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Suplementação alimentar com ácidos graxos essenciais para tilápias do Nilo: desempenho produtivo, hematológico e granuloma por corpo estranhoSakabe, Róberson [UNESP] 27 March 2007 (has links) (PDF)
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sakabe_r_me_jabo.pdf: 484637 bytes, checksum: 524d3e07db3df0075ffd97b02ea8fc33 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da suplementação alimentar com ácidos graxos essenciais sobre o desempenho produtivo, variáveis hematológicas, acúmulo de macrófagos e formação de gigantócitos em lamínulas de vidro implantadas no tecido subcutâneo de tilápias. Foram distribuídos 300 peixes (69,86 ± 5,01 g) em 20 caixas (15 peixes/caixa), com capacidade para 310 L, abastecidas com água corrente, vazão de um litro/minuto e aeração suplementar. Os peixes foram submetidos a cinco dietas contendo 28% PD e 3200 Kcal ED/kg. Foram utilizadas duas fontes de ácidos graxos essenciais: óleo de soja (OS) e óleo de linhaça (OL) nas proporções de 100% OS, 75% OS + 25% OL, 50% OS + 50% OL, 25% OS + 75% OL e 100% OL, com quatro repetições por tratamento. Após 15 dias de aclimatação, os peixes receberam as dietas experimentais durante quatro meses, duas vezes ao dia, correspondente a 3,0% da biomassa. Mensalmente foi realizada biometria dos peixes para avaliar o desempenho produtivo. Após 120 dias, os animais foram submetidos ao implante das lamínulas no tecido subcutâneo para avaliação da resposta inflamatória e das variáveis hematológicas (número de eritrócitos, porcentagem de hematócrito, taxa de hemoglobina e volume globular médio) dois, quatro, seis e oito dias após o implante. Não foi observada diferença significativa (P>0,05) entre os tratamentos para os parâmetros de desempenho produtivo e hematológico. Quanto à cinética dos macrófagos e formação de gigantócitos por corpo estranho foi observado crescente acúmulo em função do tempo de implante entre os tratamentos, precocidade na formação de gigantócitos tipo Langhans para os peixes alimentados com 100% de óleo de linhaça ao sexto dia (P<O,OOO 1) enquanto que no oitavo dia houve a formação acentuada de gigantócitos tipo Langhans (P<O,OOO I) nas lamínulas implantadas nos peixes... / The aim of this research was to evaluate the effect of the alimentary supplementation with essentials fattys acids on the productive performance, variables hematologicals, accumulation of macrophages and formation of giant cells in coverslips of glass implanted in the subcutaneous connective tissue of tilapias. 300 fish were distributed (69,86±5.01 g) in 20 aquariums (15 fishes/aquarium), with capacity for 310 L, supplied with current water, f10w of one liter/minute and supplemental aeration. The fish was submitted the five diets contend 28% PD and 3200 Kcal ED/kg. Two acid sources of essentials fattys acids were used: soybean oil (OS) and linseed oil (OL) in the ratios of 100%, 75% + 25% OL, 50% + 50% OL, 25% + 75% OL and 100% OL, with four repetitions for treatment. After 15 days of acclimatization, the fish was received the experimental diets during four months, two times/day, correspondent 3.0% of the biomass. Monthly biometry of the fish was carried through to evaluate the productive performance. After 120 days, the animals were submitted to the imp1antation of coverslips in the subcutaneous connective tissue for eva1uation of the inf1ammatory response and hematologicals variables (number of erythrocytes, percentage of haematocrit, tax of hemoglobin and average corpuscular volume) two, four, six and eight days after the implantation. Significant difference was not observed (P>O,O5) between the treatments for the parameters of productive and hematological performance. All that to kinetic of the macrophages and the formation of giants cells for strange body increasing accumulation in function of the time of implantation between the treatments was observed, premature in the formation of giants cells Langhans type for fish fed with 100% of linseed oil to sixth day (P<O,OOO 1), while that in the eighth day it had the accented formation of giant cell Langhans type (P<O,OOO 1) in coverslips ...(Complete abstract, click electronic access below)
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Encefalopatias não-infecciosas em cães: análise anatomopatológica e imunohistoquímica / Noninfectious encephalopathies in dogs: anatomopathological and immunohistochemical analysisLuiz Fernando Nascimento Panigassi 31 January 2012 (has links)
O objetivo deste estudo foi verificar o comportamento anatomopatológico e expressão imunohistoquímica das proteínas GFAP, Vimentina, COX-2 e Amilóide β em 14 casos de encefalopatias não infecciosas em cães, mais especificamente Meningoencefalite Granulomatosa (MEG), Meningoencefalite Necrotizante (MEN) e Angiopatia Amilóide Cerebral (CAA). Foram coletadas informações clínicas (gênero, raça, idade) e morfológicas (necrose, presença de proteína amilóide, infiltrado inflamatório) dos animais. Para a expressão das proteínas por imunohistoquímica foram confeccionadas lâminas próprias para tal com amostras dos tecidos, juntamente com controles positivos das reações. A avaliação da expressão das proteínas foi de como positivo ou negativo para a marcação para GFAP, Vimentina e COX-2, e para o Aβ seguiu-se a classificação proposta por Olichney (1995), com quatro graduações. Animais SRD (4/14, 28%), de raça Maltês (2/14, 14%), Labrador (2/14, 14%), Poodle (3/14, 21%), Fox Terrier (1/14, 7%), Pug (1/14, 7%) e Bichon Frisè (1/14, 7%) fizeram parte deste estudo, na maioria machos (9/14, 63%). As lesões em todos os casos foram características, sendo que em MEG foi observado manguitos perivasculares abundantes com infiltrado inflamatório disperso pelo parênquima encefálico, caracterizando os quatro casos como de MEG disseminada. Em MEN foi observado o infiltrado inflamatório acompanhado de áreas de necrose, sinais característicos da doença. Nos casos de CAA foi observado agregados proteicos junto aos vasos sanguíneos do encéfalo, confirmados como sendo material amilóide por meio da coloração Vermelho Congo. Quanto a expressão dos antígenos por imunohistoquímica, houve a marcação de todos anticorpos em todos os casos, e, para os casos de CAA, houve uma maioria de casos com classificação 1 (5/6, 83%). Em conclusão: 1. os dados clínicos obtidos reproduzem o comportamento biológico destas doenças em cães; 2. a análise imunohistoquímica das lesões de MEG, MEN e CAA apresentou resultados dentro dos quadros descritos na literatura; 3. a marcação positiva para COX-2 indica um aumento na atividade macrofágica no encéfalo; 4. as marcações de GFAP e Vimentina indicam uma reação das células da glia frente a lesão apresentada; 5. a utilização da imunohistoquímica como ferramenta de diagnóstico para estas doenças é válida. / The goal of this study was to analyze the anatomopathological and immunohistochemical profile for GFAP, Vimentin, COX-2 and β-amyloid in 14 cases of noninfectious encephalopathies in dogs, more specifically Granulomatous Meningoencephalitis (GME), Necrotizing Meningoencephalitis (NME) and Cerebral Amyloid Angiopathy (CAA). Clinical (gender, breed, age) and morphological (necrosis, presence of amyloid protein, inflammatory infiltrate) informations were collected regarding such animals. Microscopy slides with paraffin-embedded sections of tissue were elaborated for the immunohistochemical analysis, as well as positive controls for the reactions. The expressions of the proteins were graded as positive or negative for GFAP, Vimentin and COX-2, and the grading system described by Olichney was used for the β-amyloid. Animals of mixed breed (4/14, 28%), malteses (2/14, 14%), Labrador (2/14, 14%), Poodle (3/14, 21%), Fox Terrier (1/14, 7%), Pug (1/14, 7%) and Bichon Frisè (1/14, 7%) featured in this study, and most of them were males (9/14, 63%). All of the lesions observed were characteristic of such diseases, as perivascular cuffing with an abundant inflammatory infiltrate was observed in GME cases, being all 4 cases considered as disseminated GME. Necrosis, as well as the inflammatory infiltrate, was observed in all NME cases, which is the hallmark of this disease. The deposition of amyloid protein was observed in cases of CAA, which were confirmed by the Congo Red special staining. As for the immunohistochemical expression, all antibodies performed positive staining, and for the β-amyloid there was a predominance of grade 1 cases (5/6, 83%). In conclusion: 1. the clinical data reproduce the biological behavior of such diseases in dogs; 2. the immunohistochemical analysis of the lesions from GME, NME and CAA presented results coherent with those found in the literature; 3. positive staining for COX-2 presented an increased macrophage activity in the brain of those animals; 4. GFAP and Vimentin positive staining indicate a reaction by the glial cells against the presented lesion; 5. immunohistochemistry is a valid diagnostics tool for such diseases.
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Caracterização da resposta inflamatória local e sistêmica em camundongos infectados com cisticercos de Taenia crassiceps no subcutâneo / Characterization of local and systemic inflammatory response in mice infected with Taeniacrassiceps in the subcutaneousFreitas, Aline de Araújo 31 March 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-03-31 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The larval form of Taenia crassiceps has been used as an experimental model to human cysticercosis, because it has antigenic similarities with the T. solium cysticercus. The human cysticercosis by T. crassiceps has been reported in immunodepressed and immunocompetent patients. Due to the fact that the immune response to T. crassiceps is still unclear, the present study aimed to characterize the local and systemic inflammatory response of C57BL/6 wild-type and C57BL/6 IFN -Knockout (IFN-KO) mice strains after subcutaneous infection by T. crassiceps cysticercus. For this were evaluated the hemogram, the anatomopathological changes in the subcutaneous tissues , the presence of alternatively activated macrophages (CD301+ cells) and the serum cytokines concentration (IFN, IL-12p40 and IL-4). Neither of strains presented alterations on the hemogram after infection In both infected strains, it was observed granulomes formation on the inflammatory site with neutrophils and macrophages. However, the granulomatous reaction was more early, intense and with greater amount of collagen in infected IFN-KO. The serum concentrations of IFN, IL-12p40 and IL-4 in the infected C57BL/6 wild-type increased compared to the wild-type uninfected mice. In the infected IFN-KO, the increase of IL-4 serum concentration was observed due to the infection, however this cytokine concentration was lower compared with other infected strain. It was also observed in the C57BL/6 wild-type the presence of CD301+ cells at the beginning of the infection and, in the IFN-KO, these cells were present at the end of the infection. In conclusion, the immune response of C57BL/6 mice induced by T. crassiceps cysticercus can be characterized by mixed Th1/Th2 profile. The mixed response is able to promote the destruction of the parasites IFN-dependent, which results in a minor injury and lower collagen production. In IFN- deficient, there is a profile that tends towards the Th2 immune response, with the presence of CD301+ cells and increased collagen production. / A forma larval de Taenia crassiceps tem sido empregada como modelo experimental da cisticercose humana, por possuir similaridades antigênicas com o cisticerco de T. solium. A cisticercose humana por T. crassiceps foi relatada em pacientes imunodeprimidos, e imunocompetentes. Devido ao fato de que a resposta imunológica frente a T. crassiceps ainda não está totalmente esclarecida, o presente estudo objetivou a caracterização da resposta inflamatória local e sistêmica em linhagens de camundongos C57BL/6 convencionais e deficientes do gene do IFN (IFN-KO) após a infecção subcutânea por cisticercos de T. cracisseps. Para tanto, foram avaliados o hemograma, as alterações anatomopatológicas no subcutâneo, a presença de macrófagos alternativamente ativados (células CD301+) e a dosagem sérica de citocinas (IFN, IL-12p40 e IL-4). Nenhuma das linhagens apresentou alteração no hemograma após infecção. Em ambas linhagens, foram observadas a formação de granulomas no sítio inflamatório, com presença de neutrófilos e macrófagos. No entanto, a reação granulomatosa foi mais precoce, intensa e com maior quantidade de colágeno na linhagens IFN-KO. As concentrações séricas de IFN, IL12p40 e IL-4 nos camundongos C57BL/6 convencional infectados aumentaram comparadas aos camundongos convencionais não infectados. Na linhagem IFN-KO, o aumento da concentração sérica de IL-4 foi observada devido à infecção, porém, a concentração desta citocina foi menor comparada com a outra linhagem. Foi observada também na linhagem C57BL/6 convencional, a presença de células CD301+ no início da infecção e, na linhagem IFN-KO, estas células estavam presentes no final da infecção. Em conclusão, a resposta imune dos camundongos C57BL/6 induzida por cisticercos de T. crassiceps pode ser caracterizada por um perfil misto Th1/Th2. A resposta mista é capaz de promover a destruição do parasito de maneira dependente de IFN, o que resulta em uma menor lesão e menor produção de colágeno. Na deficiência de IFN apresenta um perfil que tende para resposta imune Th2, com presença de clélulas CD301+ e aumento da produção de colágeno.
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Espectro clínico e defeitos genético-moleculares de pacientes com doença granulomatosa crônica. / Clinical spectrum and molecular genetic defects in patients with chronic granulomatous disease.Nuria Bengala Zurro 13 March 2014 (has links)
A doença granulomatosa crônica é uma imunodeficiência primária dos fagócitos causada por mutações no sistema NADPH oxidase resultando em burst oxidativo ausente ou reduzido. Nosso objetivo foi realizar uma análise genética molecular do complexo NADPH oxidase em pacientes com diagnóstico clínico de DGC. Cinqüenta e quatro pacientes com diagnóstico clínico sugestivo da DGC foram incluídos em nosso estudo. As populações de neutrófilos e monócitos foram avaliadas pela capacidade de produzir peróxido de hidrogênio por meio do teste de DHR. Dezoito pacientes apresentaram defeito no burst oxidativo, enquanto trinta e oito apresentaram produção de peróxido normal. O DNA genômico dos dezoito pacientes com burst oxidativo diminuído foi extraído, os genes da cadeia beta polipeptídica do complexo citocromo b e o factor citoplasmático de neutrófilos, foram sequenciados. Sete pacientes apresentaram diferentes mutações, tanto no gene CYBB como no NCF1. Concluímos que a combinação do teste de DHR e o sequenciamento direto são métodos eficazes para o diagnóstico genético da DGC. / Chronic granulomatous disease is a primary immunodeficiency caused by mutations in the phagocyte NADPH oxidase system resulting in absent or reduced oxidative burst. Our goal was to perform a molecular genetic analysis of complex NADPH oxidase in patients with clinical diagnosis of CGD. Fifty-four patients with a clinical diagnosis of CGD were included in our study. The populations of neutrophils and monocytes were evaluated for the ability to produce hydrogen peroxide through the DHR test. Eighteen patients had a defect in the oxidative burst, while thirty-eight had normal peroxide production. Genomic DNA of the eighteen patients with decreased oxidative burst was extracted, the genes the chain complex cytochrome beta polypeptide and the neutrophil cytoplasmic factor, were sequenced. Seven patients had different mutations, both in the CYBB gene as in NCF1. We conclude that the combination of direct sequencing and DHR test methods are effective for the genetic diagnosis of CGD.
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Efeito do interferon-gamma sobre defeitos de \"splicing\" que levam à doença granulomatosa crônica ligada ao cromossomo X. / Interferon-gamma effect on splicing defects that cause chronic granulomatous disease linked to X chromosome.Frazão, Josias Brito 06 April 2009 (has links)
Os fagócitos contêm uma nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato (NADPH) oxidase associada à membrana, que gera superóxido e outros reativos intermediários do oxigênio. Defeitos nesta oxidase em seres humanos resultam na doença granulomatosa crônica (DGC). Mutações próximas aos sítios de splicing que interferem com o processamento do RNA mensageiro, acarretando deleção de um ou mais exons, são cada vez mais freqüentes na literatura científica, nesses casos, os mecanismos moleculares que levam a DGC nem sempre são totalmente esclarecidos, assim como o efeito do IFN-g, seja sobre o processamento da mensagem ou estabilidade dos transcritos. Com base nessas informações o objetivo geral deste trabalho é investigar o efeito do IFN-g sobre a regulação do sistema NADPH oxidase fagocítico humano. Através dos resultados obtidos, não se pode constatar melhora na produção de ânions superóxido após o tratamento com IFN-g em pacientes com defeito de splicing, no entanto detectou-se aumento da expressão do gene CYBB através de PCR convencional e através de real-time PCR além de um aumento na marcação de proteínas do spliceossoma através do FAN. / Phagocytes have a nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-oxidase (NADPH) associated to plasmatic membrane that generates superoxide and other oxygen reactive intermediates. Defects on this oxidase in humans result in a disorder called Chronic Granulomatous Disease (CGD). Mutations next to splicing sites that interfere with the mRNA processing leading to deletion of one or more exons, are even more frequent on scientific literature, in these cases, the molecular mechanisms causing CGD are not always completetly clear, as well as the effect of IFN-g on the mRNA processing or on the stability of transcripts. Based on this information our aim is to investigate the effect of IFN-g on the regulation of the human NADPH oxidase phagocyte system.. With the obtained results it wasnt possible to see an increase in anion superoxide production after the IFN-g treatment in patients with splicing defects, however it was detected an increase on the expression of CYBB gene by conventional and real-time PCR besides an increase in the marking of spliceossomal proteins by FAN.
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Efeito do IFN-k e TNF-α sobre a expressão gênica de CYBB e processamento de seus transcritos. / The effect of IFN-g and TNF-α on CYBB gene expression and its transcripts processing.Frazão, Josias Brito 19 March 2014 (has links)
O sistema NADPH oxidase humano é responsável pela geração de reativos intermediários do oxigênio e defeitos neste sistema resultam na Doença Granulomatosa Crônica (DGC). Nesta tese de doutorado, investigamos o efeito do IFN-g sobre eventos pós-transcricionais em pacientes com DGC ligada ao X, ocasionada por defeitos de splicing. Os dados obtidos sugerem que o uso do IFN-g in vitro interfere no processamento da mensagem causando aumento da expressão de transcritos do gene CYBB e NCF1 em células B-EBV de indivíduos sadios e pacientes DGC analisados. Observamos também que o IFN-g dimunui a expressão dos genes THOC4 NONO, SF3A1, SRRM1 e UPF3A e promove aumento de expressão de SRSF10, SNRPA1 e C2 em células B-EBV de paciente X-DGC secundária a defeitos de splicing. Identificamos que o IFN-g e o TNF-α aumentam a expressão das proteínas envolvidas no processo do splicing. Concluímos que o IFN-g aumenta a expressão de genes importantes para uma resposta eficiente do sistema imunológico, incluindo os do sistema NADPH oxidase, além de promover aumento da expressão de genes e de proteínas relacionados ao processo de splicing, que podem estar relacionados aos efeitos benéficos observados no uso do IFN-g em pacientes com DGC ligada ao X, ocasionada por defeitos de splicing. / The human phagocyte NADPH oxidase is responsible for the generation of reactive oxygen intermediates and defects in this system result in Chronic Granulomatous Disease (CGD). In this PhD Thesis, we investigated the effect of IFN-g on post-transcriptional events in normal individuals and patients with X-linked CGD, caused by splicing defects. The obtained data suggests that the use of IFN-g in vitro interferes in the message processing causing an increase of expression of CYBB and NCF1 gene transcripts in B-EBV cells of healthy individuals and analyzed CGD patients. We also observed that IFN-g decreases the expression of THOC4, NONO, SF3A1, SRRM1 and UPF3A, and increases the expression of SRSF10, SNRPA1 and C2 genes in cells from X-CGD patients, due to splicing defects. We identified that IFN-g and TNF-α induce expression of proteins involved in the splicing process. We conclude that IFN-g increases the expression of important genes for an effective immune response, including the NADPH oxidase system genes, and promotes augment of gene and protein expression related to the splicing process, which may be related to the beneficial effects related to the use of IFN-g in CGD patient caused by splicing defects.
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Imunomarcação tecidual para o fator XIIIa+ em dendrócitos dérmicos de lesões cutâneas com doença de Jorge LoboCARNEIRO, Clivia Maria Moraes de Oliveira January 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010 / A doença de Jorge Lobo (DJL) é uma infecção fúngica profunda, causada pelo Lacazia loboi, que acomete preferencialmente homens agricultores, com forma clínica queloidiana e localização nos membros inferiores. A maior incidência é encontrada na Amazônia brasileira. Há poucos relatos sobre a resposta imune tecidual nas lesões dos pacientes. Este estudo objetiva avaliar uma possível participação na patogenia da doença, dos dendrócitos dérmicos fator XIIIa (DD FXIIIa) em lesões cutâneas, através da técnica da imuno-histoquímica. Foram analisados 33 biopsias cutâneas de pacientes com DJL. O grupo controle foi representado por 10 biopsias de pele normal procedente de pacientes sem doenças dermatológicas e por 61 biopsias de pacientes com paracoccidioidomicose (PCM). Os resultados obtidos com a análise dos prontuários revelaram que a DJL acomete principalmente homens (84,8%), agricultores (72,7%), com 46-65 anos (51,5%), procedentes da região nordeste do estado do Pará (51,5%), com forma clínica queloidiana (81,8%) e localização preponderante das lesões nos membros inferiores (45,5). Os valores da contagem de DD FXIIIa nas lesões cutâneas de DJL não foram influenciados pelas variantes de gênero, idade, profissão, procedência, forma clínica e localização das lesões. A quantidade de DD FXIIIa nos pacientes com DJL foi maior do que a encontrada no grupo controle de pacientes com pele sã e no grupo de pacientes com PCM, tanto no aspecto histopatológico de granuloma frouxo (GF), como granuloma bem organizado (GBO). Em virtude dos DD FXIIIa serem considerados precursores das células de Langerhans (CLs), pode-se sugerir que o aumento deles na DJL represente um reservatório dérmico para as CLs epidérmicas e se transformariam nelas continuamente, não permitindo sua diminuição. Já foi demonstrado o aumento de citocinas do perfil Th2 (TGF-β) na DJL e o aumento de DD FXIIIa que é capaz de secretar o fator de TNF-α, observado neste estudo, mostra um predomínio do perfil Th1. Quando há uma coexpressão de citocinas de ambos os perfis na mesma doença, sugere-se a existência de padrões mistos. Então, os resultados obtidos neste trabalho sugerem que a DJL é uma doença espectral, com pólos de resistência e suscetibilidade. O que talvez explique a existência de casos localizados mesmo com longa evolução da doença e casos disseminados como manifestação precoce da DJL. / Jorge Lobo's disease (DJL) is a deep fungal infection caused by Lacazia loboi which mainly affects males farmers, with the clinical form keloid and location of the lower limbs. The highest incidence is found in the Brazilian Amazonia. There are few reports on immune tissue lesions of patients. This study aims to evaluate a possible role in the pathogenesis of the disease by factor XIIIa dermal dendrocytes (FXIIIa DD) in skin lesions, using the technique of immunohistochemistry. 33 skin biopsies were analyzed from patients with DJL. The control group consisted of 10 normal skin biopsies originating from patients without dermatological diseases and 61 biopsies from patients with paracoccidioidomycosis (PCM). The results obtained by records analyzing patients' revealed that DJL affects mainly men (84.8%), farmers (72.7%) with 46-65 years old (51.5%), coming from the northeastern Pará state (51.5%) with clinical form keloid (81.8%) and predominant location of lesions in the lower limbs (45.5). The values of the count of FXIIIa DD in skin lesions of DJL were not affected by variations in gender, age, occupation, origin, clinical manifestation and localization of lesions. The amount of FXIIIa DD in patients with DJL was higher than that found in the control group of patients with healthy skin and in the group of patients with PCM to both the histopathology of loose granuloma (GF) and organized granuloma (GBO). Because of FXIIIa DD be considered precursors of Langerhans cells (LCs) can be suggested that their increase in DJL reflects a reservoir for the LCs and transform them time and again, don’t allowing their decrease. It has been demonstrated the increase in the levels of Th2 cytokines (TGF-β) in the DJL, and the increase of FXIIIa DD that is able to secrete the factor TNF-α, observed in this study, shows a dominance of Th1. Whereas there is a co expression of cytokine profiles of both, the study suggests the existence of mixed patterns. So, the results obtained in this work suggest that DJL is a spectral disease, with a tendency of resistance or susceptibility. What might explain the existence of focal cases even with long duration of disease and disseminated cases like early manifestation of DJL.
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Doença de Jorge Lobo: estudo histopatológico retrospectivo de casos registrados no serviço de dermatologia da Universidade Federal do Pará no período de 1967 a 2009BITTENCOURT, Maraya de Jesus Semblano January 2010 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-05-08T22:12:15Z
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Previous issue date: 2010 / Doença de Jorge Lobo (DJL) ou lacaziose é infecção crônica granulomatosa da pele e tecido subcutâneo causada pelo fungo Lacazia loboi. As lesões cutâneas em geral são polimorfas, sendo mais comum o tipo nodular de aspecto queloidiano envolvendo principalmente pavilhão auricular e membros. O exame histopatológico constitui o padrão ouro para o diagnóstico. São escassos os estudos sobre correlação clinicopatológica nesta doença. O presente trabalho apresenta como objetivo estudar casos diagnosticados como DJL pelo laboratório de dermatopatologia do Serviço de Dermatologia da Universidade Federal do Pará, no período de 1967 a 2009. Foi realizada a revisão dos prontuários médicos e estudadas as características demográficas, histológicas, clínicas e localização das lesões. 59 biópsias de 45 pacientes foram avaliadas. A amostra foi composta de 37 homens e oito mulheres, com média de idade de 50 anos. A maioria dos pacientes era lavrador (55%), dos quais 93% eram do sexo masculino. O aspecto queloidiano correspondeu a 59% das lesões. Com menor freqüência foram observadas lesões verruciformes (8%), placa (3%), gomosa (1%) e lesão macular hipercrômica (1%). A maioria das lesões estava localizada nos membros inferiores (56%). Histopatologicamente, a camada córnea encontrava-se hiperceratósica em 71% das biópsias, com paraceratose em 37% e ortoceratose em 50%. A eliminação transepidérmica (ETE) do parasitas foi observada em 36% dos casos e nestes, a hiperceratose estava presente em 95% (p = 0,0121) e a paraceratose em 90% (p< 0,0001). A epiderme apresentava aspecto hiperplásico em 58%, atrófica em 29%, normal em 12% e ulcerada em 8%. Nos casos em que houve ETE a epiderme apresentava-se hiperplásica em 86% (p = 0,0054). Observou-se presença de parasitas na epiderme em 30%, das quais 89% apresentavam ETE associada (p< 0,0001). Não houve relação estatisticamente significante entre a ocorrência de ETE e o aspecto clínico da lesão (p = 0,4231). Linfócitos, macrófagos e células gigantes do tipo corpo estranho foram as células predominantes do infiltrado (100% dos casos). Plasmócitos foram observados em 35%, neutrófilos em 15% e eosinófilos em 11% dos casos. Houve relação estatisticamente significante entre a ocorrência de ETE e presença de neutrófilos no infiltrado (p = 0,0016). Em 10% esteve presente reação exsudativa e 11% áreas de necrose isoladas. Células gigantes do tipo Langhans foram observadas em 59% das biópsias, corpos asteróides em 5%, células pseudo-Gaucher em 69% e fibrose em 96%. O infiltrado se estendia à derme reticular em todos os casos e para a derme profunda em 88% (52/59). Em 10% (6/59) dos casos houve disseminação do infiltrado para a gordura subcutânea, com encontro do parasita em um caso. Quanto à distribuição por idade, sexo e profissão dos pacientes, os dados foram superponíveis aos da literatura. A análise dos resultados, portanto, permitiu avaliar o perfil epidemiológico, clínico e histopatológico da doença, que diferiram, em alguns aspectos, dos achados classicamente descritos na literatura, especialmente em relação às características da epiderme, infiltrado inflamatório e localização das lesões. / Jorge Lobo‟s disease (JLD) or lacaziosis is a chronic, granulomatous skin and subcutaneous tissue infection caused by the fungus Lacazia loboi. Clinical lesions are generally polymorphous, often presenting with a keloid-like aspect, and most often involving ears or limbs. Histopathology remains the “gold standard” exam to reach diagnosis. Few clinical-pathological correlation studies on this disease are available to date. Our goal was to systematically review cases of JLD diagnosed at the dermatopathology laboratory of the Dermatology Service of the Federal University of Pará, Brazil, from 1967 to 2009. After a thorough chart review, we could retrieve demographic and clinical data, as well as histopathological features from each case studied. 59 biopsies from 45 patients were evaluated. The sample consisted of 37 men and eight women, with a mean age of 50 years. Most patients were agricultural workers (55%), of which 93% were males. Fifty-nine percent of the lesions showed a keloid-like appearance. Verrucous (8%), plaque (3%), gummatous (1%), and hyperchromatic macular (1%) lesions were less frequently observed. Most skin lesions occurred on the lower limbs (56%). Histopathologically, the stratum corneum showed hyperkeratosis in 71% of the biopsies, associated with parakeratosis in 37% and with orthokeratosis in 50%. Transepidermal elimination of parasites (TEP) was present in 36% of the cases in association with hyperkeratosis in 95% (p=0.0121) and with parakeratosis in 90% (p<0.0001). The epidermis showed a hyperplastic appearance in 58% of the specimens, was atrophic in 29%, normal in 12%, and ulcerated in 8% of them. There was a hyperplastic epidermis (86%, p=0.0054) in sites where TEP took place. We could also observe the presence of parasites in the epidermis in 30% of the biopsies, in which an association with TEP occurred in 89% (p<0.0001). There was no statistically significant relationship between the occurrence of TEP and the clinical aspect of the lesion (p=0.4231). Lymphocytes, macrophages and giant cells of the foreign-body type were predominant in the infiltrate, being observed in 100% of the cases. Plasma cells were seen in 35%, neutrophils in 15%, and eosinophils in 11% of the cases. There was a statistically significant relationship between the occurrence of TEP and the presence of neutrophil infiltration (p=0.0016). An exudative reaction pattern was present in 10% of the biopsies, and 11% exhibited focal areas of necrosis. Langhans giant cells were observed in 59% of the biopsies, and asteroid bodies in 5%. Pseudo-Gaucher cells were present in 69% of the cases, and fibrosis in 96%. The infiltrate showed extension to the reticular dermis in all cases, and to the deep dermis in 88%. A subcutaneous spread of the infiltrate occurred in 10% of the cases, with identification of parasites within the fat tissue in one of them. As for age distribution, sex and profession of the patients, the data overlapped those of the literature. The results allowed us to evaluate epidemiological, clinical and histopathological profiles of the disease, which in certain respects differed from the classically described ones of the literature, especially concerning characteristics of the epidermis, inflammatory cell infiltrate, and location of lesions.
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Imunopatogenia da interação entre acrófagos e/ou células de Langerhans e Lacazia loboiYAMANO, Suellen Sirleide Pereira 24 April 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014 / A lobomicose é uma infecção subcutânea crônica, granulomatosa, causada pela implantação traumática do fungo Lacazia loboi nos tecidos cutâneo e subcutâneo. Ocorre predominantemente na região Amazônica e atinge qualquer grupo populacional. Histologicamente, observa-se reação inflamatória crônica caracterizada por intensa
histiocitose e fibroplasia, abundante número de macrófagos, células gigantes multinucleadas
do tipo corpo estranho e presença de considerável número de células leveduriformes. Os
macrófagos são células fagocíticas que participam do reconhecimento e da resposta a
patógenos através da fagocitose, da apresentação de antígenos aos linfócitos T e da produção
de citocinas. As células de Langerhans (LC) são um grupo de Células dendríticas (CD)
derivadas da medula óssea situadas principalmente em uma camada suprabasal da epiderme.
Estudos envolvendo a interação fungo-hospedeiro na doença de Jorge Lobo são escassos.
Assim, Este estudo é um passo importante para o melhor entendimento da biologia e
patogenia do L. loboi, e para o estudo da imunopatologia da interação patógeno versus
hospedeiro desta doença emergente e pouco conhecida. O objetivo do presente trabalho foi
analisar a interação in vitro entre macrófagos peritoneais não ativados e/ou LC, isolados de
camundongos BALB/c, com L. loboi recém-isolado de pacientes com doença de Jorge Lobo,
bem como determinar os índices de infecção, fagocitose e fusão, e medir a produção das
citocinas TNF-α, IL-4, IL-6, IL-10 e IL-12. Os resultados demonstraram que L. loboi é
fagocitado por macrófagos, mas não por LC. O índice de infecção na interação entre
macrófagos e L. loboi foi semelhante à interação entre macrófagos, LC e L. loboi em todos os
tempos analisados. A média do número de fungos por macrófago também foi praticamente
igual entre as interações e ao longo do tempo, variando de 1,2 a 1,6 fungos/macrófagos. Não
houve a formação de células gigantes em macrófagos cultivados ou LC cultivadas
isoladamente e em nenhum dos co-cultivos. Não houve diferença significante na produção de
IL-4, IL-2 e IL-10 nas interações estudadas. Os níveis de TNF-α diminuem ao longo do
tempo na interação entre macrófagos e L. loboi, enquanto a adição de LC induz aumento da
produção de TNF-α, principalmente após 48 horas. LC modulam negativamente a produção
de IL-6 por macrófagos e L. loboi também inibem essa produção por macrófagos
isoladamente ou em co-cultivo com LC. L. loboi estimulam significativamente a produção de
IL-12 por macrófagos co-cultivados com LC, mas não em LC ou macrófagos isoladamente. / Lobomycosis is a chronic, granulomatous, fungal infection of the skin and
subcutaneous caused by the fungus Lacazia loboi. This mycosis occurs predominantly in
Amazon region and affect all populations groups. Histologically, there is a chronic
inflammatory reaction characterized by the intense fibroplastia and histiocytosis, abundant
number of macrophages, multinucleated giant cells and presence of large numbers of yeast.
Macrophages are phagocytic cells that participate in the recognition and response to
pathogens through phagocytosis, antigen presentation to T lymphocytes and cytokine
production. Langerhans cells (LC) are a group of dendritic cells (DC) derived from bone
marrow, which are located mainly in the suprabasal layer of the epidermis. Studies on hostfungal
interaction in Jorge Lobo's disease are scarce. Therefore, this study constitutes an
important step towards a better understanding of L. loboi biology and pathogenesis, enabling
in vitro culture of this organism endemic in Amazon region and study of their antigenic
properties, as well as new therapeutic approaches. The objective of this study was to analyze
the in vitro interaction between non-activated peritoneal macrophages and/or Langerhans cells
isolated from BALB/c mice and L. loboi, calculating infection, phagocytosis and cellular
fusion rates; also measuring the production of TNF, IL-4, IL-6, IL-10 and IL-12. Results
showed that L. loboi is phagocytosed by macrophages but not by LC. Phagocytosis and
infection rates in the interaction between macrophages and L. loboi was similar to interaction
between macrophages, Langerhans cells and L. loboi at all times analyzed. The mean number
of yeast cell per macrophage was almost equal among interactions and over time, with mean
variation from 1.2 to 1.6 yeast/macrophages. No giant cells formation in coculture studied. No
significant difference occurred in IL-4, Il-2 and IL-10 production between interactions
studied. TNF levels decrease in interaction between macrophages and L. loboi while adding
LC induces increased production of TNF-α, especially after 48 hours. LC negatively modulate
IL-6 production by macrophage and L. loboi also inhibits this production by macrophages
alone or cocultured with LC. L. loboi stimulated significantly IL-12 production by
macrophages co-cultured with LC, but not for LC alone or macrophages.
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Isolamento e cultivo in vitro do agente etiológico da Doença de Jorge Lobo: morfologia, fisiologia e genoma de Candida loboi sp. novCOSTA, Patricia Fagundes da 18 December 2015 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-03-22T12:43:50Z
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Previous issue date: 2015-12-18 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / FADESP - Fundação de Amparo e Desenvolvimento da Pesquisa / A Doença de Jorge Lobo é uma infecção crônica, granulomatosa, que se desenvolve após a implantação traumática do fungo na pele. Manifesta-se com lesões nodulares, verrucosas e/ou queloidiformes, localizadas principalmente nos membros inferiores e pavilhões auriculares. Doença prevalente na região Amazônica e, atualmente considerada como emergente, com casos novos em outros continentes em humanos e golfinhos. Pouco se conhece sobre o agente etiológico da doença de Jorge Lobo, principalmente pela impossibilidade do cultivo in vitro, dificultando a caracterização correta do agente. Este trabalho teve como objetivo isolar, cultivar e caracterizar cepas do agente etiológico da doença de Jorge Lobo provenientes de pacientes atendidos na Unidade de Referência em Dermatologia Sanitária do Estado do Pará Dr. Marcello Candia, Marituba no estado do Pará. Durante alguns anos foram acompanhados 23 pacientes, a maioria lavradores do sexo masculino, entre 14 e 80 anos de idade, com material biológico coletado por raspado dérmico e biópsia, para confirmação do diagnóstico pelo exame micológico direto e histopatologia, com posterior tratamento. O material biológico coletado foi processado para o isolamento, com a obtenção de células leveduriformes características do agente etiológico da doença de Jorge Lobo após 7 a 14 dias em meio RPMI com a enzima dispase II. Depois de 2 a 6 meses em RPMI (5% CO2, 37ºC) observamos a fragmentação das células-mãe provenientes das lesões e a presença de células leveduriformes, variando de 1 a 7 μm de diâmetro. A partir deste momento, foi possível manter as cepas do agente etiológico da doença de Jorge Lobo em meio líquido RPMI ou em ágar Sabouraud-dextrose à temperatura ambiente, onde formaram colônias pastosas, branco-acastanhadas, cerebriformes, por vezes lanuginosas. Células destas cepas foram analisadas por diferentes técnicas de microscopia óptica e eletrônica, bioquímicas e genéticas, culminando com a descrição do genoma da cepa de um paciente, logo após o isolamento enzimático e antes da diferenciação em cultura, definindo aseguinte identificação taxonômica:Eukaryota; Fungi; Dikarya; Ascomycota; Saccharomycotina; Saccharomycetes; Saccharomycetales; Debaryomycetaceae; Candida/Lodderomyces clade; Candida; Candida sp. LDI48194. A apresentação de características clínicas peculiares, associada a aspectos morfológicos únicos, propriedades fisiológicas e genéticas, que não permitem a definição de uma espécie já identificada, indicam que o agente da doença de Jorge Lobo é, na realidade, uma nova espécie, para a qual propomos a nomenclatura de Candida loboi. / Jorge Lobo’s disease is a chronic granulomatous infection developing after traumatic implantation of the fungus in the skin. It presents with nodular, verrucous or keloid-like lesions mainly on legs and ears. The highest prevalence is at Amazon Region and it has been considered an emergent disease, presenting new cases on other continents in both, humans and dolphins. Little is known about L. loboi, and the absence of in vitro culture impairs the correct characterization of the fungus. This work had as the main goal to isolate, culture and characterize strains of the etiological agent of Jorge Lobo´s disease, obtained from patients attended at the Dr Marcello Candia Reference Unit in Sanitary Dermatology of the State of Pará, in Marituba, Pará, Brazil. During many years 23 patients were diagnosed and followed by our team. Most of them were male farmers, with age varying from 14 to 80 years-old. After biopsy of the lesion for confirming the diagnosis, the patients initiated treatment and the material was processed with dispase II at liquid medium RPMI, 37º C, 5% CO2 for 1-2 weeks to isolate yeast cells from human tissue. After 2-6 months in the medium, we observed fragmentation of mother cells and the presence of new yeast cells with diameter varying from 1 to 7μm. From that moment, it was possible to grow the strains in different liquid or solid mediums at 37º C or RT, where creamy, whitish cerebriform, sometimes hairy colonies were observed. Cells from those strains were analyzed by different techniques of optical and electron microscopy, biochemistry and genetics, ending with the description of the genome of one patient just after isolation of the fungal cells from the lesional skin, defining the following taxonomic identification: Eukaryota; Fungi; Dikarya; Ascomycota; Saccharomycotina; Saccharomycetes; Saccharomycetales; Debaryomycetaceae; Candida/Lodderomyces clade; Candida; Candida sp. LDI48194. The peculiar clinical presentation associated to unique morphological, physiological and genetic characteristics that do not permit the definition of a known species indicate that the etiological agent of Jorge Lobo’s disease is a new species, for which we propose to use the name Candida loboi.
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