AGUIAR, F. R. M. Biofilmes do complexo Sporothrix schenckii: formação e sensibilidade in vitro. 2016. 97 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-01-18T14:13:06Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_frmaguiar.pdf: 2310499 bytes, checksum: 79ee5f07e4f132b127796c1e72156695 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-01-18T14:13:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_frmaguiar.pdf: 2310499 bytes, checksum: 79ee5f07e4f132b127796c1e72156695 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-18T14:13:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_frmaguiar.pdf: 2310499 bytes, checksum: 79ee5f07e4f132b127796c1e72156695 (MD5) Previous issue date: 2016-11-17 / Sporotrichosis is a cosmopolitan subcutaneous mycosis, found mainly in tropical and subtropical areas of Latin America, caused by species of Sporothrix schenckii complex. The aim of this study was to demonstrate the capacity of Sporothrix schenckii complex to produce in vitro biofilms and to determine the profile of these biofilms against to classical antifungal drugs. Four species from Sporothrix schenckii complex were used: S. brasiliensis (n=10), S. schenckii sensu stricto (n=2), S. globosa (n=2) and S. mexicana (n=4). The formation of biofilms was performed by transferring inoculum of 2 x 105 conidia/mL for microdilution plates, which were incubated at 25 °C for 5 days. After each day of incubation, XTT and Crystal Violet assays were made to determine the metabolic activity and biomass of biofilm, respectively. For susceptibility tests, three different concentrations (planktonic MIC, 10 x MIC and 50 x MIC) of antifungals amphotericin B (AMB), caspofungin (CAS), ketoconazole (KTC), voriconazole (VRC) and fluconazole (FLC) were transferred to biofilm wells, which were incubated for 72 hours at 25 °C. The biofilms profile then antifungal drugs presence was determined by the XTT and crystal violet assays. Biofilms were produced in Thermanox™ coverslips for viewing by optical microscopy with congo-red staining, scanning electron microscopy and confocal microscopy. It was found that all species from S. schenckii complex are strong biofilm-forming, with no difference formation between them. Absorbance of biofilm after drug exposure showed that biomass and metabolic activity was significantly reduced (p<0.05), mainly in S. brasiliensis. Antifungal drugs tested showed metabolic activity and biomass reduction, especially at concentrations 50 times higher than the planktonic MICs, demonstrating the protective increase in sessile form when compared for planktonic form. / A esporotricose é uma micose subcutânea cosmopolita, encontrada, principalmente, em áreas tropicais e subtropicais da América Latina, sendo causada por espécies do complexo Sporothrix schenckii. O objetivo deste estudo foi demonstrar a capacidade de fungos do complexo S. schenckii de produzir biofilmes in vitro e determinar o perfil desses biofilmes frente às drogas antifúngicas clássicas. Foram utilizadas 4 espécies do complexo Sporothrix schenckii: S. brasiliensis (n=10), S. schenckii sensu stricto (n=2), S. globosa (n=2) e S. mexicana (n=4). A formação dos biofilmes foi feita através da transferência de inóculos de 2 x 105 conídios/mL para placas de microdiluição, que foram incubadas a 25 °C por 5 dias. Após cada dia de incubação, realizaram-se ensaios de XTT e Cristal violeta, para se determinar a atividade metabólica e biomassa dos biofilmes, respectivamente. Para os ensaios de sensibilidade, três concentrações diferentes (MIC planctônico, 10 x MIC e 50 x MIC) dos antifúngicos anfotericina B (AMB), caspofungina (CAS), cetoconazol (KTC), voriconazol (VRC) e fluconazol (FLC) foram transferidas para os poços com biofilmes, que foram incubados por 72 horas a 25 °C. O perfil dos biofilmes frente às drogas antifúngicas foi determinado através de ensaios de XTT e cristal violeta. Biofilmes foram produzidos em lamínulas de Thermanox™ para visualização através de microscopia óptica com coloração de vermelho-congo, microscopia eletrônica de varredura e microscopia confocal. Verificou-se que todas as espécies do complexo S. schenkii são fortes formadoras de biofilme, não havendo diferença de formação entre as espécies. A absorbância dos biofilmes após exposição às drogas demonstrou que a biomassa e a atividade metabólica foram reduzidas de forma significativa (p<0,05), principalmente, em S. brasiliensis. Os antifúngicos testados mostraram redução na atividade metabólica e biomassa, principalmente, em concentrações 50 vezes maiores que os MICs planctônicos, demonstrando o incremento protetivo que a forma séssil possui frente à forma planctônica.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:04:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9605_1.pdf: 412573 bytes, checksum: 422dbdb03973f6f3d662a1a50c3e02cb (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / A ação conservante de óleos essenciais de especiarias em alimentos tem se destacado como alternativa natural para a substituição de aditivos químicos. Objetivou-se avaliar a efetividade dos óleos essenciais de plantas em diferentes concentrações em inibir o crescimento de fungos (Aspergillus flavus- 4540; Fusarium moniliforme- 4542; Penicillium vaiabil- 4534; Penicillium funiculosum- 4511; Penicillium pinhophill- 4546) in vitro e incidência de Aspergillus flavus em milho (Zea mays L). As técnicas adotadas foram: determinação das atividades antifúngicas em discos de papel de filtro em meio sólido, determinação da Concentração Inibitória Mínima- CIM e Concentração Fungicida Mínima- CFM através da técnica de diluição em caldo bem como do crescimento micelial radial em Agar e a visualização do efeito do óleo essencial de orégano na morfologia de A. flavus através da microscopia óptica e eletrônica. Sementes de milho previamente desinfetadas foram tratadas com diferentes concentrações dos óleos essenciais e inoculadas com A. flavus, sendo avaliadas quanto à incidência do fungo e percentual de germinação de sementes, de acordo com o Regulamento de Análise de Sementes- RAS (2009). Os resultados demonstraram que as cepas foram mais sensíveis aos óleos essenciais de orégano, cravo e canela. A CIM variou de 0,06-2,0 &#956;L. mL -1 e a CFM variou de 0,12- 4,0 &#956;L. mL -1, de acordo com o fungo e o óleo em estudo. O óleo essencial de orégano retardou o crescimento micelial radial até o 8º dia. Os óleos de cravo e canela tiveram menor eficiência, apresentando o crescimento dos fungos a partir do 2º dia. As principais alterações morfológicas do A. flavus foram hifas curtas, largas e deformadas apresentando dilatações ao longo de sua estrutura, bem como a formação de clamidósporos. Na Microscopia Eletrônica de Varredura, o efeito mais drástico foi observado com 0,12 &#956;L.mL-1 do óleo de orégano, o qual inibiu o processo de germinação, verificando-se esporos sem germinar ou apresentando apenas os tubos germinativos. Na germinação de sementes de milho, observou-se que o tratamento com óleo de orégano apresentou 94,9% de germinação, não diferindo dos controles (p>0,05). Já com os óleos de cravo e canela apresentaram uma redução acima de 25% do percentual de germinação, quando comparado com os demais tratamentos. Em sementes de milho, o A. flavus se mostrou mais sensível quando em contato com o óleo essencial de orégano, onde se utilizou concentrações bem inferiores (0,12-1,0 &#956;L.mL-1) aos dos óleos de canela e cravo (2,0-16,0 &#956;L.mL-1). Conclui-se que o óleo essencial de orégano exerce significante efeito fungicida, sendo mais eficiente na inibição do crescimento fúngico in vitro e em milho, podendo ser usado racionalmente na conservação de alimentos

RESUMEN: “Susceptibilidad antifúngica y filogenia molecular de especies del género Fusarium de interés clínico” Fusarium solani, Fusarium oxysporum y Fusarium verticillioides, así como otras especies del género menos frecuentes, son importantes patógenos oportunistas para el hombre, para las cuales aún no existe un tratamiento eficaz. Además, la sensibilidad al tratamiento antifúngico varía en función de la especie, por lo que la identificación a nivel de especie de los aislados clínicos es de gran interés. Sin embargo, esta identificación resulta compleja en base a sus caracteristicas morfológicas. Las nuevas técnicas de biología molecular han permitido facilitar su identificación así como establecer criterios más adecuados para delimitar las diferentes especies del género. Por todo ello, en la presente tesis se ha pretendido: seleccionar los marcadores genéticos más adecuados para la identificación molecular de las especies del género; determinar la existencia de grupos filogenéticos diferenciados entre los aislados de cada una de las especies identificadas y evaluar la actividad in vitro de diferentes antifúngicos, frente a las especies de Fusarium de interés clínico y, averiguar si existen diferencias en cuanto a la sensibilidad antifúngica de los grupos filogenéticos obtenidos. El análisis multigénico realizado con aislados de F. solani ha confirmado que constituye un complejo de especies, que presenta una elevada resistencia frente a todos los antifúngicos ensayados. El análisis del gen del EF-1α ha confirmado la identificación de cuatro grupos filogenéticos dentro del complejo de F. oxysporum que han mostrado diferente sensibilidad antifúngica in vitro frente a la terbinafina. La región TUB del gen de la β-tubulina ha resultado ser un excelente marcador molecular para identificar el resto de especies de interés clínico que, en su mayoría, han mostrado sensibilidad frente a la terbinafina. / Summary: “Antifungal susceptibility and molecular phylogeny of the genus fusarium of clinical interest” Introduction. Fusarium solani, Fusarium oxysporum and Fusarium verticillioides, as well as other less frequent species of the genus, are important opportunists pathogenic to Man for which there is still no effective treatment. In addition, sensitivity to effective antifungal treatments varies depending on species, therefore identification of samples to species level is of primary interest. However, identification on the basis of morphological characteristics can be difficult. New techniques in molecular biology have made identification easier and allowed more adequate criteria to be established in order to delimit the species of the genus. Aims. To select better genetic markers for the molecular identification of the species of the genus, to determine the existence of phylogenetic groups that can delimit samples of each of the species identified, to evaluate the in vitro activity of different antifungals against species of Fusarium of clinical interest, and to find out if there are any differences with respect to the antifungal sensitivity of the phylogenetic groups obtained. Findings. Multigenetic analysis carried out with samples of F.solani have confirmed that it is a species complex that presents a high resistance against all the antifungals tested. The analysis of gene EF-1α has confirmed the identification of four phylogenetic groups within the F.oxysporum complex that have shown different antifungal sensitivity in vitro against terbinafine. The TUB region of the gene of β-tubulina has proven to be an excellent molecular marker for identifying the other species of clinical interest that have shown sensitivity primarily against terbinafine.

RIBEIRO, Louise Helena de Freitas. Potencial biotecnológico do óleo essencial de Vitex gardneriana na prevenção e controle de biofilmes de espécies de Candida de importância clínica. 2016. 42 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia e Recursos Naturais)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Anderson Silva Pereira (anderson.pereiraaa@gmail.com) on 2017-01-19T17:02:11Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_lhfribeiro.pdf: 1781281 bytes, checksum: 5b8b915c1304185cf1394d9878ae000c (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-01-23T20:13:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_lhfribeiro.pdf: 1781281 bytes, checksum: 5b8b915c1304185cf1394d9878ae000c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-23T20:13:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_lhfribeiro.pdf: 1781281 bytes, checksum: 5b8b915c1304185cf1394d9878ae000c (MD5) Previous issue date: 2016 / Candida species have been considered as important causes of nosocomial fungal infections. Their ability to form biofilms has been related to high mortality rates in patients with candidemia. Due to the capacity to colonize surfaces of catheters and other medical devices, Candida biofilms may play important roles in systemic infections, which are difficult to treat by conventional antifungal agents. Therefore, the discovery of new drugs useful in the prevention and eradication of Candida biofilms is of great interest. Essential oils are excellent sources of bioactive molecules with antifungal and antibiofilm potential. Some species of the genus Vitex have proven antifungal activity against Candida species. However, to this date, there are no reports on the antifungal activity exerted by Vitex gardneriana, which is found mainly in Brazil. This study aimed to evaluate the biotechnological potential of the essential oil from V. gardneriana in inhibiting Candida planktonic and biofilm forms. In order to assess the oil antifungal potential, Candida albicans and C. tropicalis planktonic cells and biofilms were treated with different oil concentrations and its action on cell growth, biomass formation and viability of biofilm-entrapped cells was determined. The essential oil was able in reducing significantly C. albicans (71% to 9%) and C. tropicalis (33% to 3%) planktonic growth. Regarding biofilm mass formed in the presence of the oil, all tested concentrations (2.5% to 0.039%) reduced C. albicans and C. tropicalis biomass. The same effect was not seen on the viability of C. albicans biofilm-entrapped cells, since no reduction was achieved. On the other hand, all tested concentrations reduced C. tropicalis viability. Concerning pre-formed biofilms, C. albicans biomass was reduced in most of the concentrations evaluated, whereas C. tropicalis biomass was reduced at concentrations between 2.5% and 0.625%. For both species, the oil was able in reducing the number of viable cells of pre-formed biofilms in all tested concentrations. To the best of our knowledge, this is the first report describing the V. gardneriana essential oil ability in inhibiting C. albicans and C. tropicalis planktonic and biofilm forms. Thus, the study showed that the oil action affected a major virulence factor of Candida, which can direct the new anti-Candida drugs development. / Leveduras do gênero Candida são consideradas as principais causas de infecções fúngicas nosocomiais. Sua capacidade de formar biofilmes é um fator de virulência importante, estando relacionado com as taxas de mortalidade em pacientes com candidemia. Ao colonizar superfícies de cateteres e outros dispositivos médicos, os biofilmes podem causar infecções sistêmicas de difícil tratamento pelos antifúngicos convencionais. Portanto, existe uma grande necessidade da descoberta de novos agentes antifúngicos capazes de prevenir e erradicar biofilmes formados por espécies de Candida. Óleos essenciais são excelentes fontes de compostos bioativos com potencial antifúngico, além de sua comprovada capacidade antibiofilme. Algumas espécies do gênero Vitex têm demonstrado atividade antifúngica contra Candida, contudo não existem relatos sobre a espécie Vitex gardneriana, encontrada no sertão do Nordeste brasileiro. Nesse contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o potencial biotecnológico do óleo essencial de V. gardneriana quanto sua ação sobre em as formas planctônicas e biofilmes de espécies de Candida relacionadas a infecções. As leveduras foram submetidas a diferentes concentrações do óleo essencial (2,5% a 0,039%) e sua atividade antifúngica avaliada em relação ao crescimento planctônico, formação de biomassa e número de células viáveis dos biofilmes. Os resultados mostram que o óleo essencial foi capaz de reduzir significativamente o crescimento planctônico de C. albicans (71% a 9%) e de C. tropicalis (33% a 3%). Em relação aos biofilmes formados na presença do óleo essencial, todas as concentrações reduziram a biomassa de C. albicans, enquanto a biomassa de C. tropicalis foi inibida nas concentrações de 2,5% a 0,312%. O número de células viáveis de C. albicans não foi reduzido, porém todas as concentrações do óleo reduziram significativamente as unidades formadoras de colônia de C. tropicalis. Quanto aos biofilmes pré-formados, em C. albicans foi observada redução da biomassa na maioria das concentrações testadas, enquanto a biomassa de C. tropicalis foi reduzida nas concentrações 2,5%, 1,25% e 0,625%. O óleo essencial reduziu o número de células viáveis dos biofilmes pré-formados de ambas as espécies em todas as concentrações testadas. Este é o primeiro relato da propriedade do óleo essencial de V. gardneriana de inibir as formas planctônicas e biofilmes de C. albicans e C. tropicalis. Deste modo, o estudo demonstrou que a ação do óleo afetou especialmente um dos principais fatores de virulência de Candida, podendo direcionar o desenvolvimento de novas drogas anti- Candida.

Dissertação(mestrado) - Universidade Federal do Rio Grande, Programa de Pós-Graduação em Engenharia e Ciência de Alimentos, Escola de Química e Alimentos, 2008. / Submitted by Caroline Silva (krol_bilhar@hotmail.com) on 2012-09-13T19:06:33Z No. of bitstreams: 1 avaliao da atividade antifngica e antimicotoxinas de extratos de farelo de arroz cebola e microalga chlorella.pdf: 988335 bytes, checksum: 8413be9e7b4208c1612064781396a048 (MD5) / Approved for entry into archive by Bruna Vieira(bruninha_vieira@ibest.com.br) on 2012-09-24T22:59:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 avaliao da atividade antifngica e antimicotoxinas de extratos de farelo de arroz cebola e microalga chlorella.pdf: 988335 bytes, checksum: 8413be9e7b4208c1612064781396a048 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-24T22:59:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 avaliao da atividade antifngica e antimicotoxinas de extratos de farelo de arroz cebola e microalga chlorella.pdf: 988335 bytes, checksum: 8413be9e7b4208c1612064781396a048 (MD5) Previous issue date: 2008 / A contaminação fúngica acarreta alterações na qualidade nutricional e no valor econômico dos produtos alimentícios podendo causar danos patológicos em plantas, animais e humanos. A identificação da atividade antifúngica e antimicotoxinas, em extratos de diferentes fontes que exibem propriedades de inibir naturalmente o crescimento de fungos e subseqüente produção de micotoxinas (metabólitos secundários produzidos por fungos toxigênicos), abre a perspectiva de empregar de forma mais eficiente os tecidos vegetais empregando-os como conservadores naturais. Entre os compostos com propriedades inibidoras de crescimento fúngico e produção de micotoxinas, naturalmente presentes em alimentos, destacam-se os compostos fenólicos, que por sua estrutura química dificultam a atividade de enzimas metabólicas de microrganismos. As matérias-primas escolhidas foram: o farelo de arroz, a cebola e a microalga Chlorella phyrenoidosa. Aos três tecidos são atribuídas propriedades funcionais, sendo que os dois primeiros são abundantes na região sul e comercializados com baixo valor agregado. A chlorella é empregada em dietas especiais como fonte de compostos bioativos especialmente aminoácidos essenciais e compostos antioxidantes. Este trabalho teve como objetivo determinar o teor de compostos fenólicos, a atividade antifúngica sobre o desenvolvimento dos fungos dos gêneros Rhyzopus sp., Aspergillus oryzae, Aspergillus flavus, e Fusarium graminearum e a atividade antimicotoxinas sobre o fungo Aspergillus flavus, em extratos de farelo de arroz, cebola e Chlorella. Os compostos fenólicos da cebola foram extraídos em três sistemas solventes: aquoso, metanólico e acetato de etila. Os compostos fenólicos do farelo de arroz e da chlorella foram extraídos com metanol, sendo quantificados colorimetricamente com reagente de Folin-Ciocalteau. O conteúdo de fenóis totais nos vegetais variou de 68 μgfenóis.g-1 em extrato aceto-etílico de cebola a 3012 μgfenóis.g-1 em extrato aquoso de cebola. Os extratos foram triados sobre os fungos Rhyzopus sp e Aspergillus oryzae que foram os modelos para estimar a inibição de crescimento fúngico. Esporos de Aspergillus flavus foram utilizados para estudar o efeito inibidor da produção de aflatoxina B1 e B2. Os extratos testados apresentaram algum grau de inibição do desenvolvimento fúngico, sendo a chlorella a que apresentou maior inibição em relação aos outros extratos, em todos os fungos testados, chegando a 31% de inibição/μg fenol total. Após o 7°, 14° e 21° dia de incubação foram realizadas extrações de micotoxinas do meio de crescimento pelo método adaptado de TANAKA et al., (2000). O extrato fenólico de Chlorella inibiu totalmente a produção de micotoxinas em relação ao controle. Estes resultados mostram que a ação antifúngica está naturalmente presente em alguns tecidos vegetais e que encontrar a forma de extraí-los e aplicá-los como conservadores de alimentos é muito promissor para agregar valor aos alimentos, principalmente aqueles de baixo valor comercial. / The fungal contamination cause alterations in nutritional quality and economic value of food products and can cause pathological damages in plants, animals and humans. The identification of the antifungal activity and antimycotoxin in extracts of sources different that show properties of naturally inhibiting the fungal growth and subsequent mycotoxins production (metabolites secondary produced by toxic fungal), open the perspective of employing in the more efficient form the vegetable tissue employing them like natural conservatives. Between compounds with properties inhibiting of fungal growth and mycotoxins production, naturally present in foods, stand out the phenolics, what for your chemical structure make difficult the activity of metabolic enzymes of microrganisms. The chosen raw materials were: the rice bran, the onion and the microalga Chlorella phyrenoidosa. To three tissues functional properties are attributed being that two first ones are abundant in the south region and marketed with low collected value. The Chlorella is employed in special diets like source of bioactives compounds and antioxidant compounds. This objective study was determine the tenor of phenolics compounds, the antifungal activity on the development of the fungal Rhyzopus sp, Aspergillus oryzae, Aspergillus flavus and Fusarium graminearum and antimycotoxin activity on the fungal Aspergillus flavus, in extracts of bran of rice, onion and Chlorella. The phenolic compounds of the onion were extracted in three solvent systens: aqueous, methanolic and ethila acetate. The phenolic compounds of the bran of rice and of the Chlorella were extracted with methanol, and quantified with reagent of Folin-Ciocalteau. The total phenolics levels in vegetables ranged between 68 μgphenolicg-1 in aceto-ethylic extract of anion and 3012 μgphenolic g-1 in aqueous extract of onion. The extracts was used in antifungal tests against strains of Rhyzopus sp and Aspergillus oryzae that were the models to appreciate the inhibition of fungal growth. Spores of Aspergillus flavus were used to study the inhibiting effect of the aflatoxins B1 and B2 production. The tested extracts presented some degree of inhibition of the fungal development, being the Chlorella Who presented tested bigger inhibition regasding other extracts, in all the fungal, is reaching 31% of inhibition/μgphenolic . After 7°, 14 and 21° Day of incubation were carried out extractions of mycotoxins from growth médium were determined by TANAKA et al., method (2000). The phenolic extract of chlorella inhibited totally the mycotoxins production regarding the control. These results show that the antifungal activity is present naturally in some vegetable tissues and that to find the formo of extracting to apply as conservatives of foods is very promising to values collect to the foods, principally those of low commercial value.

Orientador: James Venturini / Resumo: A paracoccidioidomicose (PCM) é micose sistêmica causada por fungos do gênero Paracoccidioides. As principais formas clínicas da doença são aguda/subaguda e crônica (FC), sendo que nessa última, a maioria dos pacientes desenvolvem fibrose pulmonar e enfisema. Estudos prévios demonstraram que pacientes FC, na forma ativa da doença, apresentam elevada produção de mediadores inflamatórios, incluindo a IL-1β. Essa citocina, diferente das demais, é produzidas por uma plataforma protéica intracelular denominada inflamassoma que pode ser ativadas por patógenos e sinais de dano do hospedeiro. Considerando-se que os mecanismos de ativação do inflamassoma em pacientes com PCM não são conhecidos, o presente estudo teve por objetivo determinar a expressão de genes envolvidos na ativação do inflamassoma e a produção de citocinas por monócitos e macrófagos alveolares de pacientes com PCM em diferentes momentos do tratamento antifúngico.Nossos resultados demonstram a ativação do NLRP3-inflamassoma, caracterizada pela elevada expressão de NLRP3, CASP1 e IL1B por monócitos. Esses achados corroboram a contribuição do NLRP3-inflamassoma na patogênese da PCM também em pacientes. / Abstract: Paracoccidioidomycosis (PCM) is a systemic mycosis caused by species of the genus Paracoccidioides . The main clinical forms of the disease are acute/subacute (AF) and chronic (CF), and in the latter, most patients develop pulmonary fibrosis and emphysema. Previous studies showed that CF patients in active disease, exhibit elevated production of inflammatory mediators, including IL-1β. This cytokine, different from the others, are produced by an intracellular multiprotein platform called inflammasome that can be activated by pathogens and host signs of damage. Considering that the activation mechanisms of the inflammasome in patients with PCM are not know, this study aimed to determine the expression of genes involved in inflammasome activation and cytokine production by monocytes and alveolar macrophages from PCM patients at different times of antifungal treatment. Our results demonstrate the activation of the NLRP3 inflammasome-characterized by high expression of NLRP3, CASP1 and IL1B by monocytes. These findings corroborate the contribution of NRLP3-inflamassome in pathogenesis of PCM also in patients. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:30:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2766_1.pdf: 404111 bytes, checksum: 048cd3267b3ab035befe8def6401879c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / Esse trabalho teve como foco a obtenção de novos derivados tiazolidínicos da série 5-benzilideno-3-(4-tercbutil-benzil)-tiazolidina-2,4-diona (LPSF/GQ) como candidatos a novos fármacos antiinflamatórios e de derivados de 2-[(arilideno)- amino]-4,5-cicloalquil-tiofeno-3-carbonitrila (LPSF/SB) como candidatos a novos antifúngicos. Todos os compostos sintetizados tiveram suas estruturas devidamente comprovadas por RMN 1H e outras técnicas espectroscópicas. A atividade antiinflamatória in vivo dos derivados tiazolidínicos foi avaliada exclusivamente para o composto (LPSF/GQ-89), que foi a droga de escolha por apresentar o substituinte 4-metilsulfonil em sua estrutura. O modelo de peritonite induzida por carragenina foi utilizado para avaliação da fase aguda da inflamação, e se pôde constatar um percentual de inibição de 74%. Para avaliação do efeito antiinflamatório durante a fase crônica foi utilizado o modelo de indução da arteriosclerose em camundongos. Para avaliação do potencial antifúngico dos derivados de tiofeno, 8 compostos foram avaliados in vitro, em um teste de sensibilidade, frente a 42 isolados clínicos de Candida e 2 de Cryptococcus neoformans, comparadas ao fluconazol e anfotericina B. A maioria dos compostos SB´s apresentou valores de CFM de 800 a 3.200 &#956;g/mL. O composto (LPSF/SB-36) foi o mais ativo da série, com valores de CFM (100-800 &#956;g/mL). Todos os compostos foram sintetizados com um alto rendimento, comprovando a validade das rotas sintéticas empregadas

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-06-30T16:59:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação- Raphael Santana.pdf: 1198352 bytes, checksum: 2ddd13ab9df70bdaf76d80dd5d481f49 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-30T16:59:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação- Raphael Santana.pdf: 1198352 bytes, checksum: 2ddd13ab9df70bdaf76d80dd5d481f49 (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / FACEPE / Actinobactérias são bactérias Gram-positivas formadoras de filamentos ramificados que se destacam pela produção de metabólitos secundários, como antimicrobianos, antitumorais, fitohormônios e corantes naturais. Diante disso, este trabalho teve o objetivo de determinar o potencial biotecnológico de actinobactérias da coleção UFPEDA contra Candida spp. Para avaliação da atividade biotecnológica, 32 actinobactérias foram testadas contra sete isolados clínicos de Candida spp. utilizando diferentes meios de cultura para o crescimento (ALA, ISP-4, AY, ISP-3) e temperaturas (37 ºC ou 45 ºC). No ensaio primário, foi evidenciada atividade apenas quando as actinobactérias foram cultivadas em meio ISP-3 a temperatura de 37 ºC. Dessas, apenas 2 linhagens (6,25 %) apresentaram atividade antifúngica com halo de inibição variando entre 11 mm e 18 mm. As duas linhagens produtoras de metabólitos secundários com atividades antifúngicas não apresentaram diferença estatística, por isso foi selecionada a linhagem G24 por apresentar um pigmento na cor vermelha para dar seguimento às análises. A fermentação da linhagem (G24) foi realizada para avaliar atividade antifúngica, biomassa e pH, durante 5 dias, utilizando diferentes meios (MPE, M1 e ISP-3),sendo tais parâmetros monitorados a cada 24 horas. O melhor meio para produção de metabólitos secundários foi ISP-3 fermentado durante 48 h em pH 7.0, sendo evidenciados halos de inibição de 13 a 18 mm e biomassa de 0,1 g/mL de meio. Estabelecidas às condições, foi realizada a extração do princípio bioativo, sendo evidenciada atividade apenas para biomassa quando extraído em acetato de etila. A concentração mínima inibitória (CMI) do extrato bruto variou de 125 μg/mL a 62,5 μg/mL para Candida spp testadas. Análise Cromatográfica do Extrato Bruto as frações semi-purificadas foram analisadas por cromatografia em camada delgada (CCD) sendo evidenciadas duas frações, uma com atividade antifúngica e outra um corante natural. As características morfológicas do isolado G24 foram analisadas por microscopia óptica, sendo observados esporos verticilados pertencente ao gênero Streptomyces. O gene 16S rDNA foi amplificado e enviado para sequenciamento, sendo identificada como Streptomyces sp. Diante destes resultados, podemos concluir que a linhagem (Streptomyces sp), isolado da rizosfera de Caesalpinia pyramidalis tul, do bioma Caatinga, apresenta uma significativa atividade antifúngica e necessita de estudos espectroscópios para caracterização do composto bioativo e do corante. / Actinobacteria are forming Gram-positive bacteria of branched filaments that stand out for the production of secondary metabolites such as antibiotics, antitumor, phytohormones and naturias dyes. Given this, this study aimed to determine the biotechnological potential of actinomycetes of UFPEDA collection against Candida spp. To evaluate the biotechnological activity, 32 actinomycetes were tested against seven clinical isolates of Candida spp., Using different culture media (ALA, ISP-4, AY, ISP-3) and temperatures (37 ° C and 45 ° C). In the primary test, activity was detected only when the actinomycetes were grown in ISP-medium 3 to a temperature of 37 ° C. Of these, only 2 strains (6.25%) showed antifungal activity with inhibition zone ranging between 11 mm and 18 mm. Fermentation of strain (G24) was used to evaluate antifungal activity, biomass and pH for 5 days, using different media (MPE M1 and ISP-3), these parameters being monitored every 24 hours. The best medium for production of secondary metabolites ISP-3 was fermented for 48 h at pH 7.0, being evidenced inhibition zones 13 to 18 mm and biomass of 0.1 g / ml medium. Established conditions, the extraction of bioactive principle has been performed and demonstrated activity only when biomass extracted into ethyl acetate. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the crude extract ranged from 125 mg / mL to 62.5 mg / mL for Candida spp tested. In chemical prospecting, semi-purified fractions were analyzed by thin layer chromatography (TLC) was evidenced two fractions, one with antifungal activity and one with a natural dye. The morphological characteristics of isolated G24 were analyzed by optical microscopy, observed verticilados spores belonging to the genus Streptomyces. The 16S rDNA gene was amplified and sent to sequencing, being identified as Streptomyces sp. Given these results, we can conclude that the line (G24) (Streptomyces sp), isolated from the rhizosphere of Caesalpinia pyramidalis tul, the Caatinga biome, presents a significant antifungal activity and requires spectroscopes studies to characterize the bioactive compound and the dye.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-04-04T21:35:12Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Dayane Kelly Sabec Pereira - 2015.pdf: 7161660 bytes, checksum: 9e90c47a6af39120173e8142ccb64d21 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-04-05T11:15:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Dayane Kelly Sabec Pereira - 2015.pdf: 7161660 bytes, checksum: 9e90c47a6af39120173e8142ccb64d21 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-05T11:15:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Dayane Kelly Sabec Pereira - 2015.pdf: 7161660 bytes, checksum: 9e90c47a6af39120173e8142ccb64d21 (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) Previous issue date: 2015-09-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The increased bacterial resistance is an important factor in the number of deaths in hospitals, hampering the cure and elevating spending on assistance. Thus it is urgent to develop new drugs, synthetic or natural origin. A group of compounds that have been prominent are the thiosemicarbazones (TSCs) and semicarbazones (SCs) due to low cost of synthesis and broad spectrum of action, antifungal, antibacterial, anti-inflammatory and antiviral. In this study tests were performed with four synthesized chemical binders, denominated: H2L0; H2L1; H2L2 and H2L3 and H2L3 the four compounds complexed ligand named: Bipy-fenil-Sn, Bipy-nit-Cu, (H2L3)butil-Sn and (H2L3)bipy-Sn submitted to quantitative tests to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Fungicidal Concentration (MFC) and also evaluated for cytotoxicity cardiomyocytes and peritoneal macrophages. The standard strains ATCC (American Type Culture Collection) used were bacteria Staphylococcus aureus and Klebsiella pneumoniae, yeast and fungi: Candida albicans, Candida tropicalis and Candida parapsilosis. The tests were performed in triplicate in 96 well plates, incubated for 24 hours at 35 ° C, with specific medium. The observed antibacterial activity of the compounds H2L1, H2L2 and H2L3 on S. aureus, presented MIC in range from 3.7 to 19.7 μg/mL; to K. pneumoniae the MICs of the compounds were over 500 μg/mL. The compound H2L3, inhibited the growth of three species of Candida tested MIC between 5.6 - 6.2 μg/mL. Because of this, the binder was chosen for complexation with metals. The complexed compounds obtained MICs 1.6 to 245.8 μg/mL. MFC tests with the compounds H2L0, H2L1 and H2L2 showed no change in the growth curve of the colonies to the three species of Candida. As for the compounds complexed MFC tests indicated a fungicidal effect of bipy-nit-Cu, bipy-fenil-Sn, only on C. albicans at concentrations of 250 μl/mL and less than 62.5 μl/mL. Cytotoxicity tests revealed that the compounds exhibit cytotoxicity under moderate conditions. In the compounds complexed with metals, antifungal activity showed up similar to H2L3 isolated compound, obtaining a satisfactory result for further research with compounds under study, presenting a great antimicrobial potential which is no prospect of a future metalodrug. / O aumento da resistência bacteriana é um fator importante no número de ocorrência de mortes em ambientes hospitalares, dificultando a cura e elevando os gastos com a assistência. Desta forma faz-se urgente o desenvolvimento de novos fármacos, sintéticos ou de origem natural. Um grupo de compostos que tem se destacado são as tiossemicarbazonas (TSCs) e as semicarbazonas (SCs), por apresentarem baixo custo de síntese e amplo espectro de ação, antifúngica, antibacteriana, antiinflamatória e antiviral. Neste trabalho foram utilizados quatro ligantes químicos sintetizados, denominados: H2L0; H2L1; H2L2 e H2L3 e quatro compostos complexados ao ligante H2L3 denominados: Bipy-fenil-Sn, Bipy-nit-Cu, (H2L3)butil-Sn e (H2L3)bipy-Sn submetidos a testes quantitativos para determinação da Concentração Inibitória Mínima (MIC) e da Concentração Fungicida Mínima (MFC) e também avaliada a citotoxidade em cardiomiócitos e macrófagos peritoneais. As cepas de padrão ATCC (American Type Culture Collection) utilizadas foram de bactérias Staphylococcus aureus e Klebsiella pneumoniae, e fungos leveduriformes: Candida albicans, Candida tropicalis e Candida parapsilosis. Os testes foram realizados em triplicata, em placas 96 poços, incubadas por 24 horas a 35ºC, com meio específico. A atividade antibactericida observada dos compostos H2L1, H2L2 e H2L3, sobre S. aureus, apresentou MIC na faixa de 3,7 a 19,7 μg/mL; para K. pneumoniae os MICs dos compostos foram superiores a 500 μg/mL. O composto H2L3, inibiu o crescimento das três espécies de Candida testadas com MIC entre 5,6 – 6,2 μg/ml. Devido a isso, este foi o ligante escolhido para a complexação com metais. Os compostos complexados obtiveram valores de MIC 1,6 a 245,8 μg/mL Os testes de MFC com os compostos H2L0, H2L1 e H2L2 não apresentaram alteração na curva de crescimento para as três espécies de Candida. Quanto aos compostos complexados, os testes de MFC apontaram um efeito fungicida do bipy-nit-Cu, bipy-fenil-Sn, somente sobre C. albicans, nas concentrações de 250 μl/mL e menores que 62,5 μl/mL. Os testes de citotoxidade revelaram que os compostos apresentam citotoxidade em condições moderadas. Nos compostos complexados com metais, a atividade antifúngica apresentou-se semelhante ao composto H2L3 isolado, obtendo um resultado satisfatório para novas pesquisas com os compostos em estudo, apresentando um ótimo potencial antimicrobiano ao qual há perspectiva de uma futura metalodroga.

Submitted by Karem Dantas (karem.c.dantas@gmail.com) on 2018-10-01T14:56:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação 2018 (Versão Final) HENRIQUE.pdf: 2771283 bytes, checksum: 0e6d05fb1c2089cb90d03b898c8779b0 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Roberto Gomes (mrobertosg@gmail.com) on 2018-10-01T17:35:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação 2018 (Versão Final) HENRIQUE.pdf: 2771283 bytes, checksum: 0e6d05fb1c2089cb90d03b898c8779b0 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-10-02T15:39:20Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação 2018 (Versão Final) HENRIQUE.pdf: 2771283 bytes, checksum: 0e6d05fb1c2089cb90d03b898c8779b0 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-02T15:39:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação 2018 (Versão Final) HENRIQUE.pdf: 2771283 bytes, checksum: 0e6d05fb1c2089cb90d03b898c8779b0 (MD5) Previous issue date: 2018-04-30 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Traditional logging activities in Brazil are waste generators and much of it is underutilized due to lack of knowledge about their use. In partnership work, the research group "Plants of the Amazon: Chemistry, Chemosystematics and Biological Activity", use as wood lefovers from the Wood Technology Laboratory (LTM) of the National Institute of Amazonian Research (INPA) as a research source, to provide the scientific community with chemical and biological knowledge about the wood of different species. In this study the remains of the wood of Protium puncticulatum (Burseraceae) were available and used to chemical research and evaluation of antifungal activity. After the chromatographic fractionations and the analysis by Nuclear Magnetic Resonance (NMR) spectroscopy, the work with the hexane extract resulted in the mixture of triterpenes α and β-amirina, in addition to lupeol; of steroids β-sitosterol and stigmasterol. The fractionation with methanolic extract led to the isolation of the lignans 7-oxo-parabenzolactone and 7'-hydroxy-9α-methylcubebin. Considering the high biological potential of the compounds belonging to the class of lignans, the antifungal test was carried out with the lignans isolated from the wood residues against the strains of Cryptococcus neoformans (ATCC90112), Cryptococcus gattii (ATCC32269) and Candida albicans (ATCC60193). The lignan 7'-hydroxy-9α-methylcubebin showed higher activity against the strains of C. neoformans and C. gattii (MIC 160 μg/ml) by broth microdilution technique. / As atividades madeireiras tradicionais no Brasil são geradoras de resíduos e grande parte é subutilizada por falta de conhecimento sobre seu aproveitamento. Em trabalho de parceria, o grupo de pesquisa “Plantas da Amazônia: Química, Quimiossistemática e Atividade Biológica” utiliza as sobras de madeira do Laboratório de Tecnologia da Madeira (LTM) do Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA) como fonte de pesquisa, para fornecer a comunidade científica conhecimentos químicos e biológicos sobre a madeira de diferentes espécies. Nesse trabalho as sobras da madeira de Protium puncticulatum (Burseraceae) foram estudadas na investigação química e avaliação da atividade antifúngica. Após os fracionamentos cromatográficos e análise por espectroscopia por Ressonância Magnética Nuclear (RMN), o trabalho com o extrato hexânico resultou na obtenção em mistura dos triterpenos lupeol, de α e β-amirin e dos esteroides β-sitosterol e estigmasterol. O fracionamento com extrato metanólico conduziu ao isolamento das lignanas 7-oxo-parabenzolactona e 7’-hidroxi-9α-metillcubebina. Considerando o alto potencial biológico das substâncias pertencente à classe das lignanas, foi realizado o ensaio antifúngico com as lignanas isoladas dos resíduos madeireiros frente às cepas de Cryptococcus neoformans (ATCC90112), Cryptococcus gattii (ATCC32269) e Cândida albicans (ATCC60193). A lignana 7’-hidroxi-9α-metillcubebina apresentou maior atividade contra as cepas de C. neoformans e C. gattii (CIM 160 μg/ml) pela técnica de microdiluição em caldo.