Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-22. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:28:32Z : No. of bitstreams: 1 000852786_20170727.pdf: 361665 bytes, checksum: d5d808335081a9c3fed7e2b8e799fbc5 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-07-28T12:36:26Z: 000852786_20170727.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-07-28T12:37:12Z : No. of bitstreams: 1 000852786.pdf: 1033847 bytes, checksum: 6afb41561aed8a3d20a5bcb13d508b71 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-08-07T14:09:17Z: 000852786.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-08-07T14:10:19Z : No. of bitstreams: 1 000852786.pdf: 1033847 bytes, checksum: 6afb41561aed8a3d20a5bcb13d508b71 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A aplicação da ultrassonografia (USG) pode fornecer dados valiosos para eficiente intervenção clínica e cirúrgica em casos de alterações tireoidianas. Entretanto, existem poucos estudos relacionados ao emprego da USG como método de avaliação da glândula tireoide (GT) em cavalos. Portanto, foi objetivo estabelecer parâmetros de análise da GT hígida em equinos adultos através do exame ultrassonográfico em modo B e Doppler. Onze equinos (vinte e dois lobos tireoidianos) foram selecionados através de resultados negativos para tireopatias no exame clínico, laboratorial (tiroxina livre por diálise de equilíbrio), ultrassonográfico e citológico. Foram determinadas as médias e os desvios padrão das dimensões dos lobos tireoidianos (LTs), e a velocidade do pico sistólico, índice de resistividade e pulsatilidade de suas respectivas artérias tireoideas craniais (ATCs). Os contornos, ecotextura, ecogenicidade e padrão do fluxo em cores do parênquima (PFCP) tireoidiano foram também avaliados. Não houve diferenças significativas entre as médias dos valores obtidos para os LTs esquerdo e direito. O mesmo ocorreu para ATC esquerda e direita. A USG se mostrou uma eficiente metodologia diagnóstica para definir os valores de referência da GT em equinos adultos. Apesar dos LTs esquerdo e direito poderem apresentar formato geral distinto num mesmo animal, outros parâmetros como as dimensões, contornos, características do parênquima e vascularização se mostraram semelhantes. A partir desses critérios, se um dos lobos for acometido por tireopatia, o lobo contra-lateral poderá servir de base para avaliação do outro alterado. Além disso, os parâmetros do Doppler espectral unilateral da ATC poderá ser utilizado para avaliar doenças tireoidianas difusas / The application of ultrasonography can provide valuable data for efficient clinical and surgical intervention in cases of thyroid disorders. However, there are few studies related to the use of the USG as an evaluation method of the thyroid gland (TG) in horses. The objective was to establish analysis parameters of healthy TG in adult horses by B and Doppler mode ultrasonography. Eleven horses (twenty-two thyroid lobes) were selected through negative for thyroid disorders on clinical examination, laboratory (free thyroxine by equilibrium dialysis), USG and cytology. It was determined the means and standard deviations of dimensions of the thyroid lobes (TLs), and peak systolic velocity, resistive and pulsatility index their respective cranial thyroid arteries (ACTs). The contours, echotexture, echogenicity and parenchymal color flow pattern (PCFP) thyroid were also evaluated. There were no significant differences between values obtained for the left and right TLs. The same happened to left and right ACTs. The USG proved an efficient diagnostic methodology for defining the TG reference values in adult horses. Although the left and right TLs may present distinct general format in the same animal, other parameters as the dimensions, contours, parenchymal and vascular characteristics were similar. From these criteria, if one of the lobes is affected by thyroid disorders, the contralateral lobe could form the basis for evaluation of another lobe changed. In addition, the study unilateral ACT spectral Doppler parameters may be used to evaluate diffuse thyroid disorder

Made available in DSpace on 2016-01-13T13:28:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-31. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-13T13:33:48Z : No. of bitstreams: 1 000855025.pdf: 4770813 bytes, checksum: 8ec3a1e8929ec7fdd27e356ee994e36a (MD5) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A tiouréia (TU) é um composto orgânico, frequentemente utilizado no tratamento de hipertireoidismo. O presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da tiouréia sobre o crescimento e desenvolvimento de rãs-touro nas fases pré e pósmetamórficas, por meio da deposição de nutrientes corporais, desempenho e análises morfológicas da glândula tireóide, fígado, rins, baço e gônadas. Este trabalho foi dividido em duas fases. Na primeira fase, 7200 girinos foram distribuídos em 12 caixas (500L), em delineamento inteiramente casualizado, e alimentados por 30 dias com ração contendo 0 (T0), 3 (T1), 5 (T2) e 7 mg TU/kg de ração (T3) e três repetições. Na segunda fase, 696 imagos originários da primeira fase foram alojados em 12 baias de 3 m2. A deposição de nutrientes corporais nos tratamentos avaliados encontra-se de acordo com o crescimento normal de girinos de rã-touro. O uso de 7 mg de TU/kg de ração proporcionou o melhor crescimento dos girinos. No tratamento T0, observou-se o desenvolvimento normal da glândula tireóide e nos demais tratamentos, observou-se a hipertrofia da glândula tireóide em função, principalmente, da hipertrofia e hiperplasia das células foliculares. Na segunda fase, observaram-se diversas alterações celulares no fígado, rim e baço. Não foram observados danos celulares ou estruturais nas gônadas. A administração de 7 mg TU/kg na alimentação dos girinos resultou na obtenção de imagos maiores na recria e ao final do período de engorda. O uso de tiouréia durante a fase de girinagem, nas dosagens utilizadas, não causou toxicidade ou qualquer alteração gonadal em animais adultos / Thiourea (TU) is an organic compound often used for treatment of hyperthyroidism. This study aimed to evaluate the effects of thiourea on growth and development of bullfrogs on pre and post-metamorphic phases, by determining the deposition of body nutrients, performance and histological analysis of the thyroid gland, liver, kidneys, spleen and gonads. This work was divided into two phases. In the first phase, 7200 tadpoles were distributed in 12 boxes (500L) in a completely randomized design, and fed for 30 days with feed containing 0 (T0), 3 (T1), 5 (T2), 7 mg TU/kg of feed (T3), and three replicates. In the second phase, 696 juveniles originating from the first phase were housed in 12 pens of 3 m2. The body nutrients deposition obtained is in accordance with the normal growth of bullfrog tadpoles. The use 7 mg TU/kg of feed provided the best growth of the tadpoles. In treatment T0, we observed the normal development of the thyroid gland and in the other treatments there was hypertrophy of the thyroid gland due mainly hypertrophy and hyperplasia of follicular cells. In the second phase, we observed cellular changes in liver, kidney and spleen. In gonads we weren't observed any cellular or structural damage on gonads.The administration of 7 mg TU/kg in the bullfrog tadpoles feed resulted in larger animals on the growing phase and at the end of it. The use of thiourea during tadpole's phase in doses used in this study didn't cause toxicity or gonadal changes in adult animal / FUNDUNESP: 0195/005/14

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-23Bitstream added on 2014-06-13T20:10:37Z : No. of bitstreams: 1 goncalves_mcp_me_botfm.pdf: 3794452 bytes, checksum: 12cf6971d591388dfc080d2c7110f578 (MD5) / Fundação Pio Xii - Barretos / Analisou–se prospectivamente 68 pacientes submetidos à tireoidectomia total por carcinoma diferenciado da tireóide e encaminhados para iodoterapia. Estes foram divididos em dois grupos: tireoidectomizados até um ano e sem iodoterapia prévia (MIBI-I), e os pacientes em acompanhamento clínico evolutivo com doença em atividade (MIBI-II). Os grupos MIBI-I e MIBI-II foram compostos por 56 e 12 pacientes, respectivamente. Do total, 42 pacientes apresentavam Tg>2ng/ml e 45 pacientes tinham TgAc>10UI/ml. O objetivo do estudo foi avaliar a reprodutibilidade dos achados da pesquisa de corpo inteiro (PCI) com sestamibi-99mTc em relação ao método convencional com o uso de iodo- 131, pós-dose terapêutica nos carcinomas diferenciados de tireóide (CDT) e a reprodutibilidade inter–observadores na classificação desses estudos. Os valores do Kappa para a PCI 131I no MIBI-I, mostraram nível de concordância pelo menos moderada no compartimento ósseo e pelo menos forte nos compartimentos cervical, linfonodos, pulmão e mediastino; na PCI com sestamibi-99mTc a melhor concordância foi pelo menos moderada na avaliação de linfonodos, regular no compartimento cervical, mediastino e sem concordância no pulmão. No grupo MIBI-II, os valores do Kappa para PCI 131I apresentaram nível de concordância moderada para os compartimentos linfonodo, mediastino e ósseo e plena no compartimento cervical e pulmão. Ao se analisar os valores kappa para a PCI com sestamibi-99mTc no MIBI-II verificou–se que foi o melhor analisado no contexto geral, permanecendo pelo menos moderada entre todos os compartimentos. As reprodutibilidades inter-instrumentos mostraram que independente dos grupos (MIBI-I e MIBI-II) a concordância foi moderada e forte, respectivamente; a especificidade e o VPN foram elevados na discriminação de não doentes na PCI de consenso comparada a PCI com sestamibi-99mTc. Nas... / Analyzed prospectively, 68 patients who underwent total thyroidectomy for differentiated thyroid cancer and were referred for radioiodine therapy. They were divided into two different groups: the first one with those that were submitted to thyroidectomy for one year without any prior radioiodine therapy (MIBI-I), and the other group was composed by patients with active disease (MIBI-II). Both groups were formed by 56 and 12 patients, respectively. Overall, 42 patients had Tg>2ng/ml and 45 patients had TgAc>10IU/ml. The aim of this study was to evaluate the reproducibility of the findings of whole body scan (WBS) with sestamibi-99mTc compared to the conventional method using iodine-131 post therapy in differentiated thyroid carcinoma (DTC); and agreement rate among observers in the classification of the WBS. Calculation of Kappa values for the 131I WBS MIBI-I showed agreement level of at least regular in the bone compartment and at least strong in cervical lymph nodes, lungs and mediastinum compartiment; while the sestamibi-99mTc WBS the best agreement rate was at least regular in the assessment of lymph nodes, cervical and mediastinum compartiment and without agreement in the lungs. In the group MIBI-II, Kappa values for PCI 131I showed regular agreement rate for lymph nodes, bone and mediastinum compartiment, and full in cervical and lung. When analyzing kappa values for the sestamibi-99mTc WBS in MIBI-II it was found that there was at least regular agreement rate among all compartments, while assessing interinstrument reproducibility it was observed that agreement rate in both groups (MIBI-I e MIB-II) was regular and strong, respectively. Besides, specificity and negative predictive value (NPV) were high discriminating not ill patients compared to consensus sestamibi-99mTc WBS. The reproducibilities of the with 99mTc-sestamibi WBS and with 131I WBS after therapy, showed that the ... (Complete abstract electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-27. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:15Z : No. of bitstreams: 1 000869033_20170527.pdf: 824646 bytes, checksum: 00f5f8bbdd7abcbefcbd2d042d519568 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-06-02T11:56:26Z: 000869033_20170527.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-06-02T11:57:14Z : No. of bitstreams: 1 000869033.pdf: 3301498 bytes, checksum: de14b09badf78ded8a950b747525f42b (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O câncer de tireoide (CT) é a neoplasia mais comum do sistema endócrino. O carcinoma papilífero da tireoide (CPT) compreende 80-85% dos casos, seguido dos carcinomas foliculares (CFT), pouco diferenciados (CPDT) e anáplasicos (CAT). O diagnóstico dos CT, principalmente nos casos bem diferenciados, ainda é um desafio devido a semelhanças morfológicas compartilhadas por esses tumores e lesões benignas (LBT). O objetivo desse estudo foi avaliar o perfil de metilação do DNA para identificar marcadores epigenéticos envolvidos no desenvolvimento das lesões benignas e dos diferentes subtipos histológicos de carcinomas. Além disso, buscou-se identificar marcadores prognósticos nos CT. Foram incluídos nesse estudo 17 lesões benignas da tireoide (8 adenomas, 6 bócios tireoideanos e 3 tireoidites), 60 CPT, 8 CFT, 2 carcinomas de células de Hurthle (CCH), 1 CPDT e 3 CAT, além de 50 tecidos não neoplásicos (TN) obtidos dos pacientes que tiveram CPT. As análises de metilação diferencial foram realizadas utilizando a plataforma microarray Infinium® Human Methylation450 BeadChip (Illumina). Na primeira etapa do estudo, os resultados obtidos de sondas diferencialmente metiladas foram utilizados na construção de um algoritmo útil como classificador diagnóstico. Na segunda etapa, o perfil de metilação do DNA das lesões benignas e dos diferentes subtipos tumorais foi comparado aos dados de tecidos não neoplásicos. Somente sondas significativamente alteradas no presente estudo e aquelas confirmadas no GEO (Gene Expression Omnibus) foram selecionadas para a construção de algoritmos. Foram delineados três algoritmos diagnósticos baseados na metilação diferencial de nove sondas selecionadas a partir de área abaixo da curva de 0,75 para o classificador de LBT e 0,90 para os classificadores CFT e CPT além de análise multivariada. Foram também aplicados métodos lineares de classificação. A aplicação do algoritmo... / Thyroid cancer (TC) is the most prevalent type of endocrine cancer. Papillary thyroid carcinoma (PTC) comprises 80-85% of the diagnosed thyroid cancers, followed by follicular (FTC), poorly differentiated (PDTC) and anaplastic carcinomas (ATC). Diagnosis of thyroid carcinomas, especially of well-differentiated carcinomas is a challenge due to morphological similarities between these tumors and benign lesions. The aim of this study was to evaluate the methylation profile to identify diagnostic markers involved in benign lesions and in different histological subtypes of carcinomas. Moreover, a search for reliable molecular prognostic markers was also performed in TC. The study included 17 benign lesions (8 adenomas, 6 goiters and 3 thyroiditis), 60 PTCs, 8 FTCs, 2 Hürthle cell carcinomas (HCC), 1 PDTC and 3 ATC, as well as 50 non-neoplastic tissues (NT) obtained from patients who had PTC. Differential methylation analyzes were performed using the Infinium® Human Methylation450 BeadChip microarray (Illumina). In the first stage of the study, the results of differentially methylated probes were used in the development of diagnostic classifier algorithm. In second step, the methylation profile of benign lesions and tumor subtypes was compared to data from non-neoplastic tissues. Only probes significantly altered in the current study and those confirmed by GEO data (Gene Expression Omnibus) were selected for the development of the algorithms. Three diagnostic algorithms were developed based on differential methylation of nine probes selected from area under the curve of 0.75 for BTL classifier and 0.90 for FTC and PTC classifiers and multivariate analysis. It was also applied linear classification methods. Application of the algorithm diagnosis allowed the correct classification of non-neoplastic tissues, benign and malignant lesions (sensitivity: 91.9% and specificity: 76.5%). The same strategy was performed using the GEO database...

Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-05-03T00:00:27Z No. of bitstreams: 1 IsabelleCristinaClementeDosSantos_DISSERT.pdf: 2438763 bytes, checksum: 4b6084ab5320a59121b13b7e45b91126 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-05-08T22:15:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 IsabelleCristinaClementeDosSantos_DISSERT.pdf: 2438763 bytes, checksum: 4b6084ab5320a59121b13b7e45b91126 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-08T22:15:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IsabelleCristinaClementeDosSantos_DISSERT.pdf: 2438763 bytes, checksum: 4b6084ab5320a59121b13b7e45b91126 (MD5) Previous issue date: 2018-03-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O câncer de tireoide (CT) é o tumor endócrino mais comum e corresponde a 1% de todas as neoplasias malignas. O número de casos diagnosticados vem aumentando e estima-se que surjam 212 mil novos casos anuais no mundo. Atualmente, não há nenhum estudo de predisposição genética ao CT realizado na população miscigenada do Rio Grande do Norte, local cuja indecência é elevada em comparação à média da população brasileira. Desta forma, o presente projeto busca avaliar a predisposição genética da população local em desenvolver o CT, a fim de compreender melhor a fisiopatologia desta doença e estabelecer potenciais biomarcadores de predisposição. Neste intuito, foi selecionado material histopatológico do banco de amostras do laboratório de Patologia da LNRCC para compor o grupo de estudo, e sangue periférico de doadores do banco de sangue Hemovida, como grupo controle. O DNA genômico das glândulas tireoide emblocadas em parafina e sangue periférico dos controles foram extraídos utilizando o conjunto de reagentes QIAamp® DNA FFPE Tissue e QIAamp® genomic DNA, respectivamente. A genotipagem de um painel de 84 SNPs foi executada através do espectrofotômetro de massa MALDI-TOF Sequenom® MassARRAY iPLEX Gold, em colaboração com o Centro Nacional de Genotipagem de Santiago de Compostela – Espanha. Trinta e seis SNPs mostraram diferenças significativas em suas frequências alélicas quando comparados entre os casos e controles. Destes, 23 SNPs foram associados ao risco de desenvolvimento do CT, destacando-se entre eles as variantes rs2997312 (OR= 6,33), rs7024345 (OR= 2,97), rs10788123 (OR= 2,78), rs116909374 (OR= 3,40) e rs965513 (OR= 2,91) por conferir maior risco de desenvolver CT aos pacientes. Adicionalmente, 13 SNPs se apresentaram como um fator de proteção para o não desenvolvimento desta neoplasia. Desta forma, o presente estudo, inédito na população do Rio Grande do Norte, sugere a associação destes SNPs como biomarcadores de predisposição de CT nesta população. / Thyroid cancer (CT) is the most common endocrine tumor and accounts for 1% of all malignancies. The number of cases diagnosed has been increasing and it is estimated that 212 thousand new cases will appear each year in the world. Currently, there is no study of genetic predisposition to CT performed in the admixture population of Rio Grande do Norte, a place where its incidence is high compared to the Brazilian average. In this way, the present project aims to evaluate the genetic predisposition of the local population to develop the CT, to better understand the pathophysiology of this disease and to establish potential biomarkers of predisposition. To this purpose, histopathological material was selected from the sample bank of the LNRCC Pathology Laboratory to compose the study group, and venous blood from donors from Hemovida blood bank as a control group. Genomic DNA from thyroid gland paraffin blocks and controls blood samples were extracted using the QIAamp® DNA FFPE Tissue kit and QIAamp® genomic DNA kit, respectively. The genotyping of a panel of 84 SNPs was performed using the MALDI-TOF Sequenom® MassARRAY iPLEX Gold Mass Spectrophotometer, in collaboration with the National Center for Genotyping of Santiago de Compostela - Spain. Thirty-six SNPs showed significant differences in their allelic frequencies when compared cases and controls. Of these, 23 SNPs were associated with risk of developing CT, mainly the variants rs2997312 (OR= 6,33), rs7024345 (OR= 2,97), rs10788123 (OR= 2,78), rs116909374 (OR= 3,40) and rs965513 (OR= 2,91) once they confer greater risk to patients. Additionally, 13 SNPs presented as a protective factor for the non-development of this neoplasia. Thus, the present study, unprecedented in the population of Rio Grande do Norte, suggests the association of these SNPs as biomarkers of CT predisposition in this population.

Orientador: Anderson Marliere Navarro / Banca: Vivian Marques Miguel Suen / Banca: Telma Maria Braga Costa / Banca: Thais Borges César / Banca: Maria Rita Marques de Oliveira / Resumo: A ingestão adequada de iodo durante a gestação é essencial para a síntese dos hormônios tireoidianos, que são importantes para as funções fisiológicas da mãe e para uma adequada maturação do sistema nervoso central do feto. Os efeitos da deficiência e/ou excesso de iodo são evidentes em todas as idades e se manifestam desde a fase fetal. O presente estudo teve como objetivo avaliar a excreção urinária de iodo, a função tireoidiana, e concentração séricas de antioxidantes e marcadores do estresse oxidativo em gestantes. Participaram do estudo 191 gestantes e 62 mulheres não gestantes que foram avaliadas segundo o estado nutricional e foram realizadas análises de iodo na urina, marcadores de estresse oxidativo e função tireoidiana. A partir das análises realizadas, foi observada insuficiência de iodo em 81 gestantes. Não houve alteração nas concentrações de TSH para 89% das gestantes. Os valores de anti-TPO foram superiores para o grupo controle em comparação com o grupo gestante (64,5% e 12,6%, respectivamente). Para o anti-TG, o grupo controle também apresentou valores maiores (11,6%). Não houve alteração significativa nos anticorpos quanto à sua classificação em relação aos valores de TSH e iodúria. A avaliação do estresse oxidativo revelou níveis de AOPP superiores para as gestantes e maiores níveis dos antioxidantes CAT e SOD. A classificação de iodúria com relação aos marcadores de estresse oxidativo revelou menores níveis de α-tocoferol para as gestantes com insuficiência de iodo. Sendo assim, os resultados sugerem que a insuficiência de iodo não foi capaz de induzir alterações nos níveis de TSH e anticorpos e que mulheres grávidas com excreção urinária de iodo adequada apresentaram melhor perfil do antioxidante α-tocoferol, indicando que o iodo pode desempenhar um papel significativo na capacidade antioxidante durante a gestação. / Abstract: Adequate intake of iodine during pregnancy is essential for synthesis of thyroid hormones, which are important for the physiological functions of the mother and proper maturation of the central nervous system of the fetus. The effects of disability and/or over are evident in all ages and manifest in the fetal stage. This study aimed to evaluate the urinary excretion levels of iodine, thyroid function and markers of oxidative stress in pregnant women. The study enrolled 191 pregnant women and 62 non-pregnant women who were evaluated according to the nutritional status and were held iodine analysis in urine, thyroid function and oxidative stress markers. From the analyzes, iodine deficiency was observed in 81 pregnant women. There was no change in TSH concentrations to 89% of pregnant women. The anti-TPO levels were higher in the control group compared to the pregnant group (64,5% and 12,6%, respectively). For anti-TG, the control group also showed higher values (11,6%). There was no significant change in antibodies and their classification about TSH levels and urinary iodine. Evaluation of oxidative stress revealed AOPP levels greater for pregnant women and higher levels of antioxidants SOD and CAT. Urinary iodine classification with respect to oxidative stress markers showed lower levels of α-tocopherol for pregnant women with iodine insufficiency. Thus, the results suggest that iodine deficiency was not able to induce altered levels of TSH and antibodies and pregnant women with urinary excretion of appropriate iodine showed a better profile of the α-tocopherol antioxidant, indicating that the iodine may play a role significant antioxidant capacity during pregnancy. / Doutor

Orientador: Silvia Regina Rogatto / Banca: Patricia Pintor dos Reis / Banca: Miriam Galvonas Jasiulionis / Banca: Janete Maria Cerutti / Banca: Sandra A. Drigo Linde / Resumo: O câncer de tireoide (CT) é a neoplasia mais comum do sistema endócrino. O carcinoma papilífero da tireoide (CPT) compreende 80-85% dos casos, seguido dos carcinomas foliculares (CFT), pouco diferenciados (CPDT) e anáplasicos (CAT). O diagnóstico dos CT, principalmente nos casos bem diferenciados, ainda é um desafio devido a semelhanças morfológicas compartilhadas por esses tumores e lesões benignas (LBT). O objetivo desse estudo foi avaliar o perfil de metilação do DNA para identificar marcadores epigenéticos envolvidos no desenvolvimento das lesões benignas e dos diferentes subtipos histológicos de carcinomas. Além disso, buscou-se identificar marcadores prognósticos nos CT. Foram incluídos nesse estudo 17 lesões benignas da tireoide (8 adenomas, 6 bócios tireoideanos e 3 tireoidites), 60 CPT, 8 CFT, 2 carcinomas de células de Hurthle (CCH), 1 CPDT e 3 CAT, além de 50 tecidos não neoplásicos (TN) obtidos dos pacientes que tiveram CPT. As análises de metilação diferencial foram realizadas utilizando a plataforma microarray Infinium® Human Methylation450 BeadChip (Illumina). Na primeira etapa do estudo, os resultados obtidos de sondas diferencialmente metiladas foram utilizados na construção de um algoritmo útil como classificador diagnóstico. Na segunda etapa, o perfil de metilação do DNA das lesões benignas e dos diferentes subtipos tumorais foi comparado aos dados de tecidos não neoplásicos. Somente sondas significativamente alteradas no presente estudo e aquelas confirmadas no GEO (Gene Expression Omnibus) foram selecionadas para a construção de algoritmos. Foram delineados três algoritmos diagnósticos baseados na metilação diferencial de nove sondas selecionadas a partir de área abaixo da curva de 0,75 para o classificador de LBT e 0,90 para os classificadores CFT e CPT além de análise multivariada. Foram também aplicados métodos lineares de classificação. A aplicação do algoritmo... / Abstract: Thyroid cancer (TC) is the most prevalent type of endocrine cancer. Papillary thyroid carcinoma (PTC) comprises 80-85% of the diagnosed thyroid cancers, followed by follicular (FTC), poorly differentiated (PDTC) and anaplastic carcinomas (ATC). Diagnosis of thyroid carcinomas, especially of well-differentiated carcinomas is a challenge due to morphological similarities between these tumors and benign lesions. The aim of this study was to evaluate the methylation profile to identify diagnostic markers involved in benign lesions and in different histological subtypes of carcinomas. Moreover, a search for reliable molecular prognostic markers was also performed in TC. The study included 17 benign lesions (8 adenomas, 6 goiters and 3 thyroiditis), 60 PTCs, 8 FTCs, 2 Hürthle cell carcinomas (HCC), 1 PDTC and 3 ATC, as well as 50 non-neoplastic tissues (NT) obtained from patients who had PTC. Differential methylation analyzes were performed using the Infinium® Human Methylation450 BeadChip microarray (Illumina). In the first stage of the study, the results of differentially methylated probes were used in the development of diagnostic classifier algorithm. In second step, the methylation profile of benign lesions and tumor subtypes was compared to data from non-neoplastic tissues. Only probes significantly altered in the current study and those confirmed by GEO data (Gene Expression Omnibus) were selected for the development of the algorithms. Three diagnostic algorithms were developed based on differential methylation of nine probes selected from area under the curve of 0.75 for BTL classifier and 0.90 for FTC and PTC classifiers and multivariate analysis. It was also applied linear classification methods. Application of the algorithm diagnosis allowed the correct classification of non-neoplastic tissues, benign and malignant lesions (sensitivity: 91.9% and specificity: 76.5%). The same strategy was performed using the GEO database... / Doutor

Orientador: Silvia Regina Rogatto / Resumo: A identificação de fatores de predisposição e a caracterização de fatores genéticos de risco para odesenvolvimento do câncer são essenciais para o diagnóstico, prognóstico e aconselhamento genéticodos pacientes afetados e seus familiares. Há uma alta incidência de pacientes que possuem carcinomasde mama (CM) e/ou carcinoma de tireoide (CT) e com história familial destes tumores, sugerindo oenvolvimento de gene(s) associado(s) com a predisposição hereditária ao câncer. O objetivo destetrabalho foi investigar a presença de genes de predisposição ao desenvolvimento de CM e CT pormeio do sequenciamento total do exoma, em pacientes que sejam afetados por pelo menos um destestumores e possuam história familial de câncer. Foram incluídas seis pacientes que apresentavam CM,12 com CT e seis com ambos os tumores, todos com história destes tumores em suas famílias. O DNAde sangue periférico foi sequenciado pela plataforma HiSeq 1000 (Illumina). Após análise debioinformática foram identificadas alterações em genes de alta e baixa penetrância comuns e raras. Asalterações raras destes genes foram consideradas como patogênicas quando presentes em pelo menostrês bancos de dados e em até dois indivíduos. A paciente 14 teve diagnóstico de síndrome de Cowdenconfirmado pela presença da mutação p.R233X no gene PTEN. Também foram investigadas outrasalterações em novos genes o que resultou em 911 SNVs (single nucleotide variations), sendo 287 não-sinônimas e 50 alteraç... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The identification of predisposing genes and characterization of genetic risk factors for cancer development are essential for the diagnosis, prognosis and genetic counseling of affected patients and their families. A significant number of patients with breast (BC) and papillary thyroid carcinomas (TC) and family history of these tumors suggest the involvement a hereditary cancer predisposition gene. The aim of this study was to evaluate new predisposing genes related to BC and TC by whole exome sequencing, in patients who are affected by at least one of these tumors and have cancer family history. Six patients with CM, 12 with CT and six with both tumors were included in the study, all of them with family history of these tumors. DNA from peripheral blood sample was sequenced by HiSeq 1000 platform (Illumina). After the bioinformatics analysis, variations in high and lowpenetrance genes were identified; most of them were considered common according to 1000 Genomes and 6500 Exomes. Furthermore, rare variations were described in these genes, which were considered pathogenic in at least three databases and observed in up to two patients. Patient 14 presented the p.R233X mutation in PTEN confirming the diagnosis of Cowden Syndrome. Other genes were investigated in order to characterize new variations related to the phenotype studied. This analysis resulted in 911 SNVs (single nucleotide variations), 287 non-synonymous alterations and 50 rare pathogenic variations (detected in at... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:57:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000443880-Texto+Completo-0.pdf: 7695566 bytes, checksum: a3397252a1694c7b91b7cd9a54df25b4 (MD5) Previous issue date: 2012 / HMGA overexpression, other than to be a feature of human malignant neoplasias, has a causal role in cell transformation. Then, the aim of our study has been to investigate the miRNAs regulated by the HMGA proteins in the process of cell transformation analyzing the miRNA expression profile of v-ras-ki oncogenetransformed thyroid cells expressing or not HMGA proteins. We demonstrate that, among the miRNAs regulated by cell transformation, there are miR-10b, miR-21, miR-125b, miR-221 and miR-222 that are positively and miR-34a and miR-603 that are negatively regulated, by HMGA expression. Then, we focused our attention on the miR-10b and miR-603 whose expression appeared to be dependent on the presence of the HMGA proteins also in other cell systems. We found that miR-10b is able to target the PTEN gene, whereas miR-603 targets CCND1 and CCND2 genes. Moreover, functional studies showed that miR-10b and miR-603 were able to regulate positively and negatively, respectively, cell proliferation and migration suggesting a role of their deregulation in thyroid cell transformation. / A super expressão das proteínas HMGA (High Mobility Group A) além de ser uma característica de neoplasias humanas malignas tem uma papel essencial na transformação celular. O objetivo deste trabalho foi identificar os miRNAs associados as proteínas HMGA no processo de transformação celular, analisando perfil de expressão de microRNAs (miRNAs) em células da tireóide transformadas com o oncogene v-ras-ki, expressando ou não as proteínas HMGA. Entre os miRNAs regulados pela transformação celular, observou-se que o miR-10b, miR-21, miR- 125b, miR-221 e o miR-222 são positivamente e o miR-34a and miR-603 são negativamente regulados pela expressão das proteínas HMGA. Assim focamos nossa atencao no miR-10b e no miR-603 cuja expressão parece ser dependente da presença das proteínas HMGA tambèm em outros sistemas celulares. Igualmente, foi demonstrado que CCND1 e CCND2 são alvos do miR-603, e PTEN alvo do miR- 10b. Além disso, os estudos funcionais demonstraram que o miR-10b e o miR-603 são capazes de regular positiva e negativamente a proliferação celular e migração, sugerindo um papel da sua desregulação na transformação de células da tireóide.

Orientador: Laura Sterian Ward / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T07:53:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_AnaPaulaCarneiroDos_M.pdf: 2998875 bytes, checksum: 9fd6ce397ec8eae4d85db8afcd041e9e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Fragmentos de anticorpos recombinantes têm se tornado ferramentas importantes em diversas áreas, tais como: Biologia Molecular, Farmacêutica e pesquisa Médica. Avanços recentes estão relacionados à aplicação desses anticorpos na oncologia, com estratégias diagnósticas e terapêuticas para diferentes carcinomas. Neste estudo, uma biblioteca de fragmentos de anticorpos monoclonais scFv foi construída utilizando RNA total de sangue periférico de 25 pacientes com Carcinoma Diferenciado da Tireóide. Essa biblioteca scFv foi selecionada utilizando os métodos Bioppaning and Rapid Analysis of Selective Interactive Ligands (BRASIL) e Phage display contra células tumorais de tireóide, com o objetivo de encontrar ligantes específicos a superfície celular tumoral. Os clones selecionados foram identificados por Dot blotting, e a reatividade contra proteínas de tumor, adenoma e bócio foi analisada por Elisa. O clone scFv-C1 apresentou melhor reatividade pelas proteínas tumorais e foi escolhido para a imunoistoquímica. Esta foi realizada com lâmina de Micro-arranjo de tecido (TMA) com duzentos e vinte nove casos de tireóide, sendo 110 Carcinomas, 52 Adenomas Foliculares, 49 Bócios e 18 tecidos normais de tireóide. O anticorpo scFv-C1 reagiu especificamente aos tecidos de câncer, com reatividade ao citoplasma das células tumorais, foi capaz de distinguir o Grupo Câncer do Controle (Bócio, Adenoma e tireóide normal) com significância estatística (p<0,0001) e entre os carcinomas reagiu melhor com os tumores pequenos (TNM 1 e 2) e com pouca agressividade (p=0,050). O fragmento de anticorpo scFv-C1 pode ser um potencial candidato a biomarcador para o diagnóstico do Câncer de tireóide / Abstract: Recombinant antibody fragments have become important tools in several fields, including molecular biology, pharmaceutical and medical research. In this study, a human single-chain variable fragment (scFv) antibody library was constructed using total RNA of leukocyte cells obtained from blood of patients with well differentiated thyroid carcinoma. This scFv antibody library was selected using the Biopanning and Rapid Analysis of Selective Interactive Ligands method (BRASIL) and Phage display technology against tumor thyroid cells, aiming to find specific cell-surface binders. The selected clones were identified by dot blot and ELISA assays and their reactivity analyzed against tumor, goiter and adenoma proteins. One clone (scFv-C1) presented the highest reactivity ratio between cancer and the control group (goiter and adenoma) and was chosen for further analysis. Immunohistochemistry was performed by means of Tissue Microarray with two hundred and twenty-nine thyroid cases (110 carcinomas, 52 follicular adenomas, 49 goiters and 18 normal tissues) including 38 papillary, 42 follicular and 30 variant follicular in the carcinoma group. The scFv-C1 reacted specifically to cancer tissues sections, showed strong reactivity with cytoplasm and was able to distinguish cancer to control groups (goiter, adenoma and normal thyroid) with_statistically significance (p<0,0001). The scFv-C1 fragment antibody described here may be a potential biomarker candidate for diagnostics and prognostics of thyroid cancer / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica