Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-04-25T12:58:07Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1177092 bytes, checksum: 246c209ae17c914f543ab3f722afaf0d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-25T12:58:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1177092 bytes, checksum: 246c209ae17c914f543ab3f722afaf0d (MD5) Previous issue date: 2018-02-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A doença de Chagas é causada pelo protozoário intracelular obrigatório Trypanosoma cruzi, e transmitido a humanos e animais vertebrados através do contato de uma solução de continuidade da pele com fezes de insetos triatomíneos infectados. Atualmente, a doença afeta aproximadamente 16 milhões de pessoas em todo o mundo. Somente duas drogas estão disponíveis no mercado para o tratamento de doentes: Benzonidazol e Nifurtimox, no entanto estas apresentam diversos efeitos colaterais, são contra-indicadas a pacientes imunossuprimidos e são eficientes apenas na fase aguda da doença. Levando-se em consideração a eficácia limitada e toxicidade das drogas disponíveis, o desenvolvimento de uma estratégia de vacinação representa uma alternativa para o controle desta doença. Neste sentido, nosso objetivo foi avaliar a resposta imune induzida pela vacinação utilizando a estratégia vacinal “prime-boost” heterólogo DNA/NTPDase-1 de T. cruzi, em camundongos BALB/c. Os resultados indicaram que a imunização com o “prime-boost”, induziu produção de níveis semelhantes tanto de IgG1 quanto de IgG2a, e embora o grupo imunizado com três doses da rNTPDase-1 tenha produzido níveis mais elevados de anticorpos precocemente, quando a avaliação foi feita 15 dias após a última imunização, verificamos que esses níveis eram semelhantes para ambos os grupos imunizados, sendo observada produção mista desses isótipos. Também foi observado, para o grupo ”prime-boost ”, aumento significativo na produção de citocina Th1 (TNF-α) e da quimiocina MCP-1. Avaliando o perfil de células T, verificamos que os animais vacinados seguindo esse mesmo protocolo apresentaram um aumento significativo na frequência de linfócitos T CD8 (CD3 + CD8 + ), além de aumentar de forma significativa o percentual de células T CD4 e CD8 com fenótipo de memória (CD44 high CD62L), quando comparado ao grupo que recebeu três doses da rNTPDase-1 e também o grupo inoculado somente com PBS (controle). Após o desafio, observamos que a imunização tanto com a rNTPDase-1 quando com o “prime- boost” foram eficazes em reduzir a carga parasitária presente no tecido cardíaco dos animais vacinados em comparação ao grupo controle, no entanto a carga parasitária presente no grupo “prime-boost” era inferior quando comparada ao grupo imunizado somente com a rNTPDase-1. A imunização utilizando esses dois protocolos, também resultou em 100% da sobrevivência quando comparados ao grupo controle, onde 50% dos animais haviam morrido durante o período experimental. Diante dos dados observados, sugerimos que a imunização seguindo a estratégia vacinal “prime-boost” heterólogo DNA/NTPDase-1 de T. cruzi, além de induzir polarização da resposta imune para o tipo Th1, também resultou em melhora na proteção. Sendo assim, imunização seguindo a estratégia vacinal “prime-boost” heterólogo DNA/NTPDase-1 de T. cruzi pode ser vista como promissora no controle da doença de Chagas. / Chagas disease is caused by the required intracellular protozoan Trypanosoma cruzi, transmitted to humans and vertebrates animals through of contacto of a continuity solution skin with feces of infected triatomine insects. The disease currently affects approximately 16 million people worldwide. Only two drugs are commercially available for the treatment of patients, such as Benzonidazole and Nifurtimox, however, they have several side effects, are not indicated in immunosuppressed patients and are efficient only in the acute phase of the disease. Due to the limited efficacy and toxicity of the available drugs, the development of a vaccination strategy represents an alternative for the control of this disease. In this regard, our objective was to study the immune response induced by the vaccination using “prime-boost” heterólogo DNA/NTPDase-1 de T. cruzi, in mice BALB/c. Our results indicated that immunization with prime-boost induced production of similar levels of IgG1 and IgG2a, and although the group immunized with rNTPDase-1 produced higher levels of antibodies at the immunization intervals when the evaluation was done 15 days later the last immunization, we check that these levels were similar for both immunized, being observed mixed production of these isotypes. We also observed a significant increase in the production of Th1 cytokine (TNF-α) and chemokine MCP-1 in the prime-boost group, and the T-cell profile showed that the animals vaccinated following the same protocol had a significant increase in the frequency of CD8 T lymphocytes (CD3 + CD8 + ), in addition to significantly increasing the percentage of CD4 and CD8 T cells with memory phenotype (CD44 high CD62L) when compared to the rNTPDase-1 group and also the group inoculated only with PBS (control). After the challenge, we observed that immunization with NTPDase-1 was effective in reducing the level of parasite present in the cardiac tissue of the vaccinated animals compared to the control group, however the parasite level present in the prime-boost group was lower when compared to the group immunized only with rNTPDase-1. Immunization using these two protocols also resulted in 100% survival when compared to the control group, where 50% of the animals died during the experimental period. The observed data, suggest that immunization following “prime-boost” heterólogo DNA/NTPDase-1 of T. cruzi strategy, induced polarization of the Th1-type immune response, also resulted in improved protection. Thus, immunization following the this strategy can be seen as promising in the control of Chagas' disease.

Orientador: João Aristeu da Rosa / Banca: João Clóvis do Prado Júnior / Banca: Márcia Aparecida Sperança / Banca: Mara Cristina Pinto / Banca: Vera Lucy de Santi Alvarenga / Resumo: Trypanosoma cruzi é um protozoário flagelado causador da doença de Chagas que, segundo estimativas da OMS afeta 16-18 milhões de pessoas na América Latina, causando danos sociais extremamente graves. A doença apresenta formas clínicas variadas que incluem a forma indeterminada, cardiomiopatia e alterações digestivas. Variações intraespecíficas nas diferentes cepas de Trypanosoma cruzi estudadas foram demonstradas em nível morfo-biológico, bioquímico e genético. Essa heterogeneidade poderia explicar a variabilidade nas manifestações clínicas da doença de Chagas e as diferenças regionais de sua morbidade. Com o objetivo de caracterizar quatro cepas de Trypanosoma cruzi isoladas de pacientes chagásicos crônicos, residentes na região de Araraquara - SP, parâmetros biológicos e moleculares foram avaliados. Para estudar o comportamento biológico das cepas, três grupos de camundongos Swiss, não isogênicos, pesando 10-12g foram infectados com formas sangüíneas das cepas em estudo. Foram avaliados os seguintes aspectos: período pré-patente, curvas de parasitemia, morfologia do parasita no sangue periférico, taxas de mortalidade e lesões histopatológicas. Três cepas apresentaram parasitemia patente com períodos pré-patentes variáveis, baixa parasitemia e formas tripomastigotas largas durante todo o curso da infecção. Uma cepa apresentou parasitemia sub-patente. Nenhum animal morreu durante o período do estudo. Exame histopatológico mostrou ninhos de formas amastigotas no coração de animais infectados para duas cepas e inflamação em vários órgãos para todas as cepas. Para a caracterização molecular o DNA do parasita foi extraído de formas epimastigotas mantidas em meio LIT. Parte do espaçador não transcrito do gene de mini-exon foi amplificado por PCR. Todas as cepas geraram produtos com 250 pb. Os dados biológicos e moleculares permitiram a classificação de todas as cepas como T.cruzi II. / Abstract: Trypanosoma cruzi is a flagellate protozoan agent of Chagas disease that, according to the OMS estimation, affect 16-18 milion of people in Latin America, making serious social damage. The illness shows varied clinicals forms that include indeterminate form, cardiomiopathy and digestive alterations. Intra-specific variations among differents Trypanosoma cruzi strains studied have been demonstrated on morpho-biological, genetic and biochemical levels. Such heterogeneity can explain the variability of Chagas disease in clinical manifestations and in the regional differences of the morbidity rate. This research has the objective to characterize four strains of Trypanosoma cruzi isolated from humans patients, residents in Araraquara - SP region, by evaluating biological and molecular parameters. In order to study the biological behavior of Trypanosoma cruzi strains, three groups of albino Swiss mice, weighting 10-12g were intraperitoneally inoculated with bloodstreams forms of the strains in study. Pre-patent period, parasitaemia patterns, tripomastigote morphology, mortality rate and tissue distribution of the protozoan were analysed. Three strains showed patent parasitemy with variable pre-patent period, low parasitemy and broad forms during the whole infection period. One strain showed sub-patent parasitemy. Mortality rates were null. Histopathological analysis showed amastigotes forms in heart for two strains and inflamatory process in several organs for all the strains. For the molecular characterization, the parasite DNA was extracted from epimastigotes forms kept in LIT medium. Part of the non-transcribed spacer of the mini-exon gene was amplified by PCR. All the strains generated products with 250 pb. The molecular and biological informations allowed to classify all the strains as T.cruzi II. / Doutor

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2018-03-06T20:14:19Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamilla Soares Nogueira - 2015.pdf: 1269034 bytes, checksum: 57bf041ae63db9b0edaaf9382d4a5698 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-03-07T12:13:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamilla Soares Nogueira - 2015.pdf: 1269034 bytes, checksum: 57bf041ae63db9b0edaaf9382d4a5698 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-07T12:13:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Kamilla Soares Nogueira - 2015.pdf: 1269034 bytes, checksum: 57bf041ae63db9b0edaaf9382d4a5698 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-08-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Chagas disease is a zoonosis of huge worldwide impact that has such as vector triatomine insects belonging to the hemiptera order and such as etiological agent Trypanosoma cruzi a flagellate that presents different evolutive manners. The evolutive manners of Trypanosoma cruzi can gain energy from various sources, for example glucose and amino acids. This capacity in gain energy from various sources lead to understand how this parasite can be able to adapt and survive in different environment, be it on the vector insects or on the vertebrate host. The aim of this work was evaluate the energetic metabolism in vitro of epimastigote forms of Trypanosoma cruzi pre and post-treatment with different concentrations of benznidazole. The parasites were grown in means of Liver infusion triptose - LIT and the organic acids referring to them energetic metabolism were measured for 3º, 6º, 9º e 12º days of growing. For evaluation of the drug effect on the parasite's metabolism was added in the growing medium the following concentrations: 100 μmolar, 50 μmolar, 25 μmolar, 12.5 μmolar e 6.25 μmolar. It was possible to detect organic acids referring to glycolytic path, oxidation of fatty acids, urea cycle and citric acid of parasites in every analyzed day. It was possible to observe that the largest concentrations of drug (25, 50 e 100μmolar) induced anaerobic way of energy production. This way before the non-detection of glicossomais and mitochondrias final products, it can conclude that one of the mechanisms of action of this drug is to prevent the aerobic metabolism of the parasite, inhibiting mitochondria paths and glicossomais. / A doença de Chagas é uma zoonose de grande impacto mundial que tem como vetor insetos triatomínios pertencentes à ordem hemíptera e como agente etiológico Trypanosoma cruzi um flagelado que apresenta diferentes formas evolutivas. As formas evolutivas de Trypanosma cruzi podem obter energia de diversas fontes, como por exemplo glicose e aminoácidos. Essa capacidade em obter energia de várias fontes leva a entender como este parasito consegue se adaptar e sobreviver em diferentes ambientes seja ele no inseto vetor ou no hospedeiro vertebrado. O objetivo deste trabalho foi avaliar o metabolismo energético in vitro de formas epimastigotas de Trypanosoma cruzi pré e pós tratamento com diferentes concentrações de benzonidazol. Os parasitos foram cultivados em meio Liver infusion triptose - LIT e os ácidos orgânicos referentes ao seu metabolismo energético foram quantificados aos 3º, 6º, 9º e 12º dias de cultura. Para avaliação do efeito do fármaco no metabolismo do parasito foi adicionado ao meio de cultura às seguintes concentrações: 100 μmolar, 50 μmolar, 25μmolar, 12.5 μmolar e 6.25μmolar. Foi possível detectar ácidos orgânicos referentes à via glicolítica, oxidação de ácidos graxos, ciclo da uréia e do ácido cítrico nos parasitos em todos os dias analisados. Foi possível observar que as maiores concentrações do fármaco (25, 50 e 100μmolar) induziram a via anaeróbia de produção de energia. Desta forma, diante da não detecção de produtos finais glicossomais e mitocondriais pode-se concluir que um dos mecanismos de ação deste fármaco é impedir o metabolismo aeróbio do parasito, inibindo vias mitocondriais e glicossomais.

De acordo com a Organização Mundial de Saúde, a doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, ainda faz parte do grupo de doenças negligenciadas, uma vez que ainda são escassos os investimentos destinados às pesquisas para desenvolvimento de novas drogas, de modo que as opções terapêuticas são limitadas. Sendo assim, é evidente a necessidade de estudos com a finalidade de desenvolver novos medicamentos eficazes na quimioterapia da doença. A espécie Tithonia diversifolia, o margaridão, é uma planta considerada invasora no Brasil, sendo encontrada ao longo de rodovias e em terrenos baldios. As lactonas sesquiterpênicas (LSTs) isoladas desta planta, possuem ação anti-inflamatória e anti-parasitária, dentre outras ações farmacológicas. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade tripanocida in vitro do extrato de lavagem foliar rico em LSTs (ELF) e da tagitinina C (TC) extraídos de T. diversifolia, isolados e em combinação com benznidazol (Bz). Adicionalmente, foi avaliado o potencial dos tratamentos, em monoterapia e combinados, em relação à capacidade de induzir a cura parasitológica, prevenir ou reduzir o índice de miocardite e suas influências na resposta imune celular e humoral de animais experimentalmente infectados pela cepa Y do T.cruzi. Os resultados demonstraram que tanto o ELF quanto a TC isolada possuem atividade tripanocida in vitro, apresentando a IC50 de 0,6426 μg/mL e 0,4022 μg/mL, respectivamente. Tais resultados foram considerados promissores quando comparados à IC50 de 9,32 μg/mL do fármaco de referência Bz. Ainda foi observado que o ELF e a TC reduziram em 32% e 51%, respectivamente, o índice de infecção por amastigotas em células H9c2, enquanto o Bz inibiu 36%. Nos experimentos in vivo, foi verificado que tanto o ELF quanto a TC foram capazes de suprimir a parasitemia dos animais experimentalmente infectados pela cepa Y, sendo observada uma potencialização desta atividade quando as LSTs foram combinadas ao Bz, uma vez que o tratamento com ELF+Bz induziu a 70% de cura nos animais, o mesmo índice foi observado no tratamento com Bz em monoterapia. Já a combinação TC+Bz foi capaz de suprimir totalmente a parasitemia e os testes do critério de cura confirmaram um índice de 100% de cura entre os animais submetidos a este tratamento. Através da dosagem de citocinas, foi observado que as terapias combinadas inibiram a produção de IFN-γ e TNF-α, importantes citocinas pró-inflamatórias ligadas à lesão tecidual associada à doença de Chagas, e foi verificado também que animais submetidos aos tratamentos contendo as LSTs apresentaram maiores produções da citocina IL-10, o que sugere uma modulação da resposta imunológica induzida pela atividade anti-inflamatória das LSTs. O benefício da modulação da resposta imune também foi evidenciado pela ausência e/ou redução de miocardite nos animais que receberam o tratamento combinado com ELF+Bz e TC+Bz. De maneira geral, nossos resultados demonstram que o tratamento combinado entre TC e Bz é promissor, pois além de induzir ao índice de cura superior ao Bz em monoterapia, ainda preveniu a miocardite nos animais. Além disso, as LSTs são capazes de interferir na resposta imune do hospedeiro, podendo esta interferência estar relacionada a melhor prognóstico da doença. / According to the World Health Organization, Chagas' disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, is still part of the neglected diseases group, since investments for research into new drug development are scarce, therapeutic options are limited. Thus, the need for studies with the purpose of developing new drugs effective in the chemotherapy of the disease is evident. The Tithonia diversifolia species, daisy, is a plant considered invasive in Brazil, being found along highways and in vacant lots. The sesquiterpene lactones (STLs) isolated from this plant have anti-inflammatory and anti-parasitic action, among other pharmacological actions. In this sense, the objective of this work was to evaluate the trypanocidal activity of foliar lavage extract in STLs (ELF) and tagitinin C (TC) extracted from T. diversifolia, isolated and in combination with benznidazole (Bz). In addition, the potential of monotherapy and combined treatments in relation to the ability to induce parasitological cure, and to prevent or reduce the myocarditis index and its influences on the cellular and humoral immune response of experimentally infected animals by T.cruzi Y strain were evaluated. The results demonstrated that both the ELF and the isolated TC have trypanocidal activity in vitro, presenting the IC50 of 0.6426 μg/mL and 0.4022 μg/mL, respectively. These results were considered promising when compared to the IC50 of 9.32 μg/mL of the reference drug Bz. It was also observed that ELF and TC reduced the rate of infection by amastigotes in H9c2 cells by 32% and 51%, respectively, while Bz inhibited 36%. In the in vivo experiments, it was verified that both ELF and TC could suppress the parasitemia of the animals experimentally infected by strain Y, being observed a potentiation of this activity when the STLs were combined with Bz, once the treatment with ELF + Bz induced 70% cure in the animals, the same rate was observed in the treatment with Bz monotherapy. The TC + Bz combination could completely suppress the parasitaemia and the tests of the curing criterion confirmed a cure rate of 100% among the animals submitted to this treatment. Through dosing of cytokines has been observed that combination therapy inhibited the production of IFN-γ and TNF-α, important inflammatory cytokines related to tissue injury associated with Chagas’ disease, and was also found that animals subjected to treatments containing the STLs, presented higher IL-10 cytokine productions, suggesting a modulation of the immune response induced by the anti-inflammatory activity of the STLs. The benefit of modulation of the immune response was also evidenced by the absence and / or reduction of myocarditis in the animals receiving combined treatment with ELF + Bz and TC + Bz. In general, our results demonstrate that the combined treatment between TC and Bz is promising, since in addition to inducing the cure rate superior to Bz in monotherapy, it still prevented the myocarditis in the animals. In addition, the STLs are capable of interfering in the immune response of the host, and this interference may be related to a better prognosis of the disease. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Orientador: João Aristeu da Rosa / Banca: Maria Tercilia Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Marcos Takashi Obara / Resumo: Estima-se que 6 a 7 milhões de pessoas estejam infectadas com Trypanosoma cruzi no mundo, a maioria na América Latina, sendo a transmissão vetorial responsável ainda por, aproximadamente, 80% dos casos. Atualmente são descritas 151 espécies de triatomíneos agrupadas em cincos tribos formadas por 18 gêneros. O gênero Rhodnius conta com 19 espécies de potenciais vetores, podendo veicular T. cruzi e Trypanosoma rangeli. É considerado um dos gêneros taxonomicamente mais complexos da subfamília Triatominae, devido as semelhanças morfológicas e a distribuição geográfica que podem se sobrepor entre algumas de suas espécies dificultando seu estudo, apesar das diversas técnicas empregadas para sua distinção. Com o desenvolvimento atual das técnicas moleculares tornou-se possível a caracterização de espécies de triatomíneos por meio de marcadores mitocondriais e nucleares, tendo essa se tornado uma variável a mais para a taxonomia dos triatomíneos, assim como a já utilizada morfologia e a recentemente popularizada morfometria geométrica. A adição de novas variáveis possibilita que dados já existentes possam ser comprovados e/ou corrigidos. Neste trabalho foram obtidos subsídios que ampliam o conhecimento e que agregados aos já existentes podem proporcionar uma diferenciação mais minuciosa e precisa de espécies englobadas no gênero Rhodnius, de modo a contribuir para estabelecer uma classificação mais apropriada. A obtenção dos dados foi conduzida, por meio de estudo molecular, utiliza... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Worlwide, it is estimated that 6 to 7 million people are infected with Trypanosoma cruzi, mostly in Latin America and the vector transmission is still responsible for approximately 80% of the cases. There are currently 151 described species of triatomine, grouped into five tribes, formed by 18 genres. The Rhodnius genre includes 19 species, which can transmit T. cruzi and Trypanosoma rangeli. It is considered one of the most complex taxonomically genera of Triatominae, due to its morphological similarities and geographical distribution that may overlap among some species hindering their study, despite the various techniques used for their distinction. With the current development of molecular techniques it has become possible to characterize triatomine species through mitochondrial and nuclear markers, this became one more toll for the taxonomy of triatomines, just as the already used morphology and recently popularized geometric morphometry. The addition of new variables enables the verification and or correction of existing data. This work has generated valueable data that amplify the knowledge which in addition to the existing may provide a more accurate differentiation of species included in the genre Rhodnius, in order to help establish a more appropriate classification. Data collection was performed by DNA analysis, using mitochondrial markers - cytochrome b and cytochrome oxidase I, in addition to morphological parameters, as, median process of pygophore, the anterolat... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La enfermedad de Chagas se encuentra presente en el continente americano desde hace más de 9.000 años. En Chile la zona endémica se extiende desde la Región de Arica y Parinacota hasta la Región de O’Higgins. Cualquier mamífero es susceptible a la infección, siendo los perros uno de los principales reservorios domésticos de la enfermedad. El objetivo de este estudio fue caracterizar la tasa de infección por Trypanosoma cruzi en caninos domésticos de 8 localidades rurales de la Región de Coquimbo. Para ello se obtuvieron 380 muestras sanguíneas de perros durante los primeros meses del año 2015, a las cuales se les realizó la extracción del ADN mediante un kit comercial y analizadas mediante ensayos de PCR tiempo real. Se detectaron 162 muestras positivas a T. cruzi, representando una tasa de infección del 42,6%. Peralillo y Gualliguaica demostraron presentar una mayor cantidad de perros infectados en comparación con las demás localidades. No se encontraron diferencias significativas según edad, sexo, condición corporal ni cantidad de caninos presentes en las viviendas con el estatus de infección en los perros. Es evidente que el ciclo de transmisión peridoméstico persiste, representando un riesgo de infección hacia los pobladores. / The Chagas disease has been present in the Americas for more than 9,000 years. In Chile, the endemic zone extends from Arica and Parinacota Region to O'Higgins Region. Any mammal is susceptible to infection, and dogs are one of the main domestic reservoirs of this disease. The objective of this study was to characterize the rate of infection by Trypanosoma cruzi in domestic canines from 8 rural localities in the Coquimbo Region. For this purpose, 380 blood samples of dogs were obtained during the first months of 2015, and the DNA were extracted with a commercial kit and analyzed by real-time PCR assays. A total of 162 T. cruzi positive samples were detected, representing an infection rate of 42.6%. Peralillo and Gualliguaica showed a higher number of infected dogs compared to the other localities. No significant differences were found between age, sex, body condition or number of canines present in the houses with the infection status in dogs. It is evident that the peridomestic transmission cycle persists, representing a risk of infection to these habitants. / Fondecyt Nro. 1140650

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La Enfermedad de Chagas es transmitida por Trypanosoma cruzi, protozoo hemoflagelado que posee un organelo denominado kinetoplasto, compuesto por kDNA, organizado en maxi y minicírculos. T. cruzi se divide en seis linajes evolutivos, conocidos como unidades discretas de tipificación (DTU’s), denominadas TcI-TcVI. Este protozoo es transmitido por insectos vectores de la subfamilia Triatominae. En Chile, encontramos cuatro especies distintas de triatominos: Triatoma infestans, responsable del ciclo doméstico, Mepraia spinolai y Mepraia gajardoi, responsables del ciclo silvestre y la recientemente descrita, Mepraia parapatrica. La situación de T. infestans ha sido controlada en zonas urbanas, lo que no ocurre con las especies del ciclo silvestre, las cuales se han hallado en el peridomicilio. Con el objetivo de detectar la presencia de T. cruzi mediante PCR, determinar los linajes circulantes en la especie utilizando Southern blot y establecer si realimentaciones continuas producen variación en el estado de infección de los insectos, se recolectaron 36 especímenes correspondientes a M. gajardoi, en la localidad de Caleta Vitor (Región de Arica y Parinacota). Para ello, se les mantuvo en un incubador que les proporcionó las condiciones óptimas de crecimiento y se les sometió a un régimen alimentario correspondiente a cinco alimentaciones con Mus musculus libres de T. cruzi, distanciadas entre ellas por 40 días. Inicialmente, 27 triatominos resultaron positivos (75%), detectando en ellos los linajes TcI, TcII, TcV y TcVI, presentándose tanto infecciones simples como mixtas. Luego de una segunda alimentación, este porcentaje se mantuvo, para continuar con tendencia a la baja en la tercera, cuarta y quinta alimentación, con un 70%, 42% y 59%, respectivamente. Estos cambios no son explicados por realimentaciones continuas, sugiriendo que otras situaciones, como por ejemplo, una baja en la carga parasitaria, pudiesen afectar la tasa de infección a lo largo del tiempo. Los cuatro linajes inicialmente detectados se mantienen hasta la cuarta alimentación, en donde sólo se detecta TcII, para luego detectar sólo una infección mixta en la quinta alimentación, TcI-TcVI, indicando que los linajes de T. cruzi en M. gajardoi se presentan de forma variable en el tiempo / Chagas disease is transmitted by Trypanosoma cruzi, a protozoan hemoflagellate that has an organelle named kinetoplast, composed of kDNA, organized in maxi and minicircles. T. cruzi can be divided into six evolutionary lineages, known as discrete typing units (DTU's), termed TcI-TcVI. This protozoan is transmitted through insect vectors of the subfamily Triatominae. In Chile, we found four different species of triatomines: Triatoma infestans, responsible for the domestic cycle, Mepraia spinolai and Mepraia gajardoi, responsible for the wild cycle and the recently described Mepraia parapatrica. The situation of T. infestans has been controlled in urban areas, but not the wild-cycle species, which have been found in the peridomicile. To detect the presence of T. cruzi by PCR, to determine the circulating lineages in the species using Southern blot and establish if continuous feedings produced variation in the infection state of the insects, thirty-six specimens corresponding to M. gajardoi were collected in Caleta Vitor, Arica and Parinacota Region. For this, they were kept in an incubator that provided the optimal conditions of growth. They were fed with five feeds of non-infected Mus musculus, distanced between them for 40 days. Initially, 27 triatomines were positive (75%), detecting TcI, TcII, TcV and TcVI lineages, presenting both simple and mixed infections. After a second feed, this percentage was maintained, to continue downward trend in the third, fourth and fifth feed, with 70%, 42% and 59%, respectively. Although these changes are not explained to continuous feedings, suggesting that other situations, such as a drop in parasite load, could affect the rate of infection over time. The four lineages initially detected were maintained until the fourth feeding, where only TcII was detected and then only a mixed infection, TcI-TcVI, was detected in the fifth feed, indicating that the T. cruzi lineages in M. gajardoi present variable changes over time / Financiamiento: Proyecto Fondef 1120122

La existencia de una interacción o no a distintos niveles de una infección concomitante entre el Trypanosoma cruzi y del Plasmodium sp en un mismo hospedero humano, no fue aeún bien definida. Krettli et al. (1977) citado por Cox F. (2001) en un estudio experimental efectuado en ratones, observó la exacerbación de la parasitemia para T. cruzi durante una infección palúdica simultánea. En otro estudio realizado en la ciudad de Bermejo en Bolivia durante la gestión 2003, se presentaron resultados preliminares que indicaron una tasa de prevalencia de enfermedad de Chagas congénita en niños nacidos de madres con infección palúdica periférica al momento del parto, superior a la presentada en neonatos de madres que no cursaron infección palúdica durante su gestación. Esta diferencia no alcanzó la significación estadística suficiente. Por lo tanto la malaria de la madre durante el embarazo puede influir sobre la enfermedad de Chagas en el binomio madre-niño. Este estudio se realizó en la ciudad de Yacuiba al sur de Bolivia. Este fue un estudio observacional, tipo cohorte, prospectivo; en el cual la unidad de observación fue el binomio madre-niño durante el periodo gestacional y luego del parto el recién nacido hasta el primer mes de vida. Las variables de exposición fueron: malaria en la gestante y seropositividad para la enfermedad de Chagas en la madre, y las variables resultado: la presencia de parasitemia detectable para T. cruzi en sangre periférica en la madre y la enfermedad de Chagas congénita. El periodo de estudio abarcó 18 meses, en los cuales 357 gestantes ingresaron al estudio. Como resultados se estableció en la mujer embarazada que la prevalencia de infecciones palúdicas durante la gestación fue de 11.5% (41/357), 9% en los controles prenatales; la tasa de seroprevalencia para la enfermedad de Chagas fue de 41.5% (148/357) y la tasa de parasitemia detectable en sangre periférica para T. cruzi de 12% (43/357). En el neonato se observó una incidencia de la enfermedad de Chagas congénito del 2% (7/359) y una tasa de transmisión congénita del 4.7% (7/148). Las coinfecciones dadas por P. vivax y T. cruzi en las madres fueron del 7.6% y del 2.8% (la primera seropositividad para la enfermedad de Chagas e infección palúdica y la segunda parasitemia detectable para T. cruzi en sangre periférica e infección palúdica durante la gestación respectivamente). Los predictores más potentes para la presencia de parasitemia para 7'. cruzi en sangre periférica en las gestantes seroreactivas para la enfermedad de Chagas fueron: habitar una vivienda precaria y la presencia de infecciones palúdicas en el segundo trimestre de gestación y ser primigesta. Concluyéndose que existe un riesgo aumentado de presentar parasitemia para T. cruzi en la madre y el niño debido a la malaria durante el embarazo

Thesis (M.S.)--University of Texas at El Paso, 2007. / Title from title screen. Vita. CD-ROM. Includes bibliographical references. Also available online.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol inst., 2003. / Härtill 5 uppsatser.