A leishmaniose é um grupo de doenças causadas por parasitos do gênero Leishmania com três manifestações clínicas principais: cutânea, mucocutânea e visceral. No Brasil, a leishmaniose é um importante problema de saúde pública pela alta incidência. O ciclo de vida da Leishmania envolve dois estágios principais de desenvolvimento, o promastigota que está presente no vetor, e o amastigota que é intracelular obrigatório do hospedeiro vertebrado. Este protozoário apresenta um alto grau de promiscuidade em quanto ao tipo de célula hospedeira, já que consegue infectar várias células do sistema imune como neutrófilos, macrófagos e células dendríticas, e também células não fagocíticas profissionais. Além disso, Leishmania pode infectar fibras musculares, como tem sido reportado em trabalhos prévios por meio de analises histológicas. Porém, as características da infecção por Leishmania no músculo têm sido pouco estudadas, o que permitiria estabelecer a importância destas células durante a infecção. O objetivo deste projeto foi avaliar as características biológicas da infecção por promastigotas de L. (L.) amazonensis em células musculares esqueléticas (SkMCs). Para atingir isso, camundongos C57BL/6 e BALB/c foram infectados nas patas traseiras, o musculo Flexor Digitorum Brevis (FDB) foi extraído e processado para coloração com hematoxilina/eosina ou imunohistoquímica. Culturas de SkMCs como mioblastos e miotubos foram infectadas com promastigotas metacíclicos de L. (L.) amazonensis por 72h. As infecções foram caracterizadas por meio de imunofluorescência indireta e microscopia confocal. As culturas de SkMCs foram caracterizadas e padronizadas por médio das proteínas Caveolina-1 e Caveolina-3, também foi medido o Ph dos vacúolos parasitóforos de mioblastos e miotubos com laranja de acridina (AO). Adicionalmente, culturas de SkMCs como miotubos foram pré-tratadas com Streptolisina O (SLO) e/ou infectadas com promastigotas metacíclicos de L. (L.) amazonensis por 72h, com o intuito de esclarecer como ocorre a entrada do parasito nas células musculares. Neste caso foi avaliada a produção de IL-1&#946;, IL-6, IL-10 e NO. Além disso, foi quantificado o mRNA de IL1&#946;, IL-6, iNOS, Ama2, UbH e Lyst. A infecção de células mostrou que L. (L.) amazonensis consegue infectar as fibras musculares in vivo, e também as células musculares esqueléticas (mioblastos e miotubos) in vitro. Além disso, o teste de viabilidade mostrou que L. (L.) amazonensis permanece viável dentro do vacúolo parasitóforo após 72h de infecção. Finalmente, foi observado que o tratamento com SLO pode favorecer a entrada do parasito nas SkMCs, como foi evidenciado pelas diferencias no nível de mRNA entre as células infectadas ou infectadas e tratadas com SLO. Os dados em conjunto sugerem que L. (L.) amazonensis tem a capacidade de infectar as células musculares esqueléticas, dado que consegue entrar nestas células, e permanecer viável dentro do vacúolo parasitóforo. A presença do parasito dentro das células induz uma resposta imune no músculo que pode estar relacionada com os processos de reparo do tecido. A entrada de L. (L.) amazonensis nas células musculares esqueléticas durante a infecção no hospedeiro mamífero é importante devido a sua capacidade de manter o parasito viável. / Leishmaniasis is a group of diseases caused by parasites from genus Leishmania. The main clinical manifestations are cutaneous, mucocutaneus and visceral leishmaniasis. In Brazil, leishmaniasis is an important public health problem because of the high incidence. The Leishmania life cycle has two principal developing stages: promastigote inside the insect vector, and amastigote, an obligate intracellular parasite of vertebrate-host cells. This protozoan is highly promiscuous in host cell type, because it infects different immune cells like neutrophils, macrophages and dendritic cells, and also non-professional phagocytes. Besides, Leishmania might infect muscle fibers, as previous studies suggested from histological analysis. However, the characteristics of Leishmania infection in muscle cells is poorly understood, which is important to understand the role of these cells during the infection. The aim of this study was to characterize the infection process by promastigotes of <i.>L. (L.) amazonensis in skeletal muscle cells (SkMCs). C57BL/6 and BALB/c mice were infected in hind footpads, the Flexor Digitorum Brevis (FDB) muscle was extracted and process to dyed with hematoxylin/eosin or immunohistochemistry. SkMCs as myoblasts and myotubes were infected with metaciclic promastigotes of L. (L.) amazonensis during 72h. The infections were characterized using indirect immunofluorescence and confocal microscopy. SkMCs culture were characterized and standardized through Caveolin-1 and Caveolin-3 proteins, and the pH of parasitophorous vacuoles both in myoblasts and myotubes was measured through acridine orange staining. In order to assess how the parasite invades the cells, myotubes were pretreated with SLO and/or infected with metaciclic promastigotes of L. (L.) amazonensis for 72h. The production of IL-1&#946;, IL-6, IL-10 and NO was quantified, and the mRNA levels of IL-1&#946;, IL-6, iNOS, Ama2, UbH and Lyst. The cell infection showed that L. (L.) amazonensis can infect muscle fibers in vivo, and skeletal muscle cells in vitro. Moreover, viability test showed the parasite remains viable inside the parasitophorous vacuole until 72h of infection. Finally, the SLO treatment can favor parasite entrance in SkMCs, as evidenced by differences in mRNA levels between infected cells or infected and treated with SLO. All data suggest that L. (L.) amazonensis can infect skeletal muscle cells, by entering into the cells, and remaining viable inside the parasitophorous vacuole. The parasite presence inside the muscle cells triggers an immune response that may be related with muscle repair processes. The entrance of L. (L.) amazonensis into SkMCs during infection in a mammal host is important because it contribute with parasite proliferation.

Esta dissertaÃÃo buscou identificar atravÃs de vetores autorregressivos (VAR) a relaÃÃo entre variÃveis macroeconÃmicas e a variaÃÃo do saldo das operaÃÃes inadimplidas a mais de 60 dias. Foram construÃdos dois cenÃrios de retraÃÃo econÃmica atravÃs da tÃcnica de impulso resposta. Ademais, a pesquisa identificou que a variaÃÃo do Produto Interno Bruto (PIB) e a variaÃÃo da Taxa Selic Acumulada, em perÃodos defasados, possuem grande correlaÃÃo com a variaÃÃo do saldo das operaÃÃes inadimplidas. Os resultados apontam que i) hà uma relaÃÃo inversa entre o crescimento do saldo das operaÃÃes inadimplidas e o crescimento do PIB na Ãpoca da inadimplÃncia, ii) hà uma relaÃÃo direta entre o crescimento do saldo das operaÃÃes inadimplidas hà mais de 121 dias e o crescimento da taxa Selic um mÃs apÃs a Ãpoca da inadimplÃncia, iii) os choques negativos no PIB afetam o crescimento do saldo das operaÃÃes inadimplidas e o crescimento da PCLD por um perÃodo superior a 12 meses. / This research sought to identify through autoregressive vectors (VAR) the relationship between macroeconomic variables and the change in the balance of operations over 60 days, building two scenarios of economic downturn by impulse response technique. The research identified that the variation of the Gross Domestic Product (GDP) and the Accumulated Selic Interest Rate in delayed periods have high correlation with the change in the balance of defaulting operations. The results show that i) there is an inverse relationship between the growth of the balance of defaulting operations and GDP growth at the time of default, ii) there is a direct relationship between the growth of the balance of defaulting operations for more than 121 days and growth the Selic rate one month after the time of default, iii) negative shocks on GDP affect the growth of the balance of the defaulting operations and growth of the Allowance for more than 12 consecutive months.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-09T12:50:55Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Camila Bastos Ribeiro - 2015.pdf: 1317896 bytes, checksum: 6090f56f4db25d087b49be30b279912d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-09T12:53:24Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Camila Bastos Ribeiro - 2015.pdf: 1317896 bytes, checksum: 6090f56f4db25d087b49be30b279912d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-09T12:53:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Camila Bastos Ribeiro - 2015.pdf: 1317896 bytes, checksum: 6090f56f4db25d087b49be30b279912d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-11-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Studies have reported that illicit drugs can alter immune system function and further suggest a greater commitment related to the use of these drugs, such as increased susceptibility to infection and progression to disease. Considering these effects in the body, we conducted a study to investigate the effect of drug use on the inflammatory response in subjects grouped according to the drug used: marijuana, cocaine and crack users and individuals from more than one drug. Thus, the study groups were: 1. non drug users (control); 2. marijuana users; 3. Cocaine/crack users; 4.cocaine/crack/marijuana users (multiuser). The profile of proinflammatory and anti-inflammatory cytokines and C-reactive protein (CRP) in the plasma of study subjects was investigated. There were also measured the levels of soluble CD14 (sCD14) and lipopolysaccharide (LPS) circulating in the plasma of individuals that are indicative of microbial translocation. We obtained high levels of sCD14, LPS, CRP, IL-6 and IL-8 in multi-user group and decreased levels of IL-6 and TNF- in cannabis user group compared to the control group. This set of findings suggests that illicit drugs may be causing a change in the integrity of the intestinal mucosa multiuser individuals due to the increased presence of LPS and sCD14 was detected in the circulation and changes in the inflammatory response with increased production and / or decreased biomarkers relevant inflammation. / Estudos têm relatado que as drogas ilícitas são capazes de alterarfunções do sistema imune e ainda sugerem um maior comprometimento relacionado ao uso dessas drogas, tais como,maior susceptibilidade a infecções e progressão para doenças. Considerando esses efeitos no organismo, realizamos um estudo parainvestigaro efeito do uso das drogas sobre a resposta inflamatóriaem indivíduos agrupadosconforme as drogas utilizadas: maconha, cocaína oucrack e indivíduos usuários de mais de uma droga. Assim, os grupos de estudo foram: 1. não usuários de drogas (controle); 2. usuários de maconha; 3. usuários de cocaína/crack; 4. usuários de cocaína/crack/maconha (multiusuários).Foi investigadoo perfil de citocinas proinflamatórias e anti-inflamatórias e proteína C reativa (PCR)no plasma dos indivíduos do estudo. Também foram medidos os níveis de CD14 solúvel (sCD14)e lipopolissacarídeo(LPS)circulantes no plasma dos indivíduos, que são indicativos de translocação microbiana. Observamos níveis elevados de sCD14, LPS, PCR, IL-6 e IL-8 no grupo de multiusuários e níveis diminuídos de IL-6 e TNF-no grupo de usuários de maconha em relação ao grupo controle.Esse conjunto de achados sugere que as drogas ilícitas podem estar provocando uma alteração na integridade da mucosa intestinal de indivíduos multiusuários devido à presença aumentada de LPS e sCD14que foi detectada na circulação e alterações na resposta inflamatória com a produção aumentada e/ou diminuída de biomarcadores importantes da inflamação.

A resposta inflamatória aguda é uma importante defesa contra o Streptococcus pneumoniae, mas a persistência na inflamação pode causar danos aos tecidos. Duas linhagens de camundongos geneticamente selecionadas para resposta inflamatória aguda mínima (AIRmin) e máxima (AIRmax) foram avaliadas frente a um desafio respiratório invasivo com pneumococo. O desafio induziu a morte de 100% dos camundongos AIRmin, e apenas 36,4% dos camundongos AIRmax. A caracterização da resposta imune inata mostrou que ambas as linhagens de camundongos responderam ao desafio com secreção de citocinas pro-inflamatórias. Entretanto, apenas os camundongos AIRmax controlaram a inflamação. Diferenças significativas quanto à expressão de metaloproteases de matriz sugerem o papel destas proteínas no controle da infecção. Além disso, os camundongos AIRmin apresentaram um aumento no número de macrófagos expressando o receptor de manose CD206, após o desafio. Uma menor resistência de macrófagos e neutrófilos dos camundongos AIRmin à morte celular programada, após o desafio, também foi observada. / Acute inflammatory response is an important defense against Streptococcus pneumoniae, but persistence of inflammation may result in tissue damage. The susceptibility against an invasive respiratory pneumococcal challenge was evaluated in two outbred mice strains, genetically selected for maximum (AIRmax) and minimum (AIRmin) acute inflammatory responses. The challenge induced the death of 100% of the AIRmin mice and only 36.4% of the AIRmax mice. Characterization of the innate immune responses showed that both mice strains responded to the challenge with the secretion of inflammatory cytokines. However, only the AIRmax mice controlled the inflammation. Significant differences on the expression of matrix metalloproteinases suggest a role of these proteins in the control of the infection. Moreover, the AIRmin mice presented an increase in the number of macrophages expressing the CD206 mannose receptor after the challenge. A reduced resistance of macrophages and neutrophils from AIRmin mice to programmed cell death, after the challenge, was also observed.

Estudos anteriores chamam a atenção para a importância da resposta de observação para o estabelecimento da discriminação em um treino de reforçamento diferencial. A presente pesquisa tem por objetivo analisar a resposta de observação e o movimento dos olhos em uma situação de discriminação simples simultânea. Participaram desta pesquisa seis adultos. Como estímulos, foram utilizadas imagens com alterações da tela Don Quixote, pintada por Pablo Picasso. Duas imagens foram apresentadas simultaneamente, ao longo de tentativas discretas. Em cada tentativa, houve uma imagem na presença do qual a resposta foi reforçada, bem como uma imagem na presença do qual a resposta não foi reforçada. O experimento foi dividido em três fases. Uma Fase Pré-experimental, uma Fase Experimental e uma Fase Pós-experimental. Na Fase Pré-experimental, foram apresentadas duas imagens idênticas. Na Fase Experimental, primeiramente, foram apresentadas as imagens com uma diferença localizada na parte superior esquerda de uma delas. Posteriormente, a diferença foi deslocada para a parte inferior esquerda e finalmente, a diferença foi apresentada na parte superior direita. O conjunto das condições da Fase Experimental previu o estabelecimento de novas discriminações ao modificar as propriedades diferenciais das imagens. Na Fase Pós-experimental, foram novamente apresentadas duas imagens inteiramente idênticas, as mesmas da Fase Pré-experimental. Para o registro do movimento dos olhos, durante todas as fases, foi utilizado um equipamento de rastreamento do olhar. Para efeito de análise, a imagem como um todo foi dividida, primeiramente, em três partes: parte 1 a área que circunscreve a diferença apresentada na Condição 1 ; parte 2 a área que circunscreve a diferença apresentada na Condição 2; e parte 3 a área que circunscreve a diferença apresentada na Condição 3. Após esta divisão, foi analisada a distribuição da duração do olhar entre as partes ao longo de todas as fases. Todos os participantes apresentaram um responder discriminado que se replicou nas três condições sucessivas. Um primeiro padrão observado na distribuição da duração do olhar para os três participantes é que, na Fase Pré-experimental, todos olharam a) por mais tempo para o Dom Quixote, b) por um tempo intermediário para o Sancho Pança e c) por menos tempo para o Sol. Estes padrões se repetiram, com pequenas alterações, ao longo das condições experimentais e na última fase. Nas condições experimentais, durante a discriminação, o que pôde ser observado é que a duração de olhar para as partes das imagens que possuíam a propriedade relevante para a discriminação foi elevada enquanto a duração de olhar para outras partes diminuiu. Todos os participantes apresentaram uma duração de observação maior para o S+ do que para o S, observação seletiva. Os dados sobre as respostas manuais na tarefa foram discutidos a partir do aprendizado cumulativo, learning set e do controle de estímulos. Os dados sobre a distribuição do olhar foram discutidos a partir de seu estabelecimento enquanto resposta de observação, sua extinção e ressurgência. / Previous studies draw attention to the importance of observing response to the discrimination establishment in differential reinforcement training. This research aims to analyze the observing response and eye movement in a simultaneous simple discrimination situation. Six adults participated. Images of Don Quixote screen painted by Pablo Picasso were used as stimuli. Two images were presented simultaneously along discrete trials. The experiment was divided in three phases: Pre-experimental Phase, Experimental Phase and Post-experimental Phase. In Pre-experimental phase, two identical images were presented. In the Experimental Phase, the images were displayed with a difference at the top left of it. Subsequently the difference was moved to its bottom left portion and finally the difference was displayed on its upper right. The set of conditions of the Experimental Phase predicted the establishment of new discriminations. In Post-experimental Phase, two identical images were presented again. The picture was divided in three parts: Part 1 - the area surrounding the difference displayed in Condition 1; Part 2 - the area surrounding the difference displayed in Condition 2; and Part 3 - the area surrounding the difference displayed in Condition 3. After this division, the duration of looking at these parts was analyzed throughout all phases. All participants showed discriminative performance in three successive conditions. During the Pre-experimental Phase, all participants: a) spent more time looking at Don Quixote, b) spent an intermediary time looking at Sancho Pança, and c) spent a shot time looking at Sol. These patterns were repeated with minor changes along the experimental conditions and the last phase. Under the experimental conditions the duration of looking at the parts of the images whose property was relevant to the discrimination increased while the duration of looking at other parts decreased. All participants showed an increased duration of looking at the S + than at the S- (selective observing). The manual responses were discussed in terms of learning set and stimulus control. The distribution of looking at was discussed in terms of its establishment as an observing response, its extinction and resurgence.

Avalia o valor reforçador condicionado de estímulos sinalizadores de reforçamento (S+) e extinção (S-) na manutenção de respostas de observação em pombos. Nos dois experimentos que formam esta investigação submete pombos privados de comida a sessões compostas por tentativas discretas separadas por intervalos entre tentativas. Apresentadas em seqüência aleatória, metade das tentativas termina com a apresentação de comida independentemente de qualquer resposta do S e metade sem. Sinalizando o início das tentativas, o único disco de respostas disponível na caixa operante é iluminado pela cor branca. Durante uma tentativa, resposta ao disco branco podem torná-lo vermelho ou verde dependendo do tipo da tentativa em vigor. Em linha de base, uma resposta, em intervalo variável, produz a alteração na cor do disco até o final da tentativa. As condições experimentais, inseridas entre duas condições de linha de base, foram diferentes para cada experimento. No experimento 1 (E1), a produção de uma das cores, ora a vermelha ora a verde, é contignte à emissão de 15 ou 24 respostas, adicionalmente às exigências de linha de base. Os resultados mostram que o comportamento dos pombos ajusta-se às exigências da condição experimental para a produção de ambas as cores do disco. Todavia, a cor associada às tentativas que terminam sem a apresentação do comedouro é freqüentemente mais produzida. No Experimento 2 (E2), as exigências para a alteração na cor do disco semantêm sempre como em linha de base. Na condição experimental, no entanto, o tempo máximo de permanência das cores verde ou vermelha no disco de respostas passa a ser de 10 s por apresentação. Passado este tempo, a cor branca retorna ao disco de resposta e as exigências para a produção das cores verde ou vermelha se restabelem. Deste modo, em uma mesma tentativa é possível ocorrer uma ou mais apresentações do estímulo sinalizador. Os resultados do E2 revelam que a ) ) freqüência de reapresentações da cor associada às tentativas que terminam sem a apresentação do comedouro é maior do que a cor alternativa. O conjunto geral dos resultados parece indicar que S-, no procedimento empregado, atua como um estímulo reforçador condicionado na manutenção de respostas de observação. Diferindo de estudos prévios em respostas de observação com pombos, estes resultados mostram que, as variáveis envolvidas no processo de reforçamento condicionado são ainda parcialmente conhecidas. Portanto, relativizam, no momento, conclusões sobre o valor reforçador condicionado de estímulos sinalizadores / The present investigation assessed the conditioned reinforcing value of stimuli that signal reinforcement (S+) and extinction (S-) in the maintenance of pigeons\' observing responses. In the basic procedure employed in the two experiments of this investigation, food-deprived pigeons were given a series of discrete trials. Half of the trials ended with . response-independent food presentation and half without food presentation; the sequence of food and no-food trials was random. At the beginning of each trial, the single response key available in the operant chamber was illuminated with white light. During the trial, pecking the key could change key color from white to red or green, according to whether the current trial was scheduled to end with food or no food. Thus, pecking the white key functioned as an observing response because it produced signaling stimuli (the red and green key colors). In baseline conditions, pecking the white key produced color change on a variable-interval schedule; once changed, keys remained either red or green until the end of the trial. Baseline and experimental conditions alternated, and the experimental conditions differed in the two experiments: In Experiment 1, red or green presentations were contingent upon 15 or 24 pecks in addition to the variable-interval requirement. Results showed that pigeons\' observing behavior adjusted to the experimental condition requirements so that both key colors were produced. The S- key color was produced more often than the S+ color. In Experiment 2, the variable-interval requirements to produce key-color changes were the same in baseline and experimental conditions. However, in the experimental condition, the duration of each green or red illumination was limited to a maximum of 10 s. The white light resumed after 10 s, and the key-color change could be repeated within the same trial (if the subject again met the variable­ interval schedule requirement). Results showed that the frequency of re-presentation of the S- color was higher than that of the S+ color. The results of both experiments suggest that S- may function as conditioned reinforcer, at least in the present procedure. These results diverge from the data in the existing literature with pigeons, and they indicate that the variables that control pigeons\' observing responses are only partially known at present. Therefore, current conclusions about the reinforcing value of signaling stimuli should be qualified

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-08-05T11:56:01Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) ludimilacardoso.pdf: 1127107 bytes, checksum: fb1d15343c99566085805dabb23209ad (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-05T11:56:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) ludimilacardoso.pdf: 1127107 bytes, checksum: fb1d15343c99566085805dabb23209ad (MD5) Previous issue date: 2006 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The development of a Th1 immune response is the key event to prevent Leishmania infection and is linked with the IL-12 production by monocytes, dendritic cells, macrophages and neutrophils. The IL-12 signal induces the increase of IFN-γ production by T cells, favoring the profile of the Th1 immune response and the resistance phenotype to the infection. In the vertebrate host, the leishmania inhabits in cells of the mononuclear phagocyte system (MPS), which is also responsible for the elimination of the parasite. The participation of immature cells of MPS in the initial production of IL-12 has been discussed. It was demonstrated recently that a population of mononuclear phagocytes, derived from bone marrow culture and expressing the marker ER-HR3 produced great amount of IL-12p40 after stimulation in vitro with procyclic or metacyclic promastigotes of L. (L.) major. The initial production of IL-12 by MPS cells is under investigation. It is unclear the role of mononuclear phagocytes, in different stages of maturation, in the production of IL-12p40 in vivo. In this work, we evaluated the involvement of MPS cells, in different stage of maturation, with the IL-12p40 production in vivo in draining lymph nodes of BALB/c mice after 48 h of infection with L. (L.) major. Our results showed that CD31+ cells (mononuclear phagocytes precursors) were absent in the draining lymph nodes of the subcutaneously footpad injection and that the number of ER-MP58+ (immature mononuclear phagocytes), ER-HR3+ cells (mononuclear phagocytes in the intermediate stage of maturation) and 33D1+ (mature phagocytes) increase in the period of 48 h after infection. We showed, also, that ER-MP58+ responsible for great part of the draining lymph nodes IL-12 production 48 h after infection with stationary-phase promastigotes of L. (L.) major in mice BALB/c. We suggested that, in vivo, the ER-MP58+ population, together with other cellular populations, known as IL-12 producers, ER-MP58+ cell has an important role in the inflammation induced by the parasitic inoculum. / O desenvolvimento de uma resposta imune do tipo Th1 é o evento chave para prevenir a infecção murina por Leishmania e está interligada à produção de IL-12 por monócitos, células dendríticas, macrófagos e neutrófilos. A sinalização via IL-12 aumenta a produção de IFN-γ por células T, favorecendo o perfil Th1 da resposta imune e o fenótipo de resistência à infecção. A leishmania, no hospedeiro vertebrado, reside em células do sistema fagocítico mononuclear (SFM), o qual também é responsável pela eliminação do parasito. A participação de células indiferenciadas do SFM na produção de IL-12 vem sendo discutida. Foi demonstrado recentemente que uma população de fagócitos mononucleares, derivados de cultura de medula óssea e expressando o marcador ER-HR3 produzia grande quantidade de IL-12p40 após estimulação in vitro com formas procíclicas ou metacíclicas de L. (L.) major. A produção de IL-12 na infecção por L. (L.) major por fagócitos em diferentes estágios de maturação in vivo ainda não está claro. Neste trabalho, avaliamos o envolvimento de células em diferentes estágios de maturação em linfonodos drenantes após 48 h de infecção por L. (L.) major em camundongos BALB/c, quanto à produção de IL- 12p40. Verificamos que células CD31+ (precursores de fagócitos mononucleares) estão ausentes nos linfonodos drenantes do sítio do inóculo e que o número de células ER-HR3+ (fagócitos mononucleares em estágio intermediário de maturação), células ER-MP58+ (fagócitos imaturos) e 33D1+ (subpopulações de células dendríticas) aumenta no período de 48 h após a infecção. Mostramos também que, células ER-MP58+ são as principais responsáveis por grande parte da produção de IL-12 nos linfonodos drenantes 48 h após a infecção por L. (L.) major em camundongos BALB/c. Sugerimos que, in vivo, a população ER-MP58+ com as outras populações celulares, conhecidas como produtoras de IL-12, têm um papel relevante na inflamação induzida pelo inóculo parasitário.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:14:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Christiane Final.pdf: 3000547 bytes, checksum: a4677dab1f77c53b6cee74e498f4ae2d (MD5) Previous issue date: 2007-11-14 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Hepatitis C virus represents a serious problem on public health, because or the high prevalence in the population, estimate from 0.3% to 14.5%. Hepatitis C is usually transmitted by blood and derivations, and the main etiologic agent of transfusion in the world. The chronic disease, with few clinical manifestations, occurs on 80% of the patients. Furthermore, the hepatitis C, is usually diagnosed when the individual is submitted to serological screening in blood banks. The specific laboratorial diagnostics of HCV is made on researching for anti-HCV antibodies, as on ELISA and Immunoblot tests, but a representative percentual of blood donors shows a specifics antibodies pattern against viral fractions that does not mean as a confirmed infection, but as a undetermined pattern. The immunological response profile developed by the individuals infected by HCV, involves responses of T helper cells 1, mediated by lymphocyte TCD4+ activation, as good as TCD8+ lymphocyte and IL-2 and IFN-production and seems to be an extremely important response for the viral clearance. The objective in the present study is analyze the immunological humoral and cellular response of blood donors whose sororeactive for hepatitis C in ELISA and Immunoblot tests. From September of 2005 to November of 2006 one hundred blood donors sororeactive to hepatitis C and one hundred healthy donors were invited to participate under their consentment of the study. In our results given by Immunoblot supplementary test, 46% showed undetermined results, 36% was reactive and 18% negative. Among negative samples 61.11% (n=11) had a weak positive reaction, among the undetermined, 76% (n=35) had DO/cut off rate below 2 and 50% (n=18) reactive had this rate above or equals to 3. There was no significative statistics differences observed among ALT data on both groups, thus remained under normal values. Among the activated lymphocytes population, those ones of LTCD3+/CD4+ showed statistics difference, whose the Immunoblot confirmed (HCV+/BLOT R) diagnose group shows a fewer cells number from the other groups (soronegative, HCV+/BLOT NR, HCV+/BLOT IND). Assessment the leukocyte subpopulation we can observe a significant statistics difference between CD69+neutrophiles and CD69+ monocytes, we did not observed significant difference between CD69+ lymphocyte population and CD69+ eosinophiles. We have conclude that the HCV infection persuade cellular changes that can be clearance viral or on chronic infection. However, to define this profile, there will be needed new researches. / A hepatite por vírus C (HCV) representa um grande problema de saúde pública devido à alta prevalência da infecção na população, que varia de 0,3 a 14,5%. A hepatite C é considerada uma doença transmitida principalmente pelo sangue e seus derivados, sendo o principal agente etiológico das hepatites pós transfusionais do mundo. A doença crônica, com poucas manifestações clínicas, ocorre em 80% dos indivíduos. Consequentemente, a hepatite C é frequentemente diagnosticada quando o indivíduo se submete aos testes de triagem sorológica em bancos de sangue. O diagnóstico laboratorial específico da hepatite C é realizado pela pesquisa de anticorpos anti-HCV, no teste ELISA e no Immunoblot. O perfil da resposta imunológica desenvolvida pelos indivíduos infectados pelo HCV, envolve a resposta de células T helper 1, mediada pela ativação de linfócitos TCD4+, tão bem como os linfócitos TCD8+, produção de IL-12 e IFN-, parece ser uma resposta extremamente importante para clearence viral. O objetivo este estudo foi avaliar a resposta imunológica humoral e celular de doadores de sangue que apresentaram sorologia reativa para hepatite C. No período de setembro de 2005 a novembro de 2006 foram convidados 100 doadores de sangue que apresentaram sorologia positiva para hepatite C e 100 doadores saudáveis a participar voluntariamente do estudo. Nossos resultados demonstraram que pelo teste complementar Immunoblot RIBA, 46% apresentaram resultados indeterminados, 36% foram reativos e 18% negativas. Das amostras negativas 61,11% (n=11) tiveram reação fracamente positiva, das indeterminadas 76% (n=35) tiveram razão DO/cutoff inferior a 2 e 50% (n=18) das reativas tiveram essa razão superior ou igual a 3. Não observamos diferenças estatísticas significante entre os valores encontrados de ALT, sendo que os mesmos permaneceram dentro dos valores de normalidade. Entre as populações de linfócitos ativados, a população de LTCD3+/CD4+ apresentou diferença estatística significante, na qual o grupo com diagnóstico confirmado por immunoblot (HCV+/BLOT R) apresentou menor número de células em relação aos outros grupos (Soronegativos, HCV+/BLOT NR, HCV+/BLOT IND). Avaliando as sub-populações de leucócitos ativados observamos diferenças estatísticas significantes entre as populações de neutrófilos CD69+ e monócitos CD69+, mas não encontramos diferença significante entre as populações de linfócitos CD69+ e eosinófilos CD69+. Desta forma concluímos que a infecção pelo HCV induz a alterações celulares que podem estar evoluindo para clearence viral ou para cronificação da infecção. No entanto para definirmos tal perfil, novos estudos serão necessários.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:14:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao-Carlos Mauricio Oliveira de Almeida.pdf: 1285251 bytes, checksum: a2a3d28e3c91b115a707e039282b1f0c (MD5) Previous issue date: 2007-09-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A hepatite C é um grande problema de saúde pública atual com aproximadamente 180 milhões de pessoas infectadas no mundo todo. O HCV é um vírus RNA de fita simples, pertencente à família flaviviridae O HCV é um agente infeccioso altamente imunogênico levando ao desenvolvimento de uma intensa resposta imune humoral e celular. No entanto cerca de 80% dos pacientes evoluem para uma doença crônica, podendo desenvolver cirrose hepática ou câncer. Apenas 15-20% dos pacientes infectados apresentam ¨clearance¨ viral e evoluem para a cura. Os mecanismos pelo qual o HCV evade-se do sistema imunológico ainda não são totalmente conhecidos, mas a polarização da imunidade através da produção de citocinas parece ser uma das principais causas. Pacientes infectados pelo HCV podem apresentar várias manifestações extra-hepáticas como fadiga, depressão e distúrbios do sono. As manifestações neurológicas podem envolver o sistema nervoso periférico na forma de polineuropatias ou o sistema nervoso central como encefalopatia agudo-subaguda, acidente vascular cerebral e um comprometimento subcortical. O acometimento neurológico pode ocorrer pela própria replicação do vírus no tecido nervoso, ou indiretamente pela resposta imunológica do paciente. Estas alterações podem levar ao comprometimento da qualidade de vida, talvez secundárias as queixas de sono. O sono é um estado fisiológico-comportamental que se associa com o sistema imune e com várias citocinas como IL1, IL2, IL-6, TNF-á e IFN-ã. Pouco se sabe sobre as manifestações neurológicas, incluindo o sono, a resposta imune e o perfil de citocinas entre estes pacientes. Desta forma o objetivo do presente estudo é avaliar as manifestações neurológicas como os distúrbios do sono, a resposta imune celular e o perfil de citocinas, o genótipo viral entre esses pacientes HCV + da Fundação de Medicina Tropical do Amazonas. Para a avaliação da resposta imune celular foi utilizado a fenotipagem dos leucócitos do sangue periférico e para a avaliação das citocinas Th1 e Th2 e inflamatórias o ELISA. As alterações neurológicas foram avaliadas por um questionário clínico criado para o estudo. A qualidade do sono foi avaliada pelo Questionário de Pittsburg (PSQI) e de fadiga pela escala FSS. Nossos resultados mostraram que as manifestações extra-hepáticas são muito freqüentes entre eles a fadiga, artralgias e mialgias. As queixas de sono foram tão freqüentes quanto às demais com 72,4% entre os pacientes. Os pacientes tiveram uma média de PSQI de 6,21 e de FSS de 3,16. Pacientes HCV positivos apresentam uma maior ativação de linfócitos T CD8+ e marcação para CD69+, alem de níveis elevados de citocinas IL-6, IL-12 e IL-8 do que controles saudáveis. Os pacientes com Hepatite C com queixas de sono apresentam mais fadiga e níveis aumentados de IL-4 e IL-6 podendo corresponder como um marcador de sono ruim nestes pacientes. O genótipo 1 foi o mais freqüente, seguido do genótipo 3 e do genótipo 2 na nossa região. O genótipo 1 tendeu a uma maior secreção de citocinas supressoras Th2, além de maiores níveis de ALT/AST, do que os outros genótipos, embora não atingisse valores estatisticamente significantes. O HCV foi isolado do líquor de apenas um paciente do estudo. Uma das possíveis explicações para tais manifestações neuro-psquiátricas seria uma ação conjunta do vírus sobre o SNC e a resposta imune, com a secreção de algumas citocinas como IL-4, IL-6. No entanto é necessário mais estudos sobre a ação do HCV sobre o SNC e o papel destas citocinas na produção desses sintomas.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:14:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO kARINA.pdf: 1878961 bytes, checksum: f6896d6307a1bc7e9fd5b8e1379c4194 (MD5) Previous issue date: 2008-11-25 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The protozoa of the genus Leishmania has a great diverty of species and are related whith the clinical form of American tegumentary Leishmaniasis (ATL) and Visceral Leishmaniasis (VL) distinguish through the geographical distribuition, the reservoir hosts and the vectors involved in the cycle, with incidence and mortality variation according with the region. Although the clinical variation forms found in patients with ATL the ilness could be grouped in three basics types: cutaneous leishmaniasis (CL), mucocutaneous leishmaniasis (ML) and diffuse cutaneous leishmaniasis. The immune response profile differs in the linfocyte activation of TCD4+ Th1 or Th2. The Th1 and Th2 cells could be identidied through the secreted cytokines, the Th1 linfocytes produced activators cytokines by immunity cells mediated as well as the INFg, INF a, IL-2 and IL-12. Howerver the infection susceptibility is related to Th2 cell response that secreted cytokine IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, TGF-B, promoting the antibody response. In the mucosal leishmaniasis has a misture of Th1 and Th2 response profile, before and after treatment, with higt levels of IgA. The leterature shows that there is a positive correlation between the high levels of IgE and the Montenegro reaction, suggesting that these antigens guide the TCD+ response to a Th1 profile. For this one, the levels of immunoglobulins isotypes (IgG, IgM, IgA and IgE) were measured in the serum samples of 36 patients infected with cutaneos and mucosal leishmaniasis caused by Leishmania (Viannia) guyanensis, from the Manaus municipality, Amazonas State, Brazil. The technicals employed were ELISA and Western Blotting. This study showed low levels of IgM and IgG in patients infected with L.(V.) guyanensis by the ELISA method using the OPD substract tht was sinsible to detect the serics immunoglobulins, for this method could not be used as diagnostic but is indicate to follow-up the infection evolution. / Os protozoários do gênero Leishmania, compreendem uma vasta diversidade de espécies e estão relacionados com a forma clínica da leishmaniose (LTALeishmaniose Tegumentar Americana e LV- Leishmaniose Visceral) diferindo quanto a distribuição geográfica, aos hospedeiros e vetores envolvidos, com variações nas taxas de incidência e mortalidade de acordo com a região. Apesar da ampla variedade de formas clínicas encontradas em pacientes com LTA, podemos agrupá-las em três tipos básicos: leishmaniose cutânea (LC), leishmaniose cutâneo-mucosa (LCM) e leishmaniose cutânea difusa (LCD). O perfil da resposta imunológica na leishmaniose cutânea difere na ativação de linfócitos T CD4+ Th1 ou Th2. As células Th1 e Th2 se identificam segundo o perfil de citocinas que elas secretam, os linfócitos Th1 produzem fundamentalmente citocinas ativadoras da imunidade mediada por células tais como o INF-γ, INFa, IL-2 e IL12. Por outro lado, a sucetibilidade à infecção está relacionada à resposta de célula Th2, que secretam citocinas do tipo IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, TGF-b, promovendo a resposta de anticorpos. Por outro lado, na leishmaniose mucosa há um mistura de perfil de resposta Th1 e Th2, antes e após tratamento, com altos índices de IgA. Dados de literatura demonstram que existe uma correlação positiva entre altos índices de IgE e a reação de Montenegro, sugerindo que antígenos orientam a resposta T CD4+ para um perfil Th2. Desta forma, buscou-se detectar níveis séricos de isotipos de imunoglobulinas (IgG, IgM, IgA e IgE) em amostras de soros de pacientes infectados com Leishmaniose cutânea e mucosa causada por Leishmania (Viannia) guyanensis, proveniente do município de Manaus, estado do Amazonas, Brasil. A técnica empregada foi o ELISA. Esta técnica utiliza extratos ou frações antigênicas do parasita. Este estudo demonstrou que a técnica sorológica pelo método de ELISA utilizando como substrato OPD é sensível para detectar a presença de imunoglobulinas séricas IgG e IgM em humanos infectados com a Leishmania (Viannia) guyanensis assim como a infecção por esta espécie leva a produção de baixo níveis de IgG e IgM, não devendo ser considerada como método útil no diagnóstico e sim como acompanhamento da evolução da infecção.