Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-03-24T12:29:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese - Augusto Ribeiro Gabriel - 2014.pdf: 1977753 bytes, checksum: 126a201173259e6ab5741dfeadcb8ba9 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-03-24T14:07:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese - Augusto Ribeiro Gabriel - 2014.pdf: 1977753 bytes, checksum: 126a201173259e6ab5741dfeadcb8ba9 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-24T14:07:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese - Augusto Ribeiro Gabriel - 2014.pdf: 1977753 bytes, checksum: 126a201173259e6ab5741dfeadcb8ba9 (MD5) Previous issue date: 2014-08-05 / With the exception of skin cancer, breast cancer remains the most common malignant neoplasm affecting women both in Brazil and worldwide, inflicting severe economic, social and emotional consequences on patients and their families. Despite advances made in diagnostic and therapeutic techniques over recent decades, mortality rates from breast cancer remain expressive. To be able to treat tumors appropriately, not only profound knowledge of the cell mechanisms involved in their genesis, but also knowledge of the mechanisms involved in the success or failure of treatment is crucial. Various methods have been developed for this purpose, including the evaluation of biological tumor markers and the genetic studies. The objective of the present study was to evaluate some biological markers involved in the differentiation and evolution of breast cancer, using immunohistochemistry on tissue arrays. A retrospective study was conducted between 2006 and 2012 in which clinical data were obtained from patient charts, and tissue samples conserved in paraffin blocks were prospectively analyzed and correlated with each other and with the patient’s response to neoadjuvant chemotherapy. The results were presented in two papers. In the first article, biomarker expression was evaluated in biopsy specimens obtained at diagnosis and then following treatment with adjuvant chemotherapy, with correlations being drawn between the differences found. Statistically significant differences were found in Ki-67, IGF-1, topoisomerase II-alpha and CK5/6 marker expression, indicating the effect of chemotherapy on the proliferation index of the malignant breast tumors. On the other hand, no statistically significant differences were found in HER2, estrogen and progesterone receptors, PTEN or EGFR. In the second paper, correlations were sought between biological marker expression and the patient’s outcome response to previous chemotherapy, with results showing significant correlations between the HER2 and topoisomerase II-alpha markers and pathologic complete response despite the fact that the sample was small. No other statistically significant correlations were found with any of the other markers evaluated. When molecular subtypes were analyzed, the study showed a greater frequency of pathologic complete response for the HER2 subtype and this difference was statistically significant. Another important result was the correlation between the tendency towards a reduction in mean Ki-67 values and a clinical benefit from the treatment implemented a finding that led to the preparation of a third paper, which consisted of an integrative review of the Ki-67 marker. This review concluded that further studies need to be conducted on the Ki-67 marker and that its expression should be analyzed dynamically to establish whether a correlation exists between this marker and patients’ prognosis and whether Ki-67 is a predictor of treatment response. / Tanto no Brasil quanto no mundo, excluindo-se o câncer de pele, o câncer de mama ainda é a neoplasia maligna que mais acomete as mulheres, trazendo prejuízo econômico, social e emocional para elas e suas famílias. Apesar dos avanços diagnósticos e terapêuticos observados nas últimas décadas, o câncer de mama ainda carrega taxas de mortalidade expressivas. Para que se possa tratar de forma adequada os tumores, é imprescindível o conhecimento profundo dos mecanismos celulares envolvidos na sua gênese, bem como dos mecanismos envolvidos no sucesso ou fracasso do tratamento. Vários métodos foram desenvolvidos neste sentido, como o estudo de marcadores biológicos dos tumores e estudos genéticos. O presente estudo teve como proposta avaliar alguns marcadores biológicos envolvidos na diferenciação e evolução do câncer de mama através da técnica de imunohistoquímica em amostras preparadas em matrizes de arranjo teciduais. Realizou-se um estudo retrospectivo no período compreendido entre 2006 e 2012, quando foram obtidos dados clínicos de prontuários e amostras de tecidos conservados em blocos de parafina, prospectivamente analisados e correlacionados entre si e com os desfechos de resposta à quimioterapia neoadjuvante. Os resultados foram apresentados em dois artigos. No primeiro artigo avaliou-se a expressão dos marcadores nas biópsias quando da realização do diagnóstico e após o tratamento com a quimioterapia adjuvante, correlacionando-se as diferenças encontradas. Diferenças de expressão dos marcadores Ki67, IGF-1, Topoisomerase II-alfa e CK5/6 foram observadas, com significado estatístico indicando o efeito da quimioterapia no índice de proliferação dos tumores malignos de mama. Por outro lado, os marcadores HER2, receptores de estrógenos, receptores de progesterona, PTEN e EGFR não apresentaram diferenças significativas. No segundo artigo, correlacionou-se a expressão dos marcadores biológicos com os desfechos de resposta à quimioterapia prévia e concluiu-se que, embora em uma amostra pequena, os marcadores HER2 e Topoisomerase II-alfa apresentaram correlação significativa com a resposta patológica completa, o que não aconteceu com os demais marcadores. Analisando subtipos moleculares este estudo evidenciou, de forma estatisticamente significativa, maior frequência de resposta patológica completa para o subtipo HER2. Outro achado importante foi evidenciado na correlação entre a tendência na redução da média dos valores de Ki67 e o benefício clínico do tratamento realizado, fato este que levou à elaboração do terceiro artigo, uma revisão integrativa acerca do marcador Ki67. Esta revisão permitiu concluir que o marcador em análise ainda precisa ser objeto de estudos e que sua expressão deve ser analisada de forma dinâmica, para avaliar se a mesma correlaciona-se com o prognóstico das pacientes e a predição de resposta ao tratamento.

Neste trabalho foram propostas técnicas para a segmentação automática de mamogramas e para a detecção de assimetrias entre mamogramas esquerdo e direito. A segmentação é realizada através de três técnicas computacionais para a identificação de três importantes regiões anatômicas nos mamogramas: borda da mama, músculo peitoral e disco fibro-glandular. O primeiro método focaliza a identificação da borda da mama através do uso de um modelo de contorno ativo especialmente projetado para esse propósito. Neste estágio, a borda da mama é automaticamente demarcada, todos os artefatos fora dessa região são eliminados, e a região de interesse usada para a detecção do músculo peitoral é definida. No próximo estágio, a borda do músculo peitoral é determinada usando uma técnica multiresolução baseada na representação Gabor wavelets. Finalmente, um modelo de densidades da mama, baseado no modelo da mistura finita de Gaussianas, é proposto para a representação de quatro categorias de tecidos mamários com diferentes densidades. O disco fibro-glandular é identificado através da aplicação de um limiar sob as classes de densidades determinadas no modelo. Os métodos propostos foram aplicados em 84 imagens de mamogramas de projeções médio-laterais oblíqüas da base de dados Mini-MIAS (\"Mammographic Image Analysis Society\", London, UK). A avaliação dos resultados dos procedimentos de segmentação da borda da mama e borda do músculo peitoral foi realizada com base no percentual de pixels falso-positivos (FPs) e falso-negativos (FNs) determinados por comparação entre os contornos verdadeiros e os contornos automaticamente identificados. As taxas médias de FPs e FNs para as bordas da mama e do músculo peitoral foram, respectivamente, de 0,41% e 0,58%, e 1,78% e 5,77%. A segmentação dos discos fibro-glandulares foi subjetivamente classificada por radiologistas e os resultados indicaram que em mais de 80% dos casos a segmentação foi ) considerada aceitável para o uso em sistemas de auxílio ao diagnóstico. A detecção de assimetrias foi realizada usando informações direcionais, obtidas a partir da representação multiresolução Gabor wavelets, e de informações de forma e densidade, extraídas dos discos fibro-glandulares dos mamogramas esquerdo e direito. No procedimento de análise direcional, uma representação wavelet formada por filtros de Gabor bidimensionais com variação em freqüência e orientação, especialmente projetadas para reduzir a redundância na representação, é aplicada para uma dada imagem. As respostas dos filtros para diferentes escalas e orientações são analisadas através da transformada de Karhunen-Loève (KL) e pelo método de limiarização de Otsu. A transformada KL é aplicada para selecionar os componentes principais das respostas dos filtros, preservando apenas os elementos direcionais mais relevantes que aparecem em todas as escalas. Os componentes principais selecionados e limiarizados pela técnica de Otsu são usados para obter as imagens de magnitude e fase dos componentes direcionais da imagem. Medidas estatísticas extraídas dos diagramas de rosa calculados a partir das imagens de fase são usadas para a análise quantitativa e qualitativa dos padrões orientados. Um total de 11 atributos é extraído dos discos fibro-glandulares segmentados dos mamogramas esquerdo e direito, e a diferença calculada para cada par de atributos é usada como uma medida para a detecção de assimetrias. Um total de 88 imagens (22 casos normais, 14 casos de densidades assimétricas e 8 casos de distorções de arquitetura) da base de dados Mini-MIAS foram usadas para avaliar o método proposto. A combinação exaustiva dos atributos juntamente com a análise de componentes principais foi usada para selecionar o melhor subgrupo de atributos. A classificação foi realizada através de classificadores de Bayes (linear e quadrático) ) e usando o método \"leave-one-out\". Uma taxa de classificação correta de 84,44% foi alcançada. / In this work, techniques are proposed for the automatic segmentation of mammograms and detection of asymmetries between left and right mammograms. The segmentation is performed by using three computational techniques for the identification of three important anatomical regions of mammograms: the skin-air boundary, the pectoral muscle, and the fibro-glandular disc. The first method focuses on the identification of the skin-air boundary by using an active contour model algorithm specially tailored for this purpose. In this stage, the skin-air boundary is demarcated, all artefacts outside the breast region are eliminated, and the region of interest for detection of the pectoral muscle is defined. In the next stage, the edge of the pectoral muscle is determined by using a multiresolution technique based upon a Gabor wavelets representation. Finally, a density breast model based upon a Gaussian mixture model is proposed for the representation of four categories of different density tissues in the breast. The fibro-glandular disc is identified by thresholding the density categories of the model. The methods proposed were applied to 84 images of medio-lateral oblique mammograms from the Mini-MIAS (Mammographic Image Analysis Society, London, U.K.) database. The evaluation of the skin-air boundary and the pectoral muscle edge were performed based upon the percentage of false-positive (FP) and false-negative (FN) pixels determined by comparison between the true contours and the contours automatically identified. The FP and FN average rates for the skin-air boundary and the pectoral muscle edge were, respectively, 0.41% and 0.58%, and 1.78% and 5.77%. Two radiologists subjectively rated the segmentation of the fibro-glandular disc and the results indicate that in more than 80% of the cases, the segmentation was considered acceptable for a Computer Aided Diagnosis purposes. Detection of asymmetries (continua) (continuação) is performed by using directional information, obtained from a multiresolution Gabor wavelets representation, and shape and density information, extracted from the fibro-glandular discs of left and right mammograms. In the directional procedure, a particular wavelet scheme with 2-D Gabor filters as elementary functions with varying tuning frequency and orientation, specifically designed in order to reduce the redundancy in the wavelet-based representation, is applied to the given image. The filter responses for different scales and orientation are analyzed by using the Karhunen-Loève (KL) transform and Otsu\'s method of thresholding. The KL transform is applied to select the principal components of the filter responses, preserving only the most relevant directional elements appearing at all scales. The selected principal components are thresholded by using Otsu\'s method and used to obtain the magnitude and phase of the image directional components. Rose diagrams computed from the phase images and statistical measures computed thereof are used for quantitative and qualitative analysis of the oriented patterns. A total of 11 features are also extracted from the segmented fibro-glandular discs of left-right mammograms, and the difference of each feature pair is used as a measure for detecting asymmetries. A total of 88 images from 22 normal cases, 14 asymmetric cases, and 8 architectural distortion cases from the Mini-MIAS database were used to evaluate the scheme. An exhaustive combination of the features along with the principal components analysis was used to select the best feature set. The classification was performed by using two Bayes\' classifiers (linear and quadratic) and the leave-one-out methodology. Average classification accuracy up to 84.44% was achieved.

A ciclofosfamida (CPA) é um agente alquilante da classe das oxazafosforinas amplamente usada no tratamento de múltiplas formas de câncer e de doenças autoimunes em adultos e crianças. A CPA está disponível na clínica como racemato, no entanto, dados pré-clínicos demonstraram diferenças na eficácia e toxicidade dos seus enantiômeros, sendo o enantiômero (S)-(-)-CPA o de maior índice terapêutico. O presente estudo investigou a enantiosseletividade e a influência do CYP2B6, CYP2C9, CYP2C19 e CYP3A na disposição cinética da ciclofosfamida (CPA) em pacientes portadoras de câncer de mama. Foram incluídas na investigação 15 pacientes previamente submetidas ao procedimento de retirada do tumor e tratadas com CPA racêmica (900-1000 mg) e epirrubicina. A atividade in vivo do CYP3A foi avaliada empregando o midazolam como fármaco marcador. As amostras seriadas de sangue foram coletadas até 24 horas após a administração do primeiro ciclo da CPA. Os enantiômeros da CPA foram extraídos do plasma, usando mistura de acetato de etila:clorofórmio (75:25, v/v) e separados na coluna Chiralcel® OD-R com fase móvel constituída por acetonitrila:água (25:75, v/v), contendo 0,2% de ácido fórmico. Os enantiômeros da CPA foram analisados por LC-MS-MS, sendo que os íons protonados e seus respectivos íons-produtos foram monitorados nas transições 261>141 para a CPA e 189>104 para o padrão interno (antipirina). A recuperação foi maior que 95% para ambos os enantiômeros da CPA e o limite de quantificação foi de 2,5 ng/mL de plasma para cada enantiômero. Os coeficientes de variação e os erros relativos obtidos na avaliação da precisão e exatidão intra e inter-ensaios foram menores que 10%. Os parâmetros farmacocinéticos foram calculados empregando o programa WinNonlin e utilizando modelo monocompartimental e cinética de primeira ordem. Os parâmetros farmacocinéticos com razões enantioméricas diferentes da unidade foram avaliados com base no teste de Wilcoxon (P0,05). A disposição cinética da CPA é enantiosseletiva em pacientes com câncer de mama, com acúmulo plasmático do enantiômero (S)-(-)-CPA (AUC 195,00 vs 174,80 g.h/mL) em função do clearance preferencial do enantiômero (R)- (+)-CPA (5,13 vs 5,99 L/h). Os clearances de ambos os enantiômeros da ciclofosfamida não diferem em função dos genótipos CYP2B6, CYP2C9 e CYP2C19 e da atividade in vivo do CYP3A avaliada pelo clearance do midazolam. / Cyclophosphamide (CPA) is an alkylating oxazaphosphorine agent widely used in the treatment of multiple forms of cancer and autoimmunes disesases in adults and children. CPA is used as a racemic mixture, although preclinical data have demonstrated differences in the efficacy and toxicity of its enantiomers, with the (S)-(- )-CPA exhibiting a higher therapeutic index. The present study investigated the enantioselectivity and influence of CYP2B6, CYP2C9, CYP2C19 and CYP3A on the kinetic disposition of cyclophosphamide (CPA) in patients with breast cancer. Fifteen patients previously submitted to removal of the tumor and treated with racemic CPA (900-1000 mg) and epirubicin were included in the study. The in vivo activity of CYP3A was evaluated using midazolam as a marker drug. Serial blood samples were collected up to 24 h after administration of the first cycle of CPA. The CPA enantiomers were extracted from plasma using a mixture of ethyl acetate:chloroform (75:25, v/v) and separated on a Chiralcel® OD-R column, with the mobile phase consisting of acetonitrile:water (25:75, v/v) and 0.2% formic acid. The CPA enantiomers were analyzed by LC-MS-MS, and the protonated ions and their respective ion products were monitored at transitions of 261>141 for CPA and of 189>104 for the internal standard (antipyrine). Recovery was higher than 95% for both CPA enantiomers and the quantification limit was 2.5 ng/mL plasma for each enantiomer. The coefficients of variation and relative errors obtained for the evaluation of the intra- and interassay precision and accuracy were less than 10%. The pharmacokinetic parameters were calculated with the WinNonlin program using a monocompartmental model and first-order kinetics. The pharmacokinetic parameters presenting enantiomer ratios different from one were evaluated using the Wilcoxon test (P0.05). The kinetic disposition of CPA was enantioselective in patients with breast cancer, with plasma accumulation of the (S)-(-)-CPA enantiomer (AUC 195.00 vs 174.80 g.h/mL) due to the preferential clearance of the (R)-(+)-CPA enantiomer (5.13 vs 5.99 L/h). Clearances of both CPA enantiomers did not differ between the CYP2B6, CYP2C9 and CYP2C19 genotypes or as a function of in vivo activity of CYP3A evaluated by the midazolam clearance.

Uma das maiores causas da alta taxa de mortalidade em todo o mundo está relacionada com a neoplasia em tecidos. Particularmente, o câncer de mama é o segundo tipo desta doença que mais atinge mulheres no Brasil. O diagnóstico precoce certamente pode diminuir o risco de morte de pessoas com este tipo de doença e o tratamento e a prevenção são certamente grandes desafios enfrentados pela medicina contemporânea. Atualmente, vem surgindo uma nova ferramenta de potencial diagnóstico, baseada no estudo de alguns elementos químicos que estão presentes em pequena quantidade no organismo, conhecidos como elementos traços. Estes elementos, responsáveis por algumas funções biológicas, podem apresentar-se em diferentes concentrações em tecidos normais e neoplásicos, o que pode indicar as mudanças histopatológicas dos tecidos e tornar possível a identificação de cada tipo de neoplasia. Desta forma, o estudo e determinação dos elementos traços em tecidos neoplásicos, que é o foco deste trabalho, apresenta uma nova área de interesse de investigação, principalmente pela possibilidade de oferecer informações diagnósticas, melhorando sua eficiência e em conseqüência, melhorando o prognóstico da paciente. Neste trabalho, utilizando a técnica de Fluorescência de Raios-X com feixes polienergéticos e monoenergéticos, determinamos as concentrações dos elementos traços em tecidos mamários normais e neoplásicos. Foram estudadas ao total 101 amostras de tecidos mamários normais, neoplásicos e tecidos normais adjacentes às neoplasias. As correções para os efeitos de matriz foram realizadas pelo método de padrão externo e pelo método de radiação espalhada para feixes polienergético e monoenergético respectivamente. Os resultados obtidos mostraram que todos os elementos analisados estão em níveis elevados nas espécies neoplásicas em relação às normais. Nas medidas com feixe polienergético foram verificadas diferenças significativas entre as concentrações dos elementos cobre e zinco entre tecidos normais e neoplásicos de amostras pareadas (p < 0,005) e não pareadas (p < 0,001). Com feixe monoenergético, foram obtidas diferenças significativas entre as concentrações de todos os elementos (Ca, Fe, Cu e Zn) em tecidos normais e neoplásicos de amostras pareadas e não pareadas (ambas com p < 0,001). Para as concentrações dos elementos cálcio e zinco foram observadas ainda diferenças significativas entre tecidos neoplásicos benignos e malignos (p < 0,001 e p < 0,002 respectivamente). A quantificação das concentrações dos elementos traços em tecidos normais e neoplásicos pode vir, portanto, auxiliar com precisão o diagnóstico das neoplasias de mama. / One of the major causes of the elevated rate of mortality in the whole world is related with the neoplasies in tissues. Particularly, the breast cancer is the second type of this disease that more reaches women in Brazil. Early diagnosis certainly can reduce the death risk in people with this type of disease and the treatment and prevention are certainly the great challenge found by medicine today. At present, it comes appearing a new diagnostic tool, based in the study of some chemical elements that are in small amount in the organism, known as trace elements. These elements, responsible for some biological functions, can be in different concentrations in healthy and neoplasics tissues that can indicate histopatological changes of breast cancer tissues, and become possible the identification of each type of neoplasies. In this way, the study and determination of trace elements in neoplastic tissues, the aim of this work, can be a new area of interest, mainly for the possibility to offer diagnostic information, improving its efficiency and in consequence, to improve the prognostic of the patient. In this work, using X-ray Fluorescence technique with polienergetic and monoenergetic beams, we determined the concentrations of the trace elements in healthy and neoplastic breast tissues. A total of 101 samples of healthy, neoplastic and adjacent normal tissues to neoplasies had been studied. The corrections for the matrix effect had been carried through by the method of external standard and by the method of scattered radiation for polienergetic and monoenergetic beams respectively. Results showed that all the analyzed elements are in raised levels in the neoplastic tissues in relation to the normal ones. In procedures with polienergetic beam significant differences between the concentrations of the elements copper and zinc had been verified between normal and neoplastic tissues of paired samples (p < 0,005) and independent samples (p < 0.001). With monoenergetic beam, concentrations of all elements (Ca, Fe, Cu and Zn) in healthy and neoplastic tissues of paired and independent samples showed significant differences (all with p < 0.001). For concentrations of the elements calcium and zinc significant differences between benign and malignant neoplastic tissues had been observed (0.001 p < and p < 0,002 respectively). The quantification of concentrations of trace elements in normal and neoplastic tissues can, therefore, support with precision the breast cancer diagnosis.

Por existirem poucos estudos sobre o momento da internação hospitalar para a realização da cirurgia por câncer de mama, decidiu-se melhor compreender este momento a partir do referencial da teoria das representações sociais e da teoria do enfrentamento, buscando-se em um grupo de mulheres a identificação do significado da admissão hospitalar necessária para a realização da cirurgia, bem como as estratégias de enfrentamento por elas utilizadas nesse momento. A coleta de dados foi realizada numa amostra composta por 10 mulheres e pelos principais profissionais envolvidos em suas admissões. Com as mulheres foram realizadas observações participantes com a utilização do diário de campo e entrevistas semi-estruturadas, analisadas qualitativamente; e os profissionais foram observados com a utilização de um instrumento aberto-fechado, analisado qualitativa e quantitativamente. Em relação às mulheres, foram identificadas as seguintes categorias: perda da mama, medo da morte, cura, cuidado enquanto estratégia de retorno à saúde e dia normal. As estratégias de enfrentamento identificadas foram: médicos, Deus, ela própria, crenças próprias, família, namorado, outros que passaram pela mesma experiência, coragem, confiança, força de vontade, oração, não pensar e convivência com pessoas brincalhonas capazes de passar energia boa. A análise conjunta das representações sociais com as estratégias de enfrentamento evidenciou que em 70% das participantes houve relação entre o significado atribuído à admissão hospitalar e as estratégias de enfrentamento utilizadas. A relação entre as representações sociais e as estratégias de enfrentamento mostrou que as categorias: cura, cuidado enquanto estratégia de retorno à saúde e dia normal foram as mais eficazes no enfrentamento da admissão hospitalar. O instrumento utilizado com os principais profissionais que realizaram as admissões hospitalares mostrou que 100% dos principais responsáveis pelas admissões hospitalares foram enfermeiras; 100% delas tentaram estabelecer um vínculo positivo com as mulheres no momento do chamamento; 80% não se apresentaram às mulheres que receberam; 90% utilizaram preferencialmente o termo senhora no período em que permaneceram com as mulheres; 100% demonstraram preocupação com o ambiente físico relacionado à admissão hospitalar; 70% mostraram-se dispostas a ouvir as mulheres recebidas; 80% receberam as mulheres na posição ereta e, 60% das admissões hospitalares ocorreram com a presença de uma enfermeira e uma auxiliar de enfermagem. Alguns desses dados permitiram verificar que esses profissionais forneceram suporte às mulheres, mas ao mesmo tempo outros dados mostraram que estes mesmos profissionais se distanciaram de um cuidado capaz de contemplar os aspectos físicos, mentais e espirituais dessas mulheres. Pontua-se, a partir desta análise, a necessidade do estabelecimento da subjetividade no momento da internação como forma de identificação das necessidades das mulheres com câncer de mama. Para tanto, sugere-se a construção de um complemento para o protocolo de admissão hospitalar atualmente utilizado na enfermaria, onde os dados deste estudo foram coletados. / For existing few studies on the moment of the hospital internment for the accomplishment of the surgery for breast cancer, it was more good decided to understand this moment from the referencial of the theory of the social representations and the theory of coping, searching in a group of women the identification of the meaning of the necessary hospital admission for the accomplishment of the surgery. The collect of data was carried through in a composed sample for 10 women and the main involved professionals in its admissions. With the women were done participant observations with utilization of field notes and semi-structured interviews that were qualitative analyzed, and the professionals were observed with utilization of open-closed instrument, that was analyzed in a qualitative and quantitative way. In relation to the women, were identified these categories: loss of the breast, fear of the death, cure, care while return strategy the health and normal day. The strategies of coping identified were: physicians, God, herself, own believes, family, boyfriend, others that had passed for the same experience, courage, confidence, will-power, prayer, don’t think and stay together of joking people that are capable to pass good energy. The analyze of social representations and strategies of coping together showed that in 70% of participants were relation between the meaning attributed to he hospital admission and the strategies of coping used. The relation between social representations and strategies of coping showed that the categories: cure, holistic care and normal day were the most effective in the coping of hospital admission. The instrument used with the main professionals who had carried through the hospital admissions showed that 100% of these professionals were nurse; 90% had used the term preferential lady in the period where they had remained with the women; 100% had demonstrated concern with the related physical environment to the hospital admission; 70% had revealed made use to hear the received women; 80% had received the women in erect position e, 60% of the hospital admissions had occurred with the presence of a nurse and one nurse aid. Some of these data had allowed to verify that these professionals had supplied support to the women, but at the same time other data had shown that these same professionals were distant of a care capable to contemplate the physical aspects, mental and spirituals of these women. From this analyze the necessity of the establishment of subjectivity in the moment of admission is emphasized as form of identification of the necessities of the women with breast cancer. For this, it is suggested construction of a complement for the protocol of hospital admission currently used in the infirmary, where the data of this study had been collected.

Introdução: O câncer de mama é uma doença que carrega a possibilidade de morte e de tratamentos mutilantes, gerando sofrimento para a mulher e sua família. Crenças e esperança possuem a capacidade de influenciar o bem-estar físico, emocional e espiritual dos familiares. Objetivos: Compreender a experiência de esperança de familiares de mulheres acometidas por câncer de mama; identificar as crenças de familiares de mulheres acometidas por câncer de mama e avaliar o nível de esperança dos familiares da mulher acometida por câncer de mama e as variáveis associadas à mesma. Método: Estudo descritivo com análises quali-quantitativas, desenvolvido no Ambulatório de Ginecologia do Hospital Universitário Cassiano Antônio Moraes, em Vitória, no Espirito Santo, de abril a agosto de 2016. Na primeira etapa do estudo, quantitativa, participaram 219 familiares de mulheres acometidas por câncer de mama, que preencheram a Escala de Esperança de Herth. Os dados foram analisados por meio de testes estatísticos. A segunda etapa do estudo, qualitativa, participaram 21 familiares. Os dados foram coletados por meio de uma entrevista, na qual o familiar foi convidado a compartilhar a experiência de vivenciar o acometimento da mulher por câncer de mama na família, enfocando as crenças e a esperança, tendo o Interacionismo Simbólico como referencial teórico e como referencial metodológico a Pesquisa de Narrativa. Os aspectos éticos para o desenvolvimento do estudo foram respeitados. Resultados: A análise dos dados permitiu identificar as características das mulheres acometidas por câncer de mama e o perfil dos familiares que as acompanham. O nível de esperança encontrado foi alto e houve relação, estatisticamente significativa entre as variáveis da mulher (acompanhante da família) e do familiar (sexo, estado civil, religião, ocupação, e grau de parentesco). Da análise interpretativa evidenciaram-se os temas: A notícia do câncer que revela o impacto do diagnóstico sobre o familiar, Passar pela experiência com a mulher e Nutrir a própria esperança que evidenciam as ações de cuidado e estratégias do familiar visando apoiar e alimentar a esperança da mulher no enfrentamento do câncer. Considerações finais: A esperança e as crenças aparecem no estudo como elementos intencionalmente construídos pelo familiar que fornecem a força e apoio aos familiares para lidar com uma situação tão adversa como a presença de um câncer de mama em um membro da família. A enfermagem possui um papel importante no apoio a familiares de mulheres com câncer de mama e no desenvolvimento de estratégias que evidenciem suas forças e recursos, para promover a esperança e evitar a desesperança. / Introduction: Breast cancer is a disease that brings the possibility of death, and of mutilating treatments, generating suffering for the woman and her family. The beliefs and hopes have the ability to influence the physical, emotional and spiritual wellbeing of the families. Objectives: To understand the experience of hope in families of women affected by breast cancer; To identify the beliefs of families affected by breast cancer; And to evaluate the level of hope of families affected by breast cancer, and the variables associated to it. Method: This is a descriptive study with quali-quantitative analyses developed at the Gynecology Outpatient Unit of the University Hospital Cassiano Antonio Moraes, in Vitoria, Espirito Santo, from April to August, 2016. In the first stage of the study, the quantitative one, 219 family members of women affected by breast cancer, who have fulfilled the Herth Hope Scale, have participated. The data was analyzed by statistical tests. In the second stage of the study, the qualitative one, 21 family members participated. The data was collected through an interview in which the family member was invited to share the experience of the affection of the woman by breast cancer in their family, focusing on beliefs and hope, having the Symbolic Interactionism as the theoretical reference, and as methodological reference the Narrative Research. The ethical aspects for the development of the study were observed. Results: The analysis of data allowed to identify the characteristics of women affected by breast cancer and the profile of family members who accompany them. The level of hope found was high, and there was a statistically significant relation between the variables of the woman (family companion) and the family member (gender, marital status, religion, occupation and level of relation). The interpretative analysis showed the themes: News about cancer, which reveals the impact of diagnosis over the family member, Going through the experience with the woman and Nourishing one\'s own hope, which evidenced the care actions and strategies by the family member with the aim of supporting and nourishing hope of the woman affected with cancer. Final considerations: Hope and beliefs appear in the study as intentionally elements constructed by the family member, providing strength and support to cope with such an adverse situation as the presence of breast cancer in a member of their family. Nursing has an important role in the support to the families of women with breast cancer, and in the development of strategies that evidence their strengths and resources to promote hope and to avoid despair.

O câncer de mama tem motivado pesquisas de avaliação e intervenção psicológica pelos altos índices de mulheres acometidas pela doença, por ser o segundo tipo de câncer mais comum entre as mulheres no mundo e também responsável pelo maior número de mortes. As pacientes com câncer de mama enfrentam o sofrimento psíquico com o diagnóstico e as vicissitudes do tratamento oncológico, necessitando de ajuda psicológica urgente. Definiu-se como objetivo geral desta pesquisa investigar os efeitos terapêuticos da Psicoterapia Breve Operacionalizada (PBO) no atendimento de mulheres diagnosticadas com câncer de mama e em tratamento oncológico. Como objetivos específicos este estudo pretende averiguar os efeitos da técnica da PBO nas situações-problema localizadas nos setores adaptativos e verificar a eficiência da PBO nas situações de crise adaptativa. A pesquisa foi delineada pelo método misto e as participantes foram 17 mulheres, com idade entre 30 e 65 anos, que estavam em tratamento num ambulatório de oncologia do Grande ABC Paulista. Os instrumentos utilizados foram: entrevista clínica preventiva; Escala Diagnóstica Adaptativa Operacionalizada (EDAO) para avaliação da adaptação, antes e após a intervenção psicológica breve e no follow-up; e a PBO. Os resultados mostraram na avaliação inicial que 17,5% das participantes estavam com adaptação ineficaz grave (grupo 5), 53% estavam com adaptação ineficaz severa (grupo 4), 17,5% com adaptação ineficaz moderada (grupo 3) e 13% com adaptação ineficaz leve (grupo 2), sendo que 41,2% estavam em crise adaptativa por perda; o setor Orgânico foi o mais comprometido, seguido do Afetivo-Relacional com soluções pouquíssimo adequadas. A situação-problema da maior parte das participantes estava relacionada ao câncer de mama, o que na compreensão psicodinâmica mostrou-se associada ao intenso desamparo egóico diante do adoecimento e tratamento oncológico. Na avaliação adaptativa final e follow-up, 82,4% das participantes apresentaram evolução de grupo adaptativo. Concluímos que a PBO se mostrou eficiente em todas as idades, estado civil, escolaridade, tempo de diagnóstico, fase de tratamento oncológico e tipo de cirurgia (mastectomia radical ou parcial) e a técnica da interpretação teorizada mostrou-se eficiente para a solução das situações-problema e da crise adaptativa por perda. A motivação, a aliança terapêutica e a transferência positiva foram fundamentais para as participantes no aproveitamento das sessões / Breast cancer has motivated research of evaluation and psychological intervention by the high rates of women affected by the disease, because it is the second most common cancer among women worldwide and also responsible for more deaths. Patients with breast cancer face the psychological suffering with diagnosis and the events of cancer treatment, requiring urgent psychological help. Thus this research had as a general objective investigate the therapeutic effects of Brief Psychotherapy Operationalized (PBO) in the care of women diagnosed with breast cancer and cancer treatment. And the specific objectives were to investigate the effects of PBOs technique in problem-situations located in adaptive sectors and verify the efficiency of the PBO in situations of adaptive crisis. The research was outlined by the mixed method and the participants were 17 women aged 30 to 65, who were being treated in an oncology outpatients clinic in São Paulo. The instruments used were: preventive clinical interview, Adaptative Operational Diagnostic Scale (EDAO) for evaluation of adaptation before and after the brief psychological intervention and follow-up; and the PBO. The results showed in the initial evaluation that 17,5% of participants were in ineffective adaptation serious (group 5), 53% were in ineffective adaptation severe, 17,5% ineffective adaptation moderate and 13% ineffective adaptation light, whereas 41,2% were in the adaptative crisis by loss; the Organic sector was the most committed, followed by the Affective-Relational with solutions very little adequate. The problem-situation of most participants was related to breast cancer, which in psychodynamic understanding was associated to the intense helplessness ego in the face of illness and cancer treatment. In the final adaptive evaluation and follow-up, 82,4% of participants presented evolution of adaptive group. We concluded that the PBO was efficient at all ages, marital status, scholarity, time of diagnosis, cancer treatment stage and type of surgery (radical and partial mastectomy) and the technique of interpretation theorized proved efficient for the solution of problem- situations and adaptive crisis by loss. The motivation, the therapeutic alliance and positive transference were crucial for the participants in harnessing of the sessions

O evento do câncer de mama pode ser traumático para a mulher que o vivencia, impactando e alterando sua qualidade de vida, principalmente em termos da organização da vida cotidiana, familiar e social, o que implica na necessidade de se adaptar às novas condições de existência e às transformações que podem resultar em uma nova identidade pessoal e social. No momento do diagnóstico de câncer de mama, diversos sentimentos são vivenciados, dentre os quais se destacam a desesperança, angústia e medo do desconhecido, sendo o impacto do diagnóstico muitas vezes considerado como uma vivência extremamente significativa, que influencia todo o processo até a reabilitação da pessoa adoentada. Além disso, os profissionais da saúde são considerados elementos importantes no enfrentamento do câncer, principalmente quando informam sobre a doença e sua evolução, bem como quando confortam e encorajam a mulher durante o diagnóstico e tratamento. O objetivo deste estudo é compreender a vivência do processo de comunicação do diagnóstico de câncer de mama na perspectiva da mulher e do médico informante. Trata-se de um estudo de caráter descritivo, exploratório, prospectivo e apoiado na metodologia qualitativa de pesquisa. Colaboraram com o estudo seis mulheres que se encontravam em processo de investigação diagnóstica e que receberam, posteriormente, a confirmação do câncer de mama, e seis médicos oncologistas que são responsáveis pela comunicação do diagnóstico. Os colaboradores foram recrutados no Serviço de Mastologia e Oncologia Ginecológica da Unidade de Ginecologia e Obstetrícia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Os instrumentos utilizados foram: Formulário de Dados Sociodemográficos do LEPPS; entrevista aberta, desenvolvida a partir de questão norteadora; e diário de campo. A análise dos dados foi pautada no referencial teórico-metodológico da Fenomenologia. Os resultados mostram que a comunicação do diagnóstico de câncer de mama é vivenciada como uma experiência complexa, tanto para as pacientes quanto para os/as médicos/as. Ao mesmo tempo em que se vê como transmissor da má notícia, o/a médico/a compreende seu papel como aquele/a que também oferece possibilidades de vida para a pessoa adoecida. Quanto às mulheres, é possível apontar que a vivência desse processo é uma experiência liminar, não linear e passível de significação singular, pela qual perpassam diversos sentimentos paradoxais, como medo, incerteza, angústia, tristeza, tranquilidade, esperança e indiferença, que suscitam diferentes modos (negação, enfrentamento, aceitação), de lidar com as facticidades do adoecimento. Conclui-se que, tanto para as pacientes quanto para os/as médicos/as, é importante que se valorizem as singularidades em seus modos de existência, buscando oferecer espaço para manifestação de subjetividades, a fim de alcançar um cuidado integral tanto na perspectiva de quem cuida como na de quem é cuidado / The event of breast cancer can be traumatic for who experiences it, impacting and changing these womens quality of life, mainly in terms of the organization of daily family and social life, implying the need to adapt to new conditions of existence and to the transformations that may result in a new personal and social identity. At the time of the diagnosis, several feelings are experienced, among which despair, anguish and fear of the unknown stand out, being the impact of the diagnosis often considered as an extremely significant experience that influences the entire process until the rehabilitation of the patient. In addition, health professionals are considered important elements in coping with cancer, especially when they inform about the disease and its evolution, as well as when they comfort and encourage women during the diagnosis and treatment. The objective of this study is to understand the experience of the communication process of the breast cancer diagnosis from the perspective of the woman and the physician diagnosing the condition. This is a descriptive, exploratory and prospective qualitative research. Six women who underwent diagnostic investigation and who subsequently received confirmation of breast cancer and six oncologists who are responsible for communicating the diagnosis collaborated with the study. The collaborators were recruited at the Department of Mastology and Gynecological Oncology of the Gynecology and Obstetrics Service at the Hospital das Clínicas of the Ribeirão Preto Medical School. The instruments used were: Sociodemographic Data Form of the LEPPS, open interview, developed based on a guiding question; and a field diary. The data analysis was based on the theoretical and methodological framework of Phenomenology. The results show that both patients and physicians go through the communication of the breast cancer diagnosis as a complex experience. At the same time as the physicians see themselves as transmitters of the bad news, they understand their role as the people who also offer possibilities of life for the sick person. As for the women, it can be appointed that the experience of this process is liminal, nonlinear and of singular significance, through which they go through different paradoxical feelings, such as fear, uncertainty, anguish, sadness, tranquility, hope and indifference, which arouse different ways (denial, coping and acceptance) of dealing with the particularities of the illness. It is concluded that, for both patients and physicians, it is important to value the singularities in their modes of existence, aiming to provide space for the manifestation of subjectivities, in order to achieve integral care from the perspectives of those who care and those who receive care

Embora exista considerável progresso na área de biossensores, ainda é primordial aprimorar muitos desses dispositivos. Este trabalho tem por objetivo contribuir para o contínuo crescimento dos biossensores a base de enzimas e de moléculas de DNA, sendo dois biossensores eletroquímicos descritos. O primeiro trata-se de um biossensor enzimático utilizando tirosinase (Tyr) imobilizada por intermédio de cistamina (CYS) e glutaraldeído (GA) para a detecção de compostos fenólicos. Eletrodos de carbono impressos (SPCE) foram modificados com nanobastões de ouro (AuNRs) em filme de poli(amido amina) (PAMAM) geração 4 para o favorecimento da transferência direta de elétrons (DET) entre o eletrodo e o sítio ativo da enzima. Para caracterizar os AuNRs e AuNRs-PAMAM, espectroscopia de absorção no UV-Visível, espalhamento de luz dinâmico (DLS) e microscopia eletrônica de varredura (SEM) foram empregadas. As etapas do biossensor foram estudadas por voltametria cíclica e linear, amperometria e microscopia de força atômica (AFM) na presença de dois analitos: catecol (CAT) e dopamina (DA). A faixa linear para CAT foi de 2,8 a 30,3 &mu;mol L-1 com um limite de detecção (LD) de 1,0&mu;mol L-1 enquanto para a DA, a faixa linear foi de 27,8 a 448,7 &mu;mol L-1 e LD de 10,0 &mu;mol L-1. Além de apresentar ótima resposta frente a possíveis interferentes, o sensor também mostrou excelente desempenho em amostras reais, que atrelados aos testes de repetibilidade e reprodutibilidade mostram a estabilidade e acurácia do biossensor. O segundo sensor, trata-se de um sensor de DNA impedimétrico em eletrodo de ouro para a detecção da mutação c.68_69del relacionada à predisposição ao câncer de mama. A imobilização da sequência de captura (SH-ssDNA) no eletrodo ocorreu pela ligação ouro-enxofre (Au-S) e o modelo de hibridização escolhido foi a hibridização direta. O genossensor distinguiu eficientemente entre as sequências alvo (tarDNA) e não-complementar (ncsDNA), apresentando faixa linear de 1,0 a 200,0 nmol L-1 e LD de 0,14 nmol L-1. Os resultados sugerem que ambos biossensores têm potencial e que as estratégias propostas são promissoras para o desenvolvimento de outros biossensores. / Despite a considerable progress in the area of biosensors, it is still crucial to improve most of these sensors. This study aims to contribute to the ongoing growth of enzyme- and DNA-based biosensors, being described two electrochemical biosensors. The first one is an enzyme-based biosensor with immobilized Tyrosinase (Tyr), through cystamine (CYS) and glutaraldehyde (GA), for detection of phenolic compounds. Screen-printed carbon electrodes (SPCE) were modified by gold nanorods (AuNRs) stabilized with poly(amide amine) PAMAM generation 4 to facilitate direct electron transfer (DET) between electrode and enzyme active site. AuNRs and AuNRs-PAMAM were characterized using UV-Visible absorption spectroscopy, dynamic light scattering (DLS) e scanning electron microscopy (SEM). Biosensor stages were studied by cyclic and linear voltametry, amperommetry and atomic force microscopy (AFM) and tested agains two analytes: catechol (CAT) and dopamine (DA). Detection limit (LD) for CAT is 1 &mu;mol L-1 and linear range from 2.8 to 30.3 &mu;mol L-1, for DA, LD is 10.0 &mu;mol L-1 and linear range 27.8 to 448.7 &mu;mol L-1. Besides, the biosensor shows great response in the presence of interferents, it also had an excellent performance in real samples that along with repeatability and reproducibility tests indicate stability and accuracy of the biosensor. The second sensor is an impedimetric DNA sensor prepared on gold electrode to detect c.68_69del mutation related to breast cancer predisposition. Capture sequence (HS-ssDNA) immobilization occurred due to gold-sulfur bond (Au-S) and direct hybridization was the chosen hybridization model. The genosensor was able to distinguishing between target sequence (tarDNA) and non-complementary sequence (ncsDNA) and linear range and LD were found to be 1.0 to 200.0 nmol L-1 and 0.14 nmol L-1, respectively. Results suggest both biosensors have potential and proposed strategies are promising for other biosensors development.

O câncer de mama representa um grave problema de saúde pública. Dentre os fármacos empregados, destaca-se o paclitaxel, um agente citotóxico eficaz, porém associado a severos efeitos colaterais. A metformina hidrocloreto tem obtido resultados promissores para o tratamento de neoplasias, porém é bastante hidrofílica, fator limitante da biodisponibilidade. A rapamicina tem demonstrado sinergismo com paclitaxel e potente atividade antitumoral. Todavia, é um fármaco lipofílico e possui desvantagens. Sistemas nanoestruturados de fármacos como lipossomas PEGlados são largamente empregados para a melhora da farmacocinética e potencialização da ação terapêutica. Ademais, a funcionalização de lipossomas com anticorpos monoclonais pode permitir a entrega seletiva do fármaco encapsulado à célula alvo. No presente trabalho objetivou-se desenvolver e caracterizar lipossomas e imunolipossomas funcionalizados com trastuzumabe, contendo paclitaxel, metformina hidrocloreto e/ou rapamicina, bem como avaliar as formulações através de estudos in vitro e in vivo. Os resultados mostraram que a metformina hidrocloreto foi encapsulada com baixa eficiência, menor que 20%, ao passo que paclitaxel e rapamicina puderam ser co-encapsulados com adequados valores de eficiência de encapsulação, equivalente a 56,32% para paclitaxel e 73,31% para rapamicina, e tamanho de partícula nanométrico, de 136,95 nm em composição biocompatível baseada em SPC:Col:DSPE-PEG(2000). Os dois fármacos apresentaram liberação lenta, e foram convertidos às formas molecular e amorfa, respectivamente para paclitaxel e rapamicina quando encapsulados. Os imunolipossomas foram funcionalizados com elevada eficiência com trastuzumabe e mantiveram o tamanho nanométrico, com adequados valores de encapsulação dos fármacos. Ainda, mostrou-se o sinergismo entre paclitaxel e rapamicina coencapsulados em lipossomas em células triplo negativas (4T1) e houve sinergismo entre os dois fármacos, mediado pelo anticorpo em imunolipossomas frente à linhagem celular HER2 positiva (SKBR3), em virtude do aumento do uptake celular mediado pelo trastuzumabe. Finalmente, os resultados obtidos in vitro foram confirmados in vivo, sendo que os lipossomas com paclitaxel e rapamicina coencapsulados foram capazes de controlar o crescimento tumoral em modelo de câncer de mama triplo negativo, ao passo que o imunolipossoma com os dois fármacos permitiu o controle do crescimento de tumores xenográficos HER2 positivos, cuja média de volume tumoral correspondeu a 25,27%, 44,38% e 47,78% das médias dos volumes tumorais de controle negativo, positivo e lipossoma, respectivamente. Portanto, a formulação desenvolvida nesse trabalho tem potencial para ser avaliada em estudos clínicos. / Breast cancer represents a severe public health problem. Among the drugs used in the treatment, paclitaxel is an effective cytotoxic drug, but associated with side effects. Hydrocloride metformin has shown promising results for cancer treatment, however it is very hydrophilic, a limiting factor for bioavailability. Rapamycin has demonstrated synergism with paclitaxel and potent anticancer activity, though it is a lipophilic drug with drawbacks that compromise its bioavailability. Nanostructured drug delivery systems, such as PEGylated liposomes are largely employed for pharmacokinetics improvement and enhancement of therapeutic effect. Furthermore, the functionalization of liposomes with monoclonal antibodies enables the selective delivery of the loaded drug to the target cell. In the present work, we aimed to develop and characterize liposomes and immunoliposomes functionalized with trastuzumab, containing paclitaxel, hydrocloride metformin and/or rapamycin, as well as to evaluate the formulations through in vitro and in vivo studies. The results showed that hydrocloride metformin was encapsulated with low efficiency, less than 20%, on the other hand paclitaxel and rapamycin could be co-loaded with suitable values of encapsulation efficiency, 56.32% for paclitaxel and 73.31% for rapamycin and nanometric particle size, 136.95 nm, based on a SPC:Chol:DSPE-PEG(2000) composition. The two drugs displayed slow release, and were converted to molecular and amorphous form, respectively for paclitaxel and rapamycin when encapsulated. The immunoliposomes were developed with high efficiency with trastuzumab and kept the nanometric size, with adequate encapsulation of drugs. Moreover, herein it was shown the synergism between paclitaxel and rapamycin co-loaded in liposomes in triple negative cells (4T1) and there was synergism between the two drugs mediated by the antibody in immunoliposomes in the HER2-positive cell line (SKBR3), due to the improved cell uptake mediated by trastuzumab. Finally, the results obtained in vitro were confirmed in vivo. Co-loaded paclitaxel and rapamycin were able to control tumor growth in a triple negative breast cancer animal model, while the immunoliposome containing the two drugs allowed for better control of tumor growth in a HER2-positive breast xenograft model, whose average tumor volume corresponded to 25.27%, 44.38% and 47.78% of the tumor volumes of positive control, negative control and liposome, respectively. Therefore, the formulation developed herein has potential to be evaluated in clinical trials.