In this work, six triazene compounds are assayed to DNA cleavage activity. The same six triazenes and the drug Asercit® (dacarbazine) are assayed to antibacterial activity and toxicity to Artemia salina Leach.: 1,3-bis-(phenyl)triazene-1-N-hidroxide (T1), 1-(4-bromophenyl)-3-(4-nitrophenyl)triazene, (T2), 1-(4-azophenyl)-3-(4-nitrophenyl)triazene (T3) ,1,3-bis-(4-azophenyl-triazene) (T4), 1,3-bis-(2-bromophenyl)triazene (T5), 1-(4-carboxyphenyl)-3-(4-azophenyl)triazene (T6) and 5-(3,3-dimethyl-1-triazenyl)imidazol-4-carboxamide (dacarbazine, Asercit®). Triazene T1 cleaves approximately 50 % of plasmid DNA (pBSKII and pUC18, 3.75 mM, 50ºC/24 hours, Tris.HCl buffer 200 mM pH 8.0). Hydroxyl radical scavengers (glycerol 0.1 and 1.0 %, DMSO 0.04 M and tiourea 0.04 M) and argon atmosphere not interfere in DNA cleavage by T1. The Kb of T1 determinated by spectrofotometric titrations with DNA are 4.50 x 101 M-1 (pH 6,5), 1.00 x 102 M-1 (pH 7,0) e 2.33 x 102 M-1 (pH 8,0). T1, T6 and Asercit® are the more actives in antibacterial activity with CIM/CBM of even 16/64 μg/ml. LC50 more lower determinated by toxicity to A. salina are to T1 (0.081 ± 0.008 μg/ml), T5 (0.076 ± 0.011 μg/ml) and T6 (0.077 ± 0.007 μg/ml). Theses studies show the wide biological activity conferred by triazene compounds. / Neste estudo, seis compostos triazenos são avaliados quanto à atividade de clivagem do DNA. Os mesmos seis triazenos e o medicamento Asercit® (dacarbazina) são avaliados quanto à atividade antibacteriana e toxicidade frente à Artemia salina Leach.: 1,3-bis-(fenil)triazeno-1-N-hidróxido (T1), 1-(4-bromofenil)-3- (4-nitrofenil)triazeno (T2), 1-(4-azofenil)-3-(4-nitrofenil)triazeno (T3), 1,3-bis-(4- azofenil)triazeno (T4), 1,3-bis-(2-bromofenil)triazeno (T5), 1-(4-carbóxifenil)-3-(4- azofenil)triazeno (T6) e 5-(3,3-dimetil-1-triazenil)imidazol-4-carboxamida (dacarbazina, Asercit®). O triazeno T1 cliva aproximadamente 50 % do DNA plasmidial (pBSKII e pUC18, a 3,75 mM, 50 ºC/24 horas, tampão Tris.HCl 200 mM pH 8,0). Seqüestradores de radicais hidroxil (glicerol 0,1 e 1 %, DMSO 0,04 M e tiouréia 0,04 M) e atmosfera de argônio não interferem na clivagem do DNA por T1. Os Kb de T1 determinados por titulação espectrofotométrica com DNA são 4,50 x 101 M-1 (pH 6,5), 1,00 x 102 M-1 (pH 7,0) e 2,33 x 102 M-1 (pH 8,0). T1, T6 e o Asercit® são os mais ativos na atividade antibacteriana com CIM/CBM de até 16/64 μg/ml. As LC50 mais baixas determinadas pela toxicidade para A. salina são para T1 (0,081 ± 0,008 μg/ml), T5 (0,076 ± 0,011 μg/ml) e T6 (0,077 ± 0,007 μg/ml). Esses estudos mostram a ampla atividade biológica conferida pelos compostos triazenos.

202 f. / Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2013-03-27T15:07:41Z No. of bitstreams: 1 Tese Maria de Lourdes Completa.pdf: 1276547 bytes, checksum: ab45e41c0f73a5e85be2b1a246cbdb9e (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Hilda Fonseca(anahilda@ufba.br) on 2013-06-05T16:01:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese Maria de Lourdes Completa.pdf: 1276547 bytes, checksum: ab45e41c0f73a5e85be2b1a246cbdb9e (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-05T16:01:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Maria de Lourdes Completa.pdf: 1276547 bytes, checksum: ab45e41c0f73a5e85be2b1a246cbdb9e (MD5) Previous issue date: 2012 / Os triterpenos são extensamente distribuídos na natureza, principalmente no reino vegetal, pois se acredita que uma de suas funções fisiológicas nos vegetais seja de defesa química contra patógenos e herbívora. Podem ser encontrados na forma livre, como glicosídeos ou ainda derivados esterificados. Os ácidos oleanólico, betulínico e ursólico são os triterpenos ácidos mais comuns de ocorrência em vegetais e, possuem atividades antitumorais conhecidas. Este trabalho descreve um levantamento da ocorrência dessas substâncias e obtenção de derivados a partir deles e de ácidos graxos comuns. Os ácidos betulínico, ursólico e oleanólico, isolados das partes aéreas de Eriope blanchetii (Lamiaceae), foram submetidos a diferentes reações de esterificação obtendo-se assim 12 derivados esterificados na posição C-3. Tanto as substâncias isoladas quanto os derivados triterpênicos foram caracterizados por técnicas espectroscópicas no IV, RMN de 1H e 13C. Os derivados foram submetidos a testes de atividade antioxidante, letalidade frente Artemia salina e atividade antimicrobiana. Além disso, o ácido o-metoxicinâmico e ácido oleico foram submetidos a esterificação com etanol e metanol empregando-se Novoenzyme, comparando-se o rendimento do produto da reação a temperatura ambiente e sob irradiação de microondas / Salvador

Infections caused by microorganisms are a serious public health problem, mainly due to the emergence of multi drug resistant bacteria and fungi. Thus, the search for new alternative therapeutic approaches remains, being the goal of several research groups worldwide. The World Health Organization (WHO) recognizes the value and encourages the use of traditional medicine knowledge. Brazil has a large number of plant species and many of them are considered medicinal. However, despite quite a lot of them are popularly used they were not scientifically validated yet. The Northeast region hosts an extensive native flora with many species showing therapeutic properties, but most of them scientifically unproven. As an example, there were representatives of the families Rubiaceae and Polygonaceae, the latter being the fourth largest family between angiosperms. Amongst Alagoas flora there are species of these two families, such as Coccoloba mollis Casaretto (1844) (Polygonaceae), Triplaris americana Linnaeus (Polygonaceae) and Coutarea hexandra Schum. (Rubiaceae), which genera have species cited by its ethnomedicinal uses. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of crude extracts and fraction obtained from these plant species. Tests were carried out in Petri dishes by the disk diffusion method to evaluate relative effectiveness of tested samples as antimicrobial agents, by measuring zones of inhibition on culture of Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) e Candida albicans (ATCC 10231). The minimal inhibitory concentration (MIC) was determined by microdilution in BHI broth (Brain Heart Infusion). Plant species were also tested against Artemia salina larvae for preliminary evaluation of its acute toxicity. Of the 69 samples tested, 17 were effective against S. aureus. The methanol fraction from the dichloromethane extract of the roots of C. hexandra was considered the most promising because it presented the highest percentage bacterial growth inhibition. Of the samples subjected to MIC determination all were active with values ranging from 125 to 500 μg/mL. None of the tested species were active against P. aeruginosa or C. albicans. Regarding the toxicity on A. salina, in preliminary tests 32 of the 69 tested samples were non-toxic. The others were submitted to quantitative test 10 of them exhibited non-toxic effects. Among the samples that showed toxicity LC50 values ranged from 2.68 to 953.9 g/mL. The three plant species showed antibacterial activity against S. aureus. For toxicity against A. salina, the 27 toxic samples, 17 are species of the family Polygonaceae, and the rest of the species C. hexandra were toxic / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Alagoas / As infecções causadas por microrganismos são um sério problema de saúde pública, principalmente devido emergência de bactérias e fungos multiresistentes. Portanto, permanece a necessidade da busca de novas alternativas de tratamento, objetivo de vários grupos de pesquisa no mundo. A Organização Mundial de Saúde (OMS) reconhece o valor e incentiva o aproveitamento do conhecimento tradicional. O Brasil possui um grande acervo vegetal, e muitas plantas são consideradas medicinais. No entanto, apesar de várias delas serem utilizadas popularmente ainda não foram validadas cientificamente. A região Nordeste abriga uma vasta flora nativa com muitas espécies com propriedades terapêuticas, porém a maior parte ainda sem comprovação científica. Como exemplo, citam-se representantes das famílias Polygonaceae e Rubiaceae, sendo esta última a quarta família de maior diversidade entre as angiospermas. Na flora Alagoana encontram espécies destas duas famílias, como a Coccoloba mollis Casaretto (1844) (Polygonaceae), Triplaris americana Linnaeus (Polygonaceae) e Coutarea hexandra Schum. (Rubiaceae), cujos gêneros possuem espécies com registros sobre seu uso etnomedicinal. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de extratos brutos e frações obtidas destas espécies vegetais. Os testes foram conduzidos em placas de Petri pelo método de difusão em disco para avaliar o potencial antimicrobiano das amostras testadas, pela formação de halo de inibição frente à cultivos de Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) e Candida albicans (ATCC 10231). A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada pela técnica de microdiluição em caldo BHI (infusão de cérebro e coração). As espécies vegetais foram também testadas para avaliação preliminar de sua toxicidade aguda, frente a larvas de Artemia salina. Das 69 amostras testadas, 17 delas apresentaram atividade contra S. aureus, a fração em metanol proveniente de extrato em diclorometano da raiz de C. hexandra foi considerada a mais promissora por ter apresentado maior percentual de inibição do crescimento bacteriano. Submetidas a determinação da CIM todas foram ativas com valores entre 125 e 500 μg/mL. Nenhuma das espécies vegetais apresentou atividade contra P. aeruginosa, ou contra C. albicans. Com relação à toxicidade frente A. salina, das 69 amostras submetidas ao teste preliminar 32 foram atóxicas. As demais foram submetidas ao teste quantitativo sendo 10 atóxicas. Entre as amostras que apresentaram toxicidade os valores de CL50 variaram de 2,68 a 953,9 g/mL. As três espécies vegetais apresentaram atividade antibacteriana frente S. aureus, com relação a toxicidade frente A. salina, das 27 amostras tóxicas, 17 são das espécies da família Polygonaceae, e as demais da espécie C. hexandra foram tóxicas.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CeltonPM.pdf: 997721 bytes, checksum: 8ad0354bfbff2f87d7c01316f84484e6 (MD5) Previous issue date: 2004-11-05 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Heparan sulfate (HS) and Heparin (Hep) glycosaminoglycans (GAGs) are heterogeneous and highly charged polysaccharides. HS is structurally related to Hep but is much less substituted with sulfo groups than heparin and has a more varied structure (or sequence). Because of structural similiarities between these two polymers, they have been described together as heparinoids . Both chains bind a variety of proteins and mediate various physiologically important processes including, blood coagulation, cell adhesion and growth factor regulation. Heparinoids with structural characteristics similar to these described from HS and/or Hep from mammalian tissues have been isolated from different species of invertebrates, although only a few heparinoids from unusual sources have been characterized. The present study describes the presence of unusual heparinoids population from Artemia franciscana, isolated after proteolysis and fractionation by ion exchange resin and named, F-3.0M. The study model in vivo were hemostasis (rat tail scarification) and inflamatoty activity. The tests in vitro were used for coagulations assays (PT and APTT). The analyse of the heparinoids eluted with 3,0M NaCl showed electrophoretic migration in different buffer systems a single band with a behaviour intermediate between those of mammalian HEP and HS. The main products obtained from Artemia heparinoids after enzymatic degradation with heparitinases I and II from F. heparinum were N-sulphated disaccharides (?U-GlcNS,6S/ ?U,2S-GlcNS and ?U-GlcNS) and N-acetylated disaccharides (?U, GlcNAc). This heparinoid had a lower hemorrhagic effect (400?g/ml) when compared to unfractiionated heparins(25?g/ml).The results also suggest a negligible APTT activity of this heparinoid (62.2s). No action was observed on PT indicating that F-3.0M haven t action on the extrinsic pathway. The results showed that the fraction F- 3.0M have inhibitory effect on migration of leukocytes, 64.5% in the concentration of 10 ?g/ml (P<0.001). The search for new heparin and/or heparan sulphates analogs devoid of anticoagulant activity is an atractive alternative and may open up a wide variety of new therapeutic applications / Heparam sulfato (HS) e Heparina (Hep) s?o glicosaminoglicanos (GAGs), heterog?neos e altamente poliani?nicos. HS ? estruturalmente relacionado a heparina, mas cont?m uma quantidade menor de grupos sulfatados que a Hep. Devido ?s similaridades estruturais entre estes dois pol?meros, eles t?m sido denominados conjuntamente de heparin?ides. Ambas as cadeias ligam-se a uma variedade de prote?nas mediadas por v?rios processos fisiol?gicos importantes, incluindo a coagula??o sangu?nea, ades?o celular e regula??o dos fatores de crescimento. O presente estudo descreve a presen?a de uma popula??o de heparin?ides (F-3.0M) diferenciados presentes em Artemia franciscana os quais foram isolados por prote?lise e fracionados por cromatografia de troca i?nica com variadas concentra??es de NaCl. Neste trabalho, utilizamos modelos in vivo para avaliar a homeostasia e a atividade anti-inflamat?ria destes heparinoides. A hemostasia foi avaliada por modelo de escarifica??o em caudas de ratos Wistar enquanto que o processo inflamat?rio foi observado atrav?s de peritonite induzida por tioglicolato de s?dio a 3%. Os heparin?ides eluidos com 3,0M de NaCl mostraram por eletroforese em diversos tamp?es uma ?nica banda com comportamento intermedi?rio entre a Hep de mam?fero e HS. O principal produto obtido da fra??o F-3.0M de Artemia franciscana ap?s a degrada??o enzim?tica com heparitinases I e II de Flavo bacterium Heparinum foram dissacar?deos N-sulfatados (?U-GlcNS,6S/ ?U,2S-GlcNS e ?U-GlcNS) e dissacar?deos N-acetilados (?U, GlcNAc). Estes heparin?ides apresentaram uma baixa atividade hemorr?gica somente na concentra??o de 400?g/ml, ? similar a heparina na concentra??o de 25?g/ml. Os resultados sugerem ainda, que esta fra??o tem baixa a??o anticoagulante APTT (62,2s); n?o apresentando a??o sobre PT, indicando que n?o tem a??o sobre a via extr?nseca da cascata. Os testes de atividade anti-inflamat?ria, desta fra??o tem efeito inibit?rio sobre a migra??o dos leuc?citos da ordem de 64,5% na concentra??o de 10 ?g/ml (P<0.001)Heparam sulfato (HS) e Heparina (Hep) s?o glicosaminoglicanos (GAGs), heterog?neos e altamente poliani?nicos. HS ? estruturalmente relacionado a heparina, mas cont?m uma quantidade menor de grupos sulfatados que a Hep. Devido ?s similaridades estruturais entre estes dois pol?meros, eles t?m sido denominados conjuntamente de heparin?ides. Ambas as cadeias ligam-se a uma variedade de prote?nas mediadas por v?rios processos fisiol?gicos importantes, incluindo a coagula??o sangu?nea, ades?o celular e regula??o dos fatores de crescimento. O presente estudo descreve a presen?a de uma popula??o de heparin?ides (F-3.0M) diferenciados presentes em Artemia franciscana os quais foram isolados por prote?lise e fracionados por cromatografia de troca i?nica com variadas concentra??es de NaCl. Neste trabalho, utilizamos modelos in vivo para avaliar a homeostasia e a atividade anti-inflamat?ria destes heparinoides. A hemostasia foi avaliada por modelo de escarifica??o em caudas de ratos Wistar enquanto que o processo inflamat?rio foi observado atrav?s de peritonite induzida por tioglicolato de s?dio a 3%. Os heparin?ides eluidos com 3,0M de NaCl mostraram por eletroforese em diversos tamp?es uma ?nica banda com comportamento intermedi?rio entre a Hep de mam?fero e HS. O principal produto obtido da fra??o F-3.0M de Artemia franciscana ap?s a degrada??o enzim?tica com heparitinases I e II de Flavo bacterium Heparinum foram dissacar?deos N-sulfatados (?U-GlcNS,6S/ ?U,2S-GlcNS e ?U-GlcNS) e dissacar?deos N-acetilados (?U, GlcNAc). Estes heparin?ides apresentaram uma baixa atividade hemorr?gica somente na concentra??o de 400?g/ml, ? similar a heparina na concentra??o de 25?g/ml. Os resultados sugerem ainda, que esta fra??o tem baixa a??o anticoagulante APTT (62,2s); n?o apresentando a??o sobre PT, indicando que n?o tem a??o sobre a via extr?nseca da cascata. Os testes de atividade anti-inflamat?ria, desta fra??o tem efeito inibit?rio sobre a migra??o dos leuc?citos da ordem de 64,5% na concentra??o de 10 ?g/ml (P<0.001)

O presente trabalho avaliou o potencial da enzima HRP no descoramento dos corantes têxteis: Azul Drimaren X-3LR (DMBLR), Azul Drimaren X-BLN (DMBBLN), Rubinol Drimaren X-3LR (DMR) e Azul Drimaren CL-R (RBBR). Parâmetros como concentração do corante, temperatura, concentração de peróxido de hidrogênio (H2O2) e tempo de reação foram otimizados. Os ensaios de descoramento dos corantes foram realizados a partir desses resultados. As melhores condições reacionais determinadas para os corantes estudados foram: concentração do corante = 120 mg L-1, temperatura = 35C, concentração de H2O2 = 0,55 mM e tempo de reação = 1 hora. Os percentuais de descoramento dos corantes DMBLR, DMBBLN, DMR e RBBR, após o tratamento enzimático foi de 99, 77, 94 e 97%, respectivamente. O tempo reacional de 5 minutos foi suficiente para os corantes DMBLR e RBBR apresentarem elevada porcentagem de descoramento, 96% para ambos. Já os corantes DMBBLN e DMR só apresentaram elevado grau de descoramento após 1 hora de reação, sendo o corante DMBBLN o mais recalcitrante, apresentando uma melhora de 10% na porcentagem de descoramento, após 24 horas de reação. Além do grau de descoramento, também foi avaliada a toxicidade dos corantes antes e após o tratamento enzimático utilizando Daphnia pulex e Artemia salina como bioindicadores de toxicidade. Resultados toxicológicos utilizando Daphnia pulex não foram conclusivos, indicando que esse bioindicador não foi adequado para avaliar a toxicidade dos corantes estudados no meio reacional utilizado. Com o uso da Artemia salina na avaliação toxicológica foi observado uma redução da toxicidade para os corantes DMBLR, DMR e RBBR após tratamento enzimático, e um aumento da toxicidade não significativo para o corante DMBBLN. Os resultados obtidos no trabalho ressaltam a eficiência da enzima HRP no descoramento dos corantes têxteis estudados, sem a geração de produtos tóxicos e prejudiciais ao meio ambiente / The aim of the present study was to evaluate the potential of the Horseradish peroxidase (HRP) enzyme in the decolorization of textile dyes Drimaren Blue X-3LR (DMBLR), Drimaren Blue X-BLN (DMBBLN), Drimaren Rubinol X-3LR (DMR) and Drimaren Blue CL-R (RBBR). Parameters such as concentration of the dye, temperature, concentration of hydrogen peroxide (H2O2) and reaction time were optimized. The optimum reaction conditions determined for the studied dyes were: concentration of the dye = 120 mg L-1, temperature = 35 C, concentration of H2O2 = 0.55 mM and reaction time = 1 h. The decolorization percentage of dyes DMBLR, DMBBLN, DMR and RBBR after enzymatic treatment was 99, 77, 94 and 97%, respectively. The reaction time of only 5 minutes presented high decolorization percentage for both dyes DMBLR and RBBR, about 96 %. However dyes DMBBLN and DMR showed high decolorization degree in 1 h of reaction and the dye DMBBLN, being the most recalcitrant, exhibited an improvement of 10% in the decolorization percentage after 24 h of reaction. Besides the decolorization degree, the toxicity of the studied dyes was also evaluated before and after enzymatic treatment using Daphnia pulex and Artemia salina as bioindicators. The toxicological results using Daphnia pulex were not conclusive, indicating that it was not an appropriate bioindicator to evaluate the toxicity of the tested dyes. Meanwhile when using Artemia salina for toxicological evaluation it was observed a reduction of toxicity for dyes DMBLR, DMR and RBBR after enzymatic treatment, and a not significant increase in toxicity for the dye DMBBLN. In conclusion, the obtained results emphasize the efficiency of the HRP enzyme in the decolorization of the studied textile dyes, without the generation of toxic and harmful products to the environment

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-05-09T12:39:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 2015 CARVALHO BC2.pdf: 1647689 bytes, checksum: 2fd318c1edae701b8c0b19a7e19ebd35 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-09T12:39:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 2015 CARVALHO BC2.pdf: 1647689 bytes, checksum: 2fd318c1edae701b8c0b19a7e19ebd35 (MD5) Previous issue date: 2015-02-23 / CNPq / A esquistossomose é uma doença endêmica distribuída em regiões tropicais e subtropicais, que pode ser controlada através do molusco Biomphalaria glabrata. O objetivo desde trabalho foi avaliar as atividades embriotóxicas, moluscicida e artemicida do extrato etéreo, da atranorina e do ácido praesorediósico, ambos purificados de Parmotrema praesorediosum. A partir do extrato obtido de P. praesorediosum com éter dietílico foram realizados isolamento e purificação do ácido praesorediósico e da atranorina. O extrato etéreo e as substâncias purificadas foram analisadas através de CCD, CLAE, RMN-H1 e RMN-C13. Para a realização dos bioensaios, todas as substâncias analisadas foram dissolvidas em DMSO (0,25%) e expostas por 24 h a 25˚C e foram utilizados grupos controle negativos (água e DMSO a 0,25%) e positivos (niclosamida 20 μg/mL e carbonato cúprico 50 μg/mL). Para os ensaios de embriotoxicidade com B. glabrata utilizou-se as seguintes concentrações para o extrato etéreo 1000, 500, 300, 250, 150, 100, 50 e 25 μg/mL, a atranorina 1000, 500 e 250 μg/mL e o ácido praesorediósico 500, 250 e 125 μg/mL. Após a exposição, os embriões foram observados por 8 dias consecutivos e classificados como inviáveis (embriões mortos e malformados) e viáveis (embriões eclodidos). Os experimentos foram realizados em triplicata com 100 embriões por grupo. Para os testes moluscicidas foram selecionados 150 animais, que foram colocados em recipientes individuais com água filtrada para verificar a maturidade sexual e, em seguida foram separados 120 animais sexualmente maduros. Os moluscos (n=5) foram separados e submetidos ao extrato etéreo 200, 150, 100, 50 e 25 μg/mL e a atranorina purificada 500, 250 e 125 μg/mL, e os testes foram realizados em triplicata para cada concentração e avaliados durante 8 dias. Para o ensaio de toxidade ambiental com A. salina utilizou-se o extrato etéreo 1000, 500, 250, 100, 50 e 25 μg/mL, a atranorina purificada 1000, 500, 250, 125 e 62,5 μg/mL e o ácido praesorediósico purificado 200, 125, 62,5 μg/mL incubados em água do mar. Os testes foram realizados em quadruplicata com 5mL da solução com dez larvas por tubo de ensaio. Os grupos foram analisados quanto à frequência de letalidade e sobrevivência. Os testes estatísticos utilizados foram o ANOVA e o pós-teste Newman- keuls com p < 0,05. A embriotoxicidade do extrato etéreo e do ácido praesorediósico purificado foram comprovados, pois as substâncias apresentaram valores de CL50 de 363,07 μg/mL e 213,79 μg/mL, respectivamente. A CL50 estimada para os moluscos tratados com o extrato etéreo foi de 102,32 μg/mL demonstrando ser bastante eficiente no combate ao hospedeiro intermediário. A atranorina purificada não apresentou toxicidade sobre embriões e moluscos. Os ensaios demonstraram que o extrato etéreo, a atranorina e o ácido praesorediósico, ambos purificados, apresentaram baixa toxicidade ao microcrustáceo, indicando que estas substâncias oferecem baixo risco ao meio ambiente. A toxicidade do extrato etéreo e do ácido praesorediósico purificado do líquen P. praesorediosum nas diferentes concentrações testadas causou significativa letalidade sobre embriões e moluscos de B. glabrata, demonstrando ser bastante promissor visto que pode ser considerado como potente agente moluscicida. / Schistosomiasis is endemic distributed in tropical and subtropical regions, which can be controlled by the snails Biomphalaria glabrata. The purpose since work was to evaluate the embryotoxic activities, molluscicide and artemicida ether extract, the atranorin and praesorediosic acid, both of purified Parmotrema praesorediosum. From the extract obtained from P. praesorediosum with diethyl ether was carried out isolation and purification of praesorediosic acid and atranorin. The ether extract and the purified compounds were analyzed by CCD, HPLC, RMN-H1 and RMN-C13. To achieve the bioassays, all analyzed substances were dissolved in DMSO (0.25%) and exposed for 24 hours at 25˚C and used negative control (water and DMSO 0,25%) and positive (niclosamide 20 μg/mL cupric carbonate and 50 μg/mL). For embryotoxicity tests with B. glabrata was used for the following concentrations ether extract 1000, 500, 300, 250, 150, 100, 50 and 25 μg/mL, the atranorin 1000, 500 and 250 μg/mL and acid praesorediosic 500, 250 and 125 μg/mL. After exposure, the embryos were observed for 8 consecutive days and are classified as non-viable (dead embryos and malformed) and viable (hatched embryos). The experiments were performed in triplicate with 100 embryos per group. To test molluscicides 150 animals were selected, which were placed in individual containers with filtered water to check sexual maturity, and then were separated 120 sexually mature animals. The snails (n= 5) were separated and subjected to ether extract 200, 150, 100, 50 and 25 μg/mL and atranorin purified 500, 250 and 125 μg/mL, and tests were performed in triplicate for each concentration and evaluated for 8 days. For environmental toxicity test with A. salina used the ether extract 1000, 500, 250, 100, 50 and 25 μg/mL, the purified atranorin 1000, 500, 250, 125 and 62.5 μg/mL and purified acid praesorediosic 200, 125, 62.5 μg/mL incubated in sea water. The tests were performed in quadruplicate with 5mL of the solution with ten larvae per test tube. The groups were analyzed for frequency and lethality survival. Statistical analyzes were performed using ANOVA and the Newman-Keuls post-test with p<0.05. Embryotoxicity ether extract and the purified acid praesorediosic been proven, as the substances showed CL50 values of 363.07 μg/mL to 213.79 μg/mL, respectively. The CL50 estimated for snails treated with ether extract was 102.32 μg/mL demonstrating to be quite efficient in combating intermediate host. The atranorin purified showed no toxicity to embryos and snails. The tests showed that the ether extract, the atranorin and praesorediosic acid, both purified, showed low toxicity microcrustacean, indicating that these substances offer low risk to the environment. The toxicity of ether extract and the purified acid praesorediosic lichen P. praesorediosum in different concentrations tested caused significant mortality of embryos and snails B. glabrata, proving to be very promising as it can be considered as potent molluscicidal agent.

Submitted by Neusa Fagundes (neusa.fagundes@unioeste.br) on 2018-03-06T13:43:20Z No. of bitstreams: 2 Denise_Indras2017.pdf: 1849754 bytes, checksum: 50210fe1707e46e56182c87ddece4b5c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-06T13:43:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Denise_Indras2017.pdf: 1849754 bytes, checksum: 50210fe1707e46e56182c87ddece4b5c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-07 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The popular use of medicinal plants are common practices and among them is a bottle, a multiple plant base product, which promises to cure various diseases. Many animal studies show in hepatic, renal enzymes and our hematological parameters after administration of plant extracts. The objective of this study was to verify a correlation between the use of multiple medicinal plants with hepatic, renal and hematological found in a patient that made use of bottle, composed of echinacea, graviola, ipé purple, sucupira and cat's claw. The bottle has 4.32 mg.mL-1 of alcohol. Pharmacological and UV/Scan tests were performed, showing some classes of secondary metabolites in plant and bottle species. A bioassay was performed with Artemia salina, and a bottle had mortality up to a concentration of 0.1 mg.mL-1. Cytotoxic effects on erythrocytes revealed hemolytic activity for echinacea, graviola, purple ipe and sucupira. The Escherichia coli test showed sensitivity to graviola, purple ipe, sucupira and cat's claw. In vivo experiment using mice. Two treatments were performed, single dose and 30 days, administering water, alcohol and bottle by gavage. Biochemical, coagulation, hematological and histopathological parameters were evaluated. In the single dose treatment were alterations of uric acid, cholesterol, creatinine, alkaline phosphatase, iron and glucose (p<0.05). Already in the treatment of 30 days were alterations of uric acid, total and indirect bilirubins, creatinine, alkaline phosphatase, glucose, triglycerides, red blood cells and leukocytes (p<0.05), beyond hepatic sinusoidal dilatation. The data showed that the alcohol present in the bottle can alter biochemical, hematological parameters and cause liver damage in rats. The bottle, although not showing alterations in important biochemical and hematological parameters, but had more pronounced hepatic histopathological alterations. / O uso popular de plantas medicinais são práticas comuns e entre elas está a garrafada, produto a base de múltiplas plantas, que promete curar várias doenças. Muitos estudos com animais mostram alterações em enzimas hepáticas, renais e nos parâmetros hematológicos após administração de extratos vegetais. O objetivo deste estudo foi verificar a correlação entre o uso de múltiplas plantas medicinais com as alterações hepáticas, renais e hematológicas encontradas em um paciente que fez uso de garrafada, composta por equinácea, graviola, ipê roxo, sucupira e unha de gato. A garrafada possui 4,32 mg.mL-1 de álcool. Foram realizados testes farmacognósticos e UV/Varredura, mostrando algumas classes de metabólitos secundários nas espécies vegetais e na garrafada. Foi realizado bioensaio com Artemia salina, e a garrafada teve mortalidade até a concentração de 0,1 mg.mL-1. Efeitos citotóxicos em eritrócitos revelaram atividade hemolítica para equinácea, graviola, ipê roxo e sucupira. O teste com Escherichia coli mostrou sensibilidade para graviola, ipê roxo, sucupira e unha de gato. No experimento in vivo utilizando ratos Wistar foram realizados dois tratamentos, dose única e 30 dias, administrando água, álcool e garrafada por gavagem. Foram avaliados parâmetros bioquímicos, de coagulação, hematológicos e histopatológicos. No tratamento com dose única foram encontradas alterações de ácido úrico, colesterol, creatinina, fosfatase alcalina, ferro e glicose (p<0,05). Já no tratamento de 30 dias foram encontradas alterações de ácido úrico, bilirubinas total e indireta, creatinina, fosfatase alcalina, glicose, triglicerídeos, hemácias e leucócitos (p<0,05), além de dilatação sinusoidal hepática. Os dados mostraram que o álcool presente na garrafada pode alterar parâmetros bioquímicos, hematológicos e causar danos ao fígado de ratos. A garrafada, apesar de não mostrar alterações em parâmetros bioquímicos e hematológicos importantes, teve alterações histopatológicas hepáticas mais pronunciadas.

A nutrição tem sido identificada como um fator chave que afeta diretamente o crescimento e o bom desempenho reprodutivo do animal quando utilizado como modelo experimental. Desta forma, é essencial uma dieta ideal acessível através da qual o zebrafish possa suprir todas suas necessidades nutricionais desde a fase larval até a sua fase adulta sem que haja necessidade de complementá-la com outros tipos de dietas, simplificando o cultivo destes animais. A dieta recomendada nos guidelines para a alimentação do Zebrafish criado em laboratório é composta por náuplios de Artemias (crustáceo rico em proteínas) em conjunto com uma ração seca rica em proteínas e sais minerais fundamentais para o bom desenvolvimento e reprodução desses animais. Este estudo teve como objetivo desenvolver e padronizar uma dieta ideal de alimentação simples, eficaz, saudável e de baixo custo a fim de obter o melhor desempenho possível nos experimentos desenvolvidos com o zebrafish. Foram utilizadas 4 diferentes modelos de dietas preparadas a partir de 3 formas de alimentação que consistiram em náuplios de Artemias, a ração padrão-ouro disponível no mercado europeu denominada Gemma Micro® desenvolvida pela Skretting e a ração elaborada para este estudo identificada como Ração Ideal. Os animais foram divididos em 4 grupos de acordo com a dieta recebida: Grupo1- alimentados com Ração Gemma(G), Grupo 2- alimentados com Ração Gemma + Artemia (G+A), Grupo 3- alimentados com Ração Ideal (I) e Grupo 4- alimentados com Ração Ideal+Artemia (I+A). Para avaliar o desempenho da Ração Ideal, foram analisados comparativamente entre os grupos os parâmetros de sobrevivência, crescimento, maturação sexual e fertilidade em duas gerações de animais (Geração 0 Geração 1). Após a análise e vários testes realizados dentro de um modelo de ração que se ajustasse ao perfil de referência, Gemma Micro® e que atendesse as necessidades do zebrafish passamos a dar início aos experimentos utilizando a ração que apresentou melhor desempenho que passou a ser denominada Ração Ideal. Em relação a sobrevivência dos animais, observamos que, na Geração 0 os animais dos grupos 3 e 4 apresentaram maiores taxas de sobrevivência em relação aos outros grupos, no entanto na geração 1 todos os grupos apresentaram taxas de sobrevivência semelhantes. Analisando o crescimento dos animais, na geração 0 os animais dos grupos 2 e 4 apresentaram crescimento semelhante e foram maiores que os animais dos grupos 1 e 3. Na geração 1, os animais do grupo 2 foram os que mais cresceram e o grupo 4 cresceu mais em relação ao grupo 3. Todos os animais estavam maduros sexualmente aos 90dpf e quantidade de ovos viáveis foram maior nos grupos 1 e 2 em ambas as gerações. A Ração Ideal forneceu um aporte calórico suficiente e semelhante á ração Gemma para a sobrevivência dos animais nas fases iniciais do desenvolvimento, apresentando taxas de sobrevivência semelhantes entre os grupos. O acréscimo da artêmia á ração ideal foi fundamental para que o crescimento dos animais alimentados com essa ração demonstrassem um crescimento semelhante á ração referência, demonstrando a deficiência proteica da ração ideal. Todas as dietas promoveram maturidade sexual na faixa etária esperada (a partir de 90dpf) no entanto parece que a fertilidade foi maior nos grupos 1 e 2, possivelmente pelo maior aporte proteico que esses animais receberam. Este estudo conseguiu desenvolver e padronizar uma dieta ideal de alimentação, eficaz, saudável e de baixo custo semelhante ao padrão-ouro utilizado em laboratórios europeus e americanos que, após alguns ajustes em sua formulação poderá ser comercializada e utilizada pelos laboratórios de pesquisa ao redor do país / Nutrition has been identified as a key factor that directly affects the growth and good reproductive performance of the animal when used as an experimental model. In this way, an ideal diet should be accessible through which the zebrafish can meet all their nutritional needs from the larval phase to adulthood without any complement with other types of diets, simplifying the management of these animals. The diet recommended in the Zebrafish feeding guidelines is composed of Artemias nauplii (crustacean rich in proteins) together with a dry diet rich in proteins and minerals that are essential for the proper development and reproduction of these animals. This study aimed to develop and standardize an ideal diet for simple, effective, healthy and low-cost feeding in order to obtain the best possible performance in the experiments developed with zebrafish. Four different diets were prepared from 3 feeding forms consisting of Artemias nauplii, the gold-standard feed available in the Europe, the Gemma Micro® developed by Skretting and the dry feed elaborated in this study identified as Ideal . The animals were divided into 4 groups according to the diet received: Group 1 fed with Gemma (G), Group 2 fed with Gemma + Artemia (G + A), Group 3 fed with Ideal dry feed (I) and Group 4- fed with Ideal dry feed+ Artemia (I + A). To evaluate the performance of the Ideal dry feed, the parameters of survival, growth, sexual maturation and fertility in two generations of animals (Generation 0 Generation 1) were comparatively analyzed between the groups. After several tests performed within a feed model that fits the reference profile, Gemma Micro® and meets the zebrafish needs, we initiated the experiments using the feed that presented the best performance, named Ideal. Regarding the animals survival, we observed that in the Generation 0 animals of groups 3 and 4 presented higher survival rates in relation to the other groups, however in generation 1 all groups had similar survival rates. Analyzing the growth of the animals, in generation 0 the animals of groups 2 and 4 presented similar growth and were larger than the animals of groups 1 and 3. In generation 1, the animals of group 2 were the ones that were bigger than other ones. Animals of group 4 were bigger than group 3. All animals were sexually mature at 90dpf and fertility was evaluated by viable egg count. The number of viable egg were higher in groups 1 and 2 in both generations. The Ideal feed provided a sufficient caloric intake similar to the Gemma for the survival of the animals in the early stages of development, once survival rates were similar between the groups. Adding artemia to the ideal feed was fundamental for animal development, once the growth of the animals fed with ideal plus artemia demonstrated a similar growth to the reference feed, demonstrating the protein deficiency of the ideal feed. All diets promoted sexual maturity at the expected age range (from 90dpf), however it appears that fertility was higher in groups 1 and 2, possibly due to the higher protein intake of these animals. This study was able to develop and standardize an ideal, effective, healthy and low-cost diet similar to the gold standard feed used in laboratories around the world. After some adjustments in its formulation, the ideal feed should be marketed and used in the research laboratories in the country

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:44:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ALEXANDRE CEZAR BORGES MATTIAZZO.pdf: 1009474 bytes, checksum: 64d992c1ae157107f49ac0e8c483156a (MD5) Previous issue date: 2013-03-01 / The liquid effluent from medical radiology centers is polluting and toxic and it can result in damage to humans and to the environment when it is discarded in the sanitary sewer system without prior treatment. This study aimed to chemically analyze OBD5, OCD, silver and total sulphate and also, through bioassays, to determine the toxic potential of the waste generated during the revealing of medical radiographs. The residual sample of this waste, for this research, was collected in one of the hospitals belonging to the state of Goiás, located in its capital, Goiânia. The parameters OBD5, OCD, silver and total sulphate were analyzed in the sample with natural pH (9.9) and after its correction with HCl (1:1) to 8.5. The bioassays were performed only with the sample after pH correction and they consisted of analysis of root growth and germination seeds of Allium cepa L., and also ecotoxicological evaluation using Artemia salina. In the experiments, to evaluate the Root Growth Rate and Seed Germination Rate of Allium cepa L., revealing residual concentrations of 0; 0.5; 1; 2 and 4% (v/v) were used. In the ecotoxicological assays with Artemia salina, used to obtain the DL50, concentrations of 0; 0.25; 0.5; 1; 1.5; 2; 2.5 and 3% (v/v) were used. The results of OBD5, OCD and total sulphate (pH 9.9) were well above the permitted limits imposed by Saneago. The sample with pH 8.5 was reported to be OBD5 15% and OCD 25% higher than those found in the sample without pH correction. Yet, the concentration of total sulphate, with pH correction to 8.5 has adapted to standards of Saneago. In both analyzes with pH 9.9 and 8.5 the total silver parameter did not exceed the quality standards of Saneago for the ones to be released in the sewer system. It was found that the revealing residue causes cytotoxic effect on Allium cepa L., inhibits root growth and changes its quality. The DL50 (24h) found from the Survival Artemia salina test rate is 0.86% (v/v). The results show that improvements are essential in the management of waste from health facilities as well as the adoption of urgent actions that promote the reduction of radiological effluent generation, such as the replacement of the conventional image production for digital. / O efluente líquido de centros de radiologia médica é poluente e tóxico, podendo resultar em prejuízos ao homem e meio ambiente se descartado na rede coletora de esgotos sanitários sem o prévio tratamento. O presente trabalho objetivou a análise química DBO5, DQO, prata e sulfato total e, ainda, por meio de bioensaios a determinação do potencial tóxico do resíduo revelador gerado durante a revelação de radiografias médicas. A amostra de resíduo revelador para execução da pesquisa foi coletada em uma das unidades hospitalares pertencentes ao estado de Goiás localizada em sua capital, Goiânia. Os parâmetros DBO5, DQO, prata e sulfato total foram analisados na amostra com pH natural (9,9) e após sua correção com HCl (1:1) para 8,5. Os bioensaios foram realizados apenas com a amostra após correção do pH e consistiram de análise de crescimento radicular e geminação de sementes de Allium cepa L., bem como de avaliação ecotoxicológica utilizando Artemia salina. Nos experimentos para avaliação da Taxa de Crescimento Radicular e Taxa de Germinação de Sementes Allium cepa L. foram utilizadas as concentrações de resíduo revelador 0; 0,5; 1; 2 e 4% (v/v). Nos ensaios ecotoxicológicos com Artemia salina para obtenção da DL50 utilizou-se concentrações 0; 0,25; 0,5; 1; 1,5; 2; 2,5 e 3% (v/v). Os resultados de DBO5, DQO e sulfato total (pH 9,9) mostraram-se bem acima dos limites permissíveis pela Saneago. A amostra com o pH 8,5 apresentou valores de DBO5 15% e de DQO 25% superiores àqueles encontrados na amostra sem correção do pH. Já a concentração de sulfato total, com a correção do pH para 8,5, adequou-se às normas da Saneago. Em ambas as análises com pH 9,9 e 8,5 o parâmetro prata total não ultrapassou os padrões de qualidade da Saneago para lançamento na rede coletora de esgotos. Foi verificado que o resíduo revelador provoca efeito citotóxico em Allium cepa L., inibe o crescimento das raízes e altera sua qualidade. A DL50 (24h) encontrada a partir do ensaio Taxa de Sobrevivência Artemia salina é de 0,86% (v/v). Os resultados obtidos mostram que são imprescindíveis melhorias no gerenciamento de resíduos de estabelecimentos de saúde e a adoção urgente de ações que promovam a redução da geração de efluentes radiológicos, como a substituição da técnica convencional de produção de imagem pela digital.

Les élevages des poissons sont soumis à des épisodes de mortalité anormale. Les bactéries du genre Vibrio sont connues comme des pathogènes opportunistes et ont été associées à ces épisodes de mortalité. Pour faire face à ces problèmes d’épizooties, les pisciculteurs ont le plus souvent recours à l’utilisation des antibiotiques. Néanmoins, des abus dans son utilisation ont malheureusement conduit à l’apparition des souches résistantes et à des fréquents échecs de traitement. Actuellement, les traitements par des bactéries lactiques probiotiques permettent d’améliorer la qualité des alevins produits pour les besoins de l’aquaculture, tout en limitant le recours aux antibiotiques. Pour qu’un micro-organisme soit reconnu comme étant potentiellement probiotique, une évaluation de ce produit basée sur plusieurs critères doit être établie. Dans une première étape, nous avons sélectionné et caractérisé 55 souches de bactéries lactiques isolées en écloserie. Le premier critère de sélection a porté sur l’inhibition de souches de vibrions pathogènes in vitro. Les bactéries lactiques ayant un effet anti Vibrio ont subi des tests de formation de biofilms et des tests de caractérisations phénotypiques, enzymatiques, physiologiques et génétiques, afin de procéder à leur identification. Puis des tests de compétition avec V. aligonlyticus ont été pratiqués in vivo sur des larves d’Artemia. Ce travail nous a permis de sélectionner la souche Lactobacillus casei (X2), car elle présentait la meilleure combinaison de propriétés requises pour un probiotique. Elle possède en effet une bonne activité antagoniste, elle n’est pas hémolytique, elle présente une forte adhérence sur plaque polystyrène et elle offre la meilleure protection contre V. alginolyticus lors du test de challenge avec Artemia. Dans une deuxième étape, la souche retenue (La. casei X2) et une autre déjà commercialisée sous le nom de Bactocell (Pediococcus acidilactici) ont été testées sur des larves de bar, afin d'évaluer les effets sur la qualité des alevins, leur réponse immunitaire et la microflore associée. Nous avons vérifié que les deux probiotiques (La. Casei et P. acidilactici) diminuaient la charge en vibrions et en microflore totale chez les larves de bar. La souche P. acidilactici a également affecté les profils de la communauté bactérienne intestinale des larves de bar. Par contre, La. casei n’a pas affecté la structure de la communauté bactérienne, bien que la souche soit présente chez les larves au jour 40 à une concentration élevée. Ces deux bactéries ont pu améliorer la croissance en longueur des larves aux jours 30 et 45 et la croissance en poids au jour 20. L’étude de l’influence des deux probiotiques sur des marqueurs de la physiologie des larves a montré qu’au jour 41, P. acidilactici était plus efficace que La. casei dans la régulation du stress oxydatif. Néanmoins, P. acidilactici a engendré des effets inflammatoires chez les larves à j20, et elle a induit un retard dans le développement osseux. Bien que La. casei ait accéléré le processus d’ossification chez les larves à j20, l’étude histopathologique a révélé une forte incidence des malformations vertébrales avec les larves à j62. A l’inverse, les larves alimentées avec P. acidilactici ont présenté un taux supérieur d’ossification normale et complète. / Diseases cause major production losses in fish farms. Bacteria of the genus Vibrio are known as opportunistic pathogens, and have been associated with mass-mortality episodes. To cope with these disease outbreaks, fish farmers often resort to the use of antibiotics. However, preventive overuse has led to the emergence of resistant strains and frequent treatment failures. Probiotic lactic acid bacteria are increasingly used to improve the quality of seed production in aquaculture, while limiting antibiotic treatments. Microbial strains must fulfil several criteria to be evaluated as potential probiotics.In a first step, we selected and characterized 55 strains of lactic acid bacteria isolated from fish hatchery. The first selection criterion focused on the in-vitro inhibition of pathogenic Vibrio strains. Lactic acid bacteria with antagonistic properties were tested for biofilm formation. The strains were characterised with the phenotypes, based on enzymatic and physiological tests, and identified by genotyping. In-vivo challenges with Vibrio aligonlyticus were then performed on Artemia. Lactobacillus casei X2 was thus selected, due to the best combination of the attributes that are required for probiotics. The strain showed antagonistic activity, adhered strongly to polystyrene plate, and secured Artemia with the best protection against V. alginolyticus. In a second step, La. casei X2 and a commercial strain of probiotics (Bactocell, Pediococcus acidilactici) were tested on European sea bass larvae, with a view to assess the effects on alevin quality, immune response and associated microbiota. Both of the lactic acid bacteria, La. casei and P. acidilactici, decreased the bacterial load and Vibrio in sea bass larvae. P. acidilactici changed significantly the profile of the bacterial community associated with fish larvae, compared to the control group. La. casei did not affect the structure of the bacterial community, although the strain was detected at high concentration in the larvae at 40 day post hatch (dph). Both probiotic treatments increased fish larval growth in body mass at 20 dph, and in length at 30 and 45 dph. Two physiological markers for gene expression suggested that P. acidilactici was more efficient than La. casei for the regulation of oxidative stress in sea bass at 41 dph. P. acidilactici induced some delay in bone development, and inflammatory signs were observed in the larvae at 20 dph. Though La. casei accelerated the early ossification process in the larvae by 20 dph, the histopathological study revealed a high incidence of vertebral malformations at 62 dph. In contrast, the treatment with P. acidilactici produced the highest proportion of fish with normal and complete ossification.