Medicamentos fitoterápicos são aqueles cuja matéria-prima é exclusivamente originária de vegetais, descartando-se qualquer associação que inclua em sua composição outras substâncias ativas isoladas não vegetais. A lesão renal aguda (LRA) é caracterizada pelo rápido declínio da função renal, definida por um aumento absoluto da creatinina sérica de pelo menos 0,3mg/dl, elevação de 50% (1,5 vezes) do valor basal ou redução do fluxo urinário, documentado como oligúria ou menor que 0,5ml/kg por hora por mais de seis horas. Este estudo investigou o efeito protetor do Echinodorus macrophyllus (Ema) na nefrotoxicidade induzida pela ciclofosfamida. Foram utilizados ratos da raça Wistar, machos, adultos, distribuídos nos grupos: Controle: animais que receberam solução de cloreto de sódio 0,9% por via intraperitoneal (i.p.), (1,5ml/kg, dose única), Ema: animais que receberam Echinodorus macrophyllus, (2g/kg 1 x ao dia, durante 5 dias, por gavagem), CCF: animais que receberam ciclofosfamida (150mg/kg dose única, i.p.), CCF + Ema: animais que receberam Echinodorus macrophyllus e ciclofosfamida no 5º dia (i.p.). Foram avaliadas a função renal (FR) (clearance de creatinina); a lesão oxidativa (peróxidos urinários, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico TBARS e tióis no tecido renal) e feita análise histológica renal (lesão tubulointersticial). Os resultados confirmaram a lesão nefrotóxica de caráter oxidativo induzida pela ciclofosfamida. O Ema demonstrou efeito renoprotetor antioxidante, com melhora da FR, redução dos níveis de peroxidação lipídica e metabólitos oxidativos. A análise histológica indicou dano significativo ao tecido renal pela CCF, que foi reduzido nos animais tratados com Ema. Este estudo demonstra claramente a LRA induzida pela ciclofosfamida e o efeito renoprotetor do Ema / Herbal medicines are those whose raw materials are exclusively originated from vegetables, excepting any association that includes in its composition other isolated active substances. Acute kidney injury (AKI) is characterized by a rapid decline in renal function defined by an absolute increase in serum creatinine of at least 0.3 mg/dL, a 50% (1.5 times) baseline increase or urinary flow reduction, documented as oliguria or less than 0.5 ml/kg per hour for a period surpassing six hours. This study investigated the protective effect of Echinodorus macrophyllus (Ema) in cyclophosphamide-induced nephrotoxicity. We used male adults Wistar mice, divided into four groups: Control group: animals receiving sodium chloride solution 0.9 intraperitoneally (ip) (1.5 ml/kg, single dose); Ema: animals that received Echinodorus macrophyllus (2g/kg one time daily for 5 days by gavage); CCF: animals receiving cyclophosphamide (150mg/kg single dose, i.p), CCF + Ema: animals receiving Echonodorus macrophyllus and cyclophosphamide on day 5. We evaluated renal function (RF) (creatinine clearance), oxidative damage (urinary peroxides, thiobarbituric acid reactive substances - TBARS and thiols in kidney tissues) and we also carried out histologic kidney analyses (tubulointerstitial injury). Data confirmed the oxidative nephrotoxic injury induced by cyclophosphamide. Ema proved to have renoprotective and antioxidant effects, with improvement in RF, reduced levels of lipid peroxidation and oxidative metabolites. The histologic analysis indicated significant damage to renal tissue by CCF, which was reduced in animals treated with Ema. This study clearly demonstrates LRA induced by cyclophosphamide and the renoprotective effect of Ema

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-05-04T18:21:40Z No. of bitstreams: 1 Natasha Pavin ok.pdf: 478428 bytes, checksum: 248a3efadd02d2695494d5e6ef077e2b (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Dias (vanessa.dias@unipampa.edu.br) on 2016-05-04T18:34:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Natasha Pavin ok.pdf: 478428 bytes, checksum: 248a3efadd02d2695494d5e6ef077e2b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-04T18:34:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Natasha Pavin ok.pdf: 478428 bytes, checksum: 248a3efadd02d2695494d5e6ef077e2b (MD5) Previous issue date: 2016 / A ciclofosfamida (CP) é um agente antineoplásico e imunossupressor. É uma droga utilizada no tratamento de diversos tipos de tumores, usada para evitar a rejeição em transplante de órgãos e em doenças autoimunes, como artrite reumática e lúpus eritematoso. A CP é um pró-fármaco que sofre biotransformação no fígado pelo citocromo P450 para gerar metabólitos ativos como a mostarda fosfaramida e a acroleína. Seus metabólitos podem ocasionar um quadro de estresse oxidativo causando danos a diversos órgãos, entre eles o sistema reprodutor. A Tribulus terrestris (TT) faz parte da família das Zygophyllaceae, é uma erva rasteira perene com uma distribuição generalizada no Mediterrâneo, climas subtropicais e no deserto de todo o mundo. Na medicina popular tradicional, tem sido utilizada desde a antiguidade como um afrodisíaco, para energizar, vitalizar e melhorar a função sexual e desempenho físico em homens, bem como para tratar infecções urinárias, inflamações, edemas e outras doenças. Apesar de estudos experimentais e clínicos confirmarem parcialmente o fato de alguns efeitos da TT sobre a libido e a produção de esperma estarem envolvidos com o componente majoritário desta planta, a protodioscina, ainda há muito debate a respeito dos possíveis mecanismos de ação, bem como da sua aplicação terapêutica. Considerando o potencial antioxidante e esteroidogênico da TT, este estudo possui como objetivo investigar o potencial protetor do extrato seco da TT contra o dano testicular induzido pela ciclofosfamida em camundongos machos. Os camundongos Swiss machos receberam o extrato seco de TT como pré-tratamento por gavagem, durante 14 dias, na dose de 11 mg/Kg. No 14 ° dia, receberam uma única injeção intraperitoneal de ciclofosfamida na dose de 100 mg/Kg. Após 24 horas, esses animais foram anestesiados e eutanasiados, e o sangue, os testículos e os epidídimos foram retirados para posteriores análises bioquímicas, avaliação espermática e histopatológica. A presença e quantificação de protodioscina no vii extrato de TT foram avaliadas por HPLC (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência), onde foi verificada uma concentração de 1,48% no extrato seco. A CP causou um desequilíbrio no sistema reprodutor destes animais, através do aumento das espécies reativas (ER), peroxidação lipídica (TBARS) e carbonilação de proteínas, bem como uma alteração nas enzimas antioxidantes: superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), glutationa S-transferase (GST) e glutationa redutase (GR). O pré tratamento com TT foi eficaz em proteger contra esses danos. Além disso, foi verificado uma redução na atividade da enzima 17β-hidroxiesteróide desidrogenase (17β-HSD), corroborando com a redução do nível de testosterona sérica verificado neste trabalho. Ao mesmo tempo, ao analisarmos a histopatologia dos testículos destes animais, verificamos uma moderada desorganização do epitélio espermatogenico, bem como, uma congestão dos vasos sanguíneos intersticiais. Estes achados corroboraram com os resultados encontrados na avaliação seminal dos animais tratados com CP, onde foi possível verificar uma diminuição da motilidade (41,07%), do vigor (23,52%), da integridade de membrana (43,44%) e da velocidade curvo-retilinea (25,43%), e o pré tratamento com TT foi eficaz em proteger contra esses danos. Em conclusão, este trabalho visou demonstrar pela primeira vez o potencial protetor do extrato seco de TT contra os danos ao sistema reprodutor masculino de camundongos expostos ao quimioterápico CP. À melhora dos parâmetros avaliados pode estar relacionada ao potencial antioxidante e esteroidogênico, bem como pela quantidade de protodioscina observada neste extrato. / Cyclophosphamide (CP) is an antineoplastic and immunosuppressive agent. It is a drug used to treat various tumours types, and also to prevent rejection in organ transplantation and autoimmune diseases such as rheumatoid arthritis and lupus erythematosus. The CP is a prodrug which is biotransformed in the liver by cytochrome P450 enzymes to generate active metabolites phosphoramide mustard and acrolein. Its metabolites can cause oxidative stress state, leading to damage in various organs, including the reproductive system. Tribulus terrestris (TT) is part of the family of Zygophyllaceae, it is a perennial creeping herb with a widespread distribution in the Mediterranean, subtropical climates and desert around the world. In traditional folk medicine, it has been used since ancient times as an aphrodisiac, to energize, vitalize and improve sexual function and physical performance in men and to treat urinary infections, inflammation, edema and other diseases. Although experimental and clinical studies partly confirm that some effects of TT on libido and sperm production are involved with the major component of this plant, protodioscin, there is still much debate about the possible mechanisms of action, as well as their therapeutic application. Considering the antioxidant and steroidogenic potential of TT, this study has the objective of investigating the protective potential of TT dry extract against testicular damage induced by cyclophosphamide in male mice. The male Swiss mice received the TT dry extract as pretreatment by gavage for 14 days at a dose of 11 mg kg-1. On day 14, animals received a single intraperitoneally injection of cyclophosphamide at a dose of 100 mg kg-1. After 24 hours, the animals were anesthetized and euthanized, and blood, testes and epididymis were removed for further biochemical analyzes, sperm and histological evaluation. The presence and quantification of protodioscin in TT extract were analyzed by HPLC (High Performance Liquid Chromatography), where a concentration of 1.48% of dry extract was verified. CP caused an imbalance in the reproductive system of these animals by increasing the reactive species (RS), ix lipid peroxidation (TBARS) and protein carbonylation, as well as change in antioxidant enzymes: superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx), glutathione S-transferase (GST) and glutathione reductase (GR). The pre-treatment with TT was effective in protecting against this damage. Furthermore, a reduction in the activity of 17β-hydroxysteroid dehydrogenase (17β-HSD) was found, confirming the reduction of serum testosterone levels observed in this study. Additionally, when analyzing the histopathology of the animals’ testes, we perceived a moderate disruption of spermatogenesis epithelium, as well as a congestion of interstitial blood vessels. These findings corroborate the results found in seminal evaluation of the animals treated with CP, where we observed a decrease in motility (41.07%), vigor (23.52%), membrane integrity (43,44%) and curved-straight speed (25.43%), and the pre-treatment with TT was effective in protecting against this damage. In conclusion, this study aimed to demonstrate for the first time the protective potential of TT dry extract against damage to the male reproductive system of mice exposed to CP chemotherapy. Improvement of these parameters may be related to antioxidant and steroidogenic potential as well as the amount of protodioscin observed in this extract.

O bussulfano (BU) e a ciclofosfamida (CY) são fármacos utilizados nos regimes de condicionamento pré-transplante de células tronco hematopoéticas (TCTH). O BU apresenta estreito intervalo terapêutico, alta variabilidade interindividual na farmacocinética e graves reações adversas. O presente estudo avaliou a administração de uma dose teste de BU oral para a individualização do regime de dosagem, definiu o melhor tempo de coletas esparsas para o monitoramento terapêutico do BU e validou um algoritmo baseado em modelo compartimental e farmacocinética populacional em pacientes submetidos ao TCTH. Trinta pacientes portadores de doenças hematológicas tiveram o tratamento com BU individualizado baseado em uma dose teste oral de 0,25 mg/Kg de BU. As doses foram baseadas no clearance aparente calculado na dose teste e as concentrações plasmáticas foram confirmadas após a quinta dose de tratamento. Os coeficientes de variação obtidos entre os valores de clearance avaliados na dose teste e na quinta dose foram <= 30%, exceto para 5 pacientes. Não foram observadas associação entre os parâmetros farmacocinéticos do BU e a evolução clínica dos pacientes. Com a finalidade de estimar os melhores tempos de coletas ideais para aplicação no monitoramento terapêutico do BU, um modelo farmacocinética populacional foi utilizado e um esquema de coletas esparsas com não mais de cinco amostras por paciente (t = 0,5; 2,25; 3; 4 e 5 horas após a dose) demonstrou ser suficiente para a caracterização da farmacocinética do BU. O presente estudo avaliou também a farmacocinética dos enantiômeros da ciclofosfamida (CY) e seus metabólitos (4-hidroxiciclofosfamida e carboxiciclofosfamida), em pacientes submetidos ao TCTH. Foram investigados pacientes portadores de esclerose sistêmica (n=10) e esclerose múltipla (n=10) em regime de condicionamento com 50 mg CY /kg/dia durante 4 dias. Dois ensaios específicos baseados na análise por LC-MS/MS foram desenvolvidos e validados para analisar os enantiômeros da CY e seus metabólito 4- hidroxiciclofosfamida (HCY) e carboxiciclofosfamida (CEPM) em plasma humano. Os parâmetros farmacocinéticos dos enantiômeros da CY e seus metabólitos foram calculados empregando o programa WinNonlin e mostraram acúmulo plasmático dos enantiômeros (S)- (-)-CY (AUC 215, 0 vs 186,2 ?g.h/mL para os paciente EM e 219,1 vs 179,2 ?g.h/mL para os paciente ES) e HCY (1), provavelmente o (R)-(+)-HCY (AUC 5,6 vs 3,7 ?g.h/mL para os paciente EM e 6,3 vs 5,6 ?g.h/mL para os paciente ES) em ambos os grupos de pacientes investigados. A disposição cinética do metabólito CEPM não mostrou enantiosseletividade. A farmacocinética da CY e seus metabólitos HCY e CEPM não diferiu entre os pacientes portadores de EM ou ES. Não foi observado correlação entre o metabolismo da CY e os genótipos avaliados (CYP2B6 e CYP2C9). Não foi possível correlacionar os valores de AUC0-? dos enantiômeros da CY e/ou dos metabólitos HCY e CEPM com a toxicidade ao uso de CY em virtude do pequeno número de pacientes investigados. / Busulfan (BU) and cyclophosphamide (CY) are drugs used during conditioning treatment for hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). BU presents narrow therapeutic window, high interindividual variability in the pharmacokinetics and serious adverse effects. The present study evaluated the administration of a BU test dose for dose individualization, set the best sparse sampling scheme for BU therapeutic monitoring and validated an algorithm based on compartmental and population pharmacokinetics model in HSCT patients. Thirty patients received BU individualized treatment based on an oral test dose of 0.25 mg/kg. Doses were based on apparent clearance calculated with BU test dose. Plasma concentrations were confirmed after the fifth treatment dose. Coefficients of variation obtained between the clearance values evaluated in the test dose and fifth dose were <= 30%, except for 5 patients. No association between BU pharmacokinetic parameters and clinical outcome was observed. To estimate the ideal sampling scheme for BU therapeutic drug monitoring, a population pharmacokinetic model was used. Sparse sampling scheme with no more than five samples per patient (t = 0.5, 2.25, 3, 4 and 5 hours after dosing) was shown to be sufficient to characterize the BU pharmacokinetics. This study also evaluated the pharmacokinetics of the cyclophosphamide enantiomers and its metabolites (4-hydroxycyclophosphamide and carboxicyclophosphamide) in HSCT patients. We investigated patients with systemic sclerosis (SS) (n = 10) and multiple sclerosis (MS) (n = 10) in the conditioning regimen with CY 50 mg/kg/day for 4 days. Two specific tests based on LC-MS/MS analysis were developed and validated to analyze the CY enantiomers and its metabolite 4-hydroxycyclophosphamide (HCY) and carboxicyclophosphamide (CEPM) in human plasma. Pharmacokinetics of CY enantiomers and its metabolites were calculated using WinNonlin software and showed plasma accumulation of (S)-(-)-CY (AUC 215.0 vs 186.2 ?g.h/mL for the MS patient and 219.1 vs. 179.2 ?g.h/mL for the SS patient) and HCY (1), probably the (R)-(+)-HCY (AUC 5.6 vs 3.7 ?g.h /mL for MS patients and 6.3 vs 5.6 ?g.h/ mL for the SS patients) enantiomers in both groups of investigated patients. CEPM kinetics disposition showed lack of enantioselectivity. The pharmacokinetics of CY and its metabolites (HCY and CEPM) did not differ between patients with MS or SS. There was no correlation between the metabolism of CY, CYP2B6 and CYP2C9 genotypes. It was not possible to correlate the AUC0-? of CY enantiomers and/or its metabolites (HCY and CEPM) with CY toxicity due to the small number of patients investigated.

O transplante autólogo de células-tronco hematopoéticas (TACTH) é efetivo para o tratamento da esclerose sistêmica (ES), com controle do acometimento pulmonar, e melhora da fibrose cutânea, da qualidade de vida e aumento da sobrevida global, quando comparado a pacientes não transplantados. Neste tratamento, utiliza-se ciclofosfamida em altas doses, uma droga imunossupressora associada a cardiotoxicidade, potencialmente fatal. A avaliação de potenciais fatores de risco e monitorização clínica durante o procedimento podem contribuir para identificar precocemente a lesão cardíaca aguda e, assim, melhorar o desfecho clínico do paciente. O objetivo deste estudo foi identificar a ocorrência de disfunções cardíacas e avaliar os fatores de risco clínicos e laboratoriais para o desenvolvimento de toxicidade cardíaca aguda induzida pela ciclofosfamida, em pacientes com ES submetidos ao TACTH. Trata-se de um estudo longitudinal e prospectivo, conduzido no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, em pacientes com ES com idade superior a 18 anos, no período de novembro de 2016 a maio de 2018, aprovado por Comitê de Ética em Pesquisa. Os pacientes foram avaliados quanto aos dados clínicos e laboratoriais, incluindo dosagem de peptídeo natriurético, no período pré, durante e 6 meses após o transplante. Foram incluídas 16 mulheres com ES, das quais uma optou por descontinuar a participação no estudo, tendo seus dados excluídos. Nenhum dos participantes apresentava história de uso de substâncias psicoativas ou diagnóstico de diabetes mellitus. Uma paciente era tabagista passiva e uma era tabagista ativa há 24 anos, abstinente desde há três meses antes do início do transplante. Duas pacientes eram hipertensas, controladas com medicamentos anti-hipertensivos. Durante o transplante, 7 (46,7%) pacientes apresentaram alterações cardíacas associadas à ciclofosfamida. As pacientes apresentaram taquicardia, ganho ponderal, aumento de pressão venosa central e dispneia iniciados em menos de 24 horas e até 4 dias após o término da infusão da dose total de ciclofosfamida (200mg/kg) do transplante. Em três, de cinco pacientes submetidas a ecocardiografia, foram detectadas alterações sugestivas de disfunção cardíaca, corroborando os achados clínicos. Uma paciente evoluiu com choque refratário e posterior óbito por falência múltipla de órgãos. Uma paciente necessitou de pericardiocentese de alívio e, nos demais, o manejo com medicações reverteu as alterações clínicas. A dosagem dos níveis séricos de peptídeo natriurético mostrouse mais elevada (p<0,0005) nos pacientes que apresentaram sinais de toxicidade cardíaca. Concluímos que as avaliações clínicas sistematizadas por equipe de enfermagem permitiram a detecção de disfunções cardíacas pós-infusão de altas doses de ciclofosfamida, quadros retrospectivamente comprovados por elevação dos níveis sérico de peptídeo natriurético. O número reduzido de participantes não permitiu fazer análises estatísticas preditoras de cardiotoxicidade e foi uma limitação do estudo. Futuramente, objetivamos aumentar o número de pacientes do estudo e identificar marcadores preditivos de toxicidade cardíaca antes e durante o transplante / Autologous hematopoietic stem cell transplantation (AHSCT) is effective for the treatment of systemic sclerosis (SSc), with stabilization of pulmonary involvement and improvement of cutaneous fibrosis, quality of life and overall survival, when compared to non-transplanted patients. Transplant includes high dose cyclophosphamide, an immunosuppressive drug associated with potentially fatal cardiotoxicity. The evaluation of potential risk factors and clinical monitoring during the procedure may contribute to early identification of acute cardiac injury and thus improve the patient\'s clinical outcome. The aim of this study was to detect cardiac dysfunctions and to evaluate clinical and laboratory risk factors for the development of acute cardiac toxicity induced by cyclophosphamide in SSc patients submitted to AHSCT. This is a longitudinal and prospective study, conducted in the University Hospital of the Ribeirão Preto Medical School (Brazil), in patients with SSc, older than 18 years of age, from November 2016 to May 2018. The protocol has been approved by the Institutional Research Ethics Committee and all patients signed informed consent. Patients were evaluated for clinical and laboratory data, including natriuretic peptide dosage before, during and at the 6 months post-transplant time point Sixteen women with SSc were included, one of whom chose to discontinue participation in the study, having their data excluded. None of the participants had a history of psychoactive substance abuse or a diagnosis of diabetes mellitus. One patient was a passive smoker and another, an active smoker for 24 years, not smoking in the three months before transplantation. Two patients had their blood pressure controlled with antihypertensive drugs. During transplantation, 7 (46.7%) patients had cardiac changes associated with cyclophosphamide. The patients presented tachycardia, weight gain, increased central venous pressure and dyspnoea initiated in less than 24 hours and up to 4 days after the end of the infusion of the total cyclophosphamide dose (200mg / kg) of the transplant. In three of five patients investigated by echocardiography, alterations suggestive of cardiac dysfunction were detected, corroborating the clinical findings of cardiac dysfunction. One patient evolved with refractory shock and subsequent death due to multiple organ failure. One patient required pericardiocentesis due to cardiac tamponade and, in the others, management with medications reversed the clinical alterations. Serum natriuretic peptide levels were higher (p<0,0005) in the patients with than in the patients without any signs of cardiac toxicity. Clinical evaluations by the nursing staff allowed the detection of cardiac dysfunctions after infusion of high dose cyclophosphamide, retrospectively confirmed by elevation of serum levels of natriuretic peptide. The reduced number of participants did not allow for statistical analyzes to predict cardiotoxicity and was a limitation of the study. In the future, we aim to increase the number of patients in the study and to identify predictive markers of cardiotoxicity before and during transplant procedure

<p>Wegener´s granulomatosis (WG) is an unusual, serious, systemic vasculitis with specific clinical findings. The studies in this thesis aim at broadening our understanding of the aetiology and outcome of WG.</p><p>Patients with WG were identified in the In-patient Register 1975-2001. During this time the incidence increased three-fold, and neither ANCA-related increased awareness, nor diagnostic drift, seem to fully explain this trend, but it is still unclear if a true rise in incidence exists. </p><p>Anti- neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA) have been presented as highly specific for vasculitis. In a series of consecutive cANCA/PR3-ANCA positive patients, we investigated the positive predictive value for ANCA, and the outcome of patients with a positive cANCA/PR3-ANCA but not vasculitis. These patients have a low future risk of developing vasculitis, possibly indicating that ANCA, in this setting, reflects neutrophil activating properties not specific to vasculitis.</p><p>By linkage of the WG-cohort, and randomly selected population controls, to the Multi-generation register, we identified all first-degree relatives and spouses of patients and controls, totally encompassing some 2,000 patients and 70,000 relatives. Familial aggregation of WG was the exception, with absolute risks of < 1 per 1000.However, relative risks in first-grade relatives amounted to 1.56 (95% CI 0.35-6.90) such that a moderate familial aggregation cannot be excluded.</p><p>In the WG-cohort, cancer occurrence and risk was compared to that of the general population. Patients with WG have an overall doubled risk of cancer, with particularly increased risks of bladder-cancer, haematopoietic cancers including lymphomas and squamous skin-cancer. In a case-control study nested within the WG-cohort, treatment with cyclophosphamide was compared among bladder-cancer patients and matched cancer-free controls. Absolute risk of bladder cancer as high as 10% some years after diagnosis were found, and this risk can partly be attributed to cyclophosphamide-treatment, with a dose-response relationship.</p>

Wegener´s granulomatosis (WG) is an unusual, serious, systemic vasculitis with specific clinical findings. The studies in this thesis aim at broadening our understanding of the aetiology and outcome of WG. Patients with WG were identified in the In-patient Register 1975-2001. During this time the incidence increased three-fold, and neither ANCA-related increased awareness, nor diagnostic drift, seem to fully explain this trend, but it is still unclear if a true rise in incidence exists. Anti- neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA) have been presented as highly specific for vasculitis. In a series of consecutive cANCA/PR3-ANCA positive patients, we investigated the positive predictive value for ANCA, and the outcome of patients with a positive cANCA/PR3-ANCA but not vasculitis. These patients have a low future risk of developing vasculitis, possibly indicating that ANCA, in this setting, reflects neutrophil activating properties not specific to vasculitis. By linkage of the WG-cohort, and randomly selected population controls, to the Multi-generation register, we identified all first-degree relatives and spouses of patients and controls, totally encompassing some 2,000 patients and 70,000 relatives. Familial aggregation of WG was the exception, with absolute risks of &lt; 1 per 1000.However, relative risks in first-grade relatives amounted to 1.56 (95% CI 0.35-6.90) such that a moderate familial aggregation cannot be excluded. In the WG-cohort, cancer occurrence and risk was compared to that of the general population. Patients with WG have an overall doubled risk of cancer, with particularly increased risks of bladder-cancer, haematopoietic cancers including lymphomas and squamous skin-cancer. In a case-control study nested within the WG-cohort, treatment with cyclophosphamide was compared among bladder-cancer patients and matched cancer-free controls. Absolute risk of bladder cancer as high as 10% some years after diagnosis were found, and this risk can partly be attributed to cyclophosphamide-treatment, with a dose-response relationship.

A major limitation in developing a successful cancer treatment is the need for a distinction between normal and cancerous tissue. For solid tumors, this distinction can be made on a spatial basis, and successful treatments have been developed accordingly; however, many of these treatments cause pathologies in healthy tissue, much to the detriment of patient health. To address this issue for solid tumours, a conceptual approach would be to administer the chemotherapeutic drug locally, such that the intra-tumour concentration was high, while the systemic exposure to the drug remained low, thus, minimizing side effects. The present research focuses on providing proof-of-concept for the electrochemical generation of a toxicant from a prodrug, and subsequent use to elicit cytotoxicity in cancer cells, in attempts to electrochemically mimic monooxygenase-catalyzed bioactivation. Electro-oxidation of acetaminophen and cyclophosphamide substrates at graphite and Ti/RuO2 anodes was successful in generating their respective toxicants; however, the graphite anode was superior with respect to current efficiency and toxicant yield. Electrolyses conducted in batch and flow reactors produced effluents which reduced EMT-6 cell viability to the IC99 level. This thesis provides proof-of-concept for electrochemical prodrug activation as a viable area for further cancer research.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karolinska institutet, 2006. / Härtill 4 uppsatser.

Made available in DSpace on 2016-12-23T13:49:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliana Macedo.pdf: 1847907 bytes, checksum: 0c2c478111632f7e86372a5f0f6c8756 (MD5) Previous issue date: 2012-05-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Ipriflavone is a synthetic isoflavone derivative from daidzein and clinically prescribed for treating and preventing osteoporosis in postmenopausal women. We investigated the potential of this drug against the cytotoxic and mutagenic effects induced by cyclophosphamide (CPA) chemotherapy, using the micronucleus assay in bone marrow erythrocytes of Swiss albino mice (Mus musculus) in vivo. To evaluate their possible mechanisms of action, performed the evaluation of antioxidant activity by DPPH assay. For in vivo testing was carried out three protocols: pretreatment, simultaneous treatment and post treatment. The ipriflavone was evaluated in three different concentrations dissolved in DMSO (1,71; 8,57 e 42,85mg.kg-1 m.c) and administered by oral via. The bone marrow was collected for the evaluation of polycromatic erythrocytes (PCE) and the ratio PCE/(PCE+NCE) (polychromatic erythrocytes / polychromatic erythrocytes + normochromatic erythrocytes). For the DPPH test were assessed five concentrations of ipriflavone (500, 250, 150, 50 e 10μg.mLˉ¹) using DPPH solution (60μM). The results of in vivo tests show that the three concentrations of ipriflavone studied significantly reduced the frequency of MNPCEs induced by CPA, in the pre-treatment protocol and demonstrated the same effect at the concentrations of 1,71 e 42,85mg.kg-1 m.c in the post-treatment. However, simultaneous treatment did not reduce the frequency of MNPCE in any of the concentrations tested. In all protocols performed, the ratio PCE/(PCE+NCE) increased. There was variation between the genders in some of the experimental groups and the evaluation of antioxidant activity of ipriflavone showed no ability to donate hydrogens, suggesting that it acts through other mechanisms, such as inactivation of the enzyme activity of cytochrome P-450 / Ipriflavona é uma isoflavona sintética derivada da daidzeína e utilizada no tratamento e prevenção da osteoporose em mulheres pós-menopausadas. Investigamos o potencial dessa droga contra os efeitos citotóxico e mutagênico induzidos pelo quimioterápico ciclofosfamida (CPA), por meio do ensaio do micronúcleo em eritrócitos de medula óssea de camundongos albinos Swiss (Mus musculus) in vivo. Para avaliar um de seus possíveis mecanismos de ação realizamos a avaliação de sua atividade antioxidante pelo método de DPPH. Para os testes in vivo foram realizados três protocolos: pré-tratamento, tratamento simultâneo e pós-tratamento. A ipriflavona foi avaliada em três concentrações dissolvidas em DMSO (1,71; 8,57 e 42,85mg.kg-1 m.c) e administrada via oral. A medula óssea foi coletada para a avaliação dos eritrócitos policromáticos micronucleados (MNPCEs) e da razão PCE/(PCE+NCE) (eritrócitos policromáticos/eritrócitos policromáticos + eritrócitos normocromáticos). Para o teste de DPPH foram avaliadas 5 concentrações de ipriflavona (500, 250, 150, 50 e 10μg.mLˉ¹) utilizando solução de DPPH 60μM. Os resultados obtidos nos testes in vivo demonstram que a ipriflavona nas três concentrações pesquisadas reduziu significativamente a frequência de MNPCEs induzidos pela CPA no protocolo de pré-tratamento e demonstrou o mesmo efeito nas concentrações de 1,71 e 42,85mg.kg-1 m.c, no pós-tratamento. Entretanto, no tratamento simultâneo, ela não reduziu a frequência de MNPCE em nenhuma das concentrações testadas. Em todos os protocolos realizados houve o aumento da razão PCE/(PCE+NCE), demonstrando sua eficácia na redução da citotoxicidade induzida pela CPA. Houve variação entre os gêneros em alguns dos grupos experimentais. A avaliação da atividade antioxidante da ipriflavona revelou sua ausência de capacidade em doar hidrogênios para o radical DPPH, sugerindo que a mesma atua por meio de outros mecanismos, como por exemplo, inativação da atividade enzimática das isoenzimas do citocromo P-450

A cistite hemorrágica (CH) consiste em um processo inflamatório difuso de origem infecciosa ou não que resulta em um sangramento da mucosa vesical. As CH crônicas recorrentes induzidas pela ciclofosfamida (CYP) são um desafio na prática clínica pela alta morbidade e por vezes mortalidade dos pacientes. O tratamento da CH induzida pela ciclofosfamida consiste no uso de MESNA, disulfiram, N-acetil-cisteína, anti-inflamatório, oxigênio hiperbárico, hiper-hidratação e irrigação vesical, mas novas terapias têm sido investigadas, inclusive usando produtos naturais. A espécie vegetal Chenopodium ambrosioides L., conhecida popularmente como mastruz, mastruço e erva-de-Santa-Maria, tem sido relatada pela população como anti-inflamatório e analgésico. O presente estudo investigou os efeitos do extrato bruto hidroalcoólico de folhas de Chenopodium ambrosioides na CH induzida pela ciclofosfamida em ratos. Vinte e nove ratos receberam 150 mg/kg de CYP por via intraperitoneal (i.p.) para indução de CH e em seguida foram divididos em três grupos: controle negativo (CN), tratados com soro fisiológico a 0,9%; extrato bruto hidroalcoólico de Chenopodium ambrosioides (EBHCa), tratado com dose única de 50 mg/kg de extrato bruto hidroalcoólico de Chenopodium ambrosioides (EBH) e controle positivo (CP), tratados com dose única de 15 mg/kg de diclofenaco de potássio, todos por gavagem. Após 48 horas da indução da CH os animais foram sacrificados para retirada da bexiga, que foi preparada para análise histopatológica e imuno-histoquímica. O EBH foi capaz de diminuir o peso da bexiga e histologicamente a inflamação aguda e crônica da bexiga, a extensão do infiltrado inflamatório na parede vesical e a neoformação capilar do mesmo modo que o diclofenaco de potássio, quando comparados ao grupo CN. Observou-se ainda uma redução da expressão imuno-histoquímica de cicloxigenase-2 (COX-2) e do fator nuclear kappa B (NF&#61547;B) na bexiga. No presente estudo o EBH das folhas de Chenopodium ambrosioides apresentou atividade anti-inflamatória, semelhante ao diclofenaco de potássio, no tratamento da CH induzida pela CYP. / Hemorrhagic cystitis (HC) consists of a diffuse inflammatory process that results on the bleeding of the bladder mucosa due to infectious or noninfectious etiology. Chronically recurrent CYP induced HC remains a challenge to clinical practice given its high morbidity and sometimes mortality of patients. Treatment consists of administering MESNA, disulfiram, N-acetylcysteine, anti-inflammatory, hyperbaric oxygen, hyperhydration and bladder irrigation, though new therapies have been investigated, such as the use of natural products. Popularly known as mastruz, mastruço and erva-de-Santa-Maria, Chenopodium ambrosioides L. has been generally reported by people as having anti-inflammatory and analgesic effects. The following study investigated the effects of a hydroalcoholic crude extract (EBH) of Chenopodium ambrosioides leaves on cyclophosphamide (CYP) induced HC in rats. In order to induce HC, twenty nine rats were intraperitoneally (i.p.) administered 150mg/kg of CYP and then divided into three groups: negative control (NC) were treated with 0,9% saline solution; hydroalcoholic crude extract of Chenopodium ambrosioides (EBHCa) were treated with a single dose of 50 mg/kg of EBH administered and positive control (PC) were treated with a single dose of 15 mg/kg of diclofenac potassium, all of them by gavage. After 48 hours of HC induction, all rats were sacrificed, their bladders removed and prepared for histopathological and immunohistochemical analysis. EBH was able to decrease bladder weight and histologically decrease acute and chronic bladder inflammation, decrease on the infiltrated inflammatory extension of the bladder wall and capillary neoformation in the same way of those from group CN. There was also a reduction in the immunohistochemical expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) and nuclear factor kappa B (NF&#61547;B) in the bladder. In this study, Chenopodium ambrosioides leaves EBH showed anti-inflammatory activity which was similar to results from diclofenac potassium used on treatment of CYP induced HC.