Orientador: Olga Maria M. de Faria Oliveira / Coorientador: José Carlos Rebuglio Vellosa / Banca: Maria José Queiroz de Freitas Alves / Banca: Mariza Pires de Melo / Resumo: Nos últimos anos houve uma explosão no interesse dos consumidores pelos alimentos denominados alimentos nutraceuticoss. Estudos epidemiológicos têm sugerido que esses alimentos tem um importante papel na prevenção de doenças crônicas. Acredita-se que os antioxidantes, principalmente os compostos fenólicos, carotenóides, tocoferóis, naturalmente encontrados em frutas, vegetais e grãos, são os responsáveis por promover o efeito quimioprotetor contra o estresse oxidativo. As frutas são um dos importantes componentes de uma dieta saudável. Seu consumo em quantidades adequadas pode reduzir o risco de doenças cardiovasculares e alguns tipos de câncer. Esse alimento é importante porque é uma fonte rica de micronutrientes, fibras e outros componentes com propriedades funcionais. Ademais, é um alimento de baixa densidade energética, isto é, com poucas calorias em relação ao volume da alimentação consumida, o que favorece a manutenção do peso corporal saudável. Dentro desse cenário, o Brasil ostenta uma grande fonte de espécies tropicais e exóticas ainda pouco exploradas, as quais podem ter um potencial agroindustrial, representando uma excelente perspectiva de oportunidade econômica. Considerando os benefícios do consumo de frutas e o sua importância mercadológica, este trabalho procura estudar a atividade antioxidante de diferentes extratos de frutas, tropicais e exóticas, para avaliar o potencial antioxidante destes extratos, visando aplicações nos setores farmacêuticos, alimentícios e de cosméticos. Assim escolheu-se avaliar a atividade antioxidante frente a diferentes espécies reativas de oxigênio e espécies reativas de nitrogênio, bem como aplicá-los a um modelo que simula a lipoperoxidação lipídica. Determinando os respectivos valores de IC50 para os testes utilizados / Abstract: In recent years have seen an explosion in consumer interest in foods called nutraceutical foods. Epidemiological studies have suggested that these foods have an important role in preventing chronic diseases. It is believed that antioxidants, especially phenolic compounds, carotenoids, tocopherols naturally found in fruits, vegetables and grains, are responsible for promoting chemistryprotect effect against oxidative stress. Fruits are one of the important components of a healthy diet. Its consumption in appropriate amounts can reduce the risk of cardiovascular disease and some cancers. This is important because food is a rich source of micronutrients, fiber and other components with functional properties. Moreover, food is a low energy density, that is, low in calories compared to the volume of feed consumed, which contributes to the maintenance of healthy body weight. Within this situation, Brazil have a great source of tropical and exotic yet unexplored, which may have a potential agrobusiness, representing an excellent economic opportunity. Considering perspective the benefits of consuming fruits and marketing its importance, this work study the antioxidant activity of different extracts of fruits, exotic and tropical to evaluate the antioxidant potential of these extracts, order at applications in pharmaceutical, food and cosmetics. So we chose to evaluate the antioxidant activity against different reactive oxygen species and reactive nitrogen species, as well as apply them to a model that simulates the lipoperoxidation. Determining their IC50 values for the tests / Mestre

Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-15Bitstream added on 2015-03-03T12:07:02Z : No. of bitstreams: 1 000795683_20151231.pdf: 660638 bytes, checksum: 33a231012881cb58e68d6113f674d71d (MD5) Bitstreams deleted on 2016-01-04T10:26:42Z: 000795683_20151231.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-04T10:28:34Z : No. of bitstreams: 1 000795683.pdf: 3344340 bytes, checksum: 89e7663b31d6e1b03d095f8827d9cbf1 (MD5) / Este trabalho teve como objetivo o estudo químico, determinação dos teores de fenóis e flavonoides totais e a avaliação das atividades antirradicalar e mutagênica dos extratos hidroalcoólicos (70% de etanol, v/v) de folhas de Pouteria torta e Pouteria ramiflora (Sapotaceae). O estudo por HPLC-DAD, HPLC-ESI-IT-MS2, HPLC-ESI-QTRAP-MS2 e ESI-IT-MS/MS possibilitou a identificação de treze substâncias derivadas da miricetina, quercetina, apigenina além do ácido gálico e do ácido quinico. Com a técnica HPLC-DAD foi possível quantificar as substâncias miricetina-3-O-?-D-galactopiranosídeo, miricetina-3-O-?-L-arabinopiranosídeo e miricetina-3-O-?-L-rhamnopiranosídeo nos extratos hidroalcoólicos das duas espécies. Os teores de miricetina-3-O-?-D-galactopiranosídeo encontrados foram de 2,53 e 13,55 mg.g-1 de extrato para P. torta e P. ramiflora, respectivamente. Para miricetina-3-O-?-L-arabinopiranosídeo foi encontrado 1,33 mg.g-1 de extrato de P. torta. Os valores encontrados para miricetina-3-O-?-L-rhamnopiranosídeo foram de 2,20 e 9,61 mg.g-1 de extrato para P. torta e P. ramiflora, respectivamente. O extrato hidroalcoólico de P. torta apresentou 11,66 mg.g-1 de extrato de fenóis totais e 16,11 mg.g-1 de extrato de flavonoides totais, enquanto a infusão das folhas apresentou 90,83 mg.g-1 de infuso de fenóis totais e 5,56 mg.g-1 de infuso de flavonoides totais. Pouteria ramiflora apresentou 125,87 mg.g-1 de extrato de fenóis totais e 48,82 mg.g-1 de extrato de flavonoides totais. O teor de fenóis totais na infusão folhas de P. ramiflora foi de 55,85 mg.g-1 de infuso, enquanto o teor de flavonoides totais foi de 27,84 mg.g-1 de infuso. A atividade antirradicalar utilizando DPPH indicou IC50 de 3,83 e 0,18 mg.mL-1 para os extratos hidroalcoólicos de P. torta e P. ramiflora, respectivamente, quando comparados aos valores encontrados para os padrões de quercetina (0,03 mg.mL-1) ... / This work aimed the chemical study, and the determination of total phenols and flavonoids amounts and the evaluation of the antiradical and mutagenic activities of hydroethanolic extracts (70% ethanol, v / v) of Pouteria torta and Pouteria ramiflora (Sapotaceae). The study by HPLC-DAD, HPLC-ESI-IT-MS/MS, HPLC-ESI-QTRAP-MS/MS and ESI-IT-MS/MS allowed the identification of thirteen substances derived from myricetin, quercetin, apigenin, and, in addition, gallic acid and quinic acid. It was possible to quantify substances by HPLC-DAD technique: myricetin-3-O-?-D-galactopyranoside, myricetin-3-O-?-L-arabinopyranoside and myricetin-3-O-?-L-rhamnopyranoside (M-3-O-RHA) in the hydroethanolic extracts of P. torta and P. ramiflora leaves. The amounts of M-3-O-GAL found were 2,53 and 13,55 mg.g-1 of extract for P. torta and P. ramiflora respectively. For M-3-O-ARA was found 1,33 mg.g-1 of P. torta extract. The values found for M-3-O-RHA were 2,20 and 9,61 mg.g-1 of extract for P. torta and P. ramiflora respectively. The hydroalcoholic extract of P. torta presented 11,66 mg.g-1 of extract for total phenols and 16,11 mg.g-1 of extract for total flavonoids, while the infusion of the leaves showed 90,83 mg.g-1 of infusion for total phenols and 5,56 mg.g-1 of infusion for total flavonoids. Pouteria ramiflora showed 125,87 mg.g-1 of extract for total phenols and 48,82 mg.g-1 of extract for total flavonoids. The total phenolic content in leaves infusion of P. ramiflora was 55,85 mg.g-1, whereas the content of total flavonoids was 27,84 mg.g-1 of infusion. The antiradical activity using DPPH showed IC50 of 3,83 and 0,18 mg.mL-1 for the hydroethanolics extracts of P. torta and P. ramiflora, respectively, when compared to the values found for the standards of quercetin (0,03 mg .mL-1) and gallic acid (0,01 mg.mL-1). For infusions the values were 0,53 and 2,62 mg.mL-1 for P. torta and P. ramiflora respectively. ...

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Obtiene el ácido gálico mediante el aislamiento de hongos nativos a partir de las vainas de tara procedente de los departamentos de Ayacucho, Huaraz y Lima, durante 7 días de evaluación mediante el Método de Cámara Húmeda. Consiguiendo, un total de 34 cepas fúngicas aisladas de las vainas de tara, de las cuales el 76.47% lo representa las cepas del género Aspergillus y el 23.53% del género Penicillium. Del total de cepas fúngicas aisladas se seleccionaron aquellas que presentaron mayor capacidad en el uso de ácido tánico, siendo para ello previamente sembradas en Agar Czapeks Dox suplementado con 1% de ácido tánico a nivel in vitro, evaluando a lo largo de 5 días el radio de crecimiento. Siendo así seleccionadas las cepas de Aspergillus aisladas de las vainas de tara procedentes del departamento de Huaraz identificadas como: HRTAS-02 y HRTAS-09 con radio de crecimiento de 3.5 cm. y 3.25 cm. respectivamente, al primer día de evaluación. Así mismo, se realizó la caracterización física y química del polvo de vaina de tara procedente del departamento de Ayacucho debido a que presenta el mayor contenido de taninos, lo cual se demuestra mediante el método titrimétrico obteniendo el 65.68% de taninos. Los resultados obtenidos se compararon con el método de hidrolisis química ácida en la cual se obtuvo una concentración de 73.01 mg/l de ácido gálico. Siendo el 73.34% la conversión de los taninos presentes en el polvo de vaina de tara a ácido gálico obtenido a partir del método de fermentación enzimática. / Tesis

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T03:56:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 298139.pdf: 2310074 bytes, checksum: 6da2debdc48462608178c1de958dfa81 (MD5) / As terapias farmacológicas utilizadas nos casos avançados de melanoma metastático maligno parecem ser incapazes de curar ou melhorar a sobrevida dos pacientes, resultando numa das neoplasias mais refratárias ao tratamento. As respostas à quimioterapia são associadas a graus significativos de toxicidade e efeitos colaterais que podem resultar em interrupção do tratamento antes da possibilidade de erradicação do câncer. Este trabalho descreve a análise dos galatos de octila (G8) e de dodecila (G12) como agentes antitumorais para o tratamento do melanoma, com ênfase na elucidação do mecanismo de ação e na investigação da toxicidade in vitro e in vivo, assim como da atividade antimelanoma in vivo, utilizando a encapsulação dos galatos em nanopartículas lipídicas sólidas como estratégia para melhorar o potencial destes compostos como novos agentes antitumorais. A primeira parte deste estudo foi a investigação do mecanismo de citotoxicidade do G8 e do G12 sobre células de linhagem de melanoma murino B16F10 e de linhagens não tumorais renais. Para isso, vários métodos de avaliação da viabilidade celular foram usados visando determinar o alvo celular para a ação citotóxica dos mesmos. Os mecanismos relacionados à apoptose foram examinados por meio da avaliação da atividade da caspase-3, do estresse oxidativo, do potencial mitocondrial e da expressão de proteínas anti ou pró-apoptóticas. Ao comparar os diferentes métodos de avaliação da viabilidade celular, os galatos apresentaram uma maior citotoxicidade no ensaio indicativo da atividade lisossômica e da integridade da membrana plasmática em comparação com os relacionados às atividades mitocondrial e ribossômica. Promoveram, ainda, estresse oxidativo, despolarização da membrana mitocondrial, aumento na atividade de caspase-3 e aumento da expressão de proteínas pró-apoptóticas (Bax) e diminuição das anti-apoptóticas (Bcl-2). Entre as linhagens tumoral e não tumorais foi evidenciada maior citotoxicidade dos galatos para a primeira. A segunda parte do estudo foi a avaliação da toxicidade e atividade antimelanoma do G8 na forma livre ou encasulado em nanopartículas lipídicas sólidas, usando modelos in vivo do melanoma murino. As nanopartículas brancas (sem G8) ou contendo o G8 encapsulado foram produzidas e caracterizadas quanto às características físico-químicas. Nos modelos estudados, a encapsulação do G8 na nanopartícula lipídica não aumentou a sua atividade antimelanoma, entretanto, os efeitos colaterais foram amenizados. A encapsulação do G8 na nanopartícula resultou em uma diminuição da toxicidade geral, hepática e renal induzida pelo G8 na forma livre, porém, preservando sua eficácia em inibir o desenvolvimento de metástases pulmonares. Os estudos sobre o mecanismo de ação antimelanoma do G8 in vivo mostraram a indução de estresse oxidativo e a ativação de caspase-3 nos pulmões. Em adição, o composto diminuiu o conteúdo de melanina e aumentou a lipoperoxidação no tumor subcutâneo. Assim, os resultados in vitro indicam que a morte celular por apoptose induzida pelo G8 e G12 em células B16F10 apresenta maior seletividade para as células tumorais e envolve danos à membrana lipídica, além de disfunção mitocondrial e lisossomal, que foram acompanhadas por alterações na expressão e atividade de proteínas apoptóticas e parece ser desencadeada por estresse oxidativo celular. Os resultados in vivo revelam que a encapsulação na nanopartícula lipídica reduziu a toxicidade do G8, sem resultar, ao menos no modelo de metástase, em alteração na ação antitumoral do mesmo, a qual parece estar relacionada à indução de estresse oxidativo, ativação de caspase-3 pulmonar e inibição da concentração de melanina no tumor subcutâneo.

Tese (doutorado) - Univesidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-graduação em Farmácia, Florianópolis, 2009 / Made available in DSpace on 2012-10-24T11:25:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 273011.pdf: 26066020 bytes, checksum: 14d63ff40b93cf325940b520c4fb24dc (MD5) / O câncer corresponde a um grupo de várias doenças que têm em comum a proliferação descontrolada de células anormais e que pode ocorrer em qualquer local do organismo. A taxa de mortalidade associada ao câncer vem crescendo nos últimos anos em função do envelhecimento populacional, do processo de industrialização e das mudanças de hábitos de vida. Atualmente o câncer é considerado um problema de saúde pública e esforços vem sendo realizados para a prevenção e cura de pacientes acometidos pelas diversas formas da doença. As neoplasias mais freqüentes na infância são as leucemias, tumores do sistema nervoso central e linfomas, enquanto nos adultos os cânceres de maior incidência são os de próstata, mama e pulmão. No entanto, a incidência do câncer de pele vem crescendo mundialmente nas últimas décadas, superando em algumas partes do mundo o câncer de mama, próstata e pulmão, tornando-se um grave problema de saúde pública, uma vez que interfere na qualidade de vida da população. As terapias empregadas para o tratamento do câncer são a radioterapia, a quimioterapia, a imunoterapia, a hormonioterapia e a cirurgia, sendo a quimioterapia a modalidade mais utilizada. Todavia, os fármacos quimioterápicos são pouco seletivos, sendo tóxicos aos tecidos sadios, principalmente àqueles de rápida proliferação celular. Nos últimos anos a pesquisa de novos fármacos para o tratamento do câncer tem sido intensificada, principalmente no estudo de compostos de ocorrência natural. O ácido gálico e seus derivados são ácidos fenólicos de ocorrência natural que apresentam uma grande variedade de ações biológicas. Estudos epidemiológicos indicam que compostos fenólicos encontrados na dieta reduzem muito os riscos de incidência de doenças como a aterosclerose, as neurodegenerativas, câncer entre outras. Alterações químicas em moléculas como o ácido gálico podem modificar as propriedades farmacodinâmicas, alterando a solubilidade e o coeficiente de partição, consequentemente suas propriedades biológicas. Neste estudo investigamos o potencial antitumoral de derivados ésteres do ácido gálico, moléculas de 0 a 16 carbonos na cadeia lateral. Esta alteração na cadeia carbônica altera a lipossolubilidade do ácido gálico e de seus n-alquil-esteres bem como os respectivos mecanismos de ação, como foi observado no efeito citotóxico e na depleção de glutationa em células de melanoma (B16-F10) e de leucemia (L1210). Todos os compostos induziram citotoxicidade dependente de concentração. A maior citotoxicidade foi observada com os galatos mais lipofílicos. Os valores de IC50 obtidos estão na faixa de micromolar. Todos os compostos causaram fragmentação do DNA após 24 h de incubação. Os resultados sugerem que os n-alquil-ésteres do ácido gálico são capazes de promover morte celular por apoptose e que este fenômeno é dependente do tamanho da cadeia carbônica. Os compostos mais lipofílicos também depletaram os níveis de glutationa intracelular e causaram um potente estresse oxidativo, além de promoverem a ativação do fator NF-kB e inibirem a expressão de moléculas de adesão. Foi observado que o decil e o tetradecil galatos são mais potentes e que o tetradecil apresenta importante atividade antimetastática e baixa toxicidade em estudos in vivo. Através da análise dos resultados obtidos pode-se inferir que os derivados do ácido gálico aqui estudados podem vir a ser uma importante estratégia terapêutica no tratamento tanto de leucemias quanto de melanomas.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. / Made available in DSpace on 2012-10-21T04:55:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2013-07-16T19:30:46Z : No. of bitstreams: 1 195539.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Antocianinas são corantes naturais que proporcionam cores atrativas e brilhantes à maioria das plantas, colorindo-as do vermelho vivo ao violeta. Estes pigmentos possuem propriedades benéficas reconhecidas, porém ainda são pouco utilizados na indústria de alimentícia devido à sua instabilidade frente às etapas de processamento de alimentos. A reação de copigmentação das antocianinas, com compostos incolores (copigmentos) naturalmente presentes nas plantas, tem sido estudada in vitro, em sistemas modelos, buscando viabilizar as antocianinas como corantes naturais. Flavonóides não antociânicos, aminoácidos, nucleosídios, ácidos orgânicos e as próprias antocianinas podem agir como copigmentos. No presente estudo, avaliou-se o efeito da adição dos ácidos orgânicos tânico e gálico ao extrato bruto de antocianinas de uvas Cabernet Sauvignon, em solução tampão e solução modelo de bebida isotônica, mantidas sob diferentes condições de armazenamento. Calculou-se o tempo de meia vida e a percentagem de retenção de cor de todas as amostras estudadas. O efeito da adição de ácido tânico às antocianinas de uva (Cabernet Sauvignon) e a betalaínas extraídas de beterrada (Asgrow Wonder) foi avaliado em iogurte. A reação de copigmentação entre os ácidos orgânicos e os pigmentos avaliados em solução tampão, foi confirmada por espectrofotometria de absorção UV-Visível. Contudo, a complexação das antocianinas foi significativamente afetada pelo pH (3,0 e 4,0), temperatura (4±1ºC e 29±2ºC), atmosfera (presença e ausência de nitrogênio) e o ambiente (luz e escuro) em que as amostras foram armazenadas. A estabilidade das antocianinas com e sem adição de ácido tânico foi similar em solução tampão e solução modelo de bebida isotônica, sendo que o ácido tânico (1:1, p/v) aumentou significativamente (p<0,05) o tempo de meia vida das amostras. Porém, em iogurte não foi observado efeito protetor do ácido tânico às antocianinas a nível de 5% de significância, enquanto que para betalaínas em iogurte, a adição de ácido tânico aumentou significativamente o tempo de meia vida e a percentagem de retenção de cor das amostras. A adição de ácido gálico (2:1, p/v) não teve efeito relevante no aumento da estabilidade das antocianinas de uva em solução tampão e em solução modelo de bebida isotônica.

Memoria para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo Mención Enología / Los polifenoles son compuestos generados a partir del metabolismo secundario de las plantas que presentan entre otras, actividad antibacteriana. Entre los polifenoles se encuentra el ácido gálico (no flavonoide) y la catequina (flavonoide). Helicobacter pylori es una bacteria Gram negativa, de forma bacilar espiralada, microaerofílica, flagelada, neutrófila, que habita en la capa mucosa que recubre el epitelio del estómago humano. Se estima que el 50% de la población mundial está infectada con la bacteria, alcanzando un 73% de prevalencia en la población en Chile. Ésta está relacionada con enfermedades como gastritis, úlceras y es un factor de alto riesgo para adquirir cáncer gástrico. Las terapias de erradicación de H. pylori consisten en el uso de antibióticos que no siempre son exitosas. Por esta razón, es necesario investigar tratamientos alternativos contra la infección por H. pylori. Diversas investigaciones muestran que constituyentes de Vitis vinifera y del vino tendrían efecto sobre la bacteria. El propósito de este trabajo fue estudiar el efecto antibacteriano del ácido gálico y de la catequina sobre Helicobacter pylori y Escherichia coli, como microorganismo control dados los diversos estudios que afirman que los polifenoles presentes en el vino tendrían efecto anti-Escherichia coli. La metodología consistió en cultivar las bacterias en medio líquido o en medio sólido, suplementados con rangos de dosis de ácido gálico y/o catequina. La actividad antibacteriana de los polifenoles en medio líquido se evaluó midiendo la DO600 de los cultivos y contabilizando las CFU/mL. Además, se midió el diámetro del halo de inhibición del crecimiento de las bacterias en medios sólidos, suplementados con los polifenoles en forma individual o en conjunto. También se evaluó la cinética de inhibición por parte de estos compuestos sobre el crecimiento bacteriano. Los resultados indican que tanto ácido gálico como catequina presentan actividad bactericida sobre ambas bacterias, siendo más efectivo el ácido gálico (el cual inhibe el crecimiento con concentraciones, dosis y tiempos de exposición menores que la catequina). La bacteria más sensible a los dos polifenoles es H. pylori. El efecto sinérgico resultó ser variable, relacionado fuertemente con las dosis de ácido gálico y catequina. / The purpose of this work was to study the antibacterial effect of gallic acid and catechin on H. pylori using E. coli as a control microorganism because various studies suggest that wine polyphenols show anti-Escherichia coli effects. The methodology consisted in growing bacteria in liquid (Trypticase soy broth or Luria Bertani) or agar (Trypticase soy agar or Luria Bertani agar) media. The culture media were supplemented with increasing doses of gallic acid and/or catechin, to generate the various conditions. In liquid medium, OD600 and CFU/mL were scored. In addition, diameters of the halo of growth inhibition produced by the two compounds either individually or together were also measured. Finally, both compounds were also determined kinetics of inhibition of bacterial growth. The results indicate that both polyphenols have antibacterial activity on both bacteria and that gallic acid is more effective, because inhibits growth at concentrations, doses and times less than catechin. H. pylori was most sensitive bacteria to both polyphenols and the synergistic effect between both polyphenols was observed but it was strongly depend upon doses of gallic acid and catechin.

Submitted by PAULO RICARDO DA SILVA SANCHES null (iqsanches@gmail.com) on 2016-04-11T19:36:44Z No. of bitstreams: 1 dissertação com folha de assinaturas.pdf: 2659590 bytes, checksum: 657a0f30c115e578e0d87cd1af6f0e8d (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-04-13T13:34:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sanches_prs_me_araiq_par.pdf: 628629 bytes, checksum: 27fd8ec47279daee3ad899c61e8c67e8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-13T13:34:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sanches_prs_me_araiq_par.pdf: 628629 bytes, checksum: 27fd8ec47279daee3ad899c61e8c67e8 (MD5) Previous issue date: 2016-03-11 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A síntese de peptídeos em fase sólida mostra-se como uma importante ferramenta para a modelagem de macromoléculas biológicas, sendo algumas de interesse quimioterápico. Desde que foi descrita pela primeira vez, esta técnica tem possibilitado a síntese de inúmeros peptídeos e o estudo aprofundado dessas moléculas. Peptídeos líticos apresentam-se como novas moléculas promissoras contra neoplasias, sendo seu mecanismo de ação ainda obscuro. O câncer é uma doença causada por fatores que provocam o desenvolvimento anormal de células do organismo. Estas células tendem a ser agressivas e incontroláveis, determinando a formação de tumores. O câncer cervical é um dos mais comuns, afetando principalmente regiões pouco desenvolvidas. Infecções pelo vírus HPV, tabagismo, falta de higiene pessoal e relações sexuais sem o uso de preservativos são as principais causas pelo aparecimento da doença. O HPV é um vírus não envelopado, de dupla fita de DNA circular e que promove infecção em células basais em divisão do epitélio. Este trabalho descreve a síntese, purificação e caracterização do peptídeo lítico Hecate (FALALKALKKALKKLKKALKKAL) e do conjugado ácido gálico-Hecate (AG-FALALKALKKALKKLKKALKKAL). Estas moléculas foram utilizadas na busca de novas terapias contra o câncer cervical causado por infecção viral e no entendimento de seu modo de ação. Os resultados mostraram que o peptídeo apresenta alta potencialidade contra o câncer cervical, mas o acoplamento do ácido gálico na sua posição amino terminal, além de diminuir a potencialidade contra o câncer, aumentou sua atividade hemolítica. Estas diferenças estão diretamente relacionadas com a diferença de carga dos dois compostos, a diferente composição lipídica das células e a estrutura secundária dos compostos. / The solid phase peptide synthesis is shown as an important tool for modeling of biological macromolecules, and some chemotherapeutic interest. Since it was first described this technique has made possible the synthesis of numerous peptides and careful study of these molecules. Lytic peptides are presented as promising new molecules against cancer, and the action mechanism is still unclear. Cancer is a disease caused by factors that cause abnormal development of the body's cells. These cells tend to be aggressive and uncontrollable, causing tumor formation. Cervical cancer is the most common, affecting mainly underdeveloped regions. Infection by the HPV virus, smoking, lack of personal hygiene and sex without protection are the main causes for the appearance of the disease. The HPV virus is a non-enveloped virus with circular double-stranded DNA and promotes infection in the dividing basal cells of the epithelium. This work describes the synthesis, purification and characterization of the lytic peptide Hecate (FALALKALKKALKKLKKALKKAL) and conjugate gallic acid-Hecate (GA-FALALKALKKALKKLKKALKKAL). These molecules were used in the search for new therapies against cervical cancer caused by viral infection and understanding of their mode of action. The results showed that the peptide has a high potential against cervical cancer, but the coupling of gallic acid in its amino terminal position reduces the potential of peptide for cancer and increases his hemolytic activity. These differences are directly related to the charge difference of the two compounds, the different lipid composition of cells and the secondary structure of the compounds.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-25Bitstream added on 2014-06-13T20:29:47Z : No. of bitstreams: 1 barbosa_vf_me_arafcf.pdf: 526140 bytes, checksum: 50d8a074a37389b25908e0fd537d9859 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Compostos fenólicos são conhecidos por possuírem propriedades antioxidantes que influenciam na qualidade dos alimentos. O ácido gálico e seus derivados apresentam propriedades antioxidantes, antimicrobiana e propriedades antimutagênicas. Neste trabalho avaliamos a ação desses compostos sobre processos oxidativos in vitro e ex vivo sendo: i) Modelos químicos na supressão de formas oxidantes de ABTS +, DPPH HOCl, H2O2, O2 -, NO e taurina cloramina; ii) Sistemas enzimáticos como HRP e MPO; iii) Sistemas celulares com polimorfonucleares e eritrócitos frente a AAPH e HOCl. Os ensaios envolvendo as espécies oxidativas na presença de ácido gálico e derivados mostraram uma boa inibição, sendo que a amostras triacetato de ácido gálico mostrou ser a melhor das amostras testadas. Em relação aos sistemas enzimáticos os dados indicam inibição não competitiva ou mista. Nos sistemas celulares foi observado: i) citotoxicidade frente às células eritrocitárias e aos polimorfonucleares, ii) a amostra galato de isopropila demonstrou menor citotoxicidade frente aos eritrócitos, iii) a amostra galato de butila foi a que apresentou relativamente menor citotoxicidade chegando a 80% de morte celular, e iv) as outras amostras chegavam a 100% de morte celular na mesma concentração. Pelos dados obtidos, concluiu-se que o ácido gálico e seus derivados são potentes antioxidantes e inibidores das peroxidases HRP (Horseradish peroxidase) e MPO (mieloperoxidase), e com alta citotoxidade frente aos sistemas celulares estudados / Phenolic compounds are known to have antioxidant properties that influence the quality of food. Gallic acid and its derivatives have antioxidant, antimicrobial and antimutagenic properties. In this study the action of these compounds on oxidative processes in vitro and ex vivo which: i) Models in the suppression of chemical forms of oxidizing ABTS•+, DPPH• HOCl, H2O2, O2 •-, NO• and taurine chloramine ii) Enzymatic systems HRP and MPO iii) cellular systems with polymorphonuclear cells and erythrocytes against AAPH and HOCl. Tests involving the oxidative species in the presence of gallic acid and its derivatives showed good inhibition, and the triacetate samples of gallic acid were found to be the best of the tested samples. Regarding enzyme systems data indicate non-competitive or mixed inhibition. In cellular systems were observed: i) cytotoxicity against cells to erythrocyte and polymorphonuclear ii) the sample with erythrocytes the isopropyl gallate showed less cytotoxicity compared to the others samples, iii) the sample of butyl gallate showed the relatively lower cytotoxicity reaching 80% of cell death, and iv) the other specimens came to 100% cell death at the same concentration. From the data obtained showed that the gallic acid and its derivatives are potent antioxidants and inhibitors of peroxidases HRP (horseradish peroxidase) and MPO (myeloperoxidase), and high cytotoxicity against the cell systems studied

Orientador: Lourdes Campaner dos Santos / Co-orientadora: Débora Cristina Baldoqui / Banca: Bianca Ferreira da Silva / Banca: Cintia Duarte de Freitas Milagre / Banca: Geraldo Mangela Vieira Junior / Resumo: Este trabalho teve como objetivo o estudo químico, determinação dos teores de fenóis e flavonoides totais e a avaliação das atividades antirradicalar e mutagênica dos extratos hidroalcoólicos (70% de etanol, v/v) de folhas de Pouteria torta e Pouteria ramiflora (Sapotaceae). O estudo por HPLC-DAD, HPLC-ESI-IT-MS2, HPLC-ESI-QTRAP-MS2 e ESI-IT-MS/MS possibilitou a identificação de treze substâncias derivadas da miricetina, quercetina, apigenina além do ácido gálico e do ácido quinico. Com a técnica HPLC-DAD foi possível quantificar as substâncias miricetina-3-O-β-D-galactopiranosídeo, miricetina-3-O-α-L-arabinopiranosídeo e miricetina-3-O-α-L-rhamnopiranosídeo nos extratos hidroalcoólicos das duas espécies. Os teores de miricetina-3-O-β-D-galactopiranosídeo encontrados foram de 2,53 e 13,55 mg.g-1 de extrato para P. torta e P. ramiflora, respectivamente. Para miricetina-3-O-α-L-arabinopiranosídeo foi encontrado 1,33 mg.g-1 de extrato de P. torta. Os valores encontrados para miricetina-3-O-α-L-rhamnopiranosídeo foram de 2,20 e 9,61 mg.g-1 de extrato para P. torta e P. ramiflora, respectivamente. O extrato hidroalcoólico de P. torta apresentou 11,66 mg.g-1 de extrato de fenóis totais e 16,11 mg.g-1 de extrato de flavonoides totais, enquanto a infusão das folhas apresentou 90,83 mg.g-1 de infuso de fenóis totais e 5,56 mg.g-1 de infuso de flavonoides totais. Pouteria ramiflora apresentou 125,87 mg.g-1 de extrato de fenóis totais e 48,82 mg.g-1 de extrato de flavonoides totais. O teor de fenóis totais na infusão folhas de P. ramiflora foi de 55,85 mg.g-1 de infuso, enquanto o teor de flavonoides totais foi de 27,84 mg.g-1 de infuso. A atividade antirradicalar utilizando DPPH indicou IC50 de 3,83 e 0,18 mg.mL-1 para os extratos hidroalcoólicos de P. torta e P. ramiflora, respectivamente, quando comparados aos valores encontrados para os padrões de quercetina (0,03 mg.mL-1) ... / Abstract: This work aimed the chemical study, and the determination of total phenols and flavonoids amounts and the evaluation of the antiradical and mutagenic activities of hydroethanolic extracts (70% ethanol, v / v) of Pouteria torta and Pouteria ramiflora (Sapotaceae). The study by HPLC-DAD, HPLC-ESI-IT-MS/MS, HPLC-ESI-QTRAP-MS/MS and ESI-IT-MS/MS allowed the identification of thirteen substances derived from myricetin, quercetin, apigenin, and, in addition, gallic acid and quinic acid. It was possible to quantify substances by HPLC-DAD technique: myricetin-3-O-β-D-galactopyranoside, myricetin-3-O-α-L-arabinopyranoside and myricetin-3-O-α-L-rhamnopyranoside (M-3-O-RHA) in the hydroethanolic extracts of P. torta and P. ramiflora leaves. The amounts of M-3-O-GAL found were 2,53 and 13,55 mg.g-1 of extract for P. torta and P. ramiflora respectively. For M-3-O-ARA was found 1,33 mg.g-1 of P. torta extract. The values found for M-3-O-RHA were 2,20 and 9,61 mg.g-1 of extract for P. torta and P. ramiflora respectively. The hydroalcoholic extract of P. torta presented 11,66 mg.g-1 of extract for total phenols and 16,11 mg.g-1 of extract for total flavonoids, while the infusion of the leaves showed 90,83 mg.g-1 of infusion for total phenols and 5,56 mg.g-1 of infusion for total flavonoids. Pouteria ramiflora showed 125,87 mg.g-1 of extract for total phenols and 48,82 mg.g-1 of extract for total flavonoids. The total phenolic content in leaves infusion of P. ramiflora was 55,85 mg.g-1, whereas the content of total flavonoids was 27,84 mg.g-1 of infusion. The antiradical activity using DPPH showed IC50 of 3,83 and 0,18 mg.mL-1 for the hydroethanolics extracts of P. torta and P. ramiflora, respectively, when compared to the values found for the standards of quercetin (0,03 mg .mL-1) and gallic acid (0,01 mg.mL-1). For infusions the values were 0,53 and 2,62 mg.mL-1 for P. torta and P. ramiflora respectively. ... / Doutor