Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T00:59:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Odontologia. / Made available in DSpace on 2012-10-22T16:04:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 235673.pdf: 10801675 bytes, checksum: 12cb9960ede56e2d3157106247732d52 (MD5) / This in situ/ex vivo study aimed to investigate the effects of two non-fluoridated dentifrices with calcium carbonate (CaCO3) and silica (SiO2) on human permanent enamel eroded by a carbonated soft drink. During two phases over 5 days, 12 volunteers (mean age 28) used a palatal appliance with 6 enamel blocks. In each period, the appliances were immersed in the soft drink for 5 min, 4 times a day. In two moments of the erosive challenge, 2 enamel blocks were not additional treatment, 2 blocks were brushed either with a CaCO3 or SiO2 dentifrices, immediately after the erosive treatment and 2 blocks 1 h later. Brushing was made for 30 s. Between phases a 2 day washout period was followed. An in vitro study was also conducted to investigate artificial and natural saliva influence on the erosion variation. The results were expressed in enamel roughness (Ra, ìm) and morphology analysis. The eroded and abrasioned enamel blocks showed superficial roughness changes significant higher than the eroded blocks (p<0.05). Blocks submitted to immediate abrasion or 1 h later did not show significant statistical difference. Both dentifrices had a similar abrasive effect on the eroded blocks. There was no significant difference in roughness between the enamel blocks from the experimental group (in vitro) and blocks from the in situ/ex vivo groups (CaCO3 and SiO2 control). Data showed that independently of the abrasive used, surface roughness is increased when erosion is associated to dental abrasion. It also did not have a 12 higher effect when comparing natural with artificial saliva in relation to dental

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. / Made available in DSpace on 2012-10-22T22:06:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 263140.pdf: 414493 bytes, checksum: 3d7909bffc9bd6d4c91cf7800edfab6a (MD5) / O objetivo do trabalho foi validar uma metodologia para determinação de cálcio em produtos cárneos e estimar a incerteza de medição da análise de nitrito de sódio, associar ao resultado da medição e comparar os resultados com os preconizados pela legislação brasileira. Na validação do método a faixa de trabalho pesquisada apresentou linearidade satisfatória (R2 = 0,9999). Os limites de detecção e quantificação foram 11 e 16 mg de cálcio/100 g da amostra. Na precisão do método o coeficiente de variação obtido foi inferior a 3 %. A exatidão foi determinada pela fortificação das amostras com solução padrão de cálcio. A especificidade do método foi confirmada para o cálcio. Na robustez foram realizadas alterações intencionais no método e avaliadas as recuperações do analito. A incerteza expandida para o mensurando (% Ca++) foi de 0,00904 g com um nível de confiança de 95 % e k = 2,87. Para a análise de nitrito de sódio as principais fontes de incerteza do método foram: a massa da amostra, o volume da diluição, a absorbância e o volume da alíquota. As incertezas expandidas (com nível de confiança de 95 %) foram de 0,0005 g (k = 2,12), 0,1032 mL (k = 2), 0,0147 (k = 2) e 0,008 mL (k = 2) para a massa da amostra, volume da diluição, absorbância e volume da alíquota respectivamente. Os resultados mostraram uma incerteza expandida de 0,21 mg/100 g com k = 2 e um nível de confiança de 95 % e a fonte de incerteza com maior contribuição foi o volume da alíquota com 66 % de influência. Em 10 % das amostras analisadas o valor do teor máximo de nitrito de sódio foi superior ao permitido pela legislação brasileira. O método analítico proposto para quantificação de cálcio, mostrou-se sensível, preciso, exato, robusto e linear na faixa de trabalho sendo adequado para determinar o teor de cálcio em produtos cárneos. Foi possível observar que há uma grande variação nos teores de nitritos entre as amostras dos produtos analisados. A incerteza de medição associada ao resultado é um dos mais importantes elementos do sistema de garantia da qualidade implementada em um laboratório.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2012-10-24T05:57:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 258293.pdf: 2567446 bytes, checksum: bd9193aa408c9f4bc98aadd3e5e048a7 (MD5) / Uma fração rica em proantocianidinas (FRP) obtida das cascas da C. celtidifolius foi avaliada quanto ao seu potencial vasorrelaxante em preparações vasculares isoladas. Em leito arterial mesentérico, artéria mesentérica e aorta torácica isolados de ratos a FRP induz relaxamento dependente da concentração. Em vasos de pequeno calibre, este efeito foi significativamente reduzido pelo L-NOARG ou por Krebs despolarizante, e completamente abolido quando ambos são combinados. O efeito também foi reduzido na presença de ODQ e pela caribdotoxina. Em vasos de grande calibre, o L-NOARG e o ODQ também reduziram o relaxamento da fração, bem como a ausência de cálcio no e a presença de um bloqueador de influxo de cálcio (lantânio) na solução de Krebs-Henseleit. N-metilmaleimida e a neomicina também foram capazes de reduzir significativamente a vasodilatação induzida pela FRP. Em outro grupo de experimentos, a vasodilatação induzida pela FRP foi significativamente reduzida pelo Wortmannina. A FRP também foi testada quanto ao seu potencial antiaterogênico em camundongos C57/BL6 LDLr KO. Nestes experimentos, a fração não foi capaz de reduzir as concentrações de lipídios séricos (colesterol total, HDL ou VLDL mais LDL), assim como não reverteu os danos vasculares morfofuncionais provocados pela dieta, quando avaliados nos experimentos de reatividade vascular e na determinação da área de lesão aterosclerótica. Os resultados indicam que a FRP apresenta efeito vasorrelaxante dependente de endotélio em artérias de pequeno e grande calibre, que este efeito envolve a ativação da via NO/GMPc e que o mecanismo de ativação da via envolve o influxo de cálcio do meio extracelular pela ativação de proteínas sensíveis ao NEM e via ativação da PLC e por promover hiperpolarização do músculo liso vascular induzido por abertura de canais KCa2+ em vasos de pequeno calibre. A fração também promove a fosforilação da enzima eNOS, pela via PI3K/Akt, mas não apresenta atividade antiaterogênica quando avaliada no modelo de aterogênese induzida pela dieta em camundongos C57/BL6 LDLr KO.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-graduação em Odontologia, Florianópolis, 2009 / Made available in DSpace on 2012-10-24T07:44:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta tecidual e a biomineralização que ocorre após a implantação, em tecido subcutâneo de camundongos, de tubos de dentina preenchidos com ProRoot MTA ou pasta de hidróxido de cálcio (HC). Tubos de dentina com 5,3 mm de diâmetro externo, 1,3 mm de diâmetro interno e 5,0 mm de comprimento foram confeccionados a partir de 83 dentes humanos. Os tubos foram divididos aleatoriamente e preenchidos com ProRoot MTA, HC ou mantidos vazios. Quatro sítios de implantação foram realizados no tecido subcutâneo dorsal de 55 camundongos. Em 3 desses sítios foram implantados um tubo preenchido com MTA, um tubo preenchido com HC ou um tubo vazio. O quarto sítio foi utilizado para observar a resposta inflamatória induzida pelo ato cirúrgico (Sham). Decorridos 12h, 1, 3, 7, 15, 30 e 60 dias, foi realizada a eutanásia dos animais. Os tecidos subcutâneos foram removidos para dosagem de citocinas teciduais, análise histológica e imunoistoquímica e os tubos de dentina foram processados para avaliação em MEV. Os dados foram analisados estatisticamente por meio de ANOVA de duas vias seguido pelo teste de Bonferroni em um nível de significância de 5%. Os achados mostraram que em 12h e nos dias 1 e 3, os níveis teciduais das citocinas TNF-a, IL-1ß e IL-10 apresentaram-se elevados nos tecidos em contato com tubos de dentina preenchidos com MTA ou HC, quando comparados com os em contato com o tubo vazio ou o Sham. Em 12h o MTA estimulou uma expressão significativamente maior de TNF-a, quando comparado ao HC. A análise imunoistoquímica mostrou que a maior expressão de MPO, NF- B, COX-2, iNOS e VEGF foi no dia 1 para todos os grupos. O MTA estimulou, no dia 1, uma expressão significativamente maior de COX-2 quando comparado ao HC. Na visualização em MEV, foi possível observar a presença de aglomerados similares à apatita depositados sobre as fibras colágenas a partir de 12h pós-implantação. A deposição de precipitados aumentou ao longo do tempo, formando uma camada compacta de apatita já aos 7 dias pós-implantação. Na análise da interface MTA-dentina, a mineralização intratubular foi observada a partir das primeiras 12h pós-implantação, sendo que os prolongamentos de apatita se tornaram maiores e mais compactos ao longo do tempo. O HC promoveu um processo de mineralização intratubular com a formação de prolongamentos mais curtos e em menor densidade. Foi possível concluir que o MTA e o HC induzem um ambiente pró-inflamatório e pró-reparo, sendo mais precoce com o MTA. Simultaneamente à resposta inflamatória aguda, o processo de biomineralização ocorreu na interface biomaterial-dentina-tecido, promovendo a formação de uma camada de apatita que permitiu a integração do biomaterial ao ambiente receptor.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:16:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327522.pdf: 553580 bytes, checksum: 4fe784b554358f2bd752f83e29d3c04b (MD5) Previous issue date: 2014 / O objetivo deste estudo foi avaliar a influência do uso de soluções irrigadoras e do uso subsequente do curativo com Ca(OH)2, sobre a microdureza da dentina radicular. Trinta segmentos radiculares de dentes de humanos, foram obtidos a partir de cortes transversais realizados a 2 mm e a 8 mm do limite amelocementário. Após o acesso e ampliação do canal, os segmentos foram incluídos em resina, polidos e aleatoriamente divididos em 3 grupos de acordo com a solução irrigadora utilizada: G1: NaOCl 1%, G2: NaOCl 1% + EDTA 17% e G3: NaOCl 5%. O teste de microdureza foi realizado na superfície cervical de cada espécime, nas distâncias de 150 µm e 500 µm a partir da luz do canal, antes e após o tratamento. Depois da medição da microdureza inicial (D0), os canais foram irrigados com 15 mL da solução irrigadora destinada a cada grupo pelo tempo de 20 min. Após, a microdureza (D1), foi medida em uma nova área lateral ao canal. Os canais foram preenchidos com Ca(OH)2 e 30 dias depois foi realizada a última medição da microdureza (D2). Os resultados obtidos foram analisados pelos testes estatísticos ANOVA e Tukey num nível de significância de 5%. Nas amostras de todos os grupos houve redução significativa da microdureza da dentina após irrigação (p < 0,05). Nas amostras do G3 a microdureza da dentina foi significativamente maior do que nas do G1 e G2 em D0 e D1. Em nenhum dos grupos foram observadas mudanças significativas nos valores de microdureza para D2. Os grupos G1 e G2 não diferiram significativamente entre si em nenhum momento das avaliações. Foi possível concluir que todos os protocolos de irrigação, promoveram diminuição significativa da microdureza da dentina. O uso do curativo por 30 dias não alterou significativamente a microdureza da dentina radicular.<br> / Abstract : The aim of this study was to evaluate the influence of irrigating solutions and the subsequent use of the dressing with Ca(OH)2, on the microhardness of root dentin. Thirty root segments of human teeth were obtained from the transverse sections 2 mm to 8 mm from the cementoenamel junction. After access and enlargment of the canal, the segments were embedded in resin and polished. Following, the specimens were randomly divided into three groups according to irrigating solution used: G1: 1% NaOCl, G2: 1% NaOCl + 17% EDTA and G3: 5% NaOCl. Prior to irrigation, the initial microhardness (D0) was evaluated in the cervical surface at distances of 150 µm and 500 µm from the lumen of the canal. The volume and time of irrigation were standardized at 15 mL and 20 min. After irrigation, the microhardness was measured again (D1), the canal were dried and filled with Ca(OH)2. Thirty days after the last evaluation of the microhardness (D2) was performed. Data were analyzed by ANOVA and Tukey. In all groups there was a statistically significant reduction in dentin microhardness after irrigation (p < 0.05). The G3 varied significantly from the others in D0 and D1. In none of the groups were observed significant changes in microhardness values for D2. G1 and G2 groups did not differ significantly from each other in all evaluations. It was concluded that all irrigation protocols caused significant decrease in dentin microhardness. The use of Ca(OH)2 for 30 days did not significantly affect the microhardness of root dentin.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:45:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327687.pdf: 1581069 bytes, checksum: b7ef445b910ab1a313ed7a41a872318d (MD5) Previous issue date: 2014 / Durante as últimas décadas, observou-se um aumento surpreendente na prevalência do diabetes melito (DM) em populações de várias regiões do mundo, inclusive no Brasil. Os tratamentos farmacológicos disponíveis atualmente não impedem a progressão da doença, apenas amenizam os sintomas. Neste cenário, a pesquisa de novas moléculas com potencial terapêutico para o tratamento do diabetes são de extrema importancia. Modificações na estrutura química fundamental da glibenclamida, uma sulfonilureia de segunda geração, pode aumentar o efeito biológico e ser mais efetiva no controle da glicemia. O objetivo do presente trabalho foi investigar o efeito antidiabético de 12 derivados da sulfonamida sintetizados com base em um fragmento de glibenclamida. Os efeitos destes derivados foram investigados sobre a glicemia, a secreção de insulina, a captação de cálcio, o conteúdo de glicogênio, e as atividades das dissacaridades intestinais e da lactato desidrogenase. A sulfonamida 5, substituída com o grupo 4-OCH3-fenilo, apresentou a melhor redução da glicemia na curva de tolerância oral à glicose e a melhor secreção de insulina entre os 12 compostos estudados. Os derivados da sulfonamida 3, 5, 7 e 9 estimularam o influxo de cálcio em ilhotas pancreáticas da mesma maneira que as sulfonilureias. O efeito estimulatório da sulfonamida 5 na captação de cálcio foi mediado pelos canais de K+-ATP, canais de cálcio do tipo L dependentes da voltagem, cálcio intracelular e pela proteína cinase C em células beta nas ilhotas pancreáticas. No intestino, a sulfonamida 5 inibiu a atividade da maltase e da sacarase e, no músculo esquelético, aumentou o conteúdo de glicogênio. A toxicidade de sulfonamida 5 não foi detectada pelo ensaio da LDH. Ainda, nesta primeira parte do trabalho, a sulfonamida 11, teve uma notável ação antihiperglicêmica, por isso, foi avaliado a capacidade deste composto em aumentar a captação da glicose em tecidos periféricos e diminuir produtos finais de glicação avançada (AGEs). A sulfonamida 11, substituída com o grupo tiofenil aumentou a captação de glicose em tecido adiposo e muscular. O efeito estimulatório da sulfonamida 11 na captação de glicose envolve a ativação de canais K+-ATP e, a ativação da translocação e da fusão de vesículas contendo GLUT4 na membrana plasmática do adipócito. A sulfonamida 11 reduziu a formação de AGES, nas doses de 0,1 e 1 µg/ml em 7, 14 e 28 dias de incubação. A partir destes resultados obtidos concluímos que as sulfonamidas sintetizadas podem ser uma boa opção terapêutica para o tratamento do diabetes. As acilhidrazonas são compostos sintéticos promissores que apresentam um amplo espectro terapêutico e, recentemente, foram patenteadas por notável atividade antileucêmica. Na segunda parte deste trabalho objetivo do estudo foi investigar o efeito anti-diabético das acilhidrazonas 1, 2, 3 e 4. As acilhidrazonas foram investigadas sobre a glicemia, a secreção de insulina, a captação de cálcio, o conteúdo de glicogênio, a captação de glicose e a atividade da lactato desidrogenase. As acilhidrazonas 1 e 4 foram capazes reduzir a glicemia na curva de tolerância à glicose. Um efeito secretagogo notável in vivo foi mostrado pela acilhidrazona 1 ou ácido [(2E)-N-(1'-naftil) -3,4,5-trimetoxibenzohidrazida] e, em experimentos in vitro, um efeito agudo e dependente da dose, na captação de cálcio em ilhotas pancreáticas, foi observado. Este efeito estimulatório na captação de cálcio, parece ser mediado, pelo menos em parte, pelos canais K+-ATP. O efeito insulinomimético foi evidenciado pela glicemia de ratos diabéticos induzidos por aloxano. A acilhidrazona 1 induziu um aumento significativo no conteúdo de glicogênio in vivo e na captação de glicose no músculo esquelético in vitro. A partir destes dados, foi analisado o mecanismo de ação da acilhidrazona 1 (BZD) na captação de glicose em músculo esquelético e o efeito in vivo na atividade das dissacaridases intestinais. O efeito agudo do BZD na captação de glicose foi mediado pelo aumento da quantidade e da translocação de GLUT4 na membrana plasmática do músculo esquelético. O efeito genômico, bem como a translocação do GLUT4 envolveu a ativação de PI 3-K e da MAPK. Ainda, a integridade microtúbulos para o processo de adesão e do ancoramento das vesículas contendo GLUT4 foi crucial para o efeito estimulatório do BZD na captação da glicose. Além disso, o BZD reduziu a atividade das dissacaridases intestinais, um efeito adicional na homeostasia da glicose que reforçou o potencial terapêutico para o tratamento do diabetes. <br> / Abstract : During the last decades, there has been a surprising increase in the prevalence of diabetes mellitus (DM) in populations from various regions of the world, including Brazil. The currently available pharmacological treatments do not prevent the progression of the disease, only alleviate symptoms. In this scenario, the research for new molecules with thera-peutic potential for the treatment of diabetes are of utmost importance. Fundamental changes in the core structure of glibenclamide, a sulfony-lurea second generation, can increase the biological effect and be more effective to glycemia control. The objective of this study was to investi-gate the antidiabetic effect of 12 sulfonamide derivatives synthesized based on a glibenclamide fragment. The effects of these derivatives were investigated on blood glucose, insulin secretion, calcium uptake, glycogen content, and the activities of intestinal disaccharidase and lactate dehydrogenase. The sulfonamide 5, replaced with 4-OCH3-phenyl group, showed the best reduction in blood glucose in the oral glucose tolerance curve and better insulin secretion among the 12 compounds studied. The sulfonamide derivatives 3, 5, 7 and 9 stimulated calcium influx in pancreatic islets in the same manner as the sulfonylu-reas. The sulfonamide 5 stimulatory effect on calcium uptake was me-diated by ATP-dependent K+ channels (K+-ATP), intracellular calcium and by protein kinase C in beta cells of the pancreatic islets. In the intes-tine, the sulfonamide 5 inhibit the activity of sucrase and maltase and, skeletal muscle glycogen content increased. The sulfonamide 5 toxicity was not detected by LDH assay. Still, this first part of the work, the sulfonamide 11, had a remarkable anti hyperglycemic action, so it was evaluated the ability of this compound to increase glucose uptake in peripheral tissues and decrease advanced glycation end products (AGEs). The sulfonamide 11, substituted with thiophenyl group in-creased glucose uptake in adipose and muscle tissue. The sulfonamide 11 stimulatory effect on glucose uptake involves the activation of K+-ATP channels and activation, translocation and fusion of vesicles con-taining GLUT4 at the adipocytes on plasma membrane. The sulfona-mide 11 reduced AGES formation at doses of 0.1 and 1 mg/mL at 7, 14 and 28 days of incubation. From these results we concluded that the synthesized sulfonamides can be a good therapeutic option for the treatment of diabetes. The acylhydrazones are promising synthetic com-pounds that exhibit a wide therapeutic spectrum and has recently been patented by remarkable antileukemic activity. In the second part of thisIXstudy objective was to investigate the anti-diabetic effect of acylhydra-zones 1, 2, 3 and 4. Acylhydrazones were investigated on blood glucose, insulin secretion, calcium uptake, glycogen content, glucose uptake and lactate dehydrogenase activity. The acylhydrazones 1 and 4 were able to reduce glycemia in glucose tolerance curve. A remarkable secretagogue effect in vivo was shown by acylhydrazone 1 [(2E)-N-(1'-naphthyl)-3,4,5-trimetoxybenzohydrazide], and in vitro experiments, an acute and dose-dependent effect on the calcium uptake in pancreatic islets was observed. This calcium uptake stimulatory effect seems to be mediated, at least in part by K+-ATP channels. The insulinomimetic effect was evidenced by glycemia in diabetic rats induced by alloxan. The acylhy-drazone 1 induced a significant increase in glycogen content in vivo and glucose uptake in skeletal muscle in vitro. From these data, we investi-gated the acylhydrazone 1 (BZD) mechanism of action in glucose up-take in skeletal muscle and the effect on activity of intestinal disacchari-dases in vivo. The acute effect of BZD on glucose uptake was mediated by the increased amount of GLUT4 translocation to the plasma mem-brane of skeletal muscle. Genomic effect as well as GLUT4 transloca-tion involving the activation of PI 3-K and MAPK. Still, the microtu-bules to the accession process and the anchoring of vesicles containing GLUT4 integrity was crucial for the stimulatory effect of BZD in glu-cose uptake. Furthermore, the BZD reduced activity of intestinal disacc-haridases, an additional effect on glucose homeostasis has reinforced therapeutic potential for the treatment of diabetes.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-07-16T21:00:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-24T20:24:10Z : No. of bitstreams: 1 317482.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Nossos resultados demonstraram que a exposição aguda ao glifosato-Roundup induz estresse oxidativo e ativa múltiplas vias de resposta ao estresse culminando com a morte de células testiculares em ratos pré-púberes. O pesticida aumenta a concentração de Ca2+ intracelular através da abertura dos canais de Ca2+ dependente de voltagem tipo-L (CCDV-L) e da liberação de Ca2+ do retículo endoplasmático, levando a uma sobrecarga de Ca2+ intracelular, e morte celular. Estes eventos foram prevenidos pelos antioxidantes Trolox® e ácido ascórbico. A ativação das vias de sinalização da proteína cinase C (PKC), fosfatidilinositol-3-cinase (PI3K), proteínas cinases ativadas por mitógeno (MAPKs), tais como a ERK 1/2 e p38 MAPK, e fosfolipase C (PLC) estão envolvidas na indução do influxo de Ca2+, no aumento da atividade da gama-glutamiltransferase (GGT) e na morte celular. A indução de estresse oxidativo por glifosato-Roundup foi confirmada através da redução nos níveis de glutationa reduzida (GSH) e do aumento nos níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e de carbonilação de proteínas. Além disso, a exposição ao pesticida afetou os sistemas de defesa antioxidante enzimáticos, acarretando em aumento na atividade das enzimas glutationa peroxidase, glutationa-redutase, glutationa-S-transferase, GGT, catalase, superóxido dismutase e glicose-6-fosfato-desidrogenase. A exposição aguda ao glifosato-Roundup também induziu ao aumento da atividade das aminotransferases AST e ALT. O aumento da atividade da GGT poderia levar a um aumento no "turnover" de GSH; no entanto, a diminuição na captação dependente de Na+ do aminoácido modelo 14C-?-methyl-amino-isobutyric acid (14C-MeAIB) em células testiculares pode estar relacionada a menor disponibilidade de aminoácidos para a síntese de novo de glutationa. O conjunto dos resultados demonstra que o herbicida glifosato-Roundup induz estresse oxidativo, aumenta a concentração de Ca2+ intracelular, ativa vias de transdução de sinais, e pode levar a morte de células testiculares. Apesar da dificuldade de extrapolação dos resultados obtidos em modelos animais para a condição humana, é possível que mecanismos semelhantes possam estar envolvidos na diminuição da capacidade reprodutiva em adultos jovens expostos ao glifosato-Roundup durante a infância e puberdade.<br> / Abstract : Our results show that acute glyphosate-Roundup exposure induces oxidative stress and activates multiple stress-response pathways leading to testicular cell death in prepubertal rat testis. The pesticide increased intracellular Ca2+ concentration by opening L-voltage-dependent Ca2+ channels (L-VDCC) and endoplasmic reticulum IP3 and ryanodine receptors, leading to an overload of Ca2 + within the cells, which set off oxidative stress and cell death. These events have been prevented by the antioxidants Trolox® and ascorbic acid. Activated protein kinase C (PKC), phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K) and the mitogen-activated protein kinases (MAPKs), such as ERK1/2 and p38MAPK have played a role in eliciting Ca2+ influx, gamma-glutamyl transferase (GGT) activation and cell death. Roundup® reduced the levels of reduced glutathione (GSH) and increased the amounts of thiobarbituric reactive species (TBARS) and protein carbonyl, characterizing oxidative damage. Also, exposure to the pesticide has stimulated the activity of glutathione peroxidase, glutathione reductase, glutathione-S-transferase, gamma-glutamyl transferase (GGT), catalase, superoxide dismutase and glucose-6-phosphate dehydrogenase, supporting downregulated GSH levels. The glyphosate-Roundup acute exposition also leads to the induction of the transaminase AST e ALT. The GGT activity could lead to increased glutathione turnover; however, downregulation of the Na+-coupled 14C-á-methyl-amino-isobutyric acid (14C-MeAIB) accumulation in testicular cells has decreased the amino acid availability to GSH de novo synthesis. Overall, Roundup® toxicity was implicated in Ca2+ overload, cell signaling misregulation, stress response of the endoplasmic reticulum and/or depleted antioxidant defenses. Although extrapolation from animal models to the human condition should be taken with caution, it is feasible that similar mechanisms could underlie impaired reproduction capability in young male people associated with glyphosate-Roundup exposure during childhood and puberty.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:04:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 319045.pdf: 1219993 bytes, checksum: 465e2e2f85e3782fd5fc2f44033d8bcb (MD5) Previous issue date: 2013 / A incorporação de produtos alimentícios industrializados à dieta causou aumento significativo da quantidade de sal ingerida pela população mundial. No Brasil, cerca de 89% dos homens entre 19 e 59 anos consomem sódio acima do nível seguro de ingestão. Evidências indicam que a ingestão exacerbada de sal pode causar inúmeras doenças. Neste trabalho, avaliamos as alterações causadas pela dieta hipersódica (NaCl 4%) no corpo cavernoso in vitro e na função erétil de ratos. Para isso, ratos Wistar machos, com 60 dias de idade, receberam ração acrescida de 4% de sódio pelo período de 2, 4, 8, 12 ou 24 semanas. Os animais que consumiram sal em excesso pelo maior período de tempo tiveram diminuição do peso testicular e aumento do peso renal, acompanhado de maior produção de urina. Em experimentos in vitro, corpos cavernosos de ratos expostos à dieta hipersódica apresentaram hiper-reatividade quando a contração foi induzida pelo estímulo elétrico de campo. Este efeito foi acompanhado por uma menor sensibilidade ao inibidor de Rho-quinase (composto Y-27632) e evidências funcionais de alterações no influxo de cálcio para o meio intracelular. Nossos resultados sugerem que modificações na recaptação de cálcio para o retículo sarcoplasmático também podem ocorrer. Apesar da dieta não prejudicar o relaxamento mediado pelo óxido nítrico, estabelecido como principal mediador da ereção, ao avaliarmos a função erétil dos animais por meio da administração subcutânea de apomorfina observamos que ratos expostos à dieta hipersódica têm menos ereções que animais da mesma idade que consumiram dieta padrão (controle). Este conjunto de efeitos, in vitro e in vivo, ocorreu de modo independente do aparecimento de hipertensão arterial, a qual até o momento tem sido o principal fator que estabelece alguma relação entre o consumo excessivo de sal e a disfunção erétil. Como conclusão, a ingestão demasiada de sódio pode causar alterações no corpo cavernoso e afetar diretamente a função erétil de ratos, independente da elevação da pressão arterial destes animais. Modificações na funcionalidade da via RhoA/Rho-quinase e mobilização de cálcio parecem contribuir para este efeito. Novos estudos são necessários para esclarecer a importância destas alterações para a disfunção erétil causada pelo consumo de sal. <br> / Abstract: The consumption of processed foods caused a significant increase in salt quantity consumed by the world population. In Brazil, around 89% of men between ages 19-59 ingest sodium above the safe level recommended. Evidence indicates that the heightened intake of salt can cause several diseases. In this study, we evaluated the changes caused by high salt diet (4% NaCl) in corpus cavernosum of rats in vitro, as well as in the erectile function of conscious rats. Wistar male rats (60 days old) received chow added with 4% NaCl for 2, 4, 8, 12 or 24 weeks. Consumption of high salt diet for 24 weeks resulted in decreased testicular weight and increased kidney weight, accompanied by augmented diuresis. When studied in vitro, strips of corpus cavernosum of rats that consumed high salt diet for 24 weeks presented enhanced contractile responses to electrical field stimulation. This effect was accompanied by a decreased susceptibility to the Rho-kinase inhibitor, compound Y-27632, and functional evidence of changes in the influx of calcium into the cytosol, besides impaired calcium uptake into the sarcoplasmic reticulum. Although high salt diet did not affect the relaxation mediated by nitric oxide, the main mediator of erection, we observed that rats exposed to high salt diet have fewer erections induced by subcutaneous injection of apomorphine, when compared with animals of same age fed regular diet (control group). The changes in responsiveness of corpus cavernosum observed in vitro and the reduced number of erection found in vivo in rats fed high salt diet appear to be independent of the influence of salt on the onset of hypertension, since no significant changes on systolic blood pressure were found in these animals. In conclusion, chronic high sodium intake can impair the functionality of corpus cavernosum in vitro and the ability of rats to achieve erections. For the best of our knowledge, this is the first study establishing a relationship between excessive consumption of salt and erectile dysfunction, independently of hypertension. Both modification in the functionality of RhoA/Rhokinase pathway and calcium mobilization appear to contribute to this effect. Further studies are needed to clarify the significance of these changes for erectile dysfunction caused by high salt intake.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Odontologia / Made available in DSpace on 2012-10-21T03:14:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 200126.pdf: 1191399 bytes, checksum: 268151a00b86c4e8297b26e2267301ef (MD5) / O objetivo desta pesquisa foi avaliar a difusão de íons Ca+2 e OH- de materiais endodonticos através da raiz intacta de dentes decíduos. Todos os dentes foram instrumentados em seu comprimento de trabalho até a lima # 40, irrigados com solução de hipoclorito de sódio 1%, e secos com cones de papel absorvente. Os materiais utilizados como obturadores foram: pasta de Ca(OH)2 associada ao propilenoglicol espessada (CaPE); pasta UFSC, mistura de de pó de óxido de zinco com pó de Ca(OH)2 associado ao óleo de oliva; Vitapex ® e Sealapex ®. Após a obturação, todos os dentes tiveram o terço apical e coronal selados, e permaneceram em frascos individuais com solução fisiológica. A análise da difusão de íons OH- e Ca+2 foi realizada por meio de um pHmetro calibrado e um espectrômetro de absorção atômica, respectivamente em 48h, 7, 30, 45 e 60 dias. A pasta CaPE foi o material obturador que mais difundiu íons OH- e Ca+2.