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Crescimento e desenvolvimento de brotações de progênies de Eucalyptys grandis in vitro / Growth and development of Eucalyptus grandis progeny shoots in vitro

Daruska Cavalcante Cardim 17 May 2006 (has links)
O objetivo deste estudo foi avaliar o crescimento e desenvolvimento de brotações de progênies de Eucalyptus grandis in vitro. Brotações oriundas de explantes de hipocótilos distais de 10 progênies foram utilizadas no meio de cultura JADS (CORREIA et al., 1995). Utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado, com 10 tratamentos (10 progênies). No meio de cultura suplementado com 0,5 mg L-1 de BAP e 0,1 mg L-1 de AIA, efetuaram-se 3 subcultivos e aos 63 dias foram avaliadas as massas fresca e seca. O meio de cultura com 0,1 mgL-1 de BAP foi utilizado no alongamento das brotações e em brotações individualizadas. No alongamento de brotações, procederam-se 3 subcultivos, e aos 63 dias foram avaliadas as massas fresca e seca e número de brotações. No alongamento de brotações individualizadas, aos 21 dias foram avaliadas a altura e a ocorrência de raízes. Existiram respostas diferenciadas das progênies; algumas progênies mostraram maior produção de massa fresca e seca e outras se destacaram no alongamento e enraizamento in vitro. / The aim of this work was to evaluate the growth and development of eucalyptus grandis progeny shoots in vitro. Shoots from distal hypocotyl explants of 10 progenies were cultivated in the JADS (CORREIA et al., 1995) tissue culture medium. The culture medium was suplemented with 0,5 mg L-1 de BAP e 0,1 mg L-1 de IAA. Three subcultures where made and at 63rd day of culture, the fresh and oven dry weight and number of shoots were evaluated. At the elongation phase, using the culture medium suplemented with 0,1 mg L-1 de BAP, three subcultures were made and at the 63rd day of culture, fresh and oven dry weight, shoot height and rooting percentage were evaluated. There were differentiated progeny responses. Some showed higher fresh and oven dry weight production and others showed higher elongation rates and rooting percentage.
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Envolvimento da giberelina na regulação do desenvolvimento vegetativo e reprodutivo de tomateiro (Solanum lycopersicum) cv Micro-Tom / Involvement of gibberellin in regulating of vegetative and reproductive growth of tomato (Solanum lycopersicum L.) cv Micro-Tom

Tatiana Bistaco Farinha 28 January 2009 (has links)
As giberelinas (GAs) são bem conhecidas pelo seu papel no alongamento do caule, germinação de sementes, desenvolvimento dos frutos e florescimento em plantas de dia longo. Apesar de boa parte das plantas de interesse agronômico não possuírem resposta fotoperiódica, há poucos estudos sob a possibilidade dessa classe hormonal estar envolvida em processos de florescimento e frutificação em plantas de dia neutro, como é o caso do tomateiro. O principal objetivo do trabalho foi avaliar a importância da via de indução por giberelina para o crescimento vegetativo e reprodutivo em Solanum lycopersicum cv Micro-tom (MT). Para tal, foram utilizados tratamentos exógenos com GA ou um inibidor de sua síntese, paclobutrazol (paclo), em diferentes estágios do desenvolvimento de MT. Os mutantes pro e gib3, os quais são supersensíveis e deficientes a GA, respectivamente, também foram utilizados para análises comparativas. Avaliou-se o tempo para 50% das plantas apresentarem botões florais visíveis a olho nu, tempo para antese, altura e número de entrenós na antese, número de frutos, massa média e total dos frutos e brix. O tratamento com 5 aplicações de paclo ao longo do ciclo levou a uma extensão do desenvolvimento vegetativo, com um atraso significativo na floração. No tratamento que recebeu aplicação de paclo 16 dias após semeadura, mesmo com a planta apresentando uma redução na altura, houve um restabelecimento de seu desenvolvimento reprodutivo, tornando este superior ao controle em termos de tamanho do fruto. Para o tratamento com aplicação de GA aos 16 dias, obteve-se um aumento no brix comparado ao controle. Por outro lado, o mutante procera, por possuir um crescimento vegetativo (altura e número de entrenós na antese) bem superior ao controle MT, teve seu crescimento reprodutivo prejudicado. Estes resultados nos levaram a concluir que embora GA possa induzir diretamente o florescimento e a frutificação de tomateiro, ela também pode reprimir esses processos, provavelmente deslocando o dreno para o crescimento vegetativo. Sendo assim, tanto a aplicação de GA quanto de paclo, se feitas em determinado estágio do desenvolvimento, podem melhorar a qualidade do fruto de tomateiro, aumentando o tamanho dos frutos ou o brix. / The gibberellins (GAs) are well known for their roles in stem elongation, seed germination, fruit development and flowering induction in long day plants. Despite the fact that many plants of agronomic interest do not respond to photoperiod, there are few studies about the possibility of this hormonal class to be involved in the process of flowering and fruit formation in photoperiod-insensitive plants, such as tomato. The main objective of this study was to evaluate the importance of the GA induction pathway for the vegetative and reproductive growth of Solanum lycopersicum cv Micro-Tom (MT). To accomplish this, we performed exogenous application of GA, or an inhibitor of its biosynthesis, paclobutrazol (paclo), at different stages of MT development. The mutants pro and gib3, which are hypersensitive and deficient in GA, respectively, were also used for comparative analysis. It was evaluated the time spent for 50% of plants presenting visible flower buds, the time to anthesis, plant height and the number of internodes at anthesis, number of fruits, total and individual fruit weight and fruit brix. The treatment that received five paclo applications during the life cycle presented stunted vegetative growth, which also reflected in a significant flowering delay. In the treatment that received paclo at 16th day after sowing, there was a reduction in plant height, but its reproductive development was resumed yielding fruit size superior to the control. Conversely, the treatment that received GA at 16th presented fruits with higher brix, compared to the control. Furthermore, the mutant pro, which had a vegetative growth higher than the control (in terms of plant height and number of internodes at anthesis), showed a reduced reproductive growth. These results drove us to the conclusion that although GA can directly induce flower and fruit development in tomato, it also can arrest these processes, probably redirecting the sink for vegetative growth. Thus, both GA and paclo applications, if made in a certain stage of plant development, can improve the quality of tomato fruit, increasing fruit size or brix.
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Variação sazonal de amido em tecidos de reserva do cafeeiro arábica na fase reprodutiva / Seasonal variation of starch in reserve tissues of arabica coffee in the reproductive stage

Jales Teixeira Chaves Filho 14 April 2008 (has links)
O café é a mais importante mercadoria no comércio agrícola internacional, representando uma significante fonte de renda para diversos países, incluindo o Brasil. A formação de gemas florais é um importante processo fisiológico em plantas superiores e o período de florescimento é influenciado pelas condições ambientais. Em Coffea arabica L. estudos tem demonstrado que os tecidos dos ramos e do caule são locais de armazenamento de carboidratos de reserva. Entretanto, muito pouco é conhecido sobre a relação existente entre o acúmulo de amido nos tecidos de reserva e o desenvolvimento reprodutivo nesta espécie. O objetivo deste presente estudo foi investigar a variação sazonal do amido nos tecidos de armazenamento de Coffea arabica L cultivar Catuaí vermelho e a relação com a iniciação e desenvolvimento de gemas florais. Este trabalho foi conduzido em condições de campo, utilizando plantas adultas crescendo na Fazenda Areão, o centro experimental da Escola Superior de Agricultura \"Luiz de Queiroz\"-ESALQ. Ramos laterais (plagiotrópicos), caule principal e raízes laterais foram coletados para determinar os locais de armazenamento nas plantas, bem como para caracterizar a variação sazonal de amido em diferentes estágios fenológicos da planta. Lâminas de secções transversais foram preparadas e então submetidas às observações histológicas. Ramos plagiotrópicos que apresentaram gemas florais e ramos sem gemas foram igualmente analisados para determinar a presença ou ausência de amido nos tecidos. Adicionalmente, o amido foi quantificado em tais ramos para determinar a relação entre o nível de carboidratos e o desenvolvimento de gemas. Os resultados indicaram que os ramos laterais, caule principal e raízes são potencialmente locais de armazenamento de reserva. As gemas florais foram observadas em ramos contendo amido acumulado nos tecidos, sugerindo que o desenvolvimento de gemas no cafeeiro arábico é influenciado pela presença deste polissacarídeo. A concentração média de amido nos ramos contendo gemas foi de 42,85 mg.g-1 de matéria seca ou de 9,10 mg.g-1 para ramos sem gemas, indicando a influência dos carboidratos de reserva sobre o ciclo reprodutivo em Coffea arabica. Ramos contendo poucos frutos demonstraram amido nos tecidos de armazenamento e botões florais desenvolvidos, em oposição aos ramos com muitos frutos, mostrando uma clara relação entre tecidos fonte-dreno e a fase reprodutiva no cafeeiro. / Coffee is the most important commodity in the international agricultural trade, representing a significant source of income to several countries, including Brazil. Flower bud formation is one important physiological process for higher plants, and flowering time is influenced by environmental conditions. In Coffea arabica L. studies have demonstrated that tissues of branches and stems are storage sites for reserve carbohydrates. However, little is known about the relationship between starch accumulation and reproductive development in coffee species. The general objective of the current study was to investigate the seasonal variation of starch in the storage tissues of Coffea arabica L. cultivar Red Catuaí and its relation with flower bud initiation and development. This work was carried out in field conditions, using adult plants growing in Areão Farm, the experimental center of Escola Superior de Agricultura \"Luiz de Queiroz\"-ESALQ. Biological samples of plagiotropic branches, main stem, and lateral roots were collected to determinate the storage sites in plant as well as to characterized the seasonal variations of starch in the different phenological stages of plants. Slides of transversal sections of samples were prepared for histological observation. Plagiotropic branches that showed floral buds and branches without buds were even analyzed to determine the presence or absence of starch in tissues. Additionally, starch was quantified in branches to determinate the relation between carbohydrate concentration and bud development. The results indicated that lateral branches, main stem, and roots were potentially reserves sites. The flower buds were only observed in those branches with higher concentrations of starch, as showed by histological preps. This observation suggested that floral bud development in arabica coffe is influenced by the presence of starch reserve. The mean concentration of starch was 42,85 mg.g-1 or 9,10 mg.g-1 dry weight in branches possessing floral buds was to branches without floral buds, respectively. Branches having few fruits showed starch in storage tissues and larger floral buds, opposed to branches with several fruits, showing a clear relationship between source-sink and reproductive phase in coffee plants.
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Análise funcional dos peptídeos RALF em Arabidopsis: avaliação do efeito do hormônio brassinolide em plantas superexpressoras e silenciadas para os genes AtRALF1 e AtRALF34 / Functional analysis of RALF peptides in Arabidopsis: evaluation of the hormone brassinolide effect in plants overexpressing and silenced for both AtRALF1 e AtRALF34 genes

Tábata Bergonci 20 April 2012 (has links)
A exemplo do que ocorre em animais, peptídeos hormonais em plantas desempenham papéis importantes no crescimento, desenvolvimento e defesa. RALF é um peptídeo hormonal ubíquo em plantas que foi primeiramente isolado de folhas de tabaco. Embora não se saiba exatamente sua função, as informações até agora existentes apontam para um envolvimento com aspectos básicos da biologia celular, provavelmente alongamento celular. Peptídeos RALF em Arabidopsis são encontrados em uma família multigênica de 37 membros. Plantas transgênicas superexpressando o AtRALF1 sob o controle do forte promotor constitutivo 35S, mostram um fenótipo semi-anão e inibição do crescimento das raízes. Um fenótipo semelhante também foi observado quando o AtRALF23 foi superexpresso. O AtRALF23, ao contrário do AtRALF1, tem sua expressão inibida por brassinosteróides. Esses fatos sugerem que diferentes peptídeos hormonais RALF, apesar de convergirem para a mesma função, apresentam uma relação individualizada com outros hormônios. O objetivo desse trabalho foi contribuir para a determinação da função dos peptídeos RALF em plantas e para o esclarecimento da inter-relação existente entre eles e os demais hormônios vegetais. Para tal, selecionou-se as isoformas AtRALF1 e AtRALF34 com base em semelhança/dessemelhança estrutural e padrão de expressão. Plantas silenciadas e com altos níveis de expressão para ambos os genes foram obtidas e avaliadas. A construção gênica AtRALF1-GFP foi inserida em Arabidopsis sob o controle do promotor 35S e foi observada fluorescência no retículo endoplasmático, complexo de Golgi e apoplasto. Genes anteriormente reportados como induzidos em plantas 35S:AtRALF1 foram validados e utilizados em experimentos com o AtRALF1 e o brassinolide. O conjunto dos resultados sugere um efeito antagônico do peptídeo AtRALF1 com relação ao efeito do brassinolide no alongamento de hipocótilos e raízes. Plantas com altos níveis de AtRALF1 são resistentes a aplicação exógena de brassinolide, não exibindo as respostas características do hormônio esteróide. O antagonismo entre os dois hormônios também foi sugerido pela análise da expressão de genes que são induzidos por AtRALF1 e brassinolide. / Like in animals, plant peptide hormones play important roles in growth, development and defense. RALF is a peptide hormone ubiquitous in plants that was first isolated from tobacco leaves. Although its function has not been established, the information gathered so far suggest its involvement with basic aspects of cellular biology, probably cellular elongation. RALF peptides in Arabidopsis are found in a multigene family of 37 members. Transgenic plants overexpressing AtRALF1 under the control of the strong constitutive promoter 35S, show a semi-dwarf phenotype and root growth inhibition. A similar phenotype was also observed when AtRALF23 was overexpressed. AtRALF23, as opposed to AtRALF1, is inhibited by brassinosteroids. These facts suggest that different RALF peptide hormones, despite the convergence to the same function, show a unique relationship with other hormones. The goal of this work was to contribute to the determination of the function of RALF peptides in plants and to clarify the inter-relationship between RALF and the other plant hormones. With that in mind, the isoforms AtRALF1 and AtRALF34 were selected based on primary structure similarity/dissimilarity and pattern of gene expression. Plants with high levels of expression or silenced for both genes were obtained and evaluated. The gene construct AtRALF1-GFP was introduced in Arabidopsis under the control of the 35S promoter and fluorescence was observed in the endoplasmic reticulum, Golgi apparatus and apoplast. Genes previously reported as induced in 35S:AtRALF1 plants were validated and used in AtRALF1 peptide and brassinolide experiments. Taken together our results suggest an antagonistic effect of the peptide AtRALF1 regarding the elongation effect of brassinolide in hypocotyls and roots. Plants with high levels of AtRALF1 are resistant to exogenously applied brassinolide, and do not show typical responses to the steroid hormone. The antagonism between the two hormones was also suggested by the gene expression analysis of the AtRALF1 and brassinolide inducible genes.
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Caracteres morfológicos e produtivos do algodoeiro em diferentes configurações de semeadura / Morphologic and productive cotton characters indifferent sow configuration

Ariana Vieira Silva 20 July 2007 (has links)
O presente estudo teve por objetivo avaliar o comportamento morfológico e produtivo da linhagem de algodão 96/319 sob espaçamentos ultra-adensado, adensado e convencional entre fileiras e número de plantas por metro linear. Os experimentos foram conduzidos em área experimental pertencente ao Instituto Agronômico de Campinas, município de Campinas e, em área agrícola no município de Leme, ambos no Estado de São Paulo, nos anos agrícolas de 1999/00 e 2000/01. O delineamento experimental foi o de blocos ao acaso em esquema fatorial, com 6 repetições, sendo três espaçamentos entre linhas (0,30, 0,60 e 0,90 m) e duas densidades de plantas por metro linear (7 e 10). Em cada parcela experimental foram marcadas quatro plantas ao acaso e analisados os seguintes parâmetros: altura média final das plantas, altura de inserção do 1º ramo frutífero, número de ramos vegetativos e reprodutivos e número de capulhos por planta. Na área útil de cada parcela foi determinada a produção de algodão em caroço e, em amostras de 20 capulhos por parcela, foram realizadas as análises dos caracteres agronômicos de laboratório (massa média de um capulho, massa de 100 sementes e porcentagem de fibra) e das características tecnológicas da fibra (comprimento, uniformidade de comprimento, tenacidade e micronaire e maturidade). De acordo com os dados experimentais obtidos, pôde-se concluir que: no espaçamento ultra-adensado, a produção de algodão em caroço foi, em média, 16% superior em relação ao espaçamento convencional; quanto à interação espaçamento entre linhas e densidade de plantas na linha, maior população de plantas resultam em menor número de capulhos por plantas e maior a produção de algodão em caroço por unidade de área; quanto menor o espaçamento entre linhas, maior a altura média final das plantas e o número de ramos vegetativos e, menor o número de ramos frutíferos e o número de capulhos por planta; quanto maior a densidade de plantas na linha, maior a altura de inserção do primeiro ramo frutífero e o número de ramos vegetativos; quanto menor o espaçamento entre linhas, menor a massa de um capulho, a massa de 100 sementes e a porcentagem de fibra; e, quanto maior a densidade de plantas na linha, menor a massa de um capulho; dentre as características tecnológicas da fibra, quanto menor o espaçamento, menor o índice micronaire e a maturidade da fibra. / The main objective of the present work was to study the morphological and productive behavior of cotton line 96/319 under ultra-narrow row, narrow row and conventional row and plants per linear meter. The experiments were carried out in an experimental area belonging to the Instituto Agronômico de Campinas, Campinas city and in commercial agricultural area in Leme city, both in São Paulo state, during the 1999/00 and 2000/01 season. The experimental design was in randomized blocks with six replications, three rows (0,30, 0,60 and 0,90 m between lines) and two densities (7 and 10 plants per linear meter). Four plants per plot were labeled and analyzed for the average plant height, insertion height of the first fruit branch, number of vegetative and fruit branches and open bolls per plant. The cotton yield was determinated in the useful area of each plot and samples of 20 open bolls randomized chosen per plot were analyzed for agronomical lab characteristics (average open boll mass, mass of 100 seeds and fiber percentage) and fiber technological characteristics (length, length uniformity, strength, micronaire and maturity). According to the experimental data obtained it was possible to conclude: cotton yield for the ultra-narrow was average 16% higher than the yields for the conventional row; for row and plant density interaction, higher plant population resulted smaller number of open bolls per plant and higher cotton yield per unit area; smaller row resulted higher average plant height and number of vegetative branches, and smaller number of fruit branches and open bolls per plant; higher plant density resulted higher insertion height of the first fruit branch and number of vegetative branches; smaller row resulted smaller average open boll mass, mass of 100 seeds and fiber percentage; and higher plant density resulted smaller average open boll mass; among fiber technological characteristics, smaller row resulted smaller micronaire and fiber maturity.
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Desenvolvimento e produtividade da cana-de-açúcar em ambiente protegido sob diferentes níveis freáticos / Development and productivity of the sugarcane in greenhouse under different water table

Adalberto Luiz de Paula 13 February 2009 (has links)
O presente trabalho teve como objetivo avaliar o nível e o tempo de elevação freática, nos diferentes estádios de desenvolvimento sobre as variáveis de crescimento, desenvolvimento, produtividade e parâmetros tecnológicos da cultura da cana-de-açúcar, variedade SP80-3280. O experimento foi conduzido em ambiente protegido, com uma área de 120 m2, instalado na área experimental do Departamento de Engenharia Rural da ESALQ USP, em Piracicaba, São Paulo. O delineamento experimental utilizado foi o Inteiramente Aleatorizado com [(2x2x3)+1+2], totalizando 15 tratamentos com 4 repetições. Os tratamentos foram constituídos de: (a) elevação do nível freático a 25 e 50 cm, (b) tempo de elevação do nível freático por 4, 6, 8 e12 dias, (c) estádios de desenvolvimento 3, 6 e 9 meses (d) nível freático constante de 40 e 60 cm durante todo o ciclo. O experimento foi composto por 60 tubos de concreto com 0,40 m de diâmetro interno e 1,10 m de altura, preenchidos com solo Latossolo Vermelho- Amarelo Álico. As variáveis analisadas foram: altura de planta, número de perfilhos, área foliar, comprimento e diâmetro de colmos, produtividade e parâmetros tecnológicos como: BRIX, POL, FIBRA, AR e ATR. As análises do caldo da cana-de-açúcar foram realizadas no laboratório de tecnologia de açúcar e álcool da ESALQ USP. Os resultados obtidos nas análises de crescimento como: números de perfilhos, área foliar, altura de plantas, comprimento e diâmetro de colmos, no cultivo da cana-planta não apresentaram diferenças significativas entre os tratamentos aplicados, o mesmo foi observado para a produção de colmos e porcentagem de Brix. O que mais teve influência nos demais parâmetros tecnológicos foi o tempo de aplicação dos tratamentos, exceto para a porcentagem de fibra, que foi influenciada pelo nível freático e estádio de desenvolvimento. Os níveis freáticos mantidos constantes a 60 e 40 cm de profundidade durante todo o ciclo de cultivo proporcionaram maiores rendimentos de ATR. Para cana soca as análises de crescimento como: número de perfilhos, diâmetro de colmos e altura de plantas não apresentaram diferenças significativas entre os tratamentos, já para o comprimento de colmos e área foliar ocorreram diferenças apenas no tratamento T14, com as menores médias. Para os parâmetros tecnológicos de Brix, Pol e ATR ocorreram menores concentrações quando aplicados os tratamentos no final do ciclo, entretanto diferindo-se significativamente do tratamento T15, que obteve a maior concentração ATR. O tratamento T15 foi o que obteve a menor concentração de açúcar redutor (AR) e a maior concentração foi obtida no tratamento T8, sem diferenças significativas dos demais tratamentos. A maior porcentagem de fibra foi obtida no tratamento T1, diferindo significativamente do tratamento T8, T12 e T13, com as menores porcentagens de fibra. A produção da cana-soca foi maior quando aplicado os tratamentos no final do ciclo (270 DAC), independente do tempo de duração dos tratamentos. Para o nível freático mantido a 40 cm de profundidade durante todo o ciclo de cultivo (T15), apresentou uma redução de 40% em relação à cana-planta, evidenciando uma possível redução de ciclos de cultivo. / The aim of this work was to evaluate the effect of level and time of freatic elevation on variables related to plant growth, development, productivity and technological parameters of sugarcane crop. The experiment was carried out in a 120-m2 greenhouse, set up at the research station of the Rural Engineering Department Luiz de Queiroz College of Agriculture (ESALQ), São Paulo University. The experimental design was Randomized Complete Block with [(2x2x3)+1+2], totaling 15 treatments and 4 repetitions. The treatments constituted of: (a) elevation of the water table to 25 and 50 cm, (b) time of the water table elevation for 4, 6, 8 e 12 days, (c) stages of development 3, 6 and 9 months, and (d) constant water table of 40 and 60 cm during the cycle. There were in the experiment 60 concrete tubes with 0.40 m of internal diameter and 1.10 m of high, filled with Red-Yellow Alic Latosol. The following variables were analyzed: height of plant, tillering number, leaf area, length and diameter of stalks, productivity as well as technological parameters such as: BRIX, POL, FIBRE, AR and ATR. The analyses of sugarcane juice were performed in the laboratory of sugar and ethanol technology of ESALQ. The results obtained in growth analyses such as: tillering numbers, leaf area, height of plants, length and diameter of stalks, showed that the crop growth did not present significant differences between the applied treatments. The same was observed for the production of stalks and percentage of Brix. The most influenced technological parameter was the time of application of the treatments, except for the fiber percentage that was influenced by the water table and stage of development. The constant water table of 60 and 40 cm depth during caused larger ATR incomes. Growth parameters such as: tillering number, stalk diameter and plant height, did not presented significant differences between the treatments. Significant differences were only observed in length of stalks and foliar area for the T14 treatment, which presented the lowest averages. For the technological parameters, Brix, Pol and ATR, lower concentrations were observed when the treatments were applied in the end of the cycle. T15 treatment presented the largest ATR concentration differing significantly. The T15 treatment showed the lower concentration of reducing sugar (AR) and the highest concentration was observed for the T8 treatment, with no signficant differences for the other treatments. The highest fiber percentage was observed in treatment T1, differing significantly from the treatment T8, T12 and T13, with the lower fiber percentages. The production of sugar ratoon cane was bigger when applying the treatments in the end of the cycle (270 DAC), independent of the duration of the treatments. For the water table, the 40 cm of depth during all the culture cycle (T15) presented a reduction of 40% in relation to the sugarcane-plant, evidencing a possible reduction of crop cycles.
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Identificação da subtilase responsável pelo processamento do prepopeptídeo AtRALF1 em Arabidopsis thaliana / Identification of the subtilase responsible for the prepropeptide AtRALF1 processing in Arabidopsis thaliana

Juan Carlos Guerrero Abad 31 January 2012 (has links)
Desde a década de 90, uma nova família de moléculas de origem protéica e com características hormonais vem sendo estudada em plantas. Esse grupo de novas moléculas, coletivamente chamado de peptídeos hormonais, está envolvido com defesa, reprodução, crescimento e desenvolvimento. RALF, que é um desses novos peptídeos, é ubíquo em plantas e está envolvido com desenvolvimento vegetal. Em Arabidopsis existem 34 genes semelhantes ao RALF (AtRALFs). Nosso grupo mostrou que AtRALF1 é processado de um precursor maior por uma subtilase. Arabidopsis possui 56 subtilases, o objetivo deste trabalho é identificar a subtilase responsável pelo processamento do AtRALF1. Predição da localização subcelular e análise da expressão in silico, ambas confirmadas por análise da expressão por RT-PCR e fusões proteicas com a proteína verde fluorescente, permitiram reduzir para sete o número de subtilases candidatas. Cruzamentos entre mutantes nocaute ou plantas de baixa expressão por RNAi dessas sete subtilases com plantas superexpressoras do AtRALF1 identificaram as subtilases AtSBT6.1 (At5g19660) e AtSBT5.3 (At2g04160) como prováveis envolvidas no processamento do prepropeptídeo AtRALF1. / Since the 90s, a new family of molecules of protein origin and with hormone characteristics has been studied in plants. This group of new molecules, collectively named peptide hormones, is involved in defense, reproduction, growth and development. RALF, one of these peptides, is ubiquitous in plants and is involved in plant development. In Arabidopsis there are 34 RALF-like genes (AtRALFs). Our group has shown that AtRALF1 is processed from a larger precursor by a subtilase. Arabidopsis has 56 subtilases, our goal is the identification of the specific subtilase that is responsible for the AtRALF1 processing. Prediction of subcelular localization and in silico gene expression analysis, both confirmed by RT-PCR expression analysis and chimeric proteins with green-fluorescent protein, allowed the reduction of the initial 56 candidates to only 7 subtilases. Crosses between knockout mutants or RNAi plants expressing low levels of subtilases with overexpressors of AtRALF1 identified the subtilases AtSBT6.1 (At5g19660) and AtSBT5.3 (At2g04160) as potentialy involved in the prepropeptide AtRALF1 processing.
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Temperatura base, soma térmica, plastocrono e duração das fases fenológicas de cultivares de pimenta biquinho / Base temperature, degree day, plastochron, and duration of phenological phases of biquinho pepper cultivars

Valera, Oscar Valeriano Sanches 21 February 2017 (has links)
The objective of this study was to estimate the base temperature (Tb, ºC), degree day (STa, ºC day) and plastochron (ºC dia nó-1) of the development satges of the biquinho pepper cultivars. The study was conducted in the experimental area of the UFSM campus Frederico Westphalem-RS, Brazil, from August 2015 to May 2016. The experimental design was a randomized block design with factorial scheme 2x4, with two biquinho pepper cultivars (BRS Moema and Airetama Biquinho Amarela) and four growing seasons (24/08/2015, 01/10/2015, 13 / 11/2015 and 15/03/2016), with six replications. For the visual identification of different stages during the vegetative and reproductive phase, the following sub-phases were established: emergence-transplant (TR-FI), transplant-beginning of flowering (TR-IF), beginning of flowering-beginning of harvest (AN-FR), fruit-ripening-fruit (FR-MA), early harvesting (IC-PC), floral bud-anthesis (BO-AN), anthesis-fruiting. In the subphases was estimated its duration (in days), STa and Tb. The subphase Tb was calculated by the methods of the standard deviation in days, the standard deviation in degrees days, the coefficient of variation in days, the coefficient of variation in degrees day, x-intercept, and relative development. The plastochron was estimated for the vegetative and reproductive phase. For each phase, we estimated the base temperature, degree day and the emission of nodes on a plant stem. The Tb was estimated by the mean error square method (QME). The plastochron was estimated from the inverse of the coefficient of simple linear regression between the number of nodes and STa. The development was similar between the two cultivars, being dependent on the cultivation times and not on the genotype. The air temperature influences only the duration of the period for the EM-TR and TR-IF phases. Tb for the EM-TR, TR-IF, IF-IC, IC-PC phases is 16.5 °C , 14.8 °C and 20.2 °C, respectively. For the sub-phases (BO-AN, AN-FR, FR-MA) the base temperature is 20.2 °C. The STa was 446.2 °C day, 377.1 °C day, 558.0 °C day, 781.8 °C day for the phases EM-TR, TR-IF, IF-IC, respectively, and 104.0 °C day, 162.8 and 342.1 °C day for the sub-phases BO-AN, AN-FR, FR-MA, respectively. With the established phases a phenological scale was proposed that indicates the duration in days and the thermal needs in each phase. In the estimation of the plastochron base temperature as well as the emission of nodes was not influenced by the cultivar. In the vegetative phase, Tb and plastochron had on average a Tb of 16.8 ºC and a plastochron of 43.6 ºC day node-1. In the reproductive phase both Tb and plastochron were similar at the evaluated times, showing in average a Tb of 16.7 ºC and plastochron of 64.4 ºC day node-1. / O objetivo deste estudo foi estimar a temperatura base (Tb,ºC), soma térmica acumulada (STa, ºC) e plastocrono (ºC dia nó-1) das fases de desenvolvimento de cultivares de pimenta biquinho. O estudo foi conduzido na área experimental da UFSM campus Frederico Westphalem-RS, Brasil, no período de agosto de 2015 a maio de 2016. O delineamento experimental utilizado foi de blocos ao acaso em esquema fatorial 2x4, tendo como fatores dois cultivares de pimenta biquinho (BRS Moema e Airetama Biquinho Amarela) e quatro épocas de semeadura (24/08/15, 01/10/15, 13/11/15 e 15/03/16), com seis repetições. Pela identificação visual de diferentes estágios durante a fase vegetativa e reprodutiva, foram estabelecidas a partir da emergência as subfases: emergência-transplante (EM-TR), transplante-início da floração (TR-IF), início da floração-início da colheita (IF-IC), início da colheita-plena colheita (IC-PC), botão floral-ântese (BO-AN), ântese-frutificação (AN-FR), frutificação-maturação do fruto (FR-MA). Nas subfases foi estimado sua duração (em dias), STa e Tb. A Tb das subfases foi calculada pelos métodos de desvio padrão em dias, desvio padrão em graus dias, coeficiente de variação em dias, coeficiente de variação em graus dia, x-intercepto e desenvolvimento relativo. O plastocrono foi estimado para a fase vegetativa e reprodutiva. Para cada fase foi estimada Tb, STa e a emissão de nós numa haste da planta. A Tb foi estimada pelo método do quadrado médio do erro (QME). A partir do inverso do coeficiente angular da regressão linear simples entre o número de nós e a soma térmica acumulada foi calculado o plastocrono. O desenvolvimento foi similar em ambas as cultivares, sendo dependentes das épocas de cultivo e não do genótipo. A temperatura do ar influencia apenas a duração do período para as subfases EM-TR e TR-IF. A Tb para as subfases EM-TR, TR-IF, IF-IC, IC-PC foi de 16,5 ºC, 14,8 ºC e 20,2 ºC, respectivamente. Para as subfases BO-AN, AN-FR, FR-MA a Tb foi de 20,2 ºC. A STa foi de 446,2 ºC dia, 377,1 ºC dia, 558,0 ºC dia, 781,8 ºC dia para as subfases EM-TR, TR-IF, IF-IC, IC-PC, respectivamente e de 104,0 ºC dia, 162,8 e 342,1 ºC dia para as subfases BO-AN, AN-FR, FR-MA, respectivamente. Com as subfases estabelecidas foi proposta uma escala fenológica que indica a duração em dias e as necessidades térmicas em cada fase. O plastocrono (ºC dia nó-1) e a Tb, não foram influenciados pelo cultivar. Na fase vegetativa a Tb e o plastocrono (ºC dia nó-1) mostraram em média Tb de 16,8 ºC e plastocrono de 43,6 ºC dia nó-1. Na fase reprodutiva tanto a Tb como o plastocrono foram similares nas épocas avaliadas, mostrando em média Tb de 16,7 ºC e plastocrono de 64,4 ºC dia nó-1.
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Clonagem e caracterização do gene PUMILIO de Arabidopsis thaliana / Cloning and characterization of the gene from Arabidopsis thaliana PUMILIO

Elaine Cristina Favaro 25 February 2002 (has links)
Proteínas que se ligam a RNAs geralmente regulam estabilidade, localização e tradução de mensageiros por interação com seqüências específicas na região 3 não traduzida. A proteína PUMILIO foi descrita pela primeira vez em Drosophila, apresentando a função de controlar a tradução de mensageiros alvo durante o desenvolvimento. Homólogos podem ser encontrados em outras espécies filogeneticamente distantes com funções similares. O seqüenciamento do genoma de Arabidopsis thaliana indicou a presença de quatro genes que codificam homólogos ao PUMILIO de Drosophila. Três deles estão no cromossomo II (APUM-1, 2 e 3), com alto grau de identidade e situados muito próximos uns dos outros. A terceira cópia está no cromossomo IV (APUM-4) e sua seqüência tem menor similaridade em relação aos três anteriores. Neste trabalho, foi clonado e caracterizado APUM-2. Ensaios de northern blot e RT-PCR indicaram que o mensageiro de Apum-2 pode ser encontrado em amostras de raiz, caule, folha, flores e frutos. Entretanto, sistemas repórteres, APUM-2::GUS e APUM-2::GFP, foram introduzidos no vegetal e a expressão foi observada nos ápices do caule e raízes, especificamente nas regiões meristemáticas. Também foram feitas construção para ensaios de genética reversa e as plantas contendo construções constitutivas (35S::APUM-2) se desenvolveram sem dominância apical e com grande quantidade de ramos, folhas e raízes secundárias, mostrando perturbações nos meristemas. Os resultados obtidos sugerem que APUM-2 possui papel relevante durante o desenvolvimento meristemático, possivelmente através de interações com mRNAs. / RNA-binding proteins often regulate the stability, localization, and translation of mRNAs by interaction with specific motifs in the 3-UTR. The PUMILIO protein from Drosophila was shown to control translation of specific mRNAs during development. PUMILIO homologs were found in several species and constitute the PUF family. The Arabidopsis thaliana sequencing project revealed four genes homolougs to PUMILIO. Three are situated in chromosome II (APUM-1, 2, and 3) that are nearly identical among themselves, and that contain a region that is 52% homologous to the PUMILIO. RNA-binding domain. The fourth is in chromosome IV (APUM-4), and shows low similarity to the other three. In this work, we characterized APUM-2 in further detail. Northern blots indicated that Apum-2 is expressed in shoot and root apices. Reporter transgenic plants were made that contained either APUM-2::GUS or Apum2::GFP constructs. Reporter gene expression confirmed that APUM-2 is active in shoot and root apices, specifically in the meristematic regions. Finally transgenic plants containing the 35S::APUM-2 construct were created. Constitutive APUM-2 expression resulted in plants with no apical dominance and a high number of leaves, stems and lateral roots. These results suggest that APUM-2 plays an important role during meristem development, possibly through a mRNA interaction.
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Compartive studies of parasitic plants\' haustorial system: structural and phylogenetic perspectives / Estudos comparados do sistema haustorial de plantas parasitas: perspectivas estruturais e filogenéticas

Teixeira-Costa, Luíza 05 April 2019 (has links)
The parasitic life style has repeatedly evolved in several occasions within nearly every life kingdom. Among Plants, parasitic clades are currently believed to have diverged 12 times independently, comprising over 1% of all extant diversity of flowering plants (Angiosperms). This great variety of species is translated into a wide array of plant habits, body sizes, modes of host infestation, photosynthetic capacity, life cycles, occupied environments, etc. Still, all of these ca. 4,600 plant species are united by the presence of a particular organ known as haustorium. Said to \"morphologically define parasitism among plants\", this peculiar plant organ carries out the main parasitic functions, from initial attachment and invasion of host tissues, to the stablishmente of a morpho-functional bridge that allows parasite-host communication and substance exchange. Considering the importance of this organ for the parasitic plant lifeform, the wide diversity of these plants is analyzed here in terms of structural and evolutionary aspects of the haustorium development. Initially, detailed studies are presented for the species characterized by two infestation modes: mistletoes, i.e., parasites the attach to host stems and branches; and endophytic parasites, i.e., plants that colonize the interior of the host body and are only visible outsite the host during the reproductive phase. Regarding mistletoes, details obtained from broad studies on their haustorium morphogenesis were used for a phylogenetic analysis of ancestral character state reconstruction and divergence time estimations. Results suggest that the change from root to aerial parasitism could have been facilitated by a common background for haustorium development shared by root parasites and early diverging mistletoes. From these early ancestors, specialization of haustorium tissue located internally to the host stems/branches would have led to evolution of different morphologies of the host-parasite connection, including the rise of a few endophytic species within mistletoe clades. In the second chapter, endoparasitism is detailed and discussed, including endophytic mistletoes but mainly focusing on the four puzzling plant families exclusively composed of species showing this infestation mode. Despite their reduced body size and endophytic system initially composed of parenchyma cells only, endoparasitic species of these four families are shown here to differentiate conductive phloem and/or xylem cells. Different strategies for the establishment of host-parasite connections are also reported and discussed as probably related to flower size. The hypothesis of parasitic plant control over host cambium differentiation is highlighted as a likely explanation for the alterations observed in host xylem and phloem anatomy. In the sequence, the third chapter is dedicated to a study of the terminology related to haustorium morphology and anatomy. A total of 48 terms are presented and discussed in an illustrated and referenced glossary. As the main result, parasitic plant haustorium is understood as a complex organ, composed of different tissues and cell types. The frequent equalization of this complete organ with one of its parts is discussed as frequently leading misunderstandings of the very parasitic nature of some species and lineages of haustorium-forming plants. Finally, the fourth chapter provides a broad comparative study of this peculiar organ in all 12 independent lineages of parasites. Methods in plant morphology and anatomy were combined with the current phylogenetic paradigm of parasitism evolution among plants. A general developmental sequence is discussed to be common in all haustoria, despite their varied ontogenetic origin. In all analyzed parasitic clades, direct host-parasite xylary connections were formed; on the other hand, phloem connections were detected in species of four clades only. A comparison between the huadotium and other plant organs discusses terminal haustoria to be a modified root, while lateral haustoria could be interpreted as either a modified stem, or as neoformation. Altogether, these results indicate the existence of very conservative mechanisms for haustorium formation throughout all of its diversity / O estilo de vida parasita tem evoluído repetidamente em várias ocasiões em quase todos os reinos da vida. Entre as plantas, acredita-se que os clados parasitas divergiram 12 vezes de forma independente, compreendendo mais de 1% de toda a diversidade existente de plantas com flores (Angiospermas). Essa grande variedade de espécies é traduzida em uma ampla gama de hábitos, tamanhos corporais, modos de infestação da planta hospedeira, capacidade fotossintética, ciclos de vida, ambientes ocupados, etc. Ainda assim, todas esses ca. 4.600 espécies de plantas estão unidas pela presença de um órgão específico conhecido como haustório. Dito como a \"definição morfológica do parasitismo entre as plantas\", este peculiar órgão vegetal realiza as principais funções parasitárias, desde a fixação inicial e invasão dos tecidos hospedeiros, até o estabelecimento de uma ponte morfofuncional que permite a comunicação parasita-hospedeira e a troca de substâncias. Considerando a importância deste órgão para a forma de vida da planta parasita, a grande diversidade destas plantas é analisada aqui em termos de aspectos estruturais e evolutivos do desenvolvimento do haustório. Inicialmente, são apresentados estudos detalhados para as espécies caracterizadas por dois modos de infestação: ervas-de-passarinho, ou seja, parasitas que se prendem a caules e ramos da hospedeira; e parasitas endofíticas, plantas que colonizam o interior do corpo hospedeiro e apenas são visíveis no exterior da hospedeira durante a fase reprodutiva. Quanto às ervas-de-passarinho, os detalhes obtidos a partir de estudos amplos sobre a morfogênese do haustório foram utilizados para uma análise filogenética de reconstrução do estado de caráter ancestral e estimativas do tempo de divergência. Os resultados sugerem que a mudança do parasitismo da raiz para o parasitismo aéreo poderia ter sido facilitada por um contexto comum para o desenvolvimento do haustório, compartilhado por parasitas de raízes e pelas primeiras ervas-de-passarinho a divergirem. A partir desses primeiros ancestrais, a especialização do tecido haustorial localizado internamente aos ramos da hospedeira levaria à evolução de diferentes morfologias da conexão parasita-hospedeira, incluindo o surgimento de algumas espécies endofíticas dentro dos clados de ervas-de-passarinho. No segundo capítulo, o endoparasitismo é detalhado e discutido, incluindo ervas-de-passarinho endofíticas, mas principalmente com foco nas quatro famílias de plantas intrigantes compostas exclusivamente por espécies que mostram esse modo de infestação. Apesar de seu tamanho corporal reduzido e do sistema endofítico inicialmente composto somente por células de parênquima, as espécies endoparasitas dessas quatro famílias são mostradas aqui como capazes de diferenciar células condutoras de floema e/ou xilema. Diferentes estratégias para o estabelecimento de conexões parasita-hospedeira também são relatadas e discutidas como provavelmente relacionadas ao tamanho das flores dessas plantas. A hipótese de controle de plantas parasitas sobre a diferenciação cambial da hospedeira é destacada como provável explicação para as alterações observadas na anatomia do xilema e floema hospedeiro. Na seqüência, o terceiro capítulo é dedicado a um estudo da terminologia relacionada à morfologia e anatomia do haustório. Um total de 48 termos são apresentados e discutidos em um glossário ilustrado e referenciado. Como principal resultado, o haustório das plantas parasitas é compreendido como um órgão complexo, composto por diferentes tecidos e tipos celulares. A frequente equalização deste órgão completo com uma de suas partes é discutida como freqüentemente levando a mal-entendidos sobre a natureza parasitária de algumas espécies e linhagens. Finalmente, o quarto capítulo fornece um amplo estudo comparativo desse órgão peculiar em todas as 12 linhagens independentes de parasitas. Métodos em morfologia e anatomia vegetal foram combinados com o atual paradigma filogenético de evolução do parasitismo entre plantas. Uma seqüência geral de desenvolvimento é discutida como sendo comum em todos os haustórios, apesar de sua origem ontogenética variada. Em todos os clados parasitas analisados, conexões xilemáticas diretas entre parasitas e hospedeiras foram obsrvadas; por outro lado, as conexões do floema foram detectadas em espécies de apenas quatro clados. Uma comparação entre o haustório e outros órgãos vegetais discute o haustório terminal como sendo uma raiz modificada, enquanto o haustório lateral pode ser interpretado como um caule modificado ou como uma neoformação. Em conjunto, estes resultados indicam a existência de mecanismos conservados para a formação de haustórios em toda a sua diversidade

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