Cinco membros da família das Acil-CoA sintetases de cadeia longa (ACSL) são responsáveis por ativar ácidos graxos, produzindo acil-CoA, e distribuí-los entre diversas vias metabólicas no interior da célula, tais como a síntese de triacilglicerol (TAG) e ?- oxidação mitocondrial. Apesar das disfunções nas ACSLs contribuirem para muitas doenças metabólicasa função de algumas isoformas de ACSL em tecidos específicos permanece ainda sem descrição na literatura. Aqui mostramos pela primeira vez a presença de mRNA da ACSL6 no músculo esquelético de seres humanos. Além disso, indivíduos obesos apresentaram menores níveis de mRNA de ACSL6 quando comparados à indivíduos magros. Após refeição hiperlipídica aguda (high fat meal, HFM, 90% de gordura) a expressão ACSL6 aumentou 2,5 vezes em relação aos níveis de jejum. Nós também verificamos as condições metabólicas que controlam a expressão ACSL6 em ratos: o jejum de 48h modulou negativamente a expressão gênica de ACSL6 e de outros genes de síntese de lipídeos tais como SREBP-1c e DGAT1, enquanto que a ingestão aguda de HFM (80% de gordura saturada , 10 mL/kg) teve o efeito oposto; Após o treinamento aeróbio (6 semanas, 5 dias /semana, uma vez por dia, 60 min a 70% da capacidade aeróbica máxima) o mRNA da ACSL6 foi reduzido em 35%. Em células primárias de músculo esquelético de ratos, a transfecção com siRNA de ACSL6 diminuiu a expressão de ACSL6, DGAT1 e SREBP-1c e o acúmulo de TAGs e gotas lipídicas. O silenciamento gênico da ACSL6 também aumentou o conteúdo dos ácidos graxos C16:0 e C18:0, AMPK-fosforilada, capacidade respiratória mitocondrial, a oxidação de palmitato e mRNA de PGC-1?, UCP2 e UCP3, mas diminuiu a produção de espécies 11 reativas de oxigênio. Em células primárias de músculo esquelético de seres humanos, a superexpressão da ACSL6 não alterou o conteúdo de TAG e da proteína DGAT1, mas aumentou as espécies lipídicas esfingomielina e fosfatidilcolinas, e reduziu a oxidação de 1-14C-palmitato e a expressão do PGC1?. Em conclusão, ACSL6 está envolvida na síntese e distribuição de acil-CoA para a síntese de lipídeos. A inibição gênica da ACSL6 melhora a capacidade de respiração mitocondrial e oxidação lipídica, através da ativação da via AMPK/PGC1?. / Five members of long-chain acyl-CoA synthetase (ACSL) family activate fatty acids providing acyl-CoA for several metabolic pathways within the cell, such as synthesis of triacylglycerol (TAG) and mitochondrial ?-oxidation, and their dysfunctions contribute to many metabolic diseases. Despite this, the existence and function of some ACSL isoforms in specific tissues remains unclear. Here we show for the first time the presence of ACSL6 mRNA and protein in skeletal muscle (SM) of humans. Obese subjects had lower levels of ACSL6 mRNA when compared to leans, and acute high fat meal (HFM, 90% fat) increased ACSL6 expression 2.5 times over fasted levels in both. We also verify the metabolic conditions that control ACSL6 expression in rats: fasting (48h) negatively modulated the ACSL6 mRNA and the expression of other genes of lipid synthesis SREBP-1c and DGAT1 in rat SM, while acute ingestion of HFM (80% saturated fat, 10 mL/Kg) had the opposite effect; After aerobic training (6 weeks, 5 days/week, once a day, 60 min at 70% of maximal aerobic capacity) ACSL6 mRNA was reduced 35%. In primary skeletal muscle cells (PSMC) of rats, ACSL6-specific siRNA oligo transfection (20 nM) decreased ACSL6, DGAT1 and SREBP-1c mRNA and the accumulation of TAGs and lipid droplets (LD). The knockdown also increased the content of C16:0 and C18:0 fatty acids, AMPK-Phosphorylated, mitochondrial content and respiratory rates, palmitate oxidation and PGC-1?, UCP2 and UCP3 mRNA, but decreased reactive oxygen species production. In PSMC of humans, ACSL6 overexpression did not change the contents of TAG or DGAT1 mRNA, but increased sphingomyelin and phosphatidylcholines and reduced 14C-palmitate oxidation and PGC1? mRNA expression. In conclusion, ACSL6 drives acyl-CoA toward lipid synthesis and its 13 downregulation improves mitochondrial capacity of respiration, lipid oxidation and biogenesis, which involves the activation of AMPK/PGC1-? pathway.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseMSJM.pdf: 971175 bytes, checksum: 60ac09233329a19cd395992927777b5d (MD5) Previous issue date: 2006-04-25 / Financiadora de Estudos e Projetos / This study investigated the effects of soy yogurt fermented by Enterococcus faecium CRL 183 and Lactobacillus jugurti 416 supplemented with isoflavones on adipose tissue, blood lipid, and glucose levels on juvenile rats. Male Wistar rats were then randomly divided into groups: chow diet (C), cholesterol-enriched diet (H), cholesterol-enriched diet/chow diet (HC), cholesterol-enriched diet/chow diet plus soy yogurt supplemented with isoflavones (HCYI), cholesterol-enriched diet/chow diet plus placebo (HCP), cholesterol-enriched diet/chow diet plus placebo supplemented with isoflavones (HCPI), cholesterol-enriched diet plus soy yogurt supplemented with isoflavones (H+YI), cholesterol-enriched diet plus placebo (H+P), and cholesterol-enriched diet plus placebo supplemented with isoflavones (H+PI). C and H groups were fed for 6 weeks on a chow diet or a cholesterol-enriched diet, respectively. Rats in the HC, HCYI, HCP, and HCPI groups were fed a cholesterol-enriched diet for 3 weeks as a preliminary treatment to create hypercholesterolemia. Rats were then given the chow diet or the chow diet plus soy products for additional 3 weeks. Additionally, animals in the H+YI, H+P, and H+PI groups were fed for 6 weeks on a cholesterol-enriched diet plus soy products. The soy products (yogurt supplemented with isoflavones, placebo, and placebo supplemented with isoflavones) were fed to each animal at the rate of 1ml/day. Food and water were consumed ad libitum. The beneficial effects of soy yogurt on epididymal (EPI) and retroperitoneal (RET) fat pads was likely due to isoflavones because adipocyte circumference (micrometers) in the HCP group was significantly larger (EPI: 105.66 ± 13.36; RET: 134.95 ± 25.40) than that in the HCYI group (EPI: 93.17 ± 12.80; RET: 108.62 ± 15.50) and HCPI group (EPI: 93.06 ± 15.10; RET: 112.34 ± 18.21). The probiotic micro-organism accentuated the antilipogenic effect of isoflavones on RET (HCYI: 108.62 ± 15.50 micrometers versus HCPI: 112.34 ± 18.21 micrometers). Moreover, the soy yogurt increased glucose concentration similar to that in the chow group but did not change blood lipids. On the other hand, soy supplementations with cholesterol-enriched diet exhibited regional variations in fat pads. It may be responsible for the increased observed on retroperitoneal adipocyte circumference (micrometers) (H+YI: 122.31 ± 1.39; H+P: 124.48 ± 1.53, or H+PI: 124.85 ± 1.09 versus C: 99.68 ± 1.49 or H: 103.26 ± 0.76) or decreased of epididymal adipocyte circumference (micrometers) (H+YI: 96.42 ± 0.68, and H+PI: 94.87 ± 0.69) compared with the C group (99.47 ± 0.95). In the same way, effect on epididymal adipose tissue was likely due to isoflavones. Probiotics do not seem to enhance the effect of isoflavones, but improved HDL cholesterol plasma levels. Soy yogurt supplemented with isoflavones did not promote changes on plasma triacylglycerol, but increased glucose concentration. If these results are confirmed in further studies, they will offer new approaches to obesity prevention or lipid metabolism abnormalities. / O presente estudo investigou os efeitos de um iogurte de soja produzido com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus jugurti 416, e posteriormente suplementado com isoflavonas sobre a adiposidade, perfil lipídico e glicemia, em ratos jovens. Ratos Wistar foram randomicamente divididos em grupos: dieta padrão (P), dieta hipercolesterolêmica (H), dieta hipercolesterolêmica/dieta padrão (HP); dieta hipercolesterolêmica/dieta padrão + iogurte de soja suplementado com isoflavonas (HPII); dieta hipercolesterolêmica/dieta padrão + placebo (HPP), dieta hipercolesterolêmica/dieta padrão + placebo suplementado com isoflavonas (HPPI), dieta hipercolesterolêmica + iogurte de soja suplementado com isoflavonas (H+II); dieta hipercolesterolêmica + placebo (H+P) e dieta hipercolesterolêmica + placebo suplementado com isoflavonas (H+PI). Os grupos P e H receberam dietas padrão e hipercolesterolêmica, respectivamente, por 6 semanas. Os animais dos grupos HP, HPII, HPP e HPPI receberam dieta hipercolesterolêmica por 3 semanas, como tratamento preliminar para o desenvolvimento da hipercolesterolemia, e então passaram a consumir dieta padrão e ou esta associada aos produtos de soja, por adicionais 3 semanas. Os animais dos grupos H+II, H+P e H+PI receberam dieta hipercolesterolêmica associada aos produtos de soja por 6 semanas. Os produtos de soja (iogurte suplementado com isoflavonas, placebo e placebo suplementado com isoflavonas) foram administrados na dose de 1 ml/rato/dia. Os animais receberam água e alimento ad libitum. Os efeitos benéficos do iogurte de soja sobre os tecidos adiposos epididimal (EPI) e retroperitoneal (RET) parecem ser devido às isoflavonas, uma vez que o diâmetro dos adipócitos (micrometros) nos animais do grupo HPP foi maior (EPI: 105.66 ± 13.36; RET: 134.95 ± 25.40) quando comparado ao dos animais dos grupos HPII (EPI: 93.17 ± 12.80; RET: 108.62 ± 15.50) e HPPI (EPI: 93.06 ± 15.10; RET: 112.34 ± 18.21). Os microrganismos probióticos acentuaram o efeito anti-lipogênico das isoflavonas para o RET (HPII: 108.62 ± 15.50 micrometros versus HPPI: 112.34 ± 18.21 micrometros). Além disso, o iogurte de soja promoveu aumento da glicemia, tornando-a similar a reportada para o grupo P, não apresentando efeito sobre o perfil lipídico. Por outro lado, a administração dos produtos de soja associados à ingestão da dieta hipercolesterolêmica apresentou diferentes efeitos sobre a adiposidade, os quais parecem depender da localização do tecido adiposo. Assim, podem ser os responsáveis pelo aumento do diâmetro (micrometros) dos adipócitos do RET (H+II: 122.31 ± 1.39; H+P: 124.48 ± 1.53 ou H+PI: 124.85 ± 1.09 versus P: 99.68 ± 1.49 ou H: 103.26 ± 0.76), ou redução do diâmetro destas células no EPI (H+II: 96.42 ± 0.68 e H+PI: 94.87 ± 0.69) comparado ao grupo P (99.47 ± 0.95). Do mesmo modo, o efeito sobre o EPI parece ser devido às isoflavonas. Os probióticos não influenciaram a biodisponibilidade das isoflavonas, porém aumentaram as concentrações plasmáticas do HDL colesterol. O iogurte de soja suplementado com isoflavonas não apresentou efeito sobre os triglicerídeos plasmáticos, porém aumentou a glicemia. Se estudos futuros confirmarem os resultados obtidos, o iogurte de soja suplementado com isoflavonas poderá oferecer novas possibilidades para a prevenção da obesidade e anormalidades do metabolismo lipídico.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseNCC.pdf: 808815 bytes, checksum: b2222a6174e1893404ba53aa06c5abe0 (MD5) Previous issue date: 2005-03-31 / Universidade Federal de Sao Carlos / The prevalence of obesity is increasing worldwide, indicating that environmental and behavioral aspects play an important causal role. Among the environmental influences, the percentage of fat energy in everyday diet and the lack of physical activity are two important factors, so the mechanisms that control food intake and body weight are essential in public health. The adipose tissue is regulated by several hormones and neuropeptides. Two of these, the circulating peptide hormones leptin and ghrelin, have actions that include reciprocal effects on appetite-regulating neurons in the hypothalamus. This study aimed to observe whether the effects of continuos fedding with a palatable hyperlipidic diet and cycling this diet with a chow one and also entends to design the effects of exercise on these diet regimens.The animals (rats) were assigned to six differents experimental groups:sedentary rats fed with chow diet(SP); exercised rats fed with chow diet(TP); sedentary rats fed with a palatable hyperlipidic diet(SH); exercised rats fed with a palatable hyperlipidic diet(TH); sedentary rats fed with food cycles, alternating weekly the chow diet wih hyperlipidic one(SC); and exercised rats fed with food cycles(TC). The data showed that the two hyperlipidic diet regimens significantly increased RET and EPI weights, area and diameter of adiposity cells, promoted hyperinsulinemia, hyperleptinemia and decreased significantly lipogenesis rate in RET and EPI, showed also percentual reduction in ghrelin levels, but didn t affect the lipolysis rate. In addition, the present investigation showed that chronic exercise decreased body weight gain and adiposity and attenuated insulin, leptin levels in both high-fat feeding regimens, also reduction in ghrelin levels in TP and increased the lipolysis rate under all regimens, excepting in food cycle treatment. Results suggest that diet and exercise affected serum levels anorexigenic and orexigenic hormones and the lipid metabolism. / A prevalência mundial da obesidade está aumentando rapidamente, indicando que aspectos ambientais e de comportamento possuem importância na etiologia desta doença. Dentre as influências ambientais, destaca-se a alta ingestão lipídica e a hipoatividade, assim melhor compreensão dos mecanismos que controlam a ingestão alimentar e o peso corporal é primordial à saúde pública. O tecido adiposo é regulado por vários hormônios e neuropeptídeos. Dois destes, a leptina e a grelina, são hormônios que têm ações antagônicas na regulação do apetite por modular neurônios hipotalâmicos. Esta pesquisa objetivou determinar os efeitos da ingestão cíclica e contínua de dieta hiperlipídica, bem como, verificar o efeito do exercício em ratos com modificação dietética. Para isto, os animais foram divididos em seis diferentes grupos experimentais: sedentários alimentados com dieta padrão (SP), treinados alimentados com dieta padrão (TP), sedentários alimentados com dieta hiperlipídica (SH), treinados alimentados com dieta hiperlipídica (TH), sedentários alimentados com dieta cíclica (SC) e treinados alimentados com dieta cíclica (TC). Os resultados mostraram que os dois regimes de dieta hiperlipídica aumentaram o peso do RET e EPI, promoveram hiperinsulinemia, hiperleptinemia e significativa diminuição da lipogênese do RET e EPI, redução percentual nos níveis de grelina, não promovendo alteração significativa da lipólise nesses grupos. Quanto ao efeito do exercício, os resultados demonstraram diminuição do ganho de peso corporal, redução da adiposidade, e diminuição significativa dos níveis de grelina em TP e normalização da concentração plasmática de leptina e insulina nos grupos alimentados com dieta hiperlipídica, promovendo também aumento da lipólise em todos grupos, exceto o alimentado com dieta cíclica. Nossos resultados sugerem que tanto a dieta, quanto o exercício, causam alteração do metabolismo lipídico e alteram os níveis de hormônios anorexígenos e orexígenos.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseRLFG.pdf: 833358 bytes, checksum: 58e782574c79b902a6b34e27cb4db49c (MD5) Previous issue date: 2004-12-16 / Financiadora de Estudos e Projetos / Exercise has been prescribed in the treatment and control of dyslipidemias and cholesterolemia; however, lipid responses to different training frequencies in hypercholesterolemic adult males have been inconsistent. METHODS: We sought to verify if different frequencies of continuous moderate exercise (5 or 2 consecutive days/week, 90 min., swimming) can, after 8 weeks, promote similar adaptations in adipocyte area (retroperitoneal and epididymal adipose tissues) and lipid parameters (total cholesterol, triglycerides, HDL-cholesterol), as well as metabolic lipid pathways in normo and hypercholesterolemic adult male rats. Normal chow or hypercholesterolemic diet (1% cholesterol plus 0.25% cholic acid) were freely given during 8 weeks to the rats, which were divided in sedentary or exercised in either 5 or 2 consecutive days/week groups. RESULTS: Exercise frequencies of both 5 and 2 consecutive days/week promoted, mainly in hypercholesterolemic diet rats, important benefits such as: reduced total cholesterol and triglycerides, increased HDL-c fraction, decreased body weight gain, reduced retroperitoneal and epididymal lipogenesis and relative weights, reductions in adipocyte areas as well as relative increase in lipolysis and relative decrease in leptin concentrations. However, the effects of 5days/week exercise were more pronounced compared with those of 2 consecutive days/week training which, however, also proved effective as well in the hypercholesterolemic situations, confirming the importance of these exercise protocols in controlling dyslipidemias and obesity. CONCLUSIONS: Our data suggest that moderate continuous exercise, 5 or 2 consecutive days/week, can result in similar positive adaptations in adipocyte areas, lipid parameters and metabolic lipid pathways in hypercholesterolemic adult male rats. / O exercício tem sido prescrito no tratamento e controle de dislipidemias e colesterolemias, contudo, as respostas no metabolismo lipídico em indivíduos hipercolesterolêmicos do sexo masculinos submetidos a diferentes freqüências de exercício tem sido inconsistentes. Objetivamos desse modo, verificar se diferentes freqüências de exercício continuo moderado (realizado 5 ou 2 dias consecutivos por semana, 90 min., natação) poderia, depois de 8 semanas, promover adaptações similares na área de adipócitos (retroperitoneal e epididimal) e parâmetros lipídicos (colesterol total, triglicérides, HDL-colesterol), assim como nas vias metabólicas lipidicas em ratos machos normo e hipercolesterolêmicos. Dieta normo ou hipercolesterolêmica (1% colesterol junto a 0.25% de acido cólico) foi livremente oferecida durante 8 semanas a um grupo de ratos divididos em sedentários e exercitados 5 ou 2 dias consecutivos por semana. Ambas as freqüências de exercício promoveram, principalmente em ratos hipercolesterolêmicos, importantes benefícios tais como: redução do colesterol total e triglicérides plasmático, diminuição do ganho de peso corporal, redução da lipogênese, peso relativo e área de adipócitos nos tecidos adiposos retroperitoneal e epididimal bem como aumento relativo da lipólise e fração HDL-c e relativa diminuição da concentração de leptina plasmática. No entanto, os efeitos promovidos pelo exercício realizado 5 dias consecutivos por semana, foram mais pronunciados quando comparados à freqüência de 2 dias consecutivos por semana, a qual entretanto, também provou ser efetiva em situação hipercolesterolêmica confirmando a importância desse protocolo de exercício em controlar e/ou amenizar dislipidemias e obesidade. Conclui-se que o exercício continuo moderado realizado 5 ou 2 dias consecutivos por semana pode resultar em adaptações positivas na área de adipócitos, parâmetros lipídicos e nas vias metabólicas lipidicas em ratos hipercolesterolêmicos.

Alguns estudos experimentais têm sugerido um importante papel do baço no metabolismo lipídico. Poucas análises, entretanto, avaliam o impacto que diferentes fontes de gordura possam exercer sobre os níveis de lipídios plasmáticos. O objetivo deste trabalho foi analisar o efeito de uma dieta nutricionalmente equilibrada (NE) e de uma dieta com gordura suína (GS) como fonte lipídica nos níveis de lipídios plasmáticos em ratos submetidos a esplenectomia total (ET) isolada ou combinada com implante esplênico autógeno (IEA). Foram utilizados 60 ratos Wistar machos adultos, distribuídos em seis grupos, cada um com dez animais: Grupo 1 controle operação simulada, com oferta de ração NE; Grupo 2 controle operação simulada, com oferta de ração GS; Grupo 3 submetidos a ET, com oferta de ração NE; Grupo 4 submetidos a ET, com oferta de ração GS; Grupo 5 submetidos a ET combinada com IEA e com oferta de ração NE; e Grupo 6 submetidos a ET combinada com IEA e com oferta de ração GS. Foram coletadas amostras sangüíneas imediatamente antes da operação (D0), e após 12 semanas de experimento (D+12), para verificação do perfil lipídico, quando os animais foram mortos, com retirada dos implantes esplênicos nos grupos 5 e 6. Houve regeneração morfológica de todos os tecidos esplênicos implantados, não se observando diferença no percentual de regeneração entre os grupos 5 e 6. Não houve diferença no ganho de peso e no consumo de ração entre os grupos de animais, assim como no lipidograma dos animais alimentados com dieta NE quando comparados os níveis plasmáticos em D0 e em D+12, enquanto nos grupos com modificação da fonte lipídica houve elevação das concentrações de colesterol total (CT), lipoproteína de baixa densidade (LDL), lipoproteína de muito baixa densidade (VLDL), triglicerídeos (TGL) e diminuição da concentração de lipoproteína de alta densidade (HDL). Quando comparados os seis grupos de animais, em D+12, apenas os níveis plasmáticos de HDL dos animais dos grupos 2, 4 e 6 apresentaram-se significativamente menores que os do grupo 3. Os resultados deste estudo permitem concluir que a dieta nutricionalmente equilibrada mantém os níveis de lipídios plasmáticos, enquanto a dieta à base de gordura suína provoca alterações no perfil lipídico de ratos alimentados com este tipo de ração, independentemente do procedimento cirúrgico realizado sobre o baço. / An important role of the spleen in lipid metabolism has been suggested by clinical and experimental studies. Few studies, however, have evaluated the impact of different sources of fat in plasma lipid levels. The purpose of the present investigation was to analyze the effect of a nutritionally balanced (NB) diet and a diet containing pork fat (PF) as sources of lipids on the lipid profile of rats submitted to total splenectomy (TS) alone or combined with splenic autotransplantation (SA). Sixty adult male Wistar rats were divided into six groups of 10 animals each: Group 1 sham-operated, fed the NB diet; Group 2 sham-operated, fed the PF diet; Group 3 TS, fed the NB diet; Group 4 TS, fed the PF diet; Group 5 SA, fed the NB diet; and Group 6 SA, fed the PF diet. Blood samples were collected immediately before the operation (D0) and 12 weeks after the beginning of the experiment (D+12) for plasma lipid determination. On D+12, the animals were killed and the splenic implants of groups 5 and 6 were removed. Morphologic regeneration of splenic tissues was observed, with no difference in percent regeneration between these two groups. Weight gain and chow intake were similar among all groups of animals. When D+12 plasma lipid levels were compared to D0, there were no differences in groups 1, 3, and 5, while in groups 2, 4, and 6 total cholesterol (TC), low density lipoprotein (LDL), very low density lipoprotein (VLDL), and triglycerides (TGL) levels had increased and high density lipoprotein (HDL) levels had decreased. At the end of the experiment, only the HDL levels of groups 2, 4, and 6 were lower than group 3 levels. Our results lead us to conclude that, regardless of the surgical spleen procedure to which the rats were submitted, a nutritionally balanced diet maintained plasma lipid levels, while a diet containing pork fat as a source of lipids led to alterations in lipid profile.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / It is estimated that approximately 30 millions of Brazilians are suffering from hypertension and despite the extreme number of hypotensive available it is believed that only 2.7 million are being treated properly. Recently several clinical, epidemiological and experimental studies have shown an association between the consumption of foods rich in cocoa and lowering blood pressure as well as relating this effect to a possible action of the cocoa flavonoids on endothelial function. Objective: to evaluate in hypertensive patients, stage 1, the effect of administration of the flavonoids of dark chocolate 70% cocoa on the arterial pressure, endothelial function, and the relationship between variations on blood pressure and endothelial function. Type of the study: experimental, clinical and open. Casuistic: 20 patients, without distinction of race or sex, with primary hypertension stage 1, without antihypertensive treatment prior normal weight, overweight or obese grade I, aged between 18 and 60. Site of the study: Clinical and Experimental Pathophysiological Laboratory Clinex. Rio de Janeiro State University. Variables studied: blood pressure, HS-CRP, IL-6, TNF-&#945;, VCAM, ICAM, E-selectin, OX-LDL, total cholesterol, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, triglycerides, blood glucose, insulin, HOMA, body mass index, waist circumference, hip circumference, waist hip ratio and body fat. Results: the chocolate-cocoa 70% significantly reduced the blood pressure measured by casual oscillometric method. Through this method we observed that systolic blood pressure decreased significantly after 4 weeks of treatment, (V0: 146.50 1.28, V1: 140.40 3.02, V2: 138.50 2.44; V3: 140.60 2.50; V4: 136.90 2.60, V4 vs. VO, p <0.001) while diastolic blood pressure has decreased considerably from 2 weeks of treatment and remained so until the end of the study (V0 : 93.2 0.74, V1: 87.50 1.8, V2: 86.05 1.67, V3: 88.35 1.48; V4: 87.45 1.78, V2 vs. V0, p< 0,05 e V4 vs. V0, p<0,03). Blood pressure measured by the method of ambulatory blood pressure during 24 hours (MAPA) did not change significantly after the intervention. We observed a expressive reduction, however not statistically significant on plasma levels of HS-CRP, TNF-&#945;, OX-LDL, IL-6, VCAM, ICAM e E-selectin The correlations between PCR-US and IL-6 and ICAM were significantly (r=0,3; p=0,05 e r=0.45, p=0,04) and IL-6 and VCAM (r=0,42, p=0,06). The other variables assessed did not change significantly after 4 weeks of consumption of chocolate-cocoa 70%. Conclusions: the results of this study suggest that the chocolate-cocoa 70% has a beneficial effect on endothelial function rises and disparate in relation to the behavior of blood pressure / Estima-se que aproximadamente 30 milhões de brasileiros apresentem hipertensão arterial e a despeito da grande quantidade de hipotensores disponíveis, acredita-se que apenas 2,7 milhões estejam sendo tratados adequadamente. Recentemente vários estudos clínicos, epidemiológicos e experimentais têm mostrado uma associação entre o consumo de alimentos ricos em cacau e a redução da pressão arterial assim como relacionando este efeito a uma possível ação dos flavonóides do cacau sobre a função endotelial. Objetivos: avaliar em pacientes hipertensos primários, estágio 1, o efeito da administração dos flavonóides do chocolate amargo 70% de cacau sobre: a pressão arterial; a função endotelial e as possíveis correlações entre as variações da pressão arterial e da função endotelial. Tipo de estudo: experimental, clínico e aberto. Casuística: 20 pacientes, sem distinção de raça ou sexo, com hipertensão arterial primária no estágio 1, sem tratamento anti-hipertensivo prévio, eutróficos, com sobrepeso ou obesos grau I, com idades entre 18 e 60 anos. Local do estudo: Disciplina de Fisiopatologia Clínica e Experimental Clinex. Universidade do Estado do Rio de Janeiro. Variáveis estudadas: pressão arterial, PCR-US, IL-6, TNF-&#945;, VCAM, ICAM, E-selectina, LDL-OX, colesterol total, LDL-colesterol, HDL-colesterol, triglicérides, glicemia, insulina, HOMA, índice de massa corporal, circunferência de cintura, circunferência de quadril, relação cintura quadril e percentual de gordura corporal. Resultados: o chocolate-cacau 70% reduziu de forma significativa a pressão arterial avaliada pelo método oscilométrico casual. Através deste método observamos que a pressão arterial sistólica reduziu de forma significativa após 4 semanas de tratamento, (V0: 146,50 1,28; V1: 140,40 3,02; V2: 138,50 2,44; V3: 140,60 2,50; V4: 136,90 2,60; V4 vs. V0, p<0,001) enquanto a pressão arterial diastólica apresentou redução significativa a partir de 2 semanas de tratamento e assim permanecendo até o final do estudo (V0: 93,2 0,74; V1: 87,50 1,8; V2: 86,05 1,67; V3: 88,35 1,48; V4: 87,45 1,78; V2 vs. V0, p< 0,05 e V4 vs. V0, p<0,03). A pressão arterial avaliada pelo método de monitorização ambulatorial da pressão arterial durante 24h (MAPA) não modificou de maneira significativa após a intervenção. Observamos reduções expressivas, embora não estatisticamente significativas nas concentrações de PCR-US, TNF-&#945;, LDL-OX, IL-6, VCAM, ICAM e E-selectina As correlações da PCR-US com IL-6 e ICAM foram significativas (r=0,3; p=0,05 e r=0.45, p=0,04) e de IL-6 com ICAM forte mas sem significância (r=0,42, p=0,06). As demais variáveis avaliadas não se modificaram de forma significativa após 4 semanas de consumo de chocolate-cacau 70%. Conclusões: os resultados do presente estudo sugerem que o chocolate-cacau 70% tem efeito benéfico sobre a função endotelial e controverso em relação ao comportamento da pressão arterial

O exercício físico tem sido indicado na prevenção do aumento da lipemia pós-prandial (após o consumo de uma refeição hiperlipídica). O objetivo deste estudo foi comparar o efeito de duas sessões de exercício físico concorrente (tradicional e em circuito) na curva lipêmica de sujeitos submetidos à refeição hiperlipídica. Onze sujeitos do sexo masculino, familiarizados com treinamento concorrente (IMC 25,50 ± 2,10kg/m²) com idade média de 28,1 + 4,7 anos participaram da realização de um experimento composto por 2 dias consecutivos. No dia 1, os sujeitos realizavam um dos três protocolos randomizados: 1) CON - repouso; 2) CT - exercício concorrente tradicional (30 minutos de exercícios de força em circuito, seguidos de 20 min de exercício aeróbico a 70% do consumo máximo de oxigênio); 3) CC - exercício concorrente em circuito (50 minutos de exercícios de força e “tiros” de 2 min na esteira a 70% do consumo máximo de oxigênio, sob forma de circuito). No dia 2, 12h após a realização dos protocolos, os sujeitos consumiam uma refeição hiperlipídica. As coletas de sangue para análise de Triglicerídeos (TG), Glicose e Insulina foram realizadas no momento basal e de 1 à 5h após o consumo da refeição. O CT e o CC apresentaram menores níveis de TG comparado ao CON na hora 1 (p<0,05) e o CT também apresentou diferença do CON na hora 4 (p<0,05). Em relação à área abaixo da curva (AUC) de TG, houve diferença entre os protocolos CT e CC em comparação ao CON (p<0,05). Não foram encontradas diferenças entre os protocolos para Glicose. Em relação à AUC de Insulina, houve diferença entre os protocolos CT e CC em comparação ao CON (p<0,05), sendo que o CC apresentou diferença para maior em relação ao CT (p<0,05). Em conclusão, tanto o exercício CT quanto o CC são eficazes para atenuar a lipemia e a insulina pós-prandiais, sendo o CC ainda mais eficaz na atenuação da insulina. / The physical exercise has been shown to prevent the increase of postprandial lipemia (after consuming a high-fat meal). The objective of this study was to compare the effect of two concurrent sessions of exercise (traditional or circuit) in lipaemic curve of subjects who underwent fat meal. Eleven male subjects, familiar with concurrent training (BMI 25.50 ± 2,10kg/m²) with average age of 28.1 ± 4.7 years participated in the realization of an experiment in 2 consecutive days. On day 1, the subjects performed one of three randomized protocols: 1) CON - break; 2) CT - traditional concurrent exercise (30 minutes of circuit strength exercises, followed by 20 minutes of aerobic exercise at 70% of maximal oxygen uptake; 3) CC - concurrent exercise circuit (50 minutes of strength exercises and "bouts" of 2 min on the treadmill at 70% of maximal oxygen consumption, as circuit. On day 2, 12 hours after the completion of the protocols, the subjects consumed a high-fat meal. The blood samples for analysis of triglycerides (TG), glucose and insulin were performed at baseline and 1 to 5 hours after consumption of the meal. The TC and CC showed lower levels of TG compared to the CON 1 hour (p <0.05) and CT also showed difference in the CON 4 hours (p <0.05). In relation to the area under the curve (AUC) of TG there was a difference between TC and CC protocols compared to the CON (p <0.05). No differences were found between the protocols for glucose. Regarding Insulin AUC there was a difference between TC and CC protocols compared to the CON (p <0.05), considering that the CC showed a difference from the CT (p <0.05). In conclusion, both the CT and CC exercises are effective to mitigate lipemia and postprandial insulin, being the CC more efficient in insulin attenuation.

Os n-3 e n-6 são duas famílias de ácidos graxos poli-insaturados. Os ácidos graxos de cadeia longa como o ácido araquidônico (AA) e docosahexaenoico (DHA) apresentam importantes funções no desenvolvimento e funcionamento do cérebro. Os produtos de oxidação dos ácidos graxos poli-insaturados estão presentes ou aumentados ao longo do desenvolvimento de doenças neurodegenerativas. A caracterização de tais produtos é crítica para o estudo que busca entender o seu papel fisiopatológico no desenvolvimento de tais doenças. No presente trabalho, buscou-se o desenvolvimento de uma ferramenta analítica sensível e específica para a detecção e quantificação dos hidroperóxidos e hidróxidos do AA (HpETE e HETE), do seu precursor, o ácido linoleico (HpODE e HODE) e do DHA (HpDoHE e HDoHE). Estes hidroperóxidos foram sintetizados por fotooxidação e os hidróxidos correspondentes foram obtidos através da redução com o NaBH4. Os isômeros isolados foram caracterizados por LC-MS/MS. Os íons produto específicos de cada isômero foram escolhidos para a construção do método de monitoramento de reação selecionada (selected reaction monitoring - SRM) para a realização da análise quantitativa dos analitos de interesse. Cabe salientar que os dados obtidos poderão ser utilizados em bibliotecas de análise lipidômica e oxi-lipidômica pois serão essenciais para a identificação e quantificação dos analítos de interesse do presente estudo em diversas doenças. Utilizando o método padronizado, buscamos investigar o papel dos hidroperóxidos e hidróxidos do DHA, LA e AA em um modelo animal para a esclerose lateral amiotrófica (ELA), uma doença neurodegenerativa que acomete neurônios motores. Foi observado um aumento nos níveis de 13-HpODE, 9-HpODE e 12-HETE no córtex motor dos animais avaliados. Adicionalmente, foram observadas alterações nas taxas lipólica e lipogênica no tecido adiposo para os animais ELA em relação aos respectivos controles. Em conjunto, os dados apresentados no presente trabalho corroboram com os trabalhos da literatura que associam alteração dos níveis dos produtos de oxidação dos ácidos graxos poli-insaturados em doenças neurodegenerativas e o metabolismo energético alterado em ELA. Futuramente é necessária uma investigação mais ampla dos níveis dos hidroperóxidos e hidróxidos lipídicos em diferentes tecidos e do metabolismo lipídico, e os conhecimentos gerados poderão ser uma importante fonte de novas opções terapêuticas para os pacientes portadores de ELA. / The n-3 and n-6 are two olyunsaturated fatty acids families. The long chain fatty acids such as arachidonic (AA) and docosahexaenoic acid (DHA) have important roles in the development and function of the brain. Polyunsaturated fatty acids (PUFAs) oxidation products are present or increased during the progression of neurodegenerative diseases. The characterization of DHA oxidation products is critical to understand their roles in the development of such diseases. In the present study, we sought to develop a sensitive and specific analytical tool for the detection and quantification of AA hydroperoxides and hydroxides (HPETE and HETE), its precursor linoleic acid (HPODE and HODE) and DHA (HpDoHE and HDoHE). These hydroperoxides were synthesized by photooxidation and the corresponding hydroxides were obtained by reduction with NaBH4. The isolated isomers were characterized by LC-MS/MS, and unique and specific fragment ions were chosen to construct a selected reaction monitoring (SRM) method for the targeted quantitative analysis. It should be emphasized that the data obtained - in the form of lipidomics and oxy-lipidomics libraries - may be used to assist in several diseases. Using the standardized method, we investigated the role of hydroperoxides and hydroxides of DHA, LA and AA in an animal model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS), a neurodegenerative disease that affects motor neurons. Increased levels of 13-HPODE, 9-HPODE and 12-HETE were observed in the animals motor cortex. Additionally, results show changes in lipogenic and lipolytic rates in adipose tissue for ALS animals when compared to their respective controls. Altogether, the data presented herein corroborate with the literature by linking altered levels of PUFAs oxidation products in neurodegenerative diseases with altered energetic metabolism in ALS. In the future, a more extensive investigation of the hydroperoxide and hydroxide level in different tissues as well as the lipid metabolism must be done, which could lead to new therapeutic options for ALS patients

Introdução: Doenças cardiovasculares constituem importante causa de morte em todo mundo e a hipercolesterolemia está diretamente relacionada a este problema de saúde pública. A dieta desempenha papel importante neste processo e alguns alimentos, como o amaranto (Amaranthus cruentus L. BRSAlegria), têm mostrado capacidade de redução do colesterol plasmático. Estudos sugerem que este efeito está relacionado a peptídeos liberados durante a digestão das proteínas, os quais atuam na modulação do metabolismo lipídico. Considerando-se que os efeitos da digestão gastrointestinal e da absorção destes peptídeos são claramente complexos torna-se importante a realização de estudos visando avaliar bioacessibilidade e mecanismos de ação destes peptídeos nos locais alvo do organismo. Objetivo: Analisar a biodisponibilidade de peptídeos em modelos animais após ingestão de isolado proteico de amaranto e relacioná-la com parâmetros ligados ao metabolismo do colesterol. Métodos: O amaranto teve sua proteína isolada. Os peptídeos da proteína do amaranto foram analisados após digestão in vitro. Dois experimentos in vivo foram conduzidos: um de fase aguda e outro de média duração. No primeiro, o isolado proteico de amaranto foi administrado a ratos e os peptídeos no sangue foram monitorados por 2 horas para verificação de fragmentos que resistissem à digestão gastrointestinal. O experimento in vivo 2 consistiu na alimentação de 3 grupos de hamster, um com dieta recomendada pela AIN93 (grupo N) e dois com dietas hipercolesterolêmicas por 21 dias, contendo a proteína de amaranto como única proteína da ração (grupo I), comparada ao controle de caseína (grupo H). Neste experimento foram analisados no plasma: peptídeos, colesterol total e frações; nas fezes: colesterol total e ácidos biliares; no fígado: colesterol, lipídeos totais, ácidos graxos, atividade enzimática da Hmgcr, expressão de Hmgcr, Srebf2, Lxr, Abca1, Abcg8 e Ampk. Resultados e discussão: Foram identificados fragmentos peptídicos provenientes da digestão in vitro do isolado proteico de amaranto, e outras dezenas de sequencias peptídicas em ratos após administração aguda de amaranto foram analisadas. Destaca-se a identificação do peptídeo ALGV, presente em proteína do amaranto de acordo com banco de dados, e similar a fragmentos com ação hipocolesterolemizante. No sangue de hamsters foram encontrados seis peptídeos com 100 por cento de cobertura e similaridade a base de dados de proteínas de amaranto, merecendo investigação sobre seus efeitos. Verificou-se que o isolado proteico de amaranto foi capaz de suprimir a hipercolesterolemia quando a dieta hipercolesterolemizante foi introduzida em paralelo a este ingrediente, com valores inferiores em 72 por cento (triglicerídeos), 64 por cento (colesterol total), 80 por cento (LDL-c) do grupo I em relação ao grupo H. Foi observada ainda menor concentração de colesterol e lipídeos totais no fígado dos animais do grupo I em relação ao grupo H (177 x 464 mg de colesterol/100 g de tecido; 2,06 x 2,86 g de lipídeos/100 g de tecido, respectivamente). Parâmetros lipídicos do sangue, das fezes e do fígado foram similares aos do grupo N, cuja dieta seguiu a preconização para roedores. Foi observada maior excreção de colesterol total no grupo I em relação ao grupo H, mas não houve maior excreção de ácidos biliares nas fezes. Não houve mudança na expressão dos genes analisados neste estudo, mas o amaranto reduziu a atividade da enzima Hmgcr. Postulase que parâmetros como expressão de Ldlr e atividade da Acat sejam alterados pela ingestão de amaranto. O perfil de ácidos graxos também foi modificado de forma a se assimilar ao grupo N, porém deve-se verificar parâmetros inflamatórios devido à maior proporção de ácido araquidônico em relação aos demais grupos estudados. Conclusão: Verifica-se biodisponibilidade dos peptídeos do amaranto e ação hipocolesterolemizante e hipolipemiante em diversas vias metabólicas, promovendo proteção cardiovascular. / Introduction: Cardiovascular diseases are important causes of death worldwide, and hypercholesterolemia is directly related to this public health problem. Diet plays an important role in this process and some foods such as amaranth (Amaranthus cruentus L. BRS-Alegria) have been shown to reduce plasma cholesterol. Studies suggest that this effect is related to peptides released during the digestion of proteins, which would play an important role in the modulation of lipid metabolism. Considering that the effects of gastrointestinal digestion and the absorption of these peptides are clearly complex, it is important to carry out studies aiming to evaluate their bioaccessibility and evaluation of the mechanisms of action of these peptides in the target sites of the organism. Objective: To analyze the bioavailability of peptides in animal models after ingestion of amaranth protein isolate and to relate it to parameters associated to cholesterol metabolism. Methods: The amaranth was crushed, the flour was defatted and its protein isolated. Amaranth peptides were analysed after in vitro digestion. Two in vivo experiments were conducted: one of acute phase and one of medium duration. In the first, the amaranth protein isolate was administered to rats and the peptides in the blood were monitored for 2 hours to check for fragments that resisted gastrointestinal digestion. The in vivo experiment 2 consisted of feeding three groups of hamsters, one with a diet recommended by AIN93 (group N) and two with hypercholesterolemic diets for 21 days, containing amaranth protein as the only dietary protein (group I), compared to casein control (group H). In this experiment were analyzed in the plasma: peptides, total cholesterol and fractions; In feces: total cholesterol and bile acids; In the liver: cholesterol, total lipids, fatty acids, Hmgcr enzymatic activity, Hmgcr expression, Srebf-2, Lxr, Abca1, Abcg8 and Ampk. Results and discussion: Peptide fragments from the in vitro digestion of amaranth protein isolate were identified and other dozens of peptide sequences were found in rats after acute amaranth administration. A higher number of peptides were found in the serum in relation to the plasma of the animals. Remarkably, ALGV peptide was found in serum of rats. This peptide is present in amaranth protein, according to databases, and is similar to fragments that present hypocholesterolemic action. In the blood of hamsters it could be found six peptides with 100 per cent coverage and similarity to the database of amaranth proteins, deserving investigation about their effects. Amaranth protein was able to suppress hypercholesterolemia when the hypercholesterolemic diet was introduced in parallel with this ingredient, with values lower for group I in 72 per cent (triglycerides), 64 per cent (total cholesterol), 80 per cent (LDL-c) in relation to the H group. A lower concentration of cholesterol and total lipids were observed in the liver of the group I compared to the H group (177 x 464 mg cholesterol / 100 g of tissue, 2.06 x 2,86 g lipids / 100 g of tissue, respectively). Lipid parameters of blood, faeces and liver were similar to those of group N, whose diet followed the recommendation for rodents. There was greater excretion of total cholesterol in group I in relation to group H, but there was no greater excretion of bile acids in feces, indicating that the effect of amaranth protein may be due to increased transintestinal cholesterol excretion, decreased micellar solubilization of cholesterol and / or modification in the expression of cholesterol transport related proteins in the intestine. There was no change in the expression of the genes analyzed in this study, but amaranth reduced the activity of the Hmgcr enzyme. It is postulated that parameters such as Ldlr expression and Acat activity are altered by amaranth intake. The fatty acid profile was also modified in order to assimilate to the N group, but inflammatory parameters related to amaranth intake should be verified due to the higher proportion of arachidonic acid in relation to the higher proportion of arachidonic acid in relation to the other groups studied. Conclusion: The bioavailability of amaranth peptides and hypocholesterolemic and hypolipidemic activity in several metabolic pathways is verified, therefore promoting cardiovascular protection.

Orientador: Ricardo Utsunomia / Resumo: Pesticidas organofosforados são muito utilizados na agricultura, mas são tóxicos para muitos organismos incluindo os seres humanos, podendo atuar como desreguladores endócrinos e como agentes mutagênicos e carcinogênicos. Um dos efeitos desreguladores é a alteração do metabolismo lipídico, que está associado também ao desenvolvimento do câncer. Isso pode ser explicado pela necessidade das células tumorais em utilizar ácidos graxos para compor suas membranas em construção. Dentre os pesticidas organofosforados está o Diclorvós (DDVP), cujo alto consumo e utilização se baseia em sua grande eficácia e baixo custo. Neste sentido, o objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do praguicida DDVP sobre os marcadores moleculares do metabolismo lipídico (SREBP, SCAP, LIMP-II e CD36) na próstata de ratos após indução química pelo carcinógeno N-metil-N-nitrosoureia (MNU). Foram utilizados 32 ratos da linhagem Fischer 344, com idade de 90 dias. Os ratos foram separados em quatro grupos experimentais: Controle, DDVP, MNU, MNU+DDVP. Foram feitas análises histopatológicas, imuno-histoquímicas e Western Blotting na próstata ventral dos ratos. Na análise histopatológica, os grupos MNU e MNU+DDVP apresentaram 100% de incidência de hiperplasia. Para a avaliação morfométrico-estereológica, o grupo MNU+DDVP apresentou aumento do volume relativo de epitélio quando comparado com o grupo controle. As proteínas SREBP e CD36 foram encontradas nas células epiteliais luminais na região do Apare... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Organophosphate pesticides are widely used in agriculture, but are toxic to many organisms including humans, and can act as endocrine disrupters and as mutagenic and carcinogenic agents. One of the deregulatory effects is the alteration of lipid metabolism, which is also associated with cancer development. This may be explained by the need for tumor cells to use fatty acids to compose their building membranes. Among the organophosphate pesticides, Dichlorvos (DDVP) is one of the most effective and least expensive. Therefore, the objective of the present study was to evaluate the influence of the DDVP pesticide on the molecular markers of lipid metabolism (SREBP, SCAP, LIMP-II and CD36) in rat prostate after chemical induction by the carcinogen N-methyl-N-nitrosourea (MNU). Thirty two rats from the Fischer 344 lineage aged 90 days were used. The rats were separated into four experimental groups: Control, DDVP, MNU and MNU + DDVP. Histopathological, immunohistochemical and Western Blotting analyzes of the ventral prostate of rats were performed. In the histopathological analysis, the MNU and MNU + DDVP groups had a 100% incidence of hyperplasia. For the morphometric-stereological evaluation, the MNU + DDVP group showed an increase in the relative volume of epithelium when compared with the control group. The SREBP and CD36 proteins were found in luminal epithelial cells in the Golgi Apparatus region, SCAP mainly in the apical region, and LIMP II dispersed in the cytoplasm as cl... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre