Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pos-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T17:21:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A proposta deste estudo foi investigar os efeitos antinociceptivos da diacereína em modelos de dor inflamatória e neuropática persistentes em camundongos. As ações da diacereína foram comparadas com as da gabapentina, uma droga anti-convulsivante clinicamente utilizada para o controle da dor neuropática. Ambas diacereína e gabapentina foram capazes de reverter significantemente a alodínia mecânica induzida pela injeção intraplantar (i.pl.) de carragenina. Contudo, nem a diacereína nem a gabapentina foram efetivas em reduzir o edema de pata, os níveis de IL-1b ou a atividade da mieloperoxidase (MPO) neste modelo. A diacereína e a gabapentina também inibiram a alodínia mecânica induzida pelo adjuvante completo de Freund (CFA) ou pela constrição parcial do nervo ciático, entretanto, a diacereína falhou em prevenir a ativação do NF-kB após a injeção i.pl. de CFA. a diacereína, apenas quando administrada por via intratecal (i.t.) mas não intraplantar, foi capaz de inibir a alodínia mecânica induzida pela carragenina. Finalmente, a diacereína não alterou significantemente a atividade locomotora, coordenação motora, temperatura corporal ou limiares térmicos ou mecânicos basais dos animais. O presente estudo sugere que a diacereína produz expressivos efeitos antinociceptivos em modelos animais de dor inflamatória e neuropática persistentes, por mecanismos provavelmente não associados com o bloqueio da produção de IL-1b, migração de neutrófilos ou ativação do NF-kB. Finalmente, os efeitos antinociceptivos da diacereína foram similares aos observados para a gabapentina. É possível que a diacereína possa apresentar grande potencial para o tratamento da dor crônica.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências. / Made available in DSpace on 2012-10-24T13:37:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 265366.pdf: 2761734 bytes, checksum: 0034f6e133cb9020706afbce0471d535 (MD5) / Osteoarthritis (OA) is the most prevalent form of rheumatic disease which affects joints like the knee, with pain as one of the most frequent symptoms among patients. Traditionally, drugs used for treatment of OA do not reduce joint damage, and have several side effects. A drug studied for this purpose is diacerein (DIA), which provides anti-osteoarthritic and condroprotective effects and inhibits the activity of IL- 1â and cell migration. Additionally, studies show that DIA promotes joint pain relief in individuals with OA. Nevertheless, its effects have not been well established; therefore, studies which investigate the use of this drug and its implications in models of OA are necessary. This study aims to examine the pharmacological effect of DIA in the control of OA using a model of OA induced by intra-articular injection (i.a.) of CFA (complete Freund's adjuvant) in the rat knee. CFA induced hypersensitivity and inflammation for about 20 days, as well as joint effusion and changes in synovial membrane and cartilage, observed on histology (histological evaluations). Moreover, DIA (30 mg/ kg, orally, daily), significantly inhibited mechanical (58 ± 10% / 87 ± 3%) and thermal (66 ± 12 % / 87 ± 8 %) allodynia induced by injection of CFA, inhibited nociception in 83 ± 5 to 41 ± 11%, verified by the percentage of vocalization, in addition to reducing the score for spontaneous pain and joint swelling in 60 ± 6 to 40 ± 9 %. Furthermore, DIA reduced the histological changes induced by CFA after 3, 15 and 23 days of treatment. In short, this study extends the data described in the literature and shows that DIA (in the dose of 30 mg/kg) reduces the joint damage (joint effusion, changes in cartilage and synovial membrane) and nociception (mechanical and thermal allodynia and spontaneous nociception) associated with OA induced by CFA in rats. Efeito da diacereína em modelo de monoartrite (osteoartrite) em ratos, induzida por injeção intra-articular de CFA (adjuvante completo de Freund) no joelho de ratos. Análise da diacereína sobre a alodínia mecânica, nocicepção, edema articular e sobre as alterações histológicas induzidas pelo CFA após 3, 15 e 23 dias da indução da monoartrite, com tratamento diário com diacereína (na dose de 30 mg/kg).

Diacerhein (DAR) is a slow acting symptomatic drug used to treatment of osteoarthritis. It is available in the Brazilian market as capsules and compounded capsules. There are no official methods for DAR analysis in any of the pharmacopeia. In the present work, methods for the quantification and dissolution evaluation of the drug in capsules and compounded capsules were developed and validated. Spectrophotometry and high-performance liquid chromatography (HPLC) were the methods used for drug determination. In the spectrophotometric method the DAR can be quantified at 277 as well as 502 nm, using 0.1N NaOH as diluent. The HPLC analyses were performed on a C18 column, using a mobile phase composed of triethylamine 0.1%:acetonitrile (65:35, v/v; adjusted to 7.5 with orthophosphoric acid) and UV detection at 250 nm. The methods showed good linearity (r>0.99), precision (RSD<2%) and accuracy (>99%) and the results obtained were not statistically different (P=0.05). The optimization of dissolution test conditions for in vitro quality control of DAR in capsules was evaluated. The use of 900 mL of sodium phosphate buffer at 37.0 ± 0.5 ºC, basket as apparatus, at 100 rpm rotate speed and 30 minutes of test provided satisfactory results for tested products. The percent dissolution of DAR in the established condition was more than 80% and the different evaluated products presented good dissolution efficiency (>85%). The spectrophotometric method that was validated to evaluate the dissolution testing showed to be specific, with no interference of the placebo or shell capsules in the quantification of DAR, linear (0.27 6.66 μg mL-1; r>0.99), precise (RSD<5%) and accurate (>97%). The drug showed satisfactory stability in the selected dissolution medium. / A diacereína (DAR) é um fármaco antiartrósico sintomático de ação lenta. No mercado brasileiro encontra-se disponível na forma de cápsulas e cápsulas manipuladas. Não existem monografias para análise de DAR em nenhuma farmacopéia. No presente trabalho, métodos para quantificação e avaliação da dissolução do fármaco em cápsulas foram desenvolvidos e validados. Os métodos usados para a quantificação do fármaco foram a espectrofotometria e a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). No método espectrofotométrico DAR pode ser quantificada em 277 ou em 502 nm, utilizando NaOH 0,1N como diluente. As análises por CLAE foram realizadas em coluna C18, utilizando fase móvel composta de trietilamina 0,1%: acetonitrila (65:35, v/v; com pH ajustado para 7,5 com ácido ortofosfórico) com detecção no UV em 250 nm. Os métodos mostraram boa linearidade (r>0,99), precisão (DPR<2%) e exatidão (>99%) e os resultados obtidos não apresentaram diferença estatística significante (P=0,05. A otimização das condições para o teste de dissolução in vitro para DAR em cápsulas foi avaliada. As condições que forneceram resultados satisfatórios para os produtos testados foram 900 mL de tampão fosfato de sódio pH 7,0 com 0,75% de lauril sulfato de sódio, a 37,0 ± 0,5 ºC, aparato cesta, 100 rpm e 30 minutos de teste. A liberação de DAR na condição estabelecida foi superior a 80% e os diferentes produtos analisados demonstraram boa eficiência de dissolução (>85%). O método espectrofotométrico que foi validado para avaliar a dissolução mostrou ser específico, não havendo interferência de excipientes ou do invólucro das cápsulas na quantificação de DAR, linear (0,27 6,66 μg/mL; r> 0,99), preciso (DPR < 5%) e exato (>97%). O fármaco mostrou estabilidade satisfatória no meio de dissolução selecionado.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fever is a systemic response that results of a cascade of events that usually begins with pathogenic infection. Its development represents an important aspect of host defense that is mediated by the central nervous system. However, antipyretic medication are routinely prescribed because fever is associated with discomfort and anxiety, apart from to represent a iminent risk of febrile seizures. The present study aimed to investigate the effect of diacerein on body temperature and Baker s Yeast- and prostaglandin E2 -induced fever in young male Wistar rats (28 30 days of age). The subcutaneous administration of diacerein (5mg/kg) did not alter basal rectal temperature. This dose attenuated the febrile response induced by Baker Yeast, however did not reversed prostaglandin E2 -induced fever. Moreover, diacerein (5mg/kg, s.c.) delayed the onset of fever induced by Baker Yeast, but it did not prevent their installation. Interestingly, diacerein inhibited the leukocyte migration enhancement that occurred in the control group after the intraperitoneal administration of Baker s Yeast. These data suggest that the diacerein exert a weak antipyretic effect, which may occur through inhibition of synthesis of proinflammatory cytokines. However, further studies are needed to elucidate the precise mechanism of this antipyretic action of diacerein. / A febre é uma resposta sistêmica que resulta de uma cascata de eventos que inicia, geralmante, com infecção patogênica. Seu desenvolvimento representa um importante aspecto de defesa do hospedeiro, que é mediado pelo sistema nervoso central. No entanto, medicações antipiréticas são rotineiramente prescritas porque a febre está associada com desconforto e ansiedade, além de representar um risco iminente de convulsões febris. O presente estudo objetivou investigar o efeito da administração subcutânea de diacereína sobre a temperatura retal e sobre a febre induzida por suspensão de Saccharomyces cerevisiae (fermento de padeiro) e por prostaglandina-E2 em ratos machos jovens da linhagem Wistar (28 30 dias). A administração subcutânea de diacereína (5mg/kg) não alterou a temperatura retal dos animais, ao longo das medidas. Esta dose atenuou a resposta febril induzida por fermento de pão, no entanto não reverteu a febre induzida pela administração intratecal de prostaglandina-E2. Além disso, diacereína (5mg/kg, s.c.) prolongou a latência para o início da febre induzida por fermento de padeiro, mas não preveniu a sua instalação. Interessantemente, a diacereína inibiu o aumento da migração leucocitária que ocorreu no grupo controle, após a administração intraperitoneal de fermento de padeiro. Estes dados sugerem que a diacereína exerce um fraco efeito antipirético, o qual pode ocorrer através da inibição da síntese de citocinas pró-inflamatórias. Porém, mais estudos são necessários para elucidar o mecanismo preciso da ação antipirética da diacereína.

Orientador: Mario Jose Abdalla Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-17T01:01:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tobar_Natalia_M.pdf: 2047534 bytes, checksum: cd359ddf7e8c05aab24d1675313c8789 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: As alarmantes estatísticas mundiais sobre a incidência de obesidade e diabetes mellitus tipo 2 (DM2) associadas aos seus índices de avanço já considerados epidêmicos permitem classificá-los como alguns dos mais desafiadores problemas de saúde pública da atualidade. A obesidade representa um dos principais fatores de risco para o desenvolvimento da resistência à insulina e DM2 e o solo comum entre estes eventos encontra-se em um processo inflamatório sistêmico exacerbado, caracterizado por uma produção anormal de citocinas pró-inflamatórias e proteínas de fase aguda. Além de contribuem para o desenvolvimento de dislipidemia, hipertensão arterial, obesidade e aterosclerose, mediadores inflamatórios atuam como moduladores negativos da ação da insulina principalmente através da ativação de proteínas intracelulares serina quinases, como JNK e IKK?, que prejudicam a transdução do sinal desencadeado pela ligação da insulina ao seu receptor celular. A Diacereína é um composto de origem vegetal que apresenta propriedades anti-inflamatórias pouco exploradas em doenças não articulares. A Reína, seu metabólito ativo, tem demonstrado inibir a síntese e atividade de citocinas pró-inflamatórias como TNF-?, IL-6 e principalmente IL-1? através do constante bloqueio de NF B. Sendo a resistência à insulina e DM2 distúrbios metabólicos associados à obesidade e a um processo inflamatório crônico, e sabendo-se ainda que atualmente os recursos disponíveis para o tratamento de tais desordens apresentam limitada eficácia, acreditamos que os efeitos anti-inflamatórios da Diacereína reflitam positivamente sobre a sinalização insulínica, permitindo classificá-la como uma alternativa terapêutica em potencial para a redução ou atenuação da manifestação clínica da resistência à insulina e DM2 / Abstract: Obesity represents one of the main risk factors to the development of insulin resistance and type 2 diabetes. The common basis among these events is a chronic and systemic inflammatory process characterized by the activation of JNK and IKK?/NF B pathways and upregulated cytokine synthesis. The objective of this work was to evaluate the effects of diacerhein administration, an anti-inflammatory anthraquinone which is probably a JNK and IKK?/ NF?B pathways inhibitor, on the insulin sensitivity in diet-induced obese mice. Swiss mice were fed with conventional chow (C group) or a high-fat diet (DIO group). Later, DIO mice were randomly subdivided in DAR10 and DAR20 groups according to the doses of 10 or 20 mg/kg of diacerhein administered. Through the Western Blot analysis, we quantified the expression and phosphorylation of IR, IRS-1 and Akt and of inflammatory mediators which modulate the insulin signaling in a negative way (IKK?, JNK and iNOS). DAR 10 and DAR20 animals presented an expressive improvement in their ITT and GTT, fasting serum glucose and insulin levels and a significant increase in the phosphorylation levels of insulin induced IR, IRS-1 and Akt in liver, muscle and adipose tissue. There was also a relevant inhibition of IKK?, I?B? and JNK phosphorylation and iNOS expression in treated mice. Our results show that trough the reversion of the low-grade subclinical inflammation, diacerhein improved glucose tolerance and insulin sensitivity in DIO animals. It suggests potential beneficial effects of this drug in the treatment of insulin resistance and type 2 diabetes / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-08-30T17:41:02Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Júlia Martins Ulhôa Ferreira - 2016.pdf: 3148442 bytes, checksum: fc17d72cc71fdebb2a4ec57487e7cd21 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-31T13:05:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Júlia Martins Ulhôa Ferreira - 2016.pdf: 3148442 bytes, checksum: fc17d72cc71fdebb2a4ec57487e7cd21 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-31T13:05:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Júlia Martins Ulhôa Ferreira - 2016.pdf: 3148442 bytes, checksum: fc17d72cc71fdebb2a4ec57487e7cd21 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-08-16 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The study of biotransformation is important in the evaluation of safety and efficacy and for developing of new drug candidates. The "microbial models of mammalian metabolism", in which microbial biotransformation is used for the purpose of predict and obtaining human metabolites, is an alternative method to the use of animals for this study. Several advantages such as lower cost, a greater quantity and variety of derivatives produced, using mild conditions of reaction and decreasing the use of toxic volatile organic solvents are observed. The aim of this study was to produce derivatives of diacerein (1,8-diacetoxy-3-carboxyanthraquinone) by biotransformation using filamentous fungi and to evaluate the cytotoxicity of the main derivatives obtained given the resurgence of interest in this class of compounds. The diacerein is an anthraquinone with a wide range of biological activities, like as anti-osteoarthritis, analgesic, anti-inflammatory, antipyretic, prevention of vascular disease, insulin resistance treatment, anticancer. Analytical methodologies have been developed for monitoring the production of derivatives by thin layer chromatography and high-performance liquid chromatography (HPLC). After screening with seventeen fungal strains, Aspergillus ochraceus ATCC 1009 and Cunninghamella echinulata ATCC 9245 were selected for incubation in semipreparative scale. Of these incubations rhein (the main human metabolite) was obtained, which was characterized using the techniques Nuclear Magnetic Resonance (NMR) 1H e 13C, High Resolution Mass Spectrometry (MS), spectrometry in the UV region and analysed by HPLC. Another derivative was obtained by incubation with Aspergillus ochraceus ATCC 1009 and characterized by MS and analyzed by HPLC being, possibly, glycosylated diacerein. The influence of the addition of cytochrome P450 inhibitor in the production of metabolites was performed and inhibited the production of rhein about 41%, which may indicate the involvement of CYP1A1 and CYP1A2 in the deacetylation reaction. The cytotoxic potential of diacerein and rhein was evaluated by the tetrazolium reduction method (MTT) assay using murine fibroblast cells 3T3 and tumor cell line B16F10 (melanoma). Both the rhein, as diacerein, have demonstrated cytotoxic potential against B16F10 cells. / O estudo da biotransformação é de fundamental importância na avaliação da segurança e eficácia e para o desenvolvimento de novos candidatos a fármacos. O “Modelo microbiano do metabolismo animal”, no qual a biotransformação microbiana é utilizada com a finalidade de prever e obter metabólitos humanos, representa um método alternativo ao uso de animais para esse estudo, uma vez que são observadas diversas vantagens como menor custo, maior quantidade e variedade de derivados produzidos, utilização de condições brandas de reação e redução da utilização de solventes orgânicos voláteis tóxicos. O objetivo deste estudo foi produzir derivados da diacereína (1,8-diacetoxi-3-carboxiantraquinona) por biotransformação, utilizando fungos filamentosos e avaliar a citotoxicidade dos principais derivados obtidos, em função do ressurgimento do interesse desta classe de compostos. A diacereína é uma antraquinona com ampla gama de atividades biológicas - antiosteoartrósica, analgésica, anti-inflamatória, antipirética, prevenção de doenças vasculares, tratamento de resistência à insulina, anticâncer. Metodologias analíticas foram desenvolvidas para o monitoramento da produção dos derivados por cromatografia em camada delgada e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Após triagem com dezessete cepas fúngicas, Aspergillus ochraceus ATCC 1009 e Cunninghamella echinulata ATCC 9245 foram selecionadas para incubações em escala semipreparativa. Dessas incubações obteve-se reína (o principal metabólito humano), a qual foi caracterizada utilizando as técnicas Ressonância Magnética Nuclear de 1H e 13C, Espectrometria de Massas de Alta Resolução (EM), Espectrometria na região do ultravioleta/visível e analisada por CLAE. Outro derivado foi obtido da incubação com Aspergillus ochraceus ATCC 1009 e caracterizado por EM e analisado em CLAE, sendo, possivelmente, a diacereína glicosilada. A influência da adição de inibidor do citocromo P450 na produção dos metabólitos foi realizada e inibiu a produção de reína em cerca de 41%, o que pode indicar o envolvimento do CYP1A1 e CYP1A2 na reação de desacetilação.O potencial citotóxico da diacereína e da reína foi avaliado pelo método de redução do tetrazólio (MTT) utilizando células de fibroblasto murino 3T3 e da linhagem tumoral B16F10 (melanoma). Tanto a reína, quanto a diacereína, demonstraram potencial citotóxico contra células B16F10.

Orientador: Ricardo de Lima Zollner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T20:34:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Malaguti_Carina_M.pdf: 3081251 bytes, checksum: 464b9eb4c3ea569832e54a9ac80854a6 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O camundongo NOD é utilizado como modelo experimental por desenvolver diabetes mellitus tipo 1 (DM-1) espontâneo similar ao diabetes mellitus humano resultando na destruição das ilhotas, orquestrada pelos linfócitos T que induzem a liberação de citocinas, entre elas a IL-1, promovendo o processo inflamatório. A diacereína possui propriedades antiinflamatórias, inibindo IL-1. Entretanto, os mecanismos envolvidos na modulação imunológica ainda estão incompletamente compreendidos. No presente estudo, soro, pâncreas, ilhotas e células mononucleares esplênicas de animais tratados com diferentes doses (5, 10 e 50mg/kg/dia) de diacereína e o grupo controle o qual recebeu solução salina, foram isolados para investigar a expressão de IL-1ß, IFN-?, IL-12 e TNF-a e a relação com o início do diabetes, aspectos morfológicos e a dose-dependência da diacereína. Os resultados mostraram o aumento do RNAm de células esplênicas e ilhotas e a diminuição da concentração no soro de IL-1 em 10mg/kg/dia de diacereína, comparado com os outros grupos e aumento da concentração de IFN-? no soro do grupo de 50mg/kg/dia. Esses resultados sugerem que a diacereína interfere na instalação do diabetes e a freqüência, pela modulação de citocinas pró-inflamatórias como IL-1ß, IFN-?, IL-12 e TNF-a. Além disso, os dados sugerem regulação pós-transcricional de IL-1ß pela diacereína / Abstract: The NOD mice is used as a experimental model of spontaneously develop type1 diabetes mellitus (DM1) similar to human disease resulting in the destruction of the islet, orchestrated by T lymphocytes that induce a cytokines release, among then the IL-1, promoting inflammatory process. Diacerhein has antiinflammatory properties, inhibiting IL-1. However, the mechanisms involved in immune modulation are still incompletely understood. In the present study, serum, pancreas islets and spleen mononuclear cells from animals treated by different doses (5, 10 and 50mg/kg/day) and the group control which received solution saline, were isolated to investigate the IL-1ß, IFN-?, IL-12 and TNF-a expression and relationship with diabetes onset, morphological aspects and diacerein dose dependence. The results demonstrate upregulation of mRNA spleen cells and islets and downregulation of serum concentration of IL-1 in 10mg/kg/day diacerein treated group compared with others groups and increase of IFN-? serum concentration for 50 mg/kg/day group. These results suggest that the diacerhein interfere with the diabetes onset and frequency by modulation of pro-inflammatory cytokines as IL-1ß, TNF-a, IFN -? and IL- 12. Furthermore, the data suggest a post-transcriptional downregulation for IL-1ß by diacerhein / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica