Submitted by Eunice Novais (enovais@uepg.br) on 2018-08-29T22:28:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Anderson Gustavo Santos.pdf: 2571906 bytes, checksum: 0241f966a2aefc7dd806932c693fb2fb (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-29T22:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Anderson Gustavo Santos.pdf: 2571906 bytes, checksum: 0241f966a2aefc7dd806932c693fb2fb (MD5) Previous issue date: 2018-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A doença de Parkinson (DP) é uma doença crônica e neurodegenerativa, de etiologia não totalmente elucidada. Estudos demonstram que processos oxidativos podem estar envolvidos nesta morte neuronal. Sabendo-se disso, pesquisas têm sido direcionadas na busca de plantas medicinais e substâncias que possam atuar inibindo tais processos oxidativos. A Passiflora alata é uma planta nativa do Brasil e que possui uma atividade antioxidante descrita na literatura. Além disto, há evidências de que espécies do gênero Passiflora podem atuar frente a doenças neurodegenerativas, como a DP. Através disto, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito do tratamento com o extrato hidroalcoólico de P. alata (EHPA) em um modelo animal de DP, induzido pela neurotoxina 6-hidroxidopamina (6-OHDA). O extrato das folhas de P. alata foi preparado através da extração com solução hidroalcoólica a 95%, e posteriormente foi realizado a determinação do conteúdo de compostos fenólicos e flavonoides, além de ser determinada a sua atividade antioxidante frente aos ensaios DPPH• e ABTS•+. Para avaliar o efeito per se do EHPA, foi realizado uma avaliação do efeito comportamental, de diferentes doses do extrato, em animais não lesionados. Para a identificação do possível efeito neuroprotetor da planta, os animais foram separados em 5 grupos experimentais: SHAM (falso-operado), 6-OHDA controle, 6-OHDA + 100mg/Kg/dia de EHPA, 6-OHDA + 200mg/Kg/dia de EHPA e 6-OHDA + 300mg/Kg/dia de EHPA. Após a divisão dos grupos, os animais foram submetidos a cirurgia estereotáxica para a administração bilateral da neurotoxina 6-OHDA ou de solução salina (SHAM) no feixe prosencefálico medial. No dia seguinte, iniciou-se o tratamento com os extratos, por via oral, tendo uma duração de 14 dias. Após o término do tratamento, os animais foram submetidos aos seguintes testes comportamentais: Reconhecimento social, Campo aberto, Reconhecimento de objetos, Labirinto em cruz elevado e Natação forçada. Após o término dos testes, os animais foram sacrificados e foram coletados sangue e cérebro (estriado) para a determinação de GSH, catalase, parâmetros hematológicos e bioquímicos. Os resultados apresentados sugerem um efeito neuroprotetor resultante do tratamento com o EHPA, indicando uma reversão do déficit cognitivo e comportamentos do tipo depressivo e ansioso, resultantes da lesão com a 6-OHDA. No entanto, não foram observadas alterações comportamentais nos ratos não lesionados. Além disto, o extrato apresentou um bom desempenho frente ao modelo de captura de radicais livres ABTS•+, indicando a sua atividade antioxidante. Não foram observadas diferenças entre os grupos nas concentrações de GSH e na atividade da catalase, tanto no plasma como no estriado. No entanto, alterações hematológicas foram identificadas nos animais lesionados. Conclui-se, portanto, que o tratamento com o EHPA reverteu os prejuízos cognitivos, efeito tipo ansioso e tipo depressivo causados pela infusão intracerebral de 6-OHDA, um modelo animal de DP. / Parkinson’s disease (PD) is a chronic and neurodegenerative disease with an unknown etiology. Studies have shown that oxidative processes may be involved in this neuronal death. Thus, studies have been focused on medicinal plants and substances with antioxidant properties that may inhibit such oxidative processes. Passiflora alata is a Brazilian native plant with an antioxidant and neuroprotective activity, described on literature. In addition, there is evidences that species of the genus Passiflora can act against neurodegenerative diseases, such as PD. Hence, the aim of present investigation was to evaluate the neuroprotective effect of ethanolic extract of Passiflora alata (EEPA) in an animal model of PD, induced by the neurotoxin 6-Hydroxidopamine (6-OHDA). The extract of P. alata’s leaves was prepared by extraction with ethanolic solution (95%), and characterized by its phenolic compounds, flavonoids and the scavenger activity against DPPH• and ABTS•+ radicals. To evaluate the effect per se of EEPA, an evaluation of the behavioral effect was carried out on non-injured animals, with different doses of the extract. For the identification of the possible neuroprotective effect of the plant, male Wistar rats were used, which were separated into 5 experimental groups: SHAM (false-operated), 6-OHDA control, 6-OHDA + 100mg/kg/day of EEPA, 6-OHDA + 200mg/kg/day of EEPA and 6-OHDA + 300mg/kg/day of EEPA. After the division of these groups, the animals were submited to the stereotaxic surgery for bilateral administration of 6-OHDA neurotoxin or saline solution (SHAM) in the medial forebrain bundle. On following day, the treatment with the extracts started and continued for 14 days. After the treatment was finished, all the animals were submitted to the following behavioral tests: Social recognition, Open field, Object recognition, Elevated plus maze and Forced swimming. The non-injured animals, the same treatment protocol and tests were followed. Subsequently, the animals were sacrificed and blood and brain (striatum) were collected for the determination of GSH, catalase, hematological and biochemical parameters. The present results demonstrate a neuroprotective effect resulting from treatment with the EEPA on rats with 6-OHDA injury, indicating a reversal of cognitive deficit and depressive and anxious behaviors. However, no behavioral effects were observed in the non-injured rats. In addition, the extract exhibited a good scavenger activity against the ABTS•+ radical, indicating its antioxidant activity. No differences were observed between groups on GSH concentrations and catalase activity, on blood and striatal tissue. However, hematological changes were identified in the injured animals. In conclusion, the treatment with EEPA reversed the cognitive, anxious and depressive impairments caused by the intracerebral infusion of 6-OHDA, an animal model of PD.

Um dos veículos de grande utilização para ativos cosméticos são os sistemas emulsionados, que são constituídos de duas fases líquidas imiscíveis e agentes tensoativos, obtidos por diferentes metodologias de emulsificação. Devido à sua excelente capacidade de solubilizar compostos hidrofílicos e lipofílicos a importância comercial e científica das emulsões entre os diversos sistemas coloidais é inquestionável. O delineamento desses sistemas exige conhecimento dos principais fatores que influenciam sua formação, propriedades físico-químicas e, consequentemente, estabilidade e performance. O uso de óleos vegetais na iensdpúésctrieias vfaergmeataciês uotliecaa gien ocsoassm, péotidcae mtoosrn cai-taser oc baadrau (vDeizp temryaxis a laattraa tVivoog. .)D, neanttirvea daos Bioma Cerrado e cujas sementes contêm um óleo com alto grau de insaturação cseonntdeor qousa nátcididaodse sg rsaixgonsif icoalenitceos teo cloinfoelreóiicso e ofsit oceosntesrtóituisi,n treesp rmesaejonrtaitánrdioos i,m aploérmta ndtee fonte de agentes capazes de atuar no combate aos processos oxidativos diretamente ligados ao envelhecimento e às doenças degenerativas. O objetivo duteilsiztaa npdeos cqoumisao ffaosi eo o ldeeossean ovo ólvleimoe enxtotr aeíd oc adraasc tesreimzaeçnãtoe s ddee sbisatreum (aDs. adliastpae).r sAoss etapas envolvidas no desenvolvimento dos sistemas estão listadas a seguir: 1) Obtenção e caracterização da matéria prima vegetal (óleo); 2) Desenvolvimento das fboarrmu u(lDaç. õaelas:t ae);s teusdtou ddoo dEaq culialísbsrieo dHeid treónfisloo aLtiivpoósfi;l oc o(EnHstLru) çrãeoq udeor iddoia gpraarma ao tóelrenoá rdioe; coabrtaidcotes;r iz3a) çEãnos afíiosisc oin-q vuiítmroi:c aA vea liaeçsãtuod doas s dme uedsatnaçbailsid easdteru tduoras iss mistiecrmoascsó pdiicsapse rdsooss sistemas dispersos mediante simulação da evaporação do produto final após aplicação na pele; estudo do efeito dos sistemas dispersos na dinâmica da membrana de estrato córneo por Ressonância Paramagnética Eletrônica. Os resultados encontrados sugerem que os sistemas dispersos desenvolvidos são potenciais alternativas na liberação de fármacos ou ativos cosméticos ou ainda, podem ser considerados produtos finais de interesse para recuperação da camada lipídica da pele. O uso de metodologia de emulsificação com baixo gasto de energia (emulsificação por inversão de fases) permitiu a obtenção de dois sistemas emulsionados estáveis: um com presença de fase gel lamelar e outro com partículas de tamanho nanométrico. O estudo das propriedades físico-químicas das formulações mostrou inexistência de quaisquer sinais de instabilidade das formulações durante o período de armazenamento em condições de temperatura específicas. A utilização de espectroscopia de Ressonância Paramagnética Eletrônica (RPE) forneceu informações acerca da dinâmica molecular do estrato córneo frente a aplicação do óleo e das formulações, demonstrando o potencial dos mesmos em atuar como veículos de fármacos ou ativos cosméticos visto que os espectros obtidos revelaram diferenças significativas na fluidez dos lipídios do estrato córneo, principal barreira na permeação cutânea. / The commercial and scientific importance of emulsions among the colloidal systems is unquestionable. These systems consist of two immiscible phases that could be obtained by different methods of emulsification. Emulsions have excellent ability to solubilize hydrophilic and lipophilic compounds, so, are widely used as vehicules for drugs and cosmetics. The rational design of these systems requires studies of the main factors that influence their formation, physicochemical properties and, consequently, stability and performance. Nowadays, the use of vegetable oils in the pharmaceutical and cosmetic industries becomes attractive. Dipteryx alata Vog is an oleaginous plant specie native to Cerrado. The seeds of this specie contain an oil with a high degree of unsaturation (oleic and linoleic fatty acids are the major constituents) and significant amounts of tocopherols and phytosterols, representing an important source of agents capable of acting to combat the oxidative processes directly related to aging and degenerative diseases. The objective of this research was the development and characterization of dispersed systems using the oil extracted from the seeds of D. alata (baru). The steps involved in the development of the systems were: 1) Preparation and characterization of vegetable raw material (oil); 2) Development of formulations: Study of Hydrophilic and Lipophilic Balance (HLB) required for baru oil; study of surfactant class; Construction of the ternary diagram; physicochemical characterization and stability studies of dispersed systems obtained; 3) In vitro assays: Evaluation of microscopic structural change of dispersed systems by simulating the evaporation of the final product after application on the skin; study of the effect of dispersed systems in the dynamics of the stratum corneum membrane by Electron Paramagnetic Resonance. The use of low energy emulsification method allowed the development of two stable emulsions: one with presence of lamellar gel phase and another with nanometric size particles. The study of physicochemical properties of the formulations showed absence of any signs of instability of the formulations during the storage period. The use of Electron Paramagnetic Resonance (EPR) spectroscopy provide information about the molecular dynamics of the stratum corneum facing the implementation of oil and formulations, demonstrating the potential of them to act as drug or cosmetic active vehicles

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-09Bitstream added on 2014-06-13T20:11:03Z : No. of bitstreams: 1 cruz_ks_me_arafcf.pdf: 1084231 bytes, checksum: 51b3fe7285e63cfa32b590132f66f964 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O baru (Dipteryx alata Vog.), fruta nativa do Cerrado brasileiro, apresenta uma amêndoa com alto teor de proteínas, entretanto, informações sobre suas propriedades são ainda escassas. O objetivo do trabalho foi caracterizar algumas das propriedades físico-químicas da proteína dessa semente. Percentuais de 74,13; 81,56 e 76,50 de proteínas foram solubilizadas frente às diferentes proporções massa:volume 1:10, 1:30 e 1:50, respectivamente. Em relação aos tempos 30, 60 e 90 minutos de extração solubilizaram-se 78,59, 80,45 e 73,74% das proteínas totais, respectivamente. Frente às modificações de pH e concentração de NaCl, verificouse um comportamento típico da predominância de globulinas, caracterizado por máxima solubilidade em pHs 2,0 (87,9%) e acima de 8,0 (89,87%) e mínima solubilidade (8,5%) em pH 4,5, em água, e aumento junto ao ponto isoelétrico associado a crescente concentração salina no meio extrator. O fracionamento pelo critério de solubilidade em diferentes sistemas revelou teores de 13,97% de albuminas; 61,74% de globulinas, 0,48% de prolaminas, 3,25% de glutelinas e 4,61% de proteínas insolúveis. A digestibilidade in vitro, determinada pela sequência enzimática pepsina-pancreatina, mostrou 85,59% e 90,54% de hidrólise em relação à caseína para a farinha desengordurada e a globulina total da amêndoa, respectivamente. A proteólise da globulina majoritária obtida em Sephadex G-200, pelas enzimas tripisina, quimotripsina e pepsina, separadamente, mostrou percentuais de hidrólise, em relação à caseína, de 62,38, 17,92 e 71,38, respectivamente, após 120 minutos de incubação, sendo o progresso das proteólises acompanhados em SDS-PAGE. O perfil cromatográfico em colunas de filtração em gel mostrou a existência de uma forma protéica majoritária na fração globulina total que, em coluna de troca-iônica de DEAE-celulose, foi eluída... / The Baru (Dipteryx alata Vog.), a fruit native to the Brazilian Cerrado, has a seed with a high protein content, however, informations about its properties remain scarce. The aim of this study was to characterize some of the physicochemical properties of this seed protein. Protein percentage of 74.13, 81.56 and 76.50 were solubilized using the mass:volume ratios 1:10, 1:30 and 1:50, respectively. During the extraction times 30, 60 and 90 minutes were solubilized 78.59, 80.45 and 73.74% of total proteins, respectively. Changes in pH and salt concentration reveled a typical behavior of gobulin predominance, characterized by greater solubility at pH 2.0 (87.9%) and above 8.0 (89.87%) and lower solubility (8.5%) at pH 4.5 in water, and solubility improvement near the isoelectric pH by increasing salt concentration in the extractant. Fractionation according to protein solubility in different solvents showed 13.97, 61.74, 0.48, 3.25 and 4.61 percent of albumin, globulin, prolamin, glutelin and insoluble protein, respectively. The in vitro digestibility determined by pepsin-pancreatin enzimatic sequence showed 85.59% and 90.54% of hydrolysis, in relation to casein, for the defatted flour and total globulin from baru seed, respectively. After 120 minutes of incubation, proteolysis of the major globulin obtained from Sephadex G-200 by tripsin, chymotrypsin and pepsin, separately, showed hydrolysis porcentages, in relation to casein, of 62.38, 17.92 and 71.38, respectively, and the progress of these proteolysis was monitored by SDS-PAGE. The chromatographic profile in gel filtration columns reveled the existence of one major protein form in total globulin, which was eluted off the DEAE-celulose ionexchange column at 0.12 M NaCl concentration. The molecular weight (MW) of globulin was estimated at 405-436 kDa and its electrophoretic profile showed three main bands of MW 62-64, 66 and 73-76 kDa, and... (Complete abstract click electronic access below)

Passiflora alata Curtis (PASSIFLORACEAE) é utilizada como tranqüilizante, seja popularmente ou pela indústria farmacêutica na produção de fitoterápicos. O objetivo desse trabalho foi avaliar, em camundongos, a atividade geral sobre o Sistema Nervoso Central e o efeito ansiolítico de um extrato hidroetanólico (70%) (EXT) e de duas frações enriquecidas (fração de saponinas - SAP e fração de flavonóides - FLA) obtidos das folhas de P. alata e, também, investigar o envolvimento do complexo receptor GABAA nos efeitos observados. O extrato e as frações foram administrados agudamente, pela via oral, e avaliados nos seguintes modelos: labirinto em cruz elevado, tempo de sono barbitúrico, avaliação da atividade locomotora espontânea, avaliação da coordenação motora em aparelho rota-rod e proteção às convulsões induzidas por pentilenotetrazol. FLA 300 mg/kg e SAP 600 e 900 mg/kg provocaram um efeito do tipo ansiolítico no labirinto em cruz elevado. FLA (CI50= 181,2 μg/mL) e SAP (CI50= 23,4 μg/mL) deslocaram a ligação específica de [3H]-TBOB em membranas sinaptossomais de córtex de ratos adicionadas de GABA (0,3 μM), indicando uma modulação positiva do canal de cloreto ativado por GABA, porém esse efeito não é mediado pelo sítio benzodiazepínico uma vez que ambas as frações não deslocaram a ligação de [3H]-flunitrazepam em concentrações até 300 μg/mL. O extrato hidroetanólico (EXT) provocou efeitodo tipo ansiolítico (300 mg/kg) no labirinto em cruz elevado, o qual foi bloqueado pela administração de flumazenil (6 mg/kg, i.p.). Porém, esse extrato em concentrações até 1000 μg/mL não deslocou a ligação de [3H]-flunitrazepam, indicando que o efeito ansiolítico é mediado pelo sítio benzodiazepínico mas não pela interação direta das substâncias presentes no extrato com este sítio. Na dose de 600 mg/kg não foi observado efeito ansiolítico para o extrato, porém foi verificada uma redução da atividade motora dos animais, indicando um efeito sedativo. EXT 300 e 600 e FLA 300 prolongaram o tempo de sono barbitúrico e SAP (300-900 mg/kg) não apresentou efeito neste teste. Os dados obtidos demonstraram que P. alata apresentou efeito hipnótico-sedativo e ansiolítico em camundongos, os quais parecem ser mediados pela ativação do complexo receptor benzodiazepínico/GABAA e podem estar relacionados com a presença de flavonóides e saponinas. / Passiflora alata Curtis (PASSIFLORACEAE) is used in folk medicine and also by pharmaceutical industry, as raw material in phytotherapy, due its tranquilizing properties. The aims of this work were to evaluate, in mice, the central nervous system general activity and the anxiolytic effect of a hydroethanolic extract (70%) (EXT) and two enriched fractions (saponin fraction – SAP – and flavonoid fraction – FLA), obtained from leaves of P. alata and, also, to investigate the GABAA receptor complex involvement on the observed effects. The extract and the fractions were administrated acutely, by oral route, and evaluated on elevated plus maze, barbiturate sleeping time, locomotor activity, rota-rod, and pentilenotetrazole-induced seizures tests. FLA 300 mg/kg and SAP 300 and 900 mg/kg produced an anxiolyticlike effect on elevated plus maze test. FLA (IC50=181,2 μg/mL) and SAP (IC50=23,4 μg/mL) inhibited the [3H]-TBOB binding to rat cerebral sinaptosomal membranes added of GABA (0,3 μM), which is an indicative of a positive modulation of the chloride channel activated by GABA, but this effect is not mediated by the benzodiazepine binding site, once these fractions in concentrations up to 300 μg/mL did not displaced the [3H]-flunitrazepam. The hidroethanolic extract (EXT) showed anxiolytic-like effect (300 mg/kg) on elevated plus maze test which was prevented by flumazenil (6 mg/kg, i.p.). However, in concentrations up to 1000 μg/mL this extract showed no potency in displacing the [3H]-flunitrazepam binding, indicating that the anxiolytic-like effect is mediated by activation of benzodiazepine binding site, but not by a direct interaction of the compounds presented in this extract at this site. At 600 mg/kg this extract did not show anxiolytic effect but it decreased the motor activity, pointing to a sedative effect. EXT 300 and 600 mg/kg and FLA 300 mg/kg increased the barbiturate sleeping time while SAP (300-900 mg/kg) presented no effects in this test. Taken account of these results, P. alata presented anxiolytic and hypnoticsedative effects in mice. These effects may be mediated by the activation of benzodiazepine/GABAergic complex, and can be related to the presence of both flavonoids and saponins.

Passiflora alata Curtis (PASSIFLORACEAE) é utilizada como tranqüilizante, seja popularmente ou pela indústria farmacêutica na produção de fitoterápicos. O objetivo desse trabalho foi avaliar, em camundongos, a atividade geral sobre o Sistema Nervoso Central e o efeito ansiolítico de um extrato hidroetanólico (70%) (EXT) e de duas frações enriquecidas (fração de saponinas - SAP e fração de flavonóides - FLA) obtidos das folhas de P. alata e, também, investigar o envolvimento do complexo receptor GABAA nos efeitos observados. O extrato e as frações foram administrados agudamente, pela via oral, e avaliados nos seguintes modelos: labirinto em cruz elevado, tempo de sono barbitúrico, avaliação da atividade locomotora espontânea, avaliação da coordenação motora em aparelho rota-rod e proteção às convulsões induzidas por pentilenotetrazol. FLA 300 mg/kg e SAP 600 e 900 mg/kg provocaram um efeito do tipo ansiolítico no labirinto em cruz elevado. FLA (CI50= 181,2 μg/mL) e SAP (CI50= 23,4 μg/mL) deslocaram a ligação específica de [3H]-TBOB em membranas sinaptossomais de córtex de ratos adicionadas de GABA (0,3 μM), indicando uma modulação positiva do canal de cloreto ativado por GABA, porém esse efeito não é mediado pelo sítio benzodiazepínico uma vez que ambas as frações não deslocaram a ligação de [3H]-flunitrazepam em concentrações até 300 μg/mL. O extrato hidroetanólico (EXT) provocou efeitodo tipo ansiolítico (300 mg/kg) no labirinto em cruz elevado, o qual foi bloqueado pela administração de flumazenil (6 mg/kg, i.p.). Porém, esse extrato em concentrações até 1000 μg/mL não deslocou a ligação de [3H]-flunitrazepam, indicando que o efeito ansiolítico é mediado pelo sítio benzodiazepínico mas não pela interação direta das substâncias presentes no extrato com este sítio. Na dose de 600 mg/kg não foi observado efeito ansiolítico para o extrato, porém foi verificada uma redução da atividade motora dos animais, indicando um efeito sedativo. EXT 300 e 600 e FLA 300 prolongaram o tempo de sono barbitúrico e SAP (300-900 mg/kg) não apresentou efeito neste teste. Os dados obtidos demonstraram que P. alata apresentou efeito hipnótico-sedativo e ansiolítico em camundongos, os quais parecem ser mediados pela ativação do complexo receptor benzodiazepínico/GABAA e podem estar relacionados com a presença de flavonóides e saponinas. / Passiflora alata Curtis (PASSIFLORACEAE) is used in folk medicine and also by pharmaceutical industry, as raw material in phytotherapy, due its tranquilizing properties. The aims of this work were to evaluate, in mice, the central nervous system general activity and the anxiolytic effect of a hydroethanolic extract (70%) (EXT) and two enriched fractions (saponin fraction – SAP – and flavonoid fraction – FLA), obtained from leaves of P. alata and, also, to investigate the GABAA receptor complex involvement on the observed effects. The extract and the fractions were administrated acutely, by oral route, and evaluated on elevated plus maze, barbiturate sleeping time, locomotor activity, rota-rod, and pentilenotetrazole-induced seizures tests. FLA 300 mg/kg and SAP 300 and 900 mg/kg produced an anxiolyticlike effect on elevated plus maze test. FLA (IC50=181,2 μg/mL) and SAP (IC50=23,4 μg/mL) inhibited the [3H]-TBOB binding to rat cerebral sinaptosomal membranes added of GABA (0,3 μM), which is an indicative of a positive modulation of the chloride channel activated by GABA, but this effect is not mediated by the benzodiazepine binding site, once these fractions in concentrations up to 300 μg/mL did not displaced the [3H]-flunitrazepam. The hidroethanolic extract (EXT) showed anxiolytic-like effect (300 mg/kg) on elevated plus maze test which was prevented by flumazenil (6 mg/kg, i.p.). However, in concentrations up to 1000 μg/mL this extract showed no potency in displacing the [3H]-flunitrazepam binding, indicating that the anxiolytic-like effect is mediated by activation of benzodiazepine binding site, but not by a direct interaction of the compounds presented in this extract at this site. At 600 mg/kg this extract did not show anxiolytic effect but it decreased the motor activity, pointing to a sedative effect. EXT 300 and 600 mg/kg and FLA 300 mg/kg increased the barbiturate sleeping time while SAP (300-900 mg/kg) presented no effects in this test. Taken account of these results, P. alata presented anxiolytic and hypnoticsedative effects in mice. These effects may be mediated by the activation of benzodiazepine/GABAergic complex, and can be related to the presence of both flavonoids and saponins.

Uma das espécies que atualmente vem despertando interesse econômico por seu elevado valor de mercado é o maracuzajeiro doce (Passiflora alata Curtis). Entretanto, a cultura é afetada por diferentes doenças que prejudicam a produtividade e a qualidade dos frutos, sendo a doença causada pelo Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV) a que mais afeta a cultura do maracujazeiro no Brasil. O presente trabalho teve como objetivo a obtenção de plantas transgênicas de P. alata visando resistência ao CABMV. O processo de transformação genética utilizado foi via Agrobacterium tumefaciens, estirpe EHA105, contendo o cassete de expressão com um fragmento do gene da proteína capsidial do CABMV, numa construção tipo hairpin e o gene de seleção nptII que confere resistência ao antibiótico canamicina. Para os experimentos de transformação genética foram utilizados como explantes segmentos de hipocótilo e segmentos internodais. Após 2 a 3 dias de co-cultivo em meio de cultura MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962) contendo acetosseringona (100 mM), os explantes foram transferidos para meio de cultura de seleção e regeneração constituído de sais minerais e vitaminas de MS, suplementado com benzilaminopurina (BAP - 1mg/L) + thidiazuron (TDZ - 0,5 mg/L) + canamicina (100 mg/L) + cefotaxima (500 mg/L) + nitrato de prata (4,0 mg/L), pH 5,8. Após 4 a 6 semanas de incubação, determinou-se o número de explantes responsivos e as gemas adventícias desenvolvidas foram transferidas para meio de cultura de alongamento MSM + GA3 (1,0 mg/L) + cefotaxima (500 mg/L) + nitrato de prata (4,0 mg/L). As plantas desenvolvidas foram aclimatizadas e analisadas por PCR, utilizando primers específicos para a detecção do fragmento do gene da proteína capsidial do CABMV e do gene de seleção (nptII). Foram identificadas 47 plantas transgênicas PCR positivas para do gene nptII. Até o momento, a integração do gene nptII foi confirmada por Southern blot em 9 plantas / One species that is currently attracting interest due to its high economic value is the sweet passionflower (Passiflora alata Curtis). However, the culture is affected by different diseases that harm the productivity and fruit quality. The disease caused by Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV) is the one that more affect the culture of passionflower in Brazil. This work aimed to obtain transgenic plants of P. alata resistant to the CABMV. The genetic transformation process was via Agrobacterium tumefaciens, strain EHA105, containing the expression cassette with a fragment of the coat protein gene of CABMV, in a hairpin construct and the selection gene nptII, which confers resistance to the antibiotic kanamycin. In the experiments of genetic transformation hypocotyl segments and internodal segments were used as explants. After 2-3 days of co-cultivation in MS medium (MURASHIGE; SKOOG, 1962) containing acetosyringone (100 mM), the explants were transferred to the selection and regeneration culture medium consisting of mineral salts and vitamins of MS medium supplemented with benzylaminopurine (BAP - 1 mg/L) + thidiazuron (TDZ - 0.5 mg/L) + kanamycin (100 mg/L) + cefotaxime (500 mg/L) + silver nitrate (4.0 mg /L), pH 5.8. After 4-6 weeks of incubation, it was determined the number of responsive explants. Shoots developed were transferred to elongating culture medium MSM + GA3 (1.0 mg/L) + cefotaxime (500 mg/L) + nitrate silver (4.0 mg/L). The developed plants were acclimatized and analyzed by PCR using specific primers to detect the fragment of CABMV and the selection gene (nptII). It was identified 47 transgenic plants PCR positive for the gene nptII. Until this moment, the integration of the nptII gene was confirmed by Southern blot in 9 plants

Passiflora alata Curtis (PASSIFLORACEAE) é utilizada como tranqüilizante, seja popularmente ou pela indústria farmacêutica na produção de fitoterápicos. O objetivo desse trabalho foi avaliar, em camundongos, a atividade geral sobre o Sistema Nervoso Central e o efeito ansiolítico de um extrato hidroetanólico (70%) (EXT) e de duas frações enriquecidas (fração de saponinas - SAP e fração de flavonóides - FLA) obtidos das folhas de P. alata e, também, investigar o envolvimento do complexo receptor GABAA nos efeitos observados. O extrato e as frações foram administrados agudamente, pela via oral, e avaliados nos seguintes modelos: labirinto em cruz elevado, tempo de sono barbitúrico, avaliação da atividade locomotora espontânea, avaliação da coordenação motora em aparelho rota-rod e proteção às convulsões induzidas por pentilenotetrazol. FLA 300 mg/kg e SAP 600 e 900 mg/kg provocaram um efeito do tipo ansiolítico no labirinto em cruz elevado. FLA (CI50= 181,2 μg/mL) e SAP (CI50= 23,4 μg/mL) deslocaram a ligação específica de [3H]-TBOB em membranas sinaptossomais de córtex de ratos adicionadas de GABA (0,3 μM), indicando uma modulação positiva do canal de cloreto ativado por GABA, porém esse efeito não é mediado pelo sítio benzodiazepínico uma vez que ambas as frações não deslocaram a ligação de [3H]-flunitrazepam em concentrações até 300 μg/mL. O extrato hidroetanólico (EXT) provocou efeitodo tipo ansiolítico (300 mg/kg) no labirinto em cruz elevado, o qual foi bloqueado pela administração de flumazenil (6 mg/kg, i.p.). Porém, esse extrato em concentrações até 1000 μg/mL não deslocou a ligação de [3H]-flunitrazepam, indicando que o efeito ansiolítico é mediado pelo sítio benzodiazepínico mas não pela interação direta das substâncias presentes no extrato com este sítio. Na dose de 600 mg/kg não foi observado efeito ansiolítico para o extrato, porém foi verificada uma redução da atividade motora dos animais, indicando um efeito sedativo. EXT 300 e 600 e FLA 300 prolongaram o tempo de sono barbitúrico e SAP (300-900 mg/kg) não apresentou efeito neste teste. Os dados obtidos demonstraram que P. alata apresentou efeito hipnótico-sedativo e ansiolítico em camundongos, os quais parecem ser mediados pela ativação do complexo receptor benzodiazepínico/GABAA e podem estar relacionados com a presença de flavonóides e saponinas. / Passiflora alata Curtis (PASSIFLORACEAE) is used in folk medicine and also by pharmaceutical industry, as raw material in phytotherapy, due its tranquilizing properties. The aims of this work were to evaluate, in mice, the central nervous system general activity and the anxiolytic effect of a hydroethanolic extract (70%) (EXT) and two enriched fractions (saponin fraction – SAP – and flavonoid fraction – FLA), obtained from leaves of P. alata and, also, to investigate the GABAA receptor complex involvement on the observed effects. The extract and the fractions were administrated acutely, by oral route, and evaluated on elevated plus maze, barbiturate sleeping time, locomotor activity, rota-rod, and pentilenotetrazole-induced seizures tests. FLA 300 mg/kg and SAP 300 and 900 mg/kg produced an anxiolyticlike effect on elevated plus maze test. FLA (IC50=181,2 μg/mL) and SAP (IC50=23,4 μg/mL) inhibited the [3H]-TBOB binding to rat cerebral sinaptosomal membranes added of GABA (0,3 μM), which is an indicative of a positive modulation of the chloride channel activated by GABA, but this effect is not mediated by the benzodiazepine binding site, once these fractions in concentrations up to 300 μg/mL did not displaced the [3H]-flunitrazepam. The hidroethanolic extract (EXT) showed anxiolytic-like effect (300 mg/kg) on elevated plus maze test which was prevented by flumazenil (6 mg/kg, i.p.). However, in concentrations up to 1000 μg/mL this extract showed no potency in displacing the [3H]-flunitrazepam binding, indicating that the anxiolytic-like effect is mediated by activation of benzodiazepine binding site, but not by a direct interaction of the compounds presented in this extract at this site. At 600 mg/kg this extract did not show anxiolytic effect but it decreased the motor activity, pointing to a sedative effect. EXT 300 and 600 mg/kg and FLA 300 mg/kg increased the barbiturate sleeping time while SAP (300-900 mg/kg) presented no effects in this test. Taken account of these results, P. alata presented anxiolytic and hypnoticsedative effects in mice. These effects may be mediated by the activation of benzodiazepine/GABAergic complex, and can be related to the presence of both flavonoids and saponins.

Made available in DSpace on 2016-12-23T14:37:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Allan Rocha de Freitas.pdf: 797985 bytes, checksum: 982269ce1959fa32c291d7c11d31b3b7 (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / The species Passiflora alata is considered a vine native from South America and has occurred in all regions of Brasil. It has great economic importance due to its acceptance and market consumption. The study aimed to evaluate the emergence and development of sweet passion fruit in a fertilized soil with sewage sludge treated in different shading levels. The experiment was conducted at the Centre for Agrarian Sciences, Federal University of Espírito Santo (CCA-UFES) and at the crountryside of the Braunstone Bridge, district of Rive, both in the municipality of Alegre-ES. Were used mature seeds of Passiflora alata Curtis fruits collected from orchards in the municipality of Alegre-ES. The soils used in the first stage of labor were Oxisol and Typic, treated or not with sewage sludge and subjected to different light regimes. The evaluation experiment was done by percentage and emergence rate index according to Maguire (1962) and analysis of root growth and shoot. In a second step, part of the seedlings was taken to the field and planted in pits containing pure soil, soil + sludge and soil + lime and two light levels. We evaluated the development of plants through the following variables: length of main stem (cm), number of leaves, number of shoots, number and length of tendril (mm) and diameter (mm). In flowering stage, were evaluated the anthesis and the number of flowers every two days in the period of 69 days. After anthesis, we measured the development of fruit during 90 days. As of 630 days after sowing were determined levels of photosynthetic pigments. The application of sewage sludge increases the nutrient content of the soil. The seeds of sweet passion fruit have a higher percentage of emergency and highest speed rate of emergence when exposed to full sun. The sweet passion fruit plants are more physiological development in soils treated with sewage sludge and under conditions of full sun. The fruits have progressive development under conditions of full sun or shade. / A espécie Passiflora alata é uma trepadeira considerada nativa da América do Sul e tem ocorrência em todas as regiões do Brasil. Apresenta grande importância econômica devido a sua aceitação e consumo no mercado. O estudo teve como objetivo avaliar a emergência e o desenvolvimento de maracujazeiro doce, em solo fertilizado com lodo de esgoto tratado em diferentes níveis de sombreamento. O experimento foi conduzido no Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Espírito Santo (CCA-UFES) e na propriedade rural Ponte da Braúna, distrito de Rive, ambos no Município de Alegre-ES. Foram utilizadas sementes de Passiflora alata Curtis de frutos maduros coletados em pomares no município de Alegre-ES. Os solos utilizados na primeira etapa do trabalho foram Latossolo Vermelho e Latossolo Amarelo, tratados ou não com lodo de esgoto e submetidos a diferentes regimes de luz. A avaliação do experimento foi feita através da porcentagem e do índice de velocidade de emergência de acordo com Maguire (1962) e análise de crescimento radicular e da parte aérea. Em uma segunda etapa, parte das mudas foi levada ao campo e plantada em covas contendo solo puro, solo + lodo e solo + lodo + calcário e dois níveis de luz. Avaliou-se o desenvolvimento das plantas através das seguintes variáveis: comprimento da haste principal (cm), número de folhas, número de brotações, número e comprimento de gavinhas (mm) e diâmetro do coleto (mm). Na fase de floração, foram avaliadas a antese e o número de flores a cada dois dias no período de 69 dias. Após a antese, foi avaliado o desenvolvimento dos frutos durante o período de 90 dias. A partir de 630 dias após a semeadura determinaram-se os teores dos pigmentos fotossintéticos. A aplicação do lodo de esgoto eleva os teores de nutrientes do solo. As sementes de maracujazeiro doce apresentam maior porcentagem de emergência e maior índice de velocidade de emergência quando expostas ao sol pleno. As plantas de maracujazeiro doce apresentam maior desenvolvimento fisiológico em solos tratados com lodo de esgoto e sob condições de sol pleno. Os frutos apresentam desenvolvimento progressivo sob condições de sol pleno e de sombreamento

Orientador: Marilia de Moraes Castro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-16T08:54:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardoso_PolianaRamos_M.pdf: 9377524 bytes, checksum: 3ae09511f3adb4c573d5459c04c08e1a (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Esta tese tem como principal objetivo contribuir para o conhecimento morfológico das glândulas dos órgãos vegetativos aéreos de Passiflora alata Curtis e P. edulis Sims e localização dos compostos bioativos responsáveis pela reconhecida importância farmacológica apresentada por estas espécies. Técnicas em microscopias fotônica e eletrônica de varredura são utilizadas na observação da morfologia das glândulas, visualização dos compostos fenólicos presentes no interior destas estruturas e exame da micromorfologia dos cristais; a espectrometria por energia dispersiva de raios-x é empregada na identificação dos átomos constituintes dos cristais. Testes histoquímicos convencionais e de fluorescência são aplicados nas glândulas para a caracterização in situ do exsudato; estes procedimentos são acoplados à análise do exsudato em espectrometria de massas (MS). Os principais pontos abordados na tese são: a validação das glândulas presentes nos pecíolos e lâminas foliares de ambas as espécies como nectários extraflorais (NEF); identificação das glândulas estipulares de P. alata como coléteres; a localização de alcalóides e flavonóides no interior dos idioblastos dispersos nos tecidos vasculares, majoritariamente no floema, do caule e da folha destas espécies. A morfologia, coloração e variação no número de NEF peciolares de P. alata indicam que estas glândulas atuam como egg mimics, estruturas miméticas de ovos de borboletas Heliconiini - principal consumidor de espécies de Passiflora - que previnem a oviposição destes insetos. Ainda, estas glândulas apresentam idioblastos dispersos no parênquima cujo conteúdo é composto por terpenos e, neste contexto, a morfologia crateriforme pode propiciar um microambiente de contenção de voláteis nos NEF peciolares de P. alata. A análise dos cristais presentes no parênquima nectarífero dos NEF peciolares de ambas as espécies identificou cristais do tipo agregado cristalífero, cuja composição é de oxalato de cálcio, e areia cristalífera, constituída por átomos de ferro, em P. alata e drusas de oxalato de cálcio em P. edulis. O registro de ferro armazenado fora do cloroplasto é inédito. A análise química qualitativa do exsudato proveniente dos NEF peciolares e laminares de ambas as espécies evidenciou açúcares e, em menor concentração relativa, flavonóides e alcalóides - exceto nos NEF peciolares de P. alata. A detecção de diferentes tipos de açúcares no exsudato das glândulas estipulares de P. alata corrobora sua identificação como coléteres. Em ambas as espécies, a localização dos idioblastos dispersos nos tecidos vasculares contendo alcalóides e flavonóides sugere uma translocação destes compostos pelos elementos de tubo crivado para diferentes órgãos e acúmulo nos idioblastos. A técnica usada para estimar a atividade antioxidante de compostos in vitro com o uso do reagente DPPH foi adaptada para a observação in situ desta reação, evidenciando esta atividade nos idioblastos contendo flavonóides em ambas as espécies. Os estudos histoquímicos aliados às análises do néctar em MS sugerem uma relação entre as diferentes concentrações de alcalóides e flavonóides no interior e fora da planta, em que a alta concentração destes compostos apresenta efeito dissuasivo, comprometendo o desenvolvimento de herbívoros, enquanto a baixa concentração não acomete o crescimento dos coletores mutualistas. Este trabalho inova ao integrar técnicas distintas na caracterização das estruturas secretoras e do exsudato por elas produzido / Abstract: The purpose of the present study is to contribute to the morphological knowledge of the glands present in aerial vegetative organs of Passiflora alata Curtis e P. edulis Sims and in situ localization of bioactive compounds responsible for the recognized pharmacological importance of both species. Scanning electron and photonic microscopy techniques are applied to the observation of glands morphology, visualization of phenolic compounds into these structures and the examination of crystals micromorphology; the energy dispersive xray spectrometry is applied to identify the constituent atoms of crystals. Conventional histochemical tests and fluorescence are applied to the glands for in situ characterization of exudate; these procedures have been coupled with the analysis of exudate in mass spectrometry (MS). The main points of this research are the validation of the glands present in the petiole and leaf blade of both species as extrafloral nectaries (EFN) and of stipular glands of P. alata as colleters; the in situ localization of alkaloids and flavonoids within the idioblast scattered through the vascular tissue, mainly in the phloem, in stem and leaves of these species. The morphology, color and variation in number of petiolar ENF of P. alata indicate that these glands act as egg mimics, mimetic structures of the Heliconiini butterflies eggs - the main consumer of Passiflora species - that prevent oviposition of these insects. Nevertheless, these glands possess idioblasts that synthesize terpenes. In this context, the crateriform morphology of petiolar ENF of P. alata may provide a microenvironment for holding volatile. The analysis of crystals present in the petiolar nectariferous parenchyma of both species identified aggregate crystals, whose composition is calcium oxalate, and crystal sand, consisting of iron atoms in P. alata, and druses of calcium oxalate in P. edulis. This is the first record of iron stored outside the chloroplast. The qualitative chemical analysis of the exudate from petiolar and laminar ENF of both species detected sugar and lower concentrations of flavonoids and alkaloids - except in the petiolar ENF of P. alata. The identification of different types of sugars found in stipular glands exudate of P. alata confirms its identification as colleters. In both species, the location of idioblasts containing alkaloids and flavonoids scattered through the vascular tissue suggest a translocation of those compounds through sieve-tube members of phloem to different organs and their consequent accumulation inside the idioblasts. The technique used in order to estimate the antioxidant activity of compounds in vitro with the aid of DPPH reagent was adapted for in situ observation of this reaction, showing this activity in idioblasts synthesizing flavonoids in both species. Histochemical studies coupled with nectar analysis in MS suggest a relationship between the different concentrations of alkaloids and flavonoids inside and outside the plant, where high concentration of these compounds has a deterrent effect, endangering the development of herbivores, while low concentration does not affect the mutualistic collectors growth. This work innovates by integrating different techniques for the characterization of the secretory structures and the exudate produced by them / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Biologia Vegetal

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-05-23T15:45:38Z No. of bitstreams: 2 Tese - Gilmarcos de Carvalho Corrêa - 1999.pdf: 2739710 bytes, checksum: 8a4b2be8043e18364d31b49cc239f5ec (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-05-23T15:46:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Gilmarcos de Carvalho Corrêa - 1999.pdf: 2739710 bytes, checksum: 8a4b2be8043e18364d31b49cc239f5ec (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-23T15:46:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Gilmarcos de Carvalho Corrêa - 1999.pdf: 2739710 bytes, checksum: 8a4b2be8043e18364d31b49cc239f5ec (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 1999-03-26 / This study was carried out with 150 plants of baru (Dipteryx alata Vog.) from three regions of Goiás State. It had 50 plants per region, and it were randomizes choiced at 1995. The purpose was to verify the occurence and distribution of genetic variation among tested populations. Fruits and seeds were analysed about morphological characters. Emersion and initial development of plantas were analysed too. The experiment was planted as hierarchal model with regions level, plants within regions and fruits within plants. There was variation to all morphological characters in fruits and seeds at regions and plants within regions levels. There was no variation about plant emersion percentage and emersion velocity index (EVI). There ws variation about emersion velocity (days). Plant height and basis diameter at 30 days after emersion showed variation at regions and plants within regions levels. The most variation proportion was founded at plants within regions level with high levels of transmission to all characters. / O estudo foi conduzido com 150 plantas de baru (Dipteryx alata Vog.), 50 plantas por região, originárias de três regiões do Estado de Goiás, escolhidas, aleatoriamente, no ano de 1995. O objetivo foi verificar a ocorrência e distribuição da variabilidade genética das populações amostradas. Foram avaliados caracteres morfológicos de frutos e sementes, além de características de emergência e desenvolvimento inicial de plantas. Adotou-se, para o experimento, o modelo hierárquico com os níveis de regiões, plantas dentro de regiões e frutos dentro de plantas. Houve variação para todas as variáveis morfológicas de frutos e sementes, entre plantas de diferentes regiões, e entre plantas dentro de regiões. Não houve variação entre frutos dentro de plantas para nenhuma das variáveis avaliadas. Não houve variação entre progênies das plantas, para percentual de emergência de plantas e índice de velocidade de emergência (IVE), em qualquer dos níveis testados. As progênies apresentaram variação, entre e dentro de regiões, para velocidade de emergência em dias, e altura e diâmetro basal de plantas aos 30 dias após a emergência das mesmas. Maior proporção da variabilidade foi observada entre plantas dentro de regiões, com altos níveis de herdabilidade, no sentido amplo, para todas as variáveis estudadas.