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Effect of Indole-3-butyric Acid on the Formation of Adventitious Roots in Cinnamomum kanehirae Cuttings

Chang, Chiung-yun 21 July 2005 (has links)
Synthetic auxin, indole-3-butyric acid (IBA), effectively promoted the rooting in Cinnamomum kanehirae cuttings. The easy-to-root genotype, H107, responded to IBA much earlier than the difficult-to-root genotype, L41. On day 5, the POD activity significantly decreased in the IBA-treated tissues as compared with the control. Similar phenomenon was observed in extract of L41 genotype showing that IBA inhibited POD activity. In addition, the variation in POD activity corresponds to an inverse variation in the concentration of free IAA. The levels of IAA in H107 genotype increased dramatically in IBA-treated tissues on day 5; while, in L41 genotype, the raise of IAA in IBA-treated tissues was observed on day 20. Moreover, the lignin content in IBA-treated H107 cuttings decreased is quite correlated with the decline of the POD activity; yet the lignin content in L41 genotype cuttings was almost unchanged. Hence, we suggest that the inhibition on POD may lead to the redifferentiation processes induced by IBA, then produce the new root primordia during the formation of adventitious roots.
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Cloning and sequence analysis of the peroxidase genes in Cinnamomum kanehirae young roots

Cho, Hsin-yi 30 June 2007 (has links)
Auxin can induce adventitious rooting. Synthetic auxin, indole-3-butyric acid (IBA), effectively promoted the rooting in Cinnamomum kanehirae. The peroxidase (POX) activity significantly decreased in the IBA-treated tissues as compared with the control. Hence, I suggest that the inhibition on POX activity may lead to the redifferentiation processes induced by IBA, which produces the new root primordia during the formation of adventitious roots. On this investigation, I cloned POX cDNA from the young roots. Degenerate primers were designed from the conservative regions of other published POX to amplify the expectant DNA fragment. Full-length cDNA of the POX gene designated CKPX1 and CKPX3 were cloned by the method of 5'and 3' RACE. The deduced amino acid of CKPX1 and CKPX3 were compared with the previously reported POX and showed between 40% and 60% identity with those plant species. Further studies on the promoter elements of CKPX3 were found out that elements related to auxin response, lignification, pathogen invasion and stress response. The results suggest that CKPX3 may be involved in the regulate process of adventitious rooting and defense against pathogens and environment stress.
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Cloning and sequence analysis of the peroxidase genes in High and Low rooting line of Cinnamomum kanehirae

Li, Ming-wei 26 May 2009 (has links)
Auxin can induce adventitious rooting. Synthetic auxin, indole-3-butyric acid (IBA), effectively promoted the rooting in Cinnamomum kanehirae. In Cinnamomum kanehirae, there are high (H) and low (L) rooting cultivar. The peroxidase (POX) activity significantly decreased in the IBA-treated tissues as compared with the control. The inhibition on POX activity may lead to the redifferentiation processes induced by IBA. In this investigation, we cloned POX cDNA from the young roots. Degenerate primers were designed from the conservative regions of other published POXs to amplify the expectant DNA fragment. We found that the H and L line have similar genes (>99%). The Full-length cDNA of the POX genes were cloned by the method of 5'and 3' Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE). The deduced amino acid were compared with the previously reported POX and showed between 40% and 70% identity with other plant POXs. Further studies on the promoter elements of POX in High-rooting cultivar and Low-rooting line show that some elements are related to auxin response, lignification, pathogen invasion and stress response. The regulatory elements of the POX gene in High-rooting line contain sugar repression responsiveness (SRS) elements that might repress the expression of POX gene, causing the lower POX activity.
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Veiksniai, lemiantys Sedum L. pridėtinių ūglių formavimąsi in vitro / Factors determining adventitious shoot formation in vitro in Sedum L

Klimaitienė, Erika 13 June 2012 (has links)
Magistrantūros studijų baigiamajame darbe pateikiama šilokų pridėtinių ūglių regeneracija lapų segmentų kultūroje, priklausomai nuo genotipo ir augimo reguliatorių maitinamojoje terpėje. Darbo objektas – Sedum rupestre ‛Angeline’, Sedum reflexum ‛Cristatum’, Sedum fosterianum ‛Elegans’, Sedum maximum ‛Autumn Joy’ lapų audiniai. Darbo metodai: izoliuoti eksplantai auginti Murashige ir Skoog (MS) maitinamojoje terpėje su skirtingais augimo reguliatorių kiekiais. Susiformavę pridėtiniai ūgliai įšaknydinti MS maitinamojoje terpėje su skirtingais augimo reguliatorių kiekiais. Vertintas ūglių susiformavimo dažnis (%), ūglių kiekis iš eksplanto (vnt.) ir įsišaknijimo dažnis (%). Darbo rezultatai. Veislių ‛Elegans’ ir ‛Cristatum’ ūglių susiformavimo dažnį labiausiai skatino 0,75 mg l-1 BAP. Veislės ‛Angeline’ didžiausias ūglių susiformavimo dažnis nustatytas terpėje, papildytoje 3,0 mg l-1 BAP. Veislės ‛Autum joy’ izoliuoti lapo segmentai 100 % dažniu ūglius formavo terpėse su 3,0 mg l-1 BAP + 0,5 mg l-1 NAR ir 4,0 mg l-1 BAP + 0,5 mg l-1 NAR. Veislės ‛Elegans’ didžiausias ūglių kiekis eksplantui gautas terpėje papildytoje 0,75 mg l-1 BAP. Veislės ‛Angeline’ daugiausia ūglių iš eksplanto susiformavo terpėse su 0,75 mg l-1 BAP ir 3,0 mg l-1 BAP. Terpėje, papildytoje 3,0 mg l-1 BAP gautas didžiausias veislės ‛Cristatum’ ūglių kiekis vienam eksplantui. Veislės ‛Autum joy’ eksplantai daugiausia ūglių suformavo terpėse, papildytose 3,0 mg l-1 BAP + 0,5 mg l-1 NAR ir 4,0 mg l-1 BAP + 0,5... [toliau žr. visą tekstą] / The master work presents orpine adventitious shoots regeneration in leaves segments cultures, depending on genotype and growth regulators in the culture medium. Object of the work – Sedum rupestre ‛Angeline’, Sedum reflexum ‛Cristatum’, Sedum fosterianum ‛Elegans’, Sedum maximum ‛Autumn Joy’ leaves tissues. Method of the work – isolated explants were growing on Murashige ir Skoog (MS) nutrition medium with different content of growth regulators. Adventitious shoots were transferred to MS culture medium for rhizogenesis induction. Shoots formation frequency, number of shoots per explant and rooting frequency were evaluated. The results of work. The highest shoots formation frequency of orpine varieties ‛Elegans’ and ‛Cristatum’ has been obtained under influence of 0.75 mg l-1 BAP. The 3.0 mg l-1 BAP concentration in culture medium resulted in highest shoots regeneration frequency of variety ‛Angeline’. All isolated explants of ‛Autum joy’ formed adventitious shoots in the medium supplemented with 3.0 mg l-1 BAP + 0.5 mg l-1 NAA and 4.0 mg l-1 BAP + 0.5 mg l-1 NAA. While 0.75 mg l-1 BAP in culture medium stimulated shoots formation frequency of variety ‛Elegans’. The highest shoots number per explant of variety ‛Angeline’ has been establishing in medium with 0.75 mg l-1 BAP and 3.0 mg l-1 BAP. Medium supplemented with 3.0 mg l-1 BAP resulted in highest shoots number per explant of ‛Cristatum’. Explants of variety ‛Autum joy’ highest shoots number per explant formed in medium... [to full text]
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Estaquia de matrizes adultas de Pinus elliottii var. elliottii e Pinus elliottii x Pinus caribaea / Adventitious rooting of mature Pinus elliottti var. elliottii and Pinus elliottii x Pinus caribaea cuttings

Priscilla de Oliveira Antonelli 30 August 2013 (has links)
O Pinus elliotti representa o principal produtor atual de exploração de resina no setor florestal brasileiro. Recentemente, plantios de P. elliottii X P. caribaea vêm se destacando, principalmente, pela sua maior produtividade em biomassa. Além disto, a resina do híbrido apresenta características químicas semelhantes aos seus parentais. Porém, poucas são as informações quanto a estaquia de espécies do gênero Pinus, e se focarmos na propagação de árvores adultas, tal carência é ainda maior, principalmente ao se considerar a dificuldade de rejuvenescimento/revigoramento do material genético. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo geral avaliar o enraizamento adventício do P. elliottii var. elliottii e P. elliottii X P. caribaea adultos. Para tanto, o trabalho foi dividido em três diferentes estudos. O primeiro (Capítulo 2) avaliou o enraizamento adventício de estacas das matrizes adultas de P. elliottii e P. elliottii X P. caribaea no 5° estágio de enxertia seriada com e sem podas sucessivas, sob ação do AIB, talco com fungicida Cerconil® e terebentina. O segundo (Capítulo 3) foi baseado na avaliação do enraizamento adventício de estacas no 2° estágio de enxertia seriada de uma matriz adulta de P. elliottii var. elliottii submetida a um ano de podas sucessivas, sob ação do AIB, terebentina e paclobutrazol. Por sua vez, o terceiro estudo (Capítulo 4) consistiu na avaliação do enraizamento adventício de braquiblastos e brotos de duas matrizes adulta de P. elliottii e P. elliottii X Pinus caribaea, sob ação do AIB e paclobutrazol. Os resultados permitiram inferir que a sobrevivência e o enraizamento adventício aos diferentes tratamentos variaram de acordo com o genótipo e com as características morfológicas das estacas (grau de lignificação e tipo de estacas, brotos e braquiblastos). De maneira geral, os resultados evidenciaram a atuação das enxertias seriadas e das podas sucessivas na restauração da competência rizogênica das estacas dos brotos das matrizes adultas de P. elliottii e P. elliottii X P. caribaea, promovido pelo rejuvenescimento/ revigoramento parcial das matrizes. Além disto, a estaquia de braquiblastos mostrou ser uma ferramenta promissora para a propagação de espécies do gênero Pinus. / Pinus elliottii is the main current resin extraction producer in the Brazilian forest sector. Recently, plantations of P. elliottii X P. caribaea play a great importance in the production systems mainly by its high biomass productivity. In addition, the hybrid resin has chemical characteristics similar to their parents. However, there is little information on obtaining clones, and considering the propagation of mature trees, this lack of information is even greater, mainly concerning the difficulty to achieve the rejuvenation/ reinvigoration of the genetic material. Based on theses information, the present work was aimed to evaluate the adventitious rooting of mature P. elliottii var. elliottii and P. elliottii X P. caribaea cuttings. Therefore, the work was divided into three basic studies. The first study (Chapter 2) was based on the evaluation of adventitious rooting of mature P. elliottii and P. elliottii X caribaea cuttings of grafts up five sequential grafting with and without pruning, under the action of AIB, talc with fungicide and turpentine. The second (Chapter 3) was based on the evaluation of adventitious rooting of mature P. elliottii cuttings of grafts up two sequential grafting with pruning, under the action of IBA, paclobutrazol and turpentine. The third (Chapter 4) evaluated the adventitious rooting of brachyblast and shoots of mature P. elliottii and P. elliottii X caribaea cuttings, under the action of IBA and paclobutrazol. Results showed that the cutting survival and root growth, under the action of different treatments, varied according to the genotype and morphological characteristics of the material (cutting lignifications and type, brachyblast or shoot). Overall, our results showed the performance of serial grafting and pruning on the restoration of rooting competence in P. elliottii and P. elliottii X P. caribaea stem cuttings, promoted by the rejuvenation of trees. Moreover, the cutting of brachyblast can be a promising tool for the propagation of Pinus species.
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Otimização da propagação clonal de Eucalyptus globulus Labill / Clonal propagation optimization of Eucalyptus globulus Labill

Germana Marcelino Cordeiro 30 July 2013 (has links)
Poucas espécies de Eucalyptus apresentam aptidão ao cultivo em regiões de baixas temperaturas e geadas frequentes, limitando seu cultivo em algumas regiões do Brasil. Genótipos de Eucalyptus globulus podem representar opções futuras para plantios florestais, tendo em vista o seu ótimo desempenho silvicultural nessas condições. No entanto, informações quanto à obtenção de mudas clonais são escassas, e se focarmos as espécies recomendadas para plantio em condições subtropicais, tal carência é ainda maior, principalmente em termos endógenos e exógenos de enraizamento de propágulos. Esta espécie se destaca também, pelo grande interesse no setor florestal, sobretudo em relação às características de sua madeira para obtenção de celulose, porém, é considerada recalcitrante ao enraizamento de estacas, especialmente quando envolve material adulto, dificultando o aproveitamento dos benefícios da clonagem. Por essa razão, o presente trabalho teve como objetivo principal avaliar a técnica de micropropagação de clones de E. globulus, visando a reversão à juvenilidade, aumentando os índices de enraizamento e, consequentemente a produção de mudas clonais. Para tanto, os clones (USP 01, USP 24 e USP 33) foram estudados e apresentaram estabelecimento satisfatório, onde avaliou-se: (a) a multiplicação in vitro, testando-se três meios de cultura (WPM, JADS e MS) suplementados com concentrações do regulador de crescimento BAP (0; 0,50 e 1,0 mg L-1) combinado com ANA (0; 0,05 e 0,10 mg L-1); (b) o alongamento in vitro, testando-se o meio de cultura WPM suplementado com concentrações de BAP (0; 0,05 e 0,10 mg L-1) combinadas com ANA (0; 0,1; 0,2 e 0,3 mg L-1); (c) e o enraizamento in vitro, em que brotações alongadas in vitro dos clones foram coletadas e transferidas para meio de cultura WPM, suplementado com 0 e 0,05 mg L-1 de BAP combinado com 0; 0,1; 0,5 e 1,0 mg L-1 de AIB. Os resultados revelaram comportamentos diferenciados dos clones quanto à multiplicação e alongamento in vitro. As taxas de multiplicação in vitro dos clones variaram ao longo dos 10 subcultivos, com uma estabilização a partir do 6º subcultivo para todos os clones avaliados, sendo a maior taxa de multiplicação (número médio de 13 gemas) na concentração de 0,7 mg L-1 de BAP e 0,05 mg L-1 de ANA no meio de cultura WPM. O meio de cultura WPM avaliado no alongamento in vitro, contribuiu favoravelmente para o alongamento das brotações, assim como ANA na concentração de 0,3 mg L-1 combinando com 0,1 mg L-1 de BAP. Portanto, o protocolo desenvolvido mostrou-se eficiente para micropropagação via proliferação de gemas axilares dos clones avaliados, porém, em relação ao enraizamento constatou-se apenas uma raiz emitida na concentração de 0,5 mg L-1 de AIB no clone 01. De forma geral, em razão dos resultados observados, conclui-se que apesar de mostrar-se viável, a micropropagação não promoveu rejuvenescimento significativo dos clones de E. globulus, uma vez que não foi observado enraizamento expressivo das microestacas para as características avaliadas. / Few Eucalyptus species present adaptation for cultivation in regions with low temperatures and frequent frosts, limiting their cultivation in some regions of Brazil. E. globulus genotypes may to represent future options for forest plantations, in view of its optimal silvicultural performance in these conditions. However, information about obtaining clonal seedlings are scarce, and considering the species recommended for planting in subtropical conditions, this lack of information is even greater, mainly when considering the endogenous and exogenous factors for the rooting. This species is distinguished by great interest in forestry, particularly in relation to characteristics of its wood to obtain cellulose, however, it is considered recalcitrant to rooting, especially when it involves adult material, making it difficult to utilize the cloning benefits. Therefore, this study aimed to evaluate the micropropagation technique of E. globulus clones, in order to revert to juvenility, increasing the rate of rooting and consequently the clonal production. For this, the clones (USP 01, USP 24 and USP 33) were studied and showed satisfactory in vitro culture establishment, where it was evaluated: (a) the in vitro multiplication, testing three culture media (WPM, JADS and MS) supplemented with concentrations plant growth regulator BAP (0; 0,50 and 1,0 mg L-1) combined with NAA (0; 0,05 and 0,10 mg L-1); (b) the in vitro elongation, testing the WPM medium culture supplemented with BAP concentrations (0; 0,05 and 0,10 mg L-1) combined with NAA (0; 0,1; 0,2 and 0,3 mg L-1); and (c) in vitro rooting, where elongated shoots in vitro of the clones were collected and transferred to WPM, supplemented with 0 and 0,05 mg L-1 BAP combined with 0; 0,1, 0,5 and 1,0 mg L-1 IBA. The results showed different behaviors of clones as in vitro multiplication and elongation. Rates of clones in vitro multiplication varied over the 10 subcultures, with the stabilization from the sixth subculture for all clones, the largest rate multiplication (average number of 13 buds) in the concentration of 0,7 mg L-1 BAP and 0,05 mg L-1 NAA in WPM. The culture media WPM evaluated in vitro elongation, contributed positively to the shoots elongation, with 0,3 mg L-1 NAA and 0,1 mg L-1 BAP. Therefore, with the micropropagation protocol using axillary buds proliferation of these clones showed be well developed , however, in relation to rooting, only one root was emitted at 0,5 mg L-1 IBA in clone 01. In general, it is possible concluded that despite viable, the micropropagation did not promote significant rejuvenation of E. globulus clones, due to the not expressive rooting for the microcutting evaluated.
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Avaliação morfofisiológica, histológica e histoquímica das vias morfogênicas na micropropagação de Neoregelia sp / Morphophysiological, histological and histochemical morphogenic pathways in Neoregelia sp micropropagation

Eveline Calderan Meneghetti 24 April 2015 (has links)
A família Bromeliaceae apresenta importância ecológica e econômica, desta forma, o desenvolvimento de protocolos para a micropropagação de espécies dessa família, faz-se necessário, a fim de suprir sua demanda comercial e mesmo ecológica. A escolha do meio de cultura e do explante utilizado durante a micropropagação são fundamentais para um protocolo eficaz. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar as diferenças quantitativas e qualitativas no desenvolvimento de explantes de Neoregelia sp em meios de cultura e monitorar as vias morfogênicas dos propágulos obtidos em explantes foliares. Para tanto, brotos de microcepas e explantes foliares procedentes de um micro jardim clonal, foram transferidos para os meios de cultura de multiplicação MS, ½ MS e WPM, todos suplementados com 0,050 mg.L-1 ANA e 0,50 mg.L-1 de BAP, onde foram mantidos por 120 dias e submetidos a diversas análises morfofisiológicas. Paralelamente, explantes foliares foram mantidos em meio de cultura MS de multiplicação para o monitoramento das vias morfogênicas durante os processos regenerativos. Para os experimentos com brotos de microcepas verificou-se que o meio de cultura MS proporcionou a melhor taxa de multiplicação, maior crescimento dos brotos, obtendo os valores mais elevados de peso de matéria fresca e seca, além disso, apresentaram maior acúmulo de nitrogênio total e proteico. No entanto, os meios de cultura ½ MS e WPM promoveram uma taxa de multiplicação semelhante a do MS, mas com brotos menores e menos vigorosos, porém, mais homogêneos, com isso, na dependência do objetivo do cultivo in vitro, não deve ser desconsiderada a possibilidade de utilização dos meios de cultura ½ MS e WPM. Os explantes foliares não se desenvolveram bem no meio de cultura WPM, não havendo diferença entre os meios MS e ½ MS, visto que ambos apresentaram resultados satisfatórios. As análises histológicas e histoquímicas identificaram células parenquimáticas, que atuam como células-tronco, manifestando capacidade morfogênica para toti ou pluripotência, dando origem respectivamente a embriões somáticos e gemas adventícias, em resposta aos estímulos in vitro. / The Bromeliaceae family has an ecological and economic importance, therefore, the protocols development for micropropagation of species of this family becomes necessary in order to meet its business and even its ecological demand. The choice of culture medium and the explant used during micropropagation are essential for an effective protocol. Thus, the aim of this study was to evaluate the quantitative and qualitative differences in the explants development of Neoregelia sp in the culture media and monitor the morphogenetic pathways of obtained propagules from leaf explants. Consequently, shoots and leaf explants coming from microcloning garden were transferred to the MS, ½ MS and WPM multiplication culture media, all supplemented with 0.050 mg.L-1 NAA and 0.50 mg.L-1 BAP, where they were held for 120 days and submitted to morphological and physiological analysis. Therefore, leaf explants were kept on MS-medium multiplication for monitoring morphogenetic pathways during the regenerative processes. Furthermore, MS medium showed the best multiplication rate for the sprouts of the microstumps, increased growth of shoots, obtaining the highest values of fresh and dry matter weight, and also showed higher accumulation of total nitrogen and protein. However, the ½ MS and WPM culture media promoted a similar multiplication rate to the MS medium, with the development of the smaller and less vigorous shoots, but with greater homogeneity. This way, depending on the purpose of in vitro culture, their use in the micropropagation for this species should not be disregarded. The leaf explants are not well developed in WPM medium, and don\'t had significant difference between the MS and ½ MS culture medium, as both showed satisfactory results. The histological and histochemical analysis identified the presence of the parenchymatic cells, which act as stem cells, expressing morphogenic ability for toti or pluripotency, leading respectively to somatic embryogenesis or adventitious organogenesis in response to in vitro stimuli.
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Desenvolvimento de Setaria viridis com ênfase no estabelecimento do meristema radicular / Development of Setaria viridis with emphasis on the establishment of the root meristem

Costa, Mayra Camargo Andrade 30 January 2018 (has links)
Setaria viridis é uma espécie de gramínea muito relevante em estudos de desenvolvimento vegetal, por determinadas características que a fazem uma excelente proposta de organismo modelo para plantas monocotiledôneas de metabolismo C4. Para que a espécie seja utilizada amplamente em estudos que visem compreender o funcionamento e desenvolvimento vegetal, bem como os mecanismos moleculares que o modulam, é essencial que aspectos de seu desenvolvimento sejam desvendados. Nesse contexto, a caracterização do meristema radicular e das estruturas presentes nos estágios iniciais da germinação é importante para se compreender como ocorre, em gramíneas, o surgimento de tipos de raízes diferentes, além de correlacionar quais fatores ambientais e endógenos estão envolvidos na escolha de diferentes arquiteturas de sistemas radiculares em gramíneas. Além disso,a caracterização do desenvolvimento de estruturas florais em Setaria viridis é importante, uma vez que traz informações que podem contribuir com um aumento na eficiência de metodologias de transformação genética para a espécie, via \"spike dip\". O presente trabalho caracterizou morfoanatomicamente o desenvolvimento radicular desde os estágios iniciais da germinação e o desenvolvimento floral em Setaria viridis. Além disso, buscou estabelecer relação entre o surgimento de diferentes tipos de raízes (primárias e as adventícias) com diferentes condições de luminosidade em cultivos in vitro / Setaria viridis is a very important grass in studies of plant development, due to some characteristics that make it an excellent proposed model organism for monocotyledonous plants with C4 metabolism. To be widely used in studies that aim to understand plant functioning and development, as well as the molecular mechanisms that modulate it, it is essential that aspects of its development be unraveled. In this context, the characterization of the root meristem and structures present in the early stages of germination is also important to understand how the emergence of different root types occurs in grasses. Moreover, to correlate the environmental and endogenous factors involved in the choice of different architectures of root systems in grasses. Furthermore, the characterization of the development of floral structures in Setaria viridis is important, since it brings information that can contribute to the efficiency of methodologies of genetic transformation for the species. The present work characterized morphologically the root development during the initial stages of germination and the floral development of Setaria. In addition, it sought to establish a relationship between the emergences of different types of roots (primary and adventitious) with different light conditions in in vitro cultures
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Desenvolvimento de Setaria viridis com ênfase no estabelecimento do meristema radicular / Development of Setaria viridis with emphasis on the establishment of the root meristem

Mayra Camargo Andrade Costa 30 January 2018 (has links)
Setaria viridis é uma espécie de gramínea muito relevante em estudos de desenvolvimento vegetal, por determinadas características que a fazem uma excelente proposta de organismo modelo para plantas monocotiledôneas de metabolismo C4. Para que a espécie seja utilizada amplamente em estudos que visem compreender o funcionamento e desenvolvimento vegetal, bem como os mecanismos moleculares que o modulam, é essencial que aspectos de seu desenvolvimento sejam desvendados. Nesse contexto, a caracterização do meristema radicular e das estruturas presentes nos estágios iniciais da germinação é importante para se compreender como ocorre, em gramíneas, o surgimento de tipos de raízes diferentes, além de correlacionar quais fatores ambientais e endógenos estão envolvidos na escolha de diferentes arquiteturas de sistemas radiculares em gramíneas. Além disso,a caracterização do desenvolvimento de estruturas florais em Setaria viridis é importante, uma vez que traz informações que podem contribuir com um aumento na eficiência de metodologias de transformação genética para a espécie, via \"spike dip\". O presente trabalho caracterizou morfoanatomicamente o desenvolvimento radicular desde os estágios iniciais da germinação e o desenvolvimento floral em Setaria viridis. Além disso, buscou estabelecer relação entre o surgimento de diferentes tipos de raízes (primárias e as adventícias) com diferentes condições de luminosidade em cultivos in vitro / Setaria viridis is a very important grass in studies of plant development, due to some characteristics that make it an excellent proposed model organism for monocotyledonous plants with C4 metabolism. To be widely used in studies that aim to understand plant functioning and development, as well as the molecular mechanisms that modulate it, it is essential that aspects of its development be unraveled. In this context, the characterization of the root meristem and structures present in the early stages of germination is also important to understand how the emergence of different root types occurs in grasses. Moreover, to correlate the environmental and endogenous factors involved in the choice of different architectures of root systems in grasses. Furthermore, the characterization of the development of floral structures in Setaria viridis is important, since it brings information that can contribute to the efficiency of methodologies of genetic transformation for the species. The present work characterized morphologically the root development during the initial stages of germination and the floral development of Setaria. In addition, it sought to establish a relationship between the emergences of different types of roots (primary and adventitious) with different light conditions in in vitro cultures
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Genes relacionados a auxinas e rizogênese adventícia em Arabidopsis

Costa, Cibele Tesser da January 2015 (has links)
Enquanto as raízes laterais (RL) se desenvolvem a partir da raiz primária, as raízes adventícias (RA) são geralmente formadas em órgãos da parte aérea da planta. As RA podem ser formadas como uma resposta adaptativa a estresses, como ferimentos ou alagamentos e a sua formação também é importante para a propagação vegetativa de espécies economicamente relevantes, que frequentemente dependem da propagação clonal de genótipos elite. A aplicação de hormônios pode estimular o desenvolvimento das RA (DRA), e as auxinas são consideradas os principais hormônios envolvidos nesse processo. Neste estudo, o sistema de plântulas estioladas foi usado em Arabidopsis thaliana para analisar diversos aspectos do DRA. Diferentes tipos de auxinas, naturais ou sintéticas, foram testadas e verificou-se que AIA causou um aumento no número de raízes sem afetar seu comprimento, ANA foi efetivo para o DRA, mas as raízes ficaram pequenas, e altas concentrações de 2,4-D causaram a formação de calos. Através de imunolocalização, um nível elevado de AIA foi detectado nos tecidos do hipocótilo que deram origem ao primórdio radicular. O padrão de expressão de genes potencialmente envolvidos com o enraizamento adventício foi testado por PCR em Tempo Real. O DRA foi marcado essencialmente por aumento na expressão de PIN1, SUR2, GH3.3, GH3.6, ARF8 e IAA28. A expressão dos genes induzidos foi mais estimulada por ANA, seguida de AIA. A expressão de IAA28 aumentou com o DRA, diferente do que foi observado no desenvolvimento de RL. Os receptores de auxinas TIR1/AFB e ABP1 iniciam a sinalização de auxinas na célula pelo controle da expressão gênica, proteólise seletiva e afrouxamento da parede celular. Verificou-se que TIR1 e as proteínas AFBs são importantes para o DRA, mas que estes receptores devem estar exercendo funções redundantes no processo e que ABP1 pode agir complementando a sua ação. Durante a organogênese das RA, TIR1 e AFB2 parecem exercer uma maior influência. As auxinas são transportadas de maneira polar, célula a célula e geralmente dependem de transportadores. Analisamos o DRA em diferentes mutantes deficientes no transporte de influxo e efluxo de auxinas juntamente com construções com genes repórteres, na presença ou ausência de auxina exógena. Uma função essencial foi estabelecida para AUX1 no enraizamento adventício e, embora LAX3 per se não tenha sido chave no processo, este parece agir em conjunto com AUX1. Também observamos que a formação eficiente de RA depende dos transportadores de efluxo PIN, principalmente PIN1, 3 e 7. A adequada fosforilação dos PINs pelas quinases PID, WAG1 e WAG2 e, consequentemente, a direção do transporte, foi igualmente essencial para o estabelecimento das RA. / Lateral roots (LR) develop from the primary root, whereas adventitious roots (AR) are generally formed from above-ground organs. AR can be formed as an adaptive response to stresses, like wounding or flooding, and their formation is also important for efficient vegetative propagation of economically relevant species, which often depend on clonal propagation of elite genotypes. Hormonal application can stimulate AR development (ARD) and auxins are recognized as major hormones involved in this process. Here, the etiolated seedlings system was used in Arabidopsis thaliana to study several aspects of ARD. Different auxin types, natural or synthetic, were tested and it was found that IAA caused an increase in root number without affecting root length, NAA was effective for ARD, but roots remained short and higher levels of 2,4-D caused callus formation. Through immunolocalization, a higher level of IAA was detected in hypocotyl tissues from which the root primordia differentiated. The expression pattern of genes potentially involved in adventitious rooting was tested by Real-Time PCR. ARD was essentially marked by increased expression of PIN1, SUR2, GH3.3, GH3.6, ARF8 and IAA28. The magnitude of expression of induced genes was much stimulated by NAA, followed by IAA. IAA28 expression increased with ARD, differently from what is known for lateral root development. The auxin receptors TIR1/AFB and ABP1 initiate auxin signaling in the cell through changes in gene expression, selective proteolysis and cell wall loosening. We observed that TIR1/AFB are important in ARD but might be playing redundant roles in the process, whereas ABP1 could be complementing their action. During AR organogenesis, TIR1 and AFB2 seemed to exert greater influence. Auxins are transported in a polar, cell to cell way and depend on several transporters. We analyzed ARD in different mutants affected in auxin influx and efflux transporters, coupled with reporter gene constructs, in presence or absence of exogenous auxin. An essential role was established for AUX1 in AR. Although LAX3 per se was not a key player in the process, it seemed to act in conjunction with AUX1. We also observed that efficient formation of AR depends on the PIN efflux transporters, mainly PIN1, 3 and 7. The proper phosphorylation of PINs by the kinases PID, WAG1 and WAG2, and hence the direction of auxin transport, was equally essential for AR establishment.

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