Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-05-22T14:36:59Z No. of bitstreams: 1 FranciscoVAN_DISSERT.pdf: 1013354 bytes, checksum: 1be0d7fcc15937d75236ebd887a49afc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-22T14:36:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FranciscoVAN_DISSERT.pdf: 1013354 bytes, checksum: 1be0d7fcc15937d75236ebd887a49afc (MD5) Previous issue date: 2010-08-25 / In recent years, bacterial resistance to multiple drugs has increased due to the indiscriminate use of antibiotics, widely used to treat infections. This situation has challenged scientists to search for new alternatives such as natural substances, in order to develop new guidelines with antibacterial recognized. Natural products have been used for thousands of years by the popular medicine for several purposes. Among them is the honey, a product resulting from collection and exudates of various plants by bees. Besides its nutritional value, honey is receiving greater attention by the scientific evidence of its medicinal effects through its therapeutic properties, especially the antimicrobial activity. Thus, this study aims to evaluate the in vitro antimicrobial activity exerted by the honey bee Apis mellifera L. and Melipona subnitida L. on the microorganisms Metilcilina Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and Pseudomonas aeruginosa isolated from hospital samples. The honey samples used were obtained from hives maintained in the region of Serra do Mel, RN, Brazil, and the Technological Center of Beekeeping (CETEC) of UFERSA, Mossoró, RN, Brazil. Data on the physical and chemical properties were used for characterization of honey from Apis mellifera L., in addition to color, consisting of honey-colored (mC), light amber (mAC) and dark amber. The method of Kirby and Bauer, diffusion in Mueller Hinton agar was used to evaluate the antimicrobial activity of honey, using wells 06 mm in diameter, in the presence of 06 bacterial isolates. To control the experiment, were conducted in parallel with different antibiograms commercial antibiotics, using the strains ATCC 25953 and ATCC 27853. The test results showed a susceptibility to MRSA, reaching inhibition zones of up to 31 mm in diameter. However, for Pseudomonas aeruginosa, the zones of inhibition reached 19 mm, considered minor when compared to produce about MRSA, probably due to factors intrinsic resistance to Pseudomonas aeruginosa. Therefore, this study identified to date for a therapeutic potential of this natural product, in particular the antimicrobial activity of honey from Apis mellifera L., proving to be the more efficient than honey from Melipona subnitida / Nos últimos anos, a resistência bacteriana a múltiplas drogas tem aumentado devido ao uso indiscriminado de antibióticos, amplamente utilizados no tratamento de infecções. Essa situação tem forçado à busca de novas alternativas como substâncias naturais, com a finalidade desenvolver novos princípios com atividades antibacterianas reconhecidas. Os produtos naturais têm sido utilizados há milhares de anos pela medicina popular para diversos propósitos. Dentre eles está o mel, produto resultante da coleta e exsudatos de várias plantas pelas abelhas. Além de seu valor nutricional, o mel vem recebendo uma maior atenção pela comprovação de seus efeitos medicinais através de suas propriedades terapêuticas, especialmente a atividade antimicrobiana. Desta forma, o presente trabalho tem por objetivo avaliar a atividade antimicrobiana in vitro exercida pelo mel das abelhas Apis mellifera L. e Meliponea subnitida L. sobre os microorganismos Staphylococcus aureus Resistente a Metilcilina (MRSA) e Pseudomonas aeruginosa multirresistentes isolados de amostras hospitalares. As amostras de mel utilizadas foram obtidas de colméias mantidas na região de Serra do Mel, RN, Brasil, e do Centro Tecnológico de Apicultura (CETEC) da UFERSA, Mossoró, RN, Brasil. Dados das análises físico-químicas foram utilizadas para caracterização dos méis de Apis mellifera L., além da cor, consistindo em mel de cor clara (mC), âmbar claro (mAC) e âmbar escuro. O método de Kirby e Bauer, difusão em Agar de Mueller Hinton, foi utilizado para avaliação da atividade antimicrobiana do mel, utilizando poços de 06 mm de diâmetro, em presença de 06 isolados bacterianos. Para controle do experimento, em paralelo foram realizados antibiogramas com diferentes antibióticos comerciais, utilizando as linhagens ATCC 25953 e ATCC 27853. Os resultados dos testes demonstraram uma suscetibilidade para o MRSA, atingindo halos de inibição de até 31 mm de diâmetro. Porém, para a Pseudomonas aeruginosa, as zonas de inibição chegaram até 19 mm, consideradas menores quando comparadas as produzidas sobre o MRSA, devido, provavelmente, a fatores de resistência intrínsecos à Pseudomonas aeruginosa. Portanto, este estudo apontou até o momento para um potencial terapêutico deste produto natural, em especial a atividade antimicrobiana do mel de Apis mellifera L., demonstrando ser mais eficiente do que o mel de Melipona subnitida / 2017-05-22

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-02-17T18:26:18Z No. of bitstreams: 1 Maria Goreth Matos de Andrade Barberino... Distribuição clonal 2013.pdf: 2055064 bytes, checksum: da2e73dad9d911837f5434c00617e1b0 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-17T18:26:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Goreth Matos de Andrade Barberino... Distribuição clonal 2013.pdf: 2055064 bytes, checksum: da2e73dad9d911837f5434c00617e1b0 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A infecção do trato urinário (ITU) é considerada a segunda infecção mais comum em humanos, estima-se que ocorram cerca de 150 milhões de casos de ITUs por ano no mundo. O aumento das taxas de resistência aos antimicrobianos entre os uropatógenos tem tornado mais difícil o tratamento das ITUs. Objetivo: Determinar a distribuição clonal das cepas de E. coli isoladas em pacientes com ITU adquirida na comunidade de acordo com o perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos e avaliar o papel dos grupos clonais na disseminação e persistência da resistência nestas infecções. Métodos: Foram isoladas 874 cepas de E. coli em pacientes com ITU, procedentes de unidades ambulatoriais em três hospitais na cidade de Salvador–Ba, no período de 2001 a 2009. O perfil de susceptibilidade foi determinado por microdiluição em placa (Microscan-Siemens®). Nas amostras selecionadas para genotipagem (n=275), a identificação dos grupos clonais foi realizada pela comparação dos padrões de PFGE, utilizando os critérios de Tenover (1995). Em todas as etapas do estudo foi utilizada como controle de qualidade a cepa ATCC E. coli 25922. Resultado: Entre os antibióticos testados, a maior prevalência de resistência foi encontrada para ampicilina (AMP) (49%), cefalotina (12-33%) e sulfametoxazol-trimetropin (SXT) (36-42%). A taxa de resistência à ciprofloxacina (CIP) variou de 9 a 14%. Na análise da distribuição clonal, segundo os fenótipos de resistência aos antimicrobianos, encontramos maior predomínio de um grupo clonal CgA (63%) entre as cepas consideradas multidroga resistentes. Diferentemente das amostras com algum grau de resistência ou multi-sensíveis, nas quais observamos diversidade clonal. Conclusão: A alta prevalência de resistência a SXT, AMP e cefalotina contraindica o uso destes antimicrobianos no tratamento empírico das ITU adquiridas na comunidade. A taxa de resistência à CIP relativamente alta, alerta para o aumento e disseminação de resistência a este antimicrobiano na comunidade. Isto irá dificultar e onerar o tratamento destas infecções. Observamos a surgimento de um grupo clonal (CgA) no período final do estudo (2008 a 2009) associado às cepas multidroga resistentes. Este achado sugere que a expansão de determinados clones pode ter um papel importante na disseminação de resistência bacteriana em ITUs adquiridas na comunidade. / Urinary tract infection (UTI) is considered the second most common infection in humans. It is estimated that there are about 150 million cases of UTIs per year worldwide. Increasing rates of antimicrobial resistance among uropathogens challenges UTI treatments. Objective: To determine the distribution of clonal strains of E. coli isolated from patients with community-acquired UTI according to the profile of antimicrobial susceptibility; and to evaluate the role of clonal groups in the spread and persistence of resistance in these infections. Methods: Eight hundred seventy four strains of E. coli were isolated from patients with UTI, coming from outpatient clinics in three hospitals in the city of Salvador - Bahia, from 2001 to 2009. The susceptibility profile was determined by broth microdilution method (Siemens - Microscan ®). The samples selected for genotyping (n = 275) were identified for clonal groups by comparing the patterns of PFGE, using the criteria of Tenover (1995). All study stages were quality control by strain E. coli ATCC 25922. Results: Among the antibiotics tested, the highest prevalence of resistance was for ampicillin (AMP) (49%) followed by trimethoprim - sulfamethoxazole (SXT) (36-42%) and for cephalothin (12-33%). The rate of resistance to ciprofloxacin (CIP) ranged between 9-14 %. In the Clonal Analysis distribution, performed according to antimicrobial resistance phenotypes, we found a higher prevalence of a clonal group CgA (63%) among multidrug resistant strains. This result differs from samples with some degree of resistance or multi-sensitive in which we observed clonal diversity. Conclusion: The high prevalence of resistance to SXT, AMP, and cephalothin contraindicate the use of these antibiotics in the empirical treatment of community-acquired UTI. The relatively high rate of resistance to CIP, raises attention to the increase and spread of antimicrobial resistance in this community and potentially complicate and encumber the treatment of these infections. We observe the emergence of a clonal group (CgA) in the final period of the study (2008-2009) associated with multidrug resistant strains. This finding suggests that the expansion of particular clones may have an important role in the spread of bacterial resistance in community-acquired UTI.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-30T21:03:32Z No. of bitstreams: 1 Maria Goreth. Prevalência de Resistência a Antimicrobianos e.pdf: 781360 bytes, checksum: f2b7c7040f7e8670e3df7e6c9397283d (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-30T21:03:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Goreth. Prevalência de Resistência a Antimicrobianos e.pdf: 781360 bytes, checksum: f2b7c7040f7e8670e3df7e6c9397283d (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Estimar a prevalência de resistência a antimicrobianos em isolados de Escherichia coli e avaliar o desempenho dos testes laboratoriais rápidos para diagnóstico das infecções não complicadas do trato urinário adquiridas na comunidade. Métodos: Este trabalho foi dividido em dois estudos, no primeiro para avaliar o perfil de susceptibilidade a antimicrobianos, foi avaliada uma amostra consecutiva de 411 isolados de E. coli procedentes de pacientes com Infecção do Trato Urinário (ITU) atendidos numa unidade de emergência de hospital privado no período de julho de 2008 a julho 2009. A identificação e os testes de susceptibilidade a antimicrobianos utilizou o sistema automatizado WalkAway – Microscan® (Siemens - Califórnia). No segundo estudo, para avaliar o desempenho dos testes rápidos para diagnóstico de ITU, além dos casos de ITU do primeiro estudo, foram incluídos 411 pacientes sem ITU atendidos no mesmo local e período. Os testes rápidos estudados, microscopia direta (Gram), teste de piúria e teste do nitrito, foram realizados conforme respectivos protocolos, realizando os controle de qualidade de todas as etapas. Resultados: A amostra de casos de ITU era formada por 342 (83%) adultos e 69 (17%) crianças. A distribuição por sexo entre adultos e crianças, mostrou predominância dos episódios no sexo feminino (85%). Dos 22 antibióticos testados, a maior prevalência de resistência foi encontrada para ampicilinasulbactam (41%), ampicilina (49%), cefalotina (33%) e sulfametoxazol-trimetoprim (36%), além disso, observamos uma inusitada taxa de resistência à ciprofloxacina (9%). Quarenta e dois por cento dos isolados de E. coli apresentaram resistência a três ou mais drogas. Houve um aumento na taxa de resistência à cefalotina, em comparação com estudo realizado na mesma cidade em 2001-2002. Não foram observadas variações significativas nas taxas de resistência para a maioria dos demais antimicrobianos. Dentre os testes rápidos avaliados a detecção de piúria apresentou a maior sensibilidade (95%; IC95%: 92-97%) e a menor especificidade (66%; IC95%: 61-70%). O teste de nitrito apresentou a maior especificidade (99%; IC95%: 98-100%) e a menor sensibilidade (45%; IC95%: 40-50%). No geral, o teste com maior acurácia foi a microscopia direta (84%; IC95%: 79-88%), seguido da detecção de piúria (80%; IC95%: 77-83%). O teste de nitrito teve o maior valor preditivo positivo (VPP) e o teste de piúria o maior valor preditivo negativo (VPN). Os testes rápidos apresentaram concordância modesta e a combinação de resultados positivos com maior VPP foi obtida com os testes de nitrito e microscopia direta (Gram). Enquanto a combinação de microscopia direta (Gram) e piúria negativos tiveram o maior VPN. Conclusão: Os isolados de E. coli apresentaram elevadas taxas de resistência a: ampicilina, ampicilina-sulbactam, sulfametoxazol-trimetoprim e cefalotina, limitando a indicação desses antibióticos para tratamento empírico das ITUs adquiridas na comunidade. Apesar da variação nos valores de sensibilidade e especificidade dos testes rápidos avaliados, o teste de nitrito positivo e o teste de piúria negativo apresentaram a melhor taxa de acerto para confirmar ou afastar o diagnóstico de ITU, respectivamente. Embora, os testes rápidos possam ser considerados úteis no diagnóstico das ITU-AC, a urocultura ainda é o teste laboratorial definitivo para diagnóstico de ITU. / To estimate the prevalence of antimicrobial resistance in Escherichia coli isolates Escherichia coli and evaluate the performance of laboratory tests for fast diagnosis of uncomplicated community acquired urinary tract infections. Methods: This work was divided into two studies; first to evaluate the profile of antimicrobial resistance we evaluated a consecutive sample of 411 isolates of E. coli from patients with urinary tract infection (UTI) attending an emergency unit of a private hospital from July 2008 to July 2009. The identification and antimicrobial susceptibility testing used the automated Walkaway - Microscan ® (Siemens - California). In the second study, to evaluate the performance of quick tests for diagnosis of UTI, apart from cases of UTI in the first study, we included 411 patients without UTI treated at the same place and period. The quick tests studied, direct microscopy (Gram), pyuria and nitrite were performed according to the respective protocols, quality control measures were performed in all stages. Results: The sample consisted of 342 (83%) adults and 69 (17%) children. The gender distribution showed that a greater number of episodes occurred in females (85%). Of 22 antibiotics tested, the highest prevalence of resistance was found for ampicillinsulbactam (41%), ampicillin (49%), cephalothin (33%) and trimethoprimsulfamethoxazole (36%), and we also noticed an unusual rate of resistance to ciprofloxacin (9%.) Forty-two percent of the isolates of E. coli were resistant to three or more drugs. There was an increase in the rate of resistance to cephalosporins, compared with a study conducted in the same city in 2001-2002. There were no significant variations in rates of resistance to most other antibiotics. Among the quick tests evaluated, the detection of pyuria had the highest sensitivity (95%, 95% CI: 92- 97%) and the lowest specificity (66%, 95% CI: 61-70%). The nitrite test had the highest specificity (99%, 95% CI: 98-100%) and the lowest sensitivity (45%, 95% CI: 40-50%). Overall, the most accurate test was the direct microscopy (84%, 95% CI: 79-88%), followed by the detection of pyuria (80%, 95% CI: 77-83%). The nitrite test had the highest positive predictive value (PPV) and the pyuria test the highest negative predictive value (NPV). Rapid tests showed modest agreement, the combination of positive results with the highest PPV was obtained from the tests of nitrite and direct microscopy (Gram), while the combination of direct microscopy (Gram) and negative pyuria had the highest NPV. Conclusion: E. coli isolates showed high rates of resistance to: ampicillin, ampicillinsulbactam, trimethoprim-sulfamethoxazole and cephalosporins, limiting the indication of these antibiotics for empirical treatment of community acquired UTIs. Despite the variation in sensitivity and specificity of the rapid tests evaluated, a positive nitrite test and a negative pyuria test showed the highest likelihood to confirm or exclude the diagnosis of UTI, respectively. Although rapid tests might be considered useful in the diagnosis of community acquired UTI, urine culture is still the definitive laboratory test for diagnosis of UTI.

Escherichia coli et Enterococcus faecalis sont deux principaux agents pathogènes impliqués dans les infections du tractus urinaire (ITU) en médecine de ville et à l’hôpital. Ces espèces bactériennes sont responsables d’ITU aigües avec des phénomènes de récurrence et dans des ITU chroniques. La consommation d'antibiotiques est directement corrélée à la résistance des bactéries uropathogènes ce qui montre l'importance de contrôler l'utilisation des antibiotiques et de développer des traitements préventifs et curatifs alternatifs pour les infections urinaires.La consommation alimentaire de cranberry et de leurs extraits est traditionnellement associée avec le maintien en bonne santé des voies urinaires. Par ailleurs, certaines études cliniques semblent montrer un effet préventif des ITU associé à la consommation alimentaire de cranberry. In vitro et ex vivo, la consommation de ces extraits par l’homme réduit l’adhérence de certaines souches d’E. coli aux cellules épithéliales urinaires et la formation de biofilm de différentes espèces. L’hypothèse de travail est que la consommation alimentaire d’extraits de cranberry conduise à la formation de métabolites urinaires qui diminuent l'adhérence des bactéries uropathogènes à l’épithélium urinaire. Ce mécanisme serait à la base de la prévention des ITU par consommation d’extraits de cranberry. Cependant, les métabolites bioactifs restent largement méconnus. / Escherichia coli and Enterococcus faecalis are two main pathogens involved in urinary tract infections (ITU) in town medicine and in the hospital. These bacterial species are responsible for acute UTIs with recurrence phenomena and in chronic ITUs. The consumption of antibiotics is directly correlated with the resistance of uropathogenic bacteria, which shows the importance of controlling the use of antibiotics and of developing alternative preventive and curative treatments for urinary infections.Cranberry consumption of their extracts is traditionally associated with the maintenance of healthy urinary tract. In addition, some clinical studies seem to show a preventive effect of ITUs associated with cranberry consumption. In vitro and ex vivo, the consumption of these extracts by humans reduces the adhesion of certain E. coli strains to urinary epithelial cells and biofilm formation of different species. The working hypothesis is that the consumption of cranberry extracts leads to the formation of urinary metabolites that decrease the adhesion of uropathogenic bacteria to the urinary epithelium. This mechanism would be the basis for the prevention of ITU by consumption of cranberry extracts. However, bioactive metabolites remain largely unknown.

Resumo: A maioria dos casos de fraturas ósseas é utilizada nas cirurgias, implantes ortopédicos de osteossíntese (placa-parafuso e parafusos) confeccionados em aço inoxidável austeníticos, devido à sua baixa relação custo-benefício. As infecções associadas aos implantes de osteossintese estão relacionadas com o crescimento de microrganismos em biofilmes, resultando em um processo infeccioso de difícil erradicação. O objetivo do estudo foi identificar os microrganismos recuperados do conjunto metálico placaparafuso e parafusos após remoção cirúrgica, avaliar a capacidade de aderência dos microrganismos, verificar a viabilidade celular, caracterizar genotipicamente os isolados Gram-positivos e detectar a resistência aos antimicrobianos. Os conjuntos placa-parafuso e parafusos de aço inoxidável austenítico ASTM F138/F139 e ISO NBR 5832-1/9 foram transportados em bolsa de polietileno para o Laboratório de Microbiologia Clínica. Os implantes foram lavados em solução tampão fosfato-salino, armazenados em bolsa contendo solução Ringer e submetidos ao banho ultrassônico em freqüência de 40±2 kHz por 5 minutos. O fluido sonicado foi transferido para tubos Falcon e centrifugado a 3.000g durante 20 minutos. O sedimento foi resuspendido em nova solução Ringer, homogeneizado por vortex e 10μL semeados em ágar Sangue de carneiro 5%, MacConkey e Sabouraud. Os meios foram incubados em diferentes condições de temperatura por 7 a 14 dias para recuperação de microrganismos. O perfil de resistência dos isolados foi obtido de acordo com CLSI 2011. Para análise da viabilidade celular foi utilizado o kit Live/Dead e microscópio de fluorescência... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The majority of cases of bone fractures is used in surgery, internal fixation of orthopedic implants (screw-plate and screws) manufactured in austenitic stainless steel due to its low cost-benefit. Infections associated with implant fixation are related to the growth of microorganisms in biofilms, resulting in an infection difficult to eradicate. The objective of study was to identify the microorganisms recovered from the set screwplate and screws metallic after surgical removal, evaluate the capacity of adherence of microorganisms, check the cell viability and characterize the isolates genotypically Gram-positive and detect antimicrobial resistance. The sets screw-plate and screws of austenitic stainless steel ASTM F138/F139 and ISO NBR 5832-1/9 were transported in polyethylene bag to the Laboratory of Clinical Microbiology. The implants were washed in phosphate buffered saline solution, stored in bags containing Ringer's solution and submitted to ultrasonic bath at a frequency of 40 kHz ± 2 for 5 minutes. The sonicate fluid was transferred to falcon tubes and centrifuged at 3.000g for 20 minutes The new sediment was re-suspended in Ringer's solution, homogenized by vortex and 10μL seeded agar 5% sheep blood, MacConkey and Sabouraud. The media were incubated at different temperatures for up to 7 days for growth of CFU mL-1. The resistance profile of the isolates was obtained according to CLSI 2011. For analysis of cell viability kit was used for Live/Dead and fluorescence microscope. After microbiological analysis the isolation was observed in some samples of polymicrobial implants. The data obtained showed that bacteria were the most isolated coagulase-negative... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Clarice Queico Fujimura Leite / Coorientador: Elisabeth Loshchagin Pizzolitto / Banca: Eliana Aparecida Varanda / Banca: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Banca: Denise Crispin Tavares / Mestre

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2018-08-16T13:19:25Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ítalo Dany Cavalcante Galo - 2018.pdf: 2927565 bytes, checksum: 078e47430d5f7162d86e682c8a01e08b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-08-17T11:19:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ítalo Dany Cavalcante Galo - 2018.pdf: 2927565 bytes, checksum: 078e47430d5f7162d86e682c8a01e08b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T11:19:44Z (GMT). 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Thus, the present study aimed to verify the antibacterial action of blue light using different experimental protocols in order to clarify contradictions reported in the literature on the subject and to determine a reproducible protocol for the study of bacterial resistance. In vitro cultures of S. aureus, E. coli, P. aeruginosa, K. pneumoniae, S. epidermidis, E. faecalis and C. albicans were performed specifically for each test of light irradiation by blue ( 470 nm) or red (660 nm) light LED emitters. Different variations of light application were performed under two conditions: after inoculation and before inoculation in agar. In addition, preliminary testing was performed to verify the possible development of bacterial resistance to blue light. All of the in vitro assays evidenced important bacterial growth inhibition, showing that the possible inherent biases found in the literature can be eliminated with the adoption of specific protocol measures and that, in fact, the blue light inhibits the growth of these infectious agents. It has been demonstrated that, in all cases, the use high application times (and hence doses) of blue light is required to have better inhibition. The resistance test performed suggests higher sensitivity of S. aureus in relation to P. aeruginosa and E. coli, showing evidence that E. coli tends to become more resistant to successive applications of this photoemission. The present study evidences that the blue light has antibacterial action in all the in vitro protocols tested, being indicated the use of light application with the infectious agent in liquid medium rich in nutrients as a way of optimizing subsequent tests of greater complexity. The test of resistance to the blue light adopted evidences more tendency to resistance by the bacterium Escherichia coli in relation to other species tested. / Infecções bacterianas aumentam significativamente a morbidade e mortalidade no âmbito hospitalar, quadro que se agrava substancialmente na presença da resistência bacteriana. Por esta razão, pesquisas que tragam alternativas terapêuticas que sejam eficientes, baratas e seguras no combate a diferentes agentes infecciosos são necessárias. Uma terapia em potencial é a fototerapia antimicrobiana, representada especialmente pela luz azul, a qual se mostra promissora, mas, ainda demanda de estudo e ajustes quanto a melhor maneira de aplicação. Assim, o presente estudo teve como objetivo verificar a ação antibacteriana da luz azul utilizando diferentes protocolos experimentais a fim de esclarecer contradições reportadas na literatura sobre o tema e determinar um protocolo reprodutível para estudo de resistência bacteriana. Foram realizadas culturas in vitro de S. aureus, E. coli, P. aeruginosa, K. pneumoniae, S. epidermidis, E. faecalis e C. albicans de forma específica para cada teste de irradiação luminosa obtida por meio de emissores LED de luz azul (470 nm) ou vermelha (660 nm). Foram realizadas diferentes variações de aplicação da luz em duas condições: após semeadura e anterior à semeadura em ágar. Além disso, foi feito teste preliminar para verificação de possível desenvolvimento de resistência bacteriana à luz azul. Todas as análises in vitro adotadas evidenciam importante inibição bacteriana, mostrando que os possíveis viesses inerentes a trabalhos encontrados na literatura podem ser eliminados com a adoção de medidas protocolares específicas e que, de fato, a luz azul inibe o crescimento destes agentes infecciosos. Foi demonstrado que, em todos os casos, é necessário o uso de elevados tempos de aplicação (e, consequentemente, doses) de luz azul para se ter melhor inibição. O teste de resistência realizado sugere maior sensibilidade da S. aureus em relação a P. aeruginosa e E. coli, e mostra evidências de que a E. coli tende a se tornar mais resistente à aplicações sucessivas desta fotoemissão. O presente estudo evidencia que a luz azul possui ação antibacteriana em todos os protocolos in vitro testados, sendo indicado o uso de aplicação da luz com o agente infeccioso em meio líquido rico em nutrientes como forma de otimizar testes de maior complexidade subsequentes. O teste de resistência à luz azul evidencia maior tendência à resistência por parte da bactéria Escherichia coli em relação a outras espécies testadas.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A otite resulta da inflamaÃÃo do conduto auditivo e representa 8-15% dos casos na prÃtica veterinÃria. Com o objetivo de delinear e comparar o perfil de isolamento de microrganismos a partir dos ouvidos mÃdio e externo de cÃes com otite foi realizado este estudo. No perÃodo de agosto/2003 a marÃo/2004 foram analisados 64 cÃes com otite externa e mÃdia associados e 50 cÃes com conduto auditivo hÃgido. A coleta de amostras foi realizada no Centro de Controle de Zoonoses de Fortaleza-CE e a anÃlise microbiolÃgica no Setor de Microbiologia do Depto. de Patologia e Medicina Legal/UFC. As amostras do ouvido externo foram coletadas com auxÃlio de swab estÃril eas de ouvido mÃdio atravÃs da tÃcnica de osteotomia da bula timpÃnica. A cultura e identificaÃÃo de microrganismos foram realizadas segundo metodologia estabelecida e os testes de susceptibilidade atravÃs do mÃtodo de difusÃo em Ãgar gel (NCCLS). Em cÃes otopatas as alteraÃÃes mais frequentes foram: escoriaÃÃes no pavilhÃo auricular (72%), otalgia (12%) e alteraÃÃo no posicionamento do pavilhÃo (12%). Em 62% dos animais a membrana timpÃnica se encontrava Ãntegra, embora mostrasse alguma alteraÃÃo estrutural. A cultura foi positiva em 48% das amostras de ouvido mÃdio e os agentes isolados com maior frequÃncia foram: Estafilococos coagulase-positiva (62,5%), bacilos Gram-negativos nÃo fermentadores (10%), enterobactÃrias (5%) e Candida albicans (5%). Foi verificada diferenÃa no nÃmero e variedade de espÃcies isoladas do ouvido externo quando comparado ao ouvido mÃdio, onde predominaram: Bacillus sp. (27,1%), M. pachydermatis (23,4%) e S. intermedius (21,8%). Os agentes mais isolados nos ouvidos externos de cÃes com otite bilateral foram: Bacillus sp. (27,9% e 31%), M. pachydermatis (25,9% e 24%), S. intermedius (23,8% e 24,6%) e EnterobactÃrias (6% e 6,1%). Observou-se diferenÃa significativa (p<0,0001) na forma como os agentes se associam, revelando a individualidade de cada conduto auditivo nesses quadros. A presenÃa de bactÃrias anaerÃbias estritas nÃo foi observada. Cepas de S. intermedius (n=83) mostraram resistÃncia intermediÃria à maioria dos antimicrobianos testados e altos nÃveis de resistÃncia a: penicilina (36,1%), ampicilina (27,7%), tetraciclina (27,7%), eritromicina (14,5%) e clindamicina (12%). Os resultados obtidos descrevem a variedade de agentes bacterianos e fÃngicos associados aos quadros de otite canina e sugerem a necessidade de se adotar procedimentos sistemÃticos e direcionados para o diagnÃstico e tratamento de otopatias em cÃes. / Otitis results from auricular inflammation and represents 8-15% of all cases received in the veterinarian practices. This study was done to outline and compare the isolation profile in external and middle ears from dogs with otitis. Between August/2003 and March/2004, 64 dogs with both otitis externa and media and 50 dogs with bilateral otitis externa were studied. Fifty dogs with healthy ears were used as control group. The collection was done ate the Zoonosis Control Center in Fortaleza-CE and the microbiological analysis at the Microbiological Center - Department of Pathology and Legal Medicine-UFC. Samples from the external ears were collected with sterile swabs and the ones from the middle ears by osteotomy of the tympanic bulla. The microrganisms were cultured and identified according to methods previously described and susceptibility tested by agar diffusion method (NCCLS). In otitic dogs the most frequent alterations were: lesions of the pinna (72%), local pain (12%) and alteration of the pinna position (12%). Sixty-two per cent of the dogs showed entire tympanic membrane with some structural alteration. Microbiogical growth was seen in 48% of the samples fromdogss with otitis media, and the most frequent isolates were: Estafilococos positive-coagulase (62.5%), non-fermentative Gram-negative (10%), Enterobacteriaceae (5%) and Candida albicans (5%). It was observed that there was an increased number and variety of species isolated in external ears comparaed to middle ears. In samples from external ears, the following predominated: Bacillus sp. (27.1%), M. pachydermatis (23.4%) e S. intermedius (21.8%). The most frequent species isolated in dogs with bilateral otitis externa were: Bacillus sp. (27.9% e 31%), M. pachydermatis (25.9% e 24%), S. intermedius (23.8% e 24.6%) e EnterobactÃrias (6% e 6.1%). There was a significative difference (p<0.0001) in the way the isolates were associated, which showed the individuality from each ear in bilateral otitis externa. In this study, no anaerobic microrganisms were isolated. S. intermedius strains (n=83) showed intermediate resistance to most of the cntimicrobials tested and high resistance to penicillin (36.1%), ampicillin (27.7%), tetracyclin (27.7%), erythromycin (14.5%) and clindamycin (12.0%). These results describe tha variety of bacterial and fungal isolates associated with canine otitis and reveal the need to adopt systematic procedures for the diagnosis and treatment of dogs with otitis.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Antibiotics are the most prescribed drugs at the Intensive Care Units. Bacteria has become more and more resistant to those drugs, which represents a threat of public health. Keeping eyes on the use of antimicrobic agents is one of the essential preconditions to control that resistance. In the period of November 1st 2005 to June 30th 2006, was verified an observational study, descriptive and prospective, where were evaluated the handbook of patients on Intensive Care Unit (ICU) of âSanta Casa de MisericÃrdia de Fortalezaâ. About 157 patients were observed and their handbook and structured forms. The social-demographic characteristics, the factors of risk associated to clinic evolution and the identification and profile of bacterial resistance were studied. The use of antimicrobic was evaluated with the objective to available subsidies to a good and rational use of drugs. The collected data were analyzed on the SPSS, version 10.0. The patients presented an average of 66 years old and the mortality between the elderly people was 60%. The most frequent diagnosed hypotheses were respiratory infection (28.7%) and sepses (15.9%), associated to 48.9% out of 80% of the total registered deaths. About half of those who made use of veinal or urinary catheters - 62.4% and 87.3%, respectively, came to die. It was found that the antibiotic therapy applied in those patients was not based on the microbiotic sensitiveness patterns, and the antibiotic consume was 182,8 DDD (daily dose definite) per bed a day. The most given antibiotic were the Ã-lactamics (107.8 DDD per 100 beds a day), such as ceftriaxone (31.9%), ciprofloxacin (16.9%) and clindamicin (14.4%). The highest dose of antibiotic given was ceftriaxone (50.3 DDD/100 beds a day). The Gram-negative bacilli were more often (71.1%), especially P. aeruginose (21.7%). The most predominant species was S. aureus (22.9%). 77.8% and 84.2% of ceps displayed tough toward cefalotin and penicillin, respectively. Most of patients (54.1%) died, though they were under antibiotic therapy. The broad profile of resistance at antibiotics shown in this research follows the recent patterns, which state that the most of the isolated patients are resistant to the Ã-lactamics, such as Pseudomonas and Staphylococcus. Scientists have become more concerned about the future, due to the high therapeutic limitation. The outcomes displayed in this essay aims to point out the necessity of monitoring the sue of antibiotics at Intensive Care Units, in order to minimize the causes of mortality due to the abuse of antibiotics. Educational actions, in order to promote a permanent guard on the use of antibiotics at hospitals, along with a rational politic to regulate the their use are very important measures to prevent and control such restless situation. / Perfil de utilizaÃÃo de antimicrobianos na unidade de terapia intensiva da Santa Casa de MisericÃrdia de Fortaleza Os antibiÃticos sÃo as drogas mais prescritas nas Unidades de Terapia Intensiva e o aumento constante da resistÃncia bacteriana a essas drogas à uma ameaÃa à saÃde pÃblica. A vigilÃncia do uso de antimicrobianos à um dos prÃ-requisitos essencial para a promoÃÃo do controle da resistÃncia. No perÃodo de 01 de Novembro de 2005 a 30 de junho de 2006, foi realizado um estudo observacional, descritivo e prospectivo, onde foram avaliados os prontuÃrios de pacientes internados na Unidade Terapia Intensiva (UTI) da Santa Casa de MisericÃrdia de Fortaleza. Foram observados 157 pacientes atravÃs de seus prontuÃrios e formulÃrios estruturados. As caracterÃsticas sÃcio-demogrÃficas, os fatores de riscos associados à evoluÃÃo clÃnica e a identificaÃÃo e perfil de resistÃncia bacteriano foram estudadas. A utilizaÃÃo de antimicrobianos foi avaliada com o objetivo de disponibilizar subsÃdios para o uso adequado e racional desses fÃrmacos. Os dados coletados foram analisados no SPSS versÃo 10.0. Os pacientes apresentaram uma media de 66 anos de idade e a mortalidade entre os maiores de 60 anos foi de 60,0%. As hipÃteses diagnÃsticas mais freqÃentes, infecÃÃo respiratÃria (28,7%) e sepse (15,9%), foram associadas a 48,9% e 80% dos Ãbitos, respectivamente. Cerca da metade dos pacientes que fizeram uso de cateter venoso central e ou de cateter urinÃrio, 62,4% e 87,3%, respectivamente, evoluÃram para Ãbito. A antibioticoterapia frequentemente nÃo foi baseada nos padrÃes de sensibilidade microbiana e o consumo de antibiÃticos foi de 182,8 Dose DiÃria Definida (DDD) por 100 leitos-dia. Predominou o uso de &#946;-lactÃmicos (107,8 DDD por 100 leito-dias), os antimicrobianos mais consumidos foram ceftriaxona (31,9%), ciprofloxacina (16,9%) e clindamicina (14,4%) e o maior valor de DDD foi para ceftriaxona (50,3 DDD/100 leito-dias). A resistÃncia bacteriana foi elevada para a maioria dos antibiÃticos utilizados, especialmente aos &#946;-lactÃmicos. Os bacilos Gram-negativos foram mais freqÃentes (71,1%), especialmente P. aeruginosa (21,7%). A espÃcie predominante foi S. aureus (22,9%). 77,8% e 84,2% das cepas de P. aeruginosa e S. aureus foram resistentes a cefalotina e à penicilina, respectivamente, e 47,4 % dos isolados de S. aureus apresentaram resistÃncia à Oxacilina e 0,6% à Vancomicina. A maioria dos pacientes (54,1%) foi a Ãbito. O amplo perfil de resistÃncia aos antimicrobianos constatado nesse estudo segue o padrÃo atual, onde a maioria dos isolados sÃo resistentes aos &#946;-lactÃmicos e pertencem aos gÃneros Pseudomonas e Staphylococcus. A elevada resistÃncia das cepas de S. aureus à oxacilina à motivo de grande preocupaÃÃo, devido à limitaÃÃo terapÃutica que essa resistÃncia determina. Os resultados obtidos nesse trabalho mostram a necessidade de se monitorar o uso de antibacterianos e a ocorrÃncia de resistÃncia bacteriana em UTIâs, no sentido de minimizar os fatores que predispÃem ao aumento da morbidade e mortalidade. A promoÃÃo de aÃÃes educativas, da vigilÃncia permanente das cepas bacterianas hospitalares e de uma polÃtica racional para o uso de antimicrobianos sÃo medidas de imensa importÃncia na prevenÃÃo e no controle dessa situaÃÃo.

Atualmente, no Brasil, a produção de enzimas do tipo KPC constitui o principal mecanismo de resistência aos carbapenêmicos em Klebsiella pneumoniae, contribuindo para a endemicidade hospitalar da espécie. No presente estudo, foi caracterizada a produção de KPC em 38 enterobactérias que foram diferençadas entre os grupos CESP (enterobactérias com produção induzida da &#946;lactamase AmpC, ex., Enterobacter spp., Serratia marcescens e Morganella morganii) e não CESP (ex., Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli e Proteus mirabilis). pertencendo a isolados recuperados de pacientes colonizados e/ou apresentando infecção urinária, pneumonia ou bacteremia, em três centros médicos de três diferentes regiões do Brasil (Amazonas, Mato grosso, Minas Gerais), durante 2008-2013. Os isolados apresentaram resistência para cefalosporinas de amplo espectro (86,8 - 94,7%), cefoxitina (86,8%), ertapenem (89,4%), imipenem (89,4%), meropenem (84,2%), amicacina (86,8%), ciprof1oxacina (84,2%), tigeciclina (42,1 %, CIM50= 2 &#181;g/ml), sulfametoxazol/trimetoprim (SXT, 60,5%) e gentamicina (57,8%). Entre bactérias do grupo CESP, os isolados de S. marcescens apresentaram sensibilidade para fosfomicina (CIM50= 8 &#181;g/mL) e sulfametoxazol-trimetoprim (CIM50= 1/19 &#181;g/mL). A produção de carbapenemase foi confirmada pelo teste de Hodge modificado e por inibição por acido fenil borônico em 76,31 e 73,68% dos isolados do grupo CESP e não CESP, respectivamente. A presença do gene blaKPC-2 foi confirmada em 78,9% dos isolados clinicos e variantes do gene blaCTX-M foram identificados em 57,89% das cepas. Cepas de S. marcescens e E. aerogenes clonalmente relacionadas por ERIC-PCR foram associadas a surtos de infecção nosocomial. Resultados do presente estudo confirmam que a produção de KPC no Brasil, ocorre em uma grande variedade de espécies de enterobactérias sendo frequentemente associada com a co-produção de ESBLs do tipo CTX-M, o que poderia favorecer a endemicidade com o subseqüente estabelecimento de surtos de infecção. Um dado relevante, foi à alta resistência a fosfomicina (66,66%) associada à presença do gene fosA2 em cepas de E. aerogenes e K. pneumoniae produtores de KPC-2. / Currently, in Brazil, the production of KPC-type enzymes is considered the main mechanism of carbapenem resistance in Klebsiella pneumoniae, which has contributed for the nosocomial endemicity of this specie. In this study, the KPC production was characterized in 38 Enterobacteriaceae isolates differenced among CESP (Enterobacteriaceae with inducible production of AmpC-type &#946;-lactamase, i.e., Enterobacter spp., Serratia marcescens and Morganella morganii) and not CESP (Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli e Proteus mirabilis) groups recovered from colonized patients and/or with urinary tract infection, pneumonia or bacteremia, in three medicai centers from different regions of Brazil (Amazonas, Mato Grosso, Minas Gerais) during 2011-2013. The isolates were resistant to broad-spectrum cephalosporins (86.8 - 94.7%), cefoxitin (86.8%), ertapenem (89.4%), imipenem (89.4%), meropenem (84.2%), amikacin (86.8%), ciprofloxacin (84.2%), tigecycline (42.1 %, MIC50 = 2 &#181;g/mL), trimethoprim-sulfamethoxazole (SXT, 60.5%) and gentamicin (57.8%). S. Marcescens isolates exhibited additional susceptibility to fosfomycin (MIC50 = 8 &#181;g/mL) and sulfamethoxazole-trimethoprim (MIC50 = 1/19 &#181;g/mL). Carbapenemase production was confirmed by Hodge modified test and inhibition by phenyl boronic acid in 76.31 and 73.68% of CESP and no CESP isolates, respectively. In fact, the presence of the blaKPC-2 gene was confirmed in 78.9% of enterobacterial isolates, whereas blaCTX-M ESBL gene variants were identified in 57.89% of the strains. S. Marcescens and E. aerogenes isolates were clonally related by ERIC-PCR being associated with outbreaks of nosocomial infection. Results of this study confirm that the production of KPC in Brazil occurs in a variety of species of Enterobacteriacea producing CTX-M-rype ESBLs, favoring the endemicity and the establisbment of outbreaks. A relevant finding was the high resistance to fosfomycin (66.66%) associated with the presence of the fosA2 gene in KPC-2-producing E. aerogenes and K. pneumoniae strains.

A contaminação de equipamentos e materiais hospitalares por microrganismos potencialmente infecciosos e altamente resistentes aos antibióticos incitam grupos de pesquisa e industrias ao redor do mundo a produzir novos materiais, e que estes possuam propriedades capazes de inibir ou eliminar (quase que completamente) a permanência desses patógenos sobre sua superfície. O objetivo deste trabalho foi avaliar a citotoxicidade da liga níquel-berílio quando em contato com as cepas bacterianas de Staphylococcus aureus (ATCC 25932), Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Klebsiella pneumoniae (amostra clínica) e Escherichia coli (ATCC 11775), após diferentes períodos de incubação, e em contato com a linhagem celular NCTC Clone 929, célula de tecido conectivo de camundongo. Para realização destes ensaios, foram confeccionados corpos de prova da liga níquel-berílio, com aproximadamente 10,0 mm e diâmetro e 3,0 mm de espessura. Para metodologia de citotoxicidade as células bacterianas preparou-se um inóculo bacteriano de 109 Unidades Formadoras de Colônia por mililitro. Para cada bactéria, um inóculo bacteriano foi preparado e deste, 40 &#956l foram aplicados em um swab estéril e espalhado no corpo de prova, onde foram introduzidos em placas de Petri, deixados a temperatura 20°C, por diferentes períodos de exposição (1, 3, 6, 9, 12, 18, 24 e 72 horas). Este teste foi realizado em triplicata. Após cada período de tempo, os corpos de prova eram pressionados contra o meio de cultura Agar Mueller-Hinton, em dez diferentes pontos da placa. O método de difusão em Agar foi utilizado para verificar a citotoxicidade da liga níquel-berílio à linhagem celular NCTC clone 929. Os resultados obtidos demonstram uma maior resistência a liga níquel-berílio das bactérias gram-positivas (S. aureus e S. epidermidis) quando comparadas com as gram-negativas (P. aeruginosa, K. pneumonia e E. coli). Destas últimas citadas, a E. coli foi a única que sobreviveu até a sexta hora de exposição, quando em contato de uma hora com o corpo de prova. Todavia, os S. aureus e S. epidermidis foram capazes de resistir até a décima segunda hora em contato com a liga níquel-berílio. Contudo, a partir deste período de incubação, nem mesmo os estafilococos toleraram a presença desses íons. Quando analisados os resultados de citotoxicidade, a liga não apresentou qualquer efeito citotóxico as células NCTC clone 929, sendo classificadas como índice de zona (IZ) zero. Os dados obtidos demonstram que a liga possui propriedades antibacteriana contra as células bacterianas testadas e que não possui nenhum efeito tóxico à linhagem celular NCTC clone 929. Além disso, a liga NiBe mostrou-se mais citotóxica contra as bactérias gram-negativas. / The contamination of equipment and hospital supplies for potentially infectious microorganisms and highly resistant to antibiotics encourage research groups and industries around the world to produce new materiais, and they have properties able to inhibit or eliminate (almost completely) to stay these pathogens on its surface. The objective of this study was to evaluate the cytotoxicity of nickel-beryllium alloy when in contact with the bacterial strains of Staphylococcus aureus (ATCC 25932), Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Klebsiella pneumoniae (clinical sample) and Escherichia coli (ATCC 11775), after different periods of incubation, and in contact with the cell line NCTC Clone 929, connective tissue of mouse cell. For these assays were prepared coupons of nickel-beryllium alloy, with approximately 10.0 mm and diameter and 3.0 mm thick. For cytotoxicity methodology bacterial cells prepared in a bacterial inoculum of 109 Colony-Forming Units per milliliter. For each bacterium, a bacterial inoculum was prepared and this, 40 &#956l were applied in a sterile swab and spread in the coupons, which were introduced in Petri dishes left at 20°C temperature, for different exposure times (1, 3, 6, 9, 12, 18, 24 and 72 hours). This test was performed in triplicate. After each time period, the samples were pressed against the culture medium Mueller-Hinton Agar at ten different points of the plate. The agar diffusion method was used to assess the cytotoxicity of nickel-beryllium alloy to clone cell line NCTC 929. The results show a greater resistance to nickel-beryllium alloy of gram-positive bacteria (S. aureus and S. epidermidis) compared to gram-negative (Pseudomonas aeruginosa, K. pneumoniae and E. coli). Of the latter mentioned, E. coli was the only one that survived until the sixth hour of exposure when contact an hour with the alloy. However, S. aureus and S. epidermidis were able to hold out until the twelfth time in contact with nickel-beryllium alloy. However, from this incubation period, even staphylococci tolerated the presence of these ions. When analyzed the results of cytotoxicity, the alloy showed no cytotoxic effect the NCTC clone 929 cells, are classified as zone index (IZ) zero. The data obtained show that the alloy possesses antibacterial properties against the tested bacterial cells and has no toxic effect on the cell line NCTC clone 929. Furthermore, \'Ni\'\'Be\' alloy was more cytotoxic against gram-negative bacteria.