O objetivo deste trabalho foi avaliar mediante testes in vitro as características espermáticas de partidas de sêmen bovino e o impacto sobre a fertilidade quando utilizadas em um programas de IATF. Foram realizados 4 experimentos que serão descritos em forma de artigos científicos. No artigo 1 comparam-se a qualidade do sêmen determinada por métodos subjetivos e objetivos para a análise espermática in vitro de partidas de sêmen bovino. Foram analisadas 80 partidas de sêmen de dois touros, através de análises convencionais (motilidade subjetiva, vigor e morfologia espermática), de acordo com os resultados foram estabelecidos 3 grupos: Alta qualidade (A), Boa qualidade (B) e Qualidade questionável (Q). Posteriormente foram analisados os resultados das análises objetivas usando sondas fluorescentes por microscopia de epifluorescência para determinar a integridade de membranas plasmática, acrossomal e potencial de membrana mitocondrial (%PIAIA); e usando o sistema computadorizado de avaliação da motilidade espermática (CASA), o efeito foi avaliado mediante ANOVA e Tukey 5%. Posteriormente, foram utilizadas 67 partidas para determinar a concordância em determinar a qualidade seminal de acordo com três métodos de avaliação seminal: (1) Análise subjetiva considerando a Motilidade subjetiva, vigor e morfologia espermática (2) Análise pelo CASA levando em consideração a MT, VCL, VSL e VAP e (3) Análise por sondas fluorescentes considerando a %PIAIA. Foram realizadas análises de correlação de Pearson e análise de concordância (significância do Kappa). No artigo 2 foram utilizadas 18 partidas de sêmen classificadas de acordo com o índice de fertilidade de cada touro em dois grupos: de Alta (n=9) e Baixa fertilidade (n=9). A classificação do escore foi proporcionada pela central com base em dados provenientes de 33.198 serviços por IATF. As partidas foram submetidas às análises convencionais, CASA, análise por sondas fluorescentes para avaliar a porcentagem de PIAIA em microscopia de epifluorescência e produção de marcadores mitocondriais por sondas fluorescentes na citometria de fluxo. Foram realizadas análises de correlação de Pearson todas as características espermáticas e os efeitos entre grupos de fertilidade foram avaliados mediante ANOVA e Tukey 5%. No artigo 3 o objetivo determinar a relação entre qualidade espermática medida pela produção de marcadores mitocondriais e integridade das estruturas espermáticas com a taxa de prenhez (TP%) resultante de um programa de inseminação artificial e tempo fixo (IATF). Neste estudo, 29 partidas de sêmen convencional usadas para inseminar 4.795 vacas da raça Nelore submetidas ao mesmo protocolo de IATF, e após o diagnóstico de prenhez foram classificadas em três grupos: Alta fertilidade (A) com TP ≥60%, Média fertilidade (M) TP entre 53,0 e 59,9% e de Baixa fertilidade (B) TP <52,2%. Doses de sêmen das mesmas partidas foram descongeladas a 37°C durante 30 segundos e submetidas às análises convencionais, CASA, análise por sondas fluorescentes para avaliar a porcentagem de PIAIA em microscopia de epifluorescência e produção de marcadores mitocondriais por sondas fluorescentes na citometria de fluxo. Foram realizadas análises de correlação de Spearman para todas as características espermáticas e os efeitos entre grupos de fertilidade foram avaliados mediante ANOVA e Tukey 5%. No artigo 4 o objetivo foi determinar as subpopulações pela morfometria espermática em partidas de sêmen com diferente escore de fertilidade. Foram utilizadas 13 partidas de sêmen de 6 touros, sendo três touros de alto escore de fertilidade (n=9) e três de baixo escore de fertilidade (n=9). Duas palhetas de cada partida foram descongeladas e uma alíquota foi depositada em formol salino (4%) e posteriormente foi feito a análise por gota húmida para aquisição de 200 imagens da cabeça espermática que foram processadas pelo programa Imagem J para determinação da morfometria, os dados foram submetidos a análise multivariada de agrupamento para formação de subpopulações pelo método de Wards e posteriormente o efeito do grupo de fertilidade foi avaliado por ANOVA e Tukey 5%. Os resultados mostraram que os marcadores da função mitocondrial são bons indicadores da função e qualidade espermática; no entanto a heterogeneidade do sêmen bovino, com subpopulações espermáticas com boa e má qualidade, varia entre touros e entre partidas do mesmo touro e gera confusão na resposta de algumas análises. Determinou-se também, que a presença de subpopulações espermáticas (SBP) com variação na morfometria da cabeça (SBP1, SBP2, SBP3 e SBP4), sendo que a SBP4 foi associada com baixo escore de fertilidade. A conclusão geral é que a qualidade seminal impacta na fertilidade in vivo em bovinos. Sendo que a morfometria da cabeça espermática e funcionalidade das mitocôndrias teve maior impacto. No entanto, todas as características de qualidade espermática devem ser avaliadas em conjunto para determinar o potencial de fertilidade de uma amostra seminal. / The objective of this study was to evaluate the sperm characteristics of bovine semen and the impact on fertility when used in an IATF program. Four experiments were carried out and described in the form of scientific articles. In article 1. We compared the semen quality determined by subjective and objective methods for the in vitro sperm analysis of bovine semen. According to the results, three groups were analyzed: high quality (A), good quality (B) and high quality (A), Questionable quality (Q). Subsequently, the results of objective analyzes using fluorescence probes by epifluorescence microscopy were analyzed to determine the integrity of plasma, acrosomal membrane and mitochondrial membrane potential (% PIAIA); And using the computerized sperm motility evaluation system (CASA), the effect was evaluated using ANOVA and Tukey 5%. Afterwards, 67 matches were used to determine the agreement to determine seminal quality according to three methods of seminal evaluation: (1) Subjective analysis considering subjective motility, vigor and sperm morphology (2) Analysis by CASA taking into consideration the TM, VCL, VSL and VAP and (3) Analysis by fluorescent probes considering % PIAIA. Pearson correlation analysis and concordance analysis (Kappa significance) were performed. In article 2, 18 sets of semen were classified according to the fertility index of each bull in two groups: High fertility (n = 9) and Low fertility (n = 9). The classification of the score was provided by the central office based on data from 33,198 services by IATF. The semen were subjected to conventional analyzes, CASA, fluorescent probe analysis to evaluate the percentage of PIAIA in epifluorescence microscopy and production of mitochondrial markers by fluorescent probes in flow cytometry. Pearson correlation analyzes were performed on all sperm characteristics and effects between fertility groups were evaluated using ANOVA and Tukey 5%. In article 3 the objective was to determine the relationship between sperm quality measured by the production of mitochondrial markers and the integrity of the spermatic structures with the pregnancy rate (TP%) resulting from an artificial insemination and fixed time (IATF) program. In this study, 29 departures of conventional semen used to inseminate 4,795 Nelore cows submitted to the same IATF protocol, and after diagnosis of pregnancy were classified into three groups: High fertility (A) with TP ≥ 60%, Average fertility ( M) TP between 53.0 and 59.9% and Low fertility (B) TP <52.2%. Semen doses of the same departures were thawed at 37 ° C for 30 seconds and subjected to conventional, CASA, fluorescent probe analysis to evaluate the percentage of PIAIA in epifluorescence microscopy and production of mitochondrial markers by fluorescent probes in flow cytometry. Spearman correlation analyzes were performed on all sperm characteristics and effects between fertility groups were evaluated using ANOVA and Tukey 5%. In article 3, 18 sets of semen were classified according to the fertility index of each bull in two groups: High (n = 9) and Low fertility (n = 9). The classification of the score was provided by the central office based on data from 33,198 services by IATF. The matches were subjected to conventional analyzes, CASA, fluorescent probe analysis to evaluate the percentage of PIAIA in epifluorescence microscopy and production of mitochondrial markers by fluorescent probes in flow cytometry. Pearson correlation analyzes were performed on all sperm characteristics and effects between fertility groups were evaluated using ANOVA and Tukey 5%. In article 4 the objective was to determine subpopulations by sperm morphometry in semen matches with different fertility scores. Seventeen sets of six bulls were used, three bulls with a high fertility score (n = 9) and three with a low fertility score (n = 9). Two straws of each set were thawed and an aliquot was deposited in saline formaldehyde (4%) and then the wet analysis was performed to acquire 200 images of the spermatic head that were processed by the Image J program to determine morphometry, the data were submitted to a multivariate cluster analysis for clusters by the Ward\'s method and later the effect of the fertility group was evaluated by ANOVA and Tukey 5%. The results showed that markers of mitochondrial function are good indicators of sperm function and quality; However, the heterogeneity of bovine semen, with good and poor quality sperm subpopulations, varies between bulls and between straws and creates confusion in the response of some analyzes. It was also determined that the presence of sperm subpopulations (SBP) with variation in head morphometry (SBP1, SBP2, SBP3 and SBP4), and SBP4 was associated with a low fertility score. The overall conclusion is that seminal quality influences in vivo fertility in cattle. Being that the morphometry of the spermatic head and functionality of the mitochondria had greater impact. However, all sperm quality characteristics should be evaluated together to determine the fertility potential of a seminal sample.

Em bovinos, o sucesso no estabelecimento da gestação depende de interações entre o concepto e o útero. Tais interações ocorrem através de moléculas presentes no ambiente uterino. Falhas nesse processo causam 30-40% de perdas de gestação. As proteínas são constituintes desse ambiente e possuem um importante papel nesse processo. Objetivou-se na presente dissertação caracterizar o perfil protéico do ambiente uterino de fêmeas bovinas, ciclando ou prenhes, durante o período crítico, utilizando eletroforese bidimensional. O objetivo específico foi comparar a composição protéica de lavados uterinos obtidos in vivo, por sonda de folley ou post-mortem no dia 18 após o estro de vacas não inseminadas ou gestantes. Para a obtenção das amostras, 48 fêmeas bovinos tiveram seu ciclo estral sincronizado e foram alocadas aleatoriamente para receberem lavagens in vivo por sonda de folley (12 inseminadas e sete não inseminadas) ou para receberem lavagens post-mortem (12 inseminadas e cinco não inseminadas) no dia 18 após o estro. Após a coleta, os lavados foram processados e submetidos à eletroforese bidimensional. Os géis foram analisados utilizando o programa Image Master-2D ELITE V. 4.01 (GE Healthcare) para determinação do ponto isoelétrico (PI) e peso molecular relativo (PMR) das proteínas nos diferentes grupos e análise da densidade óptica. Foram selecionadas 178 proteínas presentes nos lavados. Em relação à distribuição das proteínas de acordo com o ponto isoelétrico, 74% (132/178) apresentaram PI entre 5,5 e 8, em relação ao peso molecular, 44% (79/178) das proteínas possuíam PMR menor que 50KDa enquanto 54% (95/178) entre 50 e 100KDa. Nos lavados realizados por sonda de folley (FC ou FP) foram selecionadas 151 proteínas, sendo 96 nos lavados de animais cíclicos e 86 nos prenhes. Os lavados realizados post-mortem (PMC ou PMP) apresentaram apenas 54 proteínas, das quais 24 estiveram presentes nos lavados PMC e 36 nos lavados PMP. Em relação ao estado reprodutivo 115 proteínas foram encontradas nos lavados dos animais cíclicos (FC ou PMC), enquanto 104 proteínas foram selecionadas nos lavados de animais prenhes (FP e PMP). Entre os lavados realizados por sonda de folley (FC e FP) 31 proteínas foram comuns entre os estados, enquanto entre os lavados realizados post-mortem (PMC e PMP) apenas seis proteínas estiveram presentes em ambos os lavados. Nos lavados realizados em animais ciclando (FC e PMC) cinco proteínas estiveram presentes em ambos os tipos de lavados, enquanto nos lavados realizados em animais prenhes (FP e PMP) 18 proteínas foram comuns em ambos os tipos de lavado. Entre os lavados FC e PMP ou FP e PMC, 15 e 6 proteínas, respectivamente, foram comuns. As proteínas presentes exclusivamente nos lavados de vacas prenhes, possivelmente estão envolvidas no diálogo materno-embrionário durante o processo de estabelecimento da gestação. Proteínas detectadas exclusivamente nos lavados obtidos via sonda de folley podem ser devidas ao influxo de proteínas do soro sanguíneo em resposta à manipulação do trato reprodutivo durante a obtenção dos lavados. Esperava-se uma maior efetividade dos lavados realizados post-mortem em relação aos realizados por sonda de folley. Entretanto os lavados obtidos por sonda de folley foram melhores por identificar um maior numero de proteínas, permitindo identificar diferenças maiores entre os lavados de animais ciclando e prenhes. Concluiu-se que a eletroforese bidimendional constitui um método adequado para avaliar quantitativamente o perfil protéico do ambiente uterino bovino e que tanto o estado reprodutivo quanto o método de obtenção de lavados uterinos modificam sua composição protéica. Novos estudos são necessários para se obter a seqüência de aminoácidos das proteínas localizadas para que se conheça sua identidade e função na gestação inicial de bovinos. / In the cattle, the outcome for the establishment of pregnancy depends on interactions between conceptus and uterus. These interactions occur through molecules presents in the uterine environment. Failure in this process causes 30-40% of loss in gestation. The proteins are component of this environment and have a important role in this process. The aim of this dissertation was to characterize the protein profile of the uterine environment in cows, cyclic or pregnant, during the critical period, using two-dimensional electrophoresis. The specific aim was to compare the protein composition of uterine washings recovered in vivo, through a folley catheter, with washings recovered post-mortem at day 18 after estrus of not inseminated or pregnant cows. To obtain the samples 48 cows had their estrous synchronized and here aleatoric put in the group to receive washings in vivo through the folley catheter (12 inseminated and seven not inseminated) or to be washed post-mortem (12 inseminated and five not inseminated) at day 18 after estrus. After the recover, the washings were proceeded and submitted to two-dimensional electrophoresis. The gels were analyzed using the software Image Master-2D ELITE V. 4.01 (GE Heathcare) to determine the isoelectric point (PI) and relative molecular weight (PMR) of the proteins presents in the different groups and analysis of the optical density. One hundred and seventy eight proteins were presents in the washings. The distribution of the proteins according to the PI, 74% (132/178) had PI between 5,5 and 8 and according to the PMR 44% (79/178) of the proteins showed PMR lower than 50KDa, while 54% (95/178) had PMR between 50 and 100KDa. In the washings recovered through the folley catheter (FC and FP) 151 proteins were selected, being 96 from the cyclic cows and 86 from the pregnant cows. The washings recovered post-mortem (PMC and PMP) showed only 54 proteins, from those 24 were present in the cyclic animals and 36 in the pregnant animals. According to the reproductive status 115 proteins were found in the washings from the cyclic animals (FC and PMC), while 104 proteins were selected from the washings of the pregnant animals (FP and PMP). Among the washings recovered through the folley catheter (FC and FP) 31 proteins were the same between the reproductive status. While in the washings recovered post-mortem (PMC and PMP) only six proteins were present in both washings. In washings done in the cyclic animals (FC and PMC) five proteins were presents in both kind of washings, while in washings done in the pregnant animals (FP and PMP) 18 proteins were the same in both kind of washings. Among the washings FC and PMP or FP and PMC, 15 and six proteins, respectively were the same. The proteins presents exclusively in the washings of the pregnant animals are probably involved with the embryo-maternal interplay during the process of pregnancy establishment. Proteins detected exclusively in the washings recovered through the folley catheter may be inflow of proteins from the serum, in response to the uterine manipulation during the process of washing. It was expected a better effect from the washings post-mortem than the ones through the folley catheter. However the washings from the folley catheter had a better result, because they identified a greater number of proteins which allowed identify greater differences between the washings from cyclic and pregnant animals. In conclusion, the two-dimensional electrophoresis is a adequate method to analyze the quantitatively proteins profile of the uterine environment in the cow and that both the reproductive status and the method to obtain the uterine washings modify the proteins composition. New studies are necessary to obtain the amino acids sequence of the proteins found so that we know their identity and function in the beginning of pregnancy in the cow.

Com o objetivo de avaliar a influência da gestação, da parição e do puerpério sobre o quadro hemático de caprinos (Capra hircus) da raça Saanen foram colhidas amostras de sangue de animais criados em sistema intensivo, de acordo com o manejo tradicional empregado nas propriedades produtoras de leite do Estado de São Paulo. Nas amostras de sangue, colhidas em frascos contendo EDTA como anticoagulante, foram realizadas as seguintes provas: contagem do numero de hemácias, em câmara de Neubauer modificada, utilizando-se líquido de Gower como diluidor; determinação do volume globular, pelo método do microematócrito; dosagem de hemoglobina, pelo método da cianometaemoglobina; cálculo dos índices hematimétricos (VCM volume corpuscular médio; HCM hemoglobina corpuscular média; CHCM concentração de hemoglobina corpuscular média), contagem do número total de leucócitos, em câmara de Neubauer modificada, utilizando-se o líquido de Thoma como diluidor; e a contagem diferencial de leucócitos, efetuada em esfregaços sanguíneos, corados pelo método de Rosenfeld. No primeiro experimento, delineado para avaliar a influência da gestação e do puerpério foram colhidas amostras de sangue de 150 cabras, divididas em 5 grupos experimentais, conforme a seguir discriminado: G1 composto por 30 cabras não prenhes; G2 - composto por 30 cabras na fase inicial da gestação, (entre 30 e 60 dias de gestação); G3 composto por 30 cabras na fase média da gestação (entre 60 e 120 dias de gestação); G4 composto 30 cabras na fase final da gestação, (com mais de 120 dias de gestação) e G5 composto por 30 cabras recém-paridas (com até 30 dias pós-parto). No segundo experimento, delineado para avaliar a influência da parição e do puerpério sobre o quadro hemático foram colhidas 198 amostras de sangue de 11 cabras, sendo os resultados apresentados em 18 grupos experimentais, conforme a seguir discriminado: 32, 16, 8, 4, 3, 2, 1 e ½ dias antes do parto, imediatamente após o parto, e ½, 1, 2, 3, 4, 8, 16, 32 e 64 dias após o parto. No primeiro experimento, a avaliação dos resultados demonstrou que o eritrograma sofreu influência da gestação, sendo o quadro eritrocitário caracterizado, na fase final da gestação, por uma diminuição do número de hemácias e um aumento nos valores do VCM e do HCM. Também se observou a influência da gestação sobre o leucograma, pois o quadro leucocitário foi caracterizado por uma diminuição gradual do número de leucócitos com o avançar da gestação, atingindo seus menores valores no final da gestação e no puerpério. Essa diminuição ocorreu devido ao comportamento observado para o número absoluto de linfócitos que também diminuiu com a evolução da gestação. Dessa forma, o quadro leucocitário tornou-se, predominantemente, neutrofílico na fase final da gestação e no puerpério. No segundo experimento, a avaliação dos resultados obtidos demonstrou que somente o leucograma sofreu influência da parição e da evolução do puerpério. Nos últimos três dias de gestação observou-se um gradual aumento do número de leucócitos, em decorrência das variações observadas no número total de neutrófilos, sendo o quadro leucocitário, no momento do parto, caracterizado por uma leucocitose por neutrofilia sem desvio à esquerda. Nas primeiras 24 horas após o parto, ainda foi possível ser observado essa leucocitose por neutrofilia que desapareceu nos dias subseqüentes, passando o quadro leucocitário a assemelhar-se, até o final do puerpério, àquele observado na fase final da gestação. / With the intention of evaluating the influence of pregnancy, parturition and puerperium in the hemogram of Saanen goats (Capra hircus), blood samples were taken from goats bred in feedlots on the State of São Paulo. The blood samples were collected with EDTA and submitted to the following tests: erythrocyte counts (in the modified Neubauer hemocytometer, using Gowers liquid as a dilute); packed cell volume (using the microhematocrit method); hemoglobin concentration (using cyanmethemoglobin method); calculated blood indices: MCV mean corpuscular volume; MCH mean corpuscular hemoglobin; MCHC mean corpuscular hemoglobin concentration; total leukocyte counts (in the modified Neubauer hemocytometer, using Thomas liquid as a dilute); and differential leukocyte count (made up with blood smears and stained with Rosenfeld method). The first experiment was designed to evaluate the influence of pregnancy and puerperium. 150 blood samples were collected from five experimental groups of 30 goats each. These were the groups: G1 non-pregnant; G2 initial pregnancy (30 to 60 days of pregnancy); G3 middle pregnancy (60 to 120 days of pregnancy); G4 late pregnancy (more than 120 days of pregnancy); G5 kidding goats (until 30 days after parturition). In the second experiment, the influence of parturition and puerperium was evaluated in the hemogram. 198 blood samples were collected from 11 goats at different moments during pregnancy or puerperium and were allotted into 18 experimental groups as described: 32, 16, 8, 4, 3, 2, 1, ½ days before parturition, immediately after parturition and ½, 1, 2, 3, 4, 8, 16, 32, 64 days after parturition. In the 1st experiment, the evaluation of the results showed that the erythrogram was influenced by the pregnancy, characterizing the hemogram by a decrease on the number of erythrocytes and a raise on the values of the MVC and the MCH. The influence of pregnancy in the leukogram was also studied, showing a gradual decrease on the number of leukocytes further on in pregnancy reaching lower values at the end of pregnancy and puerperium. This happened due to changes observed on the absolute number of lymphocytes that lowered further on in pregnancy, becoming the leukogram mostly neutrophilic at the end of pregnancy and puerperium. In the 2nd experiment, an evaluation of the results concerning the influence of parturition and puerperium in the hemogram demonstrated that only the leukogram was under the influence of these factors. On the last three days of pregnancy, a gradual raise on the number of leukocytes was observed due to same changes on the total number of neutrophils. At the moment of parturition the leukogram was characterized by a leukocytosis due to neutrophilia with no shift to the left. On the first 24 hours after parturition, it was still possible to observe this leukocytosis due to neutrophilia that disappeared on the subsequent days making the leukogram look similar to that observed at the late pregnancy until the end of puerperium.

Sendo a constipação intestinal queixa freqüente em gestantes, procuramos verificar se o complexo hormonal da gestação, e em especial a progesterona, diminui a atividade muscular colônica. Para tanto, estudamos in vivo o registro do sinal mioelétrico, sob diferentes estados hormonais, em quatro pontos do cólon de ratas: ascendente proximal, ascendente distal, médio e cólon descendente por meio de implante de eletrodos na camada sero-muscular colônica. As ratas foram divididas em 5 grupos: controle, ooforectomizadas, ooforectomizadas tratadas com estrógeno, ooforectomizadas tratadas com progesterona e ratas prenhes. Os resultados mostraram uma maior atividade elétrica no cólon proximal em ratas prenhes e nas pré-tratadas com progesterona. Nas ratas prenhes a duração da atividade elétrica máxima foi, de modo significante, maior em todas as distâncias quando comparada com ratas controle. Os resultados sugerem que in vivo a progesterona e o complexo hormonal da prenhez aumentam a atividade mioelétrica do cólon proximal e que a prenhez aumenta a duração da atividade elétrica máxima no cólon em cada distância estudada, levando à formação de fezes mais desidratadas. Progesterona e prenhez não devem ser responsabilizadas por hipomotilidade do cólon, uma das hipóteses que poderia explicar a constipação intestinal em gestantes / The aim of this study was to find out if the hormonal complex of pregnancy, especially progesterone, could be responsible for decreasing colon myoelectric activity in female rats. We analyzed the records of colon myoelectric activity in vivo using the method of musculoserosal implantation of electrodes in four regions of the colon: proximal ascendent colon, distal ascendent colon, medial colon and descendent colon. The rats were divided in five groups: control, ovariectomized, ovariectomized and treated with estrogen, ovariectomized and treated with progesterone and pregnant rats. The results showed a greater electric activity in the proximal colon in pregnant and progesterone pretreated rats. In pregnant rats the duration of maximum electric activity was significantly greater in all distances studied. The results suggest that in vivo progesterone and the hormonal complex of pregnancy increase myoelectric activity of the proximal colon, and that pregnancy increases the duration of the maximum electric activity of the colon in every distance studied leading to more dehydrated fecal material. Progesterone and pregnancy should not be responsible for colon hypomotility, one of the hypothesis that could explain intestinal constipation in pregnant women

Orientador: Maria Cristina Cintra Gomes Marcondes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T11:27:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cruz_BreadLeandroGomesda_M.pdf: 401647 bytes, checksum: bd87e2b677303756744ab1ef75ad2316 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Câncer acomete, aproximadamente, uma entre 3000 gravidezes e causa um terço de mortes maternas. A leucina é usada experimentalmente para minimizar as alterações do metabolismo protéico durante o crescimento tumoral. Este trabalho investigou os efeitos do crescimento tumoral sobre o metabolismo protéico e estresse oxidativo nos fetos provenientes de ratas alimentadas com dieta suplementada com leucina. Os grupos de fêmeas prenhes foram divididos da seguinte forma: controle (C), controle com dieta suplementada com leucina (L), tumor (W), tumor com dieta suplementada com leucina (WL), dieta pareada á ingestão diária das ratas do grupo W (Cp), dieta suplementada com leucina e pareada á ingestão diária das ratas do grupo WL (Lp). Após 20 dias de prenhes os músculos fetais foram analisados. Os resultados mostraram que a síntese protéica fetal foi reduzida no grupo W quando comparados aos outros grupos. Houve significativa recuperação da síntese protéica no músculo dos fetos WL sugerindo efeito positivo do uso de aminoácido de cadeia ramificada nessa situação. Ocorreu aumento significativo da degradação protéica nos fetos W. Essa perda protéica foi amenizada pelo uso da dieta suplementada com leucina indicando efeito benéfico sobre a degradação protéica no grupo WL que obteve valores similares ao observado no grupo C. A atividade da enzima glutationa-S-transferase ficou elevada no músculo de fetos WL em comparação com o grupo W. Também houve aumento na atividade da enzima fosfatase alcalina no grupo WL indicando maior atividade celular nesse grupo quando comparado ao grupo W. A presença de MDA (Malondialdeído) no músculo fetal também ficou reduzida nos fetos WL. Com a análise desses parâmetros conclui-se que a dieta suplementada com leucina pode alterar o metabolismo muscular fetal aumentando a síntese protéica e reduzindo o efeito danoso do estresse oxidativo. / Abstract: Cancer occurs in approximately 1 per 3.000 pregnancies and accounts for one-third of maternal deaths. Leucine has been used experimentally to minimize the protein metabolism changes during tumor growth. The present work investigated the effects of tumor growth on muscle protein metabolism and oxidative stress in fetus pregnant rats fed a leucine-rich diet. Fetal groups from pregnant Wistar rats were: control (C), control fed leucine-rich diet (L), tumor-bearing (W), tumor-bearing fed leucine-rich diet (WL), Pair-fed control (P) and Pair-fed Leucine (PL). After 20 days the fetal muscles were analyzed. The results showed that fetal protein synthesis was decreased in W group, when compared to the other groups. The significantly recover on muscle protein synthesis in fetus of WL group suggested a positive effect of this branched-chain amino acid. There was a significant increase on protein degradation in W fetus and a protective effect of the leucine-rich diet on muscle protein waste in WL group, since it was similar to C group. The muscle enzyme glutathione-S-transferase activity was increased in WL fetus in comparison to W group. The muscle alkaline phosphatase activity increased in WL group. The malondialdehyde content (MDA) in fetal muscle was decreased in WL fetus. The leucine supplemented diet can alter the fetal muscle protein metabolism, improving the fetal muscle protein synthesis and reducing the oxidative stress. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Maria Cristina Cintra Gomes Marcondes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-20T14:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Viana_LaisRosa_M.pdf: 2263212 bytes, checksum: 98db6fdccbbe9b7c57c880aa72c62a0f (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A gravidez envolve várias etapas de ajustes fisiológicos, sendo que algumas complicações clínicas podem surgir ao longo deste processo. Dentre as complicações durante a gestação, o câncer destaca-se mais pela sua coexistência com essa complexa condição metabólica, do que pela sua incidência. Na mãe portadora de doença neoplásica, pode haver competição nutricional entre feto e tumor, resultando em alterações no crescimento e metabolismo de ambos. A manipulação da dieta e suplementação nutricional podem minimizar os danos causados pelo tumor. A leucina é um aminoácido que participa do processo de síntese protéica tecidual de forma estrutural e também atua diretamente na sinalização celular; considerando organismos portadores de câncer, a leucina age inibindo o processo de proteólise estimulando o processo de proteogênese. O objetivo desse trabalho foi avaliar o crescimento fetal em associação ao desenvolvimento de câncer em camundongas prenhes submetidas à dieta rica em leucina. Os resultados obtidos referem-se a avaliação de fêmeas adultas (60-90 dias) da linhagem NMRI, prenhes, submetidas a suplementação nutricional com leucina portadoras ou não do adenocarcinoma de colon MAC16 e inoculadas ou não com líquido ascítico ativo ou inativado . Foram avaliados, nessas fêmeas, dados morfométricos como peso relativo de coração, fígado, baço, adrenal, músculo e placenta, sendo observado discreta diminuição do peso relativo da carcaça, coração, músculo e placenta nos grupos portadores de tumor e inoculados com líquido ascítico ativo, quando comparados aos seus grupos controles. Essa diminuição, provavelmente foi induzida pelo crescimento tumoral ou por seus fatores presentes no líquido ascítico. Em contrapartida, houve aumento no peso relativo do fígado e baço nos grupos portadores de tumor, inoculados com líquido ascítico ativo bem como inativo. Também foi possível observar que, nos grupos suplementados com leucina, o peso relativo de alguns órgãos como, músculo e placenta, foi superior ao dos grupos que receberam a dieta controle, mostrando possível efeito protetor da leucina contra a espoliação desses tecidos. Foram analisados também dados bioquímicos nos soros materno e fetal, além da composição corpórea fetal. No soro materno observamos que houve diminuição discreta na concentração de albumina e glicose nos grupos portadores de tumor. Houve aumento da reabsorção de fetos por fêmea nos grupos portadores de tumor e inoculados com líquido ascítico, e ainda nesses mesmos grupos houve modulação desse efeito quando houve suplementação nutricional com leucina. No soro fetal, houve diminuição na concentração de proteínas totais, albumina e glicose, alem do aumento dos aminoácidos gliconeogênicos, como alanina e glutamina, nos grupos implantados com o tumor submetidos a dieta controle. Em contrapartida, os grupos com leucina mostraram discreto efeito protetor da suplementação com esse aminoácido. Concluímos, que os efeitos do crescimento tumoral são para alguns parâmetros mimetizados com a inoculação de líquido ascítico, porém podem ser modulados, na maioria dos parâmetros, com a suplementação nutricional de leucina. A suplementação nutricional com a leucina promoveu efeito benéfico, contribuindo para a manutenção e modulação dos efeitos deletérios causados pela presença da neoplasia, como manutenção da glicemia e proteína totais séricas, além de diminuir reabsorções fetais e também contribuiu para melhorar a atividade placentária nas mães, independente da inoculação ou não do líquido ascítico / Abstract: Pregnancy is a complex process involving several physiological steps and some clinical complications can alter the homeostasis adjustments during this process. Among the complications during pregnancy, cancer is very important for its coexistence than the incidence with this complex metabolic condition. In tumour-bearing mother, there is possible nutritional competition between foetal and tumour, resulting impaired growth and metabolic changes in both mother and foetus. The nutritional supplementation can minimize the damage caused by the tumour. Leucine acts as a cell signalling improving protein synthesis process and tissue structure. Considering cancer patients, leucine inhibits the process of proteolysis. The aim of this study was to evaluate foetal growth in association with cancer development in pregnant mice subjected to leucine-rich diet. We evaluated NMRI pregnant mice (60-90 days-old) feeding control or leucine-rich diet, bearing or not MAC16 colon adenocarcinoma and inoculated or not with active- or inactivated-ascitic fluid. Morphometric data showed decrease in the relative weight of carcass, heart, muscle and placenta in tumour-bearing groups and active-ascitic fluid injected groups. These results may be induced by tumour growth or its factors presented in ascitic fluid. In contrast, we observed increase in relative liver and spleen in tumour-bearing and both active or inactivated ascitic-fluid-inoculated groups. In groups supplemented with leucine, the muscle and placenta relative weight increased in comparison to control diet group, suggesting a possible protective effect of leucine against these tissues wasting. Biochemical data were also analyzed in maternal and foetal serum, and foetal body composition. Maternal serum showed slight decrease in serum albumin and glucose in tumour-bearing groups and also increase in gluconeogenic amino acids, such as glutamine and alanine. The foetuses resorption per female increased in all tumour-bearing groups and ascitic-fluid-inoculated dams. The foetal body water was increased in tumour-bearing animals, and also enhanced the serum pro-inflammatory cytokines and glucagon. We conclude that some effects produced by tumour growth can be similar by the ascitic fluid injection, and can be partially modulated by leucine-rich diet. Nutritional supplementation with leucine promoted beneficial effect, contributing to the maintenance and modulation of the deleterious effects caused by the presence of cancer. These effects can be related to maintenance of blood glucose and serum total protein, and reduction of fetal resorption and also improved the signalling proteins activity in placenta tissue, independent of the inoculation of the ascitic fluid / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

O objetivo deste trabalho foi avaliar alguns aspectos reprodutivos de éguas Crioulas a fim de verificar a influência destes nos índices de prenhez: idade das éguas, status reprodutivo, uso do cio do potro, presença de líquido intra-uterino (LIU), eficiência dos tratamentos pós-cobertura, presença de cistos endometriais, realização de vulvoplastia, incidência de ovulações duplas e gestações gemelares. Foram utilizados 517 ciclos de 406 éguas Crioulas de um rebanho comercial, com idades entre dois e vinte e dois anos. O índice de prenhez por ciclo foi de 80,5% aos 12 dias, 76,5% aos 42 dias e a mortalidade embrionária foi de 3,9%. O índice de prenhez foi influenciado pela idade das éguas (P < 0,01). O índice de prenhez no cio do potro foi de 85,4%, melhor que o índice obtido pelas éguas em que não se utilizou este cio e que foram cobertas no subseqüente (P = 0,07). O método de cobertura influenciou a prenhez, sendo a inseminação superior à monta natural (P = 0,01). A idade influenciou a presença de LIU sendo a incidência em éguas com mais de 12 anos maior que nas mais jovens (P < 0,01). A presença de cistos endometriais influenciou negativamente a taxa de prenhez aos 12 e aos 42 dias (P = 0,00). A correção cirúrgica da região perineal melhorou os índices de prenhez aos 12 e aos 42 dias (P < 0,05). A taxa de ovulações duplas foi de 4,84% e não influenciou os índices de prenhez aos 12 e aos 42 dias (P > 0,5). Em 6 ciclos (1,16%) de 5 éguas solteiras foram observadas gestações gemelares. Concluímos que a fertilidade das éguas Crioulas é influenciada pela idade das éguas, pela conformação vulvar, pela presença de cistos endometriais e pelo status reprodutivo. O acúmulo de LIU é um fator importante na reprodução da égua Crioula e deve ser observado e devidamente tratado para a obtenção de melhores índices de prenhez. / The aim of this study was to evaluate the reproductive aspects of Crioulo mares to verify the influence of the following aspects on the pregnancy rates: mare’s age, reproductive status, use of foal heat, presence of intrauterine fluid (IUF), efficiency of post-breeding treatments, presence of endometrial cysts, incidence of double ovulations and twin pregnancies. There were used 517 cycles of 406 Crioulo mares of a commercial herd, with ages varying from 2 to 22 years old. Pregnancy rate per cycle was 80.5% at 12 days, 76.5% at 42 days and embryo mortality was 3.9%. The pregnancy rate was influenced by the age of the mares (P < 0.01). Pregnancy rate on foal heat was 85.4%, better than the rate obtained by the mares which foal heat was not used and the subsequent cycle was (P = 0.07). The breeding method influenced pregnancy, being artificial insemination superior to natural breeding (P = 0.01). Age influenced the presence of IUF, once the incidence was higher in mares with more than 12 years old than in younger mares (P < 0.01). The presence of endometrial cysts negatively influenced the pregnancy rate at 12 and 42 days (P = 0.00). Surgical repair of perineal region improved the pregnancy rates at 12 and 42 days (P < 0.05). The rate of double ovulations was of 4.84% and did not influence the pregnancy rates either at 12 and 42 days (P > 0.5). In 6 cycles (1.16%) of 5 single mares there were observed twin pregnancies. We concluded that the fertility of Crioulo mares is influenced by the age of the mares, vulvar conformation, presence of endometrial cysts and reproductive status. The accumulation of IUF is an important factor on the reproduction of Crioulo mares and must be observed and correctly treated in order to obtain better pregnancy rates.

O objetivo deste estudo foi determinar os efeitos da aplicação de hCG no quarto dia após a inseminação a tempo fixo (IATF) sobre o tamanho do corpo lúteo (CL) existente, a indução de CL acessórios, a concentração de progesterona (P4) sérica e taxa de prenhez de vacas de corte em lactação. Nos três experimentos, vacas de corte multíparas (n=569), cruza Bos taurus, com período pós-parto entre 45 e 70 dias, foram sincronizadas com a administração de 2mg de benzoato de estradiol i.m. e a inserção de um dispositivo intravaginal contendo 0,750g de P4 (Dia -9). Sete dias após, administraram-se 150 μg de D-cloprostenol e 0,5 mg de cipionato de estradiol, i.m., no momento da retirada do dispositivo (Dia -2). Sessenta vacas de corte em lactação foram divididas aleatoriamente em dois grupos: hCG (n=30) tratadas com 1500UI i.m. de hCG e Controle (n=30) injetadas com 1,5 mL de solução salina i.m. no dia 4 depois do estro (Dia 0). Realizaram-se coletas sanguíneas dos animais para mensuração da concentração sérica de P4 nos Dias 4, 7, 10 e 14 do ciclo estral. Para acompanhamento da dinâmica ovariana, sessenta animais foram divididos aleatoriamente nos grupos hCG (n=30) ou Controle (n=30) e receberam o mesmo protocolo hormonal como citado anteriormente. No Dia 0, os ovários foram examinados por ultrassonografia transretal para determinar o diâmetro do folículo ovulatório; no Dia 4, o diâmetro do FD e presença do CL e no Dia 7 para mensurar a área luteal do CL e a presença de CL acessório. Quinhentas e sessenta e nove vacas (hCG, n= 269 e Controle, n= 300) foram inseminadas a tempo fixo 52-56 horas depois da retirada dos implantes de P4 e tratadas no Dia 4, conforme o protocolo descrito. O diagnóstico de prenhez foi realizado por ultrassonografia 30 dias após a IATF. Os resultados observados, mostraram que vacas tratadas com hCG no Dia 4 apresentaram maiores concentrações sérica de P4 no Dia 7, comparadas com as do grupo Controle (4,45 vs. 3,37ng/mL, respectivamente; p<0,05), mas níveis semelhantes de P4 nos Dias 10 e 14. Os animais do grupo hCG apresentaram CL com maior (p<0,01) área luteal no Dia 7, em relação ao grupo Controle (3,52 cm² vs. 2,66 cm², respectivamente) e uma incidência de 29,6 % de indução da ovulação do FD presente no Dia 4. Observou-se uma taxa de prenhez maior (p=0,071) no grupo tratado com hCG (53,9%) comparando-se com as vacas não tratadas (46,3%). Conclui-se que a administração de hCG no quarto dia do ciclo estral promove o aumento da área do CL, melhora função luteal, pode induzir a formação de CL acessório e tende a aumentar a taxa de prenhez de vacas de corte em lactação. / The aim of this study was to determine the effects of injection of hCG on the fourth day after the TAI on the size of the existing corpus luteum (CL), the induction of CL accessories, the concentration of progesterone (P4) levels and the possibility of increasing the rate of pregnancy of lactating beef cows subjected to synchronization of estrus and ovulation. Multiparous beef cows (n= 569), Bos taurus crossbreed with postpartum between 45 and 70 days were synchronized by administration of 2mg of estradiol benzoate im and the insertion of an intravaginal device containing 0,750g of P4 (Day -9). Seven days later, were administered 150mg of D- cloprostenol 0.5 mg of estradiol cypionate, im, at the time of device removal (Day -2). Sixty lactating beef cows were randomly divided into two groups: hCG (n= 30) treated with im 1500UI hCG and Control (n= 30) injected with 1.5 ml of saline im on day 4 after estrus (Day 0). There were blood collections of animals for measurement by radioimmunoassay of serum P4 on Days 4, 7, 10 and 14 of the estrous cycle. To evaluate the ovarian dinamics, sixty animals (hCG, n= 30 and Control, n = 30) received the same hormonal protocol and were uniformly distributed into groups according to the diameter of the ovulatory follicles on day 0 (estrus). On Day 0, the ovaries were examined by transrectal ultrasonography to determine the diameter of the ovulatory follicle, on Day 4, the diameter of the dominant follicle (DF) and the presence of CL on Day 7 to measure the area of the luteal CL and the presence of accessory CL. Five hundred and sixty-nine cows (hCG, n= 269 and Control, n= 300) were inseminated at a fixed time 52 to 56 hours after removal of the P4 devices treated on Day 4, according to the protocol described previously. The diagnosis of pregnancy were performed by ultrasonography 30 days after TAI. The results demonstrate that cows treated with hCG on Day 4 showed higher serum concentrations of P4 on Day 7, compared with the control group (4.45 vs. 3.37ng/mL, respectively, (p<0.05), but similar levels of P4 on Days 10 and 14. The animals of hCG group had greater (p<0,01) luteal area on Day 7, compared to the Control group (3.52cm² vs. 2.66cm², respectively) and a 29.6% incidence of induction DF ovulation present on Day 4. We observed a higher rate of pregnancy (p= 0.071) in the group treated with hCG (53.9%) comparing with untreated cows (46.3%). We conclude that administration of hCG on the fourth day of the estrous cycle increase the CL area, improves luteal function, can induce the formation of accessory CL and tends to increase the pregnancy rate of lactating beef cows.

Orientador: Paulo Pinto Joazeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-27T11:46:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castelucci_BiancaGazieri_M.pdf: 5603376 bytes, checksum: 36691ec0b0e4ba6ebab8bc72c2ce99ed (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A sínfise púbica (SP) faz parte do conjunto de elementos do sistema musculoesquelético que oferece suporte aos órgãos pélvicos. Em alguns animais, como camundongos e cobaias, esta junção fibrocartilaginosa passa por drásticas modificações hormonalmente reguladas durante a prenhez, resultando no afastamento dos ossos púbicos e na formação de um ligamento elástico (LiP) que facilita a passagem dos fetos durante o parto. Assim como o LiP, a cérvice uterina (CV) também sofre extensa remodelação durante a prenhez e ambos apresentam similaridades no que diz respeito à composição tecidual, proliferação celular e regulação por relaxina e hormônios esteroides. Embora alguns achados relacionem o relaxamento da SP da e CV à ativação de uma resposta pró-inflamatória sem a participação de granulócitos, a participação de outros leucócitos no remodelamento da SP durante o parto e pós-parto ainda não foi devidamente investigada em camundongos. Com a finalidade de caracterizar aspectos que envolvem a participação de leucócitos neste remodelamento realizamos o presente estudo visando à caracterização morfológica e análise da expressão gênica destas células durante o relaxamento (dias 12, 18 e 19ddg) e a remodelamento da SP no pós-parto (dias 1 e 3dpp) associadas à depleção de monócitos/macrófago. A análise morfológica demonstrou a presença de monócitos/macrófagos, positivos para os marcadores dos antígenos 7/4 e F4/80 respectivamente, dispersos na matriz e no interior de lacunas do LiP entre 18ddg e 3dpp nos grupos controle e tratados. No grupo controle, as análises de PCR em tempo real demonstraram o aumento da expressão de receptor (Ccr2) característico de monócitos inflamatórios nos tecidos interpúbicos, no final da prenhez e pós-parto. Durante a separação dos ossos púbicos, as evidencias indicaram tendência à polarização dos macrófagos favorável ao fenótipo anti-inflamatório M2 (Arg1). No relaxamento houve aumento dos fenótipos pro-inflamatório M1 (Il1a, Tnfa) e anti-inflamatório M2 (Il10); enquanto no pós-parto (1dpp) houve aumento na expressão de genes caraterísticos do fenótipo M1 e queda da expressão relativa de Arg1, simultaneamente ao remodelamento da matriz necessário a reorganização da articulação interpúbica. Posteriormente, no 3dpp, apesar da manutenção dos níveis de expressão de Il1a e Tnfa houve aumento da expressão de Il10, Arg1 e Tgfb, genes relacionados ao fenótipo M2, o que potencialmente pode ser associado à ativação de mecanismos de reparo tecidual necessários à reaproximação dos ossos púbicos. A depleção de monócitos/macrófagos nas etapas de separação e relaxamento dos tecidos interpúbicos, assim como no 3dpp favoreceu a polarização de macrófagos de fenótipo M1 (Il1a, Tnfa), resultando em alterações na compactação da matriz extracelular. Este estudo demonstra que os fagócitos mononucleares são células importantes no processo fisiológico do remodelamento da SP do camundongo durante a prenhez, parto e pós-parto. Estas células atuam por meio de mecanismos finamente regulados capazes de garantir o sucesso da reparação tecidual de estruturas suportes da cavidade pélvica do camundongo / Abstract: The pubic symphysis (PS) is part of the musculoskeletal system elements that provide support to the pelvic organs. In mice, this fibrocartinaginous joint undergoes hormonally regulated changes during pregnancy involving the pubic bones reabsortion and formation of an elastic ligament (IpL) that leading to a safe delivery. At this period, the uterine cervix (UC) also undergoes an extensive remodeling sharing some similarities with the IpL tissue like connective tissue composition, cell proliferation and hormonal regulation of that process. Although some findings relate the relaxation of PS and UC to the activation of a pro-inflammatory response without the granulocytes involvement, others leukocytes participation in PS remodeling at the delivery and postpartum were not well investigated in mice. In order to characterize aspects of the participation of leukocytes in the PS remodeling we conducted the morphological characterization and analysis of gene expression of these cells during relaxation (12, 18 and 19 days of pregnancy) and the remodeling of the PS postpartum (1 and 3dpp) associated with the depletion of monocytes / macrophages. Morphological analysis revealed the presence of positive cells for antigen 7/4 and F4 / 80, monocytes and macrophages respectively, dispersed in the matrix and inside gaps of the IpL between the 18dp and 3dpp in the control and treated groups. In control group, the real-time PCR analysis showed increased expression of the characteristic inflammatory monocytes receptor (Ccr2) at the interpúbicos tissues on late pregnancy and postpartum. During pubic bones separation, evidences indicated that macrophages preferentially tend to polarize in the anti-inflammatory phenotype M2 (Arg1). At the relaxation of IpL pro-inflammatory M1 (Il1a, Tnfa) and anti-inflammatory M2 (I110) phenotypes was increased; in the meantime, parallel to the remodeling of the extracellular matrix necessary to the interpúbica joint reorganization at postpartum (1dpp), there was an increase in the expression of genes characteristic of M1 phenotype and decreasing in the Arg1 relative expression. Subsequently, at the 3dpp, despite the maintenance in expression levels of Il1a and Tnfa there was an increased in M2 phenotype-related genes expression (Il10, Arg1 and Tgfb) potentially involved in the activation of tissue repair mechanisms necessary to pubic bones reapproximation. Depletion of monocytes / macrophages at separation and interpubic tissue relaxation, as well as 3dpp favored the M1 macrophage phenotype polarization (Il1a, Tnfa), leading to changes in the extracellular matrix compression. This study shows that mononuclear phagocytes are important cells in the physiological process of mice PS remodeling during pregnancy, labor and postpartum. These cells act through finely regulated mechanisms to ensure the successfull tissue repair of the pelvic support structures in mice / Mestrado / Biologia Tecidual / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

Considerando a importância econômica da precocidade sexual no sistema de produção de bovinos de corte, o objetivo deste estudo foi identificar regiões genômicas associadas a características reprodutivas tais como a prenhez precoce e número de folículos antrais em novilhas da raça Nelore, identificando processos biológicos envolvidos para um melhor entendimento da variabilidade fenotípica destas características. O banco de dados foi composto por 2.283 novilhas, filhas de 78 touros, provenientes de três fazendas comerciais do Brasil. Destas, 1.267 foram genotipadas com aproximadamente 74 K SNPs. Após análises de controle de qualidade, permaneceram informações de 1.255 animais e 64.800 marcadores. A informação genotípica de 42 touros também estava disponível e touros não genotipados com mais de 5 progênies genotipadas foram imputados para a mesma densidade de marcador das novilhas. Análises de associação genômica ampla (GWAS) foram utilizadas considerando uma metodologia Bayesiana (BayesB) para identificar potenciais janelas genômicas (~ 1 Mb) responsáveis pela explicação de &ge; 1% da variância genética das características. Essas regiões foram utilizadas para a pesquisa de genes bem como nas análises de enriquecimento utilizando os termos MeSH. Ainda, blocos haplotípicos dessas regiões genômicas foram ajustados como efeitos classificatórios no modelo BayesB, com o objetivo de estimar a influência de cada alelo dos touros heterozigotos sobre os fenótipos. Os coeficientes de herdabilidade preditos foram 0,28 ± 0,07 e 0,49 ± 0,09 para PP e NF, respectivamente, com correlação genética de -0,21 ± 0,29. Os resultados do GWAS apontaram janelas genômicas significativas nos cromossomos 5, 14 e 18 para PP e 2, 8, 11, 14, 15, 16 e 22 para NF. As análises de enriquecimento revelaram termos significativos (p &LT; 0,05) associados com PP: Munc-18 Proteins, Fucose e Hemoglobins, e com NF: Cathepsin B, Receptors-Neuropeptide e Palmitic Acid. Um total de 15 alelos haplotípicos tiveram efeitos diferentes (p &LT; 0,10) de sua cópia alternativa para PP e 16 para NF. As análises genômicas contribuíram para uma melhor compreensão da estrutura genética das características reprodutivas PP e NF, podendo colaborar com estratégias de seleção para melhoria dos índices reprodutivos de bovinos da raça Nelore. / Considering the economic importance of sexual precocity in beef cattle production system, the objective of this study was to explore genomic regions associated with heifer pregnancy (HP) and total number of antral follicle (NF) in a population of Nellore (Bos indicus) heifers. The dataset was composed by 2,283 animals, which were daughters of 78 sires, coming from three different commercial farms in Brazil. From these, 1,267 were genotyped with around 74 K SNP markers. After quality control analyses, the remained dataset was formed by 1,255 animals and 64,800 markers. Genotypic information of 42 sires was also available, and non-genotyped sires with more than five genotyped progenies in the dataset were imputed for the same marker density of the heifers. A Genome-wide Association Study (GWAS) was performed under a BayesB method to identify potential genomic windows (~1 Mb) that explained at least 1% of the total additive genetic variance of the traits. The pointed genomic regions were used in MeSH enrichment analyses as well as for genes searching. Haplotype blocks that span these potential genomic regions were fitted as classificatory effects in the BayesB model, aiming to estimate the effect of each allele of the heterozygous sires for these regions. The estimated heritabilities coefficients were 0.28 ± 0.07 and 0.49 ± 0.09 for HP and NF, respectively, with genomic correlation of -0.21 ± 0.29. The GWAS results pointed to significant genomic windows on chromosomes 5, 14 and 18 for HP and 2, 8, 11, 14, 15, 16 and 22 for NF. The MeSH enrichment analyses revealed significant (p &LT; 0.05) terms associated with HP: Munc-18 Proteins, Fucose and Hemoglobins, and with NF: Cathepsin B, Receptors-Neuropeptide and Palmitic Acid. The pointed regions by GWAS harbored important genes that can help explain the genetic basis of the considered traits. A total of 15 haplotype alleles obtained better results (p &LT; 0,10) than their alternative copy for HP and 16 for NF. The genomic analyses contributed to a better understanding of the genetic control of the reproductive traits HP and NF and can be useful to selection strategies in improving reproductive indices in Nellore cattle.