Submitted by JULIANA LAHR null (ju_lahr@hotmail.com) on 2016-01-08T17:34:37Z No. of bitstreams: 1 Lahr, Juliana_dissertação.pdf: 4300978 bytes, checksum: c8f51cad4332528f3754c1d768464c48 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-01-11T18:03:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lahr_j_me_rcla.pdf: 4300978 bytes, checksum: c8f51cad4332528f3754c1d768464c48 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-11T18:03:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lahr_j_me_rcla.pdf: 4300978 bytes, checksum: c8f51cad4332528f3754c1d768464c48 (MD5) Previous issue date: 2015-12-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Background: Parkinson’s disease (PD) presents asymmetric early motor symptoms, and those symptoms affect the processing and the integration of proprioceptive information. Due to that, the upper limb motor control is impaired even on single task (isolated manual task) and dual task (manual task and posture control). Because these sort of tasks are performed during activities of daily living, the role of asymmetry on those task must be clarified to elucidate the effects of disease on PD functionality and thus guide the therapists choose more effective interventions. Among strategies of intervention on PD motor impairments, two strategies that deserve special attention are the instruction of external focus of attention and mirror therapy (MT). Both interventions might be potentially effective to facilitate motor learning. Aims: to assess the role of PD asymmetry on upper limbs motor control and postural control in conditions of single versus dual task; and tasks with attentional focus with instructions versus external focus as well as to verify the effect of MT on upper limbs motor control more affected on postural control of PD patients. Methods: Twenty PD patients were submitted to assessments on: Upper Limb motor control (kinematic analysis) and postural control (kinetics analysis), in single and dual task conditions, with and without external focus of attention. Posteriorly, the subjects were distributed in two different groups: GI1 and GI2. The MT protocol consisted in a unilateral home therapy on less affected upper limb, performed 30 minutes a day, five days a week, during 6 consecutives weeks. To assist the subjects of GI1, they performed this protocol using a visual feedback (mirror therapy). Both groups were assessed before and after therapy protocol. Results: performance was not different between upper limbs and single and dual tasks, both in single and in dual task. After protocol period, both groups showed improvements on kinematic outcomes (manual dexterity, movement frequency of the hand, hesitation and task performance time improvements, independent of the sort of focus of attention that was used). Conclusion: Manual task is not affected by PD asymmetry on single and dual task. The external focus of attention was not effective to improve the task performance in PD patients, and it is not recommended to be performed during dynamic tasks. The therapy protocol with or without visual feedback promotes extended benefits on execution and planning of manual task of more affected upper limb independently of focus of attention, but it is not able to decrease the functional and motor impairments neither improve postural control. Therefore MT seems to be equally effective on manual tasks benefits, however more studies are necessary to confirm this efficacy. / Introdução: a doença de Parkinson (DP) tem o início assimétrico dos sintomas motores e afeta o processamento e a integração das informações proprioceptivas, comprometendo o controle motor dos membros superiores tanto em tarefa singular (tarefa manual isolada) quanto em tarefa dupla (tarefa manual e controle postural). Por estas tarefas serem frequentemente exigidas nas atividades de vida diária, esclarecimentos quanto ao papel da assimetria da doença nessas tarefas podem elucidar sobre os efeitos da doença na funcionalidade dos pacientes e nortear a decisão sobre estratégias de intervenção mais pertinentes. Dentre as estratégias de intervenção para esses comprometimentos encontram-se a instrução de foco de ação externo e a terapia do espelho (TE). Ambas as intervenções podem ser potencialmente eficazes na DP por facilitar a aprendizagem motora. Objetivos: avaliar o papel da assimetria da doença no controle dos membros superiores e do controle postural nas condições de tarefa singular versus dupla e de tarefa com instrução de foco de atenção livre versus foco externo, assim como verificar o efeito da TE no controle motor do membro superior afetado e no controle postural de pacientes com DP. Método: 20 pacientes foram avaliados quanto ao controle dos membros superiores (análise cinemática) e ao controle postural (análise cinética), nas condições de tarefa singular e dupla, foco de atenção livre e externo. Posteriormente, os pacientes foram distribuídos nos grupos GI1 e GI2 e realizaram a intervenção que consistiu de treino unilateral do membro superior menos afetado, com duração de 30 minutos diários, 5 dias consecutivos na semana, durante 6 semanas, em domicílio. Na intervenção somente o GI1 utilizou o feedback visual - TE. Os grupos foram avaliados pré- e pós-intervenção. Resultados: o desempenho não diferiu entre os membros superiores e entre as condições de tarefa singular e dupla. O foco de atenção externo reduziu o desempenho da tarefa manual, tanto na tarefa singular quanto na dupla. Após o período de intervenção, ambos os grupos melhoraram o desempenho nas variáveis cinemáticas – aumentaram a destreza manual e a frequência de movimento da mão, diminuíram a hesitação na realização do movimento e o tempo para realizar a tarefa, independente do foco de atenção empregado. Conclusão: a assimetria da doença não interfere no desempenho da tarefa manual nas condições de tarefa singular e dupla. O foco de atenção externo não foi eficaz em melhorar o desempenho da tarefa manual em pacientes com DP, não devendo ser utilizado em tarefas dinâmicas. A intervenção, com ou sem feedback visual, melhora a execução e o planejamento da tarefa manual do membro superior afetado independente do foco atencional empregado, mas não é capaz de reduzir o comprometimento funcional e motor, nem de melhorar o desempenho do controle postural. Portanto, a TE parece ser igualmente eficaz na melhora do desempenho da tarefa manual, porém, mais estudos são necessários para afirmar sua efetividade. / CNPq: 157894/2013-4

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-11-13Bitstream added on 2014-06-13T19:49:09Z : No. of bitstreams: 1 hamanaka_ayy_me_rcla.pdf: 547632 bytes, checksum: 7798d22c3d41b95d28e897b9f6b472fd (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A instabilidade postural é um dos sinais constatados na doença de Parkinson (DP) e, freqüentemente, está relacionada com quedas. Distúrbio no sistema somatossensorial pode ocorrer na DP e contribuir com o déficit do controle postural. Este distúrbio pode estar relacionado com déficits nos receptores sensoriais, na integração central destas informações ou na resposta motora inapropriada. Contudo, a informação somatossensorial adicional pode auxiliar na manutenção da postura ereta em indivíduos sadios. Desta forma, o objetivo do estudo foi analisar os efeitos da informação somatossensorial adicional, aplicada na sola do pé, no controle postural de adultos jovens, idosos neurologicamente sadios e idosos com DP. Nove participantes de cada grupo mantiveram a postura ereta bipodal, sobre uma plataforma de força, em duas condições: descalço e sobre palmilhas. As palmilhas utilizadas neste estudo foram projetadas com o objetivo de adicionar informação sensorial na sola dos pés. Para isso, as palmilhas possuem elevações em forma de semi-esferas distribuídas em locais estratégicos, onde há maiores concentrações de mecanorreceptores de adaptação lenta e pontos mais utilizados durante a oscilação postural. As variáveis tradicionais da posturografia foram calculadas para analisar o controle postural. Independente das condições, não houve diferença do controle postural entre adultos jovens e idosos neurologicamente sadios, porém, idosos com DP apresentaram aumento na maioria das variáveis calculadas em relação aos outros dois grupos, confirmando estratégias compensatórias para manter a postura ereta. A informação somatossensorial adicional proporcionada pelas palmilhas foi suficiente para melhorar o controle postural dos três grupos analisados. Assim, adultos jovens, idosos sadios e idosos com DP utilizam a informação adicional para reduzir a oscilação postural no plano frontal. / The postural instability is a signal of Parkinson’s disease (PD) and it is often related to falls. Somatosensory system disturbance can occur with PD and it can contribute to impairment in postural control. This impairment can be related to deficits in the sensory receptors, in the central integration of this information or in the inappropriate motor response. However, additional somatosensory information can help in the maintenance of upright quiet stance in healthy individuals. Thus, the aim of this study was to analyze the effects of the additional somatosensory information, applied on the foot sole, on the postural control of young adults, healthy older adults and older adults with PD. Nine participants of each group were asked to maintain an upright quiet bipedal stance on a force plate under two conditions: barefoot and on the insoles. The insoles used in this study were designed to add sensory information on the foot sole. In order to do that, the insoles have elevated half-spheres distributed in strategic sites, where there are higher concentrations of mechanoreceptors of slow adaptation and/or the sites more utilized for postural oscillation. Traditional posturography variables were calculated to analyze the postural control. Independently of the conditions, there were no differences between young adults and healthy older adults in postural control. Almost all variables increased for patients with PD when compared with the other groups, which can be considered as compensatory strategies to maintain the upright stance. The additional somatosensory information provided by the insoles was sufficient to improve postural control of all three groups. Therefore, young adults, healthy older adults and patients with PD were able to use the additional information provided by the insoles to decrease body sway, especially in the frontal plane.

Base teórica: A doença de Parkinson (DP) é a segunda enfermidade neurodegenerativa mais frequente, crescendo proporcionalmente com o aumento da idade. É uma doença de comprometimento motor e não motor. Levodopa e agonistas dopaminérgicos (AD) são usados no tratamento da DP, permitindo um controle ótimo dos sintomas nos primeiros anos. Entretanto, em 5 anos, metade dos pacientes terão complicações motoras e nãomotoras induzidas pelo uso de antiparkinsonianos. Manifestações neuropsiquiátricas são frequentes, entre elas depressão, ansiedade, prejuízos cognitivos, sintomas psicóticos e transtorno de descontrole dos impulsos(DI). O DI é uma condição caracterizada pela falência em resistir a impulsos ou tentação de executar atos. O DI está associado ao uso de antiparkinsonianos, em especial, os agonistas dopaminérgicos A identificação desta condição é primordial para seu tratamento e estudo adequados. Na literatura atual, o questionário padrão-ouro foi validado na língua inglesa (QUIP), não existindo uma validação para língua portuguesa. Objetivo: Traduzir e validar o questionário QUIP-CS, em sua versão curta e aplicável no momento presente da DP, para lingua Portuguesa do Brasil Métodos: A versão curta da QUIP (QUIP-CS) foi traduzida para o Português por tradutor juramentado. Após, esta foi avaliada por 5 especialistas em DP no Brasil, sendo sugeridas pequenas correções. A versão corrigida em português foi retrotraduzida para o inglês por 2 tradutores juramentados nativos na língua original da escala (inglês), que compararam suas versões posteriormente, chegando-se a uma nova versão final neste idioma. Esta foi enviada ao autor da escala original, que concordou com esta versão, ou seja, foram mantidas as propriedades semânticas do instrumento. Após, a versão final em Português foi auto-aplicada em 65 indivíduos com diagnóstico de DP em tratamento no ambulatório especializado no HCPA, sendo que, de forma aleatória, para 30 foi aplicado um questionário de avaliação sobre o grau de dificuldade de compreensão de suas perguntas. Resultados: Em uma escala de 1 a 5 pontos, onde 1 era nenhuma compreensão das perguntas e 5, clara compreensão, a média de entendimento pelos pacientes foi de 4,06 +/- 0,69 DP. Conclusão: A avaliação desta versão foi considerada de fácil compreensão pelos próprios pacientes. O artigo para validação da tradução do conteúdo da versão em Português da QUIP-CS está em fase de revisão para publicação. / Background: Parkinson’s disease (PD) is the second most often neurodegenerative disease and proportionally growing with people aging. PD is a disease with motor and nonmotor clinical features. Levodopa and dopaminergic agonists (DA) are used for PD treatment, allowing an exquisite control of the motor symptoms during the first years. However, in five years, half patients will present motor or non-motor complications induced by cronic use of these medications. Neuropsychiatric symptoms are often, for example, depression, anxiety, cognitive impairment, psychotic symptoms and impulse control disorders (ICD). The ICD is characterized by failure on resisting an impulse or on performing an specific act. Identification of the PD affected patients is crucial for proper management and study of this condition. There is an already validated self-reported questionnaire for this purpose, the Parkinson's Disease Impulsive-Compulsive Disorders Questionnaire (QUIP), without equivalent in portuguese language. Objective: To translate and to validate the Portuguese short version of the gold-standard questionnaire for identifying ICDs PD affected patients, applicable at the current moment of PD Methods: QUIP-CS was first translated to Portuguese by a professional translator. This translated version was shown to 5 PD neurologist specialists. in Brazil, being suggested minor modifications on it. This new Portuguese revised version was back translated to English by two independent native English speakers. They were both asked to compare the version one another and checked for differences. Then, they contacted each other and got a final back translated version. This one was sent for the original author, that approved its new version comparing to his original and validated one, with no loss of it’s original properties. The Portuguese corrected version was applied to 65 patients in a random way at PD’s ambulatory at HCPA. From these, 30 were asked to answer a number that would represent their level of QUIP-CS questions’ comprehension. Results: In a 1 to 5 point scale, being 1 no comprehension and 5, total comprehension, the average was 4,06 +/- 0,69 DP. Conclusion: Our results on Portuguese version of QUIP-CS show that QUIP-CS translated and corrected version was easily understood and easily self-applied. The article is under revision to be submitted for publication.

A Doença de Parkinson (DP) é a segunda doença neurodegenerativa mais comum. Atinge 3,3% das pessoas com mais de 64 anos. Com o envelhecimento populacional, sua prevalência deve dobrar. A doença classicamente se caracteriza por degeneração dos neurônios da substantia nigra, afetando principalmente a transmissão dopaminérgica. O tratamento mais eficaz na DP continua sendo a levodopa, um precursor dopaminérgico com excelente resposta motora. Entretanto, à medida que a doença progride, aparece uma série de complicações motoras e não motoras que limitam o tratamento. Para facilitar o reconhecimento destas complicações, foram criados questionários que aumentam a possibilidade de diagnóstico, abordando aspectos motores e não motores. O principal deles é um questionário de 19 itens. Ele consiste em 19 manifestações que o paciente deve assinalar, caso tenha determinado sintoma, e se ele melhora com a próxima dose da medicação. Quando existem pelo menos duas respostas positivas, o questionário tem ótima sensibilidade e especificidade. A Doença de Parkinson tem evolução heterogênea, sendo que uma das causas atribuídas para tal é genética. Tem se estudado muitos genes da rota de dopamina por sua relação íntima com a fisiopatologia e tratamento da doença. O transportador de dopamina (DAT), que realiza a retirada da dopamina da fenda sináptica, desempenha papel fundamental nesta rota. Existe um polimorfismo VNTR com cópias de uma unidade de repetição variando de 3 a 11 com as repetições 9 e 10 sendo os alelos mais comuns. Diversos estudos correlacionaram esse polimorfismo com transtorno do déficit de atenção e hiperatividade quando há 10 repetições e com a Doença de Parkinson quando há 9 repetições. Seria um candidato ideal para avaliação com relação às complicações do tratamento e progressão. Assim, avaliamos pacientes com Doença de Parkinson longitudinalmente para comparar a progressão da doença com polimorfismo do DAT e verificar as complicações associadas ao tratamento. Inicialmente, realizamos uma revisão sistemática das propriedades clinimétricas dos questionários de wearing off. Esta revisão mostrou que o questionário de 9 itens tem sensibilidade de 0,87-1 e especificidade de 0,1-0,69. Já o questionário de 19 itens tem sensibilidade de 0,81-0,9 e especificidade de 0,63-0,8 com ponto de corte igual a 2 itens positivos. Realizamos a validação deste último para português, com boa estabilidade no teste-reteste com correlação intraclasse de 0,87 (IC 95% 0,69-0,95 p < 0,01) e sensibilidade de 0,97 (IC 95% 0,94-1 p < 0,01) e especificidade de 0,71 (IC 95% 0,56-0,85 p < 0,01). Para progressão, foi demonstrada uma associação de sexo feminino e a presença de alelo com 9 repetições como fatores de risco para progressão mais rápida. A progressão em homens medida pelo UPDRS 3 era menor em 1,277 (IC 95% 2,18-0,38 p < 0,01) e pelo UPDRS total era menor em 1,50 (IC 95% 2,92-0,11 p = 0,031). Com presença de alelo com 9 repetições, a progressão do UPDRS 3 era menor em 1,92 (ICC 95% 0,04-1,01 p = 0,0317), e presente mesmo controlando para sexo. Não houve diferença na escala de discinesias ou questionário wearing off. Assim, os resultados obtidos mostraram que o questionário de 19 itens é uma boa ferramenta diagnóstica, sendo validado para português. Além disso, o polimorfismo DAT está associado à progressão mais rápida da DP com 9 repetições. / Parkinson’s disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease. It affects 3.3% of people over 64 years. With population aging, its prevalence should double. The disease is classically characterized by degeneration of substantia nigra neurons, mainly affecting dopaminergic transmission. The most effective treatment for PD continues to be levodopa, a dopaminergic precursor with excellent motor response. However, as the disease progresses, there is a number of motor and non-motor complications that limits the treatment. To facilitate the recognition of these complications, questionnaires were created to increase the possibility of diagnosis, addressing motor and non-motor aspects. The main one is a questionnaire of 19 items. It consists of 19 symptoms that the patients should indicate, if they feel particular symptom, and if they get better with the next dose of medication. When there are at least two positive responses, the questionnaire has optimal sensitivity and specificity. Parkinson’s disease has a heterogeneous evolution, and one of the reasons attributed for that is genetic. Many genes of the dopamine route have been studied for their intimate relationship with the pathophysiology and treatment of the disease. The dopamine transporter, with synaptic cleft reuptake, plays a key role in this route. It has a VNTR polymorphism with copies of a repeating unit ranging from 3 to 11 with repetitions 9 and 10 being the most common alleles. Several studies correlated this polymorphism with Attention Deficit Hyperactivity Disorder with 10 repetition allele and Parkinson’s disease with 9 repetition alleles. It would be an ideal candidate for evaluation regarding treatment complications and progression. Thus, we evaluated patients with Parkinson’s disease longitudinally to compare disease progression with DAT polymorphism and to verify treatment-related complications. Initially we performed a systematic review of the clinimetric properties of the wearing off questionnaires. That showed that the questionnaire of 9 items has sensitivity of 0.87-1 and specificity of 01-0.69. The questionnaire of 19 items has a sensitivity of 0.81-0.9 and a specificity of 0.63-0.8 with a cut-off point of 2 items. We performed the validation of the latter for Portuguese, with good stability in the testretest with intraclass correlation of 0.87 (95% CI 0.69-0.95 p < 0.01) and sensitivity of 0.97 (CI 95% 0.94-1 p < 0.01) and specificity of 0.71 (95% CI 0.56-0.85 p < 0.01). We demonstrated a female association and presence of 9 DAT allele repetition as risk factors for faster progression. The progression in men ofwith UPDRS 3 was lower in 1.277 (95% CI 2.18-0.38 p < 0.01) and total UPDRS was lower in 1.50 (95% CI 2.92-0.11 p = 0.031). With the presence of allele with 9 repetitions the progression of UPDRS 3 was lower in 1.92 (ICC 95% 0.04-1.01 p = 0.0317), and present even correcting sex. There was no difference in the dyskinesia scale or wearing off questionnaire. Thus, the results obtained showed wearing off questionnaire is a good tool for clinical and research, and it is validated to Portuguese. Also, DAT polymorphism is associated with faster PD progression with 9 repetition allele.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Parkinson’s disease (PD) is a neurodegenerative disease characterized by a progressive degeneration of dopaminergic neurons in the Substantia Nigra pars compact (SNpc) with consequent depletion of dopamine in the striatum, which gives rise to characteristic motor symptoms of PD. Although its etiology of is unknown, several studies have been suggested that oxidative stress and inflammation play a critical function in the physiopathology of PD and antioxidant and ani-inflammatory agents could be helpful to slown down the dopaminergic neurodegeneration. Thus, many studies have evaluated the potential neuroprotective effect of these agentes, including Carvacrol (CA). CA is a phenolic monoterpene found in essential oils of many aromatic plants and it has a variety of pharmacological effects on Central Nervous System, including antioxidant and anti-inflammatory activities. In this context, the objective of this study was to investigate a possible neuroprotective effect of CA in two rat models of PD. Two experiments were performed: in the experiment I, male Wistar rats were submitted to repeated administration of a low dose (0.1 mg/kg, s.c.) of reserpine (RES) or vehicle of reserpine (VR) and concomitantly treated with CA at doses of 12.5 or 25 mg/kg (i.p.) or vehicle of carvacrol (VC). Across the treatment, the animal motor behavior was evaluated by catalepsy test, open field test and assessment of oral movements. In the experiment II, male Long-Evans rats were pretreated for seven days with CA at doses of 50 or 100 mg/kg (i.p.) or VC, and were then submitted to unilateral injection of 6-hydroxydopamine (6-OHDA) or vehicle of 6-OHDA into the medial forebrain bundle (MFB). The animals were treated with CA or VC for three weeks after injection. Thereafter, they were assessed for motor behavioral function by open field, cylinder test, rotarod and amphetamine-induced circling test. In both experiments, upon completion behavioral tests, rats were perfused and theirs brains were subjected for tyrosine hydroxylase (TH) immunohistochemical analysis. In the experiment I, the results showed that the CA treatment, in both doses 12.5 e 25 mg/kg, was able to prevent the catalepsy behavior and the development of vacuous chewing movements induced by RES, however, CA failed to revert the decreased locomotor activity induced by RES in the open field test. In addition, CA in both doses prevented the depletion of TH immunostaining induced by RES in the SNpc and dorsal striatum. In the experiment II, the treatment with CA at dose of 50 mg/kg prevented the motor deficits induced by 6-OHDA injection in the open field test, cylinder test and rotarod, and increased the number of rotations induced by amphetamine. Moreover, CA attenuated the dopaminergic neurons damage in the SNpc and dorsal striatum induced by 6-OHDA injection. Taken together, our results suggest that CA shows neuroprotective effect, preventing or attenuating motor and neurochemical impairments induced by RES and 6-OHDA, so it may be regarded a promising therapeutic candidate for the prevention or treatment of PD. / A Doença de Parkinson (DP) é uma doença neurodegenerativa caracterizada por uma degeneração progressiva de neurônios dopaminérgicos da Substância Negra parte compacta (SNpc), o que resulta nas alterações motoras características desta patologia. Embora sua etiologia ainda permaneça desconhecida, vários estudos indicam que o estresse oxidativo e a inflamação exercem uma função crítica na fisiopatologia da DP e agentes antioxidantes e anti-inflamatórios poderiam desacelerar a neurodegeneração dopaminérgica. Assim, tem sido crescente o número de pesquisas relacionadas a investigação do potencial neuroprotetor destes agentes, entre eles, o Carvacrol (CA). O CA é um monoterpeno fenólico encontrado nos óleos essenciais de diversas plantas aromáticas e apresenta uma variedade de atividades farmacológicas sobre o Sistema Nervoso Central, incluindo atividades antioxidante e anti-inflamatória. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi investigar um possível efeito neuroprotetor do CA em ratos submetidos a dois modelos de DP. Foram realizados dois experimentos: no experimento I, ratos Wistar foram submetidos a administração repetida de uma dose baixa (0,1 mg/kg, s.c.) de reserpina (RES) ou veículo da reserpina (VR) e tratados concomitantemente com CA nas doses de 12,5 ou 25 mg/kg (i.p.) ou com o veículo do carvacrol (VC). Ao longo do experimento, os animais tiveram seu comportamento motor avaliado através dos testes de catalepsia, campo aberto e avaliação dos movimentos orais. No experimento II, ratos Long-Evans foram pré-tratados por sete dias com CA nas doses de 50 ou 100 mg/kg (i.p.) ou VC, e então foram submetidos a uma injeção unilateral de 6-hidroxidopamina (6-OHDA) ou veículo no feixe prosencefálico medial (medial forebrain bundle -MFB). Os animais foram tratados com CA ou VC por três semanas após a injeção de 6-OHDA e após este período tiveram seu comportamento motor avaliado através dos testes do campo aberto, cilindro, rotarod e rotações induzidas por anfetamina. Em ambos os experimentos, ao fim dos testes comportamentais, os animais foram perfundidos e seus cérebros foram processados para imunohistoquímica para tirosina hidroxilase (TH). No experimento I, os resultados mostraram que o CA em ambas as doses (12,5 e 25 mg/kg) preveniu o comportamento de catalepsia e o desenvolvimento de movimentos de mastigação no vácuo induzidos pela RES, porém não reverteu a redução da atividade locomotora causada pela RES no teste do campo aberto. O CA em ambas as doses preveniu a redução da marcação de TH induzida pela RES na SNpc e no estriado dorsal. No experimento II, os resultados mostraram que o CA na dose de 50 mg/kg preveniu os déficits motores induzidos pela injeção de 6-OHDA nos testes do campo aberto, cilindro e rotarod, e aumentou o número de rotações induzidas por anfetamina. Além disso, o CA atenuou o dano provocado pela injeção de 6-OHDA nos neurônios dopaminérgicos da SNpc e estriado dorsal. Os resultados obtidos no presente estudo sugerem que o CA apresenta um efeito neuroprotetor, prevenindo ou atenuando as alterações motoras e neuroquímicas induzidas pela RES e 6-OHDA. Desta forma, o CA pode ser considerado um candidato terapêutico promissor para a prevenção ou tratamento da DP.

The aim of the current study was divided into two separate goals, (i) optimization of a number of PCR-based protocols employed for genotyping transgenic mouse lines and (ii) evaluating a protocol for co-detection of mRNA and its correlated protein in the mouse midbrain. The optimization was performed on PCR protocols for genotyping the following transgenic mouse lines; Dat-Cre, Vglut2-Lox, Vglut2-Cre and Vmat2-Lox. Also, two different polymerases were evaluated parallel to each other – KAPA and Maxima Hot Start. One of the main findings from the PCR optimizations were that for the Vglut2-Lox protocol. By decreasing the annealing temp and increasing the MgCl2 the bands appeared brighter.  For the second part of the project, in-situ hybridization (ISH) was used to detect the mRNA expression with a `non-radioactive in situ hybridization´ protocol, using digoxigenin or fluorescein labelled riboprobes (mRNA probes). To detect the correlated protein a basic immunohistochemistry (IHC) protocol with the use of primary and secondary antibodies was implemented. The combined protocol was tested with Nd6 and Grp markers. Before testing to combined the protocols the ISH protocol was performed alone with riboprobes for Girk2, Lpl and Fst. The combined protocol detected mRNA and protein for both the control marker Th and the Nd6 marker. In conclusions, the optimized PCR protocols were optimal when used with the Maxima Hot Start polymerase and the new combined ISH and IHC protocol worked for markers Th and Nd6.

With the growing older adult population, neurodegenerative diseases common in old age such as mild cognitive impairment (MCI) or Parkinson’s disease (PD) are becoming increasingly germane areas of research. Pharmacological treatments have thus far been unsuccessful in treating cognitive decline associated with these neurodegenerative disorders. Alternative interventions, such as cognitive training programs, have shown promise. The current dissertation contains three papers examining cognitive interventions in neurodegenerative diseases. The first paper examined the longitudinal effects of cognitive speed of processing training (SPT) among those with PD. Results showed that training gains seen at initial post-test were maintained three months later. The second paper examined the effects of SPT among those with psychometrically-defined MCI and found small to medium effect sizes for improvements in everyday functional performance among those trained. The third paper examined the effects of auditory cognitive training among cognitively healthy older adults and those with psychometrically-defined MCI and found that effects may differ between those with and with MCI. Overall, these papers show that training effects can be maintained longitudinally and may potentially transfer to everyday functioning in those with neurodegenerative diseases. However, not all cognitive training programs show benefits in all areas, and individuals with differing cognitive statuses may benefit differentially from cognitive training. Future research should further explore the longitudinal effects of these training programs as well as the possibility of transfer to untrained abilities.

Fundação de Apoio a Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe - FAPITEC/SE / Parkinson's disease (PD) shows sex differences in susceptibility, pathogenesis and clinical condition. The most common incidence in males suggests sex hormones as a potential contributing factor to the individual susceptibility to this disease. Thus, the purpose of this study was evaluate the effect of chronic testosterone propionate (TP) administration on the motor and neurochemical changes in Parkinsonism model induced by reserpine (RES);and to compare the effects of administration of low doses of RES between males and females (intact and ovariectomized). A hundred ninety-two 6-9-month-old males and females Wistar rats were used. Animals were obtained from vivarium of the Department of Physiology - Federal University of Sergipe. The study was divided into three experiments: (I) testosterone propionate administration in intact male rats, (II) in intact female rats and (III) in ovariectomized rats. In all experiments, the rats were divided into eight groups: 1) testosterone propionate vehicle (CTRt) + reserpine vehicle (CTR); 2) 0.1mg / kg of TP (0.1TP) + CTR; 3) 1.0 mg / kg of TP (1.0TP) + CTR; 4) 5.0mg / kg of TP (5.0PT) + CTR; 5) CTRt + RES; 6) 0.1TP +RES; 7) 1.0TP+ RES and 8) 5.0TP + RES. Animals received 31 injections of testosterone propionate or vegetable oil (i.m.) daily and 15 injections of 0.1 mg / kg RES or vehicle (s.c.) every other day. During the treatment, the animals were weighed every four days and submitted to the following behavioral procedures: catalepsy (daily) and open field (day 31). On day 31, the rats were anesthetized, perfused and their brains were removed and subjected to the immunohistochemistry technique for tyrosine hydroxylase (TH). We show that the RES administration generates a sex-dependent response in the behavior of catalepsy and number of TH+ cells in the Ventral tegmental area (VTA). Regarding the co-administration of PT and RES in the catalepsy test, the treatment with TP showed reduced motor effects in males (Exp. I) in 5.0PT+RES group, while in females (Exp. II and III) this effect was observed at the dose of 1.0 mg / kg (1.0PT+RES) and 5.0 mg / kg (5.0PT+RES). In the open field, none of the doses of TP, in any of the experiments, was able to minimize the effects caused by the RES in motor activity. In intact males (Exp. I), all tested doses of TP were able to prevent the reduction of TH+cells caused by the RES in VTA, but not in Substantia nigra pars compacta. In intact females (Exp. II), only the dose of 5.0 mg / kg (5.0PT+RES) was able to prevent the reduction of TH+ cells in the SNpc. In ovariectomized females (Exp. III) the treatment with all doses of TP (0.1PT+RES, 1.0PT+RES and 5.0PT+RES) was able to maintain the intensity of TH in the dorsal striatum, preventing reduction caused by the RES. Taken together our results show that Chronic treatment with TP, in progressive model of parkinsonism induced by RES, showed different effects in behavioral tests and animals of different sex and conditions, showing multiple possible mechanisms of action. / A doença de Parkinson (DP) exibe diferenças sexuais na suscetibilidade, patogênese e quadro clinico, sendo a incidência mais comum no sexo masculino, evidenciando os hormônios sexuais como potencial fator que contribui para predisposição do indivíduo a esta doença. Diante disso, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a ação da administração crônica de propionato de testosterona (PT) sobre as alterações motoras e neuroquímicas no modelo de parkinsonismo induzido por reserpina (RES); além de comparar os efeitos da administração de baixas doses de RES entre machos e fêmeas (intactas e ovariectomizadas). Foram utilizados 192 ratos Wistar de ambos os sexos, 6-9 meses, provenientes do Biotério Setorial do Departamento de Fisiologia da Universidade Federal de Sergipe. O estudo foi dividido em 3 experimentos: (I) administração de propionato de testosterona em ratos intactos, (II) em ratas intactas e (III) em ratas ovariectomizadas. Os ratos foram divididos em oito grupos: 1- veículo proprionato de testosterona (CTRt)+veículo RES (CTR); 2- 0,1mg/kg de PT (0,1PT)+CTR; 3- 1,0 mg/kg de PT (1,0PT)+CTR; 4- 5,0mg/kg de PT (5,0PT)+CTR; 5- CTRt+RES; 6- 0,1PT+RES; 7- 1,0PT+RES e 8- 5,0PT+RES. Os animais receberam 31 injeções, uma a cada dia, de propionato de testosterona ou óleo vegetal (i.m) e 15 injeções, em dias alternados, de 0,1 mg/kg de RES ou veículo (s.c.). Durante o tratamento, os animais foram pesados a cada 4 dias e submetidos a testes comportamentais: catalepsia (diariamente) e campo aberto (dia 31). No dia 31, os ratos foram anestesiados, perfundidos, seus cérebros removidos e submetidos a imunohistoquímica para Tirosina Hidroxilase (TH). Mostramos que a administração de RES gera uma resposta sexo-dependente no comportamento de catelepsia e número de células TH+ na Área tegumentar ventral (VTA). Em relação a administração concomitante de PT e RES, observamos que no teste de catalepsia, o tratamento com PT mostrou redução dos efeitos motores, nos machos (exp. I) do grupo 5,0PT+RES, enquanto em fêmeas (exp. II e III) esse efeito foi observado já na dose de 1,0 mg/kg (1,0PT+RES) e também na de 5,0 mg/kg (5,0PT+ RES). Na atividade motora em campo aberto, nenhuma das doses de PT, em nenhum dos experimentos, foi capaz de minimizar os efeitos causados pela RES. Em machos intactos (Exp. I), todas as doses de PT testadas foram capazes de prevenir a diminuição de células TH+ causadas pela RES em VTA, mas não na Substância negra parte compacta. Em fêmeas intactas (Exp. II), apenas a dose de 5,0 mg/kg (5,0PT+RES) foi capaz de prevenir a diminuição de células TH+ na SNpc. Nas fêmeas ovarectomizadas (Exp. III), o tratamento com PT em todas as doses (grupos 0,1PT+RES, 1,0PT+RES e 5,0PT+RES), foi capaz de manter a intensidade de TH no estriado dorsal, prevenindo a redução causada pela RES. O tratamento crônico com PT, no modelo progressivo de parkinsonismo induzido por RES, apresentou diferentes efeitos nos testes comportamentais e nos animais de sexos e condições diferentes, mostrando possíveis mecanismos múltiplos de ação.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-20T20:16:16Z No. of bitstreams: 1 Gileno Edu Lameira de Melo.pdf: 2303187 bytes, checksum: dfdc9eb2889c78ff7007dee09856d636 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-20T20:16:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gileno Edu Lameira de Melo.pdf: 2303187 bytes, checksum: dfdc9eb2889c78ff7007dee09856d636 (MD5) Previous issue date: 2017-10-24 / Objective: Determine the effect of gait training with virtual reality in comparison to over ground training and treadmill training on balance and gait in individuals with Parkinson’s disease. Material and Methods: Study I: A systematic review was performed of articles published between 2011 and 2016 retrieved from four databases using the following keywords and synonyms: Parkinson’s Disease, Gait, and Virtual Reality Exposure Therapy. Study II: Detailed description of the study protocol. Study III: A population-based sample was composed of 37 individuals with Parkinson’s randomly allocated to three groups (control, treadmill and virtual reality). The participants were evaluated on four occasions: pre-intervention; immediately after first intervention session; post-intervention; and one month after last intervention session). Evaluations involved the administration of the Hoehn & Yahr scale, the motor section of the Unified Parkinson’s Disease Rating Scale and Parkinson ’s disease Questionnaire (PDQ-39 for the evaluation of quality of life). Long-distance walking was evaluated using the Six-Minute Walk Test with the aid of the G-WALK (BTS) inertial sensor and monitoring of heart rate, blood pressure and perceived exertion (modified Borg scale). Training was performed in 20-minute sessions at a frequency of three sessions per week for four weeks. Study IV: Thirty-seven individuals with Parkinson’s were allocated to a control group, treadmill group and Xbox group Training in each group was performed in 12 sessions. The participants were evaluated on four occasions: pre-intervention; immediately after first training session; after 12 sessions; and one month after last training session). The evaluations involved the administration of the Hoehn & Yahr scale, the motor section of the Unified Parkinson’s Disease Rating Scale, Parkinson’s Disease Questionnaire (PDQ-39 for the evaluation of quality of life), the Berg Balance Scale, and the Tinetti Test. For the evaluation of spatiotemporal gait variables, the Timed Up and Go test was performed using the G-WALK (BTS) inertial sensor. Results: Study I: Twenty-one studies with a methodological quality of 5 or more points on the PEDro scale were analyzed and the review was published in the journal Archives of Neuropsychiatry. Study II: Protocol study published in the journal Manual Therapy. Study III: Significant improvements in the distance travelled and velocity on the Six-Minute Walk Test were found in the virtual reality and treadmill groups in comparison to the control group (p < 0.05), whereas no significant differences were found between the virtual reality and treadmill groups. Study IV: Improvements in the Berg Balance Scale, Tinetti balance and cognition subscales and mobility domain of the PDQ-39 were found in the treadmill and Xbox groups in comparison to the control group. Conclusion: The results of Studies III and IV suggest that, when used with the aim of improving mobility, balance and spatiotemporal gait variables in individuals with Parkinson’s disease, training with virtual reality is as effective as treadmill training. / Objetivo: Verificar o efeito do treino de marcha com realidade virtual em comparação com treino de marcha em esteira e treino de marcha livre sobre o equilíbrio e a marcha de indivíduos com doença de Parkinson (DP). Material e método: Estudo I: Foi realizada uma revisão sistemática com uma busca em quatro bases de dados com as seguintes palavras chave e seus sinônimos: doença de Parkinson, Marcha, Terapia de exposição à realidade virtual, publicados entre 2011 e 2016. Estudo II: Descrição detalhada do protocolo do estudo. Estudo III: A amostra populacional foi composta de 37 indivíduos com DP, alocados randomicamente em três grupos (Grupo Controle; Grupo Esteira e Grupo Realidade Virtual). Os participantes foram avaliados: pré-intervenção, efeito imediato, pós-intervenção e um mês após a última intervenção. A avaliação foi composta pela Escala de Hoehn e Yahr, pela seção motora da Escala Unificada de Avaliação da Doença de Parkinson e a percepção da qualidade de vida pelo questionário de Qualidade de Vida na Doença de Parkinson (PDQ-39). Para avaliação da caminhada de longa distância, realizou o Teste de Caminhada de 6 minutos, utilizando o sensor inercial G-WALK- BTS e os parâmetros clínicos da Frequência Cardíaca, Pressão Arterial e escala de Borg modificada. Os treinos foram realizados durante quatro semanas, com três sessões por semana, com duração de 20 minutos de treino. Estudo IV: 37 parkinsonianos foram alocados em grupo controle, grupo esteira e grupo Xbox. Realizaram quatro avaliações distintas antes da intervenção, após a primeira sessão de treino, após 12 sessões de treino e 30 dias após o último treino. As avaliações foram constituídas dos seguintes testes e escalas: Escala de Hoehn e Yahr, pela seção motora da Escala Unificada de Avaliação da Doença de Parkinson e a percepção da qualidade de vida, pelo questionário de Qualidade de Vida na Doença de Parkinson (PDQ-39), Escala de Equilíbrio de Berg, Teste de Tinetti. E para avaliação dos parâmetros espaço temporais da marcha, Teste Timed Up and Go, utilizando o sensor inercial G-WALK- BTS. Foram realizadas 12 sessões de treino para cada grupo. Resultados: Estudo I: 21 estudos foram encontrados com uma qualidade metodológica de 5 pontos ou mais na escala PEDro e submetido à publicação na Revista Arquivos de Neuropsiquiatria. Estudo II: artigo publicado na revista Terapia Manual. Estudo III: O grupo Realidade virtual e Esteira apresentou estatisticamente melhora nos parâmetros da distância e velocidade, durante o teste de caminhada de 6 minutos em relação ao grupo controle (p<0,05). Não foram encontradas diferenças significativas entre o grupo esteira e o grupo Realidade Virtual. O estudo IV: Para as escalas clínicas, os grupos Esteira e XBOX apresentaram melhores escores para a Escala de Berg, Tinetti-equilíbrio e cognição e mobilidade do PDQ-39 do que o grupo controle. Conclusão: os resultados dos estudos III e IV sugerem que o treino com RV, quando utilizado para a melhoria da mobilidade, equilíbrio e dos parâmetros espaço temporais da marcha, tem efeito positivo em indivíduos com DP tanto quanto o treinamento em esteira.

A Doença de Parkinson (DP) é a segunda doença neurodegenerativa mais comum. Atinge 3,3% das pessoas com mais de 64 anos. Com o envelhecimento populacional, sua prevalência deve dobrar. A doença classicamente se caracteriza por degeneração dos neurônios da substantia nigra, afetando principalmente a transmissão dopaminérgica. O tratamento mais eficaz na DP continua sendo a levodopa, um precursor dopaminérgico com excelente resposta motora. Entretanto, à medida que a doença progride, aparece uma série de complicações motoras e não motoras que limitam o tratamento. Para facilitar o reconhecimento destas complicações, foram criados questionários que aumentam a possibilidade de diagnóstico, abordando aspectos motores e não motores. O principal deles é um questionário de 19 itens. Ele consiste em 19 manifestações que o paciente deve assinalar, caso tenha determinado sintoma, e se ele melhora com a próxima dose da medicação. Quando existem pelo menos duas respostas positivas, o questionário tem ótima sensibilidade e especificidade. A Doença de Parkinson tem evolução heterogênea, sendo que uma das causas atribuídas para tal é genética. Tem se estudado muitos genes da rota de dopamina por sua relação íntima com a fisiopatologia e tratamento da doença. O transportador de dopamina (DAT), que realiza a retirada da dopamina da fenda sináptica, desempenha papel fundamental nesta rota. Existe um polimorfismo VNTR com cópias de uma unidade de repetição variando de 3 a 11 com as repetições 9 e 10 sendo os alelos mais comuns. Diversos estudos correlacionaram esse polimorfismo com transtorno do déficit de atenção e hiperatividade quando há 10 repetições e com a Doença de Parkinson quando há 9 repetições. Seria um candidato ideal para avaliação com relação às complicações do tratamento e progressão. Assim, avaliamos pacientes com Doença de Parkinson longitudinalmente para comparar a progressão da doença com polimorfismo do DAT e verificar as complicações associadas ao tratamento. Inicialmente, realizamos uma revisão sistemática das propriedades clinimétricas dos questionários de wearing off. Esta revisão mostrou que o questionário de 9 itens tem sensibilidade de 0,87-1 e especificidade de 0,1-0,69. Já o questionário de 19 itens tem sensibilidade de 0,81-0,9 e especificidade de 0,63-0,8 com ponto de corte igual a 2 itens positivos. Realizamos a validação deste último para português, com boa estabilidade no teste-reteste com correlação intraclasse de 0,87 (IC 95% 0,69-0,95 p < 0,01) e sensibilidade de 0,97 (IC 95% 0,94-1 p < 0,01) e especificidade de 0,71 (IC 95% 0,56-0,85 p < 0,01). Para progressão, foi demonstrada uma associação de sexo feminino e a presença de alelo com 9 repetições como fatores de risco para progressão mais rápida. A progressão em homens medida pelo UPDRS 3 era menor em 1,277 (IC 95% 2,18-0,38 p < 0,01) e pelo UPDRS total era menor em 1,50 (IC 95% 2,92-0,11 p = 0,031). Com presença de alelo com 9 repetições, a progressão do UPDRS 3 era menor em 1,92 (ICC 95% 0,04-1,01 p = 0,0317), e presente mesmo controlando para sexo. Não houve diferença na escala de discinesias ou questionário wearing off. Assim, os resultados obtidos mostraram que o questionário de 19 itens é uma boa ferramenta diagnóstica, sendo validado para português. Além disso, o polimorfismo DAT está associado à progressão mais rápida da DP com 9 repetições. / Parkinson’s disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease. It affects 3.3% of people over 64 years. With population aging, its prevalence should double. The disease is classically characterized by degeneration of substantia nigra neurons, mainly affecting dopaminergic transmission. The most effective treatment for PD continues to be levodopa, a dopaminergic precursor with excellent motor response. However, as the disease progresses, there is a number of motor and non-motor complications that limits the treatment. To facilitate the recognition of these complications, questionnaires were created to increase the possibility of diagnosis, addressing motor and non-motor aspects. The main one is a questionnaire of 19 items. It consists of 19 symptoms that the patients should indicate, if they feel particular symptom, and if they get better with the next dose of medication. When there are at least two positive responses, the questionnaire has optimal sensitivity and specificity. Parkinson’s disease has a heterogeneous evolution, and one of the reasons attributed for that is genetic. Many genes of the dopamine route have been studied for their intimate relationship with the pathophysiology and treatment of the disease. The dopamine transporter, with synaptic cleft reuptake, plays a key role in this route. It has a VNTR polymorphism with copies of a repeating unit ranging from 3 to 11 with repetitions 9 and 10 being the most common alleles. Several studies correlated this polymorphism with Attention Deficit Hyperactivity Disorder with 10 repetition allele and Parkinson’s disease with 9 repetition alleles. It would be an ideal candidate for evaluation regarding treatment complications and progression. Thus, we evaluated patients with Parkinson’s disease longitudinally to compare disease progression with DAT polymorphism and to verify treatment-related complications. Initially we performed a systematic review of the clinimetric properties of the wearing off questionnaires. That showed that the questionnaire of 9 items has sensitivity of 0.87-1 and specificity of 01-0.69. The questionnaire of 19 items has a sensitivity of 0.81-0.9 and a specificity of 0.63-0.8 with a cut-off point of 2 items. We performed the validation of the latter for Portuguese, with good stability in the testretest with intraclass correlation of 0.87 (95% CI 0.69-0.95 p < 0.01) and sensitivity of 0.97 (CI 95% 0.94-1 p < 0.01) and specificity of 0.71 (95% CI 0.56-0.85 p < 0.01). We demonstrated a female association and presence of 9 DAT allele repetition as risk factors for faster progression. The progression in men ofwith UPDRS 3 was lower in 1.277 (95% CI 2.18-0.38 p < 0.01) and total UPDRS was lower in 1.50 (95% CI 2.92-0.11 p = 0.031). With the presence of allele with 9 repetitions the progression of UPDRS 3 was lower in 1.92 (ICC 95% 0.04-1.01 p = 0.0317), and present even correcting sex. There was no difference in the dyskinesia scale or wearing off questionnaire. Thus, the results obtained showed wearing off questionnaire is a good tool for clinical and research, and it is validated to Portuguese. Also, DAT polymorphism is associated with faster PD progression with 9 repetition allele.