O Eucalyptus cloeziana se destaca pelas propriedades tecnológicas da sua madeira, principalmente em razão da sua durabilidade, densidade e resistência. Entretanto, essa espécie apresenta limitações quanto ao enraizamento adventício de estacas, dificultando a obtenção de mudas clonais e o avanço nos programa de melhoramento da espécie. Nesta perspectiva, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a micropropagação de E. cloeziana a partir de materiais juvenis e adultos como uma técnica para a propagação da espécie. Para tanto, o trabalho foi dividido em quatro partes. No primeiro estudo, estabeleceu-se um protocolo de organogênese indireta de E. cloeziana a partir de hipocótilos e cotilédones. No segundo estudo avaliou-se o resgate de matrizes adultas de E. cloeziana através da indução de brotações epicórmicas em megaestacas. No terceiro estudo definiu-se um protocolo de micropropagação via proliferação de gemas axilares de matrizes adultas de E. cloeziana. Por último, no quarto estudo avaliou-se o rejuvenescimento in vitro de matrizes adultas de E. cloeziana por meio da micropropagação via proliferação de gemas axilares e a microestaquia, a partir das matrizes rejuvenescidas in vitro,para comprovar a viabilidade do cultivo in vitro como alternativa de propagação da espécie. A organogênese indireta de E. cloeziana mostrou-se possível e dependente do tipo de explante, dos reguladores de crescimento, suas concentrações e combinações utilizadas nas diferentes fases de morfogênese. As brotações adventícias foram micropropagadas e aclimatizadas com sucesso, obtendo-se mudas clonais de E. cloeziana. No resgate das matrizes adultas de E. cloeziana ocorreu maior indução de brotações epicórmicas para as megaestacas coletadas na época do ano com maior pluviosidade e temperatura. O diâmetro médio das megaestacas, compreendido entre 2,0 e 5,0 cm, correspondeu ao mais adequado para a obtenção de maior número de brotações epicórmicas no resgate das matrizes adultas de E. cloeziana. O protocolo de micropropagação das matrizes adultas de E. cloeziana foi estabelecido com sucesso, utilizando como explantes, brotações epicórmicas induzidas nas megaestacas. A multiplicação in vitro das microcepas foi realizada com êxito no meio de cultura WPM suplementado com BAP e ANA, cujas concentrações variaram entre os genótipos. Os tratamentos de \"pulse\" com GA3 não foi adequado para promover o alongamento in vitro das brotações, o qual foi obtido coma redução da concentração do BAP (0,1 mg L-1). A aclimatização e o enraizamento ex vitro das microestacas foi realizada com sucesso nos miniestufas, garantindo a obtenção de mudas clonais das matrizes adultas de E. cloeziana para a composição de um microjardim clonal. As microcepas das árvores matrizes de E. cloeziana apresentaram diferentes taxas de multiplicação in vitro, apresentando especificidades dos materiais genéticos à micropropagação. Os resultados da microestaquia das matrizes rejuvenescidas in vitro de E. cloeziana corroboraram as evidências de rejuvenescimento desses genótipos durante a micropropagação. Além disso, constatou-se que outros fatores, além da maturidade, podem estar atuando diretamente na recalcitrância do E. cloeziana ao enraizamento adventício. Dessa forma, comprovou-se a importância da micropropagação como uma ferramenta para a clonagem de E. cloeziana, abrindo perspectivas para investigações futuras para otimizar os métodos de propagação da espécie. / Eucalyptus cloeziana has importance for its wood technologic characteristics, mainly the durability, density and resistance. Moreover, this species has limitations on adventitious rooting of cuttings, having difficulties to obtain clonal seedlings and to advance in the improvement programs. In this perspective, the present work aimed to evaluate the E. cloeziana micropropagation by juvenile and mature explants as a technique for propagation this specie. Therefore, the work was divided into four basic studies. The first study was the establishment of the protocol to indirect organogenesis to E. cloeziana hypocotyls and cotyledons. In the second study evaluated the rescue of E. cloeziana adult matrices for epicormic shoots induction in crow branches. In the third study was definite a micropropagation protocol by axillary branching of E. cloeziana adult matrices. Finally, in the fourth study was evaluated the in vitro rejuvenation of E. cloeziana adult matrices to micropropagation by axillary branching and the micro-cutting technique of in vitro rejuvenated matrices to prove the in vitro culture viability to the propagation of this specie. The indirect organogenesis E. cloeziana was dependent of explant type and growth regulator and its concentration used in the different morphogenesis phases. The adventitious shoots were multiplicities and acclimatized with success to obtain E. cloeziana clonal seedlings. The vegetative rescue results of E. cloeziana adult matrices showed a higher induction epicormic shoots from branches collected in warmer and rain season. The medium diameter between 2.0 and 5.0 cm was considered the better to obtain higher epicormic shoots number in vegetative rescue. The micropropagation protocol of E. cloeziana adult matrices was realized with success using epicormic shoots, induced in the branches, like explants. The shoots in vitro multiplication was realized on WPM medium culture, supplemented with BA and NAA. The better growth regulators concentrations were different for each genotype. Treatments pulse with GA3 was not suitable to promote the elongation of shoots in vitro, which was obtained by the BA concentration reduction at 0.1 mg L-1. The in vitro shoots acclimatization and ex vitro rooting was performed in mini-incubators with success and it permit to obtain clonal seedlings from E. cloeziana adult matrices to form a clonal micro-garden. The shoots of E. cloeziana adult matrices showed different in vitro multiplication rates with specific-genotype responses to micropropagation. The micro-cutting technique results of E. cloeziana adult matrices provide evidence that occurred in vitro rejuvenation of these genotypes, during the micropropagation. Therefore, the nursery results showed that other factors, not only maturation, can be involved in the adventitious recalcitrance of E. cloeziana. In conclusion, the importance micropropagation like a biotechnological tool to propagation of E. cloeziana was proved and opened important perspectives for future investigations to optimize the propagation methods for this specie.

Au cours de l'Histoire, les humains alors nomades sont devenus sédentaires. Est-il possible de tisser des liens entre les différentes formes de nomadisme actuel et une certaine implication politique ? Selon une approche critique des pouvoirs hégémoniques, l'auteur répond à cette question à travers une expérience cinématographique nomade dans le Nord-ouest argentin. Il étudie les relations qui peuvent exister entre une pensée nomade, le militantisme et le cinéma. Suivant les révolutions sociales des années 30 à 70, certains nomades, qui parcouraient le monde comme contestation d'un mode de vie normatif, se tournent aujourd'hui vers un existentialisme quotidien. Quant au cinéma militant argentin, sa pratique passe d'une confrontation révolutionnaire face à l'hégémonie, vers la construction de subjectivités variées et précises. L'agencement entre le cinéma militant et l'expérience nomade mettra à jour l'importance d'une « communication nomade » qui s'installe aux interstices de la contestation sociale et de l'autonomie individuelle. / Throughout history, humans have gone from a nomadic to a sedentary lifestyle. Is it possible to forge links between current forms of nomadism and political involvement? Using a critical approach of the powers of dominating institutions, the author answers this question through a nomadic cinematic experience in Northwestern Argentina. The film studies the relationships that exist between nomadic thought, activism and film. After the social revolutions of the 1930's through the 1970's, nomads who had once challenged conventional lifestyles are IV today turning towards existentialism. Meanwhile, the practice of militant cinema in Argentina has changed from a revolutionary confrontation against hegemony, towards the construction of subjective identities. The link between militant cinema and the nomadic experience brings to light the importance of "nomadic communication" between social protest and individual autonomy. / Durante la historia, los seres humanos pasaron de ser nómadas a sedentarios. ¿Es posible establecer vínculos entre las diferentes formas de nomadismo actual y una cierta implicación política? Según un enfoque crítico de los poderes hegemónicos, el autor responde a esa pregunta a través de una experiencia de cine nómade en el noroeste argentino y estudia las relaciones que existen entre el pensamiento nómada, el activismo y el cine. Siguiendo las revoluciones sociales de los años 30 a los 70, algunos nómadas que vagaban por el mundo como desafío a un estilo de vida normativo, hoy están recurriendo a un existencialismo diario. En cuanto al cine militante argentino, su practica pasa de una confrontación revolucionaria contra la hegemonía, a la construcción de subjetividades variadas y precisas. El agenciamiento entre el cine militante y la experiencia nómada actualizará la importancia de una "comunicación nómada" que se instala en los intersticios de la protesta social y la autonomía individual. / Le film "Exilio o Transhumancia" accompagne ce mémoire.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:39:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6551.pdf: 1784400 bytes, checksum: ca9e70c9a7ecf2c0e2770aa5b8fb0e16 (MD5) Previous issue date: 2014-09-10 / Financiadora de Estudos e Projetos / This essay seeks to analyse the meanings of appreciation of the caipira culture, present at five editions of the National Meeting of Guitarists - conceived and organized by the Rural Landless Workers Movement [MST-SP], between the years 2003 and 2009 -, and its implications for the organizational process of the settlers of the Northeast of the State of São Paulo. Our main hypothesis points out that the appreciation of the caipira culture was configured as an organizational strategy of MST, directly related with the rooting of its settlers in a period in which the Movement sought to establish itself in the region of Ribeirão Preto a town that boasts the title of the national capital of agribusiness. This process occurred in reaction to the social derogatory imagery about the caipira, hegemonic during the last century, and that under the dual thinking, started to be considered the typical representative of the Brazilian archaic rural past , this is, the antithesis of the modernization process of the country. The theoretical framework of this research is critical to this school of thought - held by the Paulista Sociological School - which was responsible for interpreting the caipira and its culture from the historical-dialectical movement manifested, specifically, in the type of capitalist development adopted in Brazil. By observing the recent movements of appreciation of caipira culture, one of which we consider to be the empirical field of this work, we reaffirm the relevance of this debate. The method of observation and data collection is based on two sources: a documental one, which refers to the interviews carried on the Meetings of Guitarists aiming to build part of the event memory; and another one, result of our fieldwork done in a settlement of the region in which we conducted semi-structured interviews with settlers who actively participated in the design and construction of the National Meeting of Guitarists. We believe that this research brought important elements to think critically about the caipira culture not only as the survival of a past to be appreciated, but as part of a concrete historical process which, in the present, acts in a contradictory reality of agrarian reform settlements. / Nesta dissertação, procuramos compreender e analisar os significados dos discursos de valorização da cultura caipira, presentes nas cinco edições do evento denominado Encontro Nacional de Violeiros - concebido e organizado pelo Movimento dos Trabalhadores Rurais Sem Terra [MST-SP], entre os anos de 2003 e 2009 -, e seus desdobramentos para o processo organizativo dos assentados da Região Nordeste Paulista. Nossa principal hipótese é a de que a valorização da cultura caipira configurou-se como uma estratégia organizativa do MST relacionada com o ideal de "enraizamento" de seus assentados num período em que o Movimento procurava consolidar-se na região de Ribeirão Preto - cidade que ostenta o título de capital nacional do agronegócio. Esse processo ocorreu contrariamente ao imaginário social depreciativo sobre o caipira, hegemônico ao longo do século passado, e que, sob o pensamento dualista, o considerava o típico representante do "passado rural arcaico" brasileiro, ou seja, a antítese da modernização do país. O referencial teórico desta pesquisa parte da crítica a este estilo de pensamento, realizada pela Escola Sociológica Paulista, que foi responsável por interpretar o caipira e a sua cultura a partir do movimento histórico-dialético manifestado, especificamente, no tipo de desenvolvimento capitalista adotado no Brasil. Ao observar os movimentos recentes de valorização da cultura caipira, um dos quais consideramos ser o campo empírico deste trabalho, reafirmamos a atualidade deste debate. O método de observação e coleta de informações baseouse em duas fontes: uma documental, que se refere ao conjunto de entrevistas realizadas no período dos Encontros de Violeiros, cujo objetivo foi o de construir parte da memória do evento; e, outra, resultado de nosso trabalho de campo feito em um assentamento da região, no qual realizamos entrevistas semiestruturadas com os assentados que participaram ativamente da concepção e construção do Encontro Nacional de Violeiros. Acreditamos que esta pesquisa trouxe elementos para pensarmos criticamente a cultura caipira não apenas enquanto sobrevivência de um passado a ser valorizado, mas sim enquanto parte de um processo histórico concreto que hoje atua, contraditoriamente, na realidade dos assentamentos de reforma agrária.

Quillaja brasiliensis (A. St.-Hil. &Tul.) Mart. é uma espécie nativa do Rio Grande do Sul, conhecida popularmente como pau-sabão, devido à capacidade de suas folhas e cascas formarem abundante espuma em água. A espécie congênere chilena, Q. saponaria, é uma das principais fontes industriais de saponinas, as quais são utilizadas, entre outros, como adjuvantes em vacinas. Tendo em vista a presença de saponinas em Q. brasiliensis, métodos por cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foram desenvolvidos para a caracterização e o doseamento de fração purificada de saponinas, a partir do extrato aquoso de folhas, denominada QB-90. Ensaios para verificar a toxicidade subcutânea e o perfil dose-dependente para atividade adjuvante também foram realizados com esta fração. Para o doseamento de QB-90 no extrato aquoso foi desenvolvido e validado um método por CLAE empregando coluna de fase reversa C8, sistema isocrático acetonitrila:água, fluxo de 0,8 ml/min e detecção a 214 nm. Na validação do método, foram avaliados os parâmetros de linearidade e intervalo de variação, precisão, exatidão, limite de detecção, limite de quantificação e robustez. Em relação à toxicidade subcutânea de QB-90 em camundongos, não foram observados efeitos sistêmicos no intervalo de doses de 50 a 400 μg. Vacinas experimentais preparadas com herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) como antígeno e QB-90 (50-200 μg) foram capazes de aumentar a resposta imunológica em camundongos de modo comparável às saponinas de Q. saponaria (QUIL-A®, 100 μg). Com vistas à potencial utilização sustentável da espécie brasileira na obtenção de saponinas de interesse industrial, protocolos básicos de obtenção de plantas de Q. brasiliensis por micropropagação e por germinação de sementes foram desenvolvidos. Para melhor compreender o perfil de acúmulo de QB-90, seu conteúdo foi investigado em diferentes órgãos vegetais, em diferentes estações do ano e durante o desenvolvimento de plântulas, assim como em resposta a fatores de estresses bióticos e abióticos. O conteúdo de QB-90 não foi afetado pela aplicação de ácido salicílico exógeno (5 mM). No entanto, foi aumentado pela aplicação exógena de ácido jasmônico (40 μM e 400 μM), bem como pela exposição à radiação UVC. Tendência de aumento no teor de QB-90 foi observada com a aplicação de dano mecânico controlado e com a exposição à radiação UVB. A distribuição órgão-específica de QB-90 foi avaliada, detectando-se maiorconcentração nas folhas do que em raízes e caules de plantas propagadas em laboratório. O teor de QB-90 também foi analisado nas diferentes estações climáticas ao longo de dois anos, indicando que a redução da insolação, geralmente associada a períodos de baixa pluviosidade, está associada à maior produção de QB-90. / Quillaja brasiliensis (A. St.-Hil. & Tul.) Mart. is a native tree of Rio Grande do Sul, the Southern state of Brazil, commonly known as soap tree due to the capacity of their leaves and barks to produce abundant foam in water. The related Chilean species, Q. saponaria, is one of the main sources of industrial saponins which are used as adjuvant formulation for vaccines. Considering the presence of saponins in Q. brasiliensis, thin-layer chromatography (TLC) and high-performance liquid chromatography (HPLC) methods were developed to characterize and quantify the purified saponin fraction named QB-90, obtained from the aqueous extract of leaves. Additionally, the subcutaneous toxicity and dose-response profile to adjuvant activity of QB-90 were evaluated in mice. An HPLC method was developed and validated to quantify QB-90 content in aqueous extract, employing RP-8 column, mobile phase acetonitrile:water, flow rate of 0.8 ml/min and detection at 214 nm. The validation parameters evaluated were linearity and range, precision, accuracy, detection limit, quantitation limit and robustness. In relation to QB-90 subcutaneous toxicity in mice, systemic effects were not observed in doses ranging from 50-400 μg. Experimental vaccines prepared with bovine herpesvirus type I (BoHV-1) antigen and QB-90 (50- 200 μg) were able to enhance the immune responses of mice in a comparable manner to saponins from Q. saponaria (QuilA, 100 μg). Considering the potential sustainable utilization of the Brazilian species as a source of saponins of industrial use, basic protocols for obtaining Q. brasiliensis plants by micropropagation and seed germination were developed. To better understand the accumulation patterns of QB-90, we investigated its content in different plant organs; throughout the seasons and during seedling development, as well as in response to potential biotic and abiotic stress factors. Content of QB-90 wasn’t affected by exogenous application of salicylic acid (5mM). However, it was increased by exogenous application of jasmonic acid (40 μM and 400 μM), as well as by exposure to UVC. Trends toward increase in QB-90 content were observed with exposure to UVB and wounding. The organ-specific QB-90 distribution was evaluated and higher amounts were observed in leaves than roots and stems of plants propagated in the laboratory. Variations inQB-90 content in different seasons for two years showed that lower insolation, generally combined with low precipitation periods, were associated with higher QB- 90 content.

Quillaja brasiliensis (A. St.-Hil. &Tul.) Mart. é uma espécie nativa do Rio Grande do Sul, conhecida popularmente como pau-sabão, devido à capacidade de suas folhas e cascas formarem abundante espuma em água. A espécie congênere chilena, Q. saponaria, é uma das principais fontes industriais de saponinas, as quais são utilizadas, entre outros, como adjuvantes em vacinas. Tendo em vista a presença de saponinas em Q. brasiliensis, métodos por cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foram desenvolvidos para a caracterização e o doseamento de fração purificada de saponinas, a partir do extrato aquoso de folhas, denominada QB-90. Ensaios para verificar a toxicidade subcutânea e o perfil dose-dependente para atividade adjuvante também foram realizados com esta fração. Para o doseamento de QB-90 no extrato aquoso foi desenvolvido e validado um método por CLAE empregando coluna de fase reversa C8, sistema isocrático acetonitrila:água, fluxo de 0,8 ml/min e detecção a 214 nm. Na validação do método, foram avaliados os parâmetros de linearidade e intervalo de variação, precisão, exatidão, limite de detecção, limite de quantificação e robustez. Em relação à toxicidade subcutânea de QB-90 em camundongos, não foram observados efeitos sistêmicos no intervalo de doses de 50 a 400 μg. Vacinas experimentais preparadas com herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) como antígeno e QB-90 (50-200 μg) foram capazes de aumentar a resposta imunológica em camundongos de modo comparável às saponinas de Q. saponaria (QUIL-A®, 100 μg). Com vistas à potencial utilização sustentável da espécie brasileira na obtenção de saponinas de interesse industrial, protocolos básicos de obtenção de plantas de Q. brasiliensis por micropropagação e por germinação de sementes foram desenvolvidos. Para melhor compreender o perfil de acúmulo de QB-90, seu conteúdo foi investigado em diferentes órgãos vegetais, em diferentes estações do ano e durante o desenvolvimento de plântulas, assim como em resposta a fatores de estresses bióticos e abióticos. O conteúdo de QB-90 não foi afetado pela aplicação de ácido salicílico exógeno (5 mM). No entanto, foi aumentado pela aplicação exógena de ácido jasmônico (40 μM e 400 μM), bem como pela exposição à radiação UVC. Tendência de aumento no teor de QB-90 foi observada com a aplicação de dano mecânico controlado e com a exposição à radiação UVB. A distribuição órgão-específica de QB-90 foi avaliada, detectando-se maiorconcentração nas folhas do que em raízes e caules de plantas propagadas em laboratório. O teor de QB-90 também foi analisado nas diferentes estações climáticas ao longo de dois anos, indicando que a redução da insolação, geralmente associada a períodos de baixa pluviosidade, está associada à maior produção de QB-90. / Quillaja brasiliensis (A. St.-Hil. & Tul.) Mart. is a native tree of Rio Grande do Sul, the Southern state of Brazil, commonly known as soap tree due to the capacity of their leaves and barks to produce abundant foam in water. The related Chilean species, Q. saponaria, is one of the main sources of industrial saponins which are used as adjuvant formulation for vaccines. Considering the presence of saponins in Q. brasiliensis, thin-layer chromatography (TLC) and high-performance liquid chromatography (HPLC) methods were developed to characterize and quantify the purified saponin fraction named QB-90, obtained from the aqueous extract of leaves. Additionally, the subcutaneous toxicity and dose-response profile to adjuvant activity of QB-90 were evaluated in mice. An HPLC method was developed and validated to quantify QB-90 content in aqueous extract, employing RP-8 column, mobile phase acetonitrile:water, flow rate of 0.8 ml/min and detection at 214 nm. The validation parameters evaluated were linearity and range, precision, accuracy, detection limit, quantitation limit and robustness. In relation to QB-90 subcutaneous toxicity in mice, systemic effects were not observed in doses ranging from 50-400 μg. Experimental vaccines prepared with bovine herpesvirus type I (BoHV-1) antigen and QB-90 (50- 200 μg) were able to enhance the immune responses of mice in a comparable manner to saponins from Q. saponaria (QuilA, 100 μg). Considering the potential sustainable utilization of the Brazilian species as a source of saponins of industrial use, basic protocols for obtaining Q. brasiliensis plants by micropropagation and seed germination were developed. To better understand the accumulation patterns of QB-90, we investigated its content in different plant organs; throughout the seasons and during seedling development, as well as in response to potential biotic and abiotic stress factors. Content of QB-90 wasn’t affected by exogenous application of salicylic acid (5mM). However, it was increased by exogenous application of jasmonic acid (40 μM and 400 μM), as well as by exposure to UVC. Trends toward increase in QB-90 content were observed with exposure to UVB and wounding. The organ-specific QB-90 distribution was evaluated and higher amounts were observed in leaves than roots and stems of plants propagated in the laboratory. Variations inQB-90 content in different seasons for two years showed that lower insolation, generally combined with low precipitation periods, were associated with higher QB- 90 content.

Quillaja brasiliensis (A. St.-Hil. &Tul.) Mart. é uma espécie nativa do Rio Grande do Sul, conhecida popularmente como pau-sabão, devido à capacidade de suas folhas e cascas formarem abundante espuma em água. A espécie congênere chilena, Q. saponaria, é uma das principais fontes industriais de saponinas, as quais são utilizadas, entre outros, como adjuvantes em vacinas. Tendo em vista a presença de saponinas em Q. brasiliensis, métodos por cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foram desenvolvidos para a caracterização e o doseamento de fração purificada de saponinas, a partir do extrato aquoso de folhas, denominada QB-90. Ensaios para verificar a toxicidade subcutânea e o perfil dose-dependente para atividade adjuvante também foram realizados com esta fração. Para o doseamento de QB-90 no extrato aquoso foi desenvolvido e validado um método por CLAE empregando coluna de fase reversa C8, sistema isocrático acetonitrila:água, fluxo de 0,8 ml/min e detecção a 214 nm. Na validação do método, foram avaliados os parâmetros de linearidade e intervalo de variação, precisão, exatidão, limite de detecção, limite de quantificação e robustez. Em relação à toxicidade subcutânea de QB-90 em camundongos, não foram observados efeitos sistêmicos no intervalo de doses de 50 a 400 μg. Vacinas experimentais preparadas com herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) como antígeno e QB-90 (50-200 μg) foram capazes de aumentar a resposta imunológica em camundongos de modo comparável às saponinas de Q. saponaria (QUIL-A®, 100 μg). Com vistas à potencial utilização sustentável da espécie brasileira na obtenção de saponinas de interesse industrial, protocolos básicos de obtenção de plantas de Q. brasiliensis por micropropagação e por germinação de sementes foram desenvolvidos. Para melhor compreender o perfil de acúmulo de QB-90, seu conteúdo foi investigado em diferentes órgãos vegetais, em diferentes estações do ano e durante o desenvolvimento de plântulas, assim como em resposta a fatores de estresses bióticos e abióticos. O conteúdo de QB-90 não foi afetado pela aplicação de ácido salicílico exógeno (5 mM). No entanto, foi aumentado pela aplicação exógena de ácido jasmônico (40 μM e 400 μM), bem como pela exposição à radiação UVC. Tendência de aumento no teor de QB-90 foi observada com a aplicação de dano mecânico controlado e com a exposição à radiação UVB. A distribuição órgão-específica de QB-90 foi avaliada, detectando-se maiorconcentração nas folhas do que em raízes e caules de plantas propagadas em laboratório. O teor de QB-90 também foi analisado nas diferentes estações climáticas ao longo de dois anos, indicando que a redução da insolação, geralmente associada a períodos de baixa pluviosidade, está associada à maior produção de QB-90. / Quillaja brasiliensis (A. St.-Hil. & Tul.) Mart. is a native tree of Rio Grande do Sul, the Southern state of Brazil, commonly known as soap tree due to the capacity of their leaves and barks to produce abundant foam in water. The related Chilean species, Q. saponaria, is one of the main sources of industrial saponins which are used as adjuvant formulation for vaccines. Considering the presence of saponins in Q. brasiliensis, thin-layer chromatography (TLC) and high-performance liquid chromatography (HPLC) methods were developed to characterize and quantify the purified saponin fraction named QB-90, obtained from the aqueous extract of leaves. Additionally, the subcutaneous toxicity and dose-response profile to adjuvant activity of QB-90 were evaluated in mice. An HPLC method was developed and validated to quantify QB-90 content in aqueous extract, employing RP-8 column, mobile phase acetonitrile:water, flow rate of 0.8 ml/min and detection at 214 nm. The validation parameters evaluated were linearity and range, precision, accuracy, detection limit, quantitation limit and robustness. In relation to QB-90 subcutaneous toxicity in mice, systemic effects were not observed in doses ranging from 50-400 μg. Experimental vaccines prepared with bovine herpesvirus type I (BoHV-1) antigen and QB-90 (50- 200 μg) were able to enhance the immune responses of mice in a comparable manner to saponins from Q. saponaria (QuilA, 100 μg). Considering the potential sustainable utilization of the Brazilian species as a source of saponins of industrial use, basic protocols for obtaining Q. brasiliensis plants by micropropagation and seed germination were developed. To better understand the accumulation patterns of QB-90, we investigated its content in different plant organs; throughout the seasons and during seedling development, as well as in response to potential biotic and abiotic stress factors. Content of QB-90 wasn’t affected by exogenous application of salicylic acid (5mM). However, it was increased by exogenous application of jasmonic acid (40 μM and 400 μM), as well as by exposure to UVC. Trends toward increase in QB-90 content were observed with exposure to UVB and wounding. The organ-specific QB-90 distribution was evaluated and higher amounts were observed in leaves than roots and stems of plants propagated in the laboratory. Variations inQB-90 content in different seasons for two years showed that lower insolation, generally combined with low precipitation periods, were associated with higher QB- 90 content.

Made available in DSpace on 2016-12-23T14:37:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabiola Lacerda de Souza Barros.pdf: 6472406 bytes, checksum: d8013423c68ed8608b3a5668f18e35ac (MD5) Previous issue date: 2008-07-10 / Foram realizados experimentos in vivo e in vitro objetivando a propagação assexuada do mamoeiro (Carica papaya L.). O experimento in vivo foi realizado com a cultivar Golden , do grupo Solo , em lavoura comercial com dois anos e meio de idade em final de produção, onde se estudou o efeito da poda em diferentes alturas do tronco (inteira sem o ápice, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0 m) a partir do solo, para se identificar qual destas proporcionaria maior rendimento de brotações laterais aptas à estaquia. Uma contagem de brotações aos 25 dias após a poda a diferentes alturas foi realizada no experimento in vivo. As brotações contabilizadas foram podadas e, posteriormente, feita outra contagem de novas brotações aos 50 dias. Com a poda a 2,0 metros de altura, obteve-se maior número de brotações aos 25 e aos 50 dias, no período do verão, mostrando viabilidade no reaproveitamento de lavouras em final de produção na propagação assexuada. Meios de enraizamento foram testados nos experimentos in vitro. No primeiro experimento foram estudadas as concentrações do meio MS a 100%, 50% da força e MS modificado associados aos níveis do regulador de crescimento AIB (0; 0,1; 0,2; 0,4 e 0,8 mg L-1). No primeiro experimento o enraizamento foi insatisfatório devido à contaminação bacteriana, aliada a uma possível fitotoxidez do antibiótico utilizado (cefotaxima 100 mg L-1), ou ainda, ao acúmulo de citocinina remanescente da fase de multiplicação, prejudicando as reações morfogênicas e o enraizamento. No segundo experimento, utilizou-se meio de enraizamento contendo ou não carvão ativo, na concentração 1gL-1, associado aos níveis do regulador de crescimento ANA (0; 0,25; 0,5; 1,0; 2,0 mgL-1). Também não se obteve sucesso no enraizamento, provavelmente pela quantidade ou associação dos antibióticos utilizados (rifampicina 300 mg L-1 +cloranfenicol 100 mg L-1) ao meio de cultura, mesmo tendo controlado acontaminação bacteriana. O carvão ativo a 1 g L-1 acrescentado ao meio, apesar de não auxiliar o enraizamento, mostra significância de forma isolada, sendo benéfico ao desenvolvimento da parte aérea e impedindo o calejamento na base dos ramos, mostrando eficiência na adsorção de substâncias tóxicas do meio de cultivo, em relação ao tratamento que não recebeu o carvão ativo / The experiments were carried out in vivo and in vitro having of the objective the assexual reproduction of the papaya tree (Carica papaya L.). The experiment in vivo was accomplished with to cultivate Golden, of the group Sole, in commercial farming with two and a half years of age in production end, where it was studied the effect of the pruning in different heights of the trunk (it completes without the apex, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0 m) starting from the ground, and to identify which of these it would provide larger income of capable production of lateral shoots to the cutting. With the pruning to 2,0 meters of height was obtained larger shoots number, in two consecutive pruning, in other words, to the 25 and 50 days, in the period of the summer, showing viability in the recycling of farmings in production end in the assexual reproduction. In the experiments in vitro were tested rooting medium. In the first experiment were studied the concentrations of the MS medium of 100%, 50% of the force and MS modified associates at the levels of the growth regulator AIB (0; 0,1; 0,2; 0,4 and 0,8 mg L-1). The rooting was unsatisfactory due to the bacterial contamination, allied to a possible phytotoxity of the used antibiotic (cephotaxin 100 mg L-1), or still, to the kitocinin accumulation remaining of the multiplication phase harming the morphogenics reactions and the rooting. In the second experiment was used rooting medium containing (1 g L-1) or not active coal, associate at the levels of the growth regulator ANA (0; 0,25; 0,5; 1,0 and 2,0 mg L-1). It was not also obtained success in the rooting probably for the amount or association of the antibiotics used (Rifampicin 300 mg L-1 + cloranphenicol 100 mg L-1) in the culture medium, even having controlled the bacterial contamination. The active coal to 1 g L-1 increased to the medium, in spite of not aiding the rooting show significance in an isolated way, being beneficial to the development of the aerial part and impeding the calluse in the base of the shoots, showing efficiency in the adsorption of poisonous substances of the culture medium, in relation to the treatment that didnt receive the active coal

O Eucalyptus cloeziana se destaca pelas propriedades tecnológicas da sua madeira, principalmente em razão da sua durabilidade, densidade e resistência. Entretanto, essa espécie apresenta limitações quanto ao enraizamento adventício de estacas, dificultando a obtenção de mudas clonais e o avanço nos programa de melhoramento da espécie. Nesta perspectiva, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a micropropagação de E. cloeziana a partir de materiais juvenis e adultos como uma técnica para a propagação da espécie. Para tanto, o trabalho foi dividido em quatro partes. No primeiro estudo, estabeleceu-se um protocolo de organogênese indireta de E. cloeziana a partir de hipocótilos e cotilédones. No segundo estudo avaliou-se o resgate de matrizes adultas de E. cloeziana através da indução de brotações epicórmicas em megaestacas. No terceiro estudo definiu-se um protocolo de micropropagação via proliferação de gemas axilares de matrizes adultas de E. cloeziana. Por último, no quarto estudo avaliou-se o rejuvenescimento in vitro de matrizes adultas de E. cloeziana por meio da micropropagação via proliferação de gemas axilares e a microestaquia, a partir das matrizes rejuvenescidas in vitro,para comprovar a viabilidade do cultivo in vitro como alternativa de propagação da espécie. A organogênese indireta de E. cloeziana mostrou-se possível e dependente do tipo de explante, dos reguladores de crescimento, suas concentrações e combinações utilizadas nas diferentes fases de morfogênese. As brotações adventícias foram micropropagadas e aclimatizadas com sucesso, obtendo-se mudas clonais de E. cloeziana. No resgate das matrizes adultas de E. cloeziana ocorreu maior indução de brotações epicórmicas para as megaestacas coletadas na época do ano com maior pluviosidade e temperatura. O diâmetro médio das megaestacas, compreendido entre 2,0 e 5,0 cm, correspondeu ao mais adequado para a obtenção de maior número de brotações epicórmicas no resgate das matrizes adultas de E. cloeziana. O protocolo de micropropagação das matrizes adultas de E. cloeziana foi estabelecido com sucesso, utilizando como explantes, brotações epicórmicas induzidas nas megaestacas. A multiplicação in vitro das microcepas foi realizada com êxito no meio de cultura WPM suplementado com BAP e ANA, cujas concentrações variaram entre os genótipos. Os tratamentos de \"pulse\" com GA3 não foi adequado para promover o alongamento in vitro das brotações, o qual foi obtido coma redução da concentração do BAP (0,1 mg L-1). A aclimatização e o enraizamento ex vitro das microestacas foi realizada com sucesso nos miniestufas, garantindo a obtenção de mudas clonais das matrizes adultas de E. cloeziana para a composição de um microjardim clonal. As microcepas das árvores matrizes de E. cloeziana apresentaram diferentes taxas de multiplicação in vitro, apresentando especificidades dos materiais genéticos à micropropagação. Os resultados da microestaquia das matrizes rejuvenescidas in vitro de E. cloeziana corroboraram as evidências de rejuvenescimento desses genótipos durante a micropropagação. Além disso, constatou-se que outros fatores, além da maturidade, podem estar atuando diretamente na recalcitrância do E. cloeziana ao enraizamento adventício. Dessa forma, comprovou-se a importância da micropropagação como uma ferramenta para a clonagem de E. cloeziana, abrindo perspectivas para investigações futuras para otimizar os métodos de propagação da espécie. / Eucalyptus cloeziana has importance for its wood technologic characteristics, mainly the durability, density and resistance. Moreover, this species has limitations on adventitious rooting of cuttings, having difficulties to obtain clonal seedlings and to advance in the improvement programs. In this perspective, the present work aimed to evaluate the E. cloeziana micropropagation by juvenile and mature explants as a technique for propagation this specie. Therefore, the work was divided into four basic studies. The first study was the establishment of the protocol to indirect organogenesis to E. cloeziana hypocotyls and cotyledons. In the second study evaluated the rescue of E. cloeziana adult matrices for epicormic shoots induction in crow branches. In the third study was definite a micropropagation protocol by axillary branching of E. cloeziana adult matrices. Finally, in the fourth study was evaluated the in vitro rejuvenation of E. cloeziana adult matrices to micropropagation by axillary branching and the micro-cutting technique of in vitro rejuvenated matrices to prove the in vitro culture viability to the propagation of this specie. The indirect organogenesis E. cloeziana was dependent of explant type and growth regulator and its concentration used in the different morphogenesis phases. The adventitious shoots were multiplicities and acclimatized with success to obtain E. cloeziana clonal seedlings. The vegetative rescue results of E. cloeziana adult matrices showed a higher induction epicormic shoots from branches collected in warmer and rain season. The medium diameter between 2.0 and 5.0 cm was considered the better to obtain higher epicormic shoots number in vegetative rescue. The micropropagation protocol of E. cloeziana adult matrices was realized with success using epicormic shoots, induced in the branches, like explants. The shoots in vitro multiplication was realized on WPM medium culture, supplemented with BA and NAA. The better growth regulators concentrations were different for each genotype. Treatments pulse with GA3 was not suitable to promote the elongation of shoots in vitro, which was obtained by the BA concentration reduction at 0.1 mg L-1. The in vitro shoots acclimatization and ex vitro rooting was performed in mini-incubators with success and it permit to obtain clonal seedlings from E. cloeziana adult matrices to form a clonal micro-garden. The shoots of E. cloeziana adult matrices showed different in vitro multiplication rates with specific-genotype responses to micropropagation. The micro-cutting technique results of E. cloeziana adult matrices provide evidence that occurred in vitro rejuvenation of these genotypes, during the micropropagation. Therefore, the nursery results showed that other factors, not only maturation, can be involved in the adventitious recalcitrance of E. cloeziana. In conclusion, the importance micropropagation like a biotechnological tool to propagation of E. cloeziana was proved and opened important perspectives for future investigations to optimize the propagation methods for this specie.

A produção de mudas via propagação vegetativa é fundamental para se obter os ganhos desejados nos programas de melhoramento genético, bem como garantir o sucesso da implantação florestal. No entanto, existem muitos fatores que impedem a sua utilização de forma abrangente na produção de mudas para algumas espécies florestais, principalmente em relação à baixa taxa de enraizamento. Para atender a essa necessidade, pesquisas com o uso de substâncias que promovam maior taxa de enraizamento de miniestacas e crescimento de mudas vem sendo desenvolvidas, como o uso de reguladores de crescimento e de bioestimulantes à base de substâncias húmicas. Dessa forma o objetivo do presente trabalho é avaliar o efeito de adubos foliares e condicionadores de solo na produção de mudas clonais de híbridos de Pinus caribaea var. hondurensis vs. elliottii var. elliottii e de Pinus tecunumanii vs. caribaea var. hondurensis. Os experimentos foram desenvolvidos em viveiro florestal na cidade de Paranapanema-SP, com delineamento de blocos ao acaso, em arranjo fatorial 4x2, com duração de seis meses. Foram utilizados dois condicionadores de solo, sendo o C1 à base de pescados marinhos e o C2 à base de ácidos húmicos e quatro adubos foliares, sendo AF1 à base de quitosana, AF2 à base de pescados marinhos, AF3 à base de ácido húmico e AF4 extrato da alga Ascoplhyllum nodosum, além da mistura dos adubos M1AF (AF2+AF3+AF4) e o M2AF (AF1+AF3+AF4). Foram instalados dois experimentos: 1) híbrido de P. caribaea var. hondurensis vs. elliottii var. elliottii, testando a combinação dos dois condicionadores de solo e os adubos AF2, AF3, AF4 e M1AF e 2) híbrido de P. tecunumanii vs. carearia var. hondurensis em que a única alteração nos tratamentos foi o AF2 por AF1 e o M1AF por M2AF. As mudas foram avaliadas nas três fases da seguinte forma: 1) casa de vegetação: taxa de enraizamento; 2) casa de sombra: altura, massa seca e verde da parte aérea e radicial e a relação entre elas; e 3) rustificação: avaliadas as mesmas variáveis da casa de sombra, além do estado nutricional das acículas. Para o experimento 1, a taxa de enraizamento com C2 + AF3 foi 46,67% maior quando comparada à testemunha, comprovando o efeito positivo das substâncias húmicas no enraizamento. Já na fase de rustificação, a interação C1 + AF3 promoveu maior crescimento das mudas. Para o experimento 2, não houve diferença nas taxas de enraizamento na casa de vegetação, devido a característica de rápido crescimento do P. tecunumanii. E, na fase de rustificação, o adubo foliar AF4 promoveu maior crescimento somente em altura. Na casa de sombra, os tratamentos testados não promoveram crescimento significativo para ambos os híbridos. Os teores nutricionais analisados nas acículas estão dentro dos níveis adequados para ambos os experimentos. Somente o Mn apresentou baixo teor, mas sem sintomas de deficiência no experimento 2. Os híbridos obtiveram respostas diferentes quando submetidos a tratamentos semelhantes e a determinação do tratamento adequado vai depender do gargalo na produção de mudas, podendo este ser o enraizamento ou o crescimento. / The production of cuttings by vegetative propagation is essential to obtain the desired accomplishment in genetic improvement programs and ensure the success of forest establishment. However there are many factors that prevent their use in a comprehensive manner considering the production of cuttings for some forest species especially in low rooting rate. In order to meet this need research on the use of substances that promote greater rooting rates of minicuttings and growth of cuttings have been developed with the use of growth regulators and biostimulants based on humic substances. Thus the purpose of this study is to evaluate the effect of foliar fertilizers and soil conditioners in the production of Pinus caribaea var. hondurensis vs. elliottii var. elliottii and Pinus tecunumanii vs. caribaea var. hondurensis hybrids cuttings. The experiment was conducted in the city of Paranapanema-SP using cutting nursery with delineation of randomized blocks in a factorial arrangement 4x2, lasting six months. It used two soil conditioners, the C1 based on marine fish and C2 based on humic acids and 4 foliar fertilizers, the AF1 chitosan base, AF2 based on marine fish, AF3 based on humic acid and AF4 by Ascoplhyllum nodosum seaweed extract, besides the mixture of fertilizers M1AF (AF2;AF3;AF4) and M2AF (AF1;AF3;AF4). Two experiments were implemented: 1) hybrid of P. caribaea var. hondurensis vs. elliottii var. elliottii, testing the combination of two soil conditioners as well as fertilizers AF2, AF3, AF4 and M1AF and 2) hybrid of P. tecunumanii vs. caribaea var. hondurensis in which the only change in treatment was the AF2 by AF1 and M1AF by M2AF. Cuttings were evaluated in three phases as follows: 1) greenhouse: rooting rate; 2) shade house: higher, aerial drywet mass and radicial part as well as the relationship between them; 3) hardening: the shade house had the same variables evaluated, in addition with the nutritional status of needles. For the experiment 1, the rooting rate with C2 + AF3 were 46.67% higher compared with the control, this stated the positive effect of humic substances on rooting. Considering the hardening phase C1 + AF3 interaction promoted greater seedling growth. For the experiment 2 there was no difference in rooting rates at greenhouse, because the characteristic of fast growth of P. tecunumanii. In hardening phase, the foliar fertilizer AF4 promoted greater growth only in height. In the shade house treatments did not promote significant growth for both hybrids. Nutritional contents analyzed the needles leaves are within appropriate levels for both experiments. Mn showed only low level, but without deficiency symptoms in the experiment 2. Different answers were obtained on hybrids when subjected to similar treatment and to determine the appropriate treatment will depend on the obstaclecuttings production, which may either rooting or growth.

Au cours de l'Histoire, les humains alors nomades sont devenus sédentaires. Est-il possible de tisser des liens entre les différentes formes de nomadisme actuel et une certaine implication politique ? Selon une approche critique des pouvoirs hégémoniques, l'auteur répond à cette question à travers une expérience cinématographique nomade dans le Nord-ouest argentin. Il étudie les relations qui peuvent exister entre une pensée nomade, le militantisme et le cinéma. Suivant les révolutions sociales des années 30 à 70, certains nomades, qui parcouraient le monde comme contestation d'un mode de vie normatif, se tournent aujourd'hui vers un existentialisme quotidien. Quant au cinéma militant argentin, sa pratique passe d'une confrontation révolutionnaire face à l'hégémonie, vers la construction de subjectivités variées et précises. L'agencement entre le cinéma militant et l'expérience nomade mettra à jour l'importance d'une « communication nomade » qui s'installe aux interstices de la contestation sociale et de l'autonomie individuelle. / Throughout history, humans have gone from a nomadic to a sedentary lifestyle. Is it possible to forge links between current forms of nomadism and political involvement? Using a critical approach of the powers of dominating institutions, the author answers this question through a nomadic cinematic experience in Northwestern Argentina. The film studies the relationships that exist between nomadic thought, activism and film. After the social revolutions of the 1930's through the 1970's, nomads who had once challenged conventional lifestyles are IV today turning towards existentialism. Meanwhile, the practice of militant cinema in Argentina has changed from a revolutionary confrontation against hegemony, towards the construction of subjective identities. The link between militant cinema and the nomadic experience brings to light the importance of "nomadic communication" between social protest and individual autonomy. / Durante la historia, los seres humanos pasaron de ser nómadas a sedentarios. ¿Es posible establecer vínculos entre las diferentes formas de nomadismo actual y una cierta implicación política? Según un enfoque crítico de los poderes hegemónicos, el autor responde a esa pregunta a través de una experiencia de cine nómade en el noroeste argentino y estudia las relaciones que existen entre el pensamiento nómada, el activismo y el cine. Siguiendo las revoluciones sociales de los años 30 a los 70, algunos nómadas que vagaban por el mundo como desafío a un estilo de vida normativo, hoy están recurriendo a un existencialismo diario. En cuanto al cine militante argentino, su practica pasa de una confrontación revolucionaria contra la hegemonía, a la construcción de subjetividades variadas y precisas. El agenciamiento entre el cine militante y la experiencia nómada actualizará la importancia de una "comunicación nómada" que se instala en los intersticios de la protesta social y la autonomía individual.