CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / As infecÃÃes respiratÃrias agudas (IRA) sÃo importantes causas de morbidade e mortalidade em todo o mundo, acometendo principalmente crianÃas menores de cinco anos de idade. Essas infecÃÃes podem ser causadas por diferentes microrganismos, porÃm os vÃrus sÃo os mais frequentes. Esse estudo teve como objetivo descrever aspectos clÃnicos e epidemiolÃgicos de IRA de etiologia viral em crianÃas de zero a 12 anos de idade atendidas em serviÃo de emergÃncia de um hospital terciÃrio da cidade de Fortaleza-CE, no perÃodo de janeiro de 2007 a dezembro de 2008. Para tanto foram coletadas 1318 amostras de secreÃÃo de nasofaringe das crianÃas. As amostras foram submetidas à tÃcnica de imunofluorescÃncia indireta para detecÃÃo dos seguintes vÃrus respiratÃrios: vÃrus sincicial respiratÃrio (VSR), metapneumovÃrus humano (MPVh), adenovÃrus, influenza A e B e parainfluenza 1, 2 e 3. Os resultados desse estudo mostraram que pelo menos um vÃrus respiratÃrio foi detectado em 383 (29,1%) amostras. O vÃrus mais prevalente foi o VSR (44,4%), tendo o mesmo apresentado um padrÃo de sazonalidade definido, com associaÃÃo a estaÃÃo chuvosa. A co-infecÃÃo ocorreu em 12 (3,1%) amostras e o VSR foi o mais frequentemente associado. A mÃdia de idade dos pacientes foi de 23 meses e nÃo houve associaÃÃo entre o gÃnero desses pacientes e a positividade dos exames, apesar da maioria das crianÃas serem do sexo masculino. Entre os diagnÃsticos clÃnicos de etiologia viral, houve predomÃnio de infecÃÃo da via aÃrea superior (IVAS) (51,2%), e em relaÃÃo ao diagnÃstico especÃfico das infecÃÃes da via aÃrea inferior (IVAI), destacou-se a pneumonia. Portanto, os resultados desse estudo ressaltam a importÃncia dos vÃrus como causadores de IRA em crianÃas na cidade de Fortaleza, com as maiores taxas ocorrendo entre os meses de marÃo a junho, diferenciando-se da regiÃo Sul do paÃs, onde as maiores taxas sÃo encontradas nos meses de julho a outubro. / Acute respiratory infections (ARI) are important causes of morbidity and mortality worldwide, affecting mainly children under five years old. These infections can be caused by different organisms, but viruses are the most frequent. This study aimed to describe clinical and epidemiological aspects of viral ARI in children 0-12 years of age treated in the emergency department of a tertiary hospital in the city of Fortaleza, from January 2007 to December 2008. Therefore, we collected 1318 samples of nasopharyngeal secretions of children. The samples were subjected to indirect immunofluorescence for detection of the following respiratory viruses: respiratory syncytial virus (RSV), human metapneumovirus (hMPV), adenovirus, influenza A and B and parainfluenza 1, 2 and 3. The results of this study showed that at least one respiratory virus was detected in 383 (29.1%) samples. The most prevalent virus was RSV (44.4%), and presented the same seasonal pattern of a defined association with the rainy season. Co-infection occurred in 12 (3.1%) samples and RSV was the most frequently associated. The average age of patients was 23 months and there was no association between gender of these patients and positivity of the tests, although most children were male. Among the clinical diagnoses of viral etiology, there was predominance of upper respiratory infection diseases (URID) (51.2%), and in relation to the specific diagnosis of the lower respiratory infections diseases (LRID), stood out pneumonia. Therefore, the results of this study highlight the importance of viruses as causes of ARI in children in Fortaleza, with the highest rates occurring between the months March to June, differing from the southern region, where the highest rates are found in the months from July to October.

The textbook can be an important tool for the student body of the learning process. It can also allow the understanding of the events associated with the teaching of sexually transmitted diseases in the school context, and the relationships established between the different actors involved in this process. From this premise, this study aims to evaluate the theme of the infection caused by the human papilloma virus (HPV) in the three most widely distributed collections of High School Biology suggested by the National Textbook Program (PNLD) 2015, and to propose as a final product a digital teaching manual in the form of web site to aid the teacher in his work studies on this theme. The comments made about the works followed the criteria suggested by the 2015 PNLD and if information was consistent with those published by the World Health Organization and Ministry of Health in its publications. In the works analyzed, it was observed that comments about the STD infections and are more elaborate than those that deal or genital HPV infection by such a virus known as condyloma acuminata. Of the three collections studied here presented an information more completely, although this information cannot be considered satisfactory on HPV. The main result, it was found that there is a chance of access to information relating to sexually transmitted diseases and that young people can be lax or careless as methods of preventing such diseases among adolescents in high school stage. Thus, it was concluded that the veracity and relevance of information provided in these high school books today is not enough to allow students to know about the mechanisms of transmission and prevention of HPV and infections caused by this virus. As a palliative to get around this, it is proposed in this paper an online digital manual in the form of web site as a reliable source of information that complements existing or missing information about HPV in textbooks of high school biology, enabling broad access to this worthy topic. / O livro didÃtico pode ser uma importante ferramenta para o processo de aprendizagem do alunado. Ele pode tambÃm permitir a compreensÃo dos eventos associados ao ensino das doenÃas sexualmente transmissÃveis no contexto escolar, assim como as relaÃÃes que se estabelecem entre os diferentes atores envolvidos neste processo. Partindo dessa premissa, este estudo tem como objetivo avaliar a temÃtica sobre a infecÃÃo causada pelo papiloma vÃrus humano (HPV) nas trÃs coleÃÃes mais bem distribuÃdas de Biologia do Ensino MÃdio sugeridos pelo Programa Nacional do Livro DidÃtico (PNLD) de 2015, alÃm de propor como produto final um manual didÃtico digital na forma de web site para auxÃlio ao professor em seu trabalho de estudos sobre tal tema. As observaÃÃes feitas acerca das obras seguiu os critÃrios sugeridos pelo PNLD de 2015, bem como se havia informaÃÃes condizentes com aquelas divulgadas pelo OrganizaÃÃo Mundial de SaÃde e MinistÃrio da SaÃde em suas publicaÃÃes. Nas obras analisadas, observou-se que comentÃrios feitos acerca das DST e infecÃÃes sÃo bem mais elaborados do que aqueles que tratam sobre o HPV ou a infecÃÃo genital causada por tal vÃrus conhecida com condiloma acuminado. Das trÃs coleÃÃes aqui estudadas, apenas uma apresentou informaÃÃes de forma mais completa, embora estas informaÃÃes ainda nÃo possam ser consideradas satisfatÃrias sobre o HPV. Como principal resultado, verificou-se que hà uma hipÃtese sobre acesso Ãs informaÃÃes referentes Ãs DoenÃas Sexualmente TransmissÃveis e que os jovens podem ser relapsos ou displicentes quanto aos mÃtodos de prevenÃÃo contra tais doenÃas entre adolescentes em fase de ensino mÃdio. Com isso, concluiu-se que a veracidade e relevÃncia de informaÃÃes presentes nestes livros de ensino mÃdio na atualidade nÃo à suficiente para permitir aos alunos conhecerem sobre os mecanismos de transmissÃo e prevenÃÃo contra o HPV e as infecÃÃes causadas por este vÃrus. Como paliativo para contornar esta situaÃÃo, propÃe-se neste trabalho um manual digital online na forma de web site como fonte segura de informaÃÃes que complemente as informaÃÃes existentes ou ausentes sobre o HPV nos livros didÃticos de biologia do ensino mÃdio, permitindo o amplo acesso a este valoroso tema.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Objetivos: determinar a prevalÃncia de infecÃÃo genital por HPV em gestantes e comparar dados epidemiolÃgicos e de comportamento sexual e apresentaÃÃo clÃnica entre as gestantes HPV positivas e HPV negativas. Metodologia: trata-se de estudo de corte transversal (prevalÃncia) da presenÃa de infecÃÃo genital por HPV em 549 gestantes atendidas no Hospital Geral CÃsar Cals da Secretaria de SaÃde do Estado do CearÃ. Utilizouâse um questionÃrio aplicado diretamente Ãs gestantes, independente da idade gestacional e de estarem sintomÃticas ou nÃo, alÃm da coleta de esfregaÃo cÃrvico-vaginal para realizaÃÃo de teste de captura hÃbrida II, com material colhido em tubo com soluÃÃo conservadora utilizando o sistema de micro placa, conforme procedimento descrito pela DIGENEÂ. A leitura dos exames foi realizada pelo laboratÃrio Central do Cearà (LACEN). Foram excluÃdas as pacientes que haviam feito uso de antibiÃticos vaginais nos Ãltimos 15 dias ou relaÃÃes sexuais nos 2 dias anteriores à coleta cervical. Os dados foram analisados utilizando o software STATA 13.0, procedendo-se anÃlise descritiva e analÃtica atravÃs do teste de qui-quadrado e regressÃo logÃstica, subtraindo-se variÃveis. Resultados: A idade das pacientes variou de 12 a 47 anos (mÃdia de 25,89). A idade gestacional mÃdia foi de 20,34 semanas (variando de 6 a 39 semanas) com paridade variando de 0 a 7 partos. A amostra constituiu-se na maioria de mulheres de cor parda (59,38%), com uniÃo estÃvel (79,6%), com 1Â. grau completo (42,08%) e com renda familiar menor que 2 salÃrios mÃnimo por mÃs (54,1%). 245 mulheres apresentaram captura hÃbrida positiva para HPV (44,62%). 15 (2,73%) apresentaram positividade para HPV de baixo risco, 40 (7,29%) para HPV de alto risco e 190 (34,61%) para HPV de baixo e alto risco. Os grupos com presenÃa e ausÃncia de HPV mostraram-se estatisticamente diferentes quanto à raÃa, uso de preservativos com parceiro eventual, presenÃa de eversÃo do colo uterino ao exame ginecolÃgico e histÃria de vesÃculas genitais. ApÃs a regressÃo logÃstica encontrou-se uma razÃo de chances (OR) para a presenÃa de HPV . ConclusÃes: A prevalÃncia de infecÃÃo genital por HPV entre gestantes em nosso meio foi de 44,62%. Os fatores de risco associados à infecÃÃo genital por HPV foram dor pÃlvica, eversÃo e hiperemia do colo, uso do preservativo com parceiro fixo e baixa renda familiar. / Objectives: to estimate the prevalence of HPV in pregnant women and to compare the positive group and the negative one in respect of epidemiologic data, sexual behavior and clinical presentation. Methodology: It is a cross-sectional study, among 549 pregnant women followed at Hospital Geral CÃsar Cals from the Health Secretary of the State of CearÃ, from August, 2003 to May, 2004. A structured questionnaire was applied, no matter the age of pregnancy, whether they were or not symptomatic, excluding those who had used antibiotics or any other substance into the vagina, during the previous fifteen days or who had kept sexual relationship until two days before the consultation, with a endocervical swab being performed, in order to have a hybrid capture test for the presence of HPV, as indicated by the manufacturer. Data were analyzed by STATA 13.0, performed by means of the qui-square and logistic regression tests with descriptive and analytic presentation. Results: Age of patients varied from 12 to 47 years old (medium of 25.89). The medium age of pregnancy was 20.34 weeks, parity varying from 0 to 7 births. The sample consisted in the majority of women of medium brown color (59.38%), with steady union (79.6%), with 1Â. complete degree (42.08%) and with lesser familiar income than 2 minimum wages per month (54.1%). 245 women had presented positive hybrid capture for HPV (44,62%. 15 (2.73%) had presented positive test for HPV of low risk, 40 (7.29%) for HPV of high risk and 190 (34.61%) for HPV of low and high risk. The groups with presence and absence of HPV were statistically different in terms of the race, use of condoms with eventual partner, presence of cervical ectopia in gynecological examination and history of genital vesicles. After the logistic regression, the odds-ratio for the presence of HPV was done. Conclusions: The prevalence of genital infection for HPV between pregnant women was 44,62%. The risk factors associated with infection by genital HPV were pelvic pain, eversion and hyperemia of the colo, condom use with partner fixed and low family income.

O vÃrus da hepatite C (VHC) e a esteatose sÃo importantes causas de doenÃa hepÃtica crÃnica no mundo. Apesar de comum, a fisiopatologia da esteatose, e seu papel na progressÃo da fibrose em pacientes com VHC, permanece desconhecida. O objetivo deste trabalho foi quantificar esteatose macrovesicular e microvesicular e correlacionÃ-las com dados clÃnicos e histopatolÃgicos. O estudo analisou biÃpsias hepÃticas de pacientes portadores do VHC sem tratamento prÃvio. A fibrose e atividade necroinflamatÃria foram avaliadas segundo os escores de METAVIR e Ishak; as classificaÃÃes de Kleiner e Brunt foram utilizadas como suporte para o diagnÃstico de esteatohepatite realizado pelo patologista. Ademais, o nÃmero de hepatÃcitos com esteatose macrovesicular e esteatose microvesicular foram quantificados a partir do nÃmero total de hepatÃcitos. A fibrose e atividade necroinflamatÃria foram classificadas e semi-quantificadas. Foi encontrada associaÃÃo significante da fibrose avaliada pelo sistema de Ishak entre a esteatose macrogoticular e microgoticular (p= 0,017 e p= 0,0113, respectivamente). A atividade inflamatÃria global (classificaÃÃo Metavir ) apresentou correlaÃÃo linear com a piora da fibrose (< 0,001). A fibrose avaliada pelo sistema de Metavir se correlacionou com o IMC. A presenÃa de VHC associado à esteatohepatite apresentou correlaÃÃo significante com as mÃdias das AST/ALT, e com a fibrose de Ishak e Metavir, quando comparado aos dados dos pacientes com VHC, sem esteatohepatite (p = 0,006; p = 0,012; p = 0,0098 e p = 0,014, respectivamente). Em nosso trabalho, concluÃmos que a fibrose de Ishak esteve associado a esteatose macrogoticular e microgoticular. Igualmente, se demonstrou que a presenÃa da esteatohepatite esteve fortemente associado a fibrose. / The hepatitis C virus (HCV) and steatosis are important causes of chronic hepatic disease in the world. Although common, the pathofisiology of steatosis and its role in the progression of fibrosis in patients with HCV is uncertain. Our objective was to quantify the macrovacuolar and microvesicular steatosis and to correlate them with clinical and histophatologic data. The study included needle biopsy of the liver of patients with HCV without previous treatment. The fibrosis and necroinflammatory activity of hepatic damage by HCV were evaluated by METAVIR and Ishakâs scores; Kleinerâs and Bruntâs classification were used as a support for diagnosis of the steatohepatitis by the pathologist. Furthermore, the number of hepatocytes with the macrovacuolar and microvesicular steatosis was quantified in a total number of hepatocytes. Fibrosis and necroinflammatory activity were categorized and semi quantified. A significant association of the fibrosis was found and it was evaluated by the Ishak system between the macrogoticular and the microgoticular steatosis (p=0,017 e p= 0,0113, respectively). The global inflammatory activity (Metavir classification) has presented a linear correlation with the worsening of the fibrosis (< 0,001). The fibrosis which was evaluated by the Metavir system has been correlated with the BMI. The presence of HCV associated with the steatohepatitis has presented a significant correlation with the average of AST/ALT and with the Ishak and Metavir fibrosis, when compared to the data of the patients with HCV, without steatohepatitis (p= 0,006; p= 0,012; p= 0,0098 and p= 0,014, respectively) In our research we conclude that the Ishak fibrosis has been associated with the macrogoticular and microgoticular steatosis. Equally, it was demonstrated that the presence of the steatohepatitis was strongly associated to the fibrosis.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The Epstein-Barr virus (EBV) has been related to the tumorigenesis of the gastric carcinomas, varying from 1.3-19.3% according to the studied population. Several studies have demonstrated strong evidences of its relation in this process, such as the monoclonality of the viral genome and its the presence in almost all tumor cells. However, most of the mechanisms used by the virus to control this process are still unknown. In this context, the present study aimed to investigate the frequency of the EBV and the association with the BCL-2, BAX and c-MYC proteins. Therefore, 100 cases of gastric carcinoma (67 males and 33 females), obtained from two hospitals in Fortaleza, were assessed to detect the EBV by PCR and in situ hybridization (aimed to the EBER1 transcript) using the standard method and GenPointÂ. Immunohistochemistry technique was done to evaluate the expression of the referred cellular proteins, by streptavidin-biotin-peroxidase method. The distribution by sex, age, tumor anatomic site and the histopathologic analysis, in general, reproduced the pattern of the world scientific bibliographies. Regarding virus detection by in situ hybridization, 8 (8%) cases were positive, 6 of these had shown diffuse pattern of staining, and 2 had demonstrated focal pattern. From 100 cases, only 2 presented infected lymphocytes. In general, the EBV demonstrated higher association with: males (87.5%[p=0.265]), tumors situated in the cardia (37.5% [p=0.549]), advanced stage (IIIB and IV), intestinal type (87.5%[p=0.136]), and moderately differentiated (75%).There were no EBV-positive cases which exhibited BCL-2 staining. Although the BAX and the c-MYC (nuclear) proteins have demonstrated significant positivity index and scores averages in the EBV-positive group, these were lower than the values of the EBV-negative group, notably the c-MYC nuclear protein (Mann-Withney test LI p=0.039 and HS p=0.045). The cytoplasmic staining of the c-MYC protein revealed slightly higher staining values in the EBV-positive group. The balance between the BCL-2 and BAX proteins demonstrated that the majority of the evaluated cases had exhibited apoptosis-orientation, however 62.3% of the EBV-positive cases exhibited equilibrium between these proteins. Twenty-nine cases (28 negative and 1 positive) were submitted to the biotinyl tyramide system (in situ hybridization method - GenPointÂ), demonstrating the same results obtained by the standard technique. From the 61 cases assessed by PCR, 35 (57.4%) were positive, being verified a low concordance index (kappa = -0.026 [Â0.069]) with the standard in situ hybridization technique. The 30bp deletion of LMP1 gene was investigated in 24 out of 35 positive cases, being verified in 37.5% of these. The results obtained in the present study, concerning the EBV frequency and the correlation with clinic-histopathologic data, reproduced findings of researches done in several world regions. The correlation with the proteins suggests that in vivo the virus is not related to the overexpression of BCL-2 and c-MYC (nuclear) that could act in synergism to promote the tumor development. The suppression of the BAX expression might represent a viral mechanism for apoptosis inhibition. The results of the cytoplasmic c-MYC point to a possible involvement of the EBV with transport mechanisms of the nuclear membrane, resulting in its accumulation in the cytoplasm. The low frequency of infected lymphocytes indicates that they are not the main responsible of the high number of positivity in the PCR technique. It could be, at least in part, due to the infected normal and/or pre-neoplastic epithelium, suggesting a new latency pattern which not express the EBER1. / O vÃrus Epstein-Barr (EBV) tem sido associado com a tumorigÃnese dos adenocarcinomas gÃstricos, variando entre 1,3-19,3% de acordo com a populaÃÃo estudada. Diversos estudos tÃm demonstrado importantes evidÃncias do envolvimento do EBV nesse processo, tais como a monoclonalidade do genoma viral e a presenÃa do vÃrus em quase todas as cÃlulas tumorais do sitio primÃrio e em cÃlulas metastÃticas. No entanto, os mecanismos utilizados pelo vÃrus para orquestrar a transformaÃÃo tumoral, ainda nÃo foram totalmente elucidados. Neste contexto, o presente estudo objetivou investigar a freqÃÃncia do EBV e a associaÃÃo com as proteÃnas BCL-2, BAX e c-MYC. Para tanto, 100 casos de adenocarcinomas gÃstricos (67 homens e 33 mulheres), obtidos de dois hospitais de Fortaleza, foram analisados quanto à presenÃa do EBV, detectado atravÃs das tÃcnicas de PCR e de hibridaÃÃo in situ (direcionada ao transcrito viral EBER1) pelo mÃtodo usual e GenPointÂ. Procedeu-se tambÃm, estudo imuno-histoquÃmico das referidas proteÃnas celulares, atravÃs do mÃtodo da estreptoavidina-biotina-peroxidase. A distribuiÃÃo por sexo, idade, sÃtio anatÃmico do tumor e as anÃlises histopatolÃgicas, de modo geral, reproduziram as tendÃncias da literatura mundial. Pela tÃcnica de hibridaÃÃo in situ, 8 (8%) casos foram positivos, 6 destes apresentaram marcaÃÃo difusa e 2 apresentaram marcaÃÃo focal. Apenas 2 apresentaram linfÃcitos infectados. De modo geral, o EBV apresentou maior associaÃÃo com o sexo masculino (87,5% [p=0,265]), com tumores situados na cÃrdia (37,5% [p=0,549]), de estadiamento avanÃado (IIIB e IV), do tipo intestinal (87,5% [p=0,136]) e moderadamente diferenciados (75%). Nenhum dos casos EBV-positivos exibiram marcaÃÃo para BCL-2. Embora as proteÃnas BAX e c-MYC (nuclear) apresentaram Ãndices de positividade e mÃdias de escores significativos no grupo EBV-positivo, estes foram inferiores aos valores do grupo EBV-negativo, sobretudo a proteÃna c-MYC nuclear (Teste de Mann-Withney LI p=0,039 e HS p=0,045). A marcaÃÃo citoplasmÃtica da proteÃna c-MYC revelou valores de marcaÃÃo discretamente superiores no grupo EBV-positivo. O balanÃo entre as proteÃnas BCL-2 e BAX demonstrou que a maioria dos casos estudados apresentavam tendÃncia à apoptose, mas 62,5% dos casos EBV-positivos exibiram um equilÃbrio. Vinte e nove casos (28 negativos e 1 positivo) foram submetidos a outro mÃtodo de hibridaÃÃo in situ que emprega o sistema da biotinil-tiramida (GenPointÂ),demonstrando resultados idÃnticos aos obtidos pela tÃcnica convencional. De 61 casos analisados atravÃs da tÃcnica de PCR, 35 (57,4%) foram positivos, sendo constatado um baixÃssimo Ãndice de concordÃncia (kappa = -0,026 [Â0,069]) com a tÃcnica de hibridaÃÃo in situ. Em 24/35 casos positivos, a deleÃÃo de 30pb do gene LMP1 foi investigada, sendo constatada em 37,5% destes. Os resultados obtidos no presente estudo quanto à freqÃÃncia do EBV e a correlaÃÃo com critÃrios clÃnico-histopatolÃgicos, reproduziram os achados de estudos realizados em diversas partes do mundo. A correlaÃÃo com as proteÃnas sugere que in vivo, o vÃrus nÃo esteja relacionado com a expressÃo de BCL-2 e de c-MYC (nuclear), que poderiam atuar em sinergismo favorecendo o desenvolvimento tumoral. A supressÃo da expressÃo de BAX, pode representar um mecanismo viral para inibiÃÃo da apoptose. Os resultados da c-MYC citoplasmÃtica apontam para um possÃvel envolvimento do EBV com mecanismos de transporte da membrana nuclear, determinando o acÃmulo da proteÃna no citoplasma. A baixa freqÃÃncia de linfÃcitos infectados indica que os mesmos nÃo sÃo os principais responsÃveis pela elevada positividade da tÃcnica de PCR, devendo ser ao menos em parte, decorrente de epitÃlio normal e/ou prÃ-neoplÃsico infectado sugerindo um padrÃo de latÃncia que nÃo expresse EBER1.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O vÃrus da hepatite C à considerado como o principal agente causador de hepatite nÃo-A, nÃo-B e, desde sua descoberta em 1989, tem sido reconhecido como a principal causa de doenÃa crÃnica do fÃgado em todo o mundo. O VHC possui um genoma de RNA de sentido positivo e à classificado como um flavivÃrus. O vÃrus apresenta considerÃvel variabilidade em sua seqÃÃncia e as variantes do VHC podem ser divididas em seis genÃtipos principais (numerados de 1 a 6) e diversos subtipos. A distribuiÃÃo dos genÃtipos varia tanto geograficamente, quanto entre os grupos de risco. Este estudo teve como objetivo analisar a distribuiÃÃo dos genÃtipos do VHC entre pacientes atendidos em um hospital de referÃncia em Fortaleza, CearÃ. Cento e vinte pacientes com sorologia positiva para anti-VHC ou histÃria clÃnica sugestiva de infecÃÃo pelo vÃrus foram estudados. O RNA viral foi extraÃdo a partir do soro dos pacientes e a detecÃÃo molecular do vÃrus foi feita por PCR, utilizando iniciadores especÃficos para a regiÃo 5 (linha) nÃo-codificadora do genoma viral. A genotipagem foi baseada em tÃcnica de RFLP utilizando as enzimas de restriÃÃo HaeIII, RsaI, MvaI e HinfI. Noventa e seis pacientes (80%) foram positivos no teste qualitativo para VHC. A mÃdia de idade desses pacientes foi de 44 anos. HistÃria clÃnica de cirurgia foi o fator de risco mais presente, seguido por transfusÃo sangÃÃnea, DST, uso de drogas, tatuagem, diÃlise e exposiÃÃo ocupacional. A relaÃÃo entre o resultado do teste qualitativo e o uso de drogas apresentou significÃncia estatÃstica, com 96% dos usuÃrios de drogas positivos para VHC. NÃo houve diferenÃa significativa no resultado do teste qualitativo quando transfusÃes sangÃÃneas feitas antes ou depois de 1993 foram analisadas. ManifestaÃÃes clÃnicas ou Ãndices de ALT alterados tambÃm nÃo foram preditivos de positividade para VHC. O genÃtipo 1 foi o mais prevalente na populaÃÃo estudada (46,9%), seguido pelos genÃtipos 3 (34,4%) e 2 (8,3%). O genÃtipo 4 viral foi detectado em um paciente. Em nove amostras nÃo foi possÃvel a genotipagem do VHC. Esses casos foram denominados indeterminados. CaracterÃsticas epidemiolÃgicas como idade, sexo, fatores de risco, Ãndices de ALT e manifestaÃÃes clÃnicas foram relacionadas com os diversos genÃtipos virais. A distribuiÃÃo dos genÃtipos virais entre as categorias estudadas ocorreu de forma homogÃnea na maioria dos casos. Foi observada significÃncia estatÃstica apenas na relaÃÃo entre genÃtipo e exposiÃÃo ocupacional ao VHC, com predominÃncia do genÃtipo 1 neste grupo de risco. NÃo foram observadas co-infecÃÃes com mais de um genÃtipo viral. / Hepatitis C virus is considered as the main causative agent of non-A non-B hepatitis and has been recognised as the major cause of chronic liver disease worldwide, since its discovery in 1989. It has a positive-sense RNA and belongs to the flavivirus family. The HCV shows considerable sequence variability and its variants can be divided into six main genotypes (numbered from 1 to 6) and several subtypes. The genotypes distribution varies from the geographic area and among risk groups. This study had the main aim to study HCV genotypes distribution in patients from a reference hospital in Fortaleza, Ceara. It was investigated a hundred and twenty patients with anti-HCV positive or clinical history suggesting virus infection. Viral RNA was extracted from patients serum and the virus molecular detection was made by PCR, using specific primers to the 5â non-coding region of viral genome. Genotyping was based in a RFLP technique, using the restriction enzymes HaeIII, RsaI, MvaI and HinfI. Ninety six patients (80%) were positive in the qualitative test for HCV. The mean age of these patients was 44 years old. Surgery clinical history was the most frequent risk factor, followed by blood transfusion, sexual transmitted disease, drugs use, tattoos, dialysis, and occupacional exposure. The relation between qualitative test result and drug users showed statistical significance, with 96% of drugs users being positive for HCV. There was no significant difference in qualitative test result when we analysed blood transfusions done after or before the year 1993. Clinical symptoms and ALT levels also were not predictive of HCV positive result. Genotype 1 was the most prevalent in the studied population (46,9%), followed by genotype 3 (34,4%) and 2 (8,3%). There was also a molecular characterization of one patient with genotype 4 whereas nine samples were not HCV genotyped and were called as undetermined. The epidemiological characteristics such as age, gender, risk factors, ALT levels and clinical manifestations were related with viral genotypes. The HCV genotypes had a homogeneous distribution, in the majority of cases, among the different categories. A statistical significance was observed only when genotype 1 was related to HCV occupational exposure. Co-infections with more than one viral genotype were not observed.

As doenÃas sÃo consideradas como o principal fator biolÃgico capaz de limitar e desestimular a carcinicultura no mundo. As viroses sÃo, invariavelmente, as que causam maior impacto e, por conseguinte, maiores prejuÃzos econÃmicos registrados no setor. O vÃrus da InfecÃÃo Hipodermal e Necrose HematopoiÃtica â IHHNV acomete os camarÃes silvestres e cultivados nas fases jovens e sub-adulta, mas nÃo causa danos à saÃde humana. Para a espÃcie Litopenaeus vannamei à considerado de baixo impacto, levando a uma enfermidade crÃnica denominada âsÃndrome da deformidade e do nanismoâ (RDS), que compromete a qualidade do produto com implicaÃÃes econÃmicas para a indÃstria camaroneira. O presente estudo teve por objetivo realizar testes de desafio com a espÃcie nativa do camarÃo Farfantepenaeus subtilis para verificar o comportamento da mesma frente ao vÃrus da IHHN. Foram utilizados 200 camarÃes jovens saudÃveis com peso corporal de 2,56  0,44g (mÃdia  desvio padrÃo; n = 200) mantidos em tanques individuais de 5,5L, em condiÃÃes monitoradas que reproduziram os parÃmetros ambientais de cultivo. Os animais foram desafiados de duas maneiras: um grupo por ingestÃo de tecido contaminado per os e outro por injeÃÃo intramuscular do extrato contendo o vÃrus, cada qual com seu grupo controle. Os grupos controles tiveram tratamentos semelhantes, porÃm um grupo ingeriu mÃsculo de camarÃo IHHNV negativo e outro recebeu extrato de mÃsculo de camarÃo livre de IHHNV. ApÃs trÃs dias de exposiÃÃo ao IHHNV, os animais foram alimentados com raÃÃo comercial duas vezes ao dia e observados quanto ao comportamento, mortalidade, muda e sintomas jà conhecidos em espÃcies susceptÃveis à doenÃa. O experimento teve duraÃÃo de 30 dias, quando foram colhidas aleatoriamente amostras de material biolÃgico para contagem total de hemÃcitos, anÃlise histolÃgica e molecular. O estudo demonstrou que a espÃcie nativa Farfantepenaeus subtilis capturada no EstuÃrio do Rio Pacoti no municÃpio de EusÃbio, Estado do Cearà à susceptÃvel à infecÃÃo pelo vÃrus da IHHN. / Diseases are the main biological factor that can limit and discourage the shrimp culture worldwide. Virus infection is the main cause of impact and economic losses registered in this sector. The Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus (IHHNV) occurs in both wild and cultured shrimp, mainly in the juvenile and sub-adult phases, although it does not cause harm to human health. This pathogen is considered a low impact virus to Litopenaeus vannamei, causing a chronic disease called "Runt Deformity Syndrome" (RDS), which compromises the product quality and can have economic implications to shrimp industry. This study aimed at verifying response of the native species Farfantepenaeus subtilis in presence of the IHHN virus. The experiment utilized 200 healthy young shrimp weighing 2.56  0.44g (mean  standard deviation), kept in single 5.5L tanks, under monitored conditions similar to those found in shrimp culture farms. The animals have been challenged in two ways: âper osâ and by intramuscular injection, each one with its control group. After three days of exposition to the virus, the animals were fed with a commercial food two times a day, when were observed behavior, mortality, moulting and the signs for the characteristic symptoms in species susceptible to this disease. The experiment was conducted during 30 days. The shrimp were sample randomly for total hemocytes counting, histological and molecular analyses. This study showed that the native species F. subtilis caught in Pacoti River Estuary (EusÃbio - Cearà - Brazil) is susceptible to IHHNV infection.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O vÃrus influenza à o Ãnico com a habilidade de causar epidemias anuais recorrentes em curto espaÃo de tempo, atingindo todas as faixas etÃrias, ocorrendo com maior gravidade em crianÃas e idosos. Este estudo teve como objetivo conhecer os aspectos demogrÃficos e o padrÃo de sazonalidade das infecÃÃes respiratÃrias agudas (IRAs) causadas pelo vÃrus influenza em crianÃas atendidas no Hospital Infantil Albert Sabin, na cidade de Fortaleza â CearÃ, no perÃodo de janeiro de 2001 a julho de 2004. Foram coletadas 1950 amostras de aspirado de nasofaringe de crianÃas com sintomas de infecÃÃo respiratÃria aguda. Todas as amostras foram analisadas por reaÃÃo de imunofluorescÃncia indireta. A reaÃÃo de em cadeia da polimerase com transcriÃÃo reversa foi utilizada em 47 amostras positivas por imunofluorescÃncia indireta dos anos de 2003 e 2004 para anÃlise da variantes virais (H1 e H3 ) e influenza B. Um total de 156 amostras foram positivas para os vÃrus influenza A ou B, representando uma prevalÃncia de 8%. Entre as infecÃÃes causadas por vÃrus, aquelas causadas pelos vÃrus influenza A e B representaram 24,1%. O vÃrus influenza apresentou um padrÃo de ocorrÃncia anual regular, com surtos epidÃmicos durante o primeiro semestre de cada ano, correlacionados aos perÃodos chuvosos. Os picos dos perÃodos epidÃmicos de influenza antecederam ou ocorreram concomitantemente Ãs campanhas nacionais de vacinaÃÃo. Os vÃrus influenza A e B co-circularam em todos os anos de estudo, havendo uma predominÃncia significativa do vÃrus influenza A (91%) em relaÃÃo ao vÃrus influenza B (9%). Em relaÃÃo ao setor de atendimento das crianÃas com infecÃÃes por vÃrus influenza observouse a maioria delas foi atendida em ambulatÃrios (48,7%) e emergÃncia (39,7%). Dezoito crianÃas infectadas pelo vÃrus influenza foram atendidas nas enfermarias (11,5%). Com relaÃÃo à idade das crianÃas com influenza observou-se que essas infecÃÃes predominaram em crianÃas atà dos dois anos de idade (55%). InfecÃÃes de vias aÃreas inferiores predominaram em crianÃas atà dois anos de idade. Cerca de 65,4% das infecÃÃes pelo vÃrus influenza foram diagnosticadas como infecÃÃes de vias aÃreas superiores. InfecÃÃes de vias aÃreas inferiores predominaram em crianÃas atà dois anos de idade (68,5%). Nos anos de 2003 e 2004 foram identificadas as variantes virais A/H3 e B do vÃrus influenza, com predominÃncia da primeira (78,7%) / The influenza virus is unique with it is ability to cause recurring annual epidemics in a short time interval, affecting all ages, with larger gravity in children and elderly people. The aim of this study is to describe demographic features and the pattern of the seasonality of acute respiratory infections caused by influenza virus in children attended at Albert Sabin Children Hospital, in Fortaleza â CearÃ, over the period of January period 2001 at July 2004. A total of 1950 samples of nasopharyngeal aspirates were collected from chidren with symptoms of acute respiratory infection. All samples were analyzed by indirect imunofluorescense assay (IFA). Forty seven Influenza A or B positive samples by IFA, in 2003 and 2004, were submitted to polimerase chain reaction with reverse transcription (RTPCR) for analysis of viral variant H1 and H3 and influenza b. A total of 156 samples were influenza A or influenza B positive, representing a prevalence rate of 8%. Among the viral infections, those caused by influenza viruses represented 24,1%. The influenza virus showed a pattern of regular annual occurrence, observed during the first semester of each year, correlated to the rainy periods. The peak of the epidemic periods of influenza preceded or occurred concomitantly to the national campaigns of vaccination. Influenza virus A and B cocirculated in all years of the study, with a significant predominance of the virus influenza A (91%) over influenza B (9%). Regarding to the medical care setting, the majority of the children with influenza infection were attended in ambulatories (48,7%) and emergency (39.7%). Eighteen children with influenza were attended in wards (11,5%). Regarding to the age of the children with influenza these infections predominated in children until two years of age. About 65,4% of the influenza infections were diagnosed as upper respiratory tract infections. Lower respiratory tract infection predominated in children until two years of age. In 2003 and 2004 were identified the variants A/H3 and B, with predominance of the first (78,7%)

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / Plant virus identification and characterization can be achived by several methods based in the biological, morphological, cytological, serological and molecular virus properties. The molecular properties have been used with frequency for vÃrus identification and characterization and the reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) has constituted an efficient and precise method for researches with RNA plant viruses. On the other hand, the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is the most used serological method for virus detection in plant tissues. A techncal innovation developed for plant virus identification represents a great technological development and support for plant virus research. A new approach involving virus particle immune precipitation to be used for RNA amplification by RT-PCR named IP-RT-PCR was sucessefuly used for amplification of RNA fragments from five virus species from the genera Comovirus, Cucumovirus, Potyvirus and Sobemovirus. Considering that the immune biological Companies have developed several DAS-ELISA kits, but neither of them produce and commercialize PTA-ELISA kits, a simple and practical PTA-ELISA kit was developed and validated for plant virus detection. The second part of the research had the objective to study, comparatively, the biological, serological and molecular properties of four plant virus isolates obtained from naturally infected Passiflora edulis (PWV-PET and PWV-GUA) and from naturally infected Vigna unguiculata (CABMV-BV and CABMV-FOR) with the objective to elucidate the identity of the causal agent of passion fruit woodiness in Brazil. In host range studies onle Canavalia ensiformes and Macroptilium lathyroides were infected by virus isolates obtained from cowpea and from passion fruit. The isolate PWV-GUA was purified from systemically infected M. lathyroides plants and the virus purified preparation (18.24 mg of virus.ml-1) was used for rabitt immunization for polyclonal antiserum production, which showed a title of 1:128,000 in PTA-ELISA. The electrophoresis analysis of the purified virus showed a unique capsidial protein with 34 kDA. Plant virus interaction studies in C. ensiformis indicated unilateral cross protection between PWV-GUA and CABMV-FOR. On the other hand, the isolate PWV-PET did not cross protect passion fruit plants against PWV-GUA. Filogenetic analysis of nucleotiode sequencies from cDNA fragments corresponding to coat protein (CP) genes amplified by IP-RT-PCR from the genomic virus isolates compared with virus sequencies from the Genbank grouped according to the host specifities. Based on the biological, serological and mainly molecular results, the virus isolates studied were classified into two biotypes: Biotype CABMC-C (Cowpea) to include isolates obtained from cowpea that do not infect passion fruit, and biotype CABMV-P (Passion fruit) to include the virus isolates responsible for the passion fruit woodiness in Brazil. / A identificaÃÃo e a caracterizaÃÃo de vÃrus de planta podem ser realizadas por vÃrios mÃtodos envolvendo propriedades morfolÃgicas, biolÃgicas, citolÃgicas, moleculares e sorolÃgicas. As tÃcnicas moleculares tÃm sido usadas com frequencia para identificaÃÃo e caracterizaÃÃo de vÃrus, e a tÃcnica de âreverse transcription polymerase chain reactionâ (RT-PCR) tem se constituÃdo em mÃtodo eficiente e preciso para pesquisas com vÃrus de planta com genoma de RNA. De outra parte, a tÃcnica de enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) constitui o mÃtodo sorolÃgico mais usado para detecÃÃo de vÃrus em tecidos vegetais. Uma inovaÃÃo tecnolÃgica desenvolvida nesta pesquisa para diagnose de vÃrus de planta representa grande avanÃo tecnolÃgico e suporte para pesquisa em virologia vegetal. A inovaÃÃo envolvendo a imunoprecipitaÃÃo (IP) de partÃculas de vÃrus para uso na RT-PCR denominada de IP-RT-PCR foi usada com sucesso para amplificaÃÃo de fragmentos de RNA de cinco espÃcies de vÃrus dos gÃneros Comovirus, Cucumovirus, Potyvirus e Sobemovirus. Considerando que kits de DAS-ELISA tÃm sido produzidos e comercializados por companhias de imunobiologicos, mas nenhuma companhia produz kits de PTA-ELISA, um kit simples e prÃtico de PTA-ELISA foi desenvolvido e validado para detecÃÃo de vÃrus de planta. A segunda etapa da pesquisa teve como objetivo estudar as propriedades biolÃgicas, sorolÃgicas e moleculares de isolados de vÃrus do gÃnero Potyvirus obtidos de maracujazeiro (Passiflora edulis) (PWV-PET e PWV-GUA) e isolados de Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV-FOR e CABMV-BV) obtidos de feijoeiro caupi (Vigna unguiculata), visando elucidar a identidade do agente causal do endurecimento dos frutos do maracujazeiro no Brasil. Em estudos de gama de plantas hospedeiras, somente Canavalia ensiformis e Macroptilium lathyroides foram infetadas por isolados obtidos de maracujazeiro e de feijoeiro caupi. O PWV-GUA foi purificado a partir de plantas de M. lathyroides sistemicamente infetadas e a preparaÃÃo viral purificada (18,24 mg de vÃrus.ml-1) foi usada para imunizaÃÃo de coelho com a produÃÃo de antissoro policlonal com tÃtulo de 1:128.000 em PTA-ELISA. AnÃlise eletroforÃtica da preparaÃÃo viral purificada revelou uma Ãnica proteÃna capisidial com peso molecular de 34 kDa. Experimentos de interaÃÃo entre os isolados virais em C. ensiformis indicaram proteÃÃo unilateral entre PWV-GUA e CABMV-FOR. De outra parte, o isolado PWV-PET nÃo protegeu plantas de maracujazeiro contra a super infecÃÃo de PWV-GUA. AnÃlises filogenÃticas das seqÃÃncias dos fragmentos de cDNA correspondentes Ãs capas protÃicas (CP), amplificados a partir dos genomas dos isolados virais de maracujazeiro e de feijoeiro caupi por IP-RT-PCR, agruparam-se com as seqÃÃncias de isolados virais de referidas culturas depositadas no GenBank, apresentando um agrupamento em funÃÃo da especificidade de hospedeiros. Com base nos resultados dos estudos biolÃgicos, sorolÃgicos e, sobretudo moleculares, os isolados virais estudados foram classificados em dois biÃtipos: BiÃtipo CABMV-C (Cowpea) incluindo os isolados obtidos de feijoeiro caupi e biÃtipo CABMV-P (Passion fruit) para incluir os isolados responsÃveis pelo endurecimento dos frutos do maracujazeiro no Brasil.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O vÃrus sincicial respiratÃrio (VSR) destaca-se como patÃgeno importante de infecÃÃes das vias aÃreas inferiores (IVAI) infantis, principalmente no primeiro ano de vida. Este estudo teve como objetivos: determinar a prevalÃncia do VSR em casos de infecÃÃes respiratÃrias agudas (IRAs) em crianÃas atendidas no Hospital Infantil Albert Sabin, em Fortaleza - CE, entre janeiro de 2001 e julho de 2004; descrever o padrÃo de sazonalidade de circulaÃÃo do VSR ao longo do perÃodo de estudo; observar caracterÃsticas clÃnico-epidemiolÃgicas dessas infecÃÃes; caracterizar antigenicamente os VSR circulantes nos perÃodos epidÃmicos de 2003 e 2004 e determinar a taxa de isolamento do VSR em cultura de cÃlulas HEp-2 a partir de amostras coletadas em 2002, 2003 e 2004 e estocadas a â20ÂC. Aspirados de nasofaringe foram coletados de crianÃas com atà sete dias de inÃcio dos sintomas de IRA e submetidos à reaÃÃo de imunofluorescÃncia indireta (IFI). Amostras coletadas em 2002, 2003 e 2004, armazenadas a â20ÂC, foram inoculadas em monocamadas de cÃlulas HEp-2. Nos 43 meses de estudo, o VSR foi identificado em 21,0% (409/1950) dos espÃcimes clÃnicos coletados. A circulaÃÃo do vÃrus foi inicialmente observada nos meses de janeiro ou fevereiro e os Ãltimos casos foram registrados em julho ou agosto de cada ano de estudo. O pico dessas infecÃÃes foi observado nos meses de marÃo a julho, sendo associado à estaÃÃo chuvosa da cidade. As infecÃÃes causadas pelo VSR foram mais freqÃentes em crianÃas de sexo masculino e naquelas com atà dois anos de idade. Bronquiolite e pneumonia foram as sÃndromes clÃnicas mais associadas ao vÃrus. DispnÃia, dor de garganta, coriza, espirros e cianose foram os sinais e sintomas clÃnicos associados significativamente nas IRAs causadas pelo VSR. Cerca de 9,5% (39/409) das crianÃas infectadas apresentaram problemas associados, como prematuridade, cardiopatia e doenÃas pulmonares congÃnitas. Entre os fatores de risco associados a essas infecÃÃes, destacou-se a exposiÃÃo à IRA no domicÃlio. Cepas de VSR A e B co-circularam nos perÃodos epidÃmicos analisados, sem uma predominÃncia significativa de qualquer grupo antigÃnico. Cerca de 29,8% (122/409) das amostras positivas para VSR, estocadas a â20ÂC, foram inoculadas em monocamadas de cÃlulas HEp-2. O percentual de isolamento variou de 0,0%, em amostras coletadas em 2002, a 36,8%, em 2004. Nossos resultados confirmam a importÃncia do VSR como agente etiolÃgico de IRAs, especialmente IVAI, em crianÃas jovens. A ocorrÃncia do VSR na cidade de Fortaleza mostrou um padrÃo sazonal regular associado Ãs chuvas. A conservaÃÃo de amostras a â20ÂC nÃo impossibilitou o isolamento em cultura de cÃlulas atà um ano apÃs seu congelamento. / Respiratory syncytial virus (RSV) is detached as an important pathogen of lower respiratory tract infections (LRTI) in children, mainly in the first year of life. This study had as purposes: to determine the prevalence of RSV in cases of acute respiratory infections (ARIs) in children served in Albert Sabin Children Hospital, in Fortaleza â CE, over the period of January 2001 to July 2004; describe the seasonality pattern of RSV circulation along the study period; observe characteristics clinical-epidemiological of these infections; characterize antigenically the circulating RSV in the epidemic period from 2003 to 2004 and determine the isolation rate of RSV in HEp-2 cells culture from samples collected in 2002, 2003, and 2004 and stored at â20ÂC. Aspirated from nasopharynx were collected from children with up to seven days from the beginning of ARIs symptoms and submitted to the reaction of indirect immunofluorescence (IIF). Samples collected in 2002, 2003, and 2004, and stored at â20ÂC, were inoculated in monolayers of HEp-2 cells. During the 43 months of study, RSV was identified in 21.0% (409/1950) of the clinical specimens collected. Virus circulation was initially observed during the months of January or February and the last cases were recorded in July or August of each year of study. The peak of these infections was observed from March to July, associated with the rainy season of the city. The infections caused by RSV were more frequent in male children and those with up to two years of age. Bronchiolitis and pneumonia were the clinical syndromes more associated with the virus. Dyspnea, throat pain, coryza, sneezes and cyanosis were the significant clinical signs and symptoms in ARIs caused by RSV. About 9.5 % (39/409) of the infected children presented problems associated, such as prematurity, heart diseases and congenital pulmonary diseases. Among the risk factors associated with these infections, was pointed out the exposure to ARIs in the domicile. Strains of RSV A and B co-circulated during the epidemical periods analyzed, without a significant predominance of any antigenical group. About 29.8 % (122/409) of the positive samples for RSV, stored at â20ÂC, were inoculated in monolayers of HEp-2 cells. The isolation percentage varied from 0.0 %, in samples collected in 2002, to 36.8 %, in 2004. Our results confirm the importance of the RSV as etiological agent of ARIs, especially LRTI, in young children. The occurrence of RSV in the city of Fortaleza showed a regular seasonal pattern associated with the rains. The conservation of samples at â20ÂC did not make impossible the isolation in cells culture up to one year after freezing.