Orientador: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Banca: Ana Maria Centola Vidal Martins / Banca: Estevam Guilherme Lux Hoppe / Banca: Paulo Sérgio Jorge / Banca: Fabio Fernando Ribeiro Manhoso / Resumo: As mudanças nos controles internacionais dos alimentos visando sua inocuidade se efetivaram com a mudança de século, tendo como base a Análise de Riscos e a Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle. Para os resíduos químicos, apesar de problema pré-existente, a situação só ganhou notoriedade a partir de 2010 com a detecção da presença de resíduos de avermectinas em produtos cárneos brasileiros exportados para os Estados Unidos e União Europeia. A partir de então, várias medidas de mitigação foram inseridas no conjunto rotineiro de autocontroles pelas empresas processadoras. Neste trabalho objetivou-se verificar a praticidade e eficácia dessas medidas para o controle efetivo dos processos, segregando animais abatidos que pudessem contribuir para níveis inaceitáveis do perigo, com base na monitoração de resíduos de avermectinas em duas matrizes amostrais, fígado e músculo de bovinos abatidos. Para a matriz músculo foram analisados 81.565 lotes de animais, com 1,41% desses ou 1.153 lotes que apresentaram resíduos de avermectinas superiores ao LMR de 10μg/kg durante os anos de 2010 e 2011. A partir de 2012 utilizou-se a matriz fígado, sendo analisadas 77.056 amostras. Dessas, 29.267 ou 37,98% apresentaram positividade para resíduos, sendo que 4.602 ou 5,97% foram superiores ao LMR de 100μg/kg. Os resultados analíticos demonstram, até agora, agravamento do problema no elo primário da produção de carne bovina brasileira / Abstract: Changes in international food controls aiming their safety occurred with the change of the century, based on the Risk Analysis and Hazard Analysis and Critical Control Points. For chemical residues, although a pre-existing problem, the situation only gained notoriety after 2010, with the presence of avermectin residues in Brazilian meat products exported to the United States and European Union. Since then, several mitigation measures were incorporated in the routine set of self-controls the processing companies.This work aimed to verify the practicality and effectiveness of these measures for effective control of processes, segregating slaughtered animals that could contribute to unacceptable levels of risk, based on monitoring of avermectins residues in two sample matrices, liver and muscle of cattle slaughtered. For the muscle matrix were analyzed 81,565 batches of animals, with 1,153 or 1.41% batches whose residues were above the avermectin MRL (Maximum Residue Level) of 10μg/kg during the years 2010 and 2011. from 2012 was used the liver matrix , with 77,056 samples being analyzed. Of these, 29,267 or 37.98% were positive for residues, with 4,602 or 5.97% above the MRL of 100μg/kg. The analytical results shown so far, the aggravation of problems at the primary link of the production chain of Brazilian beef / Doutor

Gama-decanolactona (GD) é um composto monoterpeno com estrutura semelhante às lactonas naturais, que estão presentes em diferentes espécies e são usadas como terapia farmacológica na região amazônica. GD mostrou um efeito anticonvulsivo em ambos os modelos de pentilenotetrazol (PTZ) agudo e crônico e atua como um antagonista de glutamato não-competitivo. Considerando estudos anteriores sobre atividades biológicas de GD, o presente estudo teve como objetivo explorar o seu perfil anticonvulsivante em diferentes modelos de epilepsia em camundongos e sobre parâmetros de estresse oxidativo, neuroinflamação e genotoxicidade em células microgliais N9. A atividade anticonvulsiva de GD (100 e 300 mg/kg) foi investigada em convulsões induzidas por aminofilina, isoniazida, picrotoxina, 4-aminopiridina (4-AP) e pilocarpina em camundongos machos. Os animais receberam uma administração de solução salina (SAL), GD ou diazepam (DZP 2 mg/kg), de controle positivo e após 30 min receberam os seguintes agentes convulsivos: aminofilina, isoniazida, picrotoxina, 4-AP ou pilocarpina. Os parâmetros avaliados durante 1h foram a latência para a primeira convulsão, a porcentagem de convulsões e a taxa de mortalidade. A fim de avaliar a neurotoxicidade de GD 100 e 300 mg/kg, foi realizado o teste de desempenho de rotarod. O tempo para cair do rotarod foi gravado em diferentes momentos após a administração GD. E por último foi avaliado o desempenho de GD 100 e 300 mg/kg no teste de sono induzido por DZP (17 mg/kg). Os resultados demonstraram que GD foi capaz de aumentar a latência para a primeira convulsão induzida pela aminofilina, isoniazida, 4-AP e pilocarpina, mas não para picrotoxina. No teste de rotarod, GD 300 mg/kg reduziu o tempo de latência para cair da barra após 30 min de administração, mas não após 60, 90 ou 120 min. GD 300 mg/kg aumentou a latência do sono induzido pro DZP. Os resultados acima revelaram que GD apresentou um efeito anticonvulsivo nos modelos de epilepsia utilizados neste estudo, principalmente na dose de 300 mg/kg, bem como o tempo de latência para a primeira convulsão, sugerindo que GD pode modular as vias da adenosina e afetar os canais de potássio, direta ou indiretamente. O papel de GD sobre o estresse oxidativo em status epilepticus (SE) foi investigado medindo a produção de espécies reativas de oxigênio (EROS), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), teor de nitrito, e os danos do DNA induzidos por pilocarpina no córtex cerebral de camundongos. GD foi capaz de aumentar as atividades de SOD e CAT, diminuir a produção de EROS, NO e danos no DNA durante o estabelecimento de SE no córtex cerebral. Estes dados sugerem que as enzimas SOD e CAT são o principal sistema de eliminação de radicais livres, e GD fornece neuroproteção contra o aumento do estresse oxidativo no cérebro. Um modelo clássico para investigar se uma droga atua modulando a neuroinflamação é utilizar a linhagem celular N9 (célula neuronal da microglia murina) ativada com o químico lipopolissacárideo (LPS), que sabidamente, provoca inflamação. Assim, investigou-se o efeito da GD sobre parâmetros inflamatórios e apoptóticos nesse sistema. Avaliou-se a expressão protéica por western blotting das seguintes proteínas: óxido nítrico sintetase induzível (iNOS) e fator de necrose tumoral-alpha (TNF-α), p-38 fosforilada e não fosforilada. Avaliou-se também a atividade da caspase 9-clivada e a formação de EROS por citometria de fluxo bem como o dano ao DNA pelo ensaio cometa alcalino. Nos resultados in vitro, GD atenuou a ativação de células N9 microglias, inibiu a formação de EROS intracelular e a expressão de iNOS e TNF-α induzidas por LPS nas células. Além disso, GD bloqueou a fosforilação da p38, inibiu a caspase-9 clivada e o dano ao DNA. Estes dados indicam que GD tem um potencial terapêutico neuroprotetor e que exerce os seus efeitos através da inibição da inflamação. / Gamma-decanolactone (GD) is a monoterpene compound similar to natural lactones in structure, which are present in different species and are used as remedy in the Amazonian region. GD shows an anticonvulsant effect in both the acute and chronic pentileneterazole (PTZ) models and acts as a non-competitive glutamate antagonist. Considering previous studies on biological activities of GD, the present study aimed to explore its anticonvulsant profile in different epilepsy models in mice and on oxidative stress parameters in N9 cell. The anticonvulsant activity of GD (100 and 300 mg/kg) was investigated on seizures induced by aminophylline (AMPH), isoniazid (INH), picrotoxin (PCT), 4-aminopyridine (4-AP) an pilocarpine (PIL) in male mice. The animals received one administration of saline (SAL), GD or the positive control diazepam (DZP 2 mg/kg), and after 30 min they received the following convulsant agents: AMPH, INH, PCT, 4-AP or PIL The parameters evaluated during 1h were the latency to first seizure, the occurrence of seizure and the mortality rate. In order to evaluate the neurotoxicity of GD 100 and 300 mg/kg, the rotarod performance test was performed. The time to fall of the rotarod was recorded at different times after the GD administration. The results demonstrated that GD was able to extend the latency to first seizure induced by AMPH, INH, 4-AP and PIL, but not PCT. In the rotarod test GD 300mg/kg reduced the latency to fall of the bar just at 30 min after the administration, but not at 60, 90 or 120 min. The above results revealed that GD presented an anticonvulsant effect in the epilepsy models used in this study, especially at the dosage of 300mg/kg, as well as the latency to the first seizure, suggesting that the GD could modulate the adenosine and GABA pathways and affect potassium channels directly or indirectly. The role of gamma-decanolactone (GD) on oxidative stress in pilocarpine-induced SE was investigated by measuring ROS production, superoxide dismutase and catalase activities, nitrite content, and DNA damage in the mice cerebral cortex. GD was able to increase the superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities, decreased the ROS, NO production, and DNA damage during the SE establishment in the cerebral cortex. These data suggest that the cortex use SOD and CAT enzymes as the major free-radicals scavenging system, and GD provides neuroprotection against the increase of oxidative stress in the brain. Because previous works have consistently demonstrated the N9 microglial-neuronal system for neuroinflammation investigations, these cells are considered appropriate for this kind of research. To investigate the inhibitory effect of GD on the production of ROS and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in lipopolysaccharide (LPS) - stimulated N9 murine microglial cells through the p38 MAPK signaling pathway. The results in vitro the GD attenuated the activation of N9 cells and inhibited intracellular ROS and the expression of iNOS and TNF-α induced by LPS in the cells. In addition, GD blocked the phosphorylation of p38 and inhibited cleaved caspase-9 and DNA damage. These data indicate that GD has therapeutic potential for the treatment of neurodegenerative diseases, and that it exerts its effects by inhibiting inflammation.

De acordo com a Organização Mundial de Saúde, a doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, ainda faz parte do grupo de doenças negligenciadas, uma vez que ainda são escassos os investimentos destinados às pesquisas para desenvolvimento de novas drogas, de modo que as opções terapêuticas são limitadas. Sendo assim, é evidente a necessidade de estudos com a finalidade de desenvolver novos medicamentos eficazes na quimioterapia da doença. A espécie Tithonia diversifolia, o margaridão, é uma planta considerada invasora no Brasil, sendo encontrada ao longo de rodovias e em terrenos baldios. As lactonas sesquiterpênicas (LSTs) isoladas desta planta, possuem ação anti-inflamatória e anti-parasitária, dentre outras ações farmacológicas. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade tripanocida in vitro do extrato de lavagem foliar rico em LSTs (ELF) e da tagitinina C (TC) extraídos de T. diversifolia, isolados e em combinação com benznidazol (Bz). Adicionalmente, foi avaliado o potencial dos tratamentos, em monoterapia e combinados, em relação à capacidade de induzir a cura parasitológica, prevenir ou reduzir o índice de miocardite e suas influências na resposta imune celular e humoral de animais experimentalmente infectados pela cepa Y do T.cruzi. Os resultados demonstraram que tanto o ELF quanto a TC isolada possuem atividade tripanocida in vitro, apresentando a IC50 de 0,6426 μg/mL e 0,4022 μg/mL, respectivamente. Tais resultados foram considerados promissores quando comparados à IC50 de 9,32 μg/mL do fármaco de referência Bz. Ainda foi observado que o ELF e a TC reduziram em 32% e 51%, respectivamente, o índice de infecção por amastigotas em células H9c2, enquanto o Bz inibiu 36%. Nos experimentos in vivo, foi verificado que tanto o ELF quanto a TC foram capazes de suprimir a parasitemia dos animais experimentalmente infectados pela cepa Y, sendo observada uma potencialização desta atividade quando as LSTs foram combinadas ao Bz, uma vez que o tratamento com ELF+Bz induziu a 70% de cura nos animais, o mesmo índice foi observado no tratamento com Bz em monoterapia. Já a combinação TC+Bz foi capaz de suprimir totalmente a parasitemia e os testes do critério de cura confirmaram um índice de 100% de cura entre os animais submetidos a este tratamento. Através da dosagem de citocinas, foi observado que as terapias combinadas inibiram a produção de IFN-γ e TNF-α, importantes citocinas pró-inflamatórias ligadas à lesão tecidual associada à doença de Chagas, e foi verificado também que animais submetidos aos tratamentos contendo as LSTs apresentaram maiores produções da citocina IL-10, o que sugere uma modulação da resposta imunológica induzida pela atividade anti-inflamatória das LSTs. O benefício da modulação da resposta imune também foi evidenciado pela ausência e/ou redução de miocardite nos animais que receberam o tratamento combinado com ELF+Bz e TC+Bz. De maneira geral, nossos resultados demonstram que o tratamento combinado entre TC e Bz é promissor, pois além de induzir ao índice de cura superior ao Bz em monoterapia, ainda preveniu a miocardite nos animais. Além disso, as LSTs são capazes de interferir na resposta imune do hospedeiro, podendo esta interferência estar relacionada a melhor prognóstico da doença. / According to the World Health Organization, Chagas' disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, is still part of the neglected diseases group, since investments for research into new drug development are scarce, therapeutic options are limited. Thus, the need for studies with the purpose of developing new drugs effective in the chemotherapy of the disease is evident. The Tithonia diversifolia species, daisy, is a plant considered invasive in Brazil, being found along highways and in vacant lots. The sesquiterpene lactones (STLs) isolated from this plant have anti-inflammatory and anti-parasitic action, among other pharmacological actions. In this sense, the objective of this work was to evaluate the trypanocidal activity of foliar lavage extract in STLs (ELF) and tagitinin C (TC) extracted from T. diversifolia, isolated and in combination with benznidazole (Bz). In addition, the potential of monotherapy and combined treatments in relation to the ability to induce parasitological cure, and to prevent or reduce the myocarditis index and its influences on the cellular and humoral immune response of experimentally infected animals by T.cruzi Y strain were evaluated. The results demonstrated that both the ELF and the isolated TC have trypanocidal activity in vitro, presenting the IC50 of 0.6426 μg/mL and 0.4022 μg/mL, respectively. These results were considered promising when compared to the IC50 of 9.32 μg/mL of the reference drug Bz. It was also observed that ELF and TC reduced the rate of infection by amastigotes in H9c2 cells by 32% and 51%, respectively, while Bz inhibited 36%. In the in vivo experiments, it was verified that both ELF and TC could suppress the parasitemia of the animals experimentally infected by strain Y, being observed a potentiation of this activity when the STLs were combined with Bz, once the treatment with ELF + Bz induced 70% cure in the animals, the same rate was observed in the treatment with Bz monotherapy. The TC + Bz combination could completely suppress the parasitaemia and the tests of the curing criterion confirmed a cure rate of 100% among the animals submitted to this treatment. Through dosing of cytokines has been observed that combination therapy inhibited the production of IFN-γ and TNF-α, important inflammatory cytokines related to tissue injury associated with Chagas’ disease, and was also found that animals subjected to treatments containing the STLs, presented higher IL-10 cytokine productions, suggesting a modulation of the immune response induced by the anti-inflammatory activity of the STLs. The benefit of modulation of the immune response was also evidenced by the absence and / or reduction of myocarditis in the animals receiving combined treatment with ELF + Bz and TC + Bz. In general, our results demonstrate that the combined treatment between TC and Bz is promising, since in addition to inducing the cure rate superior to Bz in monotherapy, it still prevented the myocarditis in the animals. In addition, the STLs are capable of interfering in the immune response of the host, and this interference may be related to a better prognosis of the disease. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Orientador: Rosângela da Silva de Laurentiz / Resumo: Reações multicomponentes são processos sintéticos em que se aplicam três ou mais reagentes em um sistema one-pot com formação de apenas um produto final, o qual possui em sua estrutura todos ou a maioria dos átomos de carbono pertencentes aos reagentes. Esse tipo de reação vem sendo muito explorada em síntese orgânica devido às facilidades do processo, como menor número de etapas, economia de reagentes, maiores rendimentos, menor tempo reacional (em comparação às sínteses tradicionais) e economia de energia. A utilização das reações multicomponentes tem facilitado a obtenção de compostos heterocíclicos de grande complexidade cuja estruturas seriam muito difíceis de serem obtidas por procedimentos multietapas. Desta forma, uma adaptação da reação de Hantzsch foi realizada a partir da reação entre ácido tetrônico (1), aldeído aromático (2) e aminoantraceno (3), sob aquecimento por micro-ondas, para a obtenção de lactonas dihidronaftoquinolínicas 4. Foram utilizados aldeídos aromáticos contendo grupos sacadores e doadores de elétrons que forneceram os compostos 4a-l em rendimentos variando de 67 a 96%. Lactonas naftoquinolínicas 5 foram obtidas por duas diferentes rotas sintéticas: 1) a partir da oxidação de 4 com DDQ/etanol em micro-ondas e 2) a partir do intermediário antracelidenoamino lactona 6 e aldeído aromático em TFA. Ambas as rotas forneceram os compostos 5 em excelentes rendimentos, porém a rota 1 fornece 5 como único produto, enquanto a rota 2 fornece 5 como produto m... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T20:03:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 294444.pdf: 3460878 bytes, checksum: e762b87ccc508a5ec4aef916b7a193b1 (MD5) / Nesta tese foram desenvolvidas metodologias enzimáticas para a preparação regiosseletiva de derivados acilados da D-ribono-1,4-lactona. Os produtos foram identificados e quantificados por RMN-1H, UV-Vis ou titulação volumétrica com solução aquosa de KOH. Várias lipases, uma protease e dois micélios isolados de fungos da região amazônica foram avaliados com relação à atividade e seletividade na acilação da D-ribono-1,4-lactona com uma variedade de doadores acila. Os melhores resultados foram obtidos com a de Candida antarctica (CAL-B), obtendo-se os respectivos derivados monoacilados 5-O-acetil-D-ribonolactona e 5-O-dodecanoil-D-ribonolactona com boas conversões (64-99%) e excelente regiosseletividade. Nas reações de acetilação da D-ribono-1,4-lactona catalisada pela CAL-B, foram avaliados os efeitos do solvente orgânico (acetonitrila, acetona, THF, dioxano e DMF), da quantidade de biocatalisador (0-500 mg), da quantidade (1,5 e 100 mmol) e tipo de doador acetila (acetatos de etila, vinila e de isopropenila, ácido acético e anidrido acético) e do uso simultâneo de duas lipases no meio reacional. Foram realizados estudos de reutilização da CAL-B por até 5 ciclos. Os resultados obtidos mostraram que o uso de biocatalisadores é uma metodologia simples e ambientalmente sustentável para a preparação seletiva de derivados acilados da D-ribonolactona.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-12-17T08:36:39Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 7870926 bytes, checksum: ba472de2761e9773c430c24b117bd853 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-17T08:36:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 7870926 bytes, checksum: ba472de2761e9773c430c24b117bd853 (MD5) Previous issue date: 2009-05-08 / As lactonas sesquiterpênicas pertencem a um grande grupo de produtos naturais principalmente encontradas em plantas de vários gêneros da família Asteraceae. Essas substâncias têm recebido atenção considerável devido suas atividades biológicas apresentadas, destacando-se a atividade herbicida. Portanto, a síntese, em laboratório, de derivados das lactonas sesquiterpênicas, tais como lumissantonina e mazdassantonina, tem como objetivo a descoberta de novos compostos com potencial atividade herbicida. Foram obtidos onze compostos [22- 32], dentre os quais seis são inéditos. Esses compostos foram preparados através de reação fotoquímica, halogenação, e redução. Os compostos [22] e [25-32] foram submetidos a ensaios biológicos para avaliar suas atividades sobre a germinação e o crescimento radicular de pepino (Cucumis sativus) e sorgo (Sorghum bicolor) na concentração de 5,0 x 10-4 mol L-1. Entre os compostos avaliados o que apresentou maior fitotoxicidade sobre plântulas de sorgo foi o composto [28], inibindo o crescimento radicular em 57%. Em plântulas de pepino o composto [32] apresentou maior fitotoxicidade com 58% de inibição sobre o crescimento radicular. O composto [28] quando encapsulado com o ácido p- sulfônicocalix[6]areno apresentou inibição de 81% sobre o crescimento radicular de pepino e 62% de inibição sobre o crescimento radicular de sorgo. / The sesquiterpenes lactones belongs to a large group of natural products mainly founded in plants of several species of Asteraceae. That substances have been receiving considerable attention due to their biological activities presented, emphasizing the herbicide activity. Thus, the synthesis, in laboratory, of sesquiterpenes derivatives, such as lumissantonine and mazdassantonine, has the objective of a discovery of new compounds with potential herbicide activity. Was obtained eleven compounds [22-32], among with six are unpublished. This compounds was preparated through the photochemistry reaction, halogenation and reduction. The compounds [22] e [25-32] they were submitted to biological assay to evaluate their activities on the germination and the root growth of cucumber (Cucumis sativus) and sorghum (Sorghum bicolor) in the concentration of 5,0 x 10- 4 mol.L-1. Among the evaluated compounds the compound [28] was presented larger phytotoxic on sorghum plantules, inhibiting the root growth in 58%. In cucumber plantules the compound [32] presented larger phytotoxic activity with 58% of inhibition on the root growth. The compound [28] when encapsulated with acid sulphonic calix[6]arene presents a inhibition of 81% on the growth cucumber root and 62% of inhibition on the growth sorghum root.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-04T13:17:52Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 965384 bytes, checksum: cce066996978b4b44c045fabe5b37455 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-04T13:17:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 965384 bytes, checksum: cce066996978b4b44c045fabe5b37455 (MD5) Previous issue date: 2003-07-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os produtos naturais têm sido importantes fontes para novos agroquímicos. Dessa forma, sintetizaram-se novos compostos análogos ao avenaciolídeo, um produto natural com atividade fungicida, presente em culturas de Aspergillus avenaceus. Foram sintetizados, a partir da diacetona-D-glicose, 24 compostos, sendo 18 deles inéditos. Destes, seis são hemiacetais e seis são bis-γ-lactonas, sendo os hemiacetais precursores sintéticos das bis-lactonas. A atividade fungicida de todos os compostos inéditos obtidos foi avaliada em testes in vitro, a fim de se determinar a importância da estrutura da bis-lactona, das duas carbonilas nas bis-lactonas e, ainda, da dupla ligação exocíclica das bis-γ-lactonas, identificando-se possíveis sítios ativos nas moléculas. Foi empregado como fungo-teste o Colletotrichum gloeosporioides, isolado de tecidos de fruto de mamão. Os ensaios foram realizados utilizando-se suspensões de esporos do fungo em concentrações conhecidas, e todas as substâncias foram testadas na concentração de 100 ppm. A toxicidade foi avaliada considerando-se o halo de inibição do crescimento fúngico, em comparação ao de um fungicida padrão (Benomyl). Apenas os compostos (1R,4R,5R)-4-pentil-6-metileno-3,8- dioxabiciclo[3.3.0]octano-2,7-diona dioxabiciclo[3.3.0]octano-2,7-diona [XIIa], [XIIb] (1R,4R,5R)-4-hexil-6-metileno-3,8- e (1R,4R,5R)-4-heptil-6-metileno-3,8- dioxabiciclo[3.3.0]octano-2,7-diona [XIIc] apresentaram atividade fungicida, apontando para a importância da estrutura bis-γ-lactônica com a dupla ligação exocíclica para a atividade verificada. As percentagens de inibição foram iguais a 38,7%, 40,0% e 46,0 % para os compostos [XIIa], [XIIb] e [XIIc], respectivamente, significando que houve um ligeiro aumento da atividade fungicida com o aumento da cadeia lateral. / The natural products have been important sources of new agroquimicals. From diacetone-D-glucose 24 compounds were prepared. Among them 18 are new compounds, six of them being hemiacetals and six bis-ã-lactones analogous to Avenaciolide, a natural product isolated from Aspergillus avenaceus, possessing antifungic activity. The antifungic activity of the novel compounds was tested in vitro in order to evaluate the importance of the bis-ã-lactonic structure, of the presence of the two carbonyl groups and of the exocyclic methylene group for the reported activity, identifying possible active sites in the molecules. Colletotrichum gloesporioids were isolated from papaya tissues and used for the biological testing. The essays were performed with a known concentration of the fungi and solutions of the substances at 100 ppm. The toxicity was evaluated by the measurement of the inhibition hale have relatively to a standard fungicide (Benomyl). Only the compounds (1R, 4R,5R)-4-pentyl-6-methylene-3,8-dioxabicycle[3.3.0]octan-2,7-dione [XIIa], (1R,4R,5R)-4- hexyl-6-methylene-3,8-dioxabicycle[3.3.0]octan-2,7-dione [XIIb] e (1R,4R,5R)-4-heptyl-6- methylene-3,8-dioxabicycle[3.3.0]octan-2,7-dione [XIIc] were active, indicating that the bis-ã-lactone structure containing the exocyclic double bond is essential for the observed activity. The percentagens of inhibition were 38,7%, 40,0% and 46,0 %, for compounds [XIIa], [XIIb] e [XIIc], respectively, showing a slight increase of the antifungic activity with the increase of the lateral aliphatic group.

Gama-decanolactona (GD) é um composto monoterpeno com estrutura semelhante às lactonas naturais, que estão presentes em diferentes espécies e são usadas como terapia farmacológica na região amazônica. GD mostrou um efeito anticonvulsivo em ambos os modelos de pentilenotetrazol (PTZ) agudo e crônico e atua como um antagonista de glutamato não-competitivo. Considerando estudos anteriores sobre atividades biológicas de GD, o presente estudo teve como objetivo explorar o seu perfil anticonvulsivante em diferentes modelos de epilepsia em camundongos e sobre parâmetros de estresse oxidativo, neuroinflamação e genotoxicidade em células microgliais N9. A atividade anticonvulsiva de GD (100 e 300 mg/kg) foi investigada em convulsões induzidas por aminofilina, isoniazida, picrotoxina, 4-aminopiridina (4-AP) e pilocarpina em camundongos machos. Os animais receberam uma administração de solução salina (SAL), GD ou diazepam (DZP 2 mg/kg), de controle positivo e após 30 min receberam os seguintes agentes convulsivos: aminofilina, isoniazida, picrotoxina, 4-AP ou pilocarpina. Os parâmetros avaliados durante 1h foram a latência para a primeira convulsão, a porcentagem de convulsões e a taxa de mortalidade. A fim de avaliar a neurotoxicidade de GD 100 e 300 mg/kg, foi realizado o teste de desempenho de rotarod. O tempo para cair do rotarod foi gravado em diferentes momentos após a administração GD. E por último foi avaliado o desempenho de GD 100 e 300 mg/kg no teste de sono induzido por DZP (17 mg/kg). Os resultados demonstraram que GD foi capaz de aumentar a latência para a primeira convulsão induzida pela aminofilina, isoniazida, 4-AP e pilocarpina, mas não para picrotoxina. No teste de rotarod, GD 300 mg/kg reduziu o tempo de latência para cair da barra após 30 min de administração, mas não após 60, 90 ou 120 min. GD 300 mg/kg aumentou a latência do sono induzido pro DZP. Os resultados acima revelaram que GD apresentou um efeito anticonvulsivo nos modelos de epilepsia utilizados neste estudo, principalmente na dose de 300 mg/kg, bem como o tempo de latência para a primeira convulsão, sugerindo que GD pode modular as vias da adenosina e afetar os canais de potássio, direta ou indiretamente. O papel de GD sobre o estresse oxidativo em status epilepticus (SE) foi investigado medindo a produção de espécies reativas de oxigênio (EROS), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), teor de nitrito, e os danos do DNA induzidos por pilocarpina no córtex cerebral de camundongos. GD foi capaz de aumentar as atividades de SOD e CAT, diminuir a produção de EROS, NO e danos no DNA durante o estabelecimento de SE no córtex cerebral. Estes dados sugerem que as enzimas SOD e CAT são o principal sistema de eliminação de radicais livres, e GD fornece neuroproteção contra o aumento do estresse oxidativo no cérebro. Um modelo clássico para investigar se uma droga atua modulando a neuroinflamação é utilizar a linhagem celular N9 (célula neuronal da microglia murina) ativada com o químico lipopolissacárideo (LPS), que sabidamente, provoca inflamação. Assim, investigou-se o efeito da GD sobre parâmetros inflamatórios e apoptóticos nesse sistema. Avaliou-se a expressão protéica por western blotting das seguintes proteínas: óxido nítrico sintetase induzível (iNOS) e fator de necrose tumoral-alpha (TNF-α), p-38 fosforilada e não fosforilada. Avaliou-se também a atividade da caspase 9-clivada e a formação de EROS por citometria de fluxo bem como o dano ao DNA pelo ensaio cometa alcalino. Nos resultados in vitro, GD atenuou a ativação de células N9 microglias, inibiu a formação de EROS intracelular e a expressão de iNOS e TNF-α induzidas por LPS nas células. Além disso, GD bloqueou a fosforilação da p38, inibiu a caspase-9 clivada e o dano ao DNA. Estes dados indicam que GD tem um potencial terapêutico neuroprotetor e que exerce os seus efeitos através da inibição da inflamação. / Gamma-decanolactone (GD) is a monoterpene compound similar to natural lactones in structure, which are present in different species and are used as remedy in the Amazonian region. GD shows an anticonvulsant effect in both the acute and chronic pentileneterazole (PTZ) models and acts as a non-competitive glutamate antagonist. Considering previous studies on biological activities of GD, the present study aimed to explore its anticonvulsant profile in different epilepsy models in mice and on oxidative stress parameters in N9 cell. The anticonvulsant activity of GD (100 and 300 mg/kg) was investigated on seizures induced by aminophylline (AMPH), isoniazid (INH), picrotoxin (PCT), 4-aminopyridine (4-AP) an pilocarpine (PIL) in male mice. The animals received one administration of saline (SAL), GD or the positive control diazepam (DZP 2 mg/kg), and after 30 min they received the following convulsant agents: AMPH, INH, PCT, 4-AP or PIL The parameters evaluated during 1h were the latency to first seizure, the occurrence of seizure and the mortality rate. In order to evaluate the neurotoxicity of GD 100 and 300 mg/kg, the rotarod performance test was performed. The time to fall of the rotarod was recorded at different times after the GD administration. The results demonstrated that GD was able to extend the latency to first seizure induced by AMPH, INH, 4-AP and PIL, but not PCT. In the rotarod test GD 300mg/kg reduced the latency to fall of the bar just at 30 min after the administration, but not at 60, 90 or 120 min. The above results revealed that GD presented an anticonvulsant effect in the epilepsy models used in this study, especially at the dosage of 300mg/kg, as well as the latency to the first seizure, suggesting that the GD could modulate the adenosine and GABA pathways and affect potassium channels directly or indirectly. The role of gamma-decanolactone (GD) on oxidative stress in pilocarpine-induced SE was investigated by measuring ROS production, superoxide dismutase and catalase activities, nitrite content, and DNA damage in the mice cerebral cortex. GD was able to increase the superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities, decreased the ROS, NO production, and DNA damage during the SE establishment in the cerebral cortex. These data suggest that the cortex use SOD and CAT enzymes as the major free-radicals scavenging system, and GD provides neuroprotection against the increase of oxidative stress in the brain. Because previous works have consistently demonstrated the N9 microglial-neuronal system for neuroinflammation investigations, these cells are considered appropriate for this kind of research. To investigate the inhibitory effect of GD on the production of ROS and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in lipopolysaccharide (LPS) - stimulated N9 murine microglial cells through the p38 MAPK signaling pathway. The results in vitro the GD attenuated the activation of N9 cells and inhibited intracellular ROS and the expression of iNOS and TNF-α induced by LPS in the cells. In addition, GD blocked the phosphorylation of p38 and inhibited cleaved caspase-9 and DNA damage. These data indicate that GD has therapeutic potential for the treatment of neurodegenerative diseases, and that it exerts its effects by inhibiting inflammation.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química. / Made available in DSpace on 2012-10-20T04:35:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 223423.pdf: 1296115 bytes, checksum: 1f41fe12fbd84f7e72f15de9661d5c3e (MD5) / Este trabalho apresenta o estudo fitoquímico sistemático da espécie vegetal Polygala sabulosa A. W. Bennett (Polygalaceae), uma pequena erva comumente chamada de "timuto-pinheirinho" que se desenvolve no Planalto Meridional Sul e que têm sido utilizada na medicina popular como anestésico local e expectorante. A aplicação de métodos convencionais de separação às frações do extrato bruto de P. sabulosa solúveis em diclorometano, acetato de etila e etanol conduziu ao isolamento de treze compostos, identificados como 24-etil-5a-colesta-7,22-dien-3b-ol (1), 7-(3',3'-dimetilaliloxi)-6-metoxicumarina (2), 4-metoxi-6-(11,12-metilenodioxi-dihidroestiril)-2H-piran-2-ona (3), 4-metoxi-6-(11,12-metilenodioxi-14-metoxi-dihidroestiril)-2H-piran-2-ona (4), 4-metoxi-6-(11,12-metilenodioxi-10,14-dimetoxi-dihidroestiril)-2H-piran-2-ona (5), 4-metoxi-6-(11,12-metilenodioxi-estiril)-2H-piran-2-ona (6), 4-metoxi-6-(11,12-metilenodioxi-14-metoxi-estiril)-2H-piran-2-ona (7), 4-metoxi-6-(11,12-metilenodioxi-10,14-dimetoxi-estiril)-2H-piran-2-ona (8), 4-metoxi-6-(11,12-dimetoxi-estiril)-2H-piran-2-ona (9), protohipericina (10), 5,7,4'-trihidroxiflavona (11), 3,5,7,3',4'-pentahidroxiflavona (12) e 3-O-(b-D-glicopiranosil)-5,7,3',4'-tetrahidroxiflavona (13). A determinação estrutural destas substâncias, realizada a partir dos seus dados espectrais de infravermelho, massas e ressonância magnética nuclear de hidrogênio e de carbono-13, é discutida. A estiril-lactona 8, previamente caracterizada por CGAR-EM, foi identificada em mistura com o composto 7 e está sendo descrita como um novo produto natural. O esterol 1 e os flavonóides 11, 12 e 13 são descritos pela primeira vez como constituintes químicos de Polygala sabulosa. A avaliação das atividades tripanomicida e antinociceptiva do extrato bruto, frações solúveis e compostos puros de Polygala sabulosa, conduzidas respectivamente por bioensaio em meio de cultura contra as formas epimastigota e tripomastigota de Trypanosoma cruzi e pelo modelo de dor induzida com ácido acético, também é informada

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-09Bitstream added on 2015-04-09T12:47:39Z : No. of bitstreams: 1 000816587.pdf: 400325 bytes, checksum: fe57a4f95b8cfd93f1cdf6d5195f67d6 (MD5) / As mudanças nos controles internacionais dos alimentos visando sua inocuidade se efetivaram com a mudança de século, tendo como base a Análise de Riscos e a Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle. Para os resíduos químicos, apesar de problema pré-existente, a situação só ganhou notoriedade a partir de 2010 com a detecção da presença de resíduos de avermectinas em produtos cárneos brasileiros exportados para os Estados Unidos e União Europeia. A partir de então, várias medidas de mitigação foram inseridas no conjunto rotineiro de autocontroles pelas empresas processadoras. Neste trabalho objetivou-se verificar a praticidade e eficácia dessas medidas para o controle efetivo dos processos, segregando animais abatidos que pudessem contribuir para níveis inaceitáveis do perigo, com base na monitoração de resíduos de avermectinas em duas matrizes amostrais, fígado e músculo de bovinos abatidos. Para a matriz músculo foram analisados 81.565 lotes de animais, com 1,41% desses ou 1.153 lotes que apresentaram resíduos de avermectinas superiores ao LMR de 10μg/kg durante os anos de 2010 e 2011. A partir de 2012 utilizou-se a matriz fígado, sendo analisadas 77.056 amostras. Dessas, 29.267 ou 37,98% apresentaram positividade para resíduos, sendo que 4.602 ou 5,97% foram superiores ao LMR de 100μg/kg. Os resultados analíticos demonstram, até agora, agravamento do problema no elo primário da produção de carne bovina brasileira / Changes in international food controls aiming their safety occurred with the change of the century, based on the Risk Analysis and Hazard Analysis and Critical Control Points. For chemical residues, although a pre-existing problem, the situation only gained notoriety after 2010, with the presence of avermectin residues in Brazilian meat products exported to the United States and European Union. Since then, several mitigation measures were incorporated in the routine set of self-controls the processing companies.This work aimed to verify the practicality and effectiveness of these measures for effective control of processes, segregating slaughtered animals that could contribute to unacceptable levels of risk, based on monitoring of avermectins residues in two sample matrices, liver and muscle of cattle slaughtered. For the muscle matrix were analyzed 81,565 batches of animals, with 1,153 or 1.41% batches whose residues were above the avermectin MRL (Maximum Residue Level) of 10μg/kg during the years 2010 and 2011. from 2012 was used the liver matrix , with 77,056 samples being analyzed. Of these, 29,267 or 37.98% were positive for residues, with 4,602 or 5.97% above the MRL of 100μg/kg. The analytical results shown so far, the aggravation of problems at the primary link of the production chain of Brazilian beef