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Dinâmica da vitelogênese durante a maturação ovariana em Artemesia longinarisSilva, Rafaela Nunes da [UNESP] 28 February 2014 (has links) (PDF)
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000805066_20150708.pdf: 84839 bytes, checksum: a2201d3a364ce6fbdad0c2a63c6d8ee1 (MD5) / Sabe-se que em camarões peneídeos, a vitelogenina é sintetizada no ovário e hepatopâncreas, mas a contribuição relativa desses dois tecidos na síntese de vitelogenina ainda é incerta. Este processo pode diferir ainda de acordo com a espécie e estágio vitelogênico ou muda. Assim o presente estudo analisou a localização da produção de vitelogenina através de técnicas imunohistoquímicas, bem como, a quantificação do seu mRNA através do Real Time PCR em fêmeas de Artemesia longinaris em diferentes estágios de maturação ovariana (rudimentar - RU, em maturação - EM e maduro - MA). A espécie de camarão estudada apresenta altíssimo valor econômico. Assim, o estudo dos mecanismos da reprodução podem gerar dados para futuros projetos de produção em escala comercial, contribuindo com a preservação dos estoques naturais. A partir de análises moleculares confirmou-se a síntese de vitelogenina no ovário e hepatopâncreas de fêmeas de A. longinaris durante a maturação ovariana. Os níveis de expressão relativa de transcritos de vitelogenina no ovário e no hepatopâncreas durante a maturação ovariana demonstram que a dinâmica da síntese de vitelogenina é inversamente proporcional. A imunohistoquímica localizou a síntese endógena de vitelogenina nas células foliculares, nos oócitos pré-vitelogênicos e oócitos em vitelogênese inicial. E a síntese exógena de vitelogenina foi localizada nas células R dos túbulos hepatopancreáticos. Ainda, visto a grande contribuição do hepatopâncreas ao ciclo reprodutivo e às demais funções fisiológicas do animal, analisou-se o perfil celular do túbulo hepatopancreático nos estágios de maturação ovariana. Este órgão apresenta comportamento celular que se adapta ao ciclo reprodutivo em fêmeas, ou seja, o ciclo celular do hepatopâncreas além de obedecer a um ciclo digestivo é adaptado ao ciclo reprodutivo / It is known that in penaeid shrimp the vitellogenin is synthesized into the ovary and hepatopancreas, but the relative contribution of these two tissues in the synthesis of vitellogenin remains uncertain. This process differs according to the species and vitellogenesis stage or molt. Thus the present study examined the location of vitellogenin production by immunohistochemical techniques, as well as the quantification of its mRNA by Real Time PCR in female Artemesia longinaris at different stages of ovarian maturation (immature - RU, maturing EM and mature - MA). The shrimp species investigated presented a very high economic value. The study of the mechanisms of reproduction can generate data for future projects of commercial scale production contributing with the preservation of wild stocks. The molecular analyzes have confirmed the vitellogenin synthesis in the ovary and hepatopancreas of A. longinaris females during ovarian maturation. the relative expression level of vitellogenin transcripts in the ovary and the hepatopancreas during ovarian maturation show that the dynamics of vitellogenin synthesis is inversely proportional. By immunohistochemistry, it was located the endogenous synthesis of vitellogenin in follicular cells, in pre-vitellogenic oocytes and oocytes in early vitellogenesis. And the synthesis exogenous of vitellogenin was localized in cells R of hepatopancreaticos tubules. Also, given the great contribution of hepatopancreas reproductive cycle and other physiological functions of the animal, we analyzed the cellular profile of the hepatopancreatic tubule at stages of ovarian maturation. This organ has a cellular behavior that adapts to the reproductive cycle in females, in other words, the cellular cycle of hepatopancreas beyond to follow a digestive cycle is adapted to the reproductive cycle
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Análise tomográfica, histológica, histométrica e imunoistoquímica do beta tricálcio fosfato com osso autógeno em aumento do soalho de seio maxilarPereira, Rodrigo dos Santos [UNESP] 12 February 2014 (has links) (PDF)
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000800191.pdf: 968717 bytes, checksum: 42b4d3f55958cd4672e7050d058f0dfc (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A proposta deste estudo é avaliar o comportamento do enxerto ósseo composto de beta tricálcio fosfato (B-TCP) misturado ao osso autógeno na proporção de 1:1 frente a reabsorção, neoformação óssea e atividade molecular na enxertia do seio maxilar de humanos. Nove seios maxilares foram enxertados com esse material (Grupo Teste) e 12 com osso autógeno (Grupo Controle). Após 7 a 15 dias, os pacientes foram submetidos a uma tomografia computadorizada (TC) cone bean para mensurar o volume inicial do enxerto (T1). Decorrido 6 meses de reparação óssea, uma nova TC foi realizada para avaliar o volume final (T2) e verificar as alterações volumétricas dos materiais. Após 6 meses, no momento da instalação dos implantes dentais, biópsias foram colhidas por meio de uma broca trefina para avaliação histomorfométrica e imunoistoquímica. As taxas de reabsorção encontradas não foram significantes (p=0.17) com médias em torno de 38.3% ± 16.6 para o grupo teste e 45.7% ± 18.6 no grupo controle. Houve significância estatística na taxa de neoformação óssea do grupo teste (25.4% ± 6.4) em comparação com o grupo controle (38.6% ± 10.5). A análise imunoistoquímica teve como objetivo avaliar as proteínas Runx2, VEGF, TRAP e Osteocalcina. Os resultados encontrados com a imunomarcação destas, mostram que este enxerto possui um alto turnover celular e um tecido conjuntivo apresentando células em um curso de diferenciação celular. Visto isso, o enxerto do B-TCP misturado ao osso autógeno 1:1 em seio maxilar apresenta características moleculares com capacidade osteogênica promissora / The aim of this study is to evaluate the behavior of beta tricalcium phosphate (B-TCP) mixed with autogenous bone compost graft in the rate 1:1 analyzing bone reabsorption, bone formation and molecular activity in grafting human maxillary sinus floor augmentation. Nine maxillary sinus were grafted with this material (Test group) and 12 with autogenous bone graft alone (Control Group). After 7 – 15 days, patients were submitted to an initial computed tomography (CT) to measure the initial graft volume (T1). After 6 months of bone healing, new CT was performed by patients to evaluate bone graft final volume (T2) and the graft volumetric changes. During dental implants placement, biopsies were collected with a 3.0 mm trephine burr and processed to histomorphometric and immunohistochemistry analisys. The average of reabsorption rates of test group were 38.3% ± 16.6 and 45.7% ± 18.6 to control group (p=0.17). The new bone formation was statistical significant between test group (25.4% ± 6.4) and control group (38.6% ± 10.5) (p<0.05). The immunohistochemistry analysis evaluated Runx2, VEGF, TRAP and Osteocalcin proteins. Outcomes showed a high cellular turnover with a pathway cellular differentiation in connective tissue. Thus, B-TCP mixed with autogenous bone graft in maxillary sinus presents propitious molecular characteristics to osteogenic capacity / FAPESP: 12/10028-7 / FAPESP: 12/08455-4
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Estudo comparativo do processo de reparo utilizando osso autógeno e beta-tricálcio fosfato em levantamento do assoalho do seio maxilar em humanos: análise tomográfica, histológica, histométrica e imunoistoquímicaBoos, Fernanda Brasil Daura Jorge [UNESP] 13 January 2014 (has links) (PDF)
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000796388.pdf: 1917811 bytes, checksum: 26dc63818c283f954864cac6e22bbc1d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os autores tiveram como objetivo neste trabalho avaliar comparativamente o comportamento do beta-tricalcio fosfato (?-TCP) ChronOs® e do osso autógeno (OA) em seios maxilares por meio de análise tomográfica, histológica, histométrica e imunoistoquímica. Para o presente estudo foram realizados levantamento e preenchimento do assoalho do seio maxilar unilateralmente com OA em 12 seios e com ?-TCP puro em 11 seios maxilares. Nos períodos de 07 dias e 06 meses, os pacientes foram submetidos à tomografia para análise quantitativa do volume residual de enxerto após reabsorção e remodelação. Previamente à instalação dos implantes, foram realizadas perfurações com broca trefina para coleta do material e envio para análises. Na análise volumétrica não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos. A análise histológica evidenciou presença de grânulos sendo absorvidos e substituídos e tecido ósseo maduro no grupo teste. A quantidade de tecido ósseo neoformado foi maior no grupo do biomaterial. A análise imunoistoquímica comprovou a capacidade osteoindutiva do osso autógeno, não presente no grupo teste. Em conclusão, o ChronOs®, é um material biocompatível e osteocondutor com resultados clínicos similares ao osso autógeno neste modelo de estudo proposto, mesmo sem apresentar capacidade osteoindutiva. / The aim of this study was to analyze the behavior of the beta-tricalcium phosphate (?-TCP) ChronOs® and autogenous bone (AB) in maxillary sinus floor augmentation by comparing computed tomography (CT), histological, histometric and immunohistochemical analysis. For this study, grafting of the maxillary sinus was performed unilaterally with AB in 12 sinuses and with pure ? - TCP in 11 maxillary sinuses. In periods of 07 days and 06 months, patients underwent CT for quantitative comparative analysis of residual volume after graft resorption and remodeling. Prior to implant placement, drilling with trephine for material collection and analyzes were performed. In CT volumetric analysis there was no statistically significant difference between groups. Histological analysis revealed the presence of granules being absorbed and substituted and mature bone in the ? - TCP group. The amount of newly formed bone was also higher in the test group. Immunohistochemical analysis confirmed the osteoinductive capacity of AB group, not seen in the ? - TCP group. In conclusion, Chronos® is a biocompatible and osteoconductive material with similar clinical results to the autogenous bone in this proposed model, even without osteoinductive properties. / FAPESP: 12/08628-6 / FAPESP: 12/10028-7
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Detecção de marcadores de resistência a múltiplas drogas na pele de cães com infecção natural por Leishmania (Leishmania) infantum chagasi (Cunha e Chagas, 1937) Shaw, 2002, submetidos a diferentes protocolos de tratamentoCalado, Andréa Maria Campos [UNESP] 02 July 2014 (has links) (PDF)
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000814106.pdf: 732963 bytes, checksum: 8b7a4ecacee61c02ff2c4e104577f4d9 (MD5) / O tratamento de cães com leishmaniose visceral no Brasil tem gerado polêmicas discussões entre os diversos segmentos de profissionais da saúde. De um lado os Médicos Veterinários pressionados pelos proprietários dos cães que querem ter o direito de decidir por um tratamento ou pela eutanásia de seus animais; de outro os Ministérios da Saúde e da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) que se mostram contrários a qualquer tratamento, motivados pelo risco de se criar cepas do parasita resistentes aos fármacos, os quais também podem ser empregados em pacientes humanos. Argumentos científicos que possam embasar essa polêmica devem ser explorados. Uma das possibilidades de se avaliar o desenvolvimento de resistência a fármacos pode ser conseguida por meio da pesquisa da expressão da glicoproteína-P (gp-P) e proteína de resistência a múltiplas drogas (MRP1), que atuam como bombas de efluxo expulsando xenobióticos de células, responsáveis pelo fenótipo MDR (resistência a múltiplas drogas). Avaliamos, pela técnica de imuno-histoquímica, a reatividade da gp-P e MRP1, clone C494 e ABCC1, respectivamente, na pele de 11 cães naturalmente infectados por Leishmania (L.) infantum chagasi antes e após serem submetidos a dois protocolos de tratamento: Alopurinol e vacina inativada (n=4) e Alopurinol, vacina inativada e domperidona (n=7) e quantificamos formas amastigotas na pele pela mesma técnica. Todos os animais após 3 e 6 meses de tratamento tiveram melhora clínica evidente e tiveram contagem negativa de formas amastigotas do parasita. Pele de cães com LV expressaram gp-P e MRP1, antes e após o tratamento, no entanto, este experimento permitiu concluir que a gp-P e MRP1 não foram bons marcadores para avaliar a eficácia terapêutica da LVC e para prever possíveis estados de resistência a fármacos. Todavia, o entendimento sobre a participação de marcadores de resistência a múltiplas drogas na pele de ... / The treatment of dogs with visceral leishmaniasis in Brazil has generated controversial debate among various segments of health professionals. On one side, veterinarians pressured by dog owners want to have the right to decide between treatment and euthanasia of their animals. On the other hand, the Ministry of Health and the Ministry of Agriculture, Livestock, and Supply (MAPA) are opposed to treatment because of the risk of creating strains of the parasite resistant to drugs that are also used for human patients. Scientific arguments that can support this controversy should be explored. One possibility for assessing the development of drug resistance can be achieved through research of the expression of Pglycoprotein (P-gp) and multidrug resistance-associated protein (MRP1). These proteins, which are responsible for the MDR phenotype (multiple drug resistance), act as efflux pumps which expel xenobiotics from cells. Using immunohistochemistry, the reactivity of P-gp (clone C494) and MRP1 (clone ABCC1) in the skin of 11 dogs naturally infected by Leishmania (L.) infantum chagasi was analyzed before and after undergoing two treatment protocols: Allopurinol and inactivated vaccine (n=4) and Allopurinol, inactivated vaccine, and domperidone (n=7). Quantification of Leishmania amastigotes in the skin was also achieved via immunohistochemistry. All of the animals after 3 and 6 months of treatment had clinical improvement and tested negative for amastigote forms of the parasite. Yet, the skin of dogs positive for CVL (canine visceral leishmaniasis) expressed P-gp and MRP1 before and after treatment, illustrating that P-gp and MRP1 were neither good markers for evaluating the therapeutic efficacy of CVL nor for predicting the possible states of drug resistance. However, an understanding of the participation of markers for multiple drug resistance in the skin of dogs under treatment for CVL can be of great importance for the development of an ...
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Efeito dos hormônios gonadais sobre os filamentos intermediários de astrócitos hipocampais, durante o desenvolvimento e o ciclo estral : uma abordagem imunoistoquímicaGehlen, Gunther January 2009 (has links)
O hipocampo compõe uma das estruturas do sistema límbico, suas funções são variadas, tendo seu papel na regulação do comportamento emocional e em processos relacionados com a estocagem de memórias. Apesar de ter pouco ou nenhum papel no controle da função reprodutiva, o hipocampo é ainda assim um alvo sensível aos esteróides gonadais. Filamentos intermediários, como a proteína ácida fibrilar glial (GFAP) é um eficiente marcador do citoesqueleto de astrócitos e sofrem modificações sob ação de hormônios gonadais. Os objetivos do presente estudo foram mensurar o numero de células imunorretivas à GFAP (GFAP-ir), avaliar a imunorreatividade dos marcadores para filamentos intermediários astrocitários, bem como sua morfologia pelo método de Scholl, a GFAP-ir, no estrato radiatum da região CA1 do hipocampo, de ratos machos e fêmeas durante o desenvolvimento pós-natal. Além disso, também foi investigada a GFAP-ir nas mesmas regiões de fêmeas adultas, tanto em condições fisiológicas de variação hormonal (ao longo do ciclo estral), como em situações suprafisiológicas (reposição hormonal após ovariectomia). Três experimentos foram realizados: no primeiro foram utilizados ratos machos e fêmeas durante o desenvolvimento pós-natal (n = 48), cujas idades foram: 11 dias pós-natal (PN11), 21 (PN21), 31 (PN31) e 45 (PN45). No segundo experimento, utilizou-se ratos Wistar adultos machos e fêmeas nulíparas adultas durante as fases do ciclo estral (diestro, proestro, estro e metaestro; n = 30) para revelar diferenças provocadas pelos hormônios gonadais femininos na composição astrocitária do hipocampo. No terceiro experimento utilizaram-se fêmeas adultas nulíparas submetidas à ovariectomia (OVX) (n = 18) e tratadas com substituição hormonal de benzoato de estradiol adicionado ou não à progesterona. Os dados foram comparados entre os grupos por meio de um teste de análise da variância (ANOVA) de uma via, sendo aplicado o teste post-hoc Bonfferoni. A comparação dos dados de GFAP-ir apresentou diferenças significativas no número de células e na orientação dos prolongamentos. O número de prolongamentos centrais, aumentaram com a idade, sendo mais significativo para as fêmeas (F45xF11, p≤ 0,001, F45xF21, p≤ 0,01 e F45xF31 p≤ 0,01) que nos machos (M45x M21 p≤ 0,05). Já o número de processos laterais mostrou um aumento mais significativo com a idade nos machos (M45XM11, p≤ 0,001; M45XM21, p≤ 0,001 e M45xM31, p≤ 0,01) que nas fêmeas (F45xF11, p≤ 0,01). Havendo ainda diferenças quando analisados a orientação dos processos primários separadamente de suas ramificações. Os ratos machos apresentaram maior GFAP-ir do que as fêmeas em todas as fases do ciclo estral (diestro, proestro, estro e metaestro; p < 0,001), assim como apresentaram mais células que as fêmeas (p<0,001). Para orientação mais uma vez as diferenças ficaram restritas aos machos, tanto para os processos centrais como para os laterais (p<0,001 e p<0,05 respectivamente). Em fêmeas ovariectomizadas, injeções de estradiol provocaram aumento da GFAP-ir (P < 0,001), assim como houve um aumento do numero de células (P < 0,05) enquanto a morfologia não mostrou diferenças entre os grupos. Esses achados sugerem que a GFAP astrocitária pode ser afetada tanto por níveis fisiológicos de hormônios ovarianos quanto por manipulação hormonal destes esteróides, o que pode contribuir para a plasticidade neuro-glial relacionada a atividades locais e integradas destas áreas encefálicas em machos e fêmeas. Esses achados permitem concluir que esta influência hormonal sobre o hipocampo está presente ainda em fases iniciais do desenvolvimento do SN de ratos, apresentando particularidades morfológicas acima de tudo. Além disso, as diferenças de composição astrocitárias encontradas, ao longo do desenvolvimento, provavelmente se relacionam com a interação neurônio-glia em consonância com aspectos comportamentais e ajustes neuroendócrinos pertinentes a cada sexo, e a cada fase de diferenciação do sistema nervoso. / The hippocampus is part of the limbic system, its functions are varied, and their role in the regulation of emotional behavior and in processes related to the memories storage. Despite having little or no role in the control of reproductive function, the hippocampus still a sensitive target to gonadal steroids. Intermediate filaments such as glial fibrillary acidic protein (GFAP) is an efficient marker of the cytoskeleton of astrocytes and the action of gonadal hormones could alter this structure. The objectives of this study were to measure the number of GFAP imunorreactive cells (GFAP-ir), analysing the immunoreactivity the intermediate filaments of astrocyte, and their morphology by the Scholl‟s method, GFAP-ir in the stratum radiatum of the CA1 region from dorsal hippocampus of male and female rats during postnatal development. In addition, we investigated the GFAP-ir in the same regions of adult males and females, these under physiological hormonal changes (during the estrous cycle), as shown by supraphysiological (hormone replacement after ovariectomy). Three experiments were performed: the first was used male and female rats during postnatal development (n = 48), whose ages were 11 days postnatal (PN11), 21 (PN21), 31 (PN31) and 45 ( PN45). In the second experiment, we used adult male Wistar rats and nulliparous adult females during the estrous cycle (diestrus, proestrus, estrus and metestrus, n= 30) to reveal differences caused by female gonadal hormones on the content of astrocytes in the hippocampus. In the third experiment, a nulliparous adult females subjected to ovariectomy (OVX) (n = 18) and treated with hormone replacement therapy of estradiol benzoate added or not with progesterone. Data were compared between groups by means of a test analysis of variance (ANOVA) one-way, and applied post-hoc Bonfferoni‟s test. A comparison of the GFAP-ir showed significant differences in cell number and orientation of the extensions. The number of central extensions, increased with age, being more significant for females (F45xF11, p ≤ 0,001, F45xF21, p ≤ 0,01 and F45xF31 p ≤ 0,01) than in males (M45x M21 p ≤ 0,05). Since the number of lateral processes showed more significantly with age in males (M45XM11, p ≤ 0,001; M45XM21, p ≤ 0,001 and M45xM31, p ≤ 0,01) than in females (F45xF11, p ≤ 0,01). We also found differences when analyzed the orientation of primary processes separately from their branches. Male rats showed higher GFAP-ir than females at all stages of the estrous cycle (diestrus, proestrus, estrus and metestrus, p <0,001) and had more cells than females (p <0,001). About cell orientation, the differences were observed just in males, both for the core processes and to the lateral (p <0,001 and p <0,05 respectively). In ovariectomized females, injections of estradiol benzoate caused an increase in GFAP-ir (P <0,001), as well as an increase in the number of cells (p <0,05), but the morphology did not differ between groups. These findings suggest that the GFAP astrocyte can be affected both by physiological levels of ovarian hormones and on the hormonal manipulation of these steroids, which may contribute to neuro-glial plasticity related to local activities and integrated these brain areas in males and females. These findings show that hormonal influence on the hippocampus were present in early stages of development of the SN of rat, specially in the morphological characteristics. In addition, differences in astrocytic composition found throughout the development, probably were related to the neuron-glia interaction in accordance with aspects of behavioral and neuroendocrine adjustments, specific to each gender, and each stage of differentiation of the nervous system.
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Expressão proteica diferencial de reguladores de E-caderina em tumor odontogênico queratocístico.Porto, Lia Pontes Arruda January 2014 (has links)
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DISSERTACAO FINAL MESMO_Lia Porto_UFBA (com fotos)__CORRIGIDA 210914.pdf: 2438506 bytes, checksum: c90bea353f9f17081cb87d9108e4bbeb (MD5) / CAPES / A transição epitelial-mesenquimal (TEM) representa o processo em que as células
epiteliais perdem suas características e adquirem propriedades de células
mesenquimais típicas. A dissociação das células tumorais devido à alteração na
adesão célula-célula representa um dos princípios chave da invasão tumoral e da
TEM. O tumor odontogênico queratocístico (TOQ) tem como características
principais o seu comportamento clínico agressivo e altas taxas de recorrência. O
conhecimento das características moleculares da TEM no TOQ pode fornecer
marcadores úteis que auxiliem no prognóstico e na condução terapêutica
individualizada desse tumor odontogênico. O presente estudo analisou a
imunoexpressão das proteínas E-caderina, N-caderina, Snail, Slug e Vimentina, por
estarem envolvidas no processo da TEM, em casos de TOQ em comparação com
cistos radiculares (CRs) e folículo dentais (FDs) a fim de fornecer melhores
perspectivas na compreensão do comportamento agressivo desses tumores. Foram
utilizados 32 casos de TOQ, 15 CRs e 08 FDs para a técnica imunoistoquímica. A
análise do perfil de imunoexpressão nos TOQs demonstrou expressão preservada
de E-caderina na maioria dos casos, sendo que a N-caderina demonstrou um ganho
de expressão em epitélio tumoral em relação ao estroma, o que esteve
correlacionado com a expressão positiva de Slug em epitélio, e este por sua vez
com a expressão positiva de Snail. No estroma dos TOQs, a N-caderina
correlacionou-se positivamente com Slug, e a Vimentina com o Snail no epitélio. Ao
comparar os três grupos estudados, a imunoexpressão das proteínas foi influenciada
de forma marcante pela inflamação. As expressões aumentadas de N-caderina no
epitélio e no estroma, do Slug no epitélio e da Vimentina no estroma estiveram
associadas com a localização em mandíbula. A grande maioria dos casos que
apresentaram localização posterior (quer isoladamente ou em conjunto com a
anterior) apresentou expressão preservada de E-caderina. Estas proteínas
provavelmente desempenham papéis diferenciados na mediação da invasividade
local em TOQs. Apesar da expressão da E-caderina estar preservada na maioria
dos TOQs, há indícios de ocorrência da TEM nesses tumores. A alta intensidade de
marcação do Slug nos TOQs sugere que esta proteína é provavelmente o fator de
transcrição principal envolvido na indução de TEM nos TOQs. / The epithelial-mesenchymal transition (EMT) is the process where cells lose their
epithelial features and acquire properties of typical mesenchymal cells. The
dissociation of tumor cells due to changes in cell-cell adhesion is one of the key
principles of tumor invasion and EMT. The keratocyst odontogenic tumor (KOT) has
as main features its aggressive clinical behavior and high recurrence rates.
Knowledge of the molecular features of EMT in KOT can provide useful markers to
aid in the prognosis and individualized therapeutic management of this odontogenic
tumor. The present study examined the immunoreactivity of proteins E-cadherin, Ncadherin,
Snail, Slug and vimentin, as they are involved in the process of EMT, in
cases of KOT compared with radicular cysts (RCs) and dental follicles (DFs) to
provide better perspectives in understanding the aggressive behavior of these
tumors. Thirty-two cases of KOTs, 15 RCs and 08 DFs were used for
immunohistochemistry. The analysis of immunoreactivity profile in KOTs showed
preserved expression of E-cadherin in most cases, and N-cadherin showed a gain of
expression in tumor epithelium relative to stroma which has been positively
correlated with the expression of Slug in epithelium, and this in turn with positive
expression of Snail. In the stroma of KOTs, N-cadherin correlated positively with Slug
and vimentin, and this with Snail in the epithelium. When comparing the three
groups, the immunoreactivity of the proteins was markedly influenced by
inflammation. Increased expression of N-cadherin in the epithelium and stroma, Slug
in the epithelium and vimentin in the stroma were associated with the location in the
jaw. The majority of patients who had tumors in posterior location (either alone or in
combination with the anterior) showed preserved expression of E-cadherin. These
proteins probably play different roles in mediating local invasiveness in KOTs.
Despite the expression of E-cadherin being preserved in most KOTs, there is
evidence of the occurrence of EMT in these tumors. The high intensity staining of
Slug in KOTs suggests that this protein is probably the main transcription factor
involved in induction of MET in KOTs.
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Investigação do antígeno nuclear latente-1 do herpesvírus humano tipo-8 no sarcoma de kaposi epidêmico cutâneo e seus simuladores histológicosPereira, Patrícia Fonseca January 2011 (has links)
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Previous issue date: 2013-11-21 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O sarcoma de Kaposi (SK) é a neoplasia mais diagnosticada em pacientes com SIDA e a detecção do antígeno nuclear latente do herpesvirus humano 8 (HHV8-LNA-1) tem se mostrado útil no seu diagnóstico histológico. O objetivo deste estudo é investigar a expressão do antígeno do HHV8 no sarcoma de Kaposi e seus simuladores histológicos em biópsias de pele de pacientes HIV positivos acompanhados no Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas (IPEC) entre 2003 e 2010. A pesquisa do antígeno foi realizada em protocolo de imuno-histoquímica em 49 casos de SK cutâneo e em 60 casos de eventuais simuladores histológicos desta lesão (12 dermatofibromas, 17 hemangiomas, 8 granulomas piogênicos e 23 dermatites de estase). Dados clínico-epidemiológicos foram coletados a partir da revisão dos prontuários. O diagnóstico de SK foi confirmado por dois patologistas. A expressão nuclear do antígeno HHV-8 foi detectada em todos os casos de SK independentemente do estágio clínico da doença, e nenhuma positividade foi encontrada nos demais casos. Nossos resultados confirmam o valor diagnóstico do antígeno nuclear latente do HHV8 (HHV8-LNA-1) para diferenciar o SK de seus simuladores e consolidam sua utilização na rotina do laboratório de Anatomia Patológica do IPEC / Kaposi sarcoma is the most diagnosed neoplasia in AIDS patients and detection
of
human herpes virus 8 latent nuclear antigen (HHV8
-
LNA
-
1) has been shown to
be an
useful histological diagnostic test. The goal of this study is to investigate the
expression of HHV8 antigen in Kaposi sarcoma and its histological simulators on skin
biopsies from HIV positive patients followed in the Instituto de Pesquisa Clínica
E
vandro Chagas (IPEC) between 2003 and 2010. Immunohistochemistry protocol for
the antigen was applied in 49 cases of cutaneous KS and in 60 cases of occasional
histological simulators of this lesion (12 dermatofibromas, 17 hemangiomas, 8
pyogenic granuloma
s and 23 stasis dermatitis). Clinical and epidemiological data
were obtained from clinical files. The diagnosis of KS was confirmed by two
pathologists. Expression to HHV8
-
LNA
-
1 was detected in all cases of KS despite its
clinical stage and no positivity w
as observed in the remainder cases. Our results
confirm the diagnostic value of HHV8 latent nuclear antigen to distinguish KS from its
simulators and consolidate its use in IPEC’s pathology laboratory daily practice
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Processos de secreção e transporte vesicular da proteína básica principal (MBP-1) em eosinófilos durante a infecção por Schistosoma mansoniDias, Felipe Ferraz January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2016-03-14 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A esquistossomose mansoni é uma doença crônica causada pela infecção parasitária por trematódeos da espécie Schistosoma mansoni que induz a formação de granulomas exsudativos. Durante a resposta granulomatosa, eosinófilos são ativados e recrutados para os sítios inflamatórios e desempenham suas funções através da liberação de produtos derivados de seus grânulos de secreção. Estes grânulos têm morfologia única e armazenam um número expressivo de citocinas e proteínas catiônicas previamente sintetizadas, principalmente proteína básica principal (MBP-1). MBP-1 tem sido implicada na imunoregulação de células imune e combate aos parasitos em diversas infecções helmínticas. Embora os mecanismos de desgranulação de eosinófilos murinos e humanos frente à doenças alérgicas encontrem-se bem estabelecidos, ainda não se conhece como estas células liberam seus produtos em resposta à infecções helmínticas. Devido à essa escassa informação, a ultraestrutura de eosinófilos murinos e humanos foi avaliada com ênfase em seus processos de desgranulação frente à infecção por S. mansoni. Fragmentos de fígado e intestino grosso de camundongos fêmeas Swiss Webster (SW) infectadas por 100 cercárias de S. mansoni, assim como biópsias de pacientes infectados com a forma crônica da doença foram processados e analisados por técnica histológica avançada (inclusão em resina glicolmetacrilato), e através de microscopia eletrônica de transmissão (MET). Eosinófilos foram encontrados em diferentes estágios dos granulomas tanto hepáticos quanto intestinais de camundongos SW com 57 e 115 dias de infecção e, constituiram a principal população de células inflamatórias. Foram encontrados os 3 processos de secreção nos eosinófilos teciduais murinos, ativados pela infecção mansônica, sendo o processo de \201Cpiecemeal degranulation\201D (PMD), o mais predominante
PMD foi caracterizada pelo aumento do número de grânulos específicos em esvaziamento em relação aos grânulos intactos e em fusão. Eosinófilos hepáticos murinos foram submetidos à técnica de immunonanogold para marcação de MBP-1, a qual foi detectada na maioria dos grânulos específicos. Destes grânulos, MBP-1 foi amplamente distribuída entre os grânulos exibindo alterações morfológicas típicas de PMD e em vesículas de transporte, incluindo \201CEosinophil Sombrero Vesicles (EoSVs)\201D em associação com estes grânulos. Além disso, MBP-1 foi localizada na matriz extracelular, indicando a ocorrência de liberação extracelular desta proteína por PMD. Eosinófilos humanos provenientes de biópsias da mucosa retal apresentaram grânulos específicos com alterações ultraestruturais e presença de EoSVs ao redor e em contato com os mesmos. Estes grânulos foram encontrados dentro dos eosinófilos e na matriz extracelular adjacente, sugerindo que a secreção de produtos destes grânulos ocorra através de processo semelhante à desgranulação por PMD. Em conjunto, nossos resultados demonstram a importância dos esoinófilos na fase aguda e crônica da infecção por S. mansoni e identificam a desgranulação por piecemeal (liberação de moléculas específicas de forma seletiva e regulada) como o principal processo de secreção em resposta à infecção. Isto é importante para a compreensão das vias intracelulares envolvidas com a liberação de produtos estocados nos grânulos de eosinófilos durante respostas inflamatórias disparadas por infeções helmínticas / Schistosomiasis is a well known chronic and parasitic disease caused by trematoda specie
Schistosoma mansoni infection which triggers exsudative granuloma formations. During
granulomatous response, eosinophis are activated and recruited to inflammatory sites where they play
your functions by release of secretory granule-derived products. These granules have unic
morphology and storage an expressive number of pre-formed cytokines and cationic proteins, mainly
major basic protein-1 (MBP-1). MBP-1 has been implicated in immune cells immunoregualtion and
action against parasites in many helminthic infections. Although murine and human eosinophil
degranulation mechanisms front of allergic disorders have been established, none knows how these
cells release their products in response to helminthic infections. Due to this lack of information, the
ultrastructure of murine and human eosinophils was evaluated with focus on their degranulation
processes front of S. mansoni infection. Liver and large intestine fragments from female Swiss
Webster (SW) mice infected with 100 S. mansoni cercarie, as well as, biopsies from chronic infected
pacients were processed and analysed by advanced histologic technique (inclusion in glycol
methacrylate resin), and by transmission electron microscopy (TEM). Eosinophils were found in both
hepatic and intestinal different granuloma stages from 57 and 115 post-infection SW mice and,
consisted the main inflammatory cells population. Three secretory processes were found in murine
tissue eosinophils, activated by mansonic infection, being the “piecemeal degranulation” (PMD), the
most predominant. PMD was characterized by the augment of emptying specific granules number in
comparison to intact and fused granules. Murine hepatic eosinophils were submitted to
immunonanogold technique to label MBP-1, which was detected in the majority of the specific
granules. Of these granules, MBP-1 was widely distributed between granules with PMD-like
morphologic alterations and in transport vesicles, including Eosinophil Sombrero Vesicles (EoSVs) in
association with these granules. Moreover, MBP-1 was localized in the extracellular matrix, pointing to
a extracellular releasing of this protein by PMD. Human eosinophils from retal mucosal biopsies
showed ultrastructurally altered specific granules and presence of surronuded and attached EoSVs.
These granules were found within eosinophils cytoplasm and at the adjacent extracellular matrix,
suggesting a PMD-like degranulation of these granule products. Together, our results demonstrate the
importance of eosinophils in the acute and chronic phases of S. mansoni infection and identify
piecemeal degranulation (regulated and selective releasing of specific molecules) as the main
secretion process in response to infection. This is important for the understanding of intracellular ways
involved with granule-stored products release of eosinophils during inflammatory responses triggered
by helminthic infections.
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Caracterização do perfil de dano oxidativo em carcinoma mamário e avaliação de associação com parâmetroshistopatológicos / Profile characterization of oxidative damage in breast carcinoma and evaluation of association with histopathological parametersCastro, Thales Nascimento e January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015 / O carcinoma mamário é uma doença complexa que engloba diversas alterações genéticas e bioquímicas, além de mudanças no microambiente tumoral, tais como o estresse oxidativo,que pode ocasionar danos estruturais em lipídios, proteínas, bem como no DNA nuclear. O presente estudo teve por objetivo caracterizar o perfil oxidativo de neoplasias mamárias,comparando o perfil de expressão de produtos dos processos de peroxidação lipídica, nitração proteica e oxidação de DNA em função de parâmetros histopatológicos com valor prognóstico quanto à evolução clínica do câncer de mama. (...) Contudo, quando o tamanho tumoral foi analisado separadamente entre tumores Triplo-Negativos ou entre os demais subtipos (Luminal A/B eHER2-like), não se observou efeito significativo sobre a expressão de 8-OHdG. Em conclusão, os dados indicam que alguns tumores Triplo-Negativos são mais resistentes a danos oxidativos sobre DNA, independentemente de grau ou tamanho tumoral, o que pode contribuir para o perfil de maior agressividade deste subtipo tumoral. / Breast cancer is a complex disease that involves multiple genetic and biochemical alterationsand changes in the tumor microenvironment, such as oxidative stress, which can lead tostructural damages to lipids, proteins and nuclear DNA. The present work aimed tocharacterize the oxidative profile of mammary tumors, comparing the products of profileexpression of lipid peroxidation processes, protein nitration and DNA oxidation according tohistopathological parameters with prognostic value as to clinical evolution of breast cancer. (...) However, when the tumor size was analyzed separately from Triple-Negativetumors or among the other subtypes (luminal A / B and HER2-like), there was no significanteffect on the expression of 8-OHdG. In conclusion, the data indicate that some triple-negativetumors are more resistant to oxidative damage over the DNA, regardless of tumor grade orsize, which may contribute to the more aggressive subtype of the tumor. (AU)^ien
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Perfil da expressão de HIF-1α em células linfoides do infiltrado inflamatório peritumoral e intratumoral como marcador prognóstico do carcinoma epidermoide de cavidade oralMendes, Suzanny Oliveira 21 February 2014 (has links)
Submitted by Maykon Nascimento (maykon.albani@hotmail.com) on 2016-04-11T20:18:44Z
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Dissertacao Suzanny Oliveira Mendes.pdf: 1218162 bytes, checksum: ba406f76a90163a9319cfc83b966766b (MD5) / O complexo transcricional HIF-1 é responsável por controlar a transcrição de mais de 100 genes envolvidos em resposta celular a hipóxia. A subunidade HIF-1α é estabilizada em condições de hipóxia e dimeriza-se com um a subunidade HIF-1β, formando o complexo HIF-1 transcricionalmente ativo. Em células inflamatórias, uma elevada expressão de HIF-1α pode induzir os linfócitos à imunossupressão, reduzindo o reconhecimento dos antígenos tumorais, permitindo o crescimento tumoral. O presente trabalho objetivou investigar a relação entre a expressão de HIF-1α em linfócitos do infiltrado inflamatório intratumoral e peritumoral de 56 pacientes com carcinoma epidermoide de cavidade oral. Os resultados indicaram um valor prognóstico para esta expressão. Uma elevada expressão da HIF-1α em células do infiltrado inflamatório peritumoral foi significantemente relacionada com o pior prognóstico do paciente, enquanto esta elevada expressão nos linfócitos na região intratumoral foi correlacionado com um melhor prognóstico. Um perfil de risco indicando a chance para a recidiva e óbito foi desenhado baseado na expressão de HIF-1α nos linfócitos do infiltrado inflamatório peritumoral e intratumoral, definindo os riscos baixo, intermediário e alto. Este perfil de risco foi hábil para determinar que a expressão forte de HIF-1α nos linfócitos peritumorais são relacionados com um pior prognóstico, independente da expressão nas células intratumorais. A expressão fraca de HIF-1α nos linfócitos peritumorais e forte nos linfócitos intratumorais foram considerados um perfil de baixo risco, mostrando nenhum caso de recidiva da doença e óbito decorrente da doença. O risco intermediário foi associado com baixa expressão de HIF-1α tanto em infiltrado inflamatório intratumoral como peritumoral. Estes resultados sugerem que a expressão da HIF-1α em células linfoides do infiltrado inflamatório intratumoral e peritumoral pode exercer um papel importante como um marcador prognóstico tumoral. / The HIF-1 transcriptional complex is responsible for controlling transcription of over 100 genes involved in cell hypoxia response. HIF-1α subunit is stabilized in hypoxia conditions, dimerizes with HIF-1β forming the active HIF-1 transcriptional factor. In inflammatory cells, high HIF-1α expression might induce lymphocytic immunosuppression, decreasing tumoral antigen recognition, allowing tumor growth. The present work aimed to investigate the relationship between HIF-1α expression in lymphocytes inflammatory infiltrate from intratumoral and peritumoral region of 56 patients with oral cancer. Data indicates a prognostic value for this expression. High HIF-1α expression in peritumoral inflammatory cells was significantly related to worse patient outcome, whereas high expression in the intratumoral lymphoid cells correlates with a better prognosis. A risk profile indicating the chance of disease relapse and death was designed based on HIF-1α expression in inflammatory infiltrate cells, defining low, intermediate and high risks. This risk profile was able to determine that high HIF-1α expression in peritumoral lymphocytes correlates with worse prognosis, independently of intratumoral inflammatory infiltrate expression. Low HIF-1α in peritumoral lymphocytes and high expression in the intratumoral lymphocytes was considered a low risk profile, showing no cases of disease relapse and disease related death. Intermediate risk was associated with low HIF-1α expression in inflammatory infiltrate intratumoral and peritumoral. in tumor and tumor margins. These results suggest that HIF-1α expression in tumor and peritumoral inflammatory cells may play an important role as prognostic tumor marker.
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