A tolerância pode ser considerada um dos pilares da imunologia. Sabe-se que a tolerância a um antígeno pode gerar tolerância a outro antígeno não relacionado, fenômeno conhecido como tolerância cruzada. Neste trabalho caracterizamos a tolerância cruzada utilizando a OVA como tolerógeno e extrato de Blomia tropicalis (Bt) ou Hemocianina de Keyhole limpet (KLH) como alérgenos. Verificamos que é possível reproduzir o fenômeno da tolerância cruzada neste modelo de inflamação alérgica induzida tanto pelo KLH quanto pela Bt, com diminuição do infiltrado inflamatório no pulmão, eosinófilos, IgE total e produção de muco. Ainda, a estratégia de utilizar a tolerância cruzada terapeuticamente, i.é., após a sensibilização com KLH, a indução de tolerância cruzada não foi capaz de prevenir a resposta alérgica. Em conjunto, nossos dados mostram que a tolerância à OVA modifica as respostas alérgicas tanto à Bt quanto ao KLH no modelo de inflamação pulmonar experimental de forma profilática, mas que a tolerância cruzada não é eficiente em animais já sensibilizados. / Tolerance is among the Immunology pillars. Experimental data indicate that tolerance towards an antigen can promote tolerance to an unrelated antigen, a phenomenon known as cross-tolerance. Here we sought to characterize cross tolerance using OVA as a tolerogen and Blomia tropicalis (Bt) extract or Keyhole limpet Hemocianina (KLH) as allergens. We found that cross tolerance can be reproduced in the model of allergic lung disease induced by KLH or Bt, with less inflammatory infiltrate in the lung, eosinophils, total IgE and mucus production. Using cross tolerance therapeutically, i.e., after KLH sensitization, was not effective, since the allergic lung response was not modulated. Altogether, our data shows that OVA tolerance modulate allergic lung disease induced either by Bt or KLH when used as prophylactic model, however cross tolerance is ineffective in sensitized animals.

Introdução: Asma e rinite alérgicas são doenças inflamatórias crônicas das vias aéreas cuja principal etiopatogenia é a reação de hipersensibilidade ao ácaro da poeira. O único tratamento específico que modifica a história natural da doença é a imunoterapia alérgeno-específica (ITAE). Porém, as reações adversas ainda são uma dificuldade na consolidação da ITAE como forma de tratamento. Um meio de minimizar as reações e maximizar os efeitos terapêuticos é o uso de adjuvantes, entre eles vacinas e lipopolissacárides bacterianos, que objetivam aumentar o desvio da resposta imune de perfil T-helper (TH) 2 para TH1. A vacina de Bordetella pertussis de célula inteira (Pw) mostrou ter um papel protetor em modelos experimentais de asma induzida por ovalbumina. Porém, seu papel na alergia respiratória induzida por ácaros ainda não é conhecido. Nosso objetivo foi avaliar os efeitos da vacina tríplice bacteriana (difteria-tétano-coqueluche - DTPw) em um modelo murino de alergia respiratória crônica induzida pelo ácaro Dermatophagoides pteronyssinus (Derp). Métodos: O protocolo teve duração de 30 dias. Camundongos BALB/c foram divididos em 6 grupos, os quais foram sensibilizados por via subcutânea com solução salina ou Derp 50mcg, em três injeções. Três grupos foram imunizados com Derp, apenas com o ácaro ou associado as vacinas de difteria-tétano (DT) e DTPw, respectivamente. Os outros três receberam soro fisiológico, com ou sem vacinas DT e DTPw. Os animais, posteriormente, sofreram desafio intranasal com soro fisiológico ou Derp por 7 dias e foram sacrificados 24 horas após o último desafio. Medimos IgE, IgG1 e IgG2a séricas específicas anti-Derp; resistência, elastância e hiperresponsividade das vias aéreas; densidade de leucócitos polimorfonucleares (PMN) e área de muco ácido no epitélio nasal; celularidade no lavado bronco-alveolar (BAL); e remodelamento das vias aéreas inferiores. Resultados: Os animais sensibilizados com Derp produziram altos níveis de imunoglobulinas específicas, apresentaram aumento da densidade de PMN e da área de muco ácido nasal, elevação das células inflamatórias no BAL às custas de macrófagos e remodelamento significativo das vias aéreas. As vacinas levaram à redução dos níveis de IgE específica e o grupo Derp-DTPw apresentou os menores níveis, similares aos grupos salina. A vacina DTPw não alterou os níveis de IgG1 ou IgG2a em relação ao grupo Derp. Não houve diferença entre todos os 6 grupos quanto aos parâmetros ventilatórios e quanto à contagem de eosinófilos no BAL. As vacinas DT e DTPw inibiram o infiltrado PMN nasal e DTPw modulou a produção do muco ácido. Os grupos vacinados tiveram redução da celularidade no BAL e do remodelamento em comparação com os controles, com resultados mais expressivos no grupo Derp-DTPw em relação ao grupo Derp-DT. Conclusões: Neste modelo murino de alergia respiratória crônica induzida por ácaro, a vacina DTPw diminuiu a IgE específica sérica, as células inflamatórias no nariz e no BAL, o muco ácido nasal e o remodelamento das vias respiratórias inferiores. / Background: Asthma and allergic rhinitis are chronic inflammatory diseases of the airways whose primary etiology is hypersensitivity reaction to house dust mite (HDM). The only specific treatment which modifies the natural history of the disease is the allergen specific immunotherapy (ASIT). However, adverse reactions are still a difficulty in consolidating ASIT as a good treatment option. One way to minimize adverse reactions and maximize therapeutic effects is the use of adjuvants, including bacterial lipopolysaccharide and vaccines that aim to shift immune response profile from T helper (TH) 2 to TH1. Bordetella pertussis whole-cell vaccine (Pw) has shown to have a protective role in experimental models of ovalbumin-induced asthma. Nevertheless, its role in respiratory allergy induced by HDM is unknown. Our objective was to evaluate the effects of diphtheria-tetanus-pertussis (DTPw) vaccine in a murine model of respiratory allergy induced by the HDM Dermatophagoides pteronyssinus (Derp). Methods: The protocol lasted 30 days. BALB/c mice were divided into 6 groups, which were sensitized subcutaneously (s.c.) with saline solution or Derp 50mcg, in three injections. Three groups were submitted to Derp alone or associated with diphtheria-tetanus (DT) vaccine and DTPw, respectively. The other three received saline solution with or without DT and DTPw vaccines. Subsequently mice underwent intranasal challenge with saline or Derp for 7 days and were sacrificed 24h after the last challenge. We measured serum specific IgE, IgG1 and IgG2a anti-Derp, airway resistance, elastance and hyperresponsiveness, density of polymorphonuclear (PMN) leukocytes infiltration in nasal mucosa, acidic nasal mucus content, cellularity in bronchoalveolar lavage (BAL) and lower airways remodeling. Results: HDM sensitized mice produced high levels of specific immunoglobulins, increased density of PMN leukocytes and acidic mucus in nasal mucosa, inflammatory cells in BAL due to macrophages and developed significant airway remodeling. Vaccines have led to a progressive reduction in specific IgE levels and Derp-DTPw group had lower levels, similar to groups sensitized with saline solution. DTPw vaccine did not alter the levels of IgG1 and IgG2a compared to Derp group. There was no difference between all six groups on behalf of ventilatory parameters and eosinophil counts in BAL. Both DT and DTPw vaccines inhibited PMN infiltrate in the nose and DTPw modulated acidic nasal mucus. Vaccinated groups had reductions in BAL cellularity and remodeling compared to controls, and Derp-DTPw group had better results than Derp-DT group. Conclusions: In this murine model of chronic respiratory allergy induced by HDM, DTPw vaccine decreased specific IgE, inflammatory cells in the nose and BAL, acidic nasal mucus and lower airways remodeling

A dermatite de contato alérgica (DCA) ao íon níquel (Ni2+) é uma dermatose inflamatória frequente nos países industrializados. Envolve a ativação de células T específicas ao Ni2+, seguida da proliferação e indução de um perfil misto de citocinas, tanto pró-inflamatórias quanto reguladoras, sugerindo que vários subtipos de células T (helper - Th e citotóxica - Tc) estão envolvidos na resposta imune. Este estudo teve como objetivo a análise das citocinas TNF-alfa, INF-y, IL-2, IL-4, IL-10, IL-13, IL-17 e IL-23 pela técnica de imuno-histoquímica, para tentar identificar a prevalência de um ou mais subtipos de células T (Th/Tc), nos eczemas crônico e agudo de pacientes com DCA ao Ni2+. Avaliamos 20 pacientes (17 mulheres e 3 homens, com idade mediana de 46 anos) apresentando eczema crônico, pelo contato cotidiano do paciente com o Ni2+. Foram coletadas duas biópsias de pele em cada um dos 20 pacientes, a primeira no local do eczema crônico ao Ni2+, antes da aplicação do teste de contato (TC); e a segunda no local do eczema agudo, provocado pelo TC com o sulfato de níquel, 48 horas após sua fixação, nas leituras positivo forte (++) ou positivo muito forte (+++). Foram 160 amostras de eczema agudo e 160 de eczema crônico, perfazendo um total de 320 amostras. Apenas três amostras foram excluídas devido a algum tipo de falha técnica, como, por exemplo, o descolamento dos cortes de pele da lâmina. Para a análise dos dados utilizou-se o software estatístico STATA versão 13. As amostras coradas revelaram resultados positivos para as oito citocinas estudadas, e estas apresentaram valores heterogêneos. Esta heterogeneidade foi medida pelo coeficiente de variação, indicando a variabilidade do conjunto dos dados obtidos. O TNF-alfa, IFN-y, IL-4, IL-13 e IL-17 tiveram prevalência maior no eczema crônico do que no eczema agudo, a IL-2 e IL-23 apresentaram maior prevalência no eczema agudo, em comparação com o eczema crônico e a IL-10 apresentou prevalência similar tanto no eczema agudo quanto no crônico, porém, estas prevalências foram muito baixas, em ambos os eczemas. O TNF-alfa foi a citocina que mais prevaleceu no eczema crônico e a IL-2 foi a mais prevalente no eczema agudo. Porém, estas prevalências foram estatisticamente significantes apenas para a IL-4 e IL-13. Verificamos, nos eczemas crônico e agudo, a presença de um perfil misto de citocinas dos subtipos de células T (Th/Tc), sugerindo que as respostas imunes são expressas ao mesmo tempo. Entretanto, são necessários mais estudos para uma compreensão mais ampla sobre o perfil das citocinas na DCA ao Ni2+, o que poderia levar a novas abordagens terapêuticas / Allergic contact dermatitis (ACD) to nickel (Ni+2) is a inflammatory dermatosis, common in industrialized countries. It involves the activation of nickel-specific T cells, followed by the proliferation and induction of a mixed profile of both proinflammatory and regulatory cytokines, suggesting that several T cell subtypes (helper - Th and cytotoxic - Tc) are involved in the immune response. This study aimed to analyze the cytokines TNF-alfa, INF-y, IL-2, IL-4, IL-10, IL-13, IL-17 and IL-23 using the immunohistochemistry technique in order to try to identify the prevalence of one or more T cell subtypes (Th/Tc) in the chronic and acute eczema of patients with ACD to Ni+2. We evaluated 20 patients (17 women and 3 men, median age of 46 years) with chronic eczema, by the patient\'s daily contact with Ni+2. Two skin biopsies were collected in each of the 20 patients, the first at the site of the chronic eczema to Ni+2, prior to the application of the contact test (CT); and the second at the site of acute eczema caused by CT with nickel sulphate, 48 hours after its fixation in the strong positive (++) or very strong positive (+++) readings. There were 160 samples of acute eczema and 160 of chronic eczema, a total of 320 samples. Only three samples were excluded due to some kind of technical failure, such as detachment of the skin cuts from the microscope slide. Statistical software STATA version 13 was used to analyze the data. The stained samples showed positive results for the eight cytokines studied, and these presented heterogeneous values. This heterogeneity was measured by the coefficient of variation, indicating the variability of the data set obtained. TNF-alfa, IFN-y, IL-4, IL-13 and IL-17 had a higher prevalence in chronic eczema than in acute eczema, IL-2 and IL-23 were more prevalent in acute eczema compared to chronic eczema and IL-10 presented similar prevalence in both acute and chronic eczema, however, a very low prevalence in both eczema. TNF-alfa was the most prevalent cytokine in chronic eczema and IL-2 was the most prevalent in acute eczema. However, these prevalences were statistically significant only for IL-4 and IL-13. In chronic and acute eczema, we observed the presence of a mixed cytokine profile of the T cell subtypes (Th/Tc), suggesting that immune responses are expressed at the same time. However, further studies are needed for a broader understanding of the cytokine profile in ACD to Ni+2, which could lead to new therapeutic approaches

INTRODUÇÃO: A conjuntivite alérgica é a forma mais comum de doença alérgica que afeta o olho. Neste trabalho, desenvolvemos um modelo murino reprodutível e simular a doença humana, para possibilitar o estudo dos mecanismos fisiopatológicos da conjuntivite alérgica crônica. MÉTODOS: Imunizamos os camundongos BALB/c e C57Bl/6 com extrato do ácaro Dermatophagoides pteronyssinus (Dpt). Foi realizada a dissecção dos linfonodos ilíacos e para-aórticos, e a enucleação dos olhos. O plasma obtido pela punção cardíaca foi utilizado para a dosagem de IgE e IgG totais e específicas para Dpt. Os olhos enucleados foram enviados para estudo anátomo-patológico da conjuntiva e córnea. RESULTADOS: 1) Houve uma diferença estatisticamente significante entre as duas linhagens (BALB/c e C57Bl/6) para os grupos imunizados com 5 ?g e 500 ?g na gradação clínica e histopatológica, dosagens de IgE Total e Específica, proliferação de linfócitos específica para Dpt e IgG Específica, e na dosagem das IL-5, IL-8 e IL-13; 2) Os níveis de IgG Total não se mostraram significantes para as duas linhagens nos grupos imunizados com 5 ?g e 500 ?g; 3) Os níveis de IL-4 e IL-10 tiveram uma diferença significante nos animais da linhagem BALB/c imunizados com 5 ?g e 500 ?g, mas não nos camundongos da linhagem C57BI/6; 4) Os níveis de IFN-? foram maiores nos camundongos C57BI/6 que receberam as menores quantidades de antígeno. Porém nos camundongos BALB/c o fenômeno foi o inverso; 5) O exame histológico revelou afilamento corneano, infiltrado linfocítico corneano e conjuntival, degeneração da conjuntiva e úlceras de córnea nos animais que obtiveram as maiores gradações clínicas da doença (camundongos BALB/c imunizados com 500 ?g de Dpt e camundongos C57Bl/6 imunizados com 5 ?g. CONCLUSÃO: Desenvolveu-se um modelo simples e reprodutível de conjuntivite alérgica crônica do Dermatophagoides pteronyssinus depois de repetidas exposições ao antígeno, o qual apresenta manifestações clínicas similares à doença humana, e serve como modelo de estudo dos mecanismos imunológicos envolvidos no desenvolvimento da doença / INTRODUCTION: Allergic conjunctivitis is the most common form of allergic disease that affects the eye. In this study we developed a reproducible mouse model and simulated human disease to enable the study of physiopathologic mechanisms of chronic allergic conjunctivitis. METHODS: We immunized BALB/c and C57B1/6 mice with Dermatophagoides Pteronyssinus (Dpt) dust mite extract. The iliac and paraaortic lymph nodes were dissected and the eyes were enucleated. The plasma obtained by cardiac puncture was used to measure Total and Specific IgE and IgG and Dpt-specific. Lymph node cells were used to measure Dpt specific proliferation cytokine detection in the culture supernatant. Eyes were enucleated for histopathological analysis of the conjunctiva and cornea. RESULTS: 1) There was a statistically significant difference between the 2 strains (BALB/c and C57B1/6) for the 2 groups immunized with 5?g and 500?g in the clinical and histopathological score, Total and Specific IgE dosages, proliferation Dpt-specific lymphocytes, dust mite Specific IgG, and in the levels of IL-5, IL-8 and IL-13; 2) The level of Total IgG was not significantly different between the 2 lineages in the groups immunized with 5?g and 500?g; 3) The levels of IL-4 and IL-10 showed a significant difference in BALB/c mice sensitized with 5?g and 500?g, but not in C57B1/6 mice; 4) The IFN-? levels were higher in C57B1/6 mice that received the smallest quantity of antigen. But among BALB/c mice the phenomenon was inversed; 5) The histological examination revealed that there was a tapering of the cornea, lymphocytic infiltration of the cornea and conjunctiva, conjunctival degeneration and corneal ulcers in the animals that developed the highest clinical scores of disease (BALB/c immunized with 500 ug of Dpt and C57Bl/6 immunized with 5 ?g of Dpt). Conclusion: A simple and reproducible model of chronic allergic conjunctivitis to Dermatophagoide pteronyssinus was developed after repeated exposure to the allergen, which exhibit similar clinical manifestations as human disease, therefore serving as a template to study the immunological mechanisms involved in the development of disease

A dermatite de contato alérgica (DCA) ao íon níquel (Ni2+) é uma dermatose inflamatória frequente nos países industrializados. Envolve a ativação de células T específicas ao Ni2+, seguida da proliferação e indução de um perfil misto de citocinas, tanto pró-inflamatórias quanto reguladoras, sugerindo que vários subtipos de células T (helper - Th e citotóxica - Tc) estão envolvidos na resposta imune. Este estudo teve como objetivo a análise das citocinas TNF-alfa, INF-y, IL-2, IL-4, IL-10, IL-13, IL-17 e IL-23 pela técnica de imuno-histoquímica, para tentar identificar a prevalência de um ou mais subtipos de células T (Th/Tc), nos eczemas crônico e agudo de pacientes com DCA ao Ni2+. Avaliamos 20 pacientes (17 mulheres e 3 homens, com idade mediana de 46 anos) apresentando eczema crônico, pelo contato cotidiano do paciente com o Ni2+. Foram coletadas duas biópsias de pele em cada um dos 20 pacientes, a primeira no local do eczema crônico ao Ni2+, antes da aplicação do teste de contato (TC); e a segunda no local do eczema agudo, provocado pelo TC com o sulfato de níquel, 48 horas após sua fixação, nas leituras positivo forte (++) ou positivo muito forte (+++). Foram 160 amostras de eczema agudo e 160 de eczema crônico, perfazendo um total de 320 amostras. Apenas três amostras foram excluídas devido a algum tipo de falha técnica, como, por exemplo, o descolamento dos cortes de pele da lâmina. Para a análise dos dados utilizou-se o software estatístico STATA versão 13. As amostras coradas revelaram resultados positivos para as oito citocinas estudadas, e estas apresentaram valores heterogêneos. Esta heterogeneidade foi medida pelo coeficiente de variação, indicando a variabilidade do conjunto dos dados obtidos. O TNF-alfa, IFN-y, IL-4, IL-13 e IL-17 tiveram prevalência maior no eczema crônico do que no eczema agudo, a IL-2 e IL-23 apresentaram maior prevalência no eczema agudo, em comparação com o eczema crônico e a IL-10 apresentou prevalência similar tanto no eczema agudo quanto no crônico, porém, estas prevalências foram muito baixas, em ambos os eczemas. O TNF-alfa foi a citocina que mais prevaleceu no eczema crônico e a IL-2 foi a mais prevalente no eczema agudo. Porém, estas prevalências foram estatisticamente significantes apenas para a IL-4 e IL-13. Verificamos, nos eczemas crônico e agudo, a presença de um perfil misto de citocinas dos subtipos de células T (Th/Tc), sugerindo que as respostas imunes são expressas ao mesmo tempo. Entretanto, são necessários mais estudos para uma compreensão mais ampla sobre o perfil das citocinas na DCA ao Ni2+, o que poderia levar a novas abordagens terapêuticas / Allergic contact dermatitis (ACD) to nickel (Ni+2) is a inflammatory dermatosis, common in industrialized countries. It involves the activation of nickel-specific T cells, followed by the proliferation and induction of a mixed profile of both proinflammatory and regulatory cytokines, suggesting that several T cell subtypes (helper - Th and cytotoxic - Tc) are involved in the immune response. This study aimed to analyze the cytokines TNF-alfa, INF-y, IL-2, IL-4, IL-10, IL-13, IL-17 and IL-23 using the immunohistochemistry technique in order to try to identify the prevalence of one or more T cell subtypes (Th/Tc) in the chronic and acute eczema of patients with ACD to Ni+2. We evaluated 20 patients (17 women and 3 men, median age of 46 years) with chronic eczema, by the patient\'s daily contact with Ni+2. Two skin biopsies were collected in each of the 20 patients, the first at the site of the chronic eczema to Ni+2, prior to the application of the contact test (CT); and the second at the site of acute eczema caused by CT with nickel sulphate, 48 hours after its fixation in the strong positive (++) or very strong positive (+++) readings. There were 160 samples of acute eczema and 160 of chronic eczema, a total of 320 samples. Only three samples were excluded due to some kind of technical failure, such as detachment of the skin cuts from the microscope slide. Statistical software STATA version 13 was used to analyze the data. The stained samples showed positive results for the eight cytokines studied, and these presented heterogeneous values. This heterogeneity was measured by the coefficient of variation, indicating the variability of the data set obtained. TNF-alfa, IFN-y, IL-4, IL-13 and IL-17 had a higher prevalence in chronic eczema than in acute eczema, IL-2 and IL-23 were more prevalent in acute eczema compared to chronic eczema and IL-10 presented similar prevalence in both acute and chronic eczema, however, a very low prevalence in both eczema. TNF-alfa was the most prevalent cytokine in chronic eczema and IL-2 was the most prevalent in acute eczema. However, these prevalences were statistically significant only for IL-4 and IL-13. In chronic and acute eczema, we observed the presence of a mixed cytokine profile of the T cell subtypes (Th/Tc), suggesting that immune responses are expressed at the same time. However, further studies are needed for a broader understanding of the cytokine profile in ACD to Ni+2, which could lead to new therapeutic approaches

As relações bidirecionais entre o Sistema Nervoso e o Sistema Imune são relevantes para a manutenção da homeostase do organismo. Estudos realizados em nosso laboratório mostraram que 14 dias de coabitação com um conspecífico doente (injetado com células do tumor de Ehrlich-TAE) produziu mudanças comportamentais, endócrinas e imunológicas. Este estudo analisa os efeitos da convivência com um animal portador de tumor de Ehrlich em camundongos OVA sensibilizados e desafiados sobre a resposta alérgica pulmonar. Pares de camundongos machos foram separados em três grupos: naïve, controle e experimental. Os animais do grupo naïve não foram manipulados sendo utilizados para a avaliação de parâmetros basais. Um animal de cada par dos grupos experimental e controle foi imunizado com OVA. No dia D(0), os animais imunizados receberam uma dose reforço de OVA. No dia D(0) os camundongos do grupo experimental que não foram manipulados foram inoculados com 5x106 células de tumor de Ehrlich; seus companheiros de gaiola moradia foram designados CAD (companheiro do animal doente). Os camundongos não perturbados de cada par do grupo controle foram tratados (i.p.) em D(0) com 0,9% de NaCl, sendo designados CAS (companheiro do animal saudável). O desafio intranasal com OVA foi realizado nos camundongos CAS e CAD nos dias D(12) e D(13); colheram-se o sangue e os tecidos no dia D(14). Em comparação com o grupo CAS, os camundongos do grupo CAD apresentaram 14 dias após a coabitação: (1) aumento do número de eosinófilos e neutrófilos no LBA, (2) diminuição na contagem de células da medula óssea, (3) aumento do níveis de IL-4 e IL-5 e diminuição de IL-10 e INF-ϒ no sobrenadante do LBA, (4) aumento dos níveis de IgG1-OVA, diminuição dos níveis de IgG2a-OVA e nenhuma alteração na IgE-OVA no sangue periférico, (5) aumento na expressão de ICAM-1, VCAM-1 e L-selectina em granulócitos do LBA, (6) diminuição da reatividade da traquéia à metacolina in vitro, (7) aumento da desgranulação de mastócitos, (8) nenhuma alteração nos níveis plasmáticos de corticosterona, (9) aumento dos níveis de adrenalina e noradrenalina plasmáticas, (10) diminuição no tempo de permanência e entradas nos braços abertos do labirinto em cruz elevado, (11) diminuição da expressão de IL-6 no PVN e (12) diminuição da expressão de C-fos no PFC. Estes resultados mostram que a convivência forçada com um animal portador de um tumor ascitico de Ehrlich exacerba a inflamação alérgica pulmonar de camundongos. Eles foram discutidos como decorrentes da estimulação do Sistema Nervoso Autônomo Simpático (SNS) pelo estresse psicológico gerado pela coabitação com o parceiro doente, via liberação de adrenalina e noradrenalina e consequente mudança no perfil de citocinas Th1/Th2 para uma resposta do tipo Th2. Esta alteração seria, provavelmente, um dos mecanismos responsáveis pelo aumento do recrutamento celular para as vias aéreas dos camundongos do grupo CAD. / The bidirectional relationship between the nervous system and the imune system is relevant for homeostatic organism maintenance. Studies from our laboratory showed that 14 days of cohabitation with a sick conspecific (injected with Ehrlich tumor cells-TAE) produced behavioral, endocrinological and immunological changes. This study analyzes the effects of cohabitation with an Ehrlich tumor-bearing animal on ovalbumin (OVA)-induced lung inflammatory response in mice. Pairs of male mice were separate into three groups: naïve, control and experimental. Animals of the naïve group were kept undisturbed being used for assessment of basal parameters. One animal of each experimental and control pair of mice was immunized with OVA. On D(0), these OVA-immunized animals received an OVA booster. At this day (D(0)) the experimental mice that were kept undisturbed were inoculated with 5x106 Ehrlich tumor cells; their immunized cage-mates were then referred as to CSP(companion of sick partner). The undisturbed mice of each control pair were i.p. treated on D(0) with 0.9% NaCl; their sensitized cage-mate were subsequently referred as CHP (companion of health partner). The intranasal OVA challenge was performed on CSP and CHP mice on D(12) and D(13); blood and tissue collection were performed on D (14). Fourteen days after cohabitation, in comparison to the CHP mice, the CSP mice displayed the following: (1) an increased number of eosinophils and neutrophils in the BAL, (2) a decreased bone marrow cell count, (3) increased levels of IL-4 and IL-5 and decreased levels of IL-10 and INF-ϒ in the BAL supernatant, (4) increased levels of IgG1-OVA, decreased levels of IgG2a-OVA and no changes in OVA-specific IgE in the peripheral blood, (5) increased expression of ICAM-1, VCAM-1 and L-selectin in the BAL granulocytes, (6) decreased tracheal reactivity to metacholine measured in vitro , (7) increased mast cell degranulation, (8) no changes in plasma corticosterone levels (9) increased levels of plasmatic adrenaline and noradrenaline, (10) decreased time and % of entries on open arms of elevated plus maze, (11) decreased expression of IL-6 on PVN and (12) decreased expression of C-fos on PFC. These results suggest that cohabitation with an Ehrlich tumor bearing mice exacerbates allergic lung inflammatory response in mice. Most probably, the changes observed in CSP mice are a consequence of the psychological stress induced by forced cohabitation with the sick partner. Strong involvement of the sympathetic nervous system through adrenaline and noradrenaline release and a shift of the Th1/Th2 cytokine profile toward a Th2 response were considered to be the mechanisms underlying the cell recruitment to the animal´s airways.

Introdução: Asma e rinite alérgicas são doenças inflamatórias crônicas das vias aéreas cuja principal etiopatogenia é a reação de hipersensibilidade ao ácaro da poeira. O único tratamento específico que modifica a história natural da doença é a imunoterapia alérgeno-específica (ITAE). Porém, as reações adversas ainda são uma dificuldade na consolidação da ITAE como forma de tratamento. Um meio de minimizar as reações e maximizar os efeitos terapêuticos é o uso de adjuvantes, entre eles vacinas e lipopolissacárides bacterianos, que objetivam aumentar o desvio da resposta imune de perfil T-helper (TH) 2 para TH1. A vacina de Bordetella pertussis de célula inteira (Pw) mostrou ter um papel protetor em modelos experimentais de asma induzida por ovalbumina. Porém, seu papel na alergia respiratória induzida por ácaros ainda não é conhecido. Nosso objetivo foi avaliar os efeitos da vacina tríplice bacteriana (difteria-tétano-coqueluche - DTPw) em um modelo murino de alergia respiratória crônica induzida pelo ácaro Dermatophagoides pteronyssinus (Derp). Métodos: O protocolo teve duração de 30 dias. Camundongos BALB/c foram divididos em 6 grupos, os quais foram sensibilizados por via subcutânea com solução salina ou Derp 50mcg, em três injeções. Três grupos foram imunizados com Derp, apenas com o ácaro ou associado as vacinas de difteria-tétano (DT) e DTPw, respectivamente. Os outros três receberam soro fisiológico, com ou sem vacinas DT e DTPw. Os animais, posteriormente, sofreram desafio intranasal com soro fisiológico ou Derp por 7 dias e foram sacrificados 24 horas após o último desafio. Medimos IgE, IgG1 e IgG2a séricas específicas anti-Derp; resistência, elastância e hiperresponsividade das vias aéreas; densidade de leucócitos polimorfonucleares (PMN) e área de muco ácido no epitélio nasal; celularidade no lavado bronco-alveolar (BAL); e remodelamento das vias aéreas inferiores. Resultados: Os animais sensibilizados com Derp produziram altos níveis de imunoglobulinas específicas, apresentaram aumento da densidade de PMN e da área de muco ácido nasal, elevação das células inflamatórias no BAL às custas de macrófagos e remodelamento significativo das vias aéreas. As vacinas levaram à redução dos níveis de IgE específica e o grupo Derp-DTPw apresentou os menores níveis, similares aos grupos salina. A vacina DTPw não alterou os níveis de IgG1 ou IgG2a em relação ao grupo Derp. Não houve diferença entre todos os 6 grupos quanto aos parâmetros ventilatórios e quanto à contagem de eosinófilos no BAL. As vacinas DT e DTPw inibiram o infiltrado PMN nasal e DTPw modulou a produção do muco ácido. Os grupos vacinados tiveram redução da celularidade no BAL e do remodelamento em comparação com os controles, com resultados mais expressivos no grupo Derp-DTPw em relação ao grupo Derp-DT. Conclusões: Neste modelo murino de alergia respiratória crônica induzida por ácaro, a vacina DTPw diminuiu a IgE específica sérica, as células inflamatórias no nariz e no BAL, o muco ácido nasal e o remodelamento das vias respiratórias inferiores. / Background: Asthma and allergic rhinitis are chronic inflammatory diseases of the airways whose primary etiology is hypersensitivity reaction to house dust mite (HDM). The only specific treatment which modifies the natural history of the disease is the allergen specific immunotherapy (ASIT). However, adverse reactions are still a difficulty in consolidating ASIT as a good treatment option. One way to minimize adverse reactions and maximize therapeutic effects is the use of adjuvants, including bacterial lipopolysaccharide and vaccines that aim to shift immune response profile from T helper (TH) 2 to TH1. Bordetella pertussis whole-cell vaccine (Pw) has shown to have a protective role in experimental models of ovalbumin-induced asthma. Nevertheless, its role in respiratory allergy induced by HDM is unknown. Our objective was to evaluate the effects of diphtheria-tetanus-pertussis (DTPw) vaccine in a murine model of respiratory allergy induced by the HDM Dermatophagoides pteronyssinus (Derp). Methods: The protocol lasted 30 days. BALB/c mice were divided into 6 groups, which were sensitized subcutaneously (s.c.) with saline solution or Derp 50mcg, in three injections. Three groups were submitted to Derp alone or associated with diphtheria-tetanus (DT) vaccine and DTPw, respectively. The other three received saline solution with or without DT and DTPw vaccines. Subsequently mice underwent intranasal challenge with saline or Derp for 7 days and were sacrificed 24h after the last challenge. We measured serum specific IgE, IgG1 and IgG2a anti-Derp, airway resistance, elastance and hyperresponsiveness, density of polymorphonuclear (PMN) leukocytes infiltration in nasal mucosa, acidic nasal mucus content, cellularity in bronchoalveolar lavage (BAL) and lower airways remodeling. Results: HDM sensitized mice produced high levels of specific immunoglobulins, increased density of PMN leukocytes and acidic mucus in nasal mucosa, inflammatory cells in BAL due to macrophages and developed significant airway remodeling. Vaccines have led to a progressive reduction in specific IgE levels and Derp-DTPw group had lower levels, similar to groups sensitized with saline solution. DTPw vaccine did not alter the levels of IgG1 and IgG2a compared to Derp group. There was no difference between all six groups on behalf of ventilatory parameters and eosinophil counts in BAL. Both DT and DTPw vaccines inhibited PMN infiltrate in the nose and DTPw modulated acidic nasal mucus. Vaccinated groups had reductions in BAL cellularity and remodeling compared to controls, and Derp-DTPw group had better results than Derp-DT group. Conclusions: In this murine model of chronic respiratory allergy induced by HDM, DTPw vaccine decreased specific IgE, inflammatory cells in the nose and BAL, acidic nasal mucus and lower airways remodeling

Los objetivos fueron conocer la incidencia atmosférica de polen en Santander y su repercusión sobre la población MÉTODOS: Método volumétrico de Hirst; influencia de la meteorología en el periodo de mayo a julio de 1998 a 2002, mediante medidas de asociación lineal entre variables meteorológicas diarias y los recuentos de polen diarios de gramíneas; pruebas cutáneas; relación entre las ventas mensuales de antihistamínicos en la ciudad y los recuentos mensuales de polen de gramíneas; y la relación entre los recuentos diarios y semanales de polen y variables meteorológicas y de contaminación con las asistencias a urgencias por rinoconjuntivitis y por asma en niños. Encuesta sobre síntomas de asma de la IUATLD y un cuestionario sobre 11 factores del interior. RESULTADOS: La media anual de polen total fue 8.604, el polen de familia poaceae supuso el mayoritario (28 %). La temperatura máxima fue la única variable explicativa de los recuentos de polen en su periodo. El 100% de los pacientes estaban sensibilizados a poaceae. Se encontró relación mensual de los recuentos de poaceae con las ventas de antihistamínicos (rs= 0,7; p<0,01) y relación diaria y semanal de dichos recuentos con las asistencias por rinoconjuntivitis en niños y adultos. Las asistencias a urgencias por asma en niños (2.396) y adultos (1.665) fueron más frecuentes de septiembre a diciembre. Se encontró relación durante el periodo de mayo a julio de los recuentos semanales de poaceae y de temperatura con las asistencias a urgencias en niños. La prevalencia de síntomas de asma en adultos fue de 15% (9,8 - 20,2). Mayor frecuencia de síntomas de asma entre quienes tenían un animal en casa : 41% frente a 14%; OR: 4,2 (1,9 - 9,2) y quienes habían vivido en Santander sus primeros 10 años de vida: 22% frente a 11%; OR: 2,9 (1,1 - 7,5). CONCLUSIONES: El polen de poaceae es el predominante en la atmósfera de Santander y el que sensibiliza a todos los polínicos. Se demostró una relación del mismo con la rinoconjuntivitis en niños y adultos, y en el asma bronquial en niños. Existe una elevada prevalencia de síntomas de asma en adultos de Santander, con probable implicación de factores de interior. / Objectives: To determine the atmospheric pollen counts in Santander and their effect on this population. METHODS: Hirst volumetric method; analysis of the effect of weather on the pollen counts from 1998 to 2002 by linear association measures; skin tests; association between antihistamine sales and pollen counts; association between daily and weekly pollen counts and weather and pollution variables and Emergency Room admittances caused by rhinitis-conjunctivitis and asthma in children. Survey about asthma symptoms (IUATLD) and indoor risks for asthma. RESULTS: Average annual pollen count was 8,604. Poaceae family predominated (28%). Maximum temperature was the only explanatory variable for pollen counts during its period. All the hay fever patients were sensitized to poaceae. We found a relationship between monthly pollen counts and monthly antihistamine sales (rs= 0.7; p<0.01) and daily and weekly association with admittances for rhinitis-conjunctivitis in children and adults. Admittances to E.R. caused by asthma in children (2396) and in adults (1665) were more frequent from september to december. During the period from may to july the asthma admittances of children were associated with weekly poaceae counts and weekly temperature. Prevalence of asthma symptoms in adults was 15% (9.8 - 20.2). Symptoms were more frequent among those with a pet: 41% vs 14%; OR: 4,2 (1.9-9.2) and among people who had lived in Santander during their first ten years of life: 22% vs 11%; OR: 2.9 (1.1-7.5). CONCLUSIONS: Poaceae pollen is the predominant in the atmosphere of Santander, all the hay fever patients are sensitised to it and there is a relationship between it and rhinitis-conjunctivitis in children and adults and between it and asthma in children. There is a high prevalence of symptoms of asthma in Santander; indoor factors are probably involved.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-30 / Objetivos: Comparar a avaliação objetiva da obstrução nasal, mensurada por rinometria acústica (RnA) (volume dos cinco primeiros centímetros da cavidade nasal, V5) e rinomanometria anterior ativa (RMAA) (resistência nasal total, RNT), com a avaliação subjetiva dada pelo escore de obstrução (EO, escala de 0 a 10) em crianças e adolescentes com rinite alérgica e controles. Método: Trinta pacientes, entre sete e 18 anos, com rinite alérgica persistente e trinta controles participaram do estudo. As variáveis objetivas foram mensuradas em triplicata e de acordo com recomendações mais utilizadas. O EO foi referido para a cavidade nasal total e para as narinas em separado. RNT, V5 e EO foram mensurados nos momentos basal e após indução de obstrução nasal (100% aumento RNT após provocação nasal com histamina). Os pacientes com rinite alérgica foram tratados com corticosteroide tópico nasal (mometasona 100 mcg/dia por 15 dias) e avaliados 21 (±5) dias após. Resultados: Houve correlações significantes e negativas entre RNT e V5 em todos os grupos e situações de avaliação. Os valores de r encontrados variaram de -0,73 a -0,32, sendo a correlação encontrada no grupo rinite, no momento basal, na avaliação da narina mais obstruída a mais forte (r= -0,727). Para a cavidade nasal total não houve correlação significante entre EO e RNT e entre EO e V5 em todos os momentos estudados. Em relação à narina mais obstruída, verificamos correlação significante e negativa para EO e RNT (r= -0,51) e significante e positiva para EO e V5 (r= 0,29), avaliando-se o grupo total no momento basal. Não houve diferenças nítidas nos coeficientes de correlação encontrados nos paciente e nos controles. Os coeficientes de correlação não se alteraram após a indução de obstrução nasal e após tratamento com corticosteroide nasal. De forma semelhante, as crianças mais novas apresentaram coeficientes de correlação semelhantes aos dos adolescentes mais velhos. Conclusões: Assim como já fora descrito para adultos, a avaliação objetiva da obstrução nasal por RnA (V5) e RMAA (RNT) não apresentou correlação significativa em relação à avaliação subjetiva (escore de obstrução), em crianças e adolescentes, ao avaliar-se a cavidade nasal como um todo, fato que ocorreu na avaliação unilateral da cavidade nasal. Houve forte correlação entre as avaliações objetivas. A presença de doença nasal crônica (rinite alérgica) não interferiu na correlação entre as avaliações objetivas e subjetivas da obstrução nasal. A indução aguda de obstrução nasal, o tratamento com corticosteroide nasal e a idade também parecem não induzir alterações nessa correlação. Sugere-se, portanto, utilidade no acréscimo de um método objetivo para avaliação da obstrução nasal nas pesquisas em rinologia e, na sua impossibilidade, a avaliação das narinas em separado. / Objectives: Compare the objective assessment of nasal obstruction, measured by acoustic rhinometry (ARM) (volume of the first five centimeters of the nasal cavity, V5) and active anterior rhinomanometry (AARMM) (total nasal resistance, TNR), with the subjective evaluation given by obstruction scores (OS, scale from 0 to 10) in children and adolescents with allergic rhinitis and controls. Method: Thirty patients, aged 7 to 18 years, with persistent allergic rhinitis and thirty controls were enrolled. The objective variables were measured in triplicate and according to existing recommendations. The OS was reported for the total nasal cavity and nostrils separately. TNR, V5 and EO were measured at baseline and in the moments after the induction of nasal obstruction (100% increase in NTS after nasal challenge with histamine). Patients with allergic rhinitis were treated with topical nasal corticosteroids, mometasone 100mcg/day for 15 days and assessed 21 (± 5) days later. Results: There were significant and negative correlations between TNR and V5 in all groups and evaluation situations. The r values ranged from -0.73 to -0.32, and the association found in rhinitis group, at baseline, to evaluate the strongest and most obstructed nostril (r = -0.727). For the nasal cavity, of no significant correlation between OS and TNR and between OS and V5 at all studied times. Regarding the most obstructed nostril, we found significant negative correlation for OS and TNR (r = -0.51) and significant and positive for OS and V5 (r = 0.29), evaluating the total group at baseline. There were no clear differences in the coefficients of correlation found in patients and controls. The correlation coefficients were not changed after the induction of nasal obstruction and after treatment with nasal corticosteroids. Similarly, younger children showed a correlation coefficient similar to those of older adolescents. Conclusions: As has been described for adults, the objective assessment of nasal obstruction ARM (V5) and RMAA (TNR) showed no significant correlation in relation to the subjective evaluation (obstruction score) in children and adolescents, when assessing the nasal cavity as a whole, which has been seen in the assessment of unilateral nasal cavity. There was strong correlation between the objective evaluations. The presence of chronic nasal disease (allergic rhinitis) did not affect the correlation between objective and subjective assessments of nasal obstruction. The acute induction of nasal obstruction, nasal corticosteroid treatment and age also seem to induce changes in this correlation. It is suggested, therefore, usefulness in adding an objective method for evaluating nasal obstruction in the polls in rhinology and, failing which, the evaluation of the nostrils separately. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

INTRODUÇÃO: A conjuntivite alérgica é a forma mais comum de doença alérgica que afeta o olho. Neste trabalho, desenvolvemos um modelo murino reprodutível e simular a doença humana, para possibilitar o estudo dos mecanismos fisiopatológicos da conjuntivite alérgica crônica. MÉTODOS: Imunizamos os camundongos BALB/c e C57Bl/6 com extrato do ácaro Dermatophagoides pteronyssinus (Dpt). Foi realizada a dissecção dos linfonodos ilíacos e para-aórticos, e a enucleação dos olhos. O plasma obtido pela punção cardíaca foi utilizado para a dosagem de IgE e IgG totais e específicas para Dpt. Os olhos enucleados foram enviados para estudo anátomo-patológico da conjuntiva e córnea. RESULTADOS: 1) Houve uma diferença estatisticamente significante entre as duas linhagens (BALB/c e C57Bl/6) para os grupos imunizados com 5 ?g e 500 ?g na gradação clínica e histopatológica, dosagens de IgE Total e Específica, proliferação de linfócitos específica para Dpt e IgG Específica, e na dosagem das IL-5, IL-8 e IL-13; 2) Os níveis de IgG Total não se mostraram significantes para as duas linhagens nos grupos imunizados com 5 ?g e 500 ?g; 3) Os níveis de IL-4 e IL-10 tiveram uma diferença significante nos animais da linhagem BALB/c imunizados com 5 ?g e 500 ?g, mas não nos camundongos da linhagem C57BI/6; 4) Os níveis de IFN-? foram maiores nos camundongos C57BI/6 que receberam as menores quantidades de antígeno. Porém nos camundongos BALB/c o fenômeno foi o inverso; 5) O exame histológico revelou afilamento corneano, infiltrado linfocítico corneano e conjuntival, degeneração da conjuntiva e úlceras de córnea nos animais que obtiveram as maiores gradações clínicas da doença (camundongos BALB/c imunizados com 500 ?g de Dpt e camundongos C57Bl/6 imunizados com 5 ?g. CONCLUSÃO: Desenvolveu-se um modelo simples e reprodutível de conjuntivite alérgica crônica do Dermatophagoides pteronyssinus depois de repetidas exposições ao antígeno, o qual apresenta manifestações clínicas similares à doença humana, e serve como modelo de estudo dos mecanismos imunológicos envolvidos no desenvolvimento da doença / INTRODUCTION: Allergic conjunctivitis is the most common form of allergic disease that affects the eye. In this study we developed a reproducible mouse model and simulated human disease to enable the study of physiopathologic mechanisms of chronic allergic conjunctivitis. METHODS: We immunized BALB/c and C57B1/6 mice with Dermatophagoides Pteronyssinus (Dpt) dust mite extract. The iliac and paraaortic lymph nodes were dissected and the eyes were enucleated. The plasma obtained by cardiac puncture was used to measure Total and Specific IgE and IgG and Dpt-specific. Lymph node cells were used to measure Dpt specific proliferation cytokine detection in the culture supernatant. Eyes were enucleated for histopathological analysis of the conjunctiva and cornea. RESULTS: 1) There was a statistically significant difference between the 2 strains (BALB/c and C57B1/6) for the 2 groups immunized with 5?g and 500?g in the clinical and histopathological score, Total and Specific IgE dosages, proliferation Dpt-specific lymphocytes, dust mite Specific IgG, and in the levels of IL-5, IL-8 and IL-13; 2) The level of Total IgG was not significantly different between the 2 lineages in the groups immunized with 5?g and 500?g; 3) The levels of IL-4 and IL-10 showed a significant difference in BALB/c mice sensitized with 5?g and 500?g, but not in C57B1/6 mice; 4) The IFN-? levels were higher in C57B1/6 mice that received the smallest quantity of antigen. But among BALB/c mice the phenomenon was inversed; 5) The histological examination revealed that there was a tapering of the cornea, lymphocytic infiltration of the cornea and conjunctiva, conjunctival degeneration and corneal ulcers in the animals that developed the highest clinical scores of disease (BALB/c immunized with 500 ug of Dpt and C57Bl/6 immunized with 5 ?g of Dpt). Conclusion: A simple and reproducible model of chronic allergic conjunctivitis to Dermatophagoide pteronyssinus was developed after repeated exposure to the allergen, which exhibit similar clinical manifestations as human disease, therefore serving as a template to study the immunological mechanisms involved in the development of disease