Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of present study was to investigate (Pro)renin receptor function in the theca and granulosa cells during the preovulatory period and luteinization in cattle. During the initial preovulatory period, prorenin induced the resumption of oocyte meiosis even in the presence of follicular hemisections or forskolin. In granulosa cells, pró-renina did not increase LHinduced epiregulin (EREG) mRNA after 6 h of culture. Treatment with prorenin plus LH increased amphiregulin (AREG) and prostaglandin synthase 2 (PTGS2) mRNA in granulosa cells. The absence of prorenin effect to stimulate EREG, AREG, and PTGS2 in granulosa cells was established using different combinations of treatments with prorenin and/or aliskiren ([P]RR inhibitor) and/or LH. Treatment of granulosa cells with LH plus EGFR antagonist (AG1478) did not regulate prorenin and (P)RR after 6 h of culture. This result was confirmed in vivo using a model of intrafollicular treatment with AG1478 and intramuscular treatment with GnRH. Finally, (P)RR protein and transcripts for prorenin and pro-fibrotic genes increased in the granulosa cells from 12 h post-GnRH. In the theca cells, (P)RR mRNA and protein increased 6 h after treatment of cows with GnRH. The LH effect to stimulate (P)RR transcript was confirmed in vitro. Intrafollicular treatment with aliskiren did not reduce the ovulation rate. In cultured theca cells, AREG and EREG mRNA were not significantly expressed and ADAM17 was not stimulated by prorenin. Intrafollicular injection of AG1478 did not regulate LH-induced (P)RR, although increased CYP17A1 protein. Prorenin did not induce androstenedione and testosterone synthesis in cultured theca cells. In the corpus luteum, prorenin and (P)RR mRNA were increased at day 10 of estrous cycle compared to day 5, but were not regulated by prostaglandin in vivo, as observed for profibrotic genes. Intrafollicular treatment with aliskiren reduces serum progesterone levels in cows that ovulated. Prorenin role in progesterone synthesis through (P)RR was also evidenced in vitro. Moreover, prorenin induced ERK1/2 phosphorylation in luteal cells, although ERK1/2 inhibition (PD0325901) did not completely inhibit prorenin-induced progesterone synthesis, as evidenced using AG1478. In summary, these results demonstrate that prorenin and (P)RR are stimulated by LH at the end of the preovulatory period and, therefore, they are not related to genes regulated by LH at the initial ovulatory process in granulosa cells; (P)RR is stimulated by LH in the theca cells independently of EGFR; and prorenin stimulate progesterone synthesis through (P)RR, which involves ERK1/2 and EGFR participation. In conclusion, (P)RR is upregulated in granulosa and theca cells after gonadotropins peak and prorenin/(P)RR play an important role in the resumption of oocyte meiosis and on progesterone synthesis in the corpus luteum in cattle. / O objetivo do presente trabalho foi investigar a função do receptor de (pro)renina [(P)RR] nas células da teca e da granulosa durante o período pré-ovulatório e luteinização em bovinos. No início do período pré-ovulatório, pró-renina reiniciou a meiose oocitária bloqueada tanto pelas metades foliculares, quanto por forscolina. Nas células da granulosa, pró-renina não aumentou a expressão de RNAm para epirregulina (EREG) que foi induzido por LH após 6 horas de cultivo. Pró-renina mais LH aumentaram a expressão de RNAm para anfirregulina (AREG) e prostaglandina endoperoxidase sintetase-2 (PTGS2). Contudo, a ausência do efeito de prórenina para estimular o RNAm para EREG, AREG e PTGS2 nas células da granulosa foi evidenciada utilizando as diferentes combinações de tratamento com pró-renina e/ou alisquireno [inibidor do (P)RR] e/ou LH. O tratamento das células da granulosa com LH e antagonista de EGFR (AG1478) não regularam o RNAm para pró-renina e (P)RR após 6 horas de cultivo. Esse resultado foi confirmado in vivo, utilizando um modelo de tratamento intrafolicular com AG1478 e GnRH intramuscular em vacas. Por fim, (P)RR e o RNAm para pró-renina e genes prófibróticos aumentaram nas células da granulosa a partir das 12 horas após tratamento de vacas com GnRH. Nas células da teca, a expressão de (P)RR aumentaram 6 horas após tratamento de vacas com GnRH. O estimulo de LH sobre o transcrito de (P)RR foi confirmado in vitro. O tratamento intrafolicular com alisquireno não reduziu a taxa de ovulação. No nosso cultivo de células da teca, a expressão de RNAm para AREG e EREG não foi significativa e ADAM17 não foi estimulado por pró-renina. Injeção intrafolicular com AG1478 não regulou (P)RR estimulado por LH, mas aumentou a proteína para CYP17A1. Pró-renina não induziu a síntese de androstenediona e testosterona no nosso sistema de cultivo. No corpo lúteo, RNAm para pró-renina e (P)RR foi aumentado no dia 10 do ciclo estral comparado ao dia 5 e não foram regulados por prostaglandina in vivo, como observado para os genes pró-fibróticos. O tratamento intrafolicular com alisquireno diminuiu os níveis de progesterona plasmática em vacas que ovularam. O papel de pró-renina na síntese de progesterona através de (P)RR também foi evidenciado in vitro. Ainda, pró-renina induziu a phosphorilação de ERK1/2 nas células luteais, embora o bloqueio de ERK1/2 (PD0325901) não inibiu completamente a síntese de progesterona induzida por pró-renina, como evidenciado pelo uso de AG1478. Em resumo, esses resultados demonstram que pró-renina e (P)RR são estimulados por LH no final do período pré-ovulatório e, portanto, não estão relacionados com os genes regulados por LH no início do processo ovulatório nas células da granulosa; (P)RR é estimulado por LH nas células da teca de forma independente de EGFR; e a pró-renina estimula a síntese de progesterona via (P)RR envolvendo a participação de ERK1/2 e EGFR neste processo. Em conclusão, (P)RR é regulado positivamente nas células da granulosa e da teca após o pico de LH e a pró-renina/(P)RR possui um importante papel no reinicio da meiose oocitária e na síntese de progesterona pelo corpo lúteo em bovinos.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 577795 bytes, checksum: b429eb981891c730df96b0bb31e46866 (MD5) Previous issue date: 2010-06-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The aim of this study was to evaluate the reproductive and physiological parameters of Mangalarga Marchador stallions raised in Viçosa, Minas Gerais, Brazil during the four seasons and maintained semi-stabled. Thus, the study was conducted in a period of ten months (April 2009 to March 2010), using three stallions between 7 and 15 years of age and submitted to semen collections at intervals of 14 days for evaluation of physical and morphological semen parameters, complementary tests and cooling, and quantification of total soluble proteins present in seminal plasma. The physiological parameters measured were: respiratory and cardiac frequencies and rectal temperature at weekly intervals in the morning and afternoon. Testicular biometics and echotexture were measured before semen collection and, to determine the serum testosterone, the blood was collected every season at 20 minute intervals during a period of 24 hours. In relation to the seminal characteristics, a progressive increase in the volume with and without gel between autumn and summer was observed (p<0.05), while the concentration of the ejaculate and sperm motility were lower during spring/summer (p<0.05). The percentage of sperm with injured cellular membrane evaluated by fluorescence presented lower values in the autumn and winter, both for the fresh semen and for 24 hours post-cooling (p<0.05). The concentration of total soluble proteins present in seminal plasma did not change (p>0.05) between seasons and showed an average of 14.3 mg/mL. Testosterone secretions did not show a circadian pattern, but the highest concentration occurred between 10 and 14 hours, so that the largest average concentrations were observed in winter and summer (p<0.05). Testicular volume was not influenced by seasonality (p>0.05) and testicular echotexture was higher during summer (p<0.05). It was concluded that the season has an effect on some semen characteristics, mainly on the physical aspects of semen and resistance to the cooling process, apart from testicular echotexture and average secretion of testosterone, so that the influence on these latests showed no significant correlations with other traits. / O objetivo do presente estudo foi avaliar os parâmetros reprodutivos e fisiológicos de garanhões da raça Mangalarga Marchador, nas diferentes estações climáticas criados no município de Viçosa &#8211; MG e mantidos em regime semi-estabulado. O estudo foi conduzido por um período de dez meses (abril de 2009 a março de 2010) utilizando três garanhões com idades entre 7 e 15 anos que foram submetidos a coletas de sêmen, em intervalos de 14 dias, para avaliação de parâmetros físicos e morfológicos, testes complementares e resfriabilidade do mesmo e quantificação de proteínas solúveis totais presentes no plasma seminal. Os parâmetros fisiológicos avaliados foram a freqüência cardíaca, respiratória e temperatura retal em intervalos semanais pela manhã e à tarde. Foram mensuradas as biometrias e ecotexturas testiculares antes das coletas de sêmen e, para determinação da testosterona sérica, foi realizada uma sessão de coleta de sangue a cada estação climática, com coletas em intervalos de 20 minutos por um período de 24 horas. Quanto às características seminais, observou-se um aumento progressivo do volume com e sem gel entre o outono e verão (p < 0,05), enquanto a concentração do ejaculado e motilidade espermática foram menores no período primavera/verão (p < 0,05). A porcentagem de espermatozóides com membrana celular lesada, avaliada pela fluorescência, indicou menores valores no outono e inverno, tanto para o sêmen fresco quanto para 24 horas pós-resfriamento (p < 0,05). A concentração de proteínas solúveis totais presentes no plasma seminal não variou (p > 0,05) entre as estações climáticas e apresentou uma média de 14,3 mg/mL. A secreção de testosterona não apresentou um padrão circadiano, porém as maiores concentrações ocorreram de 10:00 às 14:00, sendo que as maiores concentrações foram observadas no inverno e verão (p < 0,05). O volume testicular não foi influenciado pela sazonalidade (p > 0,05) e a ecotextura testicular foi maior no verão (p < 0,05). Concluiu-se que a estação do ano exerce efeito sobre algumas características seminais, principalmente quanto aos aspectos físicos do sêmen e resistência ao processo de resfriamento do mesmo, além da ecotextura testicular e da secreção média de testosterona, de forma que a influência sobre estas últimas não apresentou correlações importantes com as demais características estudadas.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 269793 bytes, checksum: 7ace1f379fb4f111e4dbe56c3e1179e0 (MD5) Previous issue date: 2006-12-18 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The objective of the present study was to evaluate the effect of the administration, of 500 mg rbST (recombinant bovine somatotropin) in the moment of estrous of recipient heifers and cows inovulation with fresh embryos and 250 and 500 mg rbST in recipient inovulated with defrosted embryos, in progesterone serum concentration (P4) on the day of the inovulation and at the pregnancy rate at day 30. Blood samples were collected in the day of the inovulation by puncture of the coccygeal vein or artery for assaying of the serum P4 concentration. 259 crossbred recipients, appraised as able for reproduction, were used and divided in two studies. In the first study 144 recipient heifers received fresh embryos, randomly sorted among the experiments. The control (T1) was composed by 77 recipients, and the treated (T2) 67 recipients that received 500mg rbST at the moment of estrous. In a second study, it was used 115 recipients that receive defrosted embryos subdivided in 3 treatments. 53 recipient heifers composed the control (T1), the treated 2 (T2) was composed by 22 recipients that received 250 mg of rbST and the treated 3 (T3) was composed by 40 recipients that received 500 mg of rbST. The pregnancy rate of the first study was 65.7% (44 pregnant recipients) among the animals of T2 and 32.5% (25 pregnant recipients) at T1, which demonstrates the positive effect (P<0.01) from the use of rbST on pregnancy rate. However, the average concentrations of serum P4 in the day of the inovulation was 2.54±0.19 mg/ml for the animals of T1 and 2.27±0.20 mg/ml for the T2, there was no difference (P>0.05). The pregnancy rate of the second study recipients was 45.3% (24 recipients) among the animals of the group T1, 50.0% (11 recipient) for T2 and 52.5% (21 recipient) for T3. The average concentrations of serum P4 in the day of the inovulation were: T1 (control) = 5.41±2.33 mg/ml, T2 (250 mg rbST) = 5.77±2.19 mg/ml and T3 (treated - 500 mg rbST) = 4.77 ± 1.78 mg/ml. The results of the second study demonstrate the absence of effect (P>0.05) on the rbST use over the pregnancy rate and the serum P4 concentration. We can conclude that the administration of 500 mg rbST in recipient inovulation that receive fresh embryo at the moment of the estrous was able to improve the pregnancy rate, but not the concentration of progesterone serum P4. However, when administered 250 or 500 mg rbST in recipient inovulated that receive defrosted embryos, we are able to conclude that there was no positive effect on the pregnancy rate and on the progesterone serum concentration. / O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da administração, no dia do estro, de 500 mg de rbST (somatotropina bovina recombinante) em receptoras inovuladas com embriões transferidos à fresco e de 250 e 500 mg de rbST em receptoras inovuladas com embriões descongelados, sobre a concentração sérica de progesterona (P4) no dia da inovulação e a taxa de gestação aos 30 dias. As amostras de sangue foram coletadas no dia das inovulações por punção da veia ou artéria coccígea para análise da concentração sérica de P4. Foram utilizadas 259 receptoras mestiças, avaliadas como aptas a reprodução e divididas em dois estudos. No primeiro estudo foram utilizadas 144 receptoras, inovuladas com embriões à fresco, distribuídas aleatoriamente entre os tratamentos. O controle (T1) foi constituído por 77 receptoras e o tratado (T2) por 67 receptoras que receberam a administração de 500 mg de rbST no momento do estro. Em um segundo estudo utilizou-se 115 receptoras inovuladas com embriões descongelados subdivididas em três tratamentos. O controle (T1) foi constituido por 53 receptoras, o tratado 2 (T2) por 22 receptoras submetidas a administração de 250 mg de rbST e o tratado 3 (T3) por 40 receptoras que receberam a administração de 500 mg de rbST. As fêmeas do primeiro estudo apresentaram taxas de gestações de 65,7% (44 receptoras gestantes) entre os animais do grupo T2 e 32,5% (25 receptoras gestantes) para os do grupo T1, o que demonstra o efeito positivo (P<0,01) do uso da rbST sobre a taxa de gestação. Entretanto, as concentrações médias de P4 sérica no dia da inovulação foram de 2,54±0,19 ng/mL para os animais do T1 e 2,27±0,20 ng/mL para os do T2, não sendo observada diferença (P>0,05). No segundo estudo as taxas de gestações encontradas foram de 45,3% (24 receptoras) para T1, 50% (11 receptoras) para T2 e 52,5% (21 receptoras) para T3. As concentrações médias de P4 sérica no dia da inovulação foram de T1 (controle) = 5,41±2,33 ng/mL, T2 (250 mg rbST) = 5,77±2,19 ng/mL e T3 (500 mg rbST) = 4,77±1,78 ng/mL. Os resultados obtidos neste segundo estudo demonstram a ausência de efeito (P>0,05) do uso da rbST sobre as taxas de gestações e as concentrações séricas de P4. Concluiu-se que a aplicação de 500 mg de rbST em receptoras inovuladas com embriões à fresco no momento do estro, foi capaz de melhorar a taxa de gestação, mas não a concentração sérica de progesterona. No entanto, ao serem administradas 250 ou 500 mg de rbST receptoras inovuladas com embriões descongelados conclui-se a ausência de efeito positivo nas taxas de gestações e nas concentrações séricas de progesterona.

Made available in DSpace on 2016-07-01T13:10:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-07. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:14:10Z : No. of bitstreams: 1 000866897.pdf: 2241837 bytes, checksum: 4f7edd4ceb0f7cb049f481298ec4b4c5 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A placentação e o desenvolvimento das membranas fetais na espécie canina atualmente são estudados de forma extensiva, já que o conhecimento da morfologia da placenta possibilita reconhecer corretamente alterações patológicas e sua possível correlação com a viabilidade neonatal. O presente estudo tem como objetivo a caracterização morfológica e imunohistoquímica de placentas de cadelas provenientes de eutocia e distocia. Para o desenvolvimento deste experimento foram coletadas 80 placentas, de acordo com o tipo de parto as placentas foram divididas em três grupos experimentais, GN (n=40) placentas obtidas de parto normal, GC (n=28) placentas obtidas de cesariana e GAUP (n=12) placentas obtidas de cadelas em atonia uterina primária. Fragmentos 1cm x 1cm foram seccionados da região próxima ao cordão umbilical e armazenados em formol tamponado 10% durante 48 horas, a seguir, foram transferidos para álcool 70%, no qual permaneceram até o processamento para o estudo histopatológico e imunohistoquímico. Foram reconhecidas áreas de hemorragia, necrose, inflamação e calcificação nas placentas dos três grupos estudados. A hemorragia no parênquima placentário foi identificada em todos os grupos experimentais, não apresentando diferença significativa. A necrose evidenciada junto a face materna foi uma constante nos grupos avaliados, entretanto foram observados na região lamelar focos e áreas de necrose no GC e GAUP, porém estes achados não foram estatisticamente relevantes quanto a comparação ao GN. A inflamação foi raramente observada no GN, esteve pouco presente no GC e predominou nas amostras placentárias do GAUP. Os focos de calcificação identificados foram mais notórios no GC e GAUP. Nos grupos estudados foram observadas alterações discretas quanto a integridade histológica dos hematomas marginais. Nas placentas GN a imunomarcação para vimentina mostrou-se intensa e homogênea em toda zona lamelar, fato... / Placentation and the development of fetal membranes in dogs are currently studied extensively, since the knowledge of morphology of the placenta enables properly recognize pathological changes and its correlation with neonatal viability. We aimed to characterize morphologically and immunohistochemically placentas of bitches from eutocia and dystocia. For that 80 placentas were collected and classified according to the type of delivery into three experimental groups,GN (n = 40) placentas obtained from normal delivery, GC (n = 28) placentas obtained from cesarean section and GAUP (n = 12) placentas obtained from bitches with uterine atony. 1cm x 1cm pieces were cut from the region near the umbilical cord and stored in 10% buffered formalin for 48 hours following, were transferred to 70% alcohol, which remained until processing for histopathological and immunohistochemical study. In this research, areas of hemorrhage, necrosis, inflammation and calcification were observed in the placentas in all three groups. Hemorrhagic areas were identified in the placental parenchyma in all groups, without significant difference. The evident necrosis in the placenta maternal face was constant in the groups, we observe areas and spots of necrosis in the lamellar region in GC and GAUP, but those findings were not statistically significant when compared to GN. Inflammation was rarely observed in the GN and it was observed in a few samples in the GC, however it was predominant in samples from GAUP. Calcification spots were observed in GC and GAUP. In the studied groups, discrete alterations were observed when histological integrity of marginal hematomas was evaluated. In GN the immunostaining for vimentin proved to be intense and homogeneous throughout lamellar zone, however this was not observed in GC and GAUP, which presented immunostaining characterized by variation of intensity. For cytokeratin there was no difference between experimental groups. The RP...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-10Bitstream added on 2014-06-13T18:39:05Z : No. of bitstreams: 1 miguel_mcv_me_jabo.pdf: 1104174 bytes, checksum: b2be0e2d9f0acd211260bc64835b4e10 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O presente trabalho teve como objetivo avaliar, em novilhas da raça Nelore (n=84) mantidas em duas alturas de pasto (15 e 35 cm) e com suplementação isoproteica (26%PB) ou com dois níveis de proteína (24,7%PB e 13,1%PB) associada à gordura insaturada protegida, as concentrações plasmáticas de progesterona, do colesterol, da glicose, do peso e da qualidade do complexo cumulus oophorus. Os suplementos do experimento 1 foram isoproteicos e divididos em: SL1: Grupo controle suplementado com sal mineral; FA1: Grupo suplementado com alta relação PDR/NDT composto por polpa cítrica, farelo de algodão, Megalac-E®, minerais e uréia (26% PB e 81% NDT) e GT1: Grupo suplementado com baixa relação PDR/NDT composto por polpa cítrica, glutenose, Megalac-E®, minerais e uréia (26% PB e 81% NDT). Os suplementos do experimento 2 diferiram na porcentagem de PB divididos em: SL2: Grupo controle suplementado com sal mineral; FA2: Grupo suplementado com alta relação PDR/NDT composto por polpa cítrica, farelo de algodão, Megalac-E®, minerais e uréia (24,7% PB e 89,4% NDT) e GT2: Grupo suplementado com baixa relação PDR/NDT composto por polpa cítrica, glutenose, Megalac-E®, minerais e uréia (13,1% PB e 95% NDT). Para mensuração das concentrações de progesterona, glicose e colesterol foram realizadas coletas de sangue por venopunção da veia jugular no início do experimento e, posteriormente, a cada período de 28 dias juntamente com as pesagens (Dezembro a Maio). As análises plasmáticas de glicose foram determinadas pelo método God-Trinder, as análises séricas de colesterol pelo método Enzimático-Trinder e a concentração de progesterona plasmática foi determinada por RIA. As três mensurações foram realizadas utilizando kits comerciais. No momento do abate, os ovários das novilhas foram coletados, separados nos três... / This study aimed to evaluate in Nelore heifers (n=84) under two different grass heights (15 and 35cm) and supplemntes with isinitrogenous (26 % CP) or two protein leves (24,7 % CP and 13,1% CP) associated with unsaturated fat protected to assess plasma concentrations of progesterone, cholesterol, glucose, weight and quality of the cumulus oophorus complex. Supplements isonitrogenous of Experiment 1 were divided into SL1: control group supplemented with mineral salt; FA1: group supplemented with high for RDP / TDN composed of citrus pulp, cottonseed meal, Megalac-E®, minerals and urea (26 % CP and 81% TDN) and GT1: group supplemented with low ratio RDP / TDN composed of citrus pulp, corn gluten meal, Megalac-E®, minerals and urea (26% CP and 81% TDN). Supplements of Experiments 2 differed in the percentage of CP were divided into SL2: control group supplementes with mineral salt; FA2: group supplementes with high ratio for RDP/TDN composed of citrus pulp, cottonseed meal, Megalac -E® , minerals and urea (24,7% CP e 89,4% TND) and GT2: Group supplemented with low ratio RDP/TDN composed of citrus pulp, corn gluten meal, Megalac-E®, minerals and urea (13,1% CP e 95% TND). To measure the concentrations of progesterone, glucose and cholesterol blood was collected from the jugular vein at baseline each 28 days together the weights (December to May).The analysis of serum glucose were determined by God-Trinder method and analysis of cholesterol by the enzyme-Trinder method using the commercial kits. Plasma progesterone concentration was determined using a commercial kit for RIA. At the time of slaughter, the ovaries of heifers were collected, separated into three groups of supplementation, and transported to the laboratory in saline solution at 32-36ºC. The antral follicles with diameters between 3 and 8 mm were... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: O presente trabalho teve como objetivo avaliar, em novilhas da raça Nelore (n=84) mantidas em duas alturas de pasto (15 e 35 cm) e com suplementação isoproteica (26%PB) ou com dois níveis de proteína (24,7%PB e 13,1%PB) associada à gordura insaturada protegida, as concentrações plasmáticas de progesterona, do colesterol, da glicose, do peso e da qualidade do complexo cumulus oophorus. Os suplementos do experimento 1 foram isoproteicos e divididos em: SL1: Grupo controle suplementado com sal mineral; FA1: Grupo suplementado com alta relação PDR/NDT composto por polpa cítrica, farelo de algodão, Megalac-E®, minerais e uréia (26% PB e 81% NDT) e GT1: Grupo suplementado com baixa relação PDR/NDT composto por polpa cítrica, glutenose, Megalac-E®, minerais e uréia (26% PB e 81% NDT). Os suplementos do experimento 2 diferiram na porcentagem de PB divididos em: SL2: Grupo controle suplementado com sal mineral; FA2: Grupo suplementado com alta relação PDR/NDT composto por polpa cítrica, farelo de algodão, Megalac-E®, minerais e uréia (24,7% PB e 89,4% NDT) e GT2: Grupo suplementado com baixa relação PDR/NDT composto por polpa cítrica, glutenose, Megalac-E®, minerais e uréia (13,1% PB e 95% NDT). Para mensuração das concentrações de progesterona, glicose e colesterol foram realizadas coletas de sangue por venopunção da veia jugular no início do experimento e, posteriormente, a cada período de 28 dias juntamente com as pesagens (Dezembro a Maio). As análises plasmáticas de glicose foram determinadas pelo método God-Trinder, as análises séricas de colesterol pelo método Enzimático-Trinder e a concentração de progesterona plasmática foi determinada por RIA. As três mensurações foram realizadas utilizando kits comerciais. No momento do abate, os ovários das novilhas foram coletados, separados nos três... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to evaluate in Nelore heifers (n=84) under two different grass heights (15 and 35cm) and supplemntes with isinitrogenous (26 % CP) or two protein leves (24,7 % CP and 13,1% CP) associated with unsaturated fat protected to assess plasma concentrations of progesterone, cholesterol, glucose, weight and quality of the cumulus oophorus complex. Supplements isonitrogenous of Experiment 1 were divided into SL1: control group supplemented with mineral salt; FA1: group supplemented with high for RDP / TDN composed of citrus pulp, cottonseed meal, Megalac-E®, minerals and urea (26 % CP and 81% TDN) and GT1: group supplemented with low ratio RDP / TDN composed of citrus pulp, corn gluten meal, Megalac-E®, minerals and urea (26% CP and 81% TDN). Supplements of Experiments 2 differed in the percentage of CP were divided into SL2: control group supplementes with mineral salt; FA2: group supplementes with high ratio for RDP/TDN composed of citrus pulp, cottonseed meal, Megalac -E® , minerals and urea (24,7% CP e 89,4% TND) and GT2: Group supplemented with low ratio RDP/TDN composed of citrus pulp, corn gluten meal, Megalac-E®, minerals and urea (13,1% CP e 95% TND). To measure the concentrations of progesterone, glucose and cholesterol blood was collected from the jugular vein at baseline each 28 days together the weights (December to May).The analysis of serum glucose were determined by God-Trinder method and analysis of cholesterol by the enzyme-Trinder method using the commercial kits. Plasma progesterone concentration was determined using a commercial kit for RIA. At the time of slaughter, the ovaries of heifers were collected, separated into three groups of supplementation, and transported to the laboratory in saline solution at 32-36ºC. The antral follicles with diameters between 3 and 8 mm were... (Complete abstract click electronic access below) / Orientadora: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Coorientador: Guilherme de Paula Nogueira / Coorientador: Ricardo Andrade Reis / Banca: Roberto Sartori Filho / Banca: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Mestre

Orientador: José Luiz Moraes Vasconcelos / Banca: Mário Binelli / Banca: Mário De Beni Arrigoni / Abstract: The objective of this trial was to evaluate the effects of different nutritional diet density on conception rate (CR) in bovine females. The experiment was achieved at Agropecuária Água Preta, Cocalinho, MT. It was made use 220 no pregnant Nelore females, on average with 2.79 body condition score (BCS), housed at a commercial feedlot, randomly divided in two pens. All animals received an adaptation diet (AP) for 15 days, with 50.1% of Neutral Detergent Fiber (NDF) and 28.8% of Non-Structural Carbohydrate (NSC). On day 0 the diet of Treatment A was changed (TA= higher nutritional density diet - 43.9% of NDF and 35.5% of NSC) and the Treatment B carried on receiving the AD (TB= lower nutritional density diet). The total mixed rate, settled of sorghum silage, sorghum whole cracked, rice whole cracked, cottonseed high lint and minerals, was offered four times a day. On day 0 it started the breeding period (BP), with natural service, using 4 Nelore bulls and 4 crossbred bulls in each pen, until day 21. The females where observed for estrus during the BP and only the cows that presented service were kept on the experiment. The CR was determined 27 days after BP by ultrasound. The CR was analyzed by logistic regression of SAS. The effects of variables: treatment, phase (phase 1, from day 0 until day 10 of the BP; phase 2, grom day 11 until day 21 of the BP) and interactions were included in the model, BCS and body weigh gain (BWG) were included as a co-variables. Tendency (P=0.077) of treatment effect on CR (TA=65.7 vs TB=76.1%) was detected. There was no effect of phase and interaction phase x treatment. The BWG was similar between TA and TB, however a linear effect (P<0.05) of BWG on CR was detected. Effect of BCS was no detect (P>0.10) on CR. As conclusion, the higher nutritional density diet intake decrease the CR. / Resumo: O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito de dietas com diferentes densidades nutricionais na taxa de concepção (TC) de fêmeas bovinas. O trabalho foi realizado na Agropecuária Água Preta, Cocalinho, MT. Foram utilizadas 220 fêmeas Nelores vazias, mantidas em confinamento a céu aberto, com escore de condição corporal (ECC) médio de 2,79, alojadas aleatoriamente em duas baias. Todos os animais receberam dieta de adaptação (DA) por 15 dias, apresentando 50,1% de Fibra em Detergente Neutro (FDN) e 28,8% de Carboidrato Não Estrutural (CNE). No dia 0 a dieta do Tratamento A foi alterada (TA = dieta com maior densidade nutricional - 43,9% de FDN e 35,5% de CNE) e o Tratamento B continuou a receber a DA (TB = dieta com menor densidade nutricional). A dieta total, composta por: silagem de sorgo, sorgo integral triturado, arroz integral triturado, caroço de algodão e núcleo mineral, foi oferecida 4 vezes ao dia aos animais. No dia 0 inciou-se o período de monta (PM), no qual 4 touros nelores e 4 touros cruzados foram colocados junto às fêmeas em cada baia, permanecendo por 22 dias. No dia 21 os touros foram retirados de ambos os tratamentos. Os animais foram observados durante o PM, e somente as fêmeas que foram cobertas permaneceram no experimento. O diagnóstico de gestação (DG) foi realizado por ultra-sonografia 27 dias após a retirada dos touros. A TC foi analisada por regressão logística, por meio dos procedimentos LOGISTIC do SAS. Foram incluídos no modelo os efeitos das variáveis: tratamento, fase (fase 1, do dia 0 ao dia 10 do PM e a fase 2, do dia 11 ao dia 21 do PM) e interação fase x tratamento, e das co-variáveis: ganho de peso médio diário (GMD) e ECC. Foi detectada tendência (P=0,077) de efeito de tratamento na TC (TA=65,7 vs TB=76,1%). Não houve efeito de fase e da interação fase x tratamento. O GMD não foi diferente entre TA e TB, porém foi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: João Carlos Pinheiro Ferreira / Resumo: O objetivo geral do trabalho foi caracterizar a produção de progesterona (P4) pelas células do corpo lúteo (CL) bovino submetidas a diferentes meios de cultivo e cocultivo in vitro. Para tanto foram realizados três experimentos descritos em dois artigos. No artigo I, CLs pertencentes à fase média (10-12 dias, n=5) foram coletados e processados em laboratório. As LCs foram cultivadas por 07 dias em atmosfera umida a 5% de CO2, com ou sem a adição de 10% de soro fetal bovino (SFB), com os respectivos tratamentos: CONTROLE; CONA (10 μg/mL); LH (100 μg/mL); CONALH; LHPGFβα (10 ng/mL); CONALHPGFβα. Amostras de meio de cultivo foram coletadas nos D1 e D7 para posterior dosagem de P4. Valores com P<0,05 foram considerados diferentes estatisticamente. O cultivo de LCs na presença de CONA diminuiu a capacidade secretória de P4 das LCs e este efeito foi revertido pela adição de LH no meio de cultivo no D1, mas não no D7. A ação supressora da CONA foi mais evidente no cultivo que não empregaram o SFB. No artigo II, No Exp. 1, foram utilizados CLs pertencentes à fase média (10-12 dias, n=4). No laboratório os CLs foram processados e as LCs foram cultivadas por 07 dias em atmosfera umida a 5% de CO2. As LCs receberam os respectivos tratamentos com ou sem LH: Controle; PGF2α (10 ng/mL); PGF2α (100 ng/mL); PGF2α (354,5 ng/mL). As amostras que receberam LH apresentaram maior produção de P4, e a administração de diferentes doses de PGFβα não mostrou alteração na secreção de P4. No Exp. β, for... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The general objective of this study was to characterize the production of progesterone (P4) by the cells of the bovine corpus luteum (CL) subjected to different culture and coculture media in vitro. To this end, three experiments described in two articles were conducted. Article I: CLs belonging to the middle phase (10-12 days, n=5) were collected and processed in the laboratory. The luteal cells (LCs) were cultured for 07 days in a humid atmosphere of 5% CO2, with or without the addition of 10% fetal bovine serum (FBS), with their respective treatments: CONTROL; CONA (concanavalin-A) (10 μg/mL); LH (100 μg/mL); CONALH; LHPGFβα (10 ng/mL); CONALHPGFβα. Samples of culture medium were collected on D1 and D7 for further P4 measurement. P values <0.05 were considered statistically different. Culture of LCs in the presence of CONA decreases the ability of LC to secrete P4, and this effect was reversed by addition of LH in the culture medium in D1, but not in D7. The suppressive action was more evident in CONA cultures without FBS. In Article II, Experiment 1, CLs of middle phase of the estrous cycle (10-12 days, n = 4) were used. In the laboratory, the CLs were processed and the LCs were cultured for 07 days in a humidified atmosphere of 5% CO2. The LCs received the respective treatments with or without LH (100 μg/mL): Control; PGFβα (10 ng/mL); PGFβα (100 ng/mL); PGFβα (354,5 ng/mL). The samples that received LH produced more P4, and the administration of different doses of PGFβα... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-05-04T12:31:58Z No. of bitstreams: 1 Guilherme Aniceto Veras.pdf: 755618 bytes, checksum: abf9279c842f5f903daa9429771d78c0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-04T12:31:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guilherme Aniceto Veras.pdf: 755618 bytes, checksum: abf9279c842f5f903daa9429771d78c0 (MD5) Previous issue date: 2013-08-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The aim of this study was to evaluate the effect of different progesterone concentrations (P4) on follicular dynamics in Holstein heifers (Bos taurus) subjected to synchronization of estrus and ovulation. The experiment was conducted at the Experimental Station of São Bento do Una/PE Agronomic Institute of Pernambuco / IPA, between September and December 2012. There were used 19 pubertal Holstein heifers presenting BSC between 3.0 and 3.5 and kept in intensive system. The heifers were divided into two groups, receiving an intravaginal devices at D0 containing 0.75 g of P4 in G1 (n = 10) and 1 g of P4, in G2 (n = 9) along with 2 mg BE im. At D7, there were applied 530μg of cloprostenol and 300 IU of eCG im, at D8 intravaginal devices were removed. At D9, heifers in both groups received 1mg of EB im and at D10 TAI were preceded. The ovarian activity was monitored at D0, D4, D8, D10 and at each 6 hours after TAI until ovulation. Pregnancy diagnosis were performed 30 days after TAI. The data were subjected to analysis of variance (ANOVA) and means were compared by the test of Turkey at 5% by the statistical program SPSS 16 for Windows. Binomial variables were analyzed by chi-square. No significant effect was observed between wave synchronization (100 vs. 100%), ovulation rate (70 vs. 89%), time of ovulation (60.5 ± 2.65 vs. 64.5 ± 0.33 h) and conception rate (40 vs. 44.4%) between G1 and G2, respectively. The dominant follicle average diameter at D9 between heifers that ovulated from G1 was 14,8±0,6 mm and in G2 11,2±1,6mm presenting no statistical difference (P=0.07) the same way was not also observed statistical difference between heifers that did not ovulate from G1 (9.6±0.7mm and in G2 (7.7±0.03)(P=0.42). .) Already when comparing the average diameters of dominant follicles in D9 between the heifers that ovulated (14.8 ± 0.6 mm) and those that did not ovulate (9.6 ± 0.7 mm) from G1, it was observed significant difference (P ˂ 0.05), as well as from G2 (11,2 ± 1.6 vs. 7.7 ± 0.03 mm). The ovulation rate increased significantly in the follicles larger than 11 mm, measured on D9 However, conception rates were higher when the follicles were larger than 8 mm on D9. In the present study, no significant effect was observed in DFØ, OFØ, time of ovulation, ovulation and conception rates in pubertal Holstein heifers, but animals receiving device with lower concentrations of P4 in D0 showed higher daily rate growth follicular. / O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de progesterona (P4) sobre a dinâmica folicular em novilhas Holandesas (Bos taurus) submetidas à sincronização de estro e ovulação. O experimento foi realizado na Estação Experimental de São Bento do Una/PE do Instituto Agronômico de Pernambuco/IPA, entre setembro e dezembro de 2012. Foram utilizadas 19 novilhas púberes Holandesas, com ECC entre 3,0 e 3,5 e mantidas em sistema intensivo. Foram distribuídas em dois grupos, onde no D0, receberam implantes intravaginal contendo 0,75g de P4 no G1 (n=10) e 1g de P4 no G2 (n=9), associado a 2 mg de BE i.m. No D7, foram aplicados 530μg de cloprostenol sódico e 300 UI de eCG i.m. e no D8 os implantes intravaginais foram removidos. No D9, foi aplicado 1mg de BE i.m. em ambos os grupos e no D10 a IATF. A atividade ovariana foi acompanhada no D0, D4, D8, D10 e após a IA de 6/6 horas até a ovulação. O diagnóstico de gestação, realizado 30 dias após a IATF. Os dados foram analisados pelo SPSS 16.0, empregando-se a análise de variância (ANOVA). Sendo evidenciada diferença estatística, aplicou-se o teste de Turkey. As variáveis binominais foram analisadas pelo Qui-quadrado. Não foi observado efeito significativo entre a sincronização da onda (100 vs. 100%), taxa de ovulação (70 vs. 89%), momento da ovulação (60,5±2,65 vs. 64,5±0,33 h) e taxa de concepção (40 vs. 44,4%) entre G1 e G2, respectivamente. O diâmetro do folículo dominante no D9 (ØFD) (13,5±0,1 vs. 10,8±1,7 mm) não diferiu entre os grupos, assim como o Ø máx. FD (14,3±1,5 vs. 11,9±0,86 mm) e do Ø máx. FO (14,7±0,74 vs. 12,3±1,37 mm), porém a taxa de crescimento diário dos folículos foi significativamente maior no G1 que no G2 (1,6±0,12 vs. 1,0±0,18 mm/dia). O diâmetro médio do folículo dominante no D9 entre as novilhas que ovularam do grupo G1 foi 14,8±0,6 mm e no G2 11,2±1,6 mm não se observando diferença estatística entre os tratamentos (P=0,07), da mesma forma que também não se observou diferença estatística entre novilhas que não ovularam do G1 (9,6±0,7) e do G2 (7,7±0,03)(P=0,42). Já ao se comparar os diâmetros médios dos folículos dominantes no D9 entre as novilhas que ovularam (14,8±0,6 mm) e as que não ovularam (9,6±0,7 mm) do G1, observou-se diferença significativa (P˂0,05), assim como no G2 (11,2±1,6 vs. 7,7±0,03 mm. A taxa de ovulação aumentou significativamente nos folículos maiores de 11 mm, mensurados no D9, no entanto, as taxas de concepção foram maiores quando os folículos se encontravam maiores que 8 mm, no D9. No presente estudo não foi observado efeito significativo da concentração de P4 no ØFD, ØFO, momento da ovulação, taxas de ovulação e concepção em novilhas púberes Holandesas, porém os animais que receberam dispositivo com menor concentração de P4 no D0 apresentaram maior taxa de crescimento folicular diário.

A presente tese foi dividida em 5 Experimentos. Os objetivos do Experimento 1 foram avaliar a utilização da gonadotrofina coriônica equina (eCG) e/ou do cipionato de estradiol (ECP) na dinâmica folicular e taxa de concepção de vacas holandesas submetidas a inseminação em tempo fixo (IATF). No D0, todos os animais (n = 782) receberam 2 mg de benzoato de estradiol (BE) e um dispositivo intravaginal de progesterona (CIDR). Oito dias depois, o CIDR foi retirado e todos os animais receberam PGF2?. Simultaneamente, os animais foram divididos em 4 grupos: G1) eCG + ECP no Dia 8; G2) eCG no Dia 8 + GnRH após 48h; G3) ECP no Dia 8; G4) GnRH após 48h. Amostras de sangue e exames utlra-sonográficos foram realizados frequentemente em um subgrupo de animais (n = 96). As análises estatísticas de todos os experimentos foram efetuadas com o proc GLIMMIX e proc MIXED do SAS. O uso de eCG e o escore de condição corporal (ECC) dos animais afetaram as concentrações circulantes de progesterona no diestro. Os animais do G2 apresentaram maior taxa de concepção que os do G4 (33,8% vs. 28,9%). Além disso, para animais de menor ECC, ficou evidente o benefício da aplicação de eCG (G2 = 44,4% vs. G4 = 6,1%). No Experimento 2 (n = 26), o objetivo foi comparar o efeito da administração da eCG no dia da remoção do CIDR em animais de menor (2,0-2,5) ou maior (3,0-3,5) ECC. Foram avaliadas algumas características do corpo lúteo (CL) como o volume e histologia, assim como as concentrações plasmáticas de progesterona no diestro. Independentemente da condição corporal dos animais, a eCG aumentou o volume do CL e a concentração plasmática de progesterona no diestro. O ECC afetou negativamente o volume e concentração de progesterona sérica no diestro. Não foi encontrado diferença na proporção de células grandes/pequenas, assim como no fluxo sanguíneo no CL entre os grupos experimentais. No Experimento 3, foi comparado a taxa de concepção em vacas de leite de alta produção (n = 388) após o uso do protocolo G2 do Experimento 1 (Capítulo I), com ou sem adição de ECP no momento da retirada do CIDR (novo ou usado). Não foi verificado efeito da adição do tratamento com ECP e nem do tipo do dispostivo na taxa de concepção. No Experimento 4 (n = 199), apesar no aumento verificado no diâmetro folicular no grupo tratado com GnRH 56h (17,8 mm) comparado com GnRH 48h (16,5 mm); e do atraso no momento da ovulação após a retirada do CIDR (GnRH 56h = 75,3h; GnRH 48h = 79,8h) não foi constatado qualquer diferença na concepção ao se atrasar a aplicação do GnRH de 48h para 56h em vacas inseminadas 16h depois do GnRH. No Experimento 5 (n = 185), a taxa de concepção não diferiu em animais que receberam o GnRH 48h ou 56h (momento da IATF) após a retirada do CIDR, indicando a possibilidade do emprego de um protocolo com apenas 3 manejos em vacas de leite de alta produção. / The current thesys has been divided in 5 Experiments. Objectives of Experiment 1 were to evaluate the effects of equine chorionic gonadotropin (eCG) and/or estradiol cypionate (ECP) on follicular dymanics and conception rate in Holstein cows receiving fixed timed artificial insemination (TAI). On D0, all cows (n = 782) received 2 mg of estradiol benzoate (EB) and one intravaginal progesterone device (CIDR). Eight days later, CIDR was removed and all animals were treated with PGF2?. Simultaneously, animals were divided in 4 groups: G1) eCG + ECP on Day 8; G2) eCG on Day 8 + GnRH 48h later; G3) ECP on Day 8; G4) GnRH 48h later. Blood samples and ultrasound exams were frequently performed in a subset of the animals (n = 96). All the statistical analyses for all experiments were performed with proc GLIMMIX and proc MIXED of SAS. Equine chorionic gonadotropin (eCG) treatment and body condition score (BCS) affected circulating progesterone in the diestrus. Cows in G2 had greater conception rates than cows in G4 (33,8% vs. 28,9%). In addition, in cows with lower BCS, eCG seems to be even more affective (G2 = 44,4% vs. G4 = 6,1%). In Experiment 2 (n = 26), the objective was to compare the effect of eCG the day of CIDR removal in animals with lower (2,0-2,5) or higher (3,0-3,5) BCS. Some variables such as corpus luteum (CL) volume, histology and circulating progesterone concentration in the diestrus were evaluated. Regardless of the body condition of the animals, eCG increased CL volume and circulating progesterone concentration in the diestrus. BCS negatively affected CL volume and circulating progesterone. There were no differences in large/small CL cell ratio, as well as CL blood flow between experimental groups. In Experiment 3, it was compared conception rate in dairy cows (n = 388) after using the same protocol G2 from Experiment 1 (Chapter I), with or without an ECP treatment at the time of CIDR (new or used) removal. Both ECP treatment and type of CIDR did not significantly affected conception rates. In Experiment 4 (n = 199), despite the fact that follicular diameter was increased in group GnRH 56h (17,8 mm) compared with GnRH 48h (16,5 mm); and of the delayed time of ovulation after CIDR removal (GnRH 56h = 75,3h; GnRH 48h = 79,8h), there were no differences in conception rates after delaying the GnRH treatment from 48h to 56h in cows inseminated 16h after GnRH. In Experiment 5 (n = 185), conception rate did not differ in animals that received GnRH 48h or 56h (at the time of TAI) after CIDR removal, indicating the possibility of using a protocol with only 3 handlings in high producing dairy cows.