Submitted by Barroso Patrícia (barroso.p2010@gmail.com) on 2013-04-04T20:10:18Z No. of bitstreams: 1 BATISTA, MC.pdf: 1852522 bytes, checksum: bed699e8555a1c9a88ac11e384126fe6 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-04T20:10:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BATISTA, MC.pdf: 1852522 bytes, checksum: bed699e8555a1c9a88ac11e384126fe6 (MD5) Previous issue date: 2011 / A tuberculose continua sendo um grave problema social e de saúde pública. O diagnóstico da tuberculose, em seus estágios iniciais, e da tuberculose, infecção latente, pode contribuir para o controle da doença. Novos métodos, conhecidos como IGRA, detectam a infecção tuberculosa latente, medindo interferongama em resposta à liberação de antígenos presentes no complexo Mycobacterium tuberculosis, mas ausente na vacina BCG e em micobactérias saprófitas. Estudos vêm demonstrando uma possível superioridade na especificidade desses testes em relação ao teste tuberculínico (PPD). O objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil de citocinas de indivíduos com diagnóstico de Tuberculose infecção latente e os antígenos de Mycobacterium tuberculosis no QuantiFERON®-TB Gold Test In Tube- Cellestis Limited, Carnegie, Austrália (QFT-IT). Os níveis plasmáticos das citocinas interferon-gama (IFN-), foram avaliados com o método ELISA do kit QuantiFERON®-TB Gold Test In Tube, enquanto que os de fator de necrose tumoral (TNF), fator de transformação do crescimento beta (TGF-β) e interleucina-12/23 (IL-12/23) foram quantificados pelo método de ELISA (Duo-Set-R&D Systems-USA) nos grupos estudados. Cerca de 30% dos indivíduos do grupo controle foram responsivos, produzindo IFN-, quando estimulados com os antígenos específicos do Mycobacterium tuberculosis (Mtb). No grupo latente, 29% dos indivíduos ficaram abaixo do cut-off do kit QFT-IT. Indivíduos do grupo tuberculose em tratamento responderam menos aos antígenos de Mtb, quando comparados com grupo sem tratamento. A produção de TGF-β foi elevada em todos os grupos. Em indivíduos com tuberculose sem tratamento, a produção mostrou-se elevada em relação ao grupo de indivíduos com tuberculose em tratamento. Os níveis de TNF dos indivíduos com tuberculose sem tratamento foram menores em comparação aos grupos controle e latente, ratificando dados anteriores sobre a importância desta citocina na formação e manutenção do granuloma. Observou-se também que a resposta a fitohemaglutinina (PHA) não difere significativamente entre os grupos, porém o grupo latente apresentou resposta mais baixa. A citocina IL-12/23 não foi detectada nos grupos estudados. O índice de estímulo entre o TST e o QFT-IT mostrou uma concordância moderada (0,6) pelo índice kappa. Os resultados obtidos sugerem que, em nossa população vacinada e endêmica, esses antígenos não são bons preditores de doença, portanto mais estudos são necessários para avaliar a resposta celular utilizando o QFT-IT em nossa população. / Universidade Federal da Bahia, Instituto de Ciências da Saúde

Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-09-17T11:35:25Z No. of bitstreams: 1 Tese Danielle Versao Final.pdf: 5521521 bytes, checksum: bcd4e1200342929a6452f7261e7193ee (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-17T11:35:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Danielle Versao Final.pdf: 5521521 bytes, checksum: bcd4e1200342929a6452f7261e7193ee (MD5) Previous issue date: 2011-08-31 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Estudos anteriores demonstraram que macrófagos de pacientes lepromatosos possuem um fenótipo regulador que contribui para a imunossupressão observada na hanseníase. IDO, CD86 e HLA-DR são moléculas altamente expressas por macrófagos de pacientes lepromatosos, como também o receptor “scavenger” CD163, regulado pela IL-10. Este trabalho foi realizado com o intuito de analisar a expressão de CD163 nas lesões cutâneas de pacientes polares da hanseníase e em monócitos infectados pelo Mycobacterium leprae (ML). Observamos um aumento de macrófagos CD163+IDO+ nas lesões e nas células isoladas do infiltrado inflamatório de pacientes LL. Ademais, durante o período de cultura de 6 dias dos macrófagos isolados das lesões lepromatosas, houve uma gradativa redução da expressão gênica de CD163, IDO e IL-10, assim como dos receptores de superfície CD163, CD209, HLA-DR, CD86 e CD14 observada por citometria de fluxo, fato que ocorreu concomitantemente com a saída de ML destas células. A expressão de células CD163+IDO+CD209+ aumentou em monócitos de indivíduos saudáveis, estimulados com ML irradiado obtido de extratos de lesão. Adição de citocalasina B na cultura de monócitos reduziu a expressão de CD163 nessas células, e, na presença de anti- CD163, a entrada de bactérias nos monócitos também foi reduzida. A adição da anti- IL-10 em cultura de monócitos de indivíduos sadios reduziu a expressão de CD163 até mesmo na presença do ML. Além disso, os níveis séricos de sCD163, IL-10 e heme estavam aumentados nos pacientes lepromatosos, em comparação com pacientes tuberculóides e indivíduos sadios, assim como os depósitos intracelulares de ferro. Estes resultados sugerem que o perfil de expressão de CD163 é importante na endocitose e sobrevivência do ML no polo lepromatoso da hanseníase. / According to prior studies, macrophages from lepromatous patients present a regulatory phenotype that contributes to the immunosuppression observed in the disease. IDO, CD86, and HLA-DR molecules are highly expressed by macrophages from lepromatous patients, as well the scavenger receptor CD163, regulated by IL- 10. The purpose of this study was to analyze CD163 expression on polar leprosy skin lesions and monocytes infected by Mycobacterium leprae. We observed an increased number of CD163+IDO+ in the lesions and cells isolated from the inflammatory infiltrate of LL patients. Moreover, during the 6-day culture of macrophages isolated from lepromatous lesions, the gene expression of CD163, IDO and IL-10 and the surface receptors CD163, CD209, HLA-DR, CD86, CD14 presented a gradual decrease, as shown by flow cytometry, simultaneously with the output of ML from these cells. The expression of IDO+CD163+CD209+ cells was augmented in monocytes from healthy individuals, stimulated with irradiated ML, obtained from extracts of lesion. The addition of cytochalasin B to monocyte culture reduced the expression of CD163 in these cells, and, in presence of anti-CD163, the bacterial input into monocytes was also reduced. The addition of anti-IL-10 in monocyte culture from healthy individuals led to a decrease at the expression of CD163, even in presence of ML. Besides, serum levels of sCD163, IL-10 and heme were increased in lepromatous patients, when compared to tuberculoid patients and healthy controls, while intracellular iron deposits were also augmented. These results suggest the relevance of CD163 expression profile for endocytosis and also for the survival of ML itself in lepromatous patients.

Made available in DSpace on 2014-05-29T12:13:41Z (GMT). No. of bitstreams: 4 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 69483.pdf: 23322936 bytes, checksum: da546ea400de59d62ce689a1527ed801 (MD5) 69483.pdf.txt: 321680 bytes, checksum: 6370ce3e181189c675b71fee7ec4e25c (MD5) 69483.pdf.jpg: 1479 bytes, checksum: bb823fd956b9bef3d685e4e511e60e9a (MD5) Previous issue date: 2014-05-07 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / A tuberculose (TB) é a principal causa de morbi-mortalidade por doença infecciosa no mundo. A cada ano ocorrem cerca de 9 milhões de novos casos com aproximadamente 2 milhões de mortes, sendo que, somente 1 em cada 10 indivíduos desenvolvem a doença. Fatores genéticos do hospedeiro podem influenciar no controle da susceptibilidade à doença. Desta forma, este trabalho teve como objetivo a caracterização de polimorfismos genéticos associados à imunopatogênese da TB. Para tanto, foram incluídos 172 pacientes com TB pulmonar ativa e 173 indivíduos controle sadios. Foi realizada a extração de DNA em todos os participantes deste estudo e os polimorfismos foram caracterizados para: NOS2A (-954G\2192C), IFNG (+874T\2192A), receptor de vitamina D (VDR) (TaqI, FokI, BsmI e ApaI) e proteína transportadora da vitamina D (DBP) (HaeIII e StyI). Não foi possível determinar nenhuma associação com o desenvolvimento da TB em relação aos polimortismos genéticos descritos neste estudo No entanto, quando ajustamos a casuística em relação ao sexo e raça podemos verificar que o polimorfismo no gene VDR determinado pela enzima de restrição TaqI foi associado com o desenvolvimento da TB em nossa população. Apesar de não observarmos significância estatística em relação aos outros polimorfismos deste gene VDR (FokI, BsmI e ApaI), foi possível obervar que cinco das dezesseis possíveis combinações genéticas foram consideradas raras, sendo seis delas encontrados em cerca de 74,8%, tanto nos pacientes com TB quanto nos indivíduos controle. Apesar de não terem sido observadas diferenças estatísticas nos polimorfismos dos genes avaliados neste estudo, estes devem ser considerados de extrema importância na compreensão da ação do sistema imune bem como a expressão de seus produtos no desenvolvimento da TB, em células infectadas ou não pelo Mtb. Desta forma, análises funcionais em relação a estes genes e seus produtos estão em andamento para tentarmos esclarecer esta associação e possivelmente assegurar seu papel no desenvolvimento da tuberculose em nossa população / Tuberculosis (TB) is the main cause of morbid-mortality by an infection disease worldwide. Each year 9 million new cases occur with approximately 2 million deaths, and among them, only 1 in each 10 persons will develop the disease. Host genetic factors can influence the control of the disease susceptibility, thus, the objective of this study was to characterize the genetic polymorphisms associated with the immunopathogenesis of TB. We included 172 active TB patients and 173 health control individuals. The DNA extraction was carried out in all the participants of this study and the polymorphisms were characterized for: NOS2 (-954G→C), IFNG (+874T→A), vitamin D receptor (VDR) (TaqI, FokI, BsmI e ApaI) and vitamin D binding protein (DBP) (HaeIII and StyI). It was not possible to demonstrate any association with the development of the TB regarding the genetic polymorphisms described in this study. However, when we adjusted the cases and healthy controls by matching sex and race we could verify statistical significance in the TaqI restriction site in the VDR gene, meaning that this restriction site may be associated with TB susceptibility in our population. Besides the lack of association among the other polymorphisms sites in theVDR gene (FokI, BsmI e ApaI), we could observe that five of sixteen genotype combinations were rare, although, six of them were found in aproximatelly 74,8% of TB cases and control individuals. Regardless of statistical differences among the evaluated polymorphisms in this study not being observed, those genes must be considered of extreme importance to understand the immune system actions as well as its product expression on TB development, in cells infected or not by Mtb. Thereby, studies in our population are in progress to try to identify the functional role of IFNG, NOS2A, VDR e DBP SNPs since their secreted products are relevant to the innate and adaptive immune response against Mycobacterium tuberculosis.

MOTA, A. P. P. Atividade antimicobacteriana do óleo essencial da casca de Cinnamomum zeylanicum e do trans-cinamaldeído e suas associações com rifampicina e isoniazida. 2017. 80 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-03-22T11:57:20Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_appmota.pdf: 2911137 bytes, checksum: 560bee89cb214ddef450e401f61fb281 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-03-22T11:57:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_appmota.pdf: 2911137 bytes, checksum: 560bee89cb214ddef450e401f61fb281 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-22T11:57:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_appmota.pdf: 2911137 bytes, checksum: 560bee89cb214ddef450e401f61fb281 (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / The World Health Organization (WHO) has estimated that 10.4 million new cases of tuberculosis (TB) occurred worldwide in 2015, with a steady increase in resistance cases. Considering TB control difficulties, it is necessary to discover new drugs, especially for resistant strains, and it is believed that medicinal plants, through their essential oils (EOs), are one of the alternatives for bioprospecting active substances, such as the EO extracted from the bark of Cinnamomum zeylanicum (EOCzey), popularly known as cinnamon, and trans-cinnamaldehyde (TCin), its compound, which has several therapeutic properties, such as antimicrobial, anti-inflammatory, and hypoglycemic action, among others. In this context, the present study evaluated the antimycobacterial action of EOCzey and TCin on sensitive and resistant clinical isolates (CI) of M. tuberculosis, as well as the effects of the associations between EOCzey and TCin and the drugs rifampicin (RIF) and isoniazid (INH) on the standard M. tuberculosis H37Rv strain. The Resazurin Microtiter Assay (REMA) technique was used to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of the compounds tested on nine M. tuberculosis CIs. The effects of the EOCzey / RIF, EOCzey / INH, TCin / RIF and TCin / INH associations on the standard M. tuberculosis H37Rv strain were evaluated according to the checkerboard method, determining the Fraction Inhibitory Concentration Index (FICi), in which the synergistic effect was observed with FICi values ≤ 0.5, additive effect with FICi >0.5 and ≤ 1 and antagonism with FICi >1.0. It was observed that EOCzey and TCin were able to inhibit the growth of all nine sensitive and resistant CIs with MIC values ranging from 9.75 μg / mL to 39 μg / mL. All four associations tested resulted in synergistic and additive effects, with no antagonistic effect. Both EOCzey / RIF and EOCzey / INH associations showed FICi values of 0.375 and 0.5, whereas the TCin / RIF and TCin / INH associations showed FICi values of 0.31, 0.375 and 0.5. / A Organização Mundial de Saúde (OMS) estimou a ocorrência de 10,4 milhões casos novos de tuberculose (TB) no mundo em 2015 com um aumento contínuo dos casos de resistência. Com a difilcudade de controle TB, existe a necessidade da descoberta de novos fármacos, especialmente sobre cepas resistentes e acredita-se que as plantas medicinais, através dos óleos essenciais (OEs), sejam uma das alternativas para bioprospecção de substâncias ativas, como o OE extraído da casca de Cinnamomum zeylanicum (OECzey), popularmente conhecida com canela, e o trans-cinamaldeído (TCin), seu composto, que possuem diversas propriedades terapêuticas, como ação antimicrobiana, anti-inflamatória, hipoglicemiante, entre outras. Nesse contexto, o presente estudo avaliou a ação antimicobacteriana do OECzey e do TCin sobre isolados clínicos (ICs) de M. tuberculosis, sensíveis e resistentes, como também os efeitos das associações entre o OECzey e TCin com os fármacos rifampicina (RIF) e isoniazida (INH) sob a cepa padrão M. tuberculosis H37Rv. Utilizou-se a técnica Resazurin Microtiter Assay (REMA) para determinação da concentração inibitória mínima (CIM) dos compostos testados sobre nove ICs de M. tuberculosis. Os efeitos das associações OECzey/RIF, OECzey/INH, TCin/RIF e TCin/INH sobre a cepa padrão M. tuberculosis H37Rv foram avaliadas de acordo com método Checkerboard, determinando-se o Índice de Concentração Inibitória Fracionada (IFIC), no qual efeito sinérgico foi observador com valores de IFIC ≤ 0,5, efeito aditivo com IFIC > 0,5 e ≤ 1 e antagonismo com IFIC > 1,0. Observou-se que OECzey e o TCin foram capazes de inibir o crescimento de todos os nove ICs, sensíveis e resistentes, com valores de CIM variando entre 9,75 μg/mL a 39 μg/mL. Todas as quatro associações testadas resultaram em efeito sinérgico e aditivo, com ausência efeito antagônico. Ambas associações OECzey/RIF e OECzey/INH apresentaram valores de ICIF de 0,375 e 0,5, enquanto que nas associações TCin/RIF e TCin/INH os valores de IFIC foram 0,31, 0,375 e 0,5.

O tratamento com antimicrobianos é a principal estratégia de controle da tuberculose (TB). Entretanto, o aumento do número de casos de TB com cepas de Mycobacterium tuberculosis resistente aos antimicrobianos cria um cenário que dificulta a cura do paciente e o controle da doença. Embora várias mutações em loci específicos tenham sido identificadas como base de resistência, outros mecanismos, como o sistema de efluxo, podem contribuir para a resistência e o estabelecimento dessas mutações. O objetivo deste estudo foi avaliar a contribuição do mecanismo de efluxo em isolados clínicos de M. tuberculosis resistentes aos principais antimicrobianos do esquema básico (isoniazida, INH; e rifampicina, RIF) e de multirresistência (ofloxacina, OFX; e amicacina, AMK). Três clássicos inibidores de bombas de efluxo - EPI - (verapamil, VP; tioridazina, TZ; e clorpromazina, CPZ) foram selecionados para detectar o efluxo. Primeiramente, foram analisadas três cepas MDR, duas pré-XDR e a cepa sensível de referência H37Rv. Foi utilizada a metodologia de checkerboard combinada com o tetrazolium microplate-based assay para analisar a interação entre os EPIs com os fármacos. Foi observado que os EPIs diminuem efetivamente a resistência aos antibióticos utilizados, com reduções de 4 a 64 vezes. Para avaliar a atividade do efluxo em tempo real foi utilizado o método fluorimétrico com o brometo de etídio (BrEt), em presença dos EPIs. Foi demonstrado que todas as cepas apresentaram efluxo intrínseco, porém a acumulação e o efluxo do BrEt foi mais evidente na cepa pre-XDR com resistência adicional a AMK. A quantificação transcricional do RNAm dos genes de bombas de efluxo (mmpl7, mmr, Rv1258, p55, efpA, Rv2459) e do regulador transcricional whib7, quando as cepas foram expostas às concentrações subinibitórias dos antibióticos, foi analisada por RT-qPCR. Houve um aumento do nível transcricional de todos os genes em uma cepa MDR e na cepa Pre-XDR com resistência adicional a OFX, quando expostas a pelo menos um dos fármacos envolvidos na resistência. / Treatment with antimicrobials is the main TB control strategy. However, the increase in the number of TB cases with Mycobacterium tuberculosis strains resistant to antimicrobial creates a scenario that hinders patient's healing and disease control. Although several genetic mutations in specific loci involved in drug resistance have been identified as base of resistance, other mechanisms such as efflux system may contribute to resistance and to the establishment of these mutations. The main goal of this study was to assess the overall contribution of efflux mechanism in M. tuberculosis clinical isolates resistant to the main first line drugs (isoniazid, INH; and rifampicin, RIF) and second line (ofloxacin, OFX; and amikacin, AMK). Three classical inhibitors of efflux pumps -EPI- (verapamil, VP; thioridazine, TZ; and chlorpromazine, CPZ) were selected to detect the efflux. Firstly, we analyzed three MDR strains, two Pre-XDR and an H37Rv reference susceptible strain. We used the checkerboard method combined with the tetrazolium microplate-based assay to analyze the interaction between EPIs and drugs. It was observed that EPIs effectively reduce the MIC of antibiotics, with four-fold to 64-fold reduction. Efflux activity was evaluated in real-time by fluorimetric method with ethidium bromide (EtBr), in the presence of EPIs. All strains showed intrinsic efflux, however the accumulation and efflux of EtBr was evident most in the pre-XDR strain with additional resistance to AMK. The quantification of mRNA transcriptional level of efflux pump genes (mmpl7, mmr, Rv1258, p55, efpA, Rv2459) and the transcriptional regulator, whib7, when strains were exposed to antibiotics subinibitory concentrations was examined by RT-qPCR. There was an increase in the transcriptional level of all genes in a MDR strain and pre-XDR strain with additional OFX resistance, when exposed to at least one of the drugs involved in resistance, INH, RIF or OFX. However, there was no correlation between the reduction of antibiotic resistance levels with the EPI and the expression of genes encoding the pumps. Finally, in order to demonstrate the time to detection (TTD) of the bacterial growth in the antimicrobial environment in presence and absence of EPI, were applied BACTECTM MGITTM system 960 and Epicenter V5.53A equipped with software TB eXiST. Were used the MDR strains, a pre-XDR strain with additional resistance to AMK, and a monorresistant to OFX strain. In general, strains have showed a slower grew in the presence of VP, TZ and/or CPZ when combined with INH or RIF. This suggests that efflux is essential for the strain to grow faster in the presence of certain antibiotics. In addition, the efflux can act synergistically with the presence of mutations in order to reduce the biological cost of the bacteria and promoting growth at high drug concentrations. In conclusion, the described results demonstrated that the efflux system plays an important role in resistance to antibiotics used in the treatment of TB, and that the use of efflux inhibitors may potentiate the antimicrobial activity.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estimause que um terco da populacao mundial esteja infectado pelo bacilo. Sabe-se que 10% dos adultos infectados pelo M. tuberculosis adoecerao, 5% logo apos a primoinfeccao e os outros 5% por reativacao do bacilo ou nova exposicao. O risco de adoecimento e maior nos dois primeiros anos apos a infeccao, e aproximadamente 90% dos casos de adoecimento dos contatos ocorre neste periodo. O presente estudo prospectivo teve como objetivo avaliar as caracteristicas epidemiologicas e demograficas dos contatos de pacientes com tuberculose e analisar os fatores de risco para infeccao latente e progressao para o adoecimento por tuberculose acompanhada por um periodo de dois anos no Instituto Clemente Ferreira em São Paulo. Foram analisados 339 contatos dos 140 casos indices. Realizaram a prova tuberculinica (PT) 233 adultos e 106 criancas. A taxa de ILTB entre os contatos foi de 64% e existiu uma forte associacao entre infeccao latente e a positividade da baciloscopia do caso indice. Nao se observou correlacao entre a incidencia de infeccao latente ou adoecimento entre os contatos com os outros fatores estudados (grau de convivencia, grau de parentesco, doencas associadas, tempo de contato com o caso indice bacilifero, tabagismo e etilismo). O tratamento da infeccao latente pelo Mtb foi fator de maior relevancia na progressao para tuberculose ativa entre contatos. A taxa de adoecimento entre todos os contatos foi de 5% e de 8,3% entre os reatores a prova tuberculinica. Entre todos os contatos que receberam tratamento profilatico nenhum adoeceu. Dos 87 contatos que nao receberam tratamento preventivo, 21% adoeceram. Das 11 criancas em que nao foi indicado o tratamento da infeccao latente, tres adoeceram. Entre os contatos adultos dos 76 que nao receberam tratamento para ILTB, 15 adoeceram. O tratamento da tuberculose latente e o diagnostico precoce da tuberculose ativa sao fundamentais para bloquear a transmissao que sustenta a epidemia da TB dessa forma instituir o tratamento precoce da doenca. Neste estudo observamos que 100% daqueles que receberam quimioprofilaxia nao adoeceram o que reforca a importancia do acompanhamento dos contatos e tratamento da infeccao latente nessa populacao / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:28:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327744.pdf: 3387181 bytes, checksum: f953d00b12dd357296a0d6cf6ed03852 (MD5) Previous issue date: 2014 / Este trabalho teve como objetivo principal a síntese e caracterização de 22 chalconas derivadas do 4-carboxibenzaldeído, e avaliação da sua atividade biológica frente às enzimas PtpA e PtpB de Mycobacterium tuberculosis. As chalconas foram sintetizadas através do método de condensação de Claisen-Schmidt, utilizando quatro condições reacionais distintas. Todas as chalconas foram caracterizadas através de espectros de ressonância magnética nuclear (RMN) de 1H e 13C, ponto de fusão e espectros de massa (EM). As chalconas obtidas por via ácida (VA) forneceram primeiramente produtos esterificados, que foram hidrolisados para obter as chalconas com carboxila livre, que foram confirmadas pelo ponto de fusão. Entre as 22 chalconas obtidas, 13 são inéditas Q1VA, Q2VA, Q5VA, Q18VA, Q16VB, Q17VB, Q20VB, Q22VB, Q26VB, Q7VBR, Q3MC, Q4MC e Q9MC. As chalconas Q22VB e Q26VB foram as que apresentaram melhor atividade biológica frente às enzimas PtpA e PtpB de Mycobacterium tuberculosis. O composto Q23VB, análogo ao composto (E)-4-(3-(naftalen-2-il)-3-oxoprop-1-en-il) benzóico (QPadrão) anteriormente publicado pelo grupo e que tem alta atividade frente a estas enzimas, não teve atividade significativa.<br> / Abstract : This work aimed to the synthesis and characterization of 22 chalcones derived from 4 - carboxybenzaldehyde , and evaluation of their biological activity against PTPA and PTPB Mycobacterium tuberculosis enzymes . The chalcones were synthesized by the method of Claisen -Schmidt condensation using four different reaction conditions . All chalcones were characterized by nuclear magnetic resonance spectra ( NMR) 1H and 13C NMR , melting point and mass spectra ( MS). The chalcones obtained via acid (VA) provided first esterified product , which was hydrolyzed to obtain chalcones with free carboxyl , which was confirmed by melting point. Among the 22 chalcones obtained , 13 are new Q1VA , Q2VA , Q5VA , Q18VA , Q16VB , Q17VB , Q20VB , Q22VB , Q26VB , Q7VBR , Q3MC , Q4MC and Q9MC . The Q22VB and Q26VB chalcones showed the best biological activity against PTPA and PTPB Mycobacterium tuberculosis enzymes . The compound Q23VB , analogous to compound (E)-4-(3-(naftalen-2-il)-3-oxoprop-1-en-il) benzóico (QPadrão) previously published by the group and has high activity against these enzymes had no significant activity.

Made available in DSpace on 2012-05-07T14:43:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000042.pdf: 1706671 bytes, checksum: dc956801bf26bdb2686d937802c8fb3f (MD5) Previous issue date: 2008 / O diagnóstico da tuberculose (TB) se baseia em dados clínicos e epidemiológicos associados aos métodoslaboratoriais (baciloscopia, cultura de materiais biológicos e TTI - Teste Tuberculínico Intradérmico) e radiografia de tórax. Em crianças, por serem paucibacilares e muitas vezes apresentarem reações cruzadas ao TST, devido à vacinação recente com BCG e à exposição à micobactérias ambientais, existem dificuldades maiores para obter esse diagnóstico. Diante disso, métodos imunológicos têm sido propostos. Dentre eles, destacam-se os baseados em antígenos recombinantes específicos do complexo M. tuberculosis: o ESAT-6 (early secretory antigen target 6) e o CFP- 10 (culture filtrate protein 10), que são potentes indutores de IFN- . Baseado nisso, o nosso estudo teve como objetivos: avaliar os níveis de IFN- , produzidos por células sanguíneas induzidos por ESAT-6, CFP-10 e PPD in vitro, através de ELISA (enzyme linked immunosorbent assay), em pacientes pediátricos e determinar a sensibilidade e a especificidade dos ensaios definindo qual o teste mais apropriado para o diagnóstico. Foram selecionadas, no Hospital das Clínicas e no Instituto Professor Fernando Figueira-PE, crianças com idade de 3 a 15 anos, de ambos os sexos, e de acordo com os fatores de inclusão foram distribuídas em grupos de TB doença (n = 21) e TB latente (n = 17). O grupo controle negativo (n=21) foi formado por crianças com ausência de sinais e sintomas de TB e sem história de contato com adulto bacilífero. Os níveis de IFN- contra os antígenos ESAT-6, CFP-10 e PPD in vitro foram quantificados e a curva ROC (receiving operating characteristics) foi utilizada para avaliar a capacidade desses antígenos de diagnosticar TB infantil (latente e/ou doença). O único antígeno que demonstrou essa capacidade foi o ESAT-6 (P 0,05), tanto para TB latente (AAC

Made available in DSpace on 2012-09-06T01:12:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 156.pdf: 1949313 bytes, checksum: a974aa632b3267e55b2211756c219777 (MD5) Previous issue date: 1999 / Aborda as conseqüências sobre a saúde dos profissionais de enfermagem e medicina decorrentes do distanciamento entre o trabalho prescrito e o trabalho real. Analisa as dificuldades vivenciadas por estes profissionais no âmbito hospitalar frente ao recrudescimento da tuberculose e suas relaçoes com a organizaçao e o processo de trabalho. Trata-se de um estudo de caso, desenvolvido no serviço de tisiopneumologia de um hospital público universitário, localizado no Município do Rio de Janeiro. O referencial teórico-metodológico baseia-se em conceitos da saúde do trabalhador e da ergonomia contemporânea. O foco de discussao centra-se nas situaçoes de exposiçao ocupacional ao agente etiologico da tuberculose. A abordagem do campo orientou-se pela metodologia da Análise Ergonômica do Trabalho (AET), com ênfase na análise de demanda e da atividade. Observa-se que as condiçoes do ambiente de trabalho possuem determinantes relacionados aos aspectos organizacionais. A unidade de internaçao e o setor de broncoscopia foram identificados como as principais áreas do serviço que oferecem maior risco de exposiçao ocupacional ao Mycobacterium tuberculosis. Dentre os casos de tuberculose ocorridos em profissionais de saúde do hospital, estas foram as áreas do serviço que concentraram maior número de casos. Verificou-se que no serviço de tisiopneumologia as condiçoes do ambiente e a forma pela qual o serviço está organizado constituem os principais condicionantes das situaçoes de exposiçao ocupacional ao M. tuberculosis. Considera-se premente a necessidade de reestruturaçao tanto das instalaçoes físicas, como dos procedimentos assistenciais. No que diz respeito à estrutura física, ressalta-se a necessidade de maior número de áreas de isolamento. Quanto aos aspectos assistenciais, destaca-se a necessidade dos profissionais envolvidos tornarem-se mais sensíveis à problemática da tuberculose hospitalar, no sentido de agilizar a identificaçao de pacientes bacilíferos e ainstituir medidas de proteçao nos casos suspeitos até confirmaçao laboratorial.

Made available in DSpace on 2014-12-05T18:41:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) carla_freitas_ioc_dout_2014.pdf: 2452947 bytes, checksum: a652971a9d288c473c5d3b704f051ada (MD5) Previous issue date: 2014-11-18 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Corpúsculos lipídicos (CLs) são organelas citoplasmáticas altamente associadas à resposta inflamatória. Eles estão presentes em diversos tipos celulares e podem aumentar em número e/ou tamanho frente à situações infecciosas. Também altamente envolvidos com os fenômenos inflamatórios estão os inflamassomos. Classicamente, esses complexos moleculares são formados por um tipo de receptor tipo Nod (NLR), uma proteína adaptadora (geralmente ASC) e a enzima caspase-1 ativada. A reunião destas proteínas e a ativação de caspase-1 levam à clivagem das pro-formas de IL-1\03B2 e de IL-18 em suas formas maduras prontas para liberação. Apesar do avanço no conhecimento da biologia destas duas estruturas, corpúsculos lipídicos e inflamassomos, nada foi descrito sobre uma possível interação entre elas. Utilizando um modelo de estudo em macrófagos derivados de medula óssea de camundongos C57Bl/6 e infecção com Mycobacterium bovis BCG buscamos pesquisar se existe essa interação e de que maneira isso ocorreria. Num primeiro momento, pesquisamos a influência de receptores tipo nod e proteínas relacionadas, na biogêsene de CLs, na liberação de IL-1\03B2 e de eicosanóides. Observamos que a infecção dos macrófagos com BCG é capaz de induzir liberação de IL-1\03B2 e ativação de caspase-1, caracterizando ativação de inflamassomos. Vimos que a ausência de Nod1, Nod2, Rip2, IL-1R1 e IL-18R não interfere na biogênese de CL, nem na liberação de IL-1\03B2 e de PGE2 e LTB4. A ausência de ASC, caspase-1 e o bloqueio de NLRP3 e P2X7 potencializam a formação de corpúsculos lipídicos induzida por BCG A ausência de ASC e caspase-1 não altera a liberação de eicosanóides e o bloqueio de NLRP3 reduz a liberação de IL-1\03B2 e de PGE2. Vimos que ATP é capaz de induzir a biogênese de corpúsculos lipídicos de maneira dependente de P2X7. Concluimos que a presença de proteínas envolvidas na via dos inflamassomos regula negativamente a biogênese de corpúsculo lipídicos. Corpúsculos lipídicos são conhecidos por compartimentalizar diversas proteínas envolvidas em importantes fenômenos celulares, dependendo do tipo celular e do estímulo. Sendo assim, no segundo bloco, avaliamos se os corpúsculos gerados pela infecção com BCG seriam capazes de armazenar NLRs e proteínas associadas. Também avaliamos se a inibição da formação de corpúsculos lipídicos teria impacto sobre a ativação de inflamassomos e liberação de mediadores inflamatórios. Observamos a presença de NLRP3, caspase-1, IL-1\03B2, Nod1, Nod2 e Rip2, mas não de ASC, nos corpúsculos lipídicos. Também vimos que a redução da formação de CL induzida por BCG leva à redução da liberação e da síntese de IL-1\03B2, mas não interfere na atividade de caspase-1. Diminui também a liberação de citocinas pro e anti-inflamatórias, além de PGE2. Baseado em nossos resultados, concluimos que existe sim uma relação entre CLs e inflamassomos, onde o segundo pode regular negativamente o primeiro e CLs podem servir de plataforma, pelo menos transitória, para a localização de proteínas da via dos NLRs. O avanço no entendimento das funções de inflamassomos e corpúsculos lipídicos pode colaborar para a geração de estratégias de combate às patologias associadas à estas duas estruturas / Pathogen - triggered dysregulation of host - cell lipid metabolism is emerging as a key feature in the pathogenesis of mycobacterial infection. Accumulating evidence suggests that modulation of host lipid metabolism through mycobacteria - induced lipid body (LB) formation is an important mechanism for mycobacterial survival and growth. However the mechanisms involved in lipid body biogenesis are still not completely understood. Mycobacterial - induced inflammasome activation of caspase - 1 and consequent secretion of IL - 1β and IL - 18 in macrophages has been demonstrated as a host - defense mechanism. In the present study we investigated the participation of inflammasomes in lipid body biogenesis and function during infection with Mycobacterium bovis BCG in macrophages. W e observed IL - 1 β release and caspase - 1 activation in bone marrow macrophage, featuring inflammasome activation induced by BCG. Nod1, Nod2, Rip2, IL - 1R1 and IL - 18R doesn't influence lipid bodies biogenesis, neither IL - 1 β nor PGE 2 and LTB 4 release induced by BCG . ASC and caspase - 1 absence and the block of NLRP3 and P2X 7 leads to increase lipid bodies number induced by BCG . The absence of caspase - 1 and ASC inhibited the release of IL - 1β induced by BCG , but does not alter the release of eicosanoids. Blocking NLRP3 reduces the release of both, IL - 1β and PGE 2 . Using an activator of inflam ma somes , ATP, we observed an indu ce d lipid body biogenesis in a P2X 7 - depende nt manner . Activation of inflam m asome s by L PS and ATP leads to increased release of eicosanoids, besides the formati on of LB s. W e conclude that the presence of proteins involved in the pathway of inflamassom e s negatively regulate s biogenesis of lipid bodies. Lipid bodies are known to compartmentalize many different proteins associated with cell signaling , depending on t he cell type and stimulus. Thus , in the second block , we assessed whether the LBs generated by infection with BCG would be able to contain NLR s and associated proteins. We also evaluated whether the inhibition of lipid body for mation would impact inflam m asome s activation and re lease of inflammatory mediators. We observed NLRP3, caspase - 1 , IL - 1β, Nod1, Nod2 and RIP2 , but not ASC are associated wi th lipid bodies. Also , we have that the reduction in the formation of LC induced by BCG leads to reduced synthesis and release of IL - 1β but did not interf ere in the activity of caspase - 1. It also reduces the release of cytokines , in addition to PGE 2 . Base d o n our results , we conclude that inflam m asome s activation could negatively regulate the lipid bodies biogenesis . Moreover, lipid bodies could be site of localization to NLRs and associated - protein , but they doesn't interfere in inflammasomes activation, although the IL - 1β release is reduced by lipid bobies numbers decreased. The knowledge of inflammasome and lipid bodies biology could be useful to generate new approaches to diseases associated with these structures