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Vacinas contra leptospirose: potencial imunoprotetor do antígeno OmpL37 / Vaccines against leptospirosis: immunoprotective potential of the OmpL37 antigen

Oliveira, Thaís Larré 07 August 2014 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-08-29T11:52:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_thais_larre_oliveira.pdf: 616408 bytes, checksum: 404ac55ee19b90246334aac10658a361 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-08-29T19:49:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_thais_larre_oliveira.pdf: 616408 bytes, checksum: 404ac55ee19b90246334aac10658a361 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-08-29T19:49:43Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_thais_larre_oliveira.pdf: 616408 bytes, checksum: 404ac55ee19b90246334aac10658a361 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-29T19:49:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_thais_larre_oliveira.pdf: 616408 bytes, checksum: 404ac55ee19b90246334aac10658a361 (MD5) Previous issue date: 2014-08-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A leptospirose é uma doença infecciosa emergente causada por espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira, com complicações humana e veterinária. Essa doença é transmitida através do contato direto com um animal reservatório ou com o ambiente contaminado com a urina destes animais. O desenvolvimento de vacinas seguras e multivalentes contra leptospirose, que substituam as bacterinas existentes, permanece um desafio. Bacterinas são reatogênicas e conferem imunidade sorovar-específica e de curta duração. Esforços para o desenvolvimento de vacinas recombinantes tem focado em proteínas de membrana externa (OMPs). A proteína de membrana externa OmpL37 é conservada entre diferentes sorovares de Leptospira e atua na adesão aos tecidos do hospedeiro. Neste estudo, nós relatamos pela primeira vez, a avaliação do potencial imunoprotetor de OmpL37 como antígeno vacinal em hamsters, sob diferentes estratégias: vacina de subunidade, vacina de DNA e prime-boost. A caracterização da resposta imune através de ELISA indireto e qRT-PCR demonstrou que os maiores níveis de IgG foram estimulados pela vacina de subunidade, a qual também induziu resposta inflamatória. A vacina de DNA falhou em induzir imunidade humoral, porém também estimulou TNF-α. Apesar da resposta induzida, nenhuma formulação protegeu significativamente os animais contra a doença. / Leptospirosis is an emerging infectious disease caused by pathogenic spirochetes of Leptospira genus, of human and veterinary concern. This infectious disease is transmitted through direct contact with an animal reservoir or an environmental contaminated with their urine. The development of safe and multivalent vaccines against leptospirosis, which replace existing bacterins, remains a challenge. Bacterins are reactogenic and afford serovar specific and short-term immunity. Efforts to develop recombinant vaccines against leptospirosis have focused on outer membrane proteins (OMPs). The outer membrane protein OmpL37 is conserved among different Leptospira serovars and plays a role in adherence to host tissues. In this study we report for the first time, the evaluation of OmpL37 immunoprotective potential as a vaccine antigen in hamsters, under different strategies: subunit vaccine, DNA vaccine and prime-boost. The characterization of the immune response by indirect ELISA and qRT-PCR showed that higher levels of IgG were stimulated by the vaccine subunit, which also induced an inflammatory response. The DNA vaccine failed to induce humoral immunity, but also stimulated TNF-α. Despite the induced response, no formulation significantly protected the animals against the disease.
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Novas abordagens para vacinação animal contra a leptospirose: vacina de DNA com LioL32 e a utilização de IgY / New approaches for animal vaccination against leptospirosis: DNA vaccine with LipL32 and the use of IgY

Colonetti, Karina 27 February 2015 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-08-29T13:03:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_karina_colonetti.pdf: 1293824 bytes, checksum: 7b2f2dd5717e841df6224f67290648ff (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-08-29T19:50:07Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_karina_colonetti.pdf: 1293824 bytes, checksum: 7b2f2dd5717e841df6224f67290648ff (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-08-29T19:50:15Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_karina_colonetti.pdf: 1293824 bytes, checksum: 7b2f2dd5717e841df6224f67290648ff (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-29T19:50:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_karina_colonetti.pdf: 1293824 bytes, checksum: 7b2f2dd5717e841df6224f67290648ff (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A leptospirose humana e animal é uma doença de ocorrência mundial. Várias tentativas tem sido realizadas visando o desenvolvimento de novas abordagens para a prevenção, diagnóstico e tratamento da doença.... / The human and animal leptospirosis diseases are both worldwide spread......
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Novas abordagens para o desenvolvimento de uma vacina contra a leptospirose / New approaches for the development of a vaccine against leptospirosis

Seixas Neto, Amilton 06 August 2014 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-08-30T12:11:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_amilton_seixas_neto.pdf: 1214618 bytes, checksum: 70b8eeecc3cf0dfb3f4b6426f0b70ca4 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-01T19:11:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tese_amilton_seixas_neto.pdf: 1214618 bytes, checksum: 70b8eeecc3cf0dfb3f4b6426f0b70ca4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-01T19:12:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tese_amilton_seixas_neto.pdf: 1214618 bytes, checksum: 70b8eeecc3cf0dfb3f4b6426f0b70ca4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-01T19:12:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tese_amilton_seixas_neto.pdf: 1214618 bytes, checksum: 70b8eeecc3cf0dfb3f4b6426f0b70ca4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-08-06 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / A leptospirose é uma zoonose que possui distribuição mundial, causando um importante impacto econômico no setor agropecuário. Atualmente, as vacinas empregadas para a prevenção da enfermidade são formuladas com culturas de leptospiras inteiras inativadas, as quais possuem sucesso limitado, já que induzem uma imunidade de curta duração e proteção sorovar-específica. Resultados preliminares revelaram que fragmentos recombinantes das proteínas Ligs (Leptospiral immunoglobulin-like) são antigênicas, imunogênicas e conferem proteção total ou parcial contra o desafio homólogo em hamsters. Dessa forma, fragmentos rLigs são candidatos potenciais para uma vacina de subunidade contra a leptospirose humana e animal. Assim sendo, a proposta deste projeto foi avaliar preparações vacinais com as proteínas recombinantes LigA625-1224aa (rLigANI), LigB131-649aa (rLigBRep), LigB625-1044aa (rLigB7-11) e LigA131-1224aa (rLigAFull) quando administradas com Hidróxido de Alumínio como adjuvante, individualmente ou combinadas, a fim de identificar quais formulações serão capazes de induzir uma resposta protetora contra o desafio homólogo. Hamsters machos e fêmeas foram imunizados com as preparações através da via intramuscular, nos dias 0 e 14, e o desafio homólogo foi realizado através da via intraperitoneal, no dia 28, utilizando Leptospira interrogans sorovar Copenhageni cepa Fiocruz L1-130. Após a expressão e purificação das quatro proteínas, obteve-se quatro lotes com pureza de 90%. Todas as quatro proteínas recombinantes apresentaram antigenicidade, reagindo contra soro de humanos e animal convalescentes de leptospirose. A imunização dos hamsters contendo as preparações com rLigANI, rLigBRep, rLigB7-11 e rLigAFull conferiram proteções variáveis (0-100%) contra o desafio homólogo. Embora nenhuma preparação tenha induzido a uma proteção esterilizante, evidenciada através das técnicas de reisolamento e imunofluorescência, a associação entre rLigANI e rLigBRep foi capaz de conferir proteção significativa (p<0,05) em todos os experimentos. Em contrapartida, o fragmento inteiro de LigA, assim como rLigB7-11, não conferiram proteção. Nosso estudo propôs uma nova abordagem para o desenvolvimento de uma vacina recombinante contra a leptospirose. É o primeiro estudo que testou a proteína LigA recombinante em sua forma inteira. Além disso, foi possível obter a sua expressão na forma solúvel. Embora a proteína obtida tenha sido reconhecida por soros de humanos convalescentes in vitro, foi capaz de conferir apenas níveis de sobrevivência significativa (p<0,05) aos animais desafiados, mas não em relação à mortalidade. Por outro lado, a associação entre rLigBRep e rLigANI, outra abordagem inédita, demonstrou que mesmo testando-se em diferentes doses (40g ou 60g) de cada alvo, tanto a análise de mortalidade quanto a de sobrevivência revelou resultados significativos (p<0,01) em três dos cinco experimentos realizados. Os resultados obtidos em nosso estudo representam uma contribuição importante para o desenvolvimento de uma vacina contra a leptospirose. / Leptospirosis is a worldwide zoonosis, causing a major economic impact on the agricultural sector. Currently, the vaccines used to prevent disease in cattle are formulated with inactivated Leptospira whole-cell bacterins, which have limited success, since they induce an immunity of short duration and serovar-specific protection. Preliminary results from our group showed that recombinant fragments of Lig (leptospiral immunoglobulin-like) proteins are antigenic, immunogenic and confer full or partial protection against homologous challenge in hamster model. Thus, rLigs fragments are potential candidates for a subunit vaccine against human and animal leptospirosis. Therefore, the purpose of this study was to evaluate vaccine preparations with recombinant proteins LigA625-1224aa (rLigANI), LigB131-649aa (rLigBRep), LigB625-1044aa (rLigB7-11) and LigA131-1224aa (rLigAFull) when administered with Alum Hydroxide as adjuvant, either individually or combined, in order to identify formulations that are capable of inducing a protective response against homologous challenge. Male and female hamsters were immunized with the preparations by intramuscular injection on days 0 and 14, and the homologous challenge was performed using Leptospira interrogans serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130, by intraperitoneal injection on day 28. Following expression and purification of the four proteins were obtained four batches with a purity of 90%. All four recombinant proteins showed antigenicity, reacting against human sera with convalescent leptospirosis. Immunization of hamsters with preparations containing rLigANI, rLigBRep, rLigB7-11, and rLigAFull conferred variable protection (0-100%) against homologous challenge. Although no preparation has induced a sterilizing protection, evidenced by the isolation and immunofluorescence techniques, the association between rLigANI and rLigBRep was able to confer significant protection (p <0.05) in all experiments. In contrast, the LigAFull as well as rLigB7-11, did not provide protection. Our study has proposed a new approach for the development of a recombinant vaccine against bovine leptospirosis. It is the first study that tested the rLigA in its entire form. Furthermore, it was possible to obtain expression in soluble form. Although the protein obtained has been recognized by sera from convalescent human in vitro, it was only capable of conferring significant levels of survival (p <0.05) to challenged animals but not in relation to mortality. Moreover, the association between rLigBRep and rLigANI, another novel approach, testing showed that even at different doses (40 g ou 60 g) of each target, both the analysis of the mortality and survival showed significant results (p <0.01) in three of the five experiments. The results obtained in our study represent an important contribution to the development of a vaccine against leptospirosis.
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Desenvolvimento de métodos imunoquímicos e moleculares para o diagnóstico da neosporose / Development of immunochemical and molecular methods for the diagnosis of neosporosis

Sá, Gizele Lima de 16 March 2016 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-08-30T13:40:29Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_gizele_lima_de_sa.pdf: 1115362 bytes, checksum: 4fe5eecfaee189766be87ff59c7e2a47 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-01T19:13:07Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tese_gizele_lima_de_sa.pdf: 1115362 bytes, checksum: 4fe5eecfaee189766be87ff59c7e2a47 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-01T19:13:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tese_gizele_lima_de_sa.pdf: 1115362 bytes, checksum: 4fe5eecfaee189766be87ff59c7e2a47 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-01T19:13:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tese_gizele_lima_de_sa.pdf: 1115362 bytes, checksum: 4fe5eecfaee189766be87ff59c7e2a47 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-16 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / O Neospora caninum é um protozoário filogenéticamente relacionado a vários coccídeos de importância médico veterinária, além de ser um parasito intracelular obrigatório capaz de causar abortamentos em bovinos e paralisia neoromuscular em cães. A interação ligantes/receptores são requisitos que permitem que o parasito explore sua capacidade invasiva, sendo o contato inicial mediado por proteínas de superfície imunodominantes como Nc-p43 e Nc-p29. O estudo de antígenos e proteínas recombinantes de N. caninum gerou uma série de informações para aprimorar o diagnóstico e diferenciação deste protozoário e demais agentes a ele relacionados, principalmente com relação ao Toxoplasma gondii. No presente trabalho foi realizada uma revisão bibliográfica das proteínas envolvidas na interação hospedeiro-parasito utilizadas como alvos vacinais e na aplicação em testes diagnósticos devido a sua especificidade. Dentre as proteínas descritas, os antígenos de superfície Nc-p43 e Nc-p29 são amplamente estudados devido a sua especificidade e capacidade de induzer uma resposta imune protetiva, além de não apresentar reação cruzada com outros parasitos Apicomplexas quando utilizadas em ensaios diagnósticos. Frente a isso, propomos a expressão das proteínas específicas de N. caninum, Nc-p43 e Nc-p29 em sistema procarioto, para avaliar sua antigenicidade frente a soros de animais naturalmente infectados por N. caninum e especificidade quando testados frente a soros de animais infectados por T. gondii. A proteína rNc-p43 foi utilizada na produção de um anticorpo policlonal, que foi purificado, conjugado a peroxidase (HPR) e isotiocianato de fluoresceína (FITC) afim de detectar as proteínas recombinantes e nativas Nc-p43, espectivamente. pAb e pAb/HRP foram capazes de reconhecer rNcp-43, enquanto pAb/FITC se mostrou eficiente na imunomarcação do complexo apical de taquizoítos. Um ensaio imunoenzimático de bloqueio (b-ELISA) foi realizado para avaliar a performance do pAb/HRP como ferramenta de diagnóstico. A porcentagem de inibição média para as amostras de soros positivos e negativos de bovinos com neosporose obteve diferença estatística (P <0,0001). Estes resultados sugerem que o pAb pode ligar-se aos mesmos epítopos da Ncp-43 que os anticorpos anti-N. caninum de amostras positivas testadas. O b-ELISA utilizando o pAb/HRP representa uma opção interessante aos testes de diagnóstico disponíveis para a neosporose, uma vez que menos passos estão envolvidos na sua realização e seu formato evita a reatividade cruzada com anticorpos anti-espécie específicos. Em resumo, este trabalho descreve a clonagem e expressão das proteínas Nc-p43 e Nc-p29 de N. caninum em sistema procarioto, a produção de um anticorpo policlonal monoespecífico contra a proteína recombinante Nc-p43 e a avaliação de sua aplicabilidade como ferramenta no diagnóstico para neosporose. / Neospora caninum is a protozoan phylogenetically related to several coccidia with importance in veterinary medicine. This obligate intracellular parasite causes abortions in cattle and neoromuscular paralysis in dogs. Interaction ligand/receiver are required that allow the parasite explore your ability invasive, being the initial contact mediated for immunodominant surface proteins as Ncp43 and Nc-p29. The study of antigens and recombinant proteins of N. caninum have generated a serie of informations aiming the improvement of diagnosis and differentiation of this protozoan and other agents related to it, especially Toxoplasma gondii.In the present work was carried out a literature review focusing in the proteins involved in host-parasite interaction used as vaccine targets and application in diagnostic tests due to its specificity. Among the described proteins, antigens of surface Nc-p43 and Nc-p29 are widely studied due to their specifity and ability to induzer a protective immunity, and not reported cross reaction with other Apicomplexa parasite when used in trials diagnostics. Furthermore, the expression of specific proteins of N. caninum, Ncp43 and Nc-p29, in prokaryote system, are here described, followed by their evaluating concerning their antigenicity, using sera from animals naturally infected with N. caninum; and their specificity through reaction with sera from animals infected with T. gondii. The rNc-p43 protein was used for polyclonal antibody production in rabbit, purified and conjugated to peroxidase (HPR) and fluorescein isothiocyanate (FITC), in order to detect the recombinant and native Nc-p43, respectivelly. pAb and pAb/HRP were able to recognize rNc-p43, which was evaluated by Dot blot and ELISA assays, while pAb/FITC was able to mark the apical complex of tachyzoites. A blocking enzyme-linked immunosorbent assay (b-ELISA) was performed to evaluate the performance of pAb/HRP as diagnostic tool. The average percentage of inhibition for the positive sera pool and the negative sera pool of cattle neosporosis was significantly different (p <0.0001). These results suggest that pAb may bind to the same epitopes of Ncp43 and anti-N. caninum antibodies positive samples tested. b-ELISA using pAb/HRP is an interesting option for diagnostic tests that are available for neosporosis since fewer steps are involved in their implementation and their shape prevents cross-reactivity with anti-species-specific antibodies. In short, this work describes the cloning and expression of Nc-p43 and Nc-p29 proteins N. caninum in prokaryotic system, to produce a monnoespecific polyclonal antibody against the recombinant protein Nc-p43 and evaluation of its suitability as a tool in diagnosis of neosporosis.
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Aplicação de algoritmos de mineração de dados para classificação molecular de Leptospira spp / Application of data mining algorithms for molecular classification of Leptospira spp

Labonde, Julia 19 February 2016 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-08-30T14:07:13Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_julia_labonde.pdf: 678599 bytes, checksum: d233ff13ddb416df716b9ee25c98978d (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-01T19:13:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_julia_labonde.pdf: 678599 bytes, checksum: d233ff13ddb416df716b9ee25c98978d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-01T19:14:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_julia_labonde.pdf: 678599 bytes, checksum: d233ff13ddb416df716b9ee25c98978d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-01T19:14:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertacao_julia_labonde.pdf: 678599 bytes, checksum: d233ff13ddb416df716b9ee25c98978d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A leptospirose é uma doença infecciosa de importância mundial, que afeta humanos e animais, causada por espiroquetas patogênicas pertencentes ao gênero Leptospira. Para a área epidemiológica e clínica é fundamental que os laboratórios tenham a capacidade de identificar e classificar com precisão as espécies de Leptospira que causam doença, para que sejam tomadas decisões coerentes com relação à saúde pública. Neste estudo, nós relatamos pela primeira vez a utilização de ferramentas de mineração de dados para fins de classificação de cepas do gênero Leptospira. Vinte e cinco loci referentes a 15 genes foram selecionadas e analisados em 600 genomas rascunho de Leptospira, com o propósito de buscar polimorfismos que pudessem ser utilizados na classificação de cada espécie. Para isso, foram utilizados os algoritmos baseados em mineração de dados C4.5, Naive Bayes e Support Vector Machine. Todos os algoritmos computacionais de mineração de dados utilizados neste trabalho apresentaram valores de acurácia acima de 93% para classificação de Leptospira a nível de espécie, no entanto, o algoritmo C4.5, além de atingir a melhor acurácia de classificação (95.6%), também apresentou os genes que contribuíram para o resultado final da análise. O mesmo banco de dados genômicos utilizado pelos algoritmos computacionais foi submetido a testes com a metodologia MLST – técnica mais utilizada para classificação molecular de espécies deste gênero – no entanto, nenhum dos testes apresentou acurácia superior a 80%. Visto o algoritmo de mineração de dados C4.5 atingir uma acurácia superior aos outros algoritmos, pode-se concluir que C4.5 é uma ferramenta de mineração de dados bastante promissora para classificar espécies de Leptospira. / Leptospirosis is an infectious disease of global importance that affects humans and animals caused by pathogenic spirochetes belonging to the genus Leptospira. For epidemiological and clinical areas, it is essential that laboratories have the ability to identify and classify accurately species of Leptospira that cause disease, to take decisions consistent with respect to public health. In this study, we report for the first time the use of data mining tools for the purposes of strain classification of the genus Leptospira. Twenty-five loci related to 15 genes were selected and analyzed in 600 Leptospira draft genomes in order to search polymorphisms that could be used for the classification of each species. For this, data mining-based algorithms - C4.5, Naive Bayes and SVM - were used. All data mining computational algorithms used in this study showed accuracy levels above 93% for Leptospira classification species, however, the C4.5 algorithm achieve the best accuracy rating (95.6%) and presented the genes that contributed to the final result of the analysis. The same genomic database used by computer algorithms has been tested with the MLST methodology – most used technique for molecular classification of species of this genus - however, none of the tests show accuracy higher to 80%. Because data mining algorithm C4.5 achieve better accuracy than other algorithms, it can be concluded that C4.5 is a very promising data mining tool to classify species of Leptospira.
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Propagação in vitro de pinhão-manso / In vitro propagation of Jatropha curcas

Casarin, Tatiane 04 March 2016 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-09-04T15:24:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_tatiane_casarin.pdf: 904257 bytes, checksum: eecbe82cb3a2bcde286380eeed6592c8 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-13T17:47:27Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_tatiane_casarin.pdf: 904257 bytes, checksum: eecbe82cb3a2bcde286380eeed6592c8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-13T17:47:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_tatiane_casarin.pdf: 904257 bytes, checksum: eecbe82cb3a2bcde286380eeed6592c8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-13T17:54:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertacao_tatiane_casarin.pdf: 904257 bytes, checksum: eecbe82cb3a2bcde286380eeed6592c8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Com o crescente interesse a cerca do cultivo de pinhão-manso (Jatropha curcas L.), uma oleaginosa da família Euforbiaceae com potencialidade para a produção de biocombustíveis, faz-se necessária a aplicação de ferramentas biotecnológicas que tornem possível o desenvolvimento e seleção de genótipos com as características de interesse e melhores condições sanitárias. Nesse sentido, o estabelecimento de condições de cultivo e protocolos de regeneração eficientes para os genótipos de interesse local é de grande importância. O objetivo deste trabalho foi, portanto testar as condições para a propagação in vitro de pinhão-manso. Inicialmente investigou-se a otimização do processo de germinação in vitro de sementes, como fonte inicial de explantes, onde foi observado que o acréscimo de 0,94 μM de GA3 resultou em melhores médias de germinação. No protocolo de regeneração, após a modificação da composição dos meios de cultura e condições de cultivo, não foi observada diferença significativa entre os diferentes tratamentos de indução de calos, entretanto foi possível observar uma redução no desenvolvimento dos explantes que foram mantidos em condições de maior luminosidade. Para o alongamento das brotações adventícias obtidas, o tratamento mais eficiente foi T1: 9,69 μM AIA + 2,22 μM BAP. Para o enraizamento dos explantes foi utilizado meio MS com metade da concentração de sais, acrescido de 2,07 μM AIB. Foram obtidas 12 plantas regeneradas e enraizadas, entretanto estas não sobreviveram ao processo de aclimatação. Além dos ensaios de regeneração foram realizados ensaios de cultivo in vitro de ápices caulinares de plântulas germinadas in vitro, no qual se observou que a utilização de 22,2 μM de BAP + 2,07 μM de AIB + 1 g.L-1 de carvão ativado pode ser uma alternativa para a propagação da espécie. / Due to growing interest about Jatropha curcas L. cultivation, an oil crop from the Euforbiaceae family with potential for biofuel production, it is necessary to apply biotechnology tools that make possible the development and selection of genotypes with the features of interest and better health. Accordingly, the establishment of efficient culture conditions and regeneration protocols for local interest genotype is of great importance. Therefore the aim of this study was try to establish the best conditions for the in vitro propagation for genotypes from the Embrapa Clima Temperado breeding program. Initially we investigated the optimization of the process of in vitro germination of seeds, as an initial source of explants, where it was observed that the addition of 0.94 μM GA3 resulted in better average germination. About the regeneration protocol, after changing the composition of the culture media and cultivation conditions, there was no significant difference between the different callus induction treatments, though we observed a reduction in the development of explants that were maintained in more intense light. For elongation of adventitious shoots, the most effective treatment was T1: 9,69 μM AIA + 2,22 μM BAP. For the shoot rooting was used MS medium with half salt concentration plus 2.07 μM IBA. 12 regenerated and rooted plants were obtained, though these did not survive the acclimatization process Apical in vitro culture assays were performed in which it was observed that the treatment T2: 22.2 μM BAP + 2.07 μM IBA + 1 gL-1 of activated carbon can be an alternative for the propagation of the species.
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Desenvolvimento de vacina recombinante contra a leptospirose: produção e avaliação do potencial imunoprotetor de quatro lipoproteínas / Development of a recombinant vaccine against leptospirosis: immunological potential of putative lipoproteins

Deliberalli, Ivânia 18 February 2014 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-09-04T15:40:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_ivania_deliberalli.pdf: 709384 bytes, checksum: faef8c8ebde38dfcf18e902b5a0410ad (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-13T17:55:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_ivania_deliberalli.pdf: 709384 bytes, checksum: faef8c8ebde38dfcf18e902b5a0410ad (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-13T17:55:50Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_ivania_deliberalli.pdf: 709384 bytes, checksum: faef8c8ebde38dfcf18e902b5a0410ad (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-13T17:56:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertacao_ivania_deliberalli.pdf: 709384 bytes, checksum: faef8c8ebde38dfcf18e902b5a0410ad (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-02-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A leptospirose é uma doença causada por espiroquetas do gênero Leptospira. É uma zoonose de ampla distribuição geográfica, sendo um problema de saúde pública e veterinária, principalmente em países subdesenvolvidos e em desenvolvimento de clima tropical e subtropical. Em medicina veterinária, a leptospirose é uma doença importante tanto para a clínica quanto para a produção, devido ao risco à saúde pública, perdas reprodutivas e óbitos. A vacinação animal é realizada como medida de prevenção da enfermidade, entretanto, a proteção conferida pelas vacinas comerciais é limitada e não evita a condição de portador. Os antígenos protéicos da membrana externa parecem ser a melhor alternativa para substituir as vacinas atualmente disponíveis, porém, após diversos estudos, nenhum apresentou resultados satisfatórios. O objetivo deste trabalho foi avaliar antígenos recombinantes e preparações vacinais, capazes de conferir proteção de amplo espectro, em hamsters (Mesocricetus auratus). Neste estudo, quatro novas proteínas recombinantes de Leptospira spp foram obtidas e testadas no modelo de leptospirose aguda em hamster para avaliar vacinas experimentais. A análise in silico do genoma de L. interrogans sorogrupo Icterohaemorrhagie sorovar Copenhageni cepa FIOCRUZ L1-130 foi realizada para identificar genes alvo potenciais para o desenvolvimento de vacinas de subunidade. Quatro genes foram selecionados para expressão de proteínas recombinantes em sistema de expressão heteróloga em Escherichia coli: lic10260, lic10365, lic11207 e lic11360, que codificam para prováveis lipoproteína de membrana externa. Os genes foram amplificados a partir do DNA genômico de L. borgpeterseni sorogrupo Ballum cepa 4E. Os procedimentos de clonagem resultaram nos vetores recombinantes pAE/lic10260, pAE/lic10365, pAE/lic11207 e pAE/lic11360. As proteínas recombinantes foram eficientemente expressas nesse sistema de expressão e posteriormente, utilizadas na imunização de hamsters que foram subsequentemente desafiados com dose letal de L. borgpeterseni sorovar Ballum 4E. A resposta imune humoral induzida pelas proteínas foi avaliada por ensaio imunoenzimático (ELISA) e verificou-se que, pelo menos uma das formulações vacinais para cada proteína produziu resposta humoral significativa estatisticamente (p < 0,05). As proteínas rLIC10260, rLIC10365, rLIC11207 e rLIC11360 mostraram-se imunogênicas, tornando promissora sua utilização como vacinas contra leptospirose. / Leptospirosis is a widespread zoonosis caused by spirochetes from genus Leptospira. The disease is considered a problem in both public health and veterinary areas, affecting mainly tropical and subtropical developing countries. In veterinarian medicine, leptospirosis is an important disease for both clinic and production sectors due to the public health risks, reproductive failures and death, culminating in considerable economic losses for the area. Animal vaccination is taken as a prevention measure, however the acquired protection by the vaccines is, in most cases, weak and allows the spreading of the disease. The outer membrane antigens seems to be the best alternative to substitute the currently available vaccines, however, after several studies, none of them presented satisfactory results. The aim of the present work was the production and evaluation of four recombinant antigens in order to elicit broad spectrum protection in hamster, the susceptible experimental model (Mesocricetus auratus). An in silico analysis in L. interrogans serogroup icterohaemorrhagie serovar Copenhageni strain FIOCRUZ L1-130 was run in order to identify potential genes for subunit vaccine development. Four genes were selected, amplified, cloned into vectors and expressed in Escherichia coli: lic10260, lic10365, lic11207, lic11360. These gene products are potential outer membrane lipoproteins and were amplified from L. borgpeterseni serugroup Ballum strain 4E. The cloning procedures resulted in the recombinant vectors pAE/LIC10260, pAE/LIC10365, pAE/LIC11207 and pAE/LIC11360 and its purified products were inoculated in hamsters and their humoral response was evaluated per Enzyme-linked Immunossorbent Assay (ELISA). It was possible to verify that at least one of the vaccinal preparations for each protein was able to induce statistically significant humoral response (p < 0.05). The four obtained proteins showed immunogenic response, making them promising recombinant antigens for use against leptospirosis.
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Ação do etileno no acúmulo diferencial de proteínas durante o amadurecimento de frutas de maçãs, cv. Gala, clone Baigent / Ethylene Action in differential protein accumulation during apple fruits ripening, cv. Gala

Gonçalves, Breno 27 January 2016 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-09-04T15:54:50Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_breno_xavier_goncalves.pdf: 1124189 bytes, checksum: 716ee774eb33d8617a69335350693c80 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-13T17:56:24Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_breno_xavier_goncalves.pdf: 1124189 bytes, checksum: 716ee774eb33d8617a69335350693c80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-09-13T17:56:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_breno_xavier_goncalves.pdf: 1124189 bytes, checksum: 716ee774eb33d8617a69335350693c80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-13T17:57:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertacao_breno_xavier_goncalves.pdf: 1124189 bytes, checksum: 716ee774eb33d8617a69335350693c80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-01-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Maçãs da cultivar Gala são caracterizadas por processo de maturação/amadurecimento climatérico, ou seja, para haver a transição do estádio pré-climatérico para o amadurecimento, a maioria dos atributos de qualidade sensorial (textura, síntese de aromas e pigmentos, redução da acidez) são dependentes ou parcialmente dependentes do etileno. Nesse contexto, buscou-se identificar proteínas diferentemente acumuladas durante a transição da maturação para o amadurecimento, em condições que inibem ou não a ação do etileno. Para isso, utilizaram-se maçãs, cv. Gala, clone Beigent, colhidas no estádio pré-climatérico, que foram mantidas em temperatura ambiente por 12 dias, após a aplicação ou não do 1-MCP. Como variáveis dependentes avaliou-se a firmeza de polpa, o teor de sólidos solúveis totais e acidez total titulável, o acúmulo de transcritos do gene ACCO1, a produção de etileno, e proteínas diferentemente acumuladas. Como esperado, a aplicação de 1-MCP contribuiu para preservar a firmeza de polpa e da acidez total, assim como para reduzir significativamente a produção de etileno, provavelmente pela redução da transcrição do gene ACCO1 (redução de 3,5 vezes nos níveis de transcritos em relação às maçãs que não receberam 1-MCP), e consequente redução da síntese da ACCO1 (16 vezes menos em relação às maçãs que não receberam 1-MCP). Pela análise de proteínas, foram visualizados 200 spots, dos quais, 15 diferentemente expressos. Além das proteínas relacionadas com a biossíntese de etileno e metabolismo primário, foram também identificadas proteínas envolvidas no processo de detoxificação e defesa, bem como proteínas reguladoras, a exemplo da 14-3-3 Family protein. Dessa forma, a técnica de proteômica, além de permitir a identificação de proteínas em rotas clássicas, permite identificar proteínas associadas em novos processos relacionados ao amadurecimento de maças. / Apple fruits (c.v. Gala), are characterized by climateric ripening, thus, to bring about the transition from the pre-climacteric to the maturation stage and produce the most of sensory quality attributes (texture, synthetic flavor and pigments and reduction of acidity), this fruits are ethylene dependent. In this context, we investigated the differently accumulated proteins in the ripening process with ethylene inhibit and with ethylene action not inhibited. For this, we used Gala apples, Beigent, clone collected in pre-climacteric stage and kept at room temperature for 12 days after application or not of 1-MCP. As dependent variables we evaluated firmness, total soluble solids, titratable acidity, transcripts accumulation of ACCO1 gene, ethylene production and the differently accumulated proteins. As expected, the application of 1-MCP contributed to maintain the firmness and the total acidity as well as significantly reduce of ethylene production, probably by reducing the transcription of ACCO1 gene (3.5-fold compared to apples without MCP-1), and consequently decrease synthesis of ACCO1 protein (16-fold compared to apple fruits without 1-MCP). We found 200 spots, which 15 differently expressed. We found proteins related to the ethylene biosynthesis and primary metabolism. Further, were also identified proteins involved in detoxification and defense process, as well as regulatory proteins such as 14-3-3 Family Protein. Overall, this proteomic investigation provides a contribution towards better understanding of the regulatory networks involved in fruit ripening process, which could help future studies of apple breeding.
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Adição de ácidos graxos poli-insaturados (PUFAs) de cadeia longa ômega-3 na maturação de oócitos suínos / Addition of omega-3 long-chain polyunsaturated fatty acids (PUFAs) for in vitro maturation of porcine oocytes

Alves, Barbara da Silva 25 February 2016 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-10-16T11:45:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_barbara_da_silva_alves.pdf: 489976 bytes, checksum: 4eeba836c9990bc82824db3437f40cd3 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-10-17T11:39:45Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_barbara_da_silva_alves.pdf: 489976 bytes, checksum: 4eeba836c9990bc82824db3437f40cd3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-10-17T11:42:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_barbara_da_silva_alves.pdf: 489976 bytes, checksum: 4eeba836c9990bc82824db3437f40cd3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-17T11:42:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertacao_barbara_da_silva_alves.pdf: 489976 bytes, checksum: 4eeba836c9990bc82824db3437f40cd3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-02-25 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / A produção in vitro de embriões é uma das principais técnicas aplicadas a reprodução animal. A suplementação com ácidos graxos poli-insaturados de cadeia longa (PUFA) da série ômega-3 nos meios de maturação in vitro (MIV) pode ser relevante para a diminuição de gotículas lipídicas que prejudicam a eficiência da produção in vitro e criopreservação de embriões suínos. O presente trabalho avaliou o efeito da suplementação do meio de MIV com dois PUFA, o eicosapentaenoico (EPA) e o docosahexaenóico (DHA), sobre a maturação nuclear de oócitos suínos. Folículos com 3 a 6 mm de diâmetro foram aspirados de ovários de fêmeas suínas pré-púberes coletados em frigoríficos. O meio de maturação foi constituído de TCM-199 suplementado com 0,57 mM de cisteína, 0,91 mM de piruvato de sódio, 10 ng/mL de EGF, 0,5μg/mL de LH, 0,5μg/mL de FSH e 0,1% de PVA. A MIV foi avaliada para grupos com aproximadamente 30 complexos cumulus-oócitos, compondo quatro tratamentos, em meios suplementados com: 10% de fluído folicular suíno (FFS), considerado como controle; 50; 100 e 150μM de cada PUFA. Foi também realizada a suplementação com FFS e AMPc para avaliar a possível toxicidade desses ácidos graxo. Após as 44 h de MIV, os oócitos foram corados com Hoechst 33342. Houve diferença entre as taxas de MIV obtidas nos meios suplementados com diferentes níveis de EPA a partir de 100 μM, em comparação ao controle (P > 0,05). As taxas de MIV observadas nos meios suplementados com DHA em concentrações a partir de 100 μM foram inferiores às observadas para o controle (P < 0,05). Quando comparadas com meios suplementados FFS e AMPc, as taxas de MIV observas com 50 μM de EPA e DHA não diferiram (P > 0,05). Estes resultados indicam que a suplementação de meios para MIV com EPA e DHA influenciam de forma negativa as taxas de maturação in vitro nuclear, sugerindo um efeito tóxico para os oócitos suínos. / The production of embryos in vitro (IVP) is one of the main techniques applied to animal reproduction. Supplementation of in vitro maturation (IVM) media with long-chain polyunsaturated fatty acids (PUFA) of the omega-3 series may be relevant to the decrease of lipid droplets which hinder efficient IVP and cryopreservation of porcine embryos. This study evaluated the effects of supplementation of IVM media with two PUFA, the eicosapentaenoic (EPA) and the docosahexaenoic (DHA) on the nuclear maturation of pig oocytes. Follicles with 3-6 mm diameter were aspirated from ovaries collected at abattoirs from prepubertal gilts. The IVM medium was TCM-199 supplemented with 0.57 mM cysteine, 0.91 mM sodium pyruvate, 10 ng/mL EGF, 0.5 μg/mL LH, 0.5 μg/mL FSH and 0.1% PVA. The IVM rates were evaluated for groups having nearly 30 cumulus-oocyte complexes in four treatments, including media supplemented with: 10% porcine folicular fluido (PFF), as a control; 50; 100 and 150μM of each PUFA. FOS supplementation and cAMP was also performed to evaluate the possible toxicity of these fatty acids. After 44 h of IVM, oocytes were stained with Hoechst 33342. Differences were observed between IVM rates obtained in media supplemented with different levels of EPA from 100 uM, compared to the control (P> 0.05). The IVM rates observed in media supplemented with DHA at concentrations from 100 uM were lower than those in the control (P <0.05). When compared with supplemented FFS and cAMP means IVM rates swarming with 50 mM of EPA and DHA did not differ (P> 0.05). These results indicate that supplementation of IVM medium with EPA and DHA influenced negatively the rate of nuclear maturation, suggesting a toxic effect for swine oocytes.
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Caracterização fenotípica e sequenciamento do genoma de Leptospira kirschneri isolada de caso clínico humano / Phenotypic characterization and genome sequencing of Leptospira interrogans isolated from a human case of leptospirosis

Cunha, Carlos Eduardo Pouey da 24 October 2014 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-10-17T12:13:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha (2).pdf: 934243 bytes, checksum: 07247a5a64f709717d8bc06370d25dc7 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-10-23T11:07:13Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha (2).pdf: 934243 bytes, checksum: 07247a5a64f709717d8bc06370d25dc7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-10-23T11:07:32Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha (2).pdf: 934243 bytes, checksum: 07247a5a64f709717d8bc06370d25dc7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-23T11:07:43Z (GMT). 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Apesar de Pelotas apresentar um clima temperado, a taxa de infecções por Leptospira (10 casos por 100 mil habitantes) é superior a regiões com climas tropical e subtropical (3.5 casos por 100 mil habitantes). Trabalhos de vigilância em leptospirose desempenham papel fundamental no combate à doença identificado espécies e sorovares endêmicos a determinada região. Este trabalho descreve o isolamento e caracterização de uma cepa de Leptospira de uma paciente da zona rural de Pelotas que relatou contato com coleções hídricas, bovinos, caninos e roedores, e apresentou sintomas clássicos da fase aguda da doença. O isolado foi caracterizado como L. kirschneri sorogrupo Pomona sorovar Mozdok, conforme determinado por multilocus sequence typing (MLST). O genoma do isolado possui 3.398 sequencias codificadoras, 39 tRNAs, 1 região codificadora de rRNA e conteúdo G+C de 34,6%. O cromossomo I tem 3.738.643 pares de base, e o segundo, 335.634, totalizando 4,07 Mb. Imunofluorescência indireta mostrou a expressão dos fatores de virulência LipL32, LigA e LigB. O isolado foi capaz de causar danos severos aos tecidos renal, hepático e pulmonar, como revelado por histopatologia e a presença de leptospiras nesses tecidos confirmada pela técnica de imprint. Este é o primeiro relato de isolamento de L. kirschneri sorovar Mozdok de caso clínico humano no Hemisfério Sul, de acordo com a literatura disponível. Os resultados aqui apresentados são de grande importância epidemiológica, bem como para o desenvolvimento de novas vacinas e testes rápidos de diagnóstico. / Leptospirosis is a neglected zoonosis spread worldwide with more than 800,000 human cases each year. The disease is caused by pathogenic members of the genus Leptospira, which is classified in 10 species and more than 260 serovars, grouped in more than 30 serogroups. The main species associated with human cases of leptospirosis are L. interrogans, L. borgpetersenii and L. kirschneri. L. interrogans serogroup Icterohaemorrhagiae causes the majority of human leptospirosis cases in Brazil, where the tropical and subtropical climates favour the spread of the disease. Even though the climate in Pelotas is temperate, Leptospira infection rates (10 cases per 100 thousand inhabitants) are higher than other regions with tropical and subtropical climates (3.5 cases per 100 thousand inhabitants). Leptospirosis surveillance studies play a vital role against the disease through the identification of endemic species and sorovars to a given region. This work describes the characterization of a Leptospira strain isolated from an inhabitant of the rural area of Pelotas. The patient reported contact with water, cattle, dogs and rodents and presented classical symptomatology for leptospirosis. Multilocus sequence typing (MLST) determined the isolate to be a L. kirschneri serogroup Pomona serovar Mozdok. The genome of the isolate includes of 3,398 coding sequences, 39 tRNAs, 1 rRNA coding region and 34.6% G+C content. Chromosome I has 3,738,643 base pairs, and chromosome II has 335,634 base pairs, totalizing 4.07 Mb. Indirect immunofluorescence showed the expression of LigA and LigB virulence factors as well as the LipL32 protein. The isolate was capable of causing severe renal, hepatic and lung damage, as revealed by histopathological analysis and the presence of leptospiras in these tissues was confirmed by the imprint technique. This is the first report of isolation of L. kirschneri serovar Mozdok from a human patient in the Southern Hemisphere, according to the literature. Results presented herein are important for epidemiologic studies, as well as for the development of new vaccines and rapid diagnosis tests.

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