Mikania smilacina DC vulgarmente denominada de guaco-de-sete-sangrias, utilizado como antiinflamatório buco-dentário, no tratamento da hipertensão, de urticária e como diurético, foi caracterizada farmacognosticamente. A morfologia externa e interna da planta e da droga com ela elaborada foi estudada detalhadamente. Desenhos e fotografias das estruturas analisadas ilustram o trabalho. O estudo químico foi executado isolando-se e identificando-se substâncias presentes no extrato hexânico preparado a partir da droga. Assim, foi constatada a presença de ácido caurenóico, ácido pimaradiênico e de cumarina no referido extrato. A análise cromatográfica em fase gasosa seguida de identificação dos componentes por espectroscopia de massa acoplada a banco de dados permitiu verificar a presença dos seguintes componentes na fração óleo essencial: alfa-pineno; sabineno;limoneno; alcool alfa 4-dimetil benzílico; derivado dimetilado do estireno; terpinoleno; biciclo(6.1.0) nonano, 9-(1-metiletilideno); ciclo-hexeno 1,5,5-trimetil-6-(2-propenilideno); ciclo-hexeno, 1-(propinil); 2H-1,6 benzoxazocin- -(6H)ona, 3,4-dihidro; 2(1A) azulenona, 4,5,6,7,8,8a-hexahidro-8a-metil; etanona, 1 octahidro-3-hidroxi-7a-metil-5-(1metil- etenil); 2,6,10 dodecatrien-1-ol,3,7,11-trimetil; 1- heptanol, 2 propil; 1-noneno, 4,6,8- trimetil; espiro(4,5) dec-7-eno,1,8-dimetil-4-(1-metiletenil); 3- metil - 1,4-heptadieno; metilester do ácido 2-metil octanóico; 2,4,4-trimetil hexano; ciclopentano, 2-metil-1-metileno-3-(1-metiletenil); 2-metil, undecano; 4-metil-2-propil 1-pentanol; 3-etil, 3-pentanol, octadecano, N-etil acetamida, Hexatriacontano, 2-metil dodecano; 3-3-dimetil heptano.A quantificação da cumarina por cromatografia em camada delgada seguida de densitometria do extrato fluido foi também executada o que permitiu saber que a concentração desta substância no referido extrato varia entre 0,032a 0,035% m/v. O perfil cromatográfico do extrato fluido foi melhor caracterizado quando empregamos hidróxido de sódio a 20% como revelador. A atividade anticoagulante, antiinflamatória, toxicidade subaguda foi também executada. A planta parece não possuir atividade anticoagulante e antiinflamatória possuindo baixa atividade antimicrobiana para Staphylococcus aureus. Antimicrobiana e o ensaio de toxicidade subaguda do extrato revelou ausência de sinais de intoxicação nas doses de até 100mg/kg. / Mikania smilacina DC, which is commonly known as \"guaco-de-sete-sangrias\",was described pharmacognostically. It has been applied in folk medicine as an antiinflamatory teething agent, in treatment of hypertension, urticaria and for its diuretic properties. The external and internal plant and drug morphology has been studied here in detail. Some illustration is made with pictures and photos of many structures. Chemical studywas made isolating and identifying components of the hexanic extract prepared from the plant. In this manner a kaurenoic acid, a pimaradienic acid.and coumarin has been found in the extract of the plant. Gas chromatography analysis followed by the identification of the components by mass spectroscopy connected to a databank detected the presence of the following components: alfa-pineno; sabineno;limoneno; alcool alfa 4-dimetil benzílico; derivado dimetilado do estireno; terpinoleno; biciclo(6.1.0) nonano, 9-(1- metiletilideno); ciclo-hexeno1,5,5-trimetil-6-(2-propenilideno); ciclo-hexeno,1- (propinil); 2H-1,6 benzoxazocin-5-(6H)ona, 3,4-dihidro; 2(1A) azulenona, 4,5,6,7,8,8a-hexahidro-8a-metil; etanona, 1 octahidro-3-hidroxi-7a-metil-5- (1metil- etenil); 2,6,10 dodecatrien-1-ol,3,7,11-trimetil; 1- heptanol, 2 propil; 1-noneno, 4,6,8- trimetil; espiro(4,5) dec-7-eno,1,8-dimetil-4-(1-metiletenil); 3-metil - 1,4-heptadieno; metilester do ácido 2-metil octanóico; 2,4,4-trimetil hexano; ciclopentano, 2-metil-1-metileno-3-(1-metiletenil); 2-metil, undecano; 4-metil-2-propil 1-pentanol; 3-etil, 3-pentanol, octadecano, N-etil acetamida, Hexatriacontano, 2-metil dodecano; 3-3-dimetil heptano. Quantification of coumarin by thin layer chromatography followed by densitometry of the fluid extract has also been made and the concentration of the substance in the plant varies from 0,032 to 0,035 % m/v. The chromatographic profile of the fluid extract was better characterized when using a 20% sodium hydroxide solution as the revealer reagent. The anticoagulant, antiinflamatory and antimicrobial activity as well as its subagude toxicity has also been tested. The plant does not seem to present antiinflamatory or anticoagulant activity, and only low antimicrobial activity against Staphyloccocus aureus. The subagude toxicity assay of the extract showed no intoxication signals when using doses up to 100mg/kg.

Mikania smilacina DC vulgarmente denominada de guaco-de-sete-sangrias, utilizado como antiinflamatório buco-dentário, no tratamento da hipertensão, de urticária e como diurético, foi caracterizada farmacognosticamente. A morfologia externa e interna da planta e da droga com ela elaborada foi estudada detalhadamente. Desenhos e fotografias das estruturas analisadas ilustram o trabalho. O estudo químico foi executado isolando-se e identificando-se substâncias presentes no extrato hexânico preparado a partir da droga. Assim, foi constatada a presença de ácido caurenóico, ácido pimaradiênico e de cumarina no referido extrato. A análise cromatográfica em fase gasosa seguida de identificação dos componentes por espectroscopia de massa acoplada a banco de dados permitiu verificar a presença dos seguintes componentes na fração óleo essencial: alfa-pineno; sabineno;limoneno; alcool alfa 4-dimetil benzílico; derivado dimetilado do estireno; terpinoleno; biciclo(6.1.0) nonano, 9-(1-metiletilideno); ciclo-hexeno 1,5,5-trimetil-6-(2-propenilideno); ciclo-hexeno, 1-(propinil); 2H-1,6 benzoxazocin- -(6H)ona, 3,4-dihidro; 2(1A) azulenona, 4,5,6,7,8,8a-hexahidro-8a-metil; etanona, 1 octahidro-3-hidroxi-7a-metil-5-(1metil- etenil); 2,6,10 dodecatrien-1-ol,3,7,11-trimetil; 1- heptanol, 2 propil; 1-noneno, 4,6,8- trimetil; espiro(4,5) dec-7-eno,1,8-dimetil-4-(1-metiletenil); 3- metil - 1,4-heptadieno; metilester do ácido 2-metil octanóico; 2,4,4-trimetil hexano; ciclopentano, 2-metil-1-metileno-3-(1-metiletenil); 2-metil, undecano; 4-metil-2-propil 1-pentanol; 3-etil, 3-pentanol, octadecano, N-etil acetamida, Hexatriacontano, 2-metil dodecano; 3-3-dimetil heptano.A quantificação da cumarina por cromatografia em camada delgada seguida de densitometria do extrato fluido foi também executada o que permitiu saber que a concentração desta substância no referido extrato varia entre 0,032a 0,035% m/v. O perfil cromatográfico do extrato fluido foi melhor caracterizado quando empregamos hidróxido de sódio a 20% como revelador. A atividade anticoagulante, antiinflamatória, toxicidade subaguda foi também executada. A planta parece não possuir atividade anticoagulante e antiinflamatória possuindo baixa atividade antimicrobiana para Staphylococcus aureus. Antimicrobiana e o ensaio de toxicidade subaguda do extrato revelou ausência de sinais de intoxicação nas doses de até 100mg/kg. / Mikania smilacina DC, which is commonly known as \"guaco-de-sete-sangrias\",was described pharmacognostically. It has been applied in folk medicine as an antiinflamatory teething agent, in treatment of hypertension, urticaria and for its diuretic properties. The external and internal plant and drug morphology has been studied here in detail. Some illustration is made with pictures and photos of many structures. Chemical studywas made isolating and identifying components of the hexanic extract prepared from the plant. In this manner a kaurenoic acid, a pimaradienic acid.and coumarin has been found in the extract of the plant. Gas chromatography analysis followed by the identification of the components by mass spectroscopy connected to a databank detected the presence of the following components: alfa-pineno; sabineno;limoneno; alcool alfa 4-dimetil benzílico; derivado dimetilado do estireno; terpinoleno; biciclo(6.1.0) nonano, 9-(1- metiletilideno); ciclo-hexeno1,5,5-trimetil-6-(2-propenilideno); ciclo-hexeno,1- (propinil); 2H-1,6 benzoxazocin-5-(6H)ona, 3,4-dihidro; 2(1A) azulenona, 4,5,6,7,8,8a-hexahidro-8a-metil; etanona, 1 octahidro-3-hidroxi-7a-metil-5- (1metil- etenil); 2,6,10 dodecatrien-1-ol,3,7,11-trimetil; 1- heptanol, 2 propil; 1-noneno, 4,6,8- trimetil; espiro(4,5) dec-7-eno,1,8-dimetil-4-(1-metiletenil); 3-metil - 1,4-heptadieno; metilester do ácido 2-metil octanóico; 2,4,4-trimetil hexano; ciclopentano, 2-metil-1-metileno-3-(1-metiletenil); 2-metil, undecano; 4-metil-2-propil 1-pentanol; 3-etil, 3-pentanol, octadecano, N-etil acetamida, Hexatriacontano, 2-metil dodecano; 3-3-dimetil heptano. Quantification of coumarin by thin layer chromatography followed by densitometry of the fluid extract has also been made and the concentration of the substance in the plant varies from 0,032 to 0,035 % m/v. The chromatographic profile of the fluid extract was better characterized when using a 20% sodium hydroxide solution as the revealer reagent. The anticoagulant, antiinflamatory and antimicrobial activity as well as its subagude toxicity has also been tested. The plant does not seem to present antiinflamatory or anticoagulant activity, and only low antimicrobial activity against Staphyloccocus aureus. The subagude toxicity assay of the extract showed no intoxication signals when using doses up to 100mg/kg.

Mikania glomerata Sprengel e Mikania laevigata Schultz Bip, (Asteraceae, Eupatorieae, Mikaniinae), popularmente conhecidas como guaco, têm sido muito estudadas devido aos empregos medicinais das mesmas. São usadas para o tratamento da febre, reumatismo, gripe e doenças do trato respiratório. As monografias de ambas espécies encontram-se na Farmacopéia Brasileira. M. laevigata muitas vezes é confundida com M. glomerata, sendo comercializada como tal, ocorrendo principalmente no sul do país, onde este vegetal tem sua maior área de dispersão. Apesar de seu grande uso medicinal, sua fitoquímica clássica ainda tem se mostrado pouco estudada. Foi proposto neste trabalho o estudo fitoquímico das folhas secas de M. laevigata, sendo isoladas e identificadas por técnicas espectroscópicas as substâncias lupeol, taraxerol, cumarina, ácido orto-[(5-hidroxi)-cis-cinamoila]-transcinâmico, siringaldeído, trans-melilotosido, cis-melilotosido, 3,5-dicafeoilquinato de metila, 3,3,5 triidroxi 4,6,7- trimetoxiflavona, 3-O-b-D-glicosil-patuletina, 3-O-b-D-glicosilquercetina, 3-O-b-D-glicosil-caempferol, adenosina, ent-3a-O-b-D-glicopiranosídeo,16a,17- diidroxicaurano, e ácido 2b-[[3-O-(3-hidroxi-1-oxo-3-fenilpropil)-2-(3- metil-1- butiriloxi) - 4- O-(a-L-ramnopiranosil)-b- D-glicopiranosil] oxi]-13,15a-diidroxi-19-norcaur-16-en-18- óico. Além desses, identificou-se por GC-MS as substâncias ácido beierenóico, ácido caurenóico, óxido do cariofileno, espatulenol, diidrocumarina, e o acetato de lupeol. Foi proposta também a avaliação química dos extratos da lavagem foliar de M. glomerata e M. laevigata. A análise qualitativa desses extratos nos permitiu identificar como substâncias majoritárias, cumarina e lupeol, em M. laevigata, e lupeol e uma substância não identificada em M. glomerata. A padronização do método analítico em GC-MS permitiu a diferenciação das duas espécies, sendo utilizadas amostras de folhas de guaco de diversas regiões do país, e proposta suas identidades. / Mikania glomerata Sprengel and Mikania laevigata Schultz Bip, (Asteraceae, Eupatorieae, Mikaniinae), commonly known as guaco, have been studied because of their medicinal activities. They are used to treat fever, rheumatism, flu and respiratory tract diseases. The monographies of both species are found in Brazilian Pharmacopoeia. For many times, M. laevigata is confused with M. glomerata, and it has been sold as the last. This occurs mainly at the south of this country, where this plant has been found. In spite of the important medicinal uses from M. laevigata, the literature has few studies about its phytochemistry. In this work, the phytochemical study from the dried leaves of M. laevigata was proposed and the compounds lupeol, taraxerol, coumarin, orto-[(5-hydroxy)-cis-cinnamoyl]-transcinnamic acid, syringaldehyde, trans-melilotoside, cis-melilotoside, methyl 3,5-di-O-caffeoyl quinate, 3,3,5-trihydroxy-4,6,7-trimethoxyflavone, patuletin 3-O-b-D-glucopyranoside, quercetin 3-O-b-D-glucopyranoside, kaempferol 3-O-b-D-glucopyranoside, adenosine, entkaurane- 3a,16b,17 triol 3-O-b-D-glucopyranoside and 19-norkaur-16-ene-18-oic acid, 2b- [[3-O-(3-hydroxy -1-oxo -3 phenypropyl ) - 2 - ( 3- methyl - 1- oxobutyl - 4 - O - (a - Lramnopyranosyl) - b- D-glucopyranosyl]oxy]-13,15a-hidroxy were isolated and identified by spectroscopic methods. The compounds beyerenoic acid, kaurenoic acid, caryophyllene oxide, spathulenol dihydrocoumarin, and lupeol acetate were also identified, by GC-MS. It was proposed the chemical evaluation from the leaves rinse extracts of M glomerata and M. laevigata too. In the quantitative analysis of these extracts, coumarin and lupeol were identified as the main compounds of M. laevigata and lupeol and an unidentified compound of M. glomerata. The standardization of the analytical method by GC-MS allowed to differentiate one species from the other. Thus, leaves of guaco from many places of this country were used, and their identities were proposed.

Mikania glomerata Sprengel e Mikania laevigata Schultz Bip, (Asteraceae, Eupatorieae, Mikaniinae), popularmente conhecidas como guaco, têm sido muito estudadas devido aos empregos medicinais das mesmas. São usadas para o tratamento da febre, reumatismo, gripe e doenças do trato respiratório. As monografias de ambas espécies encontram-se na Farmacopéia Brasileira. M. laevigata muitas vezes é confundida com M. glomerata, sendo comercializada como tal, ocorrendo principalmente no sul do país, onde este vegetal tem sua maior área de dispersão. Apesar de seu grande uso medicinal, sua fitoquímica clássica ainda tem se mostrado pouco estudada. Foi proposto neste trabalho o estudo fitoquímico das folhas secas de M. laevigata, sendo isoladas e identificadas por técnicas espectroscópicas as substâncias lupeol, taraxerol, cumarina, ácido orto-[(5-hidroxi)-cis-cinamoila]-transcinâmico, siringaldeído, trans-melilotosido, cis-melilotosido, 3,5-dicafeoilquinato de metila, 3,3,5 triidroxi 4,6,7- trimetoxiflavona, 3-O-b-D-glicosil-patuletina, 3-O-b-D-glicosilquercetina, 3-O-b-D-glicosil-caempferol, adenosina, ent-3a-O-b-D-glicopiranosídeo,16a,17- diidroxicaurano, e ácido 2b-[[3-O-(3-hidroxi-1-oxo-3-fenilpropil)-2-(3- metil-1- butiriloxi) - 4- O-(a-L-ramnopiranosil)-b- D-glicopiranosil] oxi]-13,15a-diidroxi-19-norcaur-16-en-18- óico. Além desses, identificou-se por GC-MS as substâncias ácido beierenóico, ácido caurenóico, óxido do cariofileno, espatulenol, diidrocumarina, e o acetato de lupeol. Foi proposta também a avaliação química dos extratos da lavagem foliar de M. glomerata e M. laevigata. A análise qualitativa desses extratos nos permitiu identificar como substâncias majoritárias, cumarina e lupeol, em M. laevigata, e lupeol e uma substância não identificada em M. glomerata. A padronização do método analítico em GC-MS permitiu a diferenciação das duas espécies, sendo utilizadas amostras de folhas de guaco de diversas regiões do país, e proposta suas identidades. / Mikania glomerata Sprengel and Mikania laevigata Schultz Bip, (Asteraceae, Eupatorieae, Mikaniinae), commonly known as guaco, have been studied because of their medicinal activities. They are used to treat fever, rheumatism, flu and respiratory tract diseases. The monographies of both species are found in Brazilian Pharmacopoeia. For many times, M. laevigata is confused with M. glomerata, and it has been sold as the last. This occurs mainly at the south of this country, where this plant has been found. In spite of the important medicinal uses from M. laevigata, the literature has few studies about its phytochemistry. In this work, the phytochemical study from the dried leaves of M. laevigata was proposed and the compounds lupeol, taraxerol, coumarin, orto-[(5-hydroxy)-cis-cinnamoyl]-transcinnamic acid, syringaldehyde, trans-melilotoside, cis-melilotoside, methyl 3,5-di-O-caffeoyl quinate, 3,3,5-trihydroxy-4,6,7-trimethoxyflavone, patuletin 3-O-b-D-glucopyranoside, quercetin 3-O-b-D-glucopyranoside, kaempferol 3-O-b-D-glucopyranoside, adenosine, entkaurane- 3a,16b,17 triol 3-O-b-D-glucopyranoside and 19-norkaur-16-ene-18-oic acid, 2b- [[3-O-(3-hydroxy -1-oxo -3 phenypropyl ) - 2 - ( 3- methyl - 1- oxobutyl - 4 - O - (a - Lramnopyranosyl) - b- D-glucopyranosyl]oxy]-13,15a-hidroxy were isolated and identified by spectroscopic methods. The compounds beyerenoic acid, kaurenoic acid, caryophyllene oxide, spathulenol dihydrocoumarin, and lupeol acetate were also identified, by GC-MS. It was proposed the chemical evaluation from the leaves rinse extracts of M glomerata and M. laevigata too. In the quantitative analysis of these extracts, coumarin and lupeol were identified as the main compounds of M. laevigata and lupeol and an unidentified compound of M. glomerata. The standardization of the analytical method by GC-MS allowed to differentiate one species from the other. Thus, leaves of guaco from many places of this country were used, and their identities were proposed.

Resumo: O objetivo com este trabalho foi realizar um estudo farmacocinético da cumarina (CUM), 7-hidroxicumarina (7-HC), ácido o-cumárico (AOC) e ácido caurenóico (CAU) em voluntários sadios. Para quantificação em plasma dessas substâncias, dois métodos por CLAE-EM/EM foram desenvolvidos e validados. A pré-purificação dos analitos foi realizada por meio de extração líquido-líquido com tert-butil metil éter e através da técnica de precipitação de proteínas com acetonitrila. A cumarina, a 7-hidroxicumarina e o padrão interno (PI) 6-metilcumarina foram monitorados no modo positivo de ionização enquanto que os ácidos o-cumárico, caurenóico, isoferúlico (PI) e a prednisona (PI) no modo negativo de ionização. A separação cromatográfica foi realizada em uma coluna XBridge Shield RP18 150 x 2,1 mm (tamanho de partícula 5 ?m). Para o modo positivo de ionização a fase móvel foi composta de uma mistura de acetonitrila/água/ácido fórmico (65:35:0.05, v/v/v) eluída em modo isocrático. Para o modo negativo de ionização a fase móvel foi composta de um gradiente entre água e acetonitrila/água (95:5, v/v), ambos contendo 1 mM de formiato de amônio. Os resultados de validação mostraram que os novos métodos são seletivos e livres de efeito residual e de matriz. Os baixos limites de detecção (1,5 ng/mL para CAU, 3,0 ng/mL para CUM e 2,5 ng/mL para 7-HC e AOC) e de quantificação (5,0 ng/mL para CAU, 7,5 ng/mL para 7-HC e 10,0 ng/mL para AOC e CUM) indicaram que os novos métodos são muito sensíveis. As curvas de calibração apresentaram uma excelente correlação (r ? 0,99) nas faixas de 10,0 - 1500 ng/mL para CUM, 7,5 - 1000 ng/mL para 7-HC, 10,0 - 1000 ng/mL para AOC e 5,0 - 750 ng/mL para AOC. Nos diferentes níveis de concentração as variações de precisão e exatidão foram < 10,2%. A recuperação dos analitos e PI (> 70%) foi obtida com elevada precisão (CV < 5,0%). Sob as condições normais de trabalho, uma excelente estabilidade dos analitos foi observada tanto em plasma quanto em solução. Os métodos foram aplicados na análise da CUM, 7-HC, AOC e CAU no plasma de voluntários que receberam via oral o xarope de guaco, ou xarope de guaco fortificado com CUM. O estudo conduzido com 60 mL de xarope de guaco, em dose única, monstrou que a quantidade destas substâncias presentes no xarope não proporciona níveis plasmáticos suficientes para serem detectados pelos métodos bioanalíticos validados. A administração de 60 mL de xarope fortificado com 1500 mg de cumarina resultou em níveis plasmáticos de CUM, 7-HC e AOC suficientes para a determinação de seus parâmetros farmacocinéticos. Neste estudo foi possível verificar que a eliminação de AOC é dependente da sua taxa de formação e que AOC é um dos principais metabolitos biodisponíveis da CUM. Esses resultados reforçam a necessidade da condução de novos estudos para avaliar o potencial tóxico e terapêutico do AOC. O estudo também demonstrou que os níveis plasmáticos de 7-HC são extremamente baixos e o seu perfil farmacocinético sugere significativo metabolismo sequencial hepático com baixo acesso à circulação sistêmica. Esse estudo ainda reuniu evidências de que a administração do xarope de guaco na dose recomendada não proporciona níveis plasmáticos suficientes de CUM, 7-HC e AOC para o efeito broncodilatador esperado. Esse resultado sugere que estudos clínicos devem ser realizados para validar a eficácia deste fitoterápico. Só assim será possível garantir os benefícios do guaco, ou quem sabe impedir que recursos públicos sejam alocados para compra de medicamentos que não trazem nenhum benefício à população.

Universiẗat, Diss.--Freiburg/Br., 2000.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseCD.pdf: 6879107 bytes, checksum: c167cda73860ef0c5e5b15af0e2e7280 (MD5) Previous issue date: 2006-08-01 / The use of herbal medicines in the Brazilian market has increased in the last few decades. Therefore, the quality control for herbal products, as well as traditional medicines, is extremely important and for both: the manufactured products and the raw material. However, to guarantee the product s quality implies in an increase of the process costs in an industry. Currently, the quality of herbal extracts is predicted by analysis of selected marker compounds, which are often characteristic chemicals of a specific herb, but that many times do not present any relation with bioactivity. As a consequence, the marker-based approach is an incomplete and unsatisfactory method for quality control of herbal medicines In order to cope with this problem, current developments in improving sensitivity and analytical capacity of known techniques, had made possible the plant s complex extract evaluation. The present work describes an analytical methodology for the phytomedicines catuaba, espinheira-santa and guaco, based on the metabolic profile approach, where the Nuclear Magnetic Resonance techniques, as well as the High Performance Liquid Chromatography, are employed to obtain a fingerprinting of these herbal medicines. Nevertheless, due to the complex spectral data profile (1H spectra and chromatograms) evaluation it was necessary to employ chemometrics. These multivariate methods made possible to extract some relevant information and to prove the authenticity of the analyzed commercial samples. The commercial catuaba samples analysis by HR-MAS NMR/ chemometrics showed be more efficient, when compared with liquid NMR, indicating that the species sold as the phytomedicine catuaba is Trichillia catigua. Whereas, the results obtained for espinheira-santa showed an opposite situation pointing out that the efficiency of the HR-MAS is correlated with the physiological constitution of the plant material analyzed. Beside NMR results, HPLC analysis showed that the majority of the espinheira-santa commercial samples do not employ Maytenus ilicifolia species. The guaco results obtained by both, NMR and HPLC techniques were inconclusive needing the use of a complementary technique. Therefore, the present work also describes the use of the High Performance Liquid Chromatography coupling with Abstract Tandem Mass Spectrometry, by means of SRM experiments, to evaluate some commercial guaco samples. This technique provides the detection of the coumarin 1,2-benzopyrone in all the analyzed samples, due to the SRM high sensitivity, thus certifying its authenticity. The results obtained by Nuclear Magnetic Resonance, High Performance Liquid Chromatography and chemometrics, proved to be valuable tools for the evaluation of complex phytomedicines matrix. In specific cases, where high sensitivity in the analytical method is required, Mass Spectrometry can be used as an additional technique. / A utilização dos fitoterápicos no mercado nacional tem se tornado crescente nas últimas décadas. Desse modo, o controle de qualidade para os produtos de origem vegetal, assim como para os medicamentos tradicionais, é de extrema importância; e não só para o produto tecnologicamente acabado, como também para sua matéria-prima. Contudo, garantir a qualidade de um produto implica em um aumento de custos para as indústrias. Atualmente, uma das maiores práticas para a padronização das ervas baseia-se na identificação de marcadores químicos, característicos para as espécies, mas que muitas vezes não apresentam qualquer relação com sua atividade biológica. Assim sendo, essa abordagem se mostra incompleta, ou muitas vezes, insatisfatória para o controle de qualidade desse tipo de medicamento. Para contornar esse problema recentes desenvolvimentos, principalmente no aumento da sensibilidade e na capacidade analítica das técnicas existentes, tornaram possível a avaliação de extratos de plantas complexos em sua totalidade. O presente trabalho descreve uma metodologia de análise para os fitofármacos catuaba, espinheira-santa e guaco, fundamentada na abordagem analítica conhecida como metabolic profile, onde a Ressonância Magnética Nuclear, assim como a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, são empregadas para a obtenção do fingerprinting desses fitomedicamentos. Entretanto, os dados gerados (espectros de 1H e cromatogramas) apresentaram um perfil muito complexo sendo então necessária a utilização da quimiometria para sua avaliação. O emprego de métodos multivariados possibilitou à extração de informações relevantes, assim como, a constatação da autenticidade das amostras comerciais analisadas. O emprego da RMN de HR-MAS, juntamente com a quimiometria, na análise de amostras comerciais de catuaba, se mostrou mais eficiente quando comparado a RMN de líquidos, indicando que a espécie mais comercializada como o fitofármaco é a Trichillia catigua. Entretanto, os resultados obtidos para a espinheira-santa foram contrários, evidenciando a limitação da HR-MAS no que diz respeito à constituição fisiológica do material analisado. Adicionalmente a RMN, a utilização da CLAE Resumo possibilitou verificar que a maioria das amostras comerciais de espinheira-santa não utiliza a espécie Maytenus ilicifolia em sua formulação. Já para o fitofármaco guaco os resultados obtidos, tanto com a RMN como com a CLAE, se mostraram contraditórios, sendo necessária a utilização de uma outra técnica analítica complementar. Assim sendo, o trabalho também descreve a utilização do acoplamento da CLAE com a Espectrometria de Massas Tandem, através dos experimentos de SRM, na avaliação de extratos de amostras comerciais de guaco. O emprego dessa técnica permitiu a detecção da cumarina 1,2-benzopirona em todas as amostras analisadas, devido à sua elevada sensibilidade, atestando assim suas autenticidades. Portanto, através dos resultados obtidos no desenvolvimento deste trabalho, pôde-se concluir que a Ressonância Magnética Nuclear, assim como a CLAE, aliada a Quimiometria, apresentam um grande potencial em estudos que visam a avaliação de matrizes complexas, como os medicamentos fitoterápicos. Em casos específicos, onde uma maior sensibilidade no método analítico se faz necessária, a Espectrometria de Massas pode ser empregada de forma complementar.

Orientadora : Profª. Drª. Tomoe Nakashima / Co-orientadora : Profª. Drª. Jane Manfron Budel / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 25/02/2015 / Inclui referências : fls. 93-103 / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: Mikania micrantha Kunth pertence à família Asteraceae, que se destaca pela vasta quantidade de espécies vegetais usadas como medicinais. O Brasil conta com cerca de 198 espécies de Mikania, comumente conhecidas como guaco pela população e utilizadas por suas propriedades antimicrobianas, antiprotozoárias, antivirais e antiinflamatórias. Entretanto as diferentes espécies de Mikania são muito semelhantes entre si, podendo ocorrer uma confusão durante sua utilização. Além disso, podem ocorrer adulterações e falsificações no que se refere a droga vegetal. O objetivo deste trabalho foi determinar morfo-anatomicamente e quimicamente o caule e folha de Mikania micrantha, a fim de elucidar características que possam ser utilizadas para identificar esta espécie medicinal, bem como diferenciá-la das demais espécies. Os ensaios anatômicos foram desenvolvidos por técnicas frequentes em microscopia fotônica e microscopia eletrônica de varredura. Para a determinação dos metabólitos secundários foram utilizadas metodologias usuais de extração e caracterização dos mesmos. As folhas são simples, com formato ovado-deltoide, base cordada, ápice acuminado. As margens são grosseiramente denteadas, levemente crenadas e glabras em ambos os lados. O pecíolo mede 3-7 cm de comprimento e a filotaxia é oposta. Em vista frontal, as paredes celulares são onduladas, com paredes anticlinais relativamente finas em ambos os lados. Estômatos anomocíticos são encontrados em ambas as superfícies e estão localizados no mesmo nível das células epidérmicas. No entanto, poucos são os estômatos na face adaxial. Em transecção, a epiderme é unisseriada ao longo da lâmina de foliar e revestida com uma fina cutícula lisa em ambos os lados. Vários tricomas foram encontrados na superfície foliar. Desses tricomas, os glandulares são do tipo capitado biseriado e unisseriados não capitados filamentosos curvos. Os tricomas tectores, com formato cônico, unisseriado e composto. Com relação aos testes fitoquímicos M. micrantha apresentou reação positiva para flavonoides, cumarinas, iridoides, esteroides e/ou triterpenoides, heterosídeos antociânicos e saponínicos, taninos e compostos aromáticos. De acordo com as características encontradas, espera-se contribuir para a identificação desse táxon e diferenciação das demais espécies desse grupamento vegetal. Palavras-chave: Mikania micranta, Asteraceae, morfoanatomia, fitoquímica. / Abstract: Mikania micrantha Kunth belongs to the Asteraceae family, noted for its vast amount of plant species used in traditional medicine. Brazil has about 198 species, commonly known as guaco the population and used for its antimicrobial properties, antiprotozoal, antiviral and anti-inflammatory. However Mikania different species are very similar to each other, so offer a confusion may occur during use, in addition, alteration and forgery can occur with respect to the herbal drug. The objective of this study was to determine morphological and anatomically and chemically Mikania micrantha sheet and in order to elucidate features that can be used to identify this medicinal species, and distinguish it from other species. The anatomical studies were developed by common techniques in light microscopy and scanning electron microscopy. For the determination of secondary metabolites usual extraction methods were used and characterization thereof. The leaves are simple, with ovatedeltoid format, cordate base, acuminate apex. The margins are coarsely toothed, slightly crenades and glabrous on both sides. Petiole measures 3-7 cm in length and is opposite phyllotaxis. In front view, the cell walls are corrugated, with relatively thin walls anticlines on both sides. Anomocytic stomata are found on both surfaces and are located at the same level of epidermal cells. However, few stomata on the adaxial surface. In transect the skin uniseriated along the leaf blade and coated with a thin cuticle smooth on both sides. Several trichomes were found on the leaf surface. These trichomes, glandular are the type capitate biseriate and uniseriate not capitated filamentous curved. The non-glandular trichomes, with conical shape, uniseriate and compound. Regarding the phytochemical tests M. micrantha showed positive reaction to flavonoids, coumarins, iridoids, steroids and / or triterpenoids, anthocyanin glycosides and saponinis, tannins and aromatic compounds. According to the characteristics found, is expected to contribute to the identification of this taxon and differentiation from other species of this plant grouping. Keywords: Mikania micrantha, Asteraceae, morphoanatomy, phytochemistry.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-02-22T16:58:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 938895 bytes, checksum: 382a06e0b19f8a91aa1a4772c2582330 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-22T16:58:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 938895 bytes, checksum: 382a06e0b19f8a91aa1a4772c2582330 (MD5) Previous issue date: 2004-02-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da temperatura de secagem (ar ambiente e ar aquecido a 40, 50, 60, 70 e 80 oC) no teor e na composição dos óleos essenciais de guaco e hortelã-comum, e também na cumarina do guaco. Para a secagem das espécies medicinais foi utilizado um secador de bandejas a gás (GLP). O teor e a composição dos óleos essenciais extraídos de cada espécie, depois de submetida à secagem, foi comparado com os valores obtidos da planta fresca (testemunha). Para a quantificação do teor de óleo essencial foi realizada a extração pelo método de hidrodestilação e a identificação da composição deste óleo foi realizada por cromatografia gasosa, acoplada ao espectrofotômetro de massas (CG- EM). A quantificação desta composição foi realizada por cromatografia gasosa, acoplada ao detector por ionização de chamas (CG-DIC). A extração da cumarina foi realizada pelo método a quente, em banho-maria a 65 oC, e a identificação e a quantificação foram realizadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Em função dos resultados obtidos pode-se concluir que a temperatura do ar mais adequada para a secagem de guaco e hortelã-comum deve ser igual a 50 oC. / The aim of the work was to evaluate the effect that the temperature of drying has on the contents and composition of the essential oils of guaco and mint-common, and also a coumarin of guaco. The temperatures used were ambient temperature and air heated to 40, 50, 60, 70, and 80 oC. For the drying of medicinal species a dryer containing trays, connected to a liquefied petroleum gas container (LPG) was used. The content and composition of essential oils extracted from each species, were submitted to drying, and afterwards were compared with the value obtained from the fresh control plant. To accomplish the quantification of the content of the essential oil, extraction by a hydro distillation method was done, while the identification of the composition of the oil was accomplished by gas chromatography combined with mass spectrometric (GC-MS). The quantification of this composition was then accomplished by gas chromatography along with flame ionization detection (GC-FID). The extraction of coumarin was accomplished by a heating method in a double-boiler at 65 oC, and the identification and quantification were achieved by high performance liquid chromatography (HPLC). From the obtained results one is able to conclude that for adequate drying of guaco and mint-common the air temperature must be equal to 50 oC. / Tese importada do Alexandria

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao arquivo - Mariana.pdf: 540089 bytes, checksum: 5343cfe8c00b56324e8aa56928e80786 (MD5) Previous issue date: 2011-05-31 / Mikania laevigata Sch.Bip. ex Baker., popularly known as guaco, is a Brazilian medicinal plant belonging to Asteraceae family and widely used in medicine to treat coughs and respiratory disorders. It presents bronchodilator and antiulcer activities among others. Coumarins, terpenes and organic acids are the main chemical constituents of this specie. In the literature no studies were found concerning the production of standardized dried extracts from this plant specie, therefore the aim of this study was the obtaining and the characterization of standardized dry extract of this plant specie. M. laevigata leaves were collected, dried and crushed, resulting in the plant drug. The hydroalcoholic extract was obtained by percolation of the drug plant and the extraction liquid used was ethanol 80% (v/v). After drying experiments were carried out in order to investigate the influences of the extract feed rate and the drying adjuvant ratio in the characteristics of the dried extracts obtained.-coumaric acid and coumarin were used as chemical markers and were quantified by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) in all stages of the process. An analytical method was validated following the criteria proposed by the Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), proving to be selective, linear, precise, accurate, sensitive and robust. In the characterization of plant drug the volatile content obtained was 9.00 ± 1.75%, the coumarin content was 0.72 ± 0.02% and the acid &#61551;-coumaric content was 0.13 ± 0.005%. The average particle size was 444.823 &#61549;m and swelling index was 3.2 in ethanol 80%, 4.27 in ethanol 50% and 10.13 in water. The hydroalcoholic extract presented a density of 0.9256 ± 0.0006 g / mL, total solids content of 5.18 ± 0.21%, pH 6.1 ± 0.00, alcohol content of 56% and viscosity of 5.57 mPas. The drying yields ranged from 11.35 to 54.11%, and all dried products presented volatiles content and water activity below 5% and 0.5, respectively. The selected condition to be used to obtain standardized dried extracts of M. laevigata was that performed with a smaller proportion of colloidal silicon dioxide (15%) and increased extract feed rate (6mL/min), in which levels were obtained coumarin and &#61551;-coumaric acid content of 1.83 ± 0.004% and 0.80 ± 0.012%, respectively. The dry extract obtained in these conditions showed spherical particles and their antiulcer activity in the model of indomethacin induced ulcers was demonstrated, suggesting a gastroprotective effect of this extract. Comparison of powder, hydroalcoholic and dry extract chromatographic (TLC and HPLC) show that the hydroalcoholic extraction was suitable for the extraction of coumarin and &#61551;-coumaric acid and the drying process did not cause changes in the chemical profile of the extract in relation to these substances. Thus, the production of dried extracts by spray drying from the leaves of M. laevigata can be an interesting and promising alternative for obtaining such an intermediate product. / Mikania laevigata Sch.Bip. ex Baker., conhecida popularmente como guaco, é uma planta medicinal brasileira, pertencente à família Asteraceae, muito utilizada em medicamentos para tratar a tosse e distúrbios respiratórios. Apresenta atividades broncodilatadora, antiulcerogênica entre outras. Cumarinas, terpenos e ácidos orgânicos são os principais constituintes químicos desta espécie. Na literatura pesquisada não foram encontrados trabalhos abordando a produção de extratos secos padronizados de guaco, por isso o objetivo deste trabalho foi a obtenção e a caracterização do extrato seco padronizado desta espécie vegetal. As folhas de guaco foram coletadas, secas em estufa e trituradas, obtendo-se a droga vegetal. O extrato hidroalcoólico foi obtido através da percolação da droga vegetal utilizando como líquido extrator etanol 80%(v/v). Em seguida foram realizados diversos experimentos de secagem por spray drying com o intuito de investigar as influências da vazão de alimentação do extrato e da proporção de diferentes adjuvantes de secagem nas características dos extratos secos obtidos. A cumarina e o ácido &#61551;-cumárico foram utilizados como marcadores químicos e foram quantificados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) em todas as etapas do processo. Foi validado um método analítico seguindo os critérios propostos pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), o qual foi seletivo, linear, preciso, exato, sensível e robusto. Na caracterização da droga vegetal o teor de voláteis obtido foi de 9,00 ± 1,75%, o teor de cumarina foi de 0,72 ± 0,02% e o teor de ácido &#61551;-cumárico foi de 0,13 ± 0,005%. O tamanho médio de partículas foi de 444,823 &#956;m e o índice de intumescência foi de 3,2 em etanol 80%, 4,27 em etanol 50% e 10,13 em água. O extrato hidroalcoólico apresentou densidade 0,9256 ± 0,0006 g/mL, teor de sólidos totais de 5,18 ± 0,21%, pH 6,1 ± 0,00, teor alcoólico de 56% e viscosidade de 5,57 mPas. Os rendimentos de secagem variaram de 11,35 a 54,11%, sendo que em todos os produtos secos, foram observados teores de voláteis e atividade de água abaixo de 5% e 0,5, respectivamente. A condição selecionada para ser empregada na obtenção de extratos secos padronizados de guaco foi aquela realizada com menor proporção de dióxido de silício coloidal (15%), maior vazão de alimentação do extrato (6mL/min), na qual obteve-se teores de cumarina e ácido cumárico de 1,83 ± 0,004 e 0,80 ± 0,012, respectivamente. O extrato seco obtido nestas condições apresentou partículas esféricas e a sua atividade antiulcerogênica no modelo de úlceras induzidas por indometacina foi demonstrada, sugerindo-se um efeito gastroprotetor. O perfil cromatográfico (CCD e CLAE) do pó, do extrato hidroalcoólico e do extrato seco demonstrou que a extração hidroalcoólica foi adequada para a extração de cumarina e ácido&#61472;&#61551;-cumárico e o processo de secagem não ocasionou alterações no perfil químico do extrato em relação a estas substâncias. Dessa forma, a produção de extratos secos por spray drying a partir das folhas de M. laevigata pode ser uma alternativa interessante e promissora para a obtenção desse produto intermediário.