Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:10Z : No. of bitstreams: 1 000829007.pdf: 1337174 bytes, checksum: 048435f654d48a3db75d0e6b50eb566f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Esta pessoa avaliou o desempenho de um sistema que combinou os processos anaeróbio e aeróbio para o tratamento de esgoto sanitário de baixa carga orgânica, utilizando uma nova configuração de reator compartilhamento anaeróbio/aeróbio, operado sob diferentes Tempos de Detenção Hidráulica (TDHA). A combinação dos processos anaeróbio e aeróbio visa aproveitar as vantagens de cada um, minimizando possíveis aspectos negativos, já a configuração em compartilhamento visa à implantação do sistema em pequenas áreas urbanas e rurais. Foi utilizado um reator compartimentado construído com tubulação de Policloreto de vinila (PVC), composto por quatro câmaras, sendo três anaeróbias e uma aeróbia, sendo que a esta última (câmara aeróbia) foi adicionada uma camada constituída por aneis de bambu, além do fornecimento de ar por meio de um compressor e difusores de ar microporosos. O desempenho do sistema foi avaliado em quatro diferentes TDHs (33; 22; 16,5 e 8,25 horas para o sistema completo), aqui caracaterizado como fases, por meio de análises físico-químicas, bacteriológicas e microbiológicas. A eficiência média de remoção de matéria orgânica em temos de Demanda Química de Oxigênio chegou a 77% e a maior eficiência de remoção foi obtida com TDH de 22 horas (79%). Em termos de Demanda Bioquímica de Oxigênio, a eficiência média de remoção foi de 70%. A eficiência de remoção de Sólidos em Suspensão esteve em torno de 90%. o reator avaliado apresentou estabilidade operacional, alta remoção de matéria orgânica, sólidos em suspensão e com relação à remoção de Nitrogênio, o RCAA, não atingiu os padrões exigidos pela Legislação Federal no que diz respeito à remoção de N-Amoniacal, porém as baixas concentrações de Nitrato e Nitrito ocorridas na ultima fase de monitoramento, podem inferir a possibilidade de remoção de Nitrogênio pela desnitrificação, o que pode ser promissor na... / This research evaluated the performance of a system that combined anaerobic and aerobic processes, for the treatment of low strength sanitary sewage using a new configuration of anaerobic/aerobic baffled reactor, which operated under different hydraulic retention periods (HRP). The combination of the anaerobic/aerobic processes aimed to take the maximal advantages of each, minimizing the negative aspects, and the configuration through clambers aimed to built the system in small urban and rural areas. The baffled reactor was built using Polyvinyl Chloride (PVC) and it was composed by four chambers (three anaerobics and one aerobic). In the aerobic chamber was added a bamboo ring layer, with constant air supply, provided by an air compressor and diffuser. The system's performance was evaluated under four different HRPs (33; 22; 16,5 and 8,25 hours for the complete system), divided in Phases. Regarding the organic matter average removal percentages, in terms of Chemical Oxygen Demand, the reactor reached a average removal of 77% and the highest removal percentage was obtained with a HRP of 22 hours (79%). The Biochemical Oxignen Demand average percentage was 70% and the Total Suspended Solids was 90%. The reactor in question showed operation stability, effective organic matter and optimal solids removal. Regarding the Nitrogen removal, the reactor did not reached the standards required by the Federal Legislation. However the low Nitrate and Nitrite concentrations occurred in the last phase of monitoring, which may infer the possibility of nitrogen removal, in the ammonia form, through desnitrification. This may be promising to Ammonia Nitrogen removal if an extra anaerobic chamber is installed, after the aerobic chamber. Regarding the microorganism community evaluated through molecular biology techniques (PCR and DGGE), it was observed a big diversity settlement of the Bacteria Domain communities, having the inoculum a considerable influence...

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-23. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:29Z : No. of bitstreams: 1 000836886_20170327.pdf: 64217 bytes, checksum: 393504d20ec7ab99c209ce9343eb843a (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-31T12:19:17Z: 000836886_20170327.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-31T12:20:20Z : No. of bitstreams: 1 000836886.pdf: 1309134 bytes, checksum: c44c8eb5c08f968e0157c6ac0f5dcec8 (MD5) / Os rotavírus são os principais agentes causadores de diarreias em várias espécies animais e nos seres humanos, causando grandes prejuízos econômicos e de saúde pública. Uma característica marcante desse vírus é a grande diversidade genotípica das estirpes circulantes. Informações sobre genotipagem são imprescindíveis para estabelecer mecanismos de vigilância epidemiológica da infecção por rotavírus. O presente trabalho teve como objetivo discutir a epidemiologia de rotavírus na espécie bovina por meio de estudos desenvolvidos entre os anos 2006 e 2010, no Laboratório de Rotavirose da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias da Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (FCAV/Unesp). Foram obtidas 803 amostras de fezes de bezerros, na faixa etária de 1 a 90 dias, com e sem diarreia, de 48 rebanhos de gado bovino leiteiro e de corte localizados no Estado de São Paulo. As amostras foram caracterizadas com base nos testes de eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) e transcrição reversa seguida da reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). O teste de PAGE indicou animais positivos em 33,3% (16/48) dos rebanhos e 6,1% (49/803) das amostras analisadas. Nos rebanhos leiteiros foram detectados animais infectados por rotavírus nas diferentes faixas etárias de até 90 dias de idade, enquanto nos rebanhos de corte alta frequência (22,8%) de amostras positivas foi verificada em bezerros entre 1 e 15 dias (P<0,05). A análise do perfil do genoma no PAGE identificou sete eletroferótipos, característicos de rotavírus do grupo A, indicando grande diversidade genômica do rotavírus nos rebanhos estudados. A caracterização molecular dos genótipos G (VP7) e P (VP4) pela RT-PCR identificou o genótipo G6P[5] como o mais comum. Foram construídos mapas que analisaram a distribuição espacial dos rotavírus detectados. O trabalho de identificação do rotavírus é de grande valia, uma vez que... / Rotavirus is the major causative agent of diarrhea in several animal species and humans, causing large economic and public health damage. A striking feature of this virus is the great genotypic diversity of circulating strains. Genotyping information is essential to establish surveillance mechanisms of rotavirus infection. This study aimed to discuss the epidemiology of rotavirus in cattle through studies conducted between 2006 and 2010, the Rotavirus Disease Laboratory of the Faculty of Agriculture and Veterinary Sciences of the Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho (FCAV / UNESP), 803 samples of feces of calves were obtained, ranging in age from 1 to 90 days, with and without diarrhea, 48 herds of dairy and beef cattle in the State of São Paulo. The samples were characterized on the basis of electrophoresis tests on polyacrylamide gel (PAGE) and then reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The PAGE test indicated positive animals in 33.3% (16/48) of the herds and 6.1% (49/803) of the samples. In dairy herds infected animals were detected rotavirus in different age groups (P> 0.05), while in the high frequency cut herds (22.8%) of positive samples was observed in calves between 1 to 15 days (P <0,05). The genome profile analysis in PAGE identified seven eletropherotypes characteristic of rotavirus group A, indicating a high genomic diversity of rotavirus in the herds. The molecular characterization of genotype G (VP7) and P (VP4) by RT-PCR identified the genotype G6P [5] as the most common. Maps were constructed to analyze the spatial distribution of detected rotavirus. Rotavirus identification work is of great value, since it is evident that different genotypes agent is spread in São Paulo presenting different forms of production

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-25Bitstream added on 2014-11-10T11:58:06Z : No. of bitstreams: 1 000785316_20141117.pdf: 884586 bytes, checksum: d5644acb078ea4fce1cc8312c9760339 (MD5) / Neste trabalho de Dissertação, buscou-se avaliar e quantificar o teor de mercúrio presente em amostras de tecido hepático dos peixes jaraqui, tucunaré e filhote da área de influencia da AHE JIRAU - Bacia do rio Madeira, buscando definir um biomarcador proteico (metaloproteínas, metalotioneínas) para monitoramento deste elemento tóxico em peixes da região amazônica. Para realização desta pesquisa, utilizou-se técnicas de proteômica/metalômica: eletroforese bidimensional (2D-PAGE), espectrometria de massas, espectrometria de absorção atômica e bioinformática. Por espectrometria atômica foi possível analisar e quantificar o mercúrio presente nos spots proteicos com massa molar menor que 50 kDa, obtidos no fracionamento das proteínas por 2D-PAGE. As caracterizações das proteínas foram feitas por espectrometria de massas (ESI-MS), podendo assim, fazer uma correlação do mercúrio presente nos spots com as proteínas caracterizadas. Com esses resultados, podemos definir um perfil de biomarcador proteico para o mercúrio nas amostras estudadas. A seleção de spots para esse estudo foi baseada em trabalhos da literatura que afirmam a afinidade do mercúrio por proteínas de baixa massa molar e nas quantificações de mercúrio por espectrometria de absorção atômica em forno de grafite (GFAAS), já que nos pellets de massa molares maiores que 50 não foi detectado mercúrio. Nas determinações por GFAAS, somente spost proteicos com massa molar menor que 20 kDA apresentaram mercúrio na faixa de concentração de 11,30 a 83,40 mg g-1. Esses spots proteicos apresentaram mercúrio nas quantificações por espectrometria de absorção atômica. De um total de 24 spots caracterizados, foram identificadas por ESI-MS 13 proteínas que apresentaram características de biomarcadoras deste elemento nas amostras estudadas / In this dissertation work , we sought to evaluate and quantify the amount of mercury present in samples of fish jaraqui , tucunaré and filhote from the influence area of the AHE JIRAU - the Madeira basin , aiming to define a protein biomarker (metalloproteins, metallothionein) for monitoring this toxic metals in the environment. For this research, we used techniques of proteomics: two-dimensional electrophoresis (2D-PAGE), mass spectrometry. atomic absorption spectrometry and bioinformatics. With the atomic absorption analysis was possible to analize and quantify the mercury in protein spots obtained from the 2D-PAGE of protein and pellets of greater molar mass and smaller than 50 kDa. The characterization of the proteins were performed by mass spectrometry (ESI-MS), and thus being able to make a correlation between mercury in spots and proteins found in them. With these results, we can define a profile of protein biomarker for mercury in the applied samples. The selection of spots for this study was based on literature reports claiming affinity of mercury for proteins of low molecular weight and the measurements of mercury made by graphite furnace atomic absorption spectrometry (GFAAS), since the pellets with molar mass greater than 50 was not found mercury. Utilizing the GFASS requirements, the spots which their molecular mass were less than 20 kDa contained mercury concentration in the range of 11.30 to 88.40 mg g-1. Presented mercury in spots quantified by the atomic absorption spectrometry method. From 24 ESI-MS characterized spots, were identified 17 proteins, which may be used as biomarkers of this metal in the aquatic environment

A aplicação de métodos de tipificação baseados na caracterização fenotípica e genotípica em vários pontos da cadeia de produção de suínos pode ser uma importante ferramenta para identificar a principal fonte de contaminação por Salmonella sp. A partir disso, o trabalho propôs tipificar uma coleção de 97 amostras de Salmonella enterica subsp. enterica ser. Typhimurium (ST) isolada de suínos levados ao abate em três diferentes frigoríficos no Rio Grande do Sul, por meio de fagotipificação, hibridização com IS200, resistência a antimicrobianos, amplificação da região spvR, amplificação de sequências repetitivas (rep-PCR) e PFGE. Paralelamente, os isolados de ST foram avaliados frente a dois desinfetantes (amônia quaternária e iodofor) pela técnica da diluição em tubo. Os isolados foram classificados em 12 fagotipos distintos, sendo o DT177 o mais freqüentemente identificado. Houve o predomínio de um padrão único de hibridização com o IS200 e em apenas três isolados, a região spvR foi detectada. Um alto número de amostras resistentes à tetraciclina, sulfonamida e estreptomicina foi encontrado, sendo o perfil de resistência relacionado ao frigorífico de origem dos isolados. No rep-PCR, usando seqüências iniciadoras para REP e ERIC, um único padrão de bandas foi gerado entre os isolados de ST. A análise por PFGE mostrou doze diferentes padrões de bandas. Sessenta e quatro isolados apresentaram um padrão idêntico no PFGE. Todas amostras foram inibidas pelo composto quaternário de amônio, na concentração recomendada pelo fabricante e numa concentração inferior à indicada. Frente ao iodofor, quatro amostras mostraram-se resistentes na concentração indicada e 59 na sub-concentração. A combinação da fagotipificação e do perfil de PFGE permitiu alcançar uma melhor discriminação das amostras, sendo essas técnicas consideradas as mais adequadas. Por outro lado, a presença de linhagens clonais parecem estar presentes na região, indicando possíveis pontos comuns de infecção.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2001-01-16Bitstream added on 2014-06-13T19:15:42Z : No. of bitstreams: 1 toledo_egh_me_jabo.pdf: 1480955 bytes, checksum: 264147d52e4fdcb0c91216e8ebe11eca (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Para este estudo foram avaliados 20 cães adultos sadios (10 machos e 10 fêmeas) e 24 cães adultos (16 machos e 8 fêmeas) com insuficiência renal crônica (IRC), com o objetivo de estudar a proteinúria. Foram empregadas técnicas para determinação quantitativa de proteína da urina e para a separação de suas frações por meio de SDS-PAGE. As quantidades de proteínas presentes na urina de cães sadios foram pequenas, mas o estudo dos perfis eletroforéticos mostrou haver diferenças entre machos e fêmeas. Apesar da ampla variação das concentrações de proteínas entre os animais, o grupo dos portadores de IRC apresentou proteinúria intensa. Os resultados dos portadores de IRC foram agrupados de acordo com o sexo ou em função do tipo de lesão renal predominante, para comparação dos eletroforetogramas. As análises revelaram que os perfis eletroforéticos seguem um padrão para os machos e outro pra as fêmeas. Ainda, o padrão o perfil eletroforético observado quando há predomínio de lesões glomerulares difere do observado quando há predomínio de lesões túbulo-intersticiais. / This trial was conducted in 20 adult health dogs (10 male and 10 female) and in 24 adult dogs (16 male and 8 female) in chronic renal failure (CRF), in order to study urinary protein loss. Determination of total urinary proteins and their separation with SDS-PAGE were employed. The results show that CRF dogs had higher proteinuria when compared to controls and the amount of detected protein had large difference among them. In the CRF there are different patterns of protein bands occurrence and distribution according to the patient sex and predominant renal lesion. The difference between protein bands occurrence of male and female already exists in normal dogs.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-18Bitstream added on 2014-06-13T19:57:07Z : No. of bitstreams: 1 rubio_cp_me_botfmvz_parcial.pdf: 62590 bytes, checksum: d83e52a1f7aaa2a5fc9c2056d081a165 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-01-16T10:37:54Z: rubio_cp_me_botfmvz_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-01-16T10:38:37Z : No. of bitstreams: 1 000722766.pdf: 568952 bytes, checksum: 5adf12490067db9f7c01ab0964cfc64f (MD5) / Trinta cadelas foram submetidas à ovariossalpingohisterectomia por duas técnicas distintas: a convencional, por laparotomia com uso de fio de náilon (G2) e a minimamente invasiva, com uso de abraçadeiras de náilon para ligadura dos pedículos ovarianos e corpo uterino (G1). Amostras de sangue foram obtidas em quatro momentos: pré-operatório (T1), 24 horas (T2), 48 horas (T3) e sete dias (T4) após os procedimentos cirúrgicos. Objetivou-se avaliar e comparar o leucograma e as concentrações séricas das proteínas totais e suas frações de cadelas submetidas às duas técnicas cirúrgicas, utilizando-se eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Notou-se aumento significativo (p<0,001) da contagem total de leucócitos e do número de neutrófilos segmentados no T2 dos dois grupos em relação ao T1. Verificou-se aumento significativo (p<0,05) da concentração de ceruloplasmina no T3 do G1 em comparação ao T1 e diminuição significativa (p<0,05) da α1-antitripsina nos momentos T3 e T4 em relação ao T1 no G1. As concentrações séricas de uma proteína de 23kDa não-identificada nominalmente foram significativamente menores (p<0,05) no T3 do G2, em relação ao T1, e foram observadas concentrações significativamente aumentadas (p<0,05) da proteína sérica total no T2 em relação ao T1 no G2. As concentrações da ceruloplasmina no T2 e da haptoglobina nos momentos T2, T3 e T4 em relação ao T1 foram significativamente superiores (p<0,05) no G1 quando comparadas ao G2. Estes resultados mostraram que o emprego da abraçadeira de náilon promoveu uma maior resposta inflamatória quando comparada ao fio de náilon para ligadura dos pedículos ovarianos e corpo uterino em cadelas nos momentos avaliados / Thirty healthy adult female dogs were submitted to ovariosalpingohysterectomy by two different techniques: laparotomy, with the use of nylon sutures (G2) and minimal invasive, with the use of nylon cable ties (G1) for the ligature of ovarian pedicles and uterine stump. Blood samples were obtained in four different moments: before surgery (T1) and 24 hours (T2), 48 hours (T3) and 07 days (T4) after surgery, to evaluate and compare the leucogram and total serum protein and its fractions concentrations of the female dogs submitted to two surgical procedures, using polyacrylamide gel electrophoresis by means of sodium dodecyl sulfate-containing (SDS-PAGE). There was a significant increase (p<0.001) in white blood cell count and neutrophils in the T2 in both groups when compared to T1. The ceruloplasmin concentration was significantly increased (p<0.05) in the T3 of G1 when compared to T1. There was a significant decrease (p<0.05) on α1-antitrypsin concentrations on T3 and T4 when compared to T1 of G1. The non identified protein of 23kDa concentrations were significantly decreased (p<0.05) in the T3 of G2 when compared to T1. The total serum protein concentrations were significantly increased (p<0.05) in the T2 of G2 when compared to T1. The ceruloplasmin and haptoglobin concentrations in the T2 and T2, T3 and T4, respectively, were significantly increased (p<0.05) when compared to G2. These results indicated that the use of the nylon cable ties made more intense inflammatory response when compared to use of the nylon suture for the ligature of ovarian pedicles and uterine stump in the females dogs on the moments evaluated

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-26Bitstream added on 2014-06-13T19:57:21Z : No. of bitstreams: 1 chierentin_l_me_arafcf_parcial_prot.pdf: 94153 bytes, checksum: b25ed8bc84653284002d5291e354c06e (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-03T11:42:27Z: chierentin_l_me_arafcf_parcial_prot.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-03T11:44:00Z : No. of bitstreams: 1 000712988_20150826.pdf: 94153 bytes, checksum: b25ed8bc84653284002d5291e354c06e (MD5) Bitstreams deleted on 2015-08-28T16:08:59Z: 000712988_20150826.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-28T16:10:01Z : No. of bitstreams: 1 000712988.pdf: 2194395 bytes, checksum: 9cd76df3505cbddc42ddb33fc0e7079a (MD5) / O norfloxacino é uma fluoroquinolona de segunda geração derivada do ácido nalidíxico. Como as demais fluoroquinolonas, o norfloxacino atua por inibição da DNA-girase bacteriana, complexo enzimático que participa do processo de replicação do DNA bacteriano e também inibe a topoisomerase tipo IV do DNA bacteriano. Esta fluoroquinolona é utilizada para o tratamento de infecções do trato urinário causadas por bactérias Gram-negativas, incluindo Enterobacteriaceae e espécies Pseudomonas-resistentes e também alguns micro-organismos Gram-positivos. A literatura apresenta alguns métodos de análise para norfloxacino em fluidos biológicos, águas subterrâneas, alimentos e formas farmacêuticas. Com base nestas considerações, este trabalho objetiva desenvolver ensaios para análise qualitativa de norfloxacino utilizando espectrofotometria na região do visível, análise térmica, cromatografia em camada delgada, cromatografia líquida de alta eficiência, eletroforese capilar e outros métodos gerais para caracterização da SQR e comprimidos de norfloxacino. Métodos analíticos foram desenvolvidos e validados para a quantificação deste fármaco como: (1) espectrofotometria na região do visível, comprimento de onda de detecção 520 nm, com faixa linear de 95,0 a 120,0 μg/mL utilizando ácido cloranílico 0,1% como reagente, com exatidão de 102,48%; (2) cromatografia líquida de alta eficiência, com comprimento de onda de detecção de 277 nm, fase móvel composta por solução aquosa de ácido acético 5% e metanol (80:20 v/v), obtendo-se tempo de retenção médio de 5,7 minutos e capacidade de separação de produtos de degradação. A faixa linear avaliada foi de 10,0 a 30,0 μg/mL, com exatidão de 103,96%; (3) Eletroforese Capilar, validado utilizando-se como eletrólito, tampão de tetraborato de sódio 30 mM a pH 9,0 e capilar... / Norfloxacin is a second-generation fluoroquinolone derivate of nalidixic acid. Like other fluoroquinolones, norfloxacin acts by inhibiting DNA gyrase, the enzyme complex that participates in the process of bacterial DNA replication and also inhibit topoisomerase IV type of bacterial DNA. This fluoroquinolone is used in treatment of urinary tract infections caused by Gram-negative bacteria, including Enterobacteriaceae, and Pseudomonas-resistant species and also by Gram-negative microorganisms. The literature describes some methods to analyses norfloxacin in biologic fluids, groundwater, foods and pharmaceutical forms. Based on these considerations, this work aims to develop assays for qualitative analysis of norfloxacin using visible spectrophotometry, thermal analysis, thin-layer chromatography, high performance liquid chromatography, capillary electrophoresis and other general methods for the characterization of API and tablets of norfloxacin. Analytical methods were developed and validated for the quantification of this drug as: (1) visible spectrophotometry, detection wavelength 520 nm with a linear range from 95.0 to 120.0 μg/mL using chloranilic acid 0.1% as a reagent, with an accuracy of 102.48%; (2) high performance liquid chromatography with detection wavelength of 277 nm, mobile phase composed of aqueous 5% acetic acid and methanol (80:20 v/v) obtaining an average retention time of 5.7 minutes and separation capability degradation products. The linear range was measured from 10.0 to 30.0 μg/mL, with accuracy (103.96%); (3) Capillary electrophoresis was validated using a solution of 30 mM sodium tetraborate buffer pH 9.0 as the electrolyte and a fused silica capillary of 48.5 cm, with 40.0 cm effective, and 75 μm of diameter. The linear range was evaluated from... (Complete abstract click electronic access below)

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study aimed to evaluate the electrophoretic pattern of serum proteins in Trypanosoma evansi-infected cats during different periods of infection. Thirteen adult female non-breeding Felis catus were separated into two groups. Cats from the infected group (n=7) were intraperitoneally inoculated with a strain of T. evansi, and cats from the control group (n=6) received a physiological solution. Blood samples were collected at days 0, 7, 21, and 35 for evaluation total protein and protein fractious by electrophoresis. Albumin (P < 0.01), alpha-2 globulin and gamma globulin (P < 0.05) concentrations were statistically different from the seventh day post-inoculation. Beta globulin levels were increased from day 21 (P < 0.05). Alpha-1 globulin fraction did not statistically differ. These results indicate that the infection by T. evansi in cats alters the serum protein electrophoretic profile. Thus, the increase in γ-globulin fraction is a common finding in infection by T. evansi, caused mainly by increased IgM and IgG. However, the α2-globulin subfraction showed increase throughout the experimental period and, possibly, the proteins of this subfraction are directly involved in host defense against flagellate. Thereby, further studies is essentials to define the true role of each protein fraction in the control of infection. / O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil eletroforético das proteínas séricas de gatos experimentalmente infectados pelo Trypanosoma evansi, em diferentes períodos de infecção. Utilizaram-se 13 felinos (Felis catus) adultos, fêmeas e sem raça definida. Os gatos foram divididos em dois grupos homogêneos, sendo um o grupo controle (seis animais) e o outro o grupo infectado (sete animais). Os sete animais foram inoculados por via intraperitoneal, com um isolado de T. evansi. Nos outros seis animais, foi administrada pela mesma via solução fisiológica. Realizaram-se coletas de sangue nos dias 0, 7, 21 e 35 para avaliação das proteínas totais e fracionamento protéico através da técnica de eletroforese. Observou-se que os valores de albumina (p < 0,01), alfaglobulina 2 e gamaglogulinas (p < 0,05) diferiram significativamente a partir do sétimo dia de infecção e que as betaglobulinas (p < 0,05) apresentaram diferença estatística a partir do 21° dia. Não houve diferença estatística na fração alfaglobulina 1. Pode-se concluir que a infecção pelo T. evansi em gatos acarreta mudanças no perfil eletroforético das proteínas séricas. Assim, o aumento na fração γ-globulina é um achado frequente na infecção pelo T. evansi, causado principalmente pelo aumento da IgM e IgG. Contudo, a subfração α2-globulina apresentou aumento em todo o período experimental e , possivelmente, as proteínas dessa fração estejam diretamente envolvidas na defesa do hospedeiro contra o flagelado. Desse modo, é fundamental que novos estudos sejam realizados para definir o verdadeiro papel de cada proteína dessa fração no controle da infecção.

Submitted by Bruna Rodrigues (bruna92rodrigues@yahoo.com.br) on 2016-09-15T18:05:05Z No. of bitstreams: 1 TeseMSF.pdf: 7415366 bytes, checksum: 7d7fc64462037eda551e93c80b1c66ab (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-16T19:53:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseMSF.pdf: 7415366 bytes, checksum: 7d7fc64462037eda551e93c80b1c66ab (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-16T19:53:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseMSF.pdf: 7415366 bytes, checksum: 7d7fc64462037eda551e93c80b1c66ab (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-16T19:53:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseMSF.pdf: 7415366 bytes, checksum: 7d7fc64462037eda551e93c80b1c66ab (MD5) Previous issue date: 2015-09-24 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Lead (Pb) is a heavy metal widely distributed in the environment, but it does not have any physiological role in the body. Due to its widespread use in the industry, it provides direct contamination of occupationally exposed people and, indirectly, through pollutants for the general. Thus, Pb contamination has become a public health problem. Studies have linked adverse health effects at low levels of Pb in the blood, even at concentrations below 10μg/dL. The effects range from cognitive impairment in children and peripheral neuropathy in adults, but there is little knowledge about its effects in the liver. It has been reported that iron (Fe) has a protective effect that can help in reducing the absorption of Pb in the body. In this sense, the aim of this study was to evaluate the protein profile and morphology in the liver of rats intoxicated by lead acetate (Pb(C2H3O2)2) submitted simultaneously to supplementation with iron sulfate (FeSO4) at 20 mg/Kg body weight. For this, 36 weanling male rats were divided into 6 groups (n=6) and treated for 6 weeks. The control group received deionized water; the first experimental group received deionized water and a solution of FeSO4 every two days; two experimental groups received 100 mg/L Pb(C2H3O2)2 in the drinking water and one of them was supplemented with FeSO4 every two days; two groups received 400 mg/L Pb(C2H3O2)2 in the drinking water, and one of them was supplemented with FeSO4 every two days. After euthanasia, blood samples and liver were collected for the analysis of Pb concentration by Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry (ICP-MS). Also, liver samples were collected for proteomic analysis using two-dimensional electrophoresis associated with MS (2D-PAGE-MS) and histomorphological analysis. The concentration of Pb in the blood and liver showed a dose-response effect with a reduction in 40-50% Pb in the groups supplemented with Fe (not significant). Histomorphological changes were observed in all intoxicated groups. Proteomic analysis identified 247 proteins with altered expression in relation to the control group. It was observed a decrease in antioxidant enzymes such as superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase. The reduction of these enzymes leads to an increase of free radicals in the liver tissue and consequently to an in increase the levels of lipid peroxidation. The peroxidation affects the secretion of lipoproteins, mainly their release from the Golgi complex, which may have contributed to the changes observed in other proteins. The presence of Pb in some spots was confirmed by atomic absorption analysis, and this may have resulted in conformational changes that activate the protein degradation machinery. Based on the results, the present study highlights the deleterious role of Pb in the liver even at low dosage, and although Fe was associated with a reduced absorption of Pb, the results suggest that it should not be used as a prevention strategy to reduce the intoxication by Pb, since itself led to changes in the pattern of protein expression. / O chumbo (Pb) é um metal pesado amplamente distribuído em nosso meio, porém não possui papel fisiológico no organismo. Devido ao seu emprego em diversos setores industriais, proporciona contaminação direta de pessoas ocupacionalmente expostas e, indiretamente, na forma de poluentes à população geral. Por isso tornou-se um problema de saúde pública. Estudos correlacionam efeitos adversos à saúde com níveis baixos de Pb no sangue, até em concentrações abaixo de 10μg/dL. Seus efeitos vão desde o comprometimento cognitivo em crianças a neuropatia periférica em adultos, mas pouco se sabe sobre seus efeitos no fígado. Tem sido relatado que o ferro (Fe) tem um efeito protetor, que pode ajudar na diminuição da absorção do Pb pelo organismo. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil proteico e o aspecto morfológico no fígado de ratos intoxicados por acetato de chumbo (Pb(C2H3O2)2), submetidos simultaneamente à suplementação com sulfato ferroso (FeSO4) na dose de 20 mg/Kg de peso corporal. Para isso, 36 ratos machos recém-desmamados foram divididos em 6 grupos (n=6) e tratados por 6 semanas. O grupo controle recebeu água deionizada; o primeiro grupo experimental recebeu água deionizada e uma solução de FeSO4 a cada dois dias; dois grupos experimentais que receberam 100 mg/L de Pb(C2H3O2)2 na água de beber, sendo um deles suplementados com FeSO4 a cada dois dias; dois grupos que receberam a dose de 400 mg/L de Pb(C2H3O2)2 na água de beber, onde para um deles foi administrado simultaneamente FeSO4 a cada dois dias. Após a eutanásia, amostras de sangue e fígado foram coletadas para a análise de concentração de Pb por espectrometria de massas com plasma indutivamente acoplado (ICP-MS). Também foram coletadas amostras de fígados para análise proteômica por meio de Eletroforese bidimensional associada a espectrometria de massas (2D-PAGE-MS) e para análise histomorfológica. A concentração de Pb no sangue e fígado, apresentou um efeito dose-resposta com uma redução em torno 40-50% de Pb nos grupos suplementados com Fe (não significativo). Alterações histomorfológicas foram observadas em todos os grupos intoxicados. Pela da análise proteômica foram identificadas 247 proteínas com expressão alterada em relação ao grupo controle. Foi constatada a diminuição de enzimas antioxidantes como a superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase. A redução dessas enzimas leva ao aumento de radicais livres no tecido hepático, e consequentemente ao aumento nos níveis de peroxidação lipídica. A peroxidação prejudica a secreção de lipoproteínas, principalmente a liberação a partir do complexo de Golgi, o que pode ter contribuído para alterações observadas em outras proteínas. A presença de Pb em alguns spots foi confirmada através da análise por absorção atômica, e isso pode ter resultado em alterações conformacionais que ativam a maquinaria de degradação proteica. Com base nos resultados, o presente estudo reforça o papel deletério do Pb no tecido hepático, mesmo em baixa dosagem, e apesar de o Fe ter sido associado à redução da absorção de Pb, os resultados sugerem que não deve ser utilizado como estratégia de prevenção para reduzir a intoxicação pelo Pb, já que o mesmo também levou a alterações no padrão de expressão proteica.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-29Bitstream added on 2014-06-13T18:51:11Z : No. of bitstreams: 1 vieira_mc_me_jabo.pdf: 816589 bytes, checksum: 992bdbe14c30f516f59f33c1e0558c91 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O linfoma é o principal tumor hematopoiético no cão e é caracterizado pela proliferação de células originadas do tecido linfóide, histiócitos e seus precursores. Os animais com linfoma frequentemente apresentam alterações hematológicas e bioquímico-séricas, tais como anemia normocítica normocrômica não regenerativa, anemia hemolítica, hipercalcemia e gamopatia monoclonal. O objetivo desse estudo foi quantificar e qualificar as proteínas séricas totais e suas frações, em cães sadios e linfomatosos, sendo estes submetidos ao protocolo quimioterápico de Madison- Wisconsin. Após sinérese, centrifugação e obtenção das amostras de soro, de 10 cães sadios e 10 cães linfomatosos, as proteínas de fase aguda foram separadas por eletroforese em matriz de gel de poliacrilamida, e suas concentrações determinadas por densitometria computadorizada. Foram encontradas de 18 a 31 proteínas no fracionamento eletroforético, com pesos moleculares variando de 18 a 245 KD (kilodáltons). Os pesos moleculares obtidos foram: IgA, 170 KD; ceruloplasmina, 125 KD; transferrina, 85KD; albumina, 65 KD; 1-antitripsina, 60 KD; IgG (cadeia pesada), 50 KD; haptoglobina, 39 KD; 1-glicoproteína ácida, 37 KD; proteína nº 9, 33 KD; IgG (cadeia leve), 25 KD; e proteína nº 11, 23 KD. Os resultados mostraram que algumas proteínas de fase aguda se alteram no linfoma. A 1-antitripsina, 1-glicoproteína ácida, transferrina, IgG (cadeia pesada) e globulinas apresentaram diferenças significativas entre cães sadios e linfomatosos, no momento zero, antes da 1ª sessão de quimioterapia. Já nos cães linfomatosos, somente a concentração da proteína nº 9 (33KD) apresentou diferença significativa, durante o protocolo quimioterápico. / The lymphoma is the principal hematopoietic tumor in dogs and it is characterized by the proliferation of cells from lymphoid tissue, histiocytes and its precursors. Animals with lymphoma often showed changes in biochemical and hematological parameters of those animals such as non-regenerative normocromica normocytic anemia, hemolytic anemia, hypocalcemia and monoclonal gamopatia. The purpose of this study was quantify and qualify the serum total proteins and its fraction, in dogs healthy and with lymphoma, these under went the Madison-Wisconsin chemotherapy protocol. After centrifugation and fractioning of the serum samples, the acute phase proteins were separated by polyacrilamide gel electrophoresis, and their concentrations were determined by computer densitometry. Between eighteen and thirty proteins were separated by eletrophoresis, with molecular weights ranged from 18 to 245 KD (kilodaltons). The molecular weights of the proteins more found were: IgA, 170 KD; ceruloplasmin, 125 KD; transferrin, 85 KD; albumin, 65 KD; 1-antitripsin, 60 KD; IgG (weighty chain), 50 KD; haptoglobin, 39 KD; 1-acid glycoprotein, 37 KD; protein nº 9, 33 KD; IgG (light chain), 25 KD and protein nº 11, 23 KD. The results showed that some acute phase proteins changed in lymphoma. The 1-antitripsina, 1-acid glycoprotein, transferring, IgG (weighty chain) and globulins, showed significantly diferences between healthy and lymphoma dogs, in time zero, before 1ª chemotherapy session. In dogs with lymphoma, only protein nº 9 (33KD) showed significantly diference, during chemotherapy protocol.