneais de camundongos deficientes em cadeia gamma apresentam fosforilação aumentada de diversas proteínas, quando comparados a lisados obtidos, a partir de camundongos selvagens. Estudos semelhantes realizados com camundongos transgênicos para o receptor de IgA (Fc&#945;RI), entretanto, não demonstraram um papel crucial desse receptor nesta doença. Este trabalho abre, portanto, novas perspectivas para o tratamento de doenças infecciosas, através de intervenção sobre a cadeia gamma e coloca em rediscussão os conceitos atuais de ITAM e ITIM. / Sepsis is the first cause of death in Critical Care Units and despite the development in its diagnosis and treatment, mortality remains unaffected. The role of immunoglobulin Fc receptors in sepsis is not clearly understood. These receptors initiate opposing responses, depending on their aggregation by the ligand and can induce activating or inhibitory responses. The activating responses are attributed to a motif known as ITAM, and the inhibitory responses to another one called ITIM. Mice express two activating IgG receptors (Fc&#947;RI et Fc&#947;RIII) which have ITAM motifs in the intracytoplasmic domain of an associated subunit, called the FcR&#947; chain, as well as an inhibitory IgG receptor which possesses an ITIM motif in its intracytoplasmic domain. The objective of this work is to study the importance of these receptors in bacteremia and in sepsis. To this aim, we have used a peritonitis model, induced by cecal ligation and puncture (CLP). This project describes for the first time, an important role of Fc&#947;RII in B lymphocytes apoptosis. Moreover, our results show that FcR&#947; chain knockout mice have a decreased mortality in this model, which is associated to diminished TNF&#945; serum and peritoneal fluids levels, to a reduced recruitment of peritoneal inflammatory cells and to a surprising increase in E. coli phagocytosis. Blood and peritoneal fluid cultures have shown a polymicrobial flora 24 hours post-CLP for FcR&#947;-chain deficient mice, whereas wild-type mice present a strong predominance of E. coli in the same cultures and an increased bacteria total count. Lysates from FcR&#947;-chain deficient peritoneal cells revealed augmented phosphorylation of many proteins, as compared to wild-type cells. This FcR&#947; chain inhibitory role could be related to self-tolerance mechanisms. This work opens new perspectives for the treatment of bacterial diseases, proposing FcR&#947; chain targeting and the reexamination of the actual concepts of ITAM and ITIM.