Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / La tripanosomiasis americana (o enfermedad de Chagas) es una enfermedad parasitaria endémica en Latinoamérica. Cerca de 8 millones de personas estarían infectadas con el agente etiológico, Trypanosoma cruzi. En el presente trabajo experimental, se evaluaron dos grupos de ratones hembra, de las cepas A.Sw y CF1, infectados experimentalmente con el clon Dm28c de T. cruzi. Los resultados obtenidos demostraron que los ratones de la cepa A.Sw se comportaron como más resistentes que los de la cepa CF1, con mortalidades de 20% y 100%, respectivamente. Sin embargo, los animales A.Sw alcanzaron un mayor nivel de parasitemia. Al aplicar la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en varios tejidos, se observó que todos fueron positivos a la presencia de T. cruzi. Todas las muestras de tejido de los animales CF1 se mantuvieron positivas, mientras que algunas muestras de los ratones de la cepa A.Sw fueron negativas. El único tejido que permaneció positivo durante todo el estudio fue el cardiaco. Los resultados obtenidos implicarían que aplicación de la técnica de PCR en tejidos permite evidenciar la persistencia del parásito en animales supervivientes aún cuando la parasitemia es negativa

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / El protozoario Trypanosoma cruzi (T. cruzi) es el agente causal de la enfermedad de Chagas, una zoonosis parasitaria transmitida por insectos triatominos. En Chile, los vectores triatominos Triatoma infestans y Mepraia spinolai se encuentran, respectivamente, asociados a los ciclos doméstico y silvestre de transmisión de la enfermedad. Actualmente existen reportes de la presencia de T. cruzi en Mepraia gajardoi, sugiriendo que esta especie de triatomino participaría en el ciclo de transmisión silvestre. Las poblaciones naturales de T. cruzi estarían compuestas de múltiples clones distribuidos en seis unidades discretas de tipificación (DTUs) o linajes. Se ha reportado que, a diferencia de lo que ocurre en hospederos vertebrados, adaptaciones genéticas en hospederos invertebrados favorecerían en ellos la multiclonalidad de T. cruzi. El objetivo de este trabajo fue identificar los clones de T. cruzi presentes en muestras de contenido intestinal de T. infestans provenientes de Atacama (III), Valparaíso (V) y Región Metropolitana (RM) y determinar si algunos de estos clones corresponden a los detectados previamente en pacientes chagásicos crónicos. Con este fin se aplicó el método de análisis de marcadores microsatélites a muestras de T. cruzi provenientes de 109 triatominos y los resultados se compararon con información ya publicada de 80 muestras de T. cruzi provenientes de sangre y xenodiagnóstico de pacientes chagásicos crónicos de Chile. Las frecuencias alélicas obtenidas permitieron detectar diferencias genéticas significativas. Luego, a partir de un análisis filogenético se constituyeron tres nodos de parentesco: (a) clones provenientes de sangre y xenodiagnóstico de pacientes, (b) clones provenientes de triatominos de las regiones III, V y RM, y (c) clones descritos en literatura; los clones de cada nodo se habrían originado a partir de un ancestro común. En cuanto a frecuencia y distribución de linajes de T. cruzi, la mayor cantidad de muestras, provenientes tanto de triatominos de las tres regiones (59,4%) como de sangre y xenodiagnóstico de pacientes (82% y 84,3%, respectivamente), pertenecían al linaje TcI. El linaje H (híbrido) se detectó en muy escaso porcentaje de muestras de sangre y no se detectó en xenodiagnóstico de pacientes. Respecto de la clonalidad, las muestras de T. cruzi procedentes de triatominos resultaron ser principalmente multiclonales, en cambio aquellas tanto de sangre como de xenodiagnóstico de pacientes chagásicos correspondían principalmente a muestras uniclonales. De acuerdo a los resultados obtenidos, se pudo concluir que las poblaciones de T. cruzi detectadas en los triatominos estudiados eran genéticamente diferentes a las detectadas previamente en pacientes chagásicos crónicos / FONDECYT N° 1070837

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La enfermedad de Chagas constituye uno de los principales problemas de Salud Pública en países como Brasil, Bolivia y Chile. Esta parasitosis es producida por el protozoo flagelado Trypanosoma cruzi y se caracteriza por presentar una fase aguda, generalmente sintomática y una crónica asintomática que puede ser de larga evolución. El diagnóstico en esta última fase se basa fundamentalmente en la detección de anticuerpos anti-T. cruzi mediante técnicas serológicas, debido a que las parasitemias pueden ser bajas y fluctuantes. Si bien las reacciones de PCR Tiempo Final y PCR Tiempo Real (qPCR) han permitido un importante avance en el diagnóstico parasitológico de T. cruzi, es posible combinarlas con técnicas parasitológicas convencionales como el xenodiagnóstico (XD). En este trabajo, se evaluó la eficacia del diagnóstico parasitológico de T. cruzi mediante tres técnicas convencionales/no convencionales. Xenodiagnóstico convencional fue aplicado a 50 pacientes con enfermedad de Chagas crónica procedentes de la IV Región de Coquimbo, Chile. Posterior al examen microscópico de las deyecciones de los triatominos a los 30, 60 y 90 días post alimentación sobre el paciente, las muestras fecales de los triatominos obtenidas en el XD fueron procesadas para realizar PCR Tiempo Final (PCR-XD) y PCR Tiempo Real (qPCR-XD) en los 3 períodos de estudio. A los 30 días, la positividad fue del 6%, 68% y 88% para XD, PCR-XD y qPCR-XD, respectivamente. A los 60 días, la positividad fue de 14%, 74% y 96% y, a los 90 días, del 24%, 76% y 98%. Mediante la pruebas de Cochran y Mc Nemar fue posible determinar que a los 30 días no existen diferencias significativas entre la positividad de PCR-XD y qPCR-XD (p-value=0.063). Por el contrario, a los 60 y 90 días, qPCR-XD presenta diferencias significativas con las técnicas de XD y PCR-XD (p-value=0.003). Se concluye que la técnica de qPCR-XD es más eficiente que XD y PCR-XD en el diagnóstico de T. cruzi, pues no sólo confirma la presencia del parásito, sino que permite cuantificar la carga presente en el vector biológico. No obstante, los resultados de la cuantificación parasitaria en las deyecciones de los triatominos no pueden ser extrapolados a la parasitemia circulante en el paciente, pues en la técnica de XD existen variables imposibles de controlar, como la capacidad individual de los triatominos para alimentarse sobre el paciente infectado / Financiamiento: Proyecto Fondecyt 1100768

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Trypanosoma cruzi, un protozoo hemoflagelado, es el agente causal de la enfermedad de Chagas, patología endémica de Latinoamérica que se ha extendido al resto del mundo. Este parásito presenta un ciclo de vida indirecto y se transmite principalmente mediante insectos hematófagos triatominos a distintos hospederos mamíferos, incluyendo el ser humano. Dentro de los mecanismos no vectoriales de transmisión de la enfermedad, los más importantes son la transfusión sanguínea y la infección transplacentaria. La enfermedad cursa en tres fases progresivas: aguda, indeterminada y crónica, pudiendo causar discapacidad e incluso la muerte. Las drogas utilizadas como tratamiento de esta patología son poco eficaces en el tratamiento de la fase crónica, además de generar numerosos efectos colaterales indeseados, siendo necesario desarrollar nuevas drogas más eficientes en la eliminación del parásito y más inocuas para el paciente. Para que se establezca una infección crónica, T. cruzi debe resistir el daño oxidativo al DNA generado por las células del hospedero. La sobrevida de los parásitos se relacionaría con la capacidad de reparación del DNA, donde en el caso de mamíferos la fosforilación de la histona H2AX en el residuo Ser139 sería fundamental. En tripanosomátidos no se han identificado genes ortólogos para H2AX, pero en T. brucei se detectó que la histona H2A canónica es fosforilada en el residuo Thr130 como consecuencia de daño al DNA, residuo que se conserva en otros tripanosomátidos y que en el caso de T. cruzi corresponde a Thr131. La participación de este último en la respuesta al daño del DNA aún no se ha comprobado. Se realizaron tres mutaciones sitio-dirigidas diferentes en la secuencia nucleotídica que codifica para el residuo Thr131 de H2A de T. cruzi, reemplazándolo por alanina (incapaz de ser fosforilada), ácido glutámico y ácido aspártico (que simulan una fosforilación permanente del sitio). Las secuencias nucleotídicas silvestres y mutantes fueron insertadas en el vector pTREX-HIS8-GFP y expresadas como proteínas de fusión con GFP en epimastigotes de T. cruzi. Se comprobó la expresión exitosa de las proteínas en T. cruzi mediante visualización directa por microscopía de fluorescencia, inmunofluorescencia y mediante ensayos de vi Western blot. Las histonas marcadas con GFP se localizan a nivel de núcleo, lo cual sugiere una asociación con la cromatina del parásito, debiendo confirmarse su incorporación efectiva al nucleosoma mediante estudios posteriores. Otra tarea a futuro consiste en determinar si efectivamente el residuo Thr131 de H2A de T. cruzi se fosforila como respuesta al daño del DNA. Los resultados permiten concluir que es posible generar líneas de epimastigotes de T. cruzi que expresen de manera estable la histona H2A tanto de fenotipo silvestre como de fenotipos mutantes para el residuo Thr131, utilizando el vector pTREX-HIS8-GFP. Los epimastigotes que expresan estas proteínas se encuentran disponibles para realizar ensayos de viabilidad comparativa frente a la exposición con agentes genotóxicos, lo que podría determinar un posible nuevo blanco terapéutico para la enfermedad de Chagas. / Proyectos Fondecyt 11100053 y 1130113

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Las especies reactivas de oxígeno (ROS) y nitrógeno (RNS) generadas por los hospederos mamíferos y vectores triatominos inducen daño oxidativo en el DNA de Trypanosoma cruzi, disminuyendo la viabilidad parasitaria. Para reparar este tipo de daño, este protozoario activa el mecanismo de reparación de escisión de bases del DNA (vía BER). En este proceso juegan un rol fundamental las endonucleasas apurínicas/apirimidínicas (AP). En esta Memoria de Título se determinó la viabilidad de epimastigotes de T. cruzi que sobreexpresan la AP endonucleasa TcAP1 frente a una exposición sostenida a estrés oxidativo, utilizando el sistema glucosa/glucosa oxidasa que origina H2O2. Usando un kit comercial se establecieron las concentraciones de glucosa y glucosa oxidasa necesarias para producir niveles sostenidos y conocidos de H2O2, simulando la exposición sostenida de T. cruzi a agentes oxidantes en ambos hospederos. Este sistema permitió establecer que los epimastigotes que sobreexpresan TcAP1 presentan una mayor viabilidad que parásitos controles, sometidos a estrés oxidativo sostenido. En conclusión, en esta memoria de título se determinó que la endonucleasa TcAP1 participa en la sobrevida de T. cruzi en condiciones que simulan la exposición fisiológica sostenida a agentes oxidantes en ambos hospederos. Estos resultados confirman la participación de la vía BER en la persistencia parasitaria en sus hospederos / Financiemiento: Proyecto Bicentenario Anillo ACT 112, Conicyt, Proyecto Fondecyt 1090124, y Proyecto Fondecyt 11100053

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La enfermedad de Chagas, zoonosis ampliamente difundida en América, es causada por el protozoo hemoflagelado Trypanosoma cruzi. En su transmisión participan animales vertebrados y artrópodos hematófagos pertenecientes a la subfamilia Triatominae. En Chile, el aumento de las interacciones humano-fauna silvestre han permitido que emerja como amenaza la transmisión al ser humano desde los triatominos silvestres Mepraia spinolai y Mepraia gajardoi. En este estudio se investigaron los niveles de infección por T. cruzi en vectores del género Mepraia de localidades silvestres cercanas a Arica, Iquique e Illapel, a través de amplificación del DNA del kinetoplasto, obteniendo un 51% de infección en 75 ejemplares de M. spinolai y un 18% en 244 de M. gajardoi. Luego se realizó la genotipificación de T. cruzi, definiendo el tipo de T. cruzi infectante (TcI, TcII, TcV, TcVI) con sondas de minicírculos que provienen de los T. cruzi indicados. Los genotipos detectados corresponden a los cuatro tipos de T. cruzi mencionados, existiendo algunas infecciones mixtas. Los resultados muestran que, los triatominos M. spinolai y M. gajardoi, presentan una diversidad de T. cruzi, con distintos porcentajes de infección, según donde habiten y sus fuentes de alimentación

título profesional de Biólogo con Mención en Medio Ambiente. / La vinchuca endémica, Mepraia spinolai, es el principal vector silvestre de la enfermedad de Chagas en Chile, cuyo agente causante es el parásito protozoo Trypanosoma cruzi. Mepriaia spinolai es un insecto hematófago que habita las zonas semiáridas-mediterráneas de Chile central, donde sus principales presas son vertebrados terrestres. En algunos sectores, las poblaciones de vinchucas presentan elevados niveles de infección con T. cruzi, aumentando el riesgo de transmisión de esta enfermedad a la población humana, sin embargo, tanto las abundancias poblacionales como los niveles de infección varían espacialmente. Con el objetivo de identificar los factores ecológicos que determinan el tamaño poblacional de M. spinolai y el nivel de infección con T. cruzi, se recolectaron datos de la cobertura vegetacional, abundancia de vertebrados terrestres (mamíferos, aves y reptiles), precipitación y temperatura de 18 poblaciones del vector, cubriendo un rango latitudinal de 506 km (29°S – 33°S). Posteriormente, se agruparon los estadios ninfales en tres categorías: 1) ninfas de estadio I, II y III; 2) ninfas IV, V y adultas y 3) población total, con los cuales se realizaron modelos lineales para ambas variables respuestas en función de las características bióticas y abióticas de cada localidad. Los resultados permitieron detectar la influencia de los factores para cada grupo. Para las abundancias poblacionales de M. spinolai se identificaron relaciones positivas con la cobertura vegetacional, la temperatura mínima y la abundancia de Oryctolagus cuniculus (conejo) y una relación negativa con la precipitación. En el caso de los niveles de infección con el protozoo, se obtuvieron relaciones positivas con la cobertura vegetacional, temperatura mínima, abundancia de reptiles y la precipitación, y relaciones negativas con la abundancia de mamíferos nativos (excluyendo las dos especies más 2 abundantes) y la abundancia de mamíferos introducidos (excluyendo conejo). Adicionalmente, se analizaron las relaciones entre las abundancias poblacionales de M. spinolai y los niveles de infección con T. cruzi entre los distintos grupos, encontrando asociaciones positivas y significativas entre los niveles de infección de estadios primarios (ninfas I, II y III) y la abundancia de los más cercanos al adulto (IV, V y adulto). Con estos resultados se enfatiza la importancia que puede tener la estructura comunitaria y las condiciones ambientales en la mantención del ciclo silvestre de transmisión de T. cruzi en Chile semiárido-mediterráneo. / The endemic kissing bug, Mepraia spinolai, is the main wild vector of Chagas disease in Chile, whose causative agent is the protozoan parasite Trypanosoma cruzi. Mepriaia spinolai is an hematophagous insect that inhabits the Semi-arid and Mediterranean zones of central Chile, where its main prey are terrestrial vertebrates. In some areas, populations of kissing bug exhibit high levels of infection with T. cruzi, increasing the risk of disease transmission to the human population; however, both population abundance and levels of infection vary spatially. In order to identify the ecological factors that determine M. spinolai population size and the level of infection with T. cruzi, we collected data on vegetation cover, abundance of terrestrial vertebrates (mammals, birds and reptiles), precipitation and temperature of 18 vector populations, covering a latitudinal range of 506 km (29°S - 33°S). Subsequently, nymphal stages were grouped into three categories: 1) nymphal stage I, II and III; 2) nymphal stage IV, V and adult and 3) the total population, to construct linear models for both response variables according to the biotic and abiotic characteristics of each locality. The results allowed to detect the influence of factors for each group. For M. spinolai population abundances, positive relationships were identified with vegetation cover, minimum temperature and abundance of Oryctolagus cuniculus (rabbit) and a negative relationship with precipitation. In the case of infection levels with the protozoan, positive relationships were obtained with vegetation cover, minimum temperature, abundance of reptiles and precipitation, and negative relationships with abundance of native mammals (excluding the two most abundant species) and abundance of introduced mammals (excluding rabbit). Additionally, the relationships between the population abundance of M. spinolai and levels of T. cruzi infection between the different groups were analyzed, finding 4 positive and significant associations between the levels of infection of primary stages (nymphs I, II and III) and the abundance of those closest to the adult (IV, V and adult). These results emphasize the importance of the community structure and environmental conditions in the maintenance of the wild transmission cycle of T. cruzi in Semi-arid and Mediterranean Chile.

Orientador: Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Grasiela Dias de CamposSeveri-Aguiar / Banca: Silvana Gisele Pegorin de Campos / Resumo: Os insetos da subfamília Triatominae, também conhecidos como barbeiros, possuem uma grande importância na parasitologia humana, pois são vetores do Trypanosoma cruzi, protozoário causador da doença de Chagas. Além da importância médicosanitária, esses insetos destacam-se na citogenética, por apresentarem características peculiares como cromossomos holocêntricos, e uma meiose incomum, na qual os autossomos segregam-se de maneira regular, enquanto que os cromossomos sexuais apresentam a primeira divisão equacional e a segunda reducional. Além disso, diversos estudos são realizados para identificar os efeitos do estresse fisiológico no organismo desses insetos. Entretanto, não há estudos avaliando a influência da contaminação de triatomíneos pelo Trypanosoma cruzi na reprodução desses indivíduos. Para isso foram analisadas as características citogenéticas durante a espermatogênese de três espécies de triatomíneos: Triatoma brasiliensis, Rhodnius neglectus e Panstrongylus megistus, que foram infectadas em laboratório, pelo T. cruzi. Posteriormente, foram confeccionadas lâminas com os testículos desses insetos e coradas por técnica citogenéticas convencionais e, também, realizada contagem celular para verificar quantitativamente as células presentes nos testículos. Foi possível observar um aumento no tamanho celular dos núcleos poliploides, células nutritivas presentes nos túbulos seminíferos, e de todas as células durante a espermatogênese, além de uma desorganização no material nuclear e nucleolar durante a divisão celular. Além disso, foi observado um decréscimo nas quantidades celulares de indivíduos contaminados, com aumento no número de núcleos poliploides e células em intérfase, e uma diminuição de células em divisão. Essas alterações podem ter ocorrido devido ao estresse fisiológico que a infecção por T.cruzi causou ao organismo desses... / Abstract: The insects of the Triatominae, also known as barbers, have a great importance in human parasitology, as are vectors of Trypanosoma cruzi protozoan that causes Chagas disease. In addition to medical and health importance, these insects stand out in cytogenetics, due to peculiar characteristics as holocentric chromosomes, and an unusual meiosis, in which the autosomes segregate regularly, while the sex chromosomes present the first equational division and the second reductive. In addition, several studies are conducted to identify the effects of physiological stress in the body of these insects. However, there are no studies evaluating the influence of contamination of insects Trypanosoma cruzi in the reproduction of these individuals. For this, we analyzed the cytogenetic characteristics during spermatogenesis three triatomine species: Triatoma brasiliensis, Rhodnius neglectus and Panstrongylus megistus, which were infected in the laboratory with T. cruzi. Later blades were made with the testicles of these insects and stained by conventional cytogenetic technique and performed cell counts to quantitatively determine these cells in the testes. It was possible to observe an increase in cell size of polyploid nuclei, nutritional cells present in the seminiferous tubules and all cells during spermatogenesis, plus a disruption in nuclear and nucleolar during cell division. Furthermore, there was a decrease in cell quantities given infected individuals, an increase in the number of polyploid cells and nuclei in interphase, and a decrease in cell division. These changes may be due to physiological stress that infection with T. cruzi caused to the body of these insects. In addition, cells in interphase and early chromosome condensation had higher heteropycnotic corpuscles in contaminated than in those who were free of protozoan that causes Chagas disease showing that the physiological stress organisms may be the main reason for this change in... / Mestre

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Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2018. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal (FAPDF). / A doença de Chagas afeta cerca de 8 milhões de pessoas ao redor do mundo e cerca de um terço dessas desenvolve as formas graves da doença, sendo o maior caso de cardiomiopatia causada na América Latina e também está entre o maior causador de mortes dentro das doenças tropicais negligenciadas. Mesmo sendo conhecida há 111 anos, os mecanismos que desenvolvem a patologia continuam um enigma, principalmente se tratando de estudos em humanos. Apesar disso, hoje é indiscutível o papel da resposta imune do hospedeiro frente ao agente etiológico, o Trypanosoma cruzi, no controle da infecção ou na sua disseminação, além dos mecanismos desencadeados na fase inicial da doença serem determinantes para o estabelecimento de uma fase crônica. Uma das primeiras células imunes a interagir com este patógeno são as céluls dendríticas (DCs), as quais são responsáveis por intermediar uma resposta imune não específica para uma específica e que possui uma função determinante dentro da patologia.. Este trabalho então visa uma análise da resposta inicial que é desencadeada em DCs frente ao T. cruzi a partir da validação de genes que foram vistos como diferencialmente expressos no trancriptoma realizado da interação inicial ente DCs e T. cruzi após 12h. Alguns desse genes modulados diferencialmente sob ação do patógeno foram o ligante da superfamília de fator necrose tumoral, membro 18 (TNFSF18), ligante 9 de quimiocina com motivo C-X-C (CXCL9) e peptidase específica de ubiquitina 18 (USP18), que possuíram sua expressão aumentada sob infecção. Essa superexpressão constatada por RNA-seq, foi confirmada neste estudo através de RT-qPCR após um processo de padronização e escolha de critérios rigorosos para garantir a qualidade da interpretação dos dados e poder comparar com veracidade os dados provenientes de duas metodologias distintas. Ficou comprovado então que a expressão gênica dessa interação patógeno-hospedeiro poderia ser atestada por RT-qPCR, viabilizando estudos posteriores de outros genes e também em uma população amostral maior, permitindo assim analisar a resposta inicial de forma mais abrangente. Isso tornará possível garimpar genes que tenham um papel fundamental na infecção e estuda-los com mais profundidade. Também é importante ressaltar que não necessariamente um aumento de expressão de transcrito reflete no nível proteico, como foi aferido neste trabalho ao mensurar algumas citocinas como IFN-γ, TNF, IL-6, IL-4, IL-10, IL-2 e IL-12, em que houve aumento de expressão de TNF sob infecção que condiz com seu nível de transcrito detectado, porém IL-10 que também foi supraregulado a nível transcricional, não possuía o mesmo comportamento a nível proteíco, tendo uma regulação importante e decisiva na expressão pelo hospedeiro. / Chagas disease affects around 8 million people worldwide and about one-third of them develops severe forms of the disease, being the largest case of cardiomyopathy caused in Latin America and also among the largest cause of death within neglected tropical diseases. Even though it has been known for 111 years, the mechanisms that develop pathology remain an enigma, especially when it comes to studies in humans. Despite this, the role of the host immune response to the etiologic agent, Trypanosoma cruzi, in the control of the infection or its dissemination is indisputable, besides the mechanisms triggered in the initial phase of the disease are determinant for the establishment of a chronic phase. One of the first immune cells to interact with this pathogen is the dendritic cells (DCs), which are responsible for being a mediator between a less specific immune response to a more specific and that has a determining function within the pathology. This work then aims an analysis of the initial response that is triggered in DCs against T. cruzi from a transcriptome performed from the initial interaction between DCs and T. cruzi after 12h. Some of these genes differentially modulated under the action of the pathogen were the tumor necrosis factor, member 18 (TNFSF18), CXC (CXCL9) motif chemokine ligand 9 and ubiquitin 18 specific peptidase (USP18), which had their expression considerably infection. This overexpression verified by RNA-seq was confirmed in this study through RT-qPCR after a process of standardization and selection of strict criteria to guarantee the quality of data interpretation and to be able to compare data from two different methodologies. It was then proved that the differential gene expression obtained in the transcriptome, a robust but more expensive and inaccessible technique, could be attested by RT-qPCR, allowing further studies of other genes and also in a larger sample population, thus allowing an analysis of the initial response in DCs by the T, I crossed more comprehensively in order to mine genes that have a fundamental role in the infection and study them in more depth. It is also important to note that not necessarily an increase in transcript expression reflects at the protein level, as measured in this work when measuring some cytokines such as IFN-γ, TNF, IL-6, IL-4, IL-10, IL-2 and IL-12, in which there was an increase in expression of TNF under infection that matches its detected level of transcript, but IL-10, which was also supraregulated at the transcriptional level, did not have the same behavior at the protein level, having an important and decisive regulation in expression by the host.