Todas as adaptações adquiridas através do treinamento físico são reversíveis durante a inatividade. Reduções significativas no consumo máximo de oxigênio (VO2max) são observadas dentro de duas a quatro semanas de destreinamento. Por outro lado, as consequências do destreinamento sobre o tecido adiposo são pouco estudadas. O objetivo foi investigar os efeitos de destreinamento físico sobre o metabolismo e celularidade do tecido adiposo periepididimal. Métodos e Resultados: Ratos Wistar machos, com idade de 6 semanas, foram divididos em 3 grupos: treinado (T) durante 12 semanas; destreinados (D), (treinados por 8 semanas e destreinados por 4 semanas), e sedentário (S) pareados por idade. O treinamento consistiu em sessões de esteira rolante (1h/dia, 5d/semk, 50 60% da capacidade máxima). A análise morfométrica do tecido PE revelou diferenças significativas entre os grupos. A área seccional dos adipócitos do grupo D foi significativamente maior que a T e S (3474 µm2 ± 68,8 µm2 vs 1945,7 µm2 ± 45,6 µm2 vs 2492,4 µm2 ± 49,08 µm2, respectivamente). Em comparação com as células dos animais do grupo T as células do D apresentaram 48% de aumento na capacidade de realizar a lipogênese, espontaneamente ou insulina estimulada. Já lipólise basal não se alterou. A redução de 15% na apoptose foi observada nos grupos T e D em relação ao S. Algumas expressões de genes foram alterados em D vs S: a adiponectina aumentou 3 vezes e PPAR-gama aumentou 2 vezes. O gene do Pref-1 foi 3 vezes maior em T vs S. Estes resultados sugerem fortemente que a adipogênese foi estimulada neste grupo. Conclusões: o destreinamento causa aumento significativo no tamanho dos adipócitos e na capacidade lipogênica. Como a apoptose celular na gordura PE foi reduzida em D e T, estes resultados sugerem que as alterações do tecido adiposo após destreinamento podem ser potencialmente obesogenicas. / All adaptations acquired through physical training are reversible during inactivity. Significant reductions in maximal oxygen uptake (VO2Max) are observed within two-four weeks of detraining. Conversely, the consequences of detraining on adipose tissue are poorly known. The objective was to investigate the physical detraining effects on metabolism and cellularity of rat periepididymal adipose tissue. Methods and Results: Male Wistar rats, ageing 6 weeks, were divided in 3 groups: trained (T) for 12 weeks; detrained (D), (trained for 8 weeks and detrained for 4 weeks), and age-matched sedentary (S). Training consisted in treadmill running sessions (1h/day, 5d/week, 50 60% of the maximal capacity). The morphometric analysis of PE tissue disclosed significant differences between the groups. The adipocyte sectional area of group D was significantly bigger than T and S (3474 µm2 ± 68,8 µm2 vs 1945,7 µm2 ± 45,6 µm2 vs 2492,4 µm2 ± 49,08 µm2, respectively). Compared to T the cells of D animals showed 48% increased ability to perform: lipogenesis, either spontaneously or insulin stimulated and isoproterenol-stimulated lipolysis. Basal lipolysis did not change. A 15% reduction in apoptosis was observed in groups T and D in relation to S. Some gene expressions were changed in D vs S: adiponectin (3-fold up) and PPAR-gamma (2-fold up). PREF-1 gene was 3-fold higher in T vs S. These results strongly suggest that adipogenesis was stimulated in this group. Conclusions: Detraining causes significant increase in adipocyte size and lipogenic capacity. As PE fat cell apoptosis was reduced in D and T, these results suggest that adipose tissue changes following detraining can potentially be obesogenic.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:23:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6292.pdf: 2287765 bytes, checksum: b3d00bafed75c8cbfaf179911ce21881 (MD5) Previous issue date: 2014-09-09 / Financiadora de Estudos e Projetos / Ovariectomy in animals (surgical removal of ovaries) is a model used to mimic the menopause in women. The ovarian hormone deficiency alters the lipid profile, increases inflammation and the risk of type 2 diabetes mellitus, sarcopenia, osteopenia, obesity and cardiovascular diseases. Resistance training (RT) has been used as a non-pharmacological tool to prevent or reverse the postmenopausal effects. However, there are few studies evaluating the ovariectomy (Ovx) and RT effects on the morphology and angiogenesis of visceral adipose tissue (VAT). Thus, the aim of this study was to investigate the Ovx and RT influence at the size and adipocytes number, gene expression and VEGF-A protein levels and microvessel density in VAT of rats. Adult Sprague-Dawley rats were divided into four groups (n=6 per group): Sham-operated sedentary (Sham-Sed), ovariectomized sedentary (Sed-Ovx), Sham-operated resistance training (Sham-Tr) and ovariectomized resistance training (Ovx- Tr). During the resistance training period, the animals climbed a 1.1m vertical ladder with weights attached to their tails, which were progressively increased; the sessions were performed three times a week, with 4-9 climbs and 8-12 dynamic movements per climb with intervals of 2 minutes between climbs. Histological analysis was performed to analyze vascular micro density and morphology of VAT; gene expression and VEGF-A protein levels were analyzed by real-time PCR and ELISA, respectively. Ovx resulted in higher body weight, adipocyte hypertrophy, decreased both VEGF-A mRNA and protein and VEGF-R2 mRNA expression, and decreased the micro vascular density in the VAT of sedentary rats. However, RT was not able to prevent any changes induced by ovariectomy. The data indicated that Ovx impaired the morphology and angiogenesis of rats VAT and that RT protocol adopted did not prevent these changes. We suggest future studies performing adaptations in this resistance training program, associated or not to hypocaloric diet and treatment with estradiol. / A ovariectomia em animais (remoção cirúrgica dos ovários) é um modelo de estudo utilizado para mimetizar a menopausa em mulheres. A deficiência dos hormônios ovarianos altera o perfil lipídico, aumenta a inflamação e o risco de diabetes tipo 2, sarcopenia, osteopenia, obesidade e doenças cardiovasculares. O treinamento resistido (TR) tem sido empregado como ferramenta não farmacológica na tentativa prevenir ou reverter os efeitos da pósmenopausa. No entanto, são escassos os estudos sobre os efeitos da Ovx e TR na morfologia e angiogênese do tecido adiposo visceral (TAV). Diante disto, o objetivo desta pesquisa foi verificar a influência da Ovx e do TR no tamanho e no número dos adipócitos, expressão gênica e concentração proteica de VEGF-A e densidade microvascular do TAV de ratas. Ratas Sprague-Dawley adultas foram dividas em quatro grupos experimentais (n=6 por grupo): Sham operado sendentário (Sham-Sed); Ovariectomizado sedentário (Ovx-Sed); Sham operado treinamento resistido (Sham-Tr) e Ovariectomizado treinamento resistido (Ovx-Tr). Durante o período de treinamento resistido, os animais escalaram uma escada vertical de 1,1 m com pesos atados em suas caudas, que foram aumentados progressivamente; as sessões foram realizadas três vezes na semana, com 4-9 escaladas por sessão de treino e 8- 12 movimentos por escalada com intervalos de 2 minutos entre as escaladas. A morfologia e densidade vascular foram avaliadas por meio de análises histológicas, a expressão gênica e proteica do VEGF-A foram analisadas por PCR em tempo real e ELISA, respectivamente. A ovariectomia aumentou a massa corporal e provocou hipertrofia dos adipócitos, diminuição da expressão de VEGF-A e seu receptor, diminuição da concentração de VEGF-A e redução da densidade microvascular no TAV das ratas. O treinamento resistido não foi eficiente em prevenir nenhuma destas alterações. Sugere-se futuros estudos realizando adaptações neste programa de treinamento resistido, associadas ou não à dieta hipocalórica e ao tratamento com o estradiol.

Orientador: Roberto Carlos Burini / Banca: Luis Carlos Giarola / Banca: Nailza Maestá / Resumo: A obesidade é considerada um grave problema da Saúde Pública mundial, apresentando prevalência crescente nas últimas décadas em diversas populações. Entretanto, a concentração da gordura corporal na região abdominal tem se mostrado mais fortemente associada com riscos metabólicos e cardiovasculares e com uma variedade de doenças crônicas. Objetivo: Identificar os fatores socioeconômicos e comportamentais associados à adiposidade abdominal de adultos. Metodologia: foram aplicados: questionário para avaliar as condições socioeconômicas e demográficas, Recordatório de 24 horas para obtenção do consumo alimentar, questionário de atividade física cotidiana (IPAQ, versão 8, forma longa) e realizada avaliação da composição corporal através de peso, estatura, circunferência abdominal e impedância bioelétrica. Resultados: Foram avaliados 1455 indivíduos, sendo 74,0% do sexo feminino e 73,5% com idade inferior a 60 anos. A maioria referiu ser solteiro/viúvo/divorciado (62,2%), apresentar renda familiar de até seis salários-mínimos (62,0%) e ser analfabeto ou possuir Ensino Fundamental incompleto ou completo (62,2%). Apresentaram alta prevalência de excesso de peso e obesidade (77,7%), circunferência abdominal aumentada (60,5%), e alimentação inadequada (93,4%). A hiperadiposidade abdominal apresentou associação com excesso de peso, renda e estado civil, sendo a baixa renda fator preditor e estado civil solteiro/viúvo/divorciado fator protetor. Conclusão: Na população estudada foi encontrada alta prevalência de excesso de peso, circunferência abdominal aumentada e alimentação de baixa qualidade. Portanto, é essencial a adoção de ações que visem a mudança do estilo de vida com o objetivo de prevenir o aparecimento ou agravamento de doenças crônicas nessa população. / Abstract: The obesity is considered a serious problem in the Public Health sector world widely, and it has been increasing in several populations over the last decades. However, the adipose tissue concentration around the abdominal area has been strongly associated with metabolic and cardiovascular risks and a great number of chronic diseases. Objective: To identify the socioeconomic and behavioral factors related to the abdominal adiposity in adults. Method: a questionnaire was used to evaluate the socioeconomic and demographic conditions, a 24-hour recall was done to obtain information about their dietary habits, a questionnaire about the routine physical activity was applied (IPAQ 8, long form), and an evaluation of the weight, height, abdominal size, bioelectrical impedance was done to check the body composition. Results: a study was conducted among 1455 people, 74,0% females and 73,5% under 60 years old. Most of whom said they were single/widow/divorced (62,2%), with a familiar income up to six basic salary (62,0%), and were illiterate or had or hadn't graduated from elementary school (62,2%). 77,7% presented a great predominance of overweight and obesity, 60,5% had an increased abdominal circumference and 93,4% had an inadequate dietary. The abdominal hyper adiposity presented to be associated with overweight, income and marital status, since the low income was the predictor and the marital status (single/widow/divorced) was the protector factor. Conclusion: Among the studied population, a high predominance of overweight, increased abdominal circumference and low quality dietary was found. Therefore, it is essential to adopt actions which can change these people's life style as a way to prevent chronic diseases. / Mestre

Orientador: Fausto Viterbo / Resumo: O tratamento das lesões em nervos periféricos normalmente constitui um desafio. Os resultados clínicos são pobres na maioria dos casos de lesões com perda da continuidade do axônio. Viterbo (1992) propôs a neurorrafia látero-terminal sem incisão do nervo doador, uma alternativa para a neurorrafia término-terminal. Novas pesquisas devem esclarecer porque são tão controversos os resultados experimentais e os da prática clínica entre os diversos autores sobre a neurorrafia látero-terminal. Muitos estudos têm buscado alternativas para alcançar melhores resultados no tratamento das lesões nervosas periféricas. A reposição de células, introdução de fatores neurotróficos e a introdução de células-tronco têm sido algumas das alternativas exploradas na literatura atual. Quanto às células-tronco ainda há muito a ser pesquisado, seja sobre o potencial regenerativo das células-tronco e suas fontes, formas de oferecimento dessas células no local da lesão ou como acompanhar a integração e confirmar a sobrevivência dessas células no local da injúria do nervo. Este estudo objetivou avaliar a influência de células-tronco mesenquimais provenientes do tecido adiposo na neurorrafia látero-terminal quanto à regeneração e reinervação periférica, por meio de estudo experimental em ratos. Foram estudados 150 animais, 140 animais dispostos em sete grupos, 10 outros animais foram necessários para se fazer o gel de plaquetas. Em um dos grupos a neurorrafia látero-terminal foi realizada com a interpos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The treatment of peripheral nerve injuries is often a challenge. In most cases of injury with loss of continuity of the axon the clinical results are poor. Viterbo (1992) published the lateral-terminal neurorrhaphy without incision of the donor nerve, an alternative for the end-to-end neurorrhaphy. Further research should clarify why the experimental results and the clinical practice about the lateral-terminal neurorrhaphy are so controversial among the various authors. Many studies have sought for alternatives to achieve better results in the treatment of peripheral nerve injuries. The replacement of cells, the introduction of neurotrophic factors and the introduction of stem cells have been some of the alternatives explored in the literature. As for the stem cells, much remains to be searched, either on the regenerative potential of stem cells and their sources, offering forms of these cells at the injury site or on how to support the integration and confirm the survival of these cells at the site of the nerve injury. This study experimental study in rats aimed to evaluate the influence of stem cells from adipose tissue in the lateral-terminal neurorrhaphy focusing the regeneration and the peripheral reinnervation. 150 animals were studied, 140 animals arranged in seven groups, other 10 animals were needed to make the platelet gel. In one group the lateral-terminal neurorrhaphy was performed with the interposition of stem cells removed from the adipose tissue of the animal.... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / O consumo excessivo de gorduras tem sido implicado na gênese da obesidade e de diversas comorbidades relacionadas a esta doença. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do treinamento resistido em ratos alimentados com dieta hiperlipídica nas seguintes variáveis: composição corporal, adiposidade, área de adipócitos, expressão do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) e dos receptores ativados por proliferadores de peroxissomo tipo gama (PPAR-γ) no tecido adiposo retroperitoneal, níveis pressóricos e atividade da metaloproteinase-2 (MMP-2) no ventrículo esquerdo. Foram avaliados 32 ratos machos Wistar divididos em quatro grupos experimentais (n=8/cada) de acordo com o tipo de dieta e o treinamento: sedentário (SED; dieta padrão), sedentário obeso [SED-OB; dieta hiperlipídica (30% de gordura)], treinamento resistido (TR; dieta padrão) e treinamento resistido obeso (TR-OB; dieta hiperlipídica). Após o desmame (dia 21), os animais foram submetidos à dieta experimental durante 24 semanas. Doze semanas após início da dieta, os grupos TR e TR-OB iniciaram o período de 12 semanas de treinamento resistido. Este era composto por escaladas em uma escada vertical de 1.1 metros com pesos atados a cauda num total de três sessões de treinamento por semana (Segundas, Quartas e Sextas-feiras) com 4 a 9 escaladas/sessão e 8 a 12 movimentos dinâmicos a cada subida. O treinamento resistido induziu reduções significativas na massa corporal, na massa gorda, no percentual de gordura, na área de adipócitos e nos níveis pressóricos e ainda promoveu aumento de massa magra e na expressão de VEGF e PPAR-γ em ambos os grupos treinados. Além disso, foi observada uma maior atividade da MMP-2 no ventrículo esquerdo nos grupos treinados (TR e TR-OB). Nossos achados demonstram que o treinamento resistido foi capaz de promover mudanças positivas na composição corporal, na atividade da MMP-2 no ventrículo esquerdo, nos níveis pressóricos e em mediadores enzimáticos do tecido adiposo retroperitoneal sugerindo que esta modalidade de exercício pode ser uma ferramenta útil para prevenir as alterações induzidos pelo consumo de uma dieta hiperlipídica. / The purpose of the present study was to evaluate the effect of resistance training on body composition, adiposity, adipocyte area, vascular endothelium growth factor (VEGF) and peroxisome proliferator-activated receptor-gamma (PPAR-γ) in adipose tissue, systolic and diastolic blood pressures (BP), and activity of muscle MMP-2 in left ventricle. We evaluated 32 Wistar rats divided into four experimental groups (n=8/each) according to diet and exercise status: sedentary (SED; standard diet), sedentary obese [SED-OB; hiperlipidic diet (30% of fat)], resistance training (RT; standard diet) and resistance training RT obese (RT-OB; hiperlipidic diet). After weaning (day 21), animals were subjected to the experimental diet according to their groups during 24 weeks. A 12-week resistance-training period was used, during which the animals climbed a 1.1-m vertical ladder with weights attached to their tails. The sessions were performed three times/week (Mondays, Wednesdays and Fridays), with 49 climbs/session and 812 dynamic movements/climb with two rest minutes. The RT promoted significantly reductions of body and fat masses, fat percentage, adipocytes area and systolic and diastolic BPs, associated with higher expression of VEGF and PPAR-γ in retroperitoneal adipose tissue and higher fat free mass in both trained groups. Furthermore, it was observed higher muscle MMP-2 activity of the left ventricle in trained animals. This study demonstrated that, resistance training induced positive changes in body composition, MMP-2 activity in left ventricle, systolic and diastolic BPs and adipose tissue metabolism, suggesting that it can be a useful tool to prevent the physiopathological changes induced by high-fat diet consumption.

O acúmulo de tecido adiposo visceral (TAV) está relacionado com a piora da sensibilidade à insulina (SI) e, por isso, tem sido hipotetizado que a retirada de parte deste depósito, lipectomia (L), poderia melhorar este quadro. No entanto, a L pode ocasionar um aumento compensatório ou uma regeneração do tecido retirado. Para investigar se a L e o exercício afetam ou não a SI e a adiposidade, 36 ratos machos Wistar foram submetidos à dieta hiperlipídica e divididos em 4 grupos: LT (treinado), LS (sedentário), FT (falso operado) e FS, sendo submetidos à L e/ou treinamento aeróbio. O peso corporal e consumo de ração foram medidos semanalmente. A glicemia de jejum e tolerância à glicose foram avaliados pré e pós-intervenções. Índice HOMA, adiposidade e expressão gênica (mRNA) PPAR, PPAR e TNF- e expressão protéica do PGC1- foram analisados pós-intervenções. O grupo L apresentou maior consumo de ração após L (p<0,05). Foi verificada pior tolerância à glicose no grupo LS (p<0,03) e diminuída insulina de jejum nos grupos LT e FT (p<0,00). O grupo LT apresentou melhor SI (p<0,04). Não houve diferença na adiposidade dos animais (p>0,1). Os grupos LT e FS apresentaram maior expressão gênica do PPAR no TAV comparados aos LS e FT, já no músculo o LT apresentou menor expressão gênica comparado ao FS (p<0,05). O grupo LS apresentou maior mRNA do TNF- comparado aos demais grupos (p<0,05) e maior expressão protéica de PGC1- que o grupos LT e FS (p<0,05). Nossos resultados demonstram que o treinamento melhorou a ação da insulina e em associação à L melhorou a SI. Além disso, a L ocasionou aumento no consumo de ração que pode ter colaborado com a recuperação da adiposidade neste grupo / Increased visceral adipose tissue (VAT) may account for the impairment in peripheral and hepatic insulin sensitivity (IS). It has been hypothesized that the partial removal of VAT known as lipectomy (L) could result in the improvement, while a re-growth of the excised tissue and/or a compensatory growth of non-excised depots seem to occur. To investigate whether or not VAT removal and exercise affect IS and adiposity 36 male Wistar rats were fed a high-fat diet and assigned to 4 experimental groups: EL (exercised), ES (sham-lipectomized), CL (control-sedentary), and CS; animals were submitted to L and/or exercise training. Body weight and food intake were recorded weekly. Fasting glucose and glucose tolerance were assessed pre and post-interventions. HOMA Index, body fat content, PPAR, PPAR e TNF- mRNA and PGC1- protein expression were assessed post-interventions. L group showed increased food intake post-L (p<0,05). CL group presented worsening on glucose tolerance (p<0,03). ET and ES showed lower fast insulin (p<0,00) and EL group showed better IS (p<0,04). There were no significant difference on body fat (p>0,1). EL and CL groups showed higher PPAR mRNA on VAT compared to CL and ES, EL showed decreased PPAR mRNA on skeletal muscle compared to CS (p<0,05). CL group showed greater TNF- mRNA (p<0,05) and greater PGC1- protein expression compared to EL and CS (p<0,05). Our results showed that short-term swimming training improved insulin action and, in association with L improve IS. Moreover, lipectomy has induced increased food intake which may be related with an increase in adiposity at this group

Células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea (CTMs-MO) e de tecido adiposo (CTMs-TA) são uma ferramenta atrativa para a reparação do tecido ósseo baseada na terapia celular. No presente estudo, foi investigado o potencial osteogênico e adipogênico de CTMs-MO e CTMs-TA, assim como o efeito da intercomunicação entre osteoblastos e adipócitos na expressão do fenótipo celular. CTMs-MO e CTMs-TA de ratos foram cultivadas em meios de crescimento, osteogênico e adipogênico para avaliar a diferenciação osteoblástica e adipocítica. Adicionalmente, osteoblastos e adipócitos foram cocultivados de forma indireta para investigar o efeito dos adipócitos sobre os osteoblastos e vice versa. CTMs-MO e CTMs-TA apresentaram potencial tanto osteogênico quanto adipogênico em condições não indutoras de diferenciação. No entanto, quando expostas ao meio osteogênico, as CTMs-MO exibiram maior expressão gênica de RUNX2, fosfatase alcalina e osteocalcina, expressão proteíca de RUNX2 e maior formação de matriz extracelular mineralizada comparadas às CTMs-TA. Por outro lado, em condições adipogênicas, as CTMs-TA apresentaram maior expressão gênica de PPAR&gamma;, proteína adipocítica 2 e resistina, expressão proteíca de PPAR&gamma; e maior formação de acúmulo lipídico comparadas às CTMs-MO. A presença de adipócitos em coculturas indiretas inibiu a expressão do fenótipo osteoblástico, enquanto os osteoblastos não apresentaram um efeito marcante sobre a expressão do fenótipo adipocítico. Em conclusão, o presente estudo mostrou que as CTMs-MO são mais osteogênicas enquanto as CTMs-TA são mais adipogênicas. Adicionalmente, foi observado que a intercomunicação entre osteoblastos e adipócitos pode afetar negativamente o reparo ósseo. Assim, postulamos que o maior potencial osteogênico das CTMs-MO as tornam a escolha mais adequada para a indução do reparo ósseo baseado na terapia celular. / Mesenchymal stem cells from bone marrow (BM-MSCs) and adipose tissue (AT-MSCs) are attractive tools for cell-based therapies to repair bone tissue. In the present study, we investigated the osteogenic and adipogenic potential of BM-MSCs and AT-MSCs as well as the effect of crosstalk between osteoblasts and adipocytes on cell phenotype expression. Rat BM-MSCs and AT-MSCs were cultured either in growth, osteogenic or adipogenic medium to evaluate osteoblast and adipocyte differentiation. Also, osteoblasts and adipocytes were indirectly cocultured to investigate the effect of adipocytes on osteoblast differentiation and vice versa. BM-MSCs and AT-MSCs exhibit osteogenic and adipogenic potential under non-differentiation-inducing conditions. However, when exposed to osteogenic medium, BM-MSCs exhibited higher gene expression of RUNX2, alkaline phosphatase and osteocalcin, RUNX2 protein expression and more extracellular matrix mineralization compared with AT-MSCs. Conversely, under adipogenic conditions, AT-MSCs displayed higher gene expression of PPAR&gamma;, fatty acid binding protein 4 and resistin, PPAR&gamma; protein expression and more lipid accumulation compared with BM-MSCs. The presence of adipocytes as indirect coculture repressed the expression of osteoblast phenotype while osteoblasts did not exert remarkable effect on adipocyte phenotype expression. In conclusion, the present study showed that BM-MSCs are more osteogenic while AT-MSCs are more adipogenic. Also, we observed that the crosstalk between osteoblasts and adipocytes may negatively impact bone repair. Thus, we postulate that the higher osteogenic potential of BM-MSCs makes them the first choice for inducing bone repair in cell-based therapies.

A descoberta das células tronco adultas tornou possível a sua aplicação clínica em protocolos de medicina regenerativa e de engenharia de tecidos para a reparação de órgãos danificados ou pouco funcionais. Neste sentido, são conhecidas muitas fontes diferentes de células tronco adultas, entre elas o tecido epitelial, o tecido muscular e a medula óssea. Recentemente, o tecido adiposo adulto foi reconhecido como uma fonte alternativa, acessível e rica em células tronco mesenquimais (MSCs), também denominadas de células tronco derivadas do tecido adiposo (hADSCs). As hADSCs são as células tronco adultas que apresentam a maior plasticidade, e são facilmente isoladas pela característica de aderência a substratos plásticos. Sob condições específicas de cultivo, as hADSCs podem diferenciar-se em células precursoras osteoblásticas. Dentre as proteínas necessárias para a diferenciação das hADSCs, o papel do complexo minichromosome maintenance (MCM) não é muito bem conhecido. A proteína MCM2 é parte do complexo MCM, fazendo parte do complexo pré-replicativo (pre-RC). Em células proliferativas, o gene MCM2 apresenta alta expressão, sendo que o seu produto gênico está relacionado com os mecanismos de reparação de DNA. Sendo assim, analisamos as mudanças na expressão do gene MCM2 durante a osteodiferenciação das hADSCs em diferentes meios de cultura, contendo BMP-4 ou OM. Os genes relacionados com a osteodiferenciação, como osteocalcina (OC), osteopontina (OP) e fosfatase alcalina (ALP) foram analisados por RT-PCR, por PCR em tempo real e citoquímica. Os dados obtidos pelas técnicas citoquímicas e de biologia molecular indicaram uma diminuição da expressão do gene MCM2 durante a osteodiferenciação, que pode estar relacionada com danos ao DNA ou senescência nas hADSCs. / The discovery of adult stem cells is a promise field in regenerative medicine and tissue engineering. There are many sources of adult stem cells among which of whom are the skin, muscle and bone marrow. Currently, the adipose tissue has been an alternative source of mesenchymal stem cells (MSCs), termed human adipose-derived stem cells (hADSCs). The MSCs are the most plastic adult stem cells known until now and are easily isolated by adherence in plastic substrates. Under specifics conditions of culture hADSCs can be differentiated in osteoblast cell precursors. Among proteins needed for hADSCs differentiation, the roles of minichromosome maintenance (MCM) complex remains poorly understood. The protein complex MCM2-7 is part of DNA pre-replicative complex (pre-RC), being abundant in proliferating cells and involved in DNA repair mechanisms. In this sense, the Mcm2 is essential for the activity of the MCM complex. Thus, we analysed MCM2 gene expression changes during osteoinduction by culturing hADSCs in different media containing BMP-4 or in osteogenic medium. Genes related to osteodifferentiation, like osteocalcin (OC), osteopontin (OP) and alkaline phosphatase (ALP) were analysed by molecular and cytochemistry approaches during osteodifferentiation. Interestingly, we observed a decrease in the MCM2 gene level osteoinduction of hADSCs in osteogenic medium, which could be related to an increase in genome damage and senescence in hADSCs.

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T23:46:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereda_MariaDelCarmenVelazquez_D.pdf: 4069355 bytes, checksum: 2eba0c803662fe7e920cab4f907dc527 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Clinicamente, a celulite é definida como uma alteração na topografia da pele que ocorre principalmente em mulheres, na região pélvica, abdômen e membros inferiores, caracterizando-se pelo aspecto de "casca de laranja". Etiologicamente, celulite é definida como uma desordem metabólica localizada do tecido subcutâneo que provoca uma alteração na forma corporal, onde muitas estruturas são alteradas na derme, na micro circulação e, também, no tecido adiposo. Este fenômeno, por sua vez, está associado com modificações morfológicas, histoquímicas e bioquímicas na pele e resultam nas alterações que levam ao desconforto estético e à aparência clínica da celulite. Partes destas alterações decorrem do acúmulo de lipídeos no interior de adipócitos, células chave no equilíbrio lipólise-lipogênese, o qual é visto hoje como uma unidade glandular funcional capaz de promover uma relação direta com o sistema nervoso central. Pesquisas atuais indicam que a busca por substâncias capazes de promover a homeostase dermo-hipodérmica através de uma ação lipolítica direta, aliada ao estímulo da produção de fatores de crescimento, especialmente TGF-? e GM-CSF, bem como de proteínas da matriz extracelular, como colágeno, elastina e GAGs, além de substâncias reguladoras do metabolismo adipocitário. Tendo em vista a complexidade clínica e estética da celulite, bem como as alterações bioquímicas dérmicas e hipodérmicas, buscamos neste trabalho avaliar os efeitos da associação entre o extrato oleoso dos grãos verdes de café (Coffea arabica L.) (OC) e os fitoesteróis de canola (Brassica campestris L.) (F), cuja combinação resulta no produto Slimbuster® L (SBL). Para isto, avaliamos neste estudo os efeitos in vitro (fibroblastos e adipócitos humanos), ex-vivo (fragmentos de pele humana) e clínicos (voluntários humanos) de SBL, OC e/ou F, utilizando metodologias e modelos experimentais que possibilitassem a visão global do processo celulítico. Os resultados demonstram que SBL foi capaz de estimular significativamente a lipólise, a síntese de leptina em cultura de adipócitos humanos, a produção de GM-CSF, TGF-?, colágeno, elastina e GAGs em cultura de fibroblastos humanos, a contração de fibroblastos em gel de colágeno, bem como promover a melhora das características histológicas gerais da pele (ex-vivo). As frações isoladas (OC e F) também demonstraram efeitos importantes e distintos, sendo estes mais pronunciados para OC e potencializados quando ambos são associados (SBL). Os resultados clínicos demonstram que o produto Slimbuster® L foi bem apreciado pelas voluntárias quanto aos itens "facilidade de aplicação", "pele mais lisa" e "pele mais macia", "atenuação de celulite" e "redução de gordura", especialmente após 60 dias de utilização de uma loção corporal contendo 3,0% (p/p) do produto. Os resultados das medidas instrumentais obtidos demonstram que o produto foi capaz de reduzir significativamente as medidas na região da coxa (superior, mediana e inferior), sendo esta diminuição centimétrica observada em aproximadamente 30% do painel em D30 e em 50% do painel em D60. As demais áreas avaliadas - abdome, pernas e quadris - não apresentaram significância estatística, porém devem ser levadas em consideração, pois apresentaram forte tendência após 60 dias de aplicação da loção corporal, indicando uma possível melhora significativa com o uso prolongado. A análise adipométrica das voluntárias demonstrou também forte tendência de redução da taxa de gordura localizada nas regiões do abdome, supra-ilíaca, supra-espinal e coxa proximal. A espessura da hipoderme através da ultrassonografia (ecografia) possibilitou observar uma redução superior a 2% nas regiões da coxa e abdome em aproximadamente 70% do painel em todos os tempos experimentais avaliados (D30 e D60). De acordo com todos os resultados obtidos neste trabalho, podemos concluir que o produto Slimbuster® L pode ser considerada uma ferramenta segura e eficaz na prevenção e tratamento tópico da gordura localizada e celulite / Abstract: Cellulite is an alteration of the topography of the skin that occurs mainly in women on the pelvic region, lower limbs and abdomen. It is characterized by a padded or 'orange peel' appearance. In according with its etiology, cellulite is defined as a metabolic located disorder of the subcutaneous tissue that provokes an alteration in the physical form, where many structures are alterated in the dermis, in the microcirculation and within the adipocytes. This phenomenon is associated to morphological, histochemical and biochemical modifications in the skin, culminating in the alterations that lead to the aesthetic discomfort and to the clinical appearance of the cellulitis. These alterations are consequence, in parts, from the lipid accumulation into the adypocites, crucial cells in the lypolisis-lipogenesis balance, and it is considerate as a glandular functional unity able to promote a fine-tune interaction with the central nervous system. Recent studies indicate the search for active substances with the ability of promote the dermo-hypodermic homeostasis through lipolytic action, allied to the stimulus of the production of growth factors, mainly TGF-? and GM-CSF, proteins of extracellular matrix, such as collagen, elastin and glycosaminoglycans, as well as substances ables to regulate the adipocyte metabolism. According to the clinical and aesthetic complexity of the cellulitis, as well as the biochemical alterations in the dermis and hypodermis, in this work we evatuate the effects of green coffee seed oil (Coffea arabica L.) and canola phytoesterols (Brassica campestris L.) (F), whose association is the product Slimbuster L (SBL). In this way, we evaluate in this study the effects of these compounds through in vitro, ex-vivo and clinical assessment, using methodologies and experimental models that show the global vision of the process of cellulites. The results demonstrate that SBL was able to stimulate significantly the lipolysis, the synthesis of leptin in human adipocyte cell culture, the production of GM-CSF, TGF-?, collagen, elastin and GAGs in human fibroblast cell culture, the contraction of fibroblastos in collagen gel matrix, as well as promoting the improvement of skin general histologic aspect. The separated fractions (OC and F) also demonstrated important and different effects, being this more pronounced for OC and when both (OC e F) are associated (SBL). The clinical results demonstrate that Slimbuster L was well appreciated by the volunteers for the items "facility of application", "more smooth skin" and "shear it more me" reduction of cellulite" and "reduction of fat accumulation", specially after 60 days use of a body lotion containing 3.0% (w/w) of SBL. The results of the instrumental assessment obtained demonstrate that SBL was able to reduce significantly the measures in the region of the thigh (superior, medium and inferior), being this centrimetric reduction observed in approximately 30% of the panel at D30 and in 50% of the panel at D60. The other evaluated areas - abdome, legs and hips - did not present statistical significance, however they must be taken into account since they presented strong tendency after 60 days of application of the body lotion, indicating a possible improvement with the time of use. The adipometric analysis of the volunteers demonstrated a strong tendency of accumulated fat reduction in the areas of abdomen, supra-iliac, supra-spinal and proximal thigh. The thickness of hypodermis measured by ultrasonography (ecography) showed a reduction superior to 2% in the areas of the thigh and abdomen in approximately 70% of the panel in the all experimental evaluated times (D30 and D60). In according to the results presented in this work, we can conclude that the product Slimbuster L can be considered a safe and efficient tool in the prevention and topical treatment of the located fat and cellulite / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Farmacologia

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Foi avaliada a composiÃÃo relativa dos cortes comerciais da carcaÃa e a composiÃÃo tecidual (mÃsculo, osso e gordura) da perna, lombo e paleta de cabritos mestiÃos Boer, Anglo Nubiano e os do tipo sem raÃa definida (SPRD), esse Ãltimo usado como grupo controle. Foram utilizados 44 caprinos, sendo 20 de diferentes graus de sangue Anglo Nubiano x SPRD (13  Anglo Nubiano x  SPRD e 07  Anglo Nubiano x  SPRD), 16 Boer x SPRD (07  Boer x  SPRD e 09  Boer x  SPRD) e 8 cabritos SPRD. Os animais foram abatidos, em mÃdia, com 12 meses de idade e 30 kg de peso vivo. ApÃs resfriamento (2ÂC) da carcaÃa por 24 horas, foram separados os seguintes cortes comerciais: perna, lombo (anterior e posterior), paleta, peito, costela, pescoÃo e fraldinha, sendo obtidos os rendimentos em relaÃÃo ao peso da carcaÃa fria. Em seguida, a perna, o lombo (anterior e posterior) e a paleta foram dissecados, separando-se os tecidos muscular, adiposo e Ãsseo. A partir dos pesos desses tecidos, foram estimadas as relaÃÃes mÃsculo:osso (RMO) e mÃsculo:gordura (RMG). O desenho experimental obedeceu a um delineamento inteiramente casualizado, e os dados foram analisados pelo procedimento GLM do pacote estatÃstico SAS, em que as mÃdias foram comparadas pelo teste de Tukey. Os rendimentos mÃdios dos cortes foram: perna = 29,8%, lombo = 24,7% (anterior = 18,3% e posterior = 6,4%), paleta = 20,8%, peito = 5,0%, pescoÃo = 7,16%, costela = 3,3% e fraldinha = 5,8%, sem que tenham sido observadas diferenÃas significativas (P>0,05) entre os grupos genÃticos para os cortes estudados, exceto para costela e pescoÃo. Nos cabritos mestiÃos Boer, observaram-se rendimentos superiores (P<0,05) no tecido muscular (64,88%) e na RMO (5,40). Jà nos cabritos mestiÃos Anglo Nubiano, observou-se rendimento superior (P<0,05) para o tecido adiposo (9,46%), enquanto os cabritos SPRD apresentaram superioridade no rendimento do tecido Ãsseo (21,35%) e na RMG (10,5). Conclui-se que, nos cortes de maior valor comercial, a carcaÃa de cabritos mestiÃos Boer apresenta uma maior proporÃÃo de tecido muscular que os cabritos mestiÃos Anglo Nubiano e os SPRD / In this study, the relative composition of the commercial cuts of the carcass and the tissue composition (muscle, bones and fat) of the thigh, loin and shoulders of half-blooded Boer, Anglo Nubian and undefined-breed kids (SPRD) were evaluated. The SPRDâs were used as control group. Forty-four pieces were used, of which 20 units of mixed-blooded Anglo Nubian x SPRD (13  Anglo Nubian x  SPRD and 7  Anglo Nubiano x  SPRD), sixteen Boer x SPRD (07  Boer x  SPRD and 09  Boer x  SPRD), and the remaining 8 heads being SPRDâs. The animals were slaughtered at the average age and weight of 12 months and 30 kg respectively live weight. After cooling the carcass at 2 degrees centigrade for 24 hours the following commercial cuts were set apart: thigh, loin ( front and hind ) shoulders, breast, ribs, neck, sirloin and the proportional weights were figured out in relation to the total weight of the cold carcass. Next, the thigh, loin (front and hind) and shoulders were dissected and the relationship between the weight of the cold carcass and yield was determined, setting apart the muscular, bone and grease tissues. From the weights of such tissues the relations muscle/bones (RMB) and muscle/fate (RMF) were estimated. The experimental scratch was designed in an entirely random way and the data was analyzed according to the GLM procedures in the SAS statistics package in the which the measurements were compared according to the Tukey test. The average yield of the cuts was: tight 29.8%, loin 24.7% ( front 18.3% and hind 6.4%), shoulders 20.8% , breast 5.0%, neck 7.16%, ribs 3.3%, sirloin 5.8%. No significant differences (P>0.05) were found among the genetic groups studied except for the neck and ribs. In the Boer mixed blooded animals higher yield (P>0.05) in the muscular tissues (64.88 %) and in RMB (5.40%) were absorbed. The Anglo Nubian mixed blooded animals showed a higher yield (P<0.05) in the grease tissues (9.46 %), whereas the SPRDâs showed a superior yield in the bone tissue (21.35%) and in the RMF (10.5). The conclusion was that in the cuts of greater commercial value, the carcass of Boer mixed shows a better yield of muscular tissue than the Anglo Nubian and SPRDâs half breeds