Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais. / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:18:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 225447.pdf: 1924169 bytes, checksum: ac3ec7ab64c86f8a12faefe9644bca54 (MD5)

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2013-07-16T04:00:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 275941.pdf: 3920730 bytes, checksum: a8a7ac8b1e5b39af492282cd978cb709 (MD5) / O Planalto Norte Catarinense apresenta uma paisagem em forma de mosaico originado por sucessivas modificações ao longo da história de uso e ocupação territorial, baseada na redução e fragmentação de habitats contínuos de Floresta Ombrófila Mista, representando atualmente uma realidade duplamente funcional, com aspectos produtivos e conservativos exercendo uma nova dinâmica dentro das comunidades naturais. Esta paisagem e suas conectividades se inserem em realidades ainda pouco exploradas pela ciência, especialmente as ciências baseadas em metodologias sistêmicas que incluam, além de tantos outros componentes, o elemento humano como potencial modificar e possível restaurador dos processos naturais. Esta pesquisa se propôs a diagnosticar os distintos elementos formadores da paisagem e suas relações, evidenciando o duplo aspecto produtivo e conservativo da paisagem do Planalto Norte Catarinense com foco em fazendas produtoras de madeira, a fim de gerar ações de conectividade dentro de um contexto ambiental, social e econômico. O diagnóstico foi construído através da elaboração de cenários da relação homem-natureza baseados em diferentes ciclos produtivos e econômicos da Floresta da Araucária; da análise das diversas formas e fontes de heterogeneidade da paisagem numa escala temporal de cinqüenta anos; da caracterização estrutural da paisagem em relação a sua composição espacial e temporal; da avaliação funcional da paisagem sob um aspecto do conjunto de fluxos ecológicos dos organismos e sua interação/comunicação com as diferentes unidades da paisagem. Estudando a paisagem do Planalto Norte Catarinense a partir deste conjunto de metodologias sistêmicas, emergiram novas concepções do que representa esta paisagem: os cenários da relação homem-natureza construídos mostraram que a paisagem estudada modificou-se e eco-evoluiu com os ciclos econômicos baseados na produtividade da Floresta de Araucária em um primeiro momento, e numa época mais recente, numa produtividade silvicultural; sob o ponto de vista das suas diferentes fontes e formas de heterogeneidade foi possível perceber que a paisagem é resultado de um duplo aspecto, natural e transformado, que interagiu ao longo do tempo para formar atualmente uma nova heterogeneidade, determinada por várias características históricas, físicas e espaciais do ambiente e pela atividade desenvolvida da produção de madeira que foi a grande geradora do mosaico heterogêneo da paisagem atual; sob o ponto de vista de sua espacialidade e arranjo estrutural, a paisagem e os seus diferentes elementos atuam e interagem de forma duplamente funcional, conservativa e produtiva, o que pressupôs a adoção de uma nova visão e concepção que privilegiasse também características irregulares, heterogêneas e eventuais das manchas remanescentes de vegetação nativa e do conjunto de talhões de pinus; evidências deste arranjo permitiram caracterizar as potenciais regiões de conectividade entre os remanescentes e as diversas permeabilidades da matriz de pinus, que tende a atuar com funções facilitadoras aos fluxos ecológicos dentro das fazendas e para a região do Planalto Norte com um todo; olhar as unidades conservativas e produtivas desta paisagem sob uma visão de polirrede permitiu perceber que existem fenômenos eventuais e emergentes que são geradores de diferentes conectividades, e que estas estão condicionadas a existência de fluxos ecológicos dissipadores e concentradores de energia e biodiversidade. Esta forma de perceber a paisagem do Planalto Norte Catarinense, ainda que aparentemente simplista, diante de um cenário altamente complexo onde a natureza representa um poli-sistema está baseada em uma concepção diferenciada do que significa a conectividade ambiental para esta região centrada na produção de madeira ou para outros setores produtivos do país. O planejamento de forma conjunta exigirá o desenvolvimento de uma concepção de conectividade social capaz de ver a paisagem acima da visão particular das propriedades. A formação de pesquisadores capazes de problematizar as questões complexas que se apresentam no nosso tempo e com papel de articuladores dos diferentes saberes talvez seja o grande desafio para a ciência e para a construção de ações políticas que possam ser efetuadas na prática e compatíveis com a realidade de cada paisagem e seus componentes sociais e ambientais.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2013-07-16T04:11:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317443.pdf: 2642284 bytes, checksum: 8378fd1dec60fc1b3c8798a9be5c39fc (MD5) / A Mata Atlântica é, provavelmente, o ecossistema mais devastado e mais seriamente ameaçado do planeta, sendo reconhecido como um dos 25 Hotspots de biodiversidade do mundo. Em Santa Catarina as estimativas apontam que existe cerca de 22,4% de remanescentes de Mata Atlântica. Esse quadro de ameaça deve-se principalmente a forte pressão que as florestas tropicais têm sofrido devido ao processo de extrativismo e a substituição da cobertura vegetal original por áreas agrícolas e urbanizadas. Os remanescentes normalmente se encontram na forma de fragmentos e as populações presentes nestes podem apresentar uma redução do potencial evolutivo e sofrer incremento na taxa de extinção devido ao aumento da depressão endogâmica e perda de diversidade genética. Diante disso, o Governo do Estado de Santa Catarina incluiu nas Metas do Projeto Inventário Florístico Florestal de Santa Catarina (IFF-SC) a avaliação da diversidade genética de espécies da flora ameaçadas de extinção, visando maior fundamentação as estratégias de conservação que serão delineadas após a conclusão do Projeto. Assim, o presente trabalho apresenta os dados de diversidade e estrutura genética obtidos para quatro espécies da Floresta Ombrófila Mista do Estado de Santa Catarina e discute áreas prioritárias para conservação e elementos importantes para a elaboração de estratégias de conservação. Para a caracterização da diversidade genética foi utilizada a técnica de eletroforese de isoenzimas em gel de amido. Foram coletadas e genotipadas 86 populações naturais das quatro espécies elencadas para o trabalho, sendo 13 de Ocotea porosa, 31 de Araucaria angustifolia, 30 de Dicksonia sellowianna e 12 de Podocarpos lambertii. Foram encontrados níveis altos de diversidade genética para A. angustifolia, D. sellowianna e O. porosa e baixos para P. lambertii. Estes níveis de diversidade encontrados para as populações destas espécies, mostram grande potencial para conservação in situ, pois as populações possuem diversidade genética potencial para a continuidade do processo evolutivo. Os níveis de divergência genética encontrados entre as populações foram moderados para A. angustifolia e elevados para as outras espécies. As altas divergências genéticas encontradas em D. sellowianna, O. porosa e P. lambertii indicam que uma parte significativa da diversidade genética é encontrada entre as populações. Isso também indica falta de conectividade histórica entre as populações e também pode ser reflexo da expansão da Floresta Ombrófila Mista sobre os campos. Em um enfoque de conservação in situ, fica clara a necessidade de estabelecimento de um grande número de populações das espécies estudadas para a conservação no longo prazo dos níveis de diversidade genética. Também é imprescindível medidas para aumentar a conectividade entre os remanescentes florestais, pois com o atual quadro de fragmentação e seus efeitos sobre as populações, o risco dessa divergência entre populações aumentar ainda mais é alto. Os resultados obtidos para as espécies avaliadas também apontam a necessidade de uma política estadual para a produção de mudas de espécies florestais nativas em função das altas divergências genéticas encontradas e da grande variação nos níveis de diversidade genética e nos índices de fixação para todas as espécies. É importante ressaltar que neste trabalho foram utilizados indivíduos adultos e os resultados obtidos são de acontecimentos históricos. Desse modo, os resultados obtidos são reflexos de eventos reprodutivos ocorridos, em alguns casos antes e em outros casos poucas décadas após, o início do processo exploratório. Levando isso em consideração além do atual quadro de conservação dos remanescentes floretais no estado, as gerações que estão sendo geradas atualmente tendem a apresentar um estado mais crítico do que os indivíduos adultos analisados. Diante disso, ressalta-se a importância da continuidade dos trabalhos com genética de populações das espécies ameaçadas no Estado.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:43:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317842.pdf: 1874621 bytes, checksum: 1625556e3bf30951e00ec4f3cd4b2d07 (MD5) Previous issue date: 2013 / O cacaueiro (Theobroma cacao L.) é uma espécie tropical com tem um elevado valor económico, é o principal elemento na produção de chocolate o alto conteúdo de polifenóis o há posicionado como um produto antioxidante. O cacaueiro a além de ser um dos principais componentes econômicos nas regiões onde é cultivado exerce também um importante papel na preservação ambiental. No entanto, às características botânicas que esta espécie apresenta, associadas a um alto grau de auto-incompatibilidade, os plantios comerciais apresentam alta heterozigosidade genética, afetando diretamente a produtividade do seu cultivo, gerando assim a necessidade dos melhores genótipos serem propagados assexuadamente. Por estão razão, a embriogênese somática se configura como alternativa eficiente para a propagação de genótipos elite, permitindo a captura e fixação de ganhos genéticos. A técnica de cultura de tecidos, como a embriogênese somática tem sido rotineiramente usada tanto como uma técnica de propagação clonal de plantas, bem como um modelo válido para investigar eventos estruturais, fisiológicos e moleculares que ocorrem durante o desenvolvimento embrionário. No presente trabalho buscou-se avaliar a resposta embriogênica e capacidade de formar embriões somáticos dos genótipos do grupo genético Nacional, visando estabelecer um protocolo de propagação baseado na embriogênese somática. Assim, também integraram-se duas técnicas como a quantificação do padrão de metilação do DNA de embriões e das plântulas obtidas durante a embriogênese somática, assim como também a elaboração de um perfil proteômico dos embriões somáticos formados durante a embriogênese somática de Theobroma cacao L. Propondo-se identificar a relação da metilação DNA e a capacidade conversão dos embriões somáticos, visto que a metilação do DNA é um dos mediadores chave no mecanismo epigenético associado ao desenvolvimento embrionário. Neste contexto, o presente trabalho foi estruturado em capítulos, para facilitar a compreensão dos resultados obtidos. O primeiro capítulo consiste no estado da arte e situação do problema, no qual a traves de uma revisão bibliográfica se trata de mostrar aspectos relevantes de Theobroma cacao L., da embriogênese somática, da metilação do DNA e da proteômica em plantas. O segundo capítulo consiste na avaliação da resposta dos genótipos de grupo Nacional à embriogênese somática. O terceiro capítulo relaciona aos níveis de metilação do DNA global em embriões somáticos formados durante a embriogênese somática secundaria e as plântulas obtidas durante a conversão e o quarto aborda a proteômica comparativa como uma ferramenta para identificar proteínas relacionadas com a capacidade de conversão dos embriões somáticos de Theobroma cacao L.<br>

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:45:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317575.pdf: 1125116 bytes, checksum: b77805baf2ea363cbf337638e0c6cb69 (MD5) Previous issue date: 2013 / A mancha-bacteriana e a podridão negra são doenças de grande importância em plantações de tomate e couve-flor, respectivamente. A produtividade das plantas atacadas por estas moléstias é comprometida principalmente pela redução da área foliar. A aplicação de polissacarídeos de plantas e microrganismos sobre culturas vegetais pode representar uma eficiente forma de controle alternativo de doenças. Este trabalho objetivou avaliar o efeito da goma xantana (GOMA) e de polissacarídeos extraídos da Xanthomonas gardneri (PX) e do parênquima de reserva da babosa (PB) na proteção de plantas de tomate contra a mancha bacteriana e na proteção de plantas de couve-flor contra a podridão negra. A redução da severidade da mancha bacteriana em plantas de tomate tratadas com PB ou GOMA foi da ordem de 83,80 %. A severidade em tomateiros tratados com PX mostrou-se, em média, 59,1 % menor que a das plantas testemunhas. Em couve-flor, todas as doses de PB testadas foram eficientes no controle da doença, reduzindo em média 69,0 % da severidade em relação à testemunha. A GOMA foi capaz de reduzir a podridão negra apenas nas menores doses, diminuindo aproximadamente 66,4 %. Em média, PX foi capaz de reduzir a severidade da podridão negra em 77,8 % em relação às plantas tratadas com água destilada. A uma temperatura média de 26 oC, no interior de uma casa de vegetação, observou-se que todas as suspensões polissacarídicas testadas foram capazes de controlar a mancha bacteriana do tomateiro quando aplicadas 2 ou 4 dias antes da inoculação com o patógeno. Porém, a 19 oC, PB, GOMA e PX controlaram a doença mesmo quando aplicados em um intervalo de tempo maior (6 dias antes da inoculação). PB e GOMA não promoveram uma redução significativa do crescimento in vitro das colônias de X. gardneri e X. campestris pv. campestris em todas as doses testadas. A maior concentração de PX conferiu uma redução de 56,0 % sobre o crescimento bacteriano de X. gardneri e chegou a diminuir 97,6 % do crescimento da X. campestris pv. campestris em relação à testemunha. PB, GOMA e PX promoveram acúmulo de peróxido de hidrogênio em células foliares de tomateiro, porém o mesmo não foi observado em couve-flor. Sob temperaturas mais elevadas (24,5 oC), observou-se que, 4 dias após a pulverização dos tomateiros, as plantas tratadas com PB, GOMA ou PX apresentavam atividade de peroxidase 3, 4,2 e 4,1 vezes maiores que a da testemunha, respectivamente. No sexto dia, a atividade de peroxidases em plantas tratadas com polissacarídeos manteve a mesma tendência. Resultados semelhantes foram observados neste mesmo período em tomateiros tratados com ASM. A atividade de polifenoloxidases foi aumentada apenas nos vegetais pulverizados com PB e ASM. Além da atividade de peroxidases e polifenoloxidases, também foi avaliado o acúmulo de compostos fenólicos totais e flavonóides em folhas de tomateiro tratadas com diferentes polissacarídeos e inoculadas 4 dias após a pulverização dos mesmos, sob uma temperatura média de 24,5 oC. As suspensões polissacarídicas não influenciaram no conteúdo de compostos fenólicos totais em folhas de tomateiro. Porém, foi evidenciado um aumento sutil no teor de flavonóides em plantas tratadas com PB após a inoculação do patógeno. Além do aumento da atividade enzimática ser evidenciado em tomateiros cultivados sob altas temperaturas, também observou-se um incremento da atividade de enzimas (peroxidases, polifenoloxidases e FAL) em plantas cultivadas em casa de vegetação, sob uma temperatura média de 19,2 oC, e tratadas com PB, GOMA ou PX. Em couve-flor pulverizada com os polissacarídeos não foi observada uma alteração da atividade de polifenoloxidases. Contudo, verificou-se que após 2 e 4 dias da aplicação dos tratamentos, a GOMA e PX elevaram significativamente a atividade de peroxidases. Os resultados do presente estudo mostram a capacidade de PB, GOMA e PX em ativar mecanismos de defesa do tomateiro e da couve-flor e, consequentemente, de controlar doenças como a mancha bacteriana e a podridão negra. <br> / The bacterial spot and black rot are diseases of major importance in tomato and cauliflower crops, respectively. The productivity of plants infected by these diseases is affected especially by reduced leaf area. The application of plant polysaccharides and microorganisms on crops may represent an efficient way of controlling these diseases. This study evaluated the effect of xanthan gum (GOMA) and polysaccharides extracted from Xanthomonas gardneri (PX) and from aloe reserve parenchyma (PB) to protect the tomato plant against bacterial spot as well as the cauliflower against the black rot. The reduction of bacterial spot severity in the tomato plants treated with PB or GOMA was around 83.80 % and when treated with PX was, on average, 59.1 % lower than the control plant. In cauliflower, all the tested PB's doses were effective in disease control, reducing, on average, 69.0 % of severity compared to the control plants. The GOMA reduced the black rot only at lower doses, decreasing approximately 66.4 %. On average, doses of PX, reduced the severity of black rot in 77.8 % compared to plants treated with water. At a temperature of 26 oC, it was observed that all the tested polysaccharide suspensions were able to control the bacterial spot of tomato plants when applied 2 or 4 days before inoculation with the pathogen. However, at 19 ºC, PB, GOMA and PX controlled the disease even when applied in a longer interval (6 days prior to inoculation). PB and GOMA did not provoke a significant growing reduction of in vitrocolonies of X. gardneri and X. campestris pv. campestris in all tested doses. A higher PX concentration reduced 56.0 % of X. gardneri and decreased 97.6 % of X. campestris pv. campestris bacterial growth in relation to the control. PB, PX and GOMA promoted accumulation of hydrogen peroxide in tomato leaf cells, but the same was not observed in cauliflower. Under higher temperature (24.5 °C), it was observed that, 4 days after the application on tomato plants, those treated with PB, PX or GOMA showed peroxidase activity 3, 4.2 and 4.1 times higher than the control plant, respectively. On the sixth day, the peroxidase activity in plants treated with polysaccharides kept the same tendency. Similar results were observed at the same period in plants treated with ASM. The activity of polyphenol oxidases was increased only in plants sprayed with PB and ASM. It was also evaluated the accumulation of total phenolic compounds and flavonoids in tomato leaves treated with different polysaccharides and inoculated 4 days after spraying under an average temperature of 24.5oC. The polysaccharide suspensions did not influence the content of total phenolic compounds in tomato leaves, however, it was observed a slight increase in flavonoid content in plants treated with PB after pathogen inoculation. Besides the increase of enzyme activity was evidenced in tomato plant grown under high temperatures it was also observed an increase in the activity of enzymes (peroxidases, polyphenol oxidases and FAL) in plants grown in a greenhouse under an average temperature of 19.2 °C and treated with PB, GOMA or PX. In cauliflower plants sprayed with the polysaccharides it was not observed any change in the activity of polyphenol oxidases, however, it was verified that 2 and 4 days after application of treatments, GOMA and PX, the activity of peroxidases increased significantly. The results of the present study demonstrate the capacity of PB, GOMA and PX in activating latent defense mechanisms of tomato and cauliflower plants to control diseases such as black rot and bacterial spot.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-graduação em Recusos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:48:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 318276.pdf: 2781242 bytes, checksum: 3a2d76a128184f2689f22105a2a2fde9 (MD5) Previous issue date: 2013 / O hormônio ácido abscísico (ABA) participa da sinalização celular em situações de estresse. Buscou-se, nesse estudo, verificar a expressão de genes envolvidos no sistema antioxidante em resposta ao ABA de uma variedade de milho com baixa produção de flavonoides (p1-ww). Foram aplicadas às plântulas concentrações crescentes de ABA, sendo controle (água), 10, 100 e 1000 ?M. As coletas das folhas medianas foram realizadas após 3, 6 e 12 horas de tratamento. As amostras foram usadas para posterior isolamento do RNA, síntese de cDNA e qRT-PCR. Foi realizada a quantificação relativa (método do ?Ct) dos transcritos de actina (act), Zm actina (Zmact), -glumamilcisteína sintetase ( -ecs), glutationa sintetase (gsh-s), glutationa redutase (gsr1), gluatationa S-transferase (gst23), ascorbato peroxidases (apx1 e apx2), catalases (cat1 e cat3) e superóxido dismutase (sod2), em relação aos transcritos de ?-tubulina (tub), gene de referência. O experimento foi repetido três vezes. Foram realizadas análises estatísticas pelo teste de Kruskal-Wallis, com 99% de significância e o grupo 1000 ?M de ABA foi excluído das análises por apresentar variação do transcrito tub. Os resultados mostraram que não houve modificação de expressão dos genes cat3, apx2 e gsr1 em resposta ao tratamento com ABA. Porém, os genes cat1, apx1, sod2, -ecs, gsh-s e gst23 mostraram expressão diferencial. O aumento significativo mais frequente ocorreu das amostras controle para as tratadas com 100 ?M de ABA, ocorrendo aumento após 3, 6 e 12 horas de tratamento dos genes act, Zmact, cat1 e gst23. Já para sod2 e -ecs houve aumento em 100 ?M de ABA após 6 e 12 horas, para gsh-s após 3 e 6 horas e para o transcrito de apx1 após 6 horas. O aumento observado, em uma variedade de milho com expressão diminuída de flavonoide, na expressão de 6 genes envolvidos no sistema antioxidante em resposta ao tratamento das folhas com 100 ?M de ABA, confirma que o ABA age como mediador do sistema antioxidante da célula vegetal <br> / The purpose of this work is to describe the knowledge and practice of mammography as well as to identify associated factors in adult (20 to 59 years old) and elderly women (from 60 years old on). Data was attained in two population studies with independent samples; one with adult women and the other with elder ones, both living in urban areas of Florianopolis (SC) city in 2009-10. Variable dependent on mammography knowledge was built according to the sum of adequate responses of nine questions about it, and varied from zero to nine for all adult and elder women who participated. Another dependent variable, an inadequate practice of mammography, was defined as the examination with periodicity over 1 year in women from 40 to 69 years old. For the knowledge analysis about mammography, the average of adequate responses was estimated and the prevalence for the inadequate practice. Average reasons of adequate responses of knowledge and prevalence reasons of inadequate practice were estimated as well as their respective confidence intervals of 95% per crude and adjusted Poisson regression. Among the adults, 23.1% answered all questions appropriatelu and the appropriate average was 7.2 (IC95%: 7.1-7.3). In the adjusted model we associated a higher age group, educational and income levels to the knowledge about mammography. The prevalence of inadequate practice in adults was 49.2% (IC95%:44.5-59.4); the fact of not having a private health insurance increased this prevalence and reduced a greater knowledge. For the elderly women, 15.3% answered all questions appropriately and the average of adequate responses was 6.4 (IC95%: 5.26.5) and factors associated to the adjusted model were related to a lower age group, increased educational and income levels, and the identification of mammography as the main diagnosed method for breast cancer. Prevalence of inadequate practice was 55.0% (IC95%:50.6-59.4) and associated factors belonged to the first income quartile, the lack of an educational background, the fact of not having a partner, and there was a reduction of such prevalence once the mammography knowledge increased. Mammography knowledge reduces the inadequate practice and must constantly be propagated among women, especially for those with lower educational and income levels.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:50:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 319149.pdf: 1874177 bytes, checksum: 1cea7677a7ae8908fa6c31165458c598 (MD5)

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:51:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 321523.pdf: 4932600 bytes, checksum: 1ae132ba78a22b9e3beb07d2926f7885 (MD5) Previous issue date: 2013 / A Araucaria angustifolia é uma conífera da família Araucariaceae, com ocorrência na floresta ombrófila mista, tipologia do bioma Mata Atlântica do Brasil que atualmente, encontra-se ameaçada de extinção, Esta condição reforça a necessidade de aplicação de medidas para a conservação desta espécie. Para que isto ocorra de forma eficaz é necessário o emprego conjunto de manejos convencionais para conservação dos remanescentes florestais e ferramentas biotecnológicas. Sendo assim, o presente trabalho propõe avanços na área de fisiologia, bioquímica e morfogenética que podem ser aplicados em técnicas de conservação de sementes e a propagação in vitro via embriogênese somática desta espécie. Anaálises de western blot em sementes de araucária detectaram a presença de dehidrinas nos extratos termoestáveis e termosensíves de eixos e cotiolédones de embriões zigóticos dessa espécie, e um possível mecanismos de defosforilação dessas proteínas. Além disso, imunolocalizações in situ por microscopia de luz (ML) e microscopia eletrônica de transmissão (MET) mostraram que estas proteínas estão presentes em todos os tecidos dos eixo embrionário e cotilédones, e a nível subcelular elas foram associadas aos corpos proteicos, microcorpos e a cromatina no núcleo. Os padrões desenvolvimento de embriões somáticos desta espécie foram acompanhados por ML, microscopia confocal (MC), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e MET. Os resultados mostraram que culturas embrionárias de A. angustifólia proliferam através de massas pró-embrionároas (MPE) em três estágios de desenvolvimento, I, II e III, e que somente o estágio III é capaz de dar origem aos embriões somáticos (ES) iniciais. ES iniciais foram caracterizados pela presença de massa embrionária (ME) composta pelas células embriogênicas (CE), a qual é ligada a região do suspensor. O suspensor foi composto inicialmente pelas células do embrionárias do tubo (CT), seguidas pelas células de suspensor (SC), sendo que estes dois tipos celulares se diferem pelo diferente grau de vacualização e desorganizaçãoo celular. Além disso, por análise de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foi possível verificar que o desenvolvimento inicia dos embriões somáticos de A. angustifolia foram relacionados com uma redução do ABA endógeno e da poliamina putrescina na etapa de proliferação das MPE, seguido de aumento de ABA endógeno e das poliaminas spermidina e espermina, durante a embriogênese inicial. <br> / Abstract : Araucaria angustifolia is an endangered conifer of the South of Brazil. This condition reinforces the need to implement measures for the conservation of this species. For this to happen effectively requires the combined use of conventional managements for conservation of forest remnants and biotechnological tools. Therefore, this work proposes advances in physiology, biochemistry and morphogenetic that can be applied in seed conservation techniques and in vitro propagation via somatic embryogenesis of this species. Western blot analysis of Brazilian pine seeds detected the presence of dehydrins in the total proteins and heat-stable extracts from axis and cotyledons from zygotic embryos, and a possible mechanisms for dephosphorylation of these proteins. Furthermore, immunolocalization in situ of dehydrins by light microscopy (LM) and transmission electron microscopy (TEM) showed the presence of these proteins in all tissues of the embryonic axis and cotyledons. At the subcellular level they were associated with protein bodies, microbodies and chromatin in the nucleus. The standards development of somatic embryos of this species were followed by LM, confocal microscopy (CM), scanning electron microscopy (SEM) and TEM. The results showed that embryogenci cultures of A. angustifolia proliferate by proembryogenic masses (PEM) in three developmental stages I, II and III and, only the PEM III are able to give rise to early somatic embryos (ES). Early ES were characterized by the presence of embryonal mass (EM) composed of embryogenic cells (EC), which is connected to the region of the suspensor. The suspensor was composed by embryonal tube cells (CT) followed by suspensor-like cells (SC), and these two cell types differ by degree of vacuolation and dismantling cell. Furthermore, by analysis of high performance liquid chromatography (HPLC) was verified that the development of early somatic embryos of A. angustifolia were associated with a decrease in endogenous contentes of ABA and polyamine putrescine in the proliferation step of MPE, followed by an increase of endogenous contentes of ABA and polyamines spermine and spermidina during the early embryogenesis.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:42:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013Bitstream added on 2014-09-24T20:28:57Z : No. of bitstreams: 1 320150.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / O declínio e morte das videiras, causados pelo fungo Fusarium oxysporum f. sp. herbemontis, é um dos principais problemas fitossanitários da viticultura no Sul do Brasil. A erradicação das plantas contaminadas é a principal forma de controle desta doença, por não haver controle químico eficiente. A inoculação com fungos micorrízicos arbusculares é uma alternativa para reduzir ou neutralizar efeitos de patógenos de solo, mas são necessários estudos sobre os mecanismos envolvidos na resposta das plantas nesse processo. Com o objetivo de compreender tais mecanismos um experimento trifatorial foi conduzido com os porta-enxertos de videira SO4, P1103 e R110, suscetível, tolerante e resistente ao patógeno, respectivamente. Eles foram inoculados ou não com o fungo micorrízico arbuscular (FMA) Rhizophagus irregularis e inoculados ou não com Fusarium oxysporum f. sp. herbemontis. Avaliaram-se o crescimento e sintomas de fusariose das plantas, o perfil protéico das raízes foi caracterizado por eletroforese bidimensional, e as proteínas foram identificadas por espectrometria de massa MALDI-TOF. Os porta-enxertos inoculados com R. irregularis apresentaram maior desenvolvimento e melhor estado nutricional, além de possuírem menor índice de doença quando inoculados com o fungo patogênico. O porta-enxerto R110 regulou a expressão de 73 proteínas enquanto que SO4 regulou 59 proteínas. No porta-enxerto SO4 foram identificadas nove proteínas relacionadas à indução de resistência, enquanto que no porta-enxerto R110 foram identificadas seis proteínas. Os resultados, além de confirmar a melhora no crescimento e no estado nutricional das plantas, inoculadas com Rizophagus irregulares, também mostram o potencial de micorrizas no controle biológico de doença radicular e evidenciam diferenças na interação dos porta-enxertos frente ao patógeno, ao FMA e à combinação de ambos <br>

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-06T00:21:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 318764.pdf: 3238245 bytes, checksum: edb0ab063851e305267cd79d0944fd97 (MD5) Previous issue date: 2013 / O Bioma Mata Atlântica é um dos ecossistemas mais ricos em diversidade biológica, contudo é o mais ameaçado do planeta. O processo de devastação causado nesse bioma reduziu sua biodiversidade, afetando suas populações e comunidades como também a flora epifítica. As espécies utilizadas nessa pesquisa são epífitas pertencentes à família Orchidaceae, do gênero Cattleya Lindl., que estão diminuindo suas populações devido à fragmentação deste ecossistema. A conservação ex situ tem sido uma importante ferramenta para a conservação das espécies ameaçadas e a micropropagação permite a conservação destes recursos genéticos vegetais. No presente trabalho foram propostas três investigações relacionadas a morfo-histodiferenciação de orquídeas do gênero Cattleya. Com o objetivo de compreender os estádios referentes a germinação e formação de protocormo até a fase de plântula, estudou-se a germinação assimbiótica de sementes de orquídeas de Cattleya amethystoglossa Linden & Rchb. f. ex Warner in vitro, caracterizando a diferenciação morfológica e histológica durante os processos de germinação e desenvolvimento dos protocormos até o estádio de plântula. Sementes C. amethystoglossa passaram pelo processo de desinfestação e foram inoculadas em meio de cultura MS/2. As análises revelaram que o embrião após intumescimento rompe a testa, caracterizando a germinação e constitui o protocormo, o qual, no desenvolvimento, apresenta-se com primórdios foliares, no ápice, e rizóides, na base. No estádio que surge a primeira raiz passa a constituir a plântula. Nesse estádio em que o protocormo passa a ser uma plântula e esta constituído pelas primeiras folhas, pode-se induzir a formação das estruturas semelhantes a protocormos (ESPs). Utilizando este processo, no capítulo II, foi objetivado investigar através de estudos morfológicos e histológicos a etapa de obtenção das ESPs utilizando o processo de indução de explantes foliares de Cattleya tigrina A. Rich. ex Beer. Como explantes foram utilizados folhas jovens de C. tigrina cultivadas in vitro, inoculadas com a face abaxial em contato com o meio de cultura baseado em MS e suplementado com a metade das concentrações de macro e micronutrientes, suplementado com 20 µM de TDZ para induzir a formação das ESPs. A regeneração destas estruturas teve origem epidérmica, iniciando na face abaxial da folha inoculada. A região basal dos explantes foi a que apresentou maior quantidade de regeneração das ESPs. Estas ESPs apresentavam rizóides, na sua base, com a função de obtenção de nutrientes. A proliferação destas ESPs aconteceu gradativamente e em estádios mais avançados foram mais numerosas e mais volumosas. Estas ESPs foram selecionadas e subcultivadas em meio de cultura isento de fitoreguladores. Com a obtenção destas ESPs, objetivou-se estudos relacionados a morfo-histodiferenciação das ESPs, sob diferentes concentrações de giberelina e sacarose, para regeneração ou desenvolvimento de C. tigrina. As análises revelaram que as ESPs submetidas ao tratamento suplementado com 5 g.L-1 de sacarose e 5 µM ácido giberélico (S5G5) apresentaram uma melhor resposta morfológica e histológica de diferenciação em relação aos outros tratamentos. Estas ESPs permaneceram com a coloração verde, com alongamento caulinar e primórdios foliares. Os tratamentos submetidos com 20 g.L-1 de sacarose (S20G0) e 20 g.L-1 de sacarose e 5 µM giberelina (S20G5), não foram eficientes na regeneração de plantas, observando necrose total e ou parcial das ESPs. Para isso foi proposto realizar análises bioquímicas, verificando o teor de amido, carboidratos totais, clorofila a e b, e carotenóides totais. A partir dos resultados foi constatado que o tratamento S20G0 apresentou as concentrações mais elevadas de teores de carboidrato e amido, remetendo para alta concentração de sacarose no meio. Os teores de clorofila a, b, total e carotenóides nos tratamentos S20G5 e S5G5 apresentaram diferenças significativas quando comparadas com o tratamento S20G0. Sugere-se que a alta concentração de sacarose no meio de cultura pode ter ocasionado redução nos teores de clorofila e consequentemente na fotossíntese. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que as ESPs suplementadas com 5 g.L-1 de sacarose e 5 µM de ácido giberélico estiveram mais aptas a formar plantas, pois apresentaram parte aérea alongada, com primórdios foliares. Com estes resultados foi possível elucidar processos de desenvolvimento de C. amethystoglossa, a partir da germinação, e de C. tigrina, a partir da indução para obtenção de ESPs. Análises comparativas das ESPs submetidas a diferentes concentrações de sacarose e giberelina mostraram que elevados níveis de sacarose, para regeneração das ESPs, podem vir a ocasionar necrose das ESPs. O meio suplementado com 5 g.L-1 de sacarose e 5 µM de ácido giberélico, através das análises morfo-histológicas e bioquímicas, revelou ser o mais eficiente para obtenção de plantas. <br> / Abstract: The Atlantic Forest biome is one of the richest ecosystems in biological diversity, yet it is the most endangered in the world. Devastation of this biome has diminished its biodiversity, affecting its populations and communities as well as the epiphytic flora. The species used in this research are epiphytic belonging to the Orchidaceae family, genus Cattleya Lindl., whose populations have declined due to the fragmentation of this ecosystem. Ex situ preservation has been an important tool for managing the preservation of endangered species, and micropropagation enables the preservation of plant genetic resources. In the present work, three investigations were proposed for the morpho and histodifferentiation of orchids of the genus Cattleya. Aiming to understand the stages relating to the germination and formation of protocorm until reaching the plantlet phase, nonsymbiotic in vitro germination of seeds of orchids Cattleya amethystoglossa Linden & Rchb. f. ex Warner was studied, characterizing the morphological and histological differentiation during the processes of germination and development of protocorms until the seedling stage. Seeds of C. amethystoglossa were disinfected and inoculated in a MS/2 culture. The analyses revealed that the embryo after swelling breaks the testa cell, characterizing germination, and constitutes the protocorm, which, during development, presents leaf primordia at the apex and rhizoids at the base. At the stage when the first root emerges, it becomes a plantlet. In this stage, in which the protocorm becomes a seedling and is constituted by the first leaves, one can induce the formation of protocorm-like bodies (PLBs). Using this process, in Chapter II, the objective was to investigate via morphological and histological studies the stage of PLBs development, using the process of induction of leaf explants of Cattleya tigrina A. Rich. ex Beer. As explants, young leaves of C. tigrina cultured in vitro were inoculated with the abaxial surface in touch with the MS medium and supplemented with half of the concentrations of macro and micro nutrients, supplemented with 20 µM of TDZ to induce the PLBs development. The regeneration of such structures had epidermal origin, starting on the abaxial surface of the inoculated leaf. The basal region of the explants presented the greatest PLBs regeneration. Such PLBs had rhizoids at their bases, with the function of obtaining nutrients. Proliferation of the PLBs occurred gradually and in the most advanced stages they were more numerous and voluminous. Such PLBs were selected and sub-cultured in culture medium free of plant growth regulators. Upon the development of the PLBs, the goal was to study the morpho and histodifferentiation of the PLBs under different concentrations of gibberellin and sucrose, for regeneration or development of C. tigrina. The analyses showed that the PLBs undergoing treatment supplemented with 5 g.L-1 of sucrose and de 5 µM of gibberellin acid (S5G5) presented the best morphological and histological differentiation response compared with other treatments. Such PLBs remained with a green color, with elongation of the shoots with leaf primordia. Treatments with 20 g.L-1 of sucrose (S20G0) and 20 g.L-1 of sucrose and 5 µM of gibberellin (S20G5) were not effective in the plants regeneration, and total or partial necrosis of the PLBs was found. As a result, it was suggested to conduct biochemical analyses to determine the concentrations of starch, total carbohydrates, chlorophyll a, b, total and carotenoids. The results showed that treatment S20G0 had the highest concentrations of carbohydrates and starch, attributable to the high concentration of sucrose in the medium. The levels of chlorophyll a, b, total and carotenoids in treatments S20G5 and S5G5 showed significant differences when compared with treatment S20G0. It is suggested that the high sucrose concentration in the culture medium might have caused the reduced amount of chlorophyll and, as a consequence, in photosynthesis. According to the results obtained, it was possible to conclude that the PLBs supplemented with 5 g.L-1 of sucrose and 5 µM of gibberellin acid were more efficient in forming plants, because they showed an elongated shoot with leaf primordia. With these results, it was possible to elucidate the development processes of C. amethystoglossa from germination and of C. tigrina from induction to develop PLBs. Comparative analyses of PLBs with different concentrations of sucrose and gibberellin showed that high levels of sucrose for PLBs regeneration might cause necrosis of the same. The morphological and histological analyses showed that the medium supplemented with 5 g.L-1 of sucrose and 5 µM of gibberellin acid was the most effective for the plants development.